藥根堿的提取制備方法及其在制備預(yù)防和治療結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了一種從中藥中提取制備藥根堿的方法及藥根堿在制備預(yù)防和治療結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用。該制備方法采用酸堿系統(tǒng)溶劑法，將藥材粉碎后加入酸(0.1％-2％)性水性溶劑回流提取，回收溶劑后再經(jīng)酸堿溶劑法得到純度大于80％的藥根堿。采用本法制備的藥根堿具有純度高、周期短、成本低的優(yōu)勢(shì)，是一種環(huán)保型制備方法，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】藥根堿的提取制備方法及其在制備預(yù)防和治療結(jié)腸癌藥物 中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種利用酸堿溶劑法從中藥中提取制備藥根堿的方法及其在預(yù)防和 治療結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 藥根堿（Jatrorrhizine)是原小檗堿型異喹啉類(lèi)生物堿，分子式為C20H20N04,分 子量為338. 39,紅黃色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)208-2KTC。具有廣泛的生理活性，包括抗菌、鎮(zhèn)痛、 降壓、調(diào)節(jié)免疫等功能，在醫(yī)藥領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。
[0003] 功勞木、黃連、黃柏、黃藤、三顆針為中國(guó)藥典2010年版一部收載的藥材，均具有 清熱燥濕，瀉火解毒之功效，主治濕熱瀉痢、黃疸尿赤、目赤腫痛、瘡癤癰腫、痢疾及黃疸型 肝炎等?，F(xiàn)代藥理研究表明他們均具有抗菌、抗?jié)?、抗真菌等作用。其中活性成分為異?啉類(lèi)生物堿，均含有小檗堿、藥根堿、巴馬汀等成分。
[0004] 現(xiàn)有技術(shù)中，有從功勞木、黃連、黃柏、三顆針等藥材中提取得到小檗堿，未見(jiàn)從黃 連、黃柏、三顆針中提取制備藥根堿的研究。專(zhuān)利技術(shù)（201210371939.X)發(fā)明了一種從功 勞木中制備藥根堿的方法，主要采用飽和1 %氨水浸泡，以85-95%乙醇溶液為提取溶劑， 進(jìn)行閃式提取，調(diào)PH1-3,濾去不溶物，濾液調(diào)節(jié)pH8-9,上大孔樹(shù)脂柱富集，50 %乙醇洗脫， 進(jìn)而采用制備型液相色譜分離得到藥根堿。但該方法采用大孔樹(shù)脂洗脫、制備色譜分離 等技術(shù)，操作復(fù)雜，成本高。專(zhuān)利技術(shù)（200910167852.9)提供了一種提取黃藤總生物堿、 分離藥根堿的方法，其中分離藥根堿采用〇. 1 % -1. 〇%的硫酸溶液，浸漬，大孔吸附樹(shù)脂， 10% -60%乙醇洗脫，鹽酸調(diào)pH為2,鹽析后，上硅膠柱精制后，加鹽酸調(diào)pH為2,干燥得藥 根堿。該法采用大孔樹(shù)脂洗脫，硅膠色譜柱條帶分離工藝比較繁瑣，并且周期長(zhǎng)，成本高，不 適合工業(yè)化生產(chǎn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種從中藥中提取制備藥根堿的方法，以及藥根 堿、藥根堿組合物在制備預(yù)防和治療結(jié)腸癌藥物方面的應(yīng)用。發(fā)明的目的是提供一種提取 制備方法操作簡(jiǎn)單，提取效率高，周期短，成本低，純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)的藥根堿的制備 方法，并將其應(yīng)用于制備預(yù)防和治療結(jié)腸癌藥物。
[0006] 為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0007] -種從中藥中制備藥根堿的方法，其特征包括以下步驟：
[0008] 將藥材粉碎置于提取容器中，加入酸性水性溶劑，回流，過(guò)濾，回收溶劑，然后用堿 調(diào)PH，靜置，過(guò)濾，濾液濃縮后用酸調(diào)pH，加入5-30 %的氯化鈉，靜置，過(guò)濾，得干燥沉淀物；
[0009] 干燥沉淀物用堿性水性溶劑復(fù)溶，回流提取，過(guò)濾，濾液用堿調(diào)節(jié)pH，靜置，過(guò)濾， 濾液濃縮后用酸調(diào)節(jié)PH，加入5-30 %的氯化鈉，靜置，過(guò)濾，干燥沉淀；反復(fù)重復(fù)上述步驟， 沉淀用堿性水性溶劑復(fù)溶，回流提取，過(guò)濾，得沉淀，沉淀用堿性水性溶劑復(fù)溶，過(guò)濾，濾液 濃縮，加入0-30%的氯化鈉，靜置，過(guò)濾，干燥沉淀，即得含量> 80%的藥根堿；
[0010] 所述藥材優(yōu)選功勞木、黃柏、黃藤、黃連、三顆針、金果欖；
[0011] 所述提取溶劑為酸性水性溶劑，溶劑中酸的含量?jī)?yōu)選〇. 1% -2%，水性溶劑優(yōu)選 水、乙醇、甲醇，酸優(yōu)選鹽酸、硫酸、醋酸；
[0012] 所述復(fù)溶溶劑為堿性水性溶劑，溶劑的pH優(yōu)選8-14,水性溶劑優(yōu)選水、乙醇、甲 醇，堿優(yōu)選氨水、石灰水、氫氧化鈉、氫氧化鉀；
[0013] 所述酸堿溶劑系統(tǒng)中的酸性條件pH為0.5-7,堿性條件pH為8-14,堿優(yōu)選氨水、 石灰水、氫氧化鈉、氫氧化鉀，酸優(yōu)選鹽酸、硫酸、醋酸；
[0014] 所述的藥根堿在制備預(yù)防和治療結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用；
[0015] 一種藥用組合物，其特征在于含有所述的藥根堿，以及含有藥學(xué)上可接受的載 體；
[0016] 所述藥根堿及含藥根堿的組合物在制備預(yù)防和治療結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用，其特征 在于所述的藥根堿或藥用組合物可制備成口服制劑、注射劑、吸入制劑或外用制劑。
[0017] 本發(fā)明經(jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)藥根堿采用10mg/kg、20mg/kg口服給藥，與模型組相比 具有明顯抑制ApcMin/+miCe結(jié)腸及小腸中腫瘤的大小、腫瘤數(shù)量的作用，并能延長(zhǎng)生存周期。 因此，可用藥根堿預(yù)防和治療結(jié)腸癌。
[0018] 本發(fā)明所涉及的藥根堿提取制備方法，采用無(wú)毒、全的溶劑、材料提取制備，提取 率高，周期短，操作簡(jiǎn)單，成本低，更適合于工業(yè)化生產(chǎn)。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0019] 圖1為藥根堿對(duì)ApcMin/+MiCe小鼠生存周期的影響。
[0020] 下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下 列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0021] 實(shí)施例1 :
[0022] 取功勞木藥粉Ikg加入提取容器中，加入12L的0. 2 %酸醇（50% )溶液，回流，合 并濾液，回收溶劑，濃縮藥液，堿調(diào)pH為10,靜置，過(guò)濾。濾液濃縮后調(diào)節(jié)pH為2,加入15% 的氯化鈉，靜置，過(guò)濾。干燥沉淀后，用30倍體積的堿性水溶液復(fù)溶，回流，濾液調(diào)節(jié)pH為 10,濾液濃縮后調(diào)節(jié)pH為2,加入15%的氯化鈉，靜置，過(guò)濾。干燥沉淀。將此沉淀用20倍 體積的堿性水溶液復(fù)溶，回流，過(guò)濾。沉淀用9的水溶液復(fù)溶，過(guò)濾，濾液濃縮，靜置，過(guò)濾， 得到干燥沉淀，HPLC法檢測(cè)其含量為89. 1 %。
[0023] 實(shí)施例2 :
[0024] 取黃連藥粉Ikg加入提取容器中，加入12L的0. 2 %醋酸醇（50% )溶液，回流，合 并提取液，回收溶劑，濃縮藥液，然后用堿調(diào)PH為9,靜置，過(guò)濾。濾液濃縮后調(diào)節(jié)pH為1， 加入15%的氯化鈉，靜置，過(guò)濾。干燥沉淀后，用30倍體積的堿性水溶液復(fù)溶，回流，過(guò)濾， 濾液調(diào)節(jié)PH9,靜置，過(guò)濾，濾液濃縮后調(diào)節(jié)pH為1，加入15 %的氯化鈉，靜置，過(guò)濾。干燥沉 淀。將此沉淀用10倍體積的堿性水溶液復(fù)溶，回流提取1次，過(guò)濾。沉淀用PH9的水溶液 復(fù)溶，過(guò)濾，濾液濃縮，靜置，過(guò)濾，得到干燥沉淀，HPLC法檢測(cè)其含量為91. 3%。
[0025] 實(shí)施例3 :
[0026] 取黃柏藥粉Ikg加入提取容器中，加入12L的0. 2 %酸醇（50% )溶液，回流，合并 提取液，回收溶劑，濃縮藥液，然后用堿調(diào)PH為9,靜置，過(guò)濾。濾液濃縮后調(diào)節(jié)pH為1，加 入15%的氯化鈉，靜置，過(guò)濾。干燥沉淀后，用30倍體積的堿性水溶液復(fù)溶，回流，過(guò)濾，濾 液調(diào)節(jié)PH9,靜置，過(guò)濾，濾液濃縮后調(diào)節(jié)pH為1，加入15 %的氯化鈉，靜置，過(guò)濾。干燥沉 淀。將此沉淀用10倍體積的堿性水溶液復(fù)溶，回流提取1次，過(guò)濾。沉淀用PH9的水溶液 復(fù)溶，過(guò)濾，濾液濃縮，靜置，過(guò)濾，得到干燥沉淀，HPLC法檢測(cè)其含量為85. 1 %。
[0027] 實(shí)施例4 :
[0028]ApcMin/+MiCe小鼠分籠飼養(yǎng)，自由飲水，從ApcMin/+MiCe小鼠出生第八周開(kāi)始，給藥 組分別口服給予l〇mg/kg、20mg/kg的藥根堿，模型組給予高脂飼料，連續(xù)給藥40周，測(cè)定小 腸與結(jié)腸中腫瘤大小，統(tǒng)計(jì)腫瘤數(shù)量（表1)及生存周期（圖1)。
[0029] 從表1和圖1可見(jiàn)，藥根堿高劑量組明顯降低ApcMin/+MiCe小腸及結(jié)腸腫瘤數(shù)量、 腫瘤的大小，延長(zhǎng)ApcMin/+MiCe小鼠的生存周期。
[0030] 表1.藥根堿對(duì)ApcMin/+Mice小鼠的影響
[0031]

【權(quán)利要求】
1. 一種從中藥中提取制備藥根堿的方法，其特征包括以下步驟： (1) 將藥材粉碎置于提取容器中，加入酸性水性溶劑，回流，過(guò)濾，回收溶劑，然后用堿 調(diào)pH，靜置，過(guò)濾，濾液濃縮后用酸調(diào)pH，加入5-30%的氯化鈉，靜置，過(guò)濾，得干燥沉淀物； (2) 干燥沉淀物用堿性水性溶劑復(fù)溶，回流提取，過(guò)濾，濾液用堿調(diào)節(jié)pH，靜置，過(guò)濾， 濾液濃縮后用酸調(diào)節(jié)PH，加入5-30 %的氯化鈉，靜置，過(guò)濾，干燥沉淀； (3) 反復(fù)重復(fù)步驟（2)，沉淀用堿性水性溶劑復(fù)溶，回流提取，過(guò)濾，得沉淀，沉淀用堿 性水性溶劑復(fù)溶，過(guò)濾，濾液濃縮，加入0-30 %的氯化鈉，靜置，過(guò)濾，干燥沉淀，即得含量> 80 %的藥根堿； (4) 其中（1)中藥材優(yōu)選功勞木、黃柏、黃藤、黃連、三顆針、金果欖。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述，其特征在于提取溶劑為酸性水性溶劑，溶劑中酸的含量?jī)?yōu)選 0. 1% -2%，水性溶劑優(yōu)選水、乙醇、甲醇，酸優(yōu)選鹽酸、硫酸、醋酸。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述，其特征在于復(fù)溶溶劑為堿性水性溶劑，溶劑的pH優(yōu)選8-14， 水性溶劑優(yōu)選水、乙醇、甲醇，堿優(yōu)選氨水、石灰水、氫氧化鈉、氫氧化鉀。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述，其特征在于酸堿溶劑系統(tǒng)中的酸性條件pH為0. 5-7,堿性條 件pH為8-14,堿優(yōu)選氨水、石灰水、氫氧化鈉、氫氧化鉀，酸優(yōu)選鹽酸、硫酸、醋酸。
5. 權(quán)利要求1所述的藥根堿在制備預(yù)防和治療結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用。
6. -種藥用組合物，其特征在于含有權(quán)利要求1所述的藥根堿，以及含有藥學(xué)上可接 受的載體。
7. 權(quán)利要求1和6所述在制備預(yù)防和治療結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的藥 根堿或藥用組合物可制備成口服制劑、注射劑、吸入制劑或外用制劑。
【文檔編號(hào)】C07D455/03GK104327072SQ201410685815
【公開(kāi)日】2015年2月4日 申請(qǐng)日期:2014年11月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月25日
【發(fā)明者】張春鳳, 張素麗 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)