一種米鉑的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，本發(fā)明公開了一種米鉑的制備方法，該方法以十四酸和順-二硝酸-[（1R,2R）-1,2-環(huán)己二胺]二水合鉑溶液為原料，制備得到米鉑粗品；米鉑粗品經(jīng)過精制獲得米鉑。本發(fā)明制備方法得到的米鉑，經(jīng)過穩(wěn)定性試驗，表明其異構(gòu)體、雜質(zhì)以及米鉑含量變化小，具有非常好的穩(wěn)定性。
【專利說明】一種米鉑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種米鉬的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]米鉬由日本國立癌癥中心研究所的前田等發(fā)明，為脂溶性鉬類抗癌藥物，在超液化碘油中混懸性好，經(jīng)肝動脈給藥后積聚于腫瘤局部，緩慢釋放鉬成分，不僅提高了病變局部的抗腫瘤效果，還減輕了全身性不良反應(yīng)。其作用機(jī)制與其他鉬類藥物相似，通過產(chǎn)生烷化結(jié)合物作用于DNA，形成鏈內(nèi)和鏈間交聯(lián)，從而抑制DNA的合成及復(fù)制，抑制腫瘤的生長。動物研究表明，米鉬混懸液TACE后可靶向積聚于腫瘤組織緩釋活性成分，發(fā)揮良好的抗腫瘤效果，抗癌活性優(yōu)于凈司他丁斯酯。臨床研究顯示，米鉬組和凈司他丁斯酯組的TEV比例分別為26.5%(22/83) ,17.9%(7/39);兩組的2年生存率分別為75.9,70.3% ；3年生存率分別為58.4%、48.7%，兩藥療效類似。與凈司他丁斯酯比較，米鉬組未見肝血管損傷(不影響再次治療)，對肝膽系統(tǒng)的不可逆性損傷(對預(yù)后帶來不利影響)減少，安全性優(yōu)于凈司他丁斯酯。[0003]目前，肝癌治療藥物遠(yuǎn)未滿足臨床需求，作為應(yīng)用于TACE的新型肝細(xì)胞癌治療藥物，米鉬具有廣闊的開發(fā)前景。米鉬原料藥的合成方法有很多種:專利W01994014470以順-(1R，2R)-1，2-環(huán)已二胺與碘亞鉬酸鉀反應(yīng)制得順-[(1R，2R)-1，2-環(huán)已二胺]-二碘合鉬，再在氯仿中與十四酸銀反應(yīng)除去形成的碘化銀，溶液經(jīng)濃縮處理得到米鉬；該方法中十四酸銀沒有市售品，需要自行合成。并且，最后一步用到十四酸銀容易造成產(chǎn)品的銀含量超標(biāo)，并且不易處理。另外，順-[(1R，2R)_ 1，2-環(huán)已二胺]-二碘合鉬價格較高，導(dǎo)致生產(chǎn)成本增加不利于生產(chǎn)。日本專利JP11315088和JP200483508報道將順式-二氯-[(IR，2R)-1，2-環(huán)己二胺]合鉬經(jīng)硝酸銀水解后，加入氯仿和正十四碳酸，氫氧化鉀，反應(yīng)2小時后，取氯仿層，冷卻結(jié)晶制得米鉬；該方法直接將十四酸與中間體反應(yīng)，由于十四酸的反應(yīng)能力低于十四酸鈉所以造成轉(zhuǎn)化效率降低，需要反應(yīng)時間較長。而且反應(yīng)中使用氯仿和水的體系很容易造成反應(yīng)完畢后分液困難，這也給生產(chǎn)帶來很大的麻煩。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]基于上述原因， 申請人:研究發(fā)現(xiàn)，在以十四酸或其鹽作為原料合成米鉬原料中，會產(chǎn)生一個較大的雜質(zhì)，該雜質(zhì)與米鉬結(jié)構(gòu)相近，在后續(xù)的精制過程中很難去除，因此，我們科研人員經(jīng)過若干次創(chuàng)造性試驗，意外發(fā)現(xiàn)，采用一定體積比的乙醇與異丙醇體系，在一定溫度下反應(yīng)得到米鉬粗品，米鉬粗品先用氯仿，接著使用水，再用氯仿，最后采用一定體積比的甲醇-水，獲得米鉬，該方法得到的米鉬具有單個雜質(zhì)均小于0.1%，總雜質(zhì)含量低的優(yōu)點(diǎn)；穩(wěn)定性試驗表明，本發(fā)明制備方法得到的米鉬，單個雜質(zhì)含量、總雜質(zhì)含量、米鉬含量變化率小。
[0005]本發(fā)明通過下述方案實現(xiàn)的。
[0006]一種米鉬的制備方法，以十四酸和順-二硝酸_[ (IR, 2R) -1, 2-環(huán)己二胺]二水合鉬溶液為原料，制備得到米鉬粗品；米鉬粗品經(jīng)過精制獲得米鉬。
[0007]上述所述的制備方法包括:取十四酸，加入95%乙醇，于50-55 °C攪拌溶解，加入1.135摩爾/升氫氧化鈉溶液，于50- 550C下攪拌反應(yīng)2.5h，攪拌下，滴加順-二硝酸-[(IR，2R) -1, 2-環(huán)己二胺]二水合鉬溶液，滴畢，加入異丙醇，于50-55°C下繼續(xù)攪拌反應(yīng)18h，停止攪拌，冷卻至20-25°C，繼續(xù)攪拌30分鐘，過濾，濾餅用水和甲醇洗滌后，40-45°C減壓干燥，得白色固體即米鉬粗品。上述所述的一種米鉬的制備方法，95%乙醇與異丙醇的體積比為5:1。
[0008]其中順-二硝酸_[ (IR, 2R)-1, 2-環(huán)己二胺]二水合鉬溶液的制備方法為:取順式-[(IR，2R)-1, 2-環(huán)己二胺-二氯]合鉬加，加水，于20-25°C攪拌0.5小時，將1.05摩爾/升硝酸銀的水溶液避光下滴入，于20-25°C下繼續(xù)避光攪拌反應(yīng)48h，將反應(yīng)生成的淡黃色沉淀過濾，濾餅用水洗滌后，合并濾液，濾液用0.2微米的微孔濾膜過濾，向濾液中加入
0.168摩爾/升碘化鈉水溶液于20-25°C攪拌24小時后，冷卻至10°C以下，靜置3小時，用
0.2微米的微孔濾膜過濾，濾畢，向濾液中加入活性炭，于20-25°C攪拌I小時，抽濾，用水洗滌，濾液用0.2微米濾膜過濾，得到濾液為順-二硝酸_[ (IR，2R)-1, 2-環(huán)己二胺]二水合鉬溶液。
[0009]其中米鉬粗品經(jīng)過精制獲得米鉬的制備方法為:取米鉬粗品，加入氯仿，于20-25°C攪拌I小時，過濾，重復(fù)兩次，將濾餅加入50°C熱水，于50°C下攪拌I小時，過濾，重復(fù)3次，濾餅加入氯仿，65°C加熱回流30分鐘，冷卻至50°C，加入活性炭，于此溫度下攪拌30分鐘，過濾，濾液冷卻至20-25°C，滴加體積比為1000:49的甲醇-水溶液，滴加完畢后，于20- 25°C攪拌3小時，靜置12小時，過濾，濾餅用甲醇淋洗，50°C真空干燥，得到米鉬。
[0010]一、檢測分析方法
[0011]【異構(gòu)體】取本品適量，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含1.0mg的溶液，作為供試品溶液。精密量取1ml，置100mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄VD)測定。色譜柱:SUMICHIRAL0A-2500(
4.6mmX250mm5ym);以正己烷-甲醇-乙醇(97:3:0.5)為流動相；柱溫:30°C，檢測波長:216nm,流速:0.8ml/min。另取異構(gòu)體I，米鉬和異構(gòu)體2適量,加流動相溶解并稀釋制成每Iml中各約含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。取對照品溶液10 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖，異構(gòu)體1、米鉬和異構(gòu)體2依次流出，米鉬與兩異構(gòu)體的分離度應(yīng)符合要求，理論板數(shù)按米鉬峰計算不低于2000。取對照溶液10 μ I注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使米鉬色譜峰的峰高約為滿量程的10%，再精密量取供試品溶液與對照溶液各10 μ I分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液的色譜圖中如有兩異構(gòu)體峰，其峰面積均不得大于對照溶液主峰面積的1/10 (0.1%)。
[0012]【有關(guān)物質(zhì)】取本品約10mg，置IOml量瓶中，加混合溶劑(正己烷:乙醇=4: I)Iml振搖使溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液(本液配制后必須立即進(jìn)樣)；精密量取Iml，置100mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液(5小時內(nèi)穩(wěn)定)。照含量測定項下的色譜條件，取對照溶液20 μ I注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的10%，再精密量取供試品溶液與對照溶液各20 μ 1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的4倍，供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積的1/10 (0.1%)，相對保留時間為0.7-1.2的雜質(zhì)面積不得大于對照溶液主峰面積的1/12.5 (0.08%);各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的1/2 (0.5%)ο
[0013]【含量測定】照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄VD)測定
[0014]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱:Inertsil 0DS-3250_X4.6_5 μ m ;以甲醇-乙醇(80: 20)為流動相；檢測波長為216nm;柱溫為40°C。理論板數(shù)按米鉬峰計算不得低于3000。
[0015]測定法溶液臨用新制取本品約10mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加混合溶劑(正己烷:乙醇=4: l)lml振搖使溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取米鉬對照品，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。
[0016]二、穩(wěn)定性試驗
[0017]取實施例1和實施例2精制米鉬原料藥，按照本發(fā)明公開的檢測方法進(jìn)行檢測，按照下述試驗:
[0018](I)光照試驗:取樣品，疏松平攤于小培養(yǎng)皿中，厚度約5mm。將其置于藥品強(qiáng)光照射試驗箱，于照度4500Lx±500Lx條件下放置10天，在第10天取樣，檢測，結(jié)果與O月數(shù)據(jù)相比較。
[0019](2)高溫試驗:取樣品，置于小燒杯中，密封膜封口。將其置于電熱鼓風(fēng)干燥箱，在600C ±1°C條件下放置10天，于第10天取樣檢測，結(jié)果與O月數(shù)據(jù)相比較。
[0020](3) 高濕試驗:取樣品，置于小燒杯中，分別置于盛有NaCl飽和溶液和KN03飽和溶液的密閉干燥器，濕度條件分別為RH75%。將其分別置于電熱鼓風(fēng)干燥箱，在25°C ±1°C條件下放置10天，于第10天取樣檢測，結(jié)果與O月數(shù)據(jù)相比較。
[0021]表1強(qiáng)光照射影響因素試驗結(jié)果
[0022]
【權(quán)利要求】
1.一種米鉬的制備方法，其特征在于:以十四酸和順-二硝酸-[(1R，2R)-1，2-環(huán)己二胺]二水合鉬溶液為原料，制備得到米鉬粗品；米鉬粗品經(jīng)過精制獲得米鉬。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種米鉬的制備方法，其中制備方法包括:取十四酸，加入95%乙醇，于50-55°C攪拌溶解，加入1.135摩爾/升氫氧化鈉溶液，于50_55°C下攪拌反應(yīng)2.5h，攪拌下，滴加順-二硝酸_[ (IR, 2R)-1, 2-環(huán)己二胺]二水合鉬溶液，滴畢，加入異丙醇，于50-55°C下繼續(xù)攪拌反應(yīng)18h，停止攪拌，冷卻至20-25°C，繼續(xù)攪拌30分鐘，過濾，濾餅用水和甲醇洗滌后，40-45°C減壓干燥，得白色固體即米鉬粗品。
3.根據(jù)權(quán)利I或2所述的一種米鉬的制備方法，其中順-二硝酸-[(IR，2R)-1,2-環(huán)己二胺]二水合鉬溶液的制備方法為:取順式-[(IR，2R)-1, 2-環(huán)己二胺-二氯]合鉬加，加水，于20-25°C攪拌0.5小時，將1.05摩爾/升硝酸銀的水溶液避光下滴入，于20_25°C下繼續(xù)避光攪拌反應(yīng)48h，將反應(yīng)生成的淡黃色沉淀過濾，濾餅用水洗滌后,合并濾液,濾液用0.2微米的微孔濾膜過濾，向濾液中加入0.168摩爾/升碘化鈉水溶液于20-25°C攪拌24小時后，冷卻至10°C以下，靜置3小時，用0.2微米的微孔濾膜過濾，濾畢，向濾液中加入活性炭，于20-25°C攪拌I小時，抽濾，用水洗滌，濾液用0.2微米濾膜過濾，得到濾液為順-二硝酸-[(1R，2R)-1，2-環(huán)己二胺]二水合鉬溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種米鉬的制備方法，其中米鉬粗品經(jīng)過精制獲得米鉬的制備方法為:取米鉬粗品，加入氯仿，于20-25°C攪拌I小時，過濾，重復(fù)兩次，將濾餅加入50°C熱水，于50°C下攪拌1小時，過濾，重復(fù)3次，濾餅加入氯仿，65°C加熱回流30分鐘，冷卻至50°C，加入活性炭，于此溫度下攪拌30分鐘，過濾，濾液冷卻至20-25°C，滴加體積比為1000:49的甲醇-水溶液，滴加完畢后，于20-25°C攪拌3小時，靜置12小時，過濾，濾餅用甲醇淋洗，50°C真空干燥，得到米鉬。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種米鉬的制備方法，其中95%乙醇與異丙醇的體積比為5:1o
【文檔編號】C07F15/00GK103910762SQ201410151902
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年4月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月16日
【發(fā)明者】高紅云, 于新影, 姜海全, 王蕾, 劉實 申請人:北京美迪康信醫(yī)藥科技有限公司, 哈爾濱譽(yù)衡藥業(yè)股份有限公司