鏈霉菌屬菌種所產(chǎn)的化合物及該化合物的制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了兩種具有抗腫瘤活性的新化合物及其制備方法和應(yīng)用，并提供了生產(chǎn)該兩種新化合物的鏈霉菌屬（Streptomyces?labedae）菌株，保藏編號(hào)CGMCC?No.8025，其于2013年8月14日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心。該兩種新化合物經(jīng)鑒定獲得其相應(yīng)的結(jié)構(gòu)式，并經(jīng)檢測(cè)具有抗腫瘤活性。
【專利說(shuō)明】鏈霉菌屬菌種所產(chǎn)的化合物及該化合物的制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及的是一種醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是涉及一種鏈霉菌屬菌種所產(chǎn)的化合物及該化合物的制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]鏈霉菌屬(streptomyces),是最高等的放線菌,有發(fā)育良好的分枝菌絲，菌絲無(wú)橫隔，已報(bào)道的有千余種，廣泛分布于有機(jī)物豐富、酸度和含水量適中的土壤中，營(yíng)好氧性腐生生活，對(duì)土壤中復(fù)雜有機(jī)物的礦化發(fā)揮重要作用，是最重要的抗生素生產(chǎn)菌，例如鏈霉素、四環(huán)素、紅霉素、新霉素、卡那霉素和井R霉素等。有的可產(chǎn)生工業(yè)用蛋白酶、葡萄糖異構(gòu)酶或維生素B12等。
[0003]癌癥或腫瘤是動(dòng)物和人類死亡的主要原因，為了獲得有效和安全的施用于患有癌癥病人的抗腫瘤劑，人們已經(jīng)付出并且還在付出巨大的努力。尋找抗腫瘤活性物質(zhì)是微生物代謝產(chǎn)物研究熱點(diǎn)之一。目前關(guān)于革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌Streptomyces Iabedae代謝產(chǎn)物的研究報(bào)道較少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，提出一種鏈霉菌屬菌種所產(chǎn)的化合物及該化合物的制備方法和應(yīng)用，通過(guò)發(fā)酵后能夠用于制備抗腫瘤藥物。
[0005]本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的: [0006]本發(fā)明從自然環(huán)境中分離獲得了鏈霉菌屬(Streptomyces labedae) HCCB11431菌株，該菌株于2013年8月14日保藏在中國(guó)科學(xué)院微生物研究所內(nèi)的中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期為2013年8月14日，保藏編號(hào)CGMCCN0.8025本發(fā)明首先提供了兩種具有抗腫瘤活性的化合物，其次提供了生產(chǎn)該兩種具有抗腫瘤活性的化合物的鏈霉菌屬菌株，本發(fā)明還提供了上述的兩種化合物的制備方法和應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明首先提供了一種具有抗腫瘤活性的式(A)所示的化合物，
【權(quán)利要求】
1.一種具有抗腫瘤活性的式(A)所示的新化合物，
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的式(A)所示的新化合物，其特征在于，所述式(A)所示的新化合物為一種鏈霉菌屬(Streptomyces Iabedae)菌株所產(chǎn)；所述鏈霉菌屬菌株的保藏編號(hào)CGMCC N0.8025。
3.一種制備權(quán)利要求1或2所述的式(A)所示的新化合物的方法，包括如下步驟: (a)、采用液體培養(yǎng)基發(fā)酵鏈霉菌屬CGMCCN0.8025菌株，獲得發(fā)酵產(chǎn)物； (b)、采用有機(jī)溶劑提取所獲得的發(fā)酵產(chǎn)物，減壓蒸餾得到提取物； (c )、將獲得的提取物采用有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，得到萃取相； (d)、將獲得的萃取相進(jìn)行減壓蒸餾獲得萃取物，再采用戴安P680色譜儀進(jìn)行分離； (e)、采用半制備液相色譜制得所述式(A)所示的新化合物； 其中，所述式(A)所示的新化合物包括如下式(I)所示的新化合物和如下式(II)所示的新化合物:
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(a)中，所述發(fā)酵的過(guò)程如下: 先將鏈霉菌屬CGMCC N0.8025菌株接種于種子培養(yǎng)基中，搖床培養(yǎng)2天，其中搖床培養(yǎng)的條件為28°C、220r/min，再將培養(yǎng)好的種子以8%的接種量接種于5L發(fā)酵罐中的發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)5 - 7天，所述發(fā)酵的溫度為26 - 28°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述種子培養(yǎng)基的組分及含量為:葡萄糖20g，甘油 20g，可溶性淀粉 20g，黃豆餅 30g, KH2P040.2g，MgS04.7H200.2g 以及水 IL ;所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組分及含量為:葡萄糖8g，黃豆餅粉22g，玉米淀粉40g，MgS04.7H201g,KH2P040.2g, NaC12g 以及水 1L。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于， 步驟(b)中提取發(fā)酵產(chǎn)物的有機(jī)溶劑為甲醇； 步驟(C)中，所述萃取的有機(jī)溶劑為正丁醇；步驟(d)中，所述采用戴安P680色譜儀分離，層析柱為YMC-ODS C-18，采用甲醇和水為洗脫溶劑進(jìn)行梯度洗脫分離，O~30min采用10% -100%的乙腈洗脫,流速8ml/min,收集5.1 - 6.3min的餾分，濃縮后得到粗樣； 步驟(e)中，對(duì)步驟(d)獲得的粗樣進(jìn)一步進(jìn)行半制備，半制備柱為Agilent ZORBAXSB - C18，得到所述式(I)所示的化合物和式(II)所示的化合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的式(A)所示的化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的式(A)所示的化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述腫瘤的細(xì)胞選自人乳腺癌細(xì)胞MCF - 7、人胰腺癌細(xì)胞PANC -1和前列腺癌細(xì)胞Du - 145中的一種或幾種。
9.一種藥物組合物或抗腫瘤藥物，所述藥物組合物或抗腫瘤藥物含有權(quán)利要求1或2所述的式(A)所示的化合物中的一種或兩種`。
【文檔編號(hào)】C07C229/36GK103694127SQ201310746189
【公開(kāi)日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月30日
【發(fā)明者】蔣秋龍, 楊志鈞, 錢(qián)秀萍, 戈梅, 饒敏, 羅敏玉, 殷瑜, 毛文偉 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué), 上海來(lái)益生物藥物研究開(kāi)發(fā)中心有限責(zé)任公司