一種從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法。本發(fā)明以菊芋葉為原料，經(jīng)加熱回流或超聲提取，固液分離后得綠原酸提取液，再經(jīng)膜分離和膜濃縮后過(guò)大孔樹(shù)脂柱，流加洗雜液洗雜，用洗脫液洗脫至高效液相色譜（HPLC）檢測(cè)無(wú)綠原酸流出，并收集洗脫液，洗脫液減壓濃縮，經(jīng)活性炭脫色，再經(jīng)噴霧干燥后得綠原酸純度為94%以上的高純度綠原酸。該方法不僅樣品處理量大，操作簡(jiǎn)單，適用于工業(yè)化生產(chǎn)，而且彌補(bǔ)了金銀花等中藥資源作為綠原酸提取原料的不足，變廢為寶，為提取綠原酸提供一個(gè)新的來(lái)源，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和環(huán)境效益。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及提取純化綠原酸的方法，具體地說(shuō)是一種從菊芋葉片中提取純化綠原 酸的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 菊芋（Helianthus tuberosus L.)俗稱(chēng)洋姜、鬼子姜。原產(chǎn)于北美，為菊科向日葵 屬的多年生草本植物。因?yàn)榫沼蟓h(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)，具有耐寒耐旱、抗風(fēng)沙、繁殖能力極強(qiáng)、種植 管理簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，可以在灘邊、荒漠等地區(qū)種植，是一種可以用于改善土地沙漠化，鹽堿化 的經(jīng)濟(jì)植物，對(duì)菊芋進(jìn)行廣泛種植并開(kāi)展綜合開(kāi)發(fā)利用對(duì)改善生態(tài)環(huán)境，增加我國(guó)北部地 區(qū)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)收入具有重要價(jià)值(劉丹梅等，菊芋的生態(tài)功能研究，2009 (10) : 140-142)。
[0003] 當(dāng)前人們對(duì)菊芋的研究和利用主要針對(duì)其地下塊莖，菊芋塊莖富含菊粉、氨基酸、 高蛋白成分和一系列酚酸類(lèi)化合物(袁曉艷等，菊芋葉中綠原酸提取工藝研究，2008)，可以 作為食品和飼料使用。相對(duì)菊芋塊莖而言，菊芋葉片研究和利用較少，菊芋葉除了作飼料以 外更多的則被廢棄，造成了資源的大量浪費(fèi)。菊芋葉中含有大量的生物活性物質(zhì)，綠原酸是 其中一種最為重要的化學(xué)成分之一(袁曉艷等，高效液相色譜-質(zhì)譜法分析菊芋葉中的綠 原酸類(lèi)化合物，2008, 26 (3) :335-338)。綠原酸具有抗菌、抗病毒、抗誘變、保肝、利膽等多 種藥用功能，應(yīng)用非常廣泛，主要為醫(yī)藥、日用化工和食品等行業(yè)(王茜等，杜仲葉中綠原酸 提取分離工藝條件的研究，2008, 24(1) :73-80)。
[0004] 目前，國(guó)內(nèi)主要以金銀花、杜仲等高價(jià)藥用資源為原料提取綠原酸，原料有 限，價(jià)格昂貴，因此亟需尋找提取綠原酸的替代來(lái)源。中國(guó)專(zhuān)利200710098997. 9和 200810244181. 7分別從紫莖澤蘭和一枝黃花中提取分離綠原酸，但紫莖澤蘭和一枝黃花環(huán) 境侵染力強(qiáng)，易于對(duì)生態(tài)環(huán)境造成破壞。中國(guó)專(zhuān)利201210531489. 6從煙草中提取分離綠原 酸，但煙草中含有多種有害物質(zhì)，其安全性得不到保障。菊芋作為被聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織官員稱(chēng) 為"21世紀(jì)人畜共用作物"的植物，不僅安全可靠，對(duì)環(huán)境無(wú)污染，而且菊芋中綠原酸的含量 較高約為〇. 5%-5. 0%。因此，從菊芋葉中提取純化綠原酸可以帶來(lái)更好的經(jīng)濟(jì)效益、環(huán)境效 益和社會(huì)效益。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：
[0007] -種從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法：
[0008] 1)加熱提取：以菊芋葉粗粉為原料，將原料與溶劑按I :5-1 :20(W/V)的比例混合， 而后于40-KKTC下回流提取兩次，每次1-6小時(shí)，冷卻至室溫，經(jīng)固液分離后得綠原酸提取 液；
[0009] 2)膜分離和膜濃縮：將步驟1)中得到的綠原酸提取液先通過(guò)截留分子量1000的 超濾膜，收集透過(guò)液，再用截留分子量200的納濾膜將提取液濃縮至原體積的10%，收集濃 縮液；
[0010] 3)大孔樹(shù)脂富集純化：將步驟2)中得到的濃縮液通過(guò)大孔樹(shù)脂柱，動(dòng)態(tài)吸附至飽 和，用pH=5-6的鹽酸水溶液以5-10BV/h的流速淋洗上述大孔樹(shù)脂柱至流出液無(wú)色，再用體 積分?jǐn)?shù)為40%-80%的乙醇以5-10BV/h的流速進(jìn)行洗脫，收集乙醇洗脫液直至無(wú)綠原酸流 出，將收集所得洗脫液減壓濃縮至膏狀；
[0011] 4)活性炭脫色：將步驟3)中所得的浸膏用水溶解，其中料液按質(zhì)量體積比為1 :10 (g/mL)的比例溶解，在每ImL水溶解液中加入30-60mg活性炭，室溫下攪拌脫色10-50min, 過(guò)濾，收集濾液后得純度為94%以上的高純度綠原酸。
[0012] 所述菊芋葉粗粉為將新鮮菊芋葉片置于陰涼通風(fēng)處，陰干，粉碎至可通過(guò)10-200 目標(biāo)準(zhǔn)篩，待用。
[0013] 所述溶劑為體積分?jǐn)?shù)為1〇%-1〇〇%的甲醇或乙醇水溶液。
[0014] 步驟3)的大孔樹(shù)脂為符合藥用要求的極性或中極性大孔吸附樹(shù)脂。
[0015] 所述步驟3)的大孔樹(shù)脂為ADS-7型、HPD-600型、NKA-2型、ADS-17型或DM130型 大孔吸附樹(shù)脂中的一種。
[0016] 所述步驟4)中洗脫收集綠原酸后的大孔樹(shù)脂柱經(jīng)再生液再生后可重復(fù)利用，進(jìn)而 達(dá)到連續(xù)操作的目的。
[0017] 所述再生液為無(wú)水乙醇。
[0018] 所述活性炭為10-60目的食品脫色精制專(zhuān)用活性炭。
[0019] 本發(fā)明有益效果在于：
[0020] 1.本發(fā)明以菊芋葉為提取原料，變廢為寶，擴(kuò)大綠原酸的原料來(lái)源，可獲得更好的 經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和環(huán)境效益。
[0021] 2.本發(fā)明采用膜分離濃縮技術(shù)，除去大分子雜質(zhì)，減小了后續(xù)工作的難度。
[0022] 3.本發(fā)明以大孔樹(shù)脂作為富集純化材料，吸附速率快，吸附容量大，選擇性好，操 作簡(jiǎn)單，適合綠原酸的分離純化。另外，洗脫劑和再生劑均可回收重復(fù)利用，降低了生產(chǎn)成 本。
[0023] 4.本發(fā)明采用活性炭脫色技術(shù)，大大縮短了后處理時(shí)間。
[0024] 5.本發(fā)明提取過(guò)程操作方法簡(jiǎn)單，控制參數(shù)少，效率高，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0025] 圖1為本發(fā)明提取純化綠原酸的工藝流程圖。

【具體實(shí)施方式】
[0026] 以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明不限于此。
[0027] 本發(fā)明所述菊芋葉粗粉為將新鮮菊芋葉片置于陰涼通風(fēng)處，陰干，粉碎至可通過(guò) 10-200目標(biāo)準(zhǔn)篩，待用。
[0028] 本發(fā)明所述實(shí)施例中，綠原酸的純度采用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，所用色譜柱 為辦口618丨1805 018(4.6_\250_，5 4 111)，檢測(cè)波長(zhǎng)為32711111，流動(dòng)相六為0.1%三氟乙 酸水溶液，B為乙腈，流速為lmL/min，進(jìn)樣量為10 μ L，梯度洗脫程序如表1。
[0029] 表I HPLC梯度洗脫程序

【權(quán)利要求】
1. 一種從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法，其特征在于： 1) 加熱提?。阂跃沼笕~粗粉為原料，將原料與溶劑按1 :5-1 :20(W/V)的比例混合，而后 于40-KKTC下回流提取兩次，每次1-6小時(shí)，冷卻至室溫，經(jīng)固液分離后得綠原酸提取液； 2) 膜分離和膜濃縮：將步驟1)中得到的綠原酸提取液先通過(guò)截留分子量1000的超濾 膜，收集透過(guò)液，再用截留分子量200的納濾膜將提取液濃縮至原體積的10%，收集濃縮液； 3) 大孔樹(shù)脂富集純化：將步驟2)中得到的濃縮液通過(guò)大孔樹(shù)脂柱，動(dòng)態(tài)吸附至飽和， 用pH=5-6的鹽酸水溶液以5-lOBV/h的流速淋洗上述大孔樹(shù)脂柱至流出液無(wú)色，再用體積 分?jǐn)?shù)為40%-80%的乙醇以5-10BV/h的流速進(jìn)行洗脫，收集乙醇洗脫液直至無(wú)綠原酸流出， 將收集所得洗脫液減壓濃縮至膏狀； 4) 活性炭脫色：將步驟3)中所得的浸膏用水溶解，在每lmL水溶液中加入30-60mg活 性炭，室溫下攪拌脫色10_50min，過(guò)濾，收集濾液后得純度為94%以上的高純度綠原酸。
2. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法，其特征在于： 所述菊芋葉粗粉為將新鮮菊芋葉片置于陰涼通風(fēng)處，陰干，粉碎至可通過(guò)10-200目標(biāo) 準(zhǔn)篩，待用。
3. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法，其特征在于：所述溶劑 為體積分?jǐn)?shù)為1〇%_1〇〇%的甲醇或乙醇水溶液。
4. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法，其特征在于：步驟3)的 大孔樹(shù)脂為符合藥用要求的極性或中極性大孔吸附樹(shù)脂。
5. 按權(quán)利要求4所述的從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法，其特征在于：所述步驟 3) 的大孔樹(shù)脂為ADS-7型、HPD-600型、NKA-2型、ADS-17型或DM130型大孔吸附樹(shù)脂中的 一種。
6. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法，其特征在于：所述步驟 4) 中洗脫收集綠原酸后的大孔樹(shù)脂柱經(jīng)再生液再生后可重復(fù)利用，進(jìn)而達(dá)到連續(xù)操作的目 的。
7. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法，其特征在于：所述再生 液為無(wú)水乙醇。
8. 按權(quán)利要求1所述的從菊芋葉片中提取純化綠原酸的方法，其特征在于：所述活性 炭為10-60目的食品脫色精制專(zhuān)用活性炭。
【文檔編號(hào)】C07C67/48GK104418741SQ201310390110
【公開(kāi)日】2015年3月18日 申請(qǐng)日期:2013年8月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月30日
【發(fā)明者】夏傳海, 孫鵬程, 方圣濤 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所