一種從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法，具體涉及膜分離和膜濃縮過(guò)程，大孔樹脂吸附洗脫過(guò)程和聚酰胺精制過(guò)程。本發(fā)明以金銀花提取物為原料，用去離子水溶解，經(jīng)膜分離和膜濃縮后過(guò)大孔樹脂柱，流加洗雜液洗雜，用洗脫液洗脫至高效液相色譜（HPLC）檢測(cè)無(wú)綠原酸流出，并收集洗脫液，洗脫液經(jīng)減壓濃縮、聚酰胺柱吸附分離洗脫精制后，噴霧干燥，得綠原酸純度為98%以上的高純度綠原酸。該方法制備的綠原酸純度極高，綠原酸損失少，操作簡(jiǎn)單，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
【專利說(shuō)明】一種從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及提取綠原酸的方法，具體涉及一種從金銀花提取物中制備高純度綠原 酸的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 以金銀花為原料生產(chǎn)綠原酸是我國(guó)綠原酸的主要生產(chǎn)方式。目前，國(guó)內(nèi)金銀花中 綠原酸的制備一般是先將綠原酸提取液醇沉或絮凝沉淀后，采用大孔樹脂進(jìn)行分離純化。 但是，在生成沉淀的過(guò)程中會(huì)伴有綠原酸的包夾，導(dǎo)致綠原酸的大量損失，產(chǎn)率低。另外， 沉淀法除雜效果差，產(chǎn)品純度低。中國(guó)專利02133448. X公開了"大孔樹脂吸附提取高含 量綠原酸的工藝方法"，以金銀花為原料，提取濃縮后，加入乙醇進(jìn)行醇沉，過(guò)濾，濾液濃縮， 經(jīng)一次大孔樹脂吸附分離洗脫后，噴霧干燥得綠原酸純度為40%的綠原酸產(chǎn)品。中國(guó)專利 01144170. 4公開了"金銀花中綠原酸的提取純化方法"，以金銀花為原料，提取濃縮后，加入 絮凝劑進(jìn)行絮凝沉淀，過(guò)濾，濾液經(jīng)大孔樹脂吸附分離洗脫后，真空干燥得得率為22%，純度 為48%的綠原酸產(chǎn)品。
[0003] 隨著膜材料、制膜方法以及膜應(yīng)用的不斷發(fā)展，膜分離技術(shù)逐漸成為分離技術(shù)大 家族中的重要成員。由于膜分離技術(shù)可以根據(jù)膜截留分子量大小選擇性分離純化化合物， 具有分離精度高、易于操作和管理、在應(yīng)用中對(duì)環(huán)境造成二次污染小的優(yōu)點(diǎn)而逐漸成為國(guó) 內(nèi)學(xué)術(shù)研究的熱點(diǎn)。中國(guó)專利99115374. X和中國(guó)專利200510020265. 9中分別公開了將膜 分離技術(shù)用于杜仲葉和金銀花制備綠原酸的方法，制備了高純度綠原酸產(chǎn)品。
[0004] 聚酰胺柱層析技術(shù)是目前應(yīng)用很廣泛的分離純化技術(shù)，對(duì)極性物質(zhì)和非極性物 質(zhì)均能適用，尤其適用于分離黃酮類、醌類和酚類化合物。聚酰胺吸附劑可重復(fù)適用， 對(duì)綠原酸及其結(jié)構(gòu)類似物分離純化效果較好。中國(guó)專利200410035758. 5和中國(guó)專利 200910264401. 7分別公開了將聚酰胺柱層析技術(shù)應(yīng)用于金銀花和菊芋制備綠原酸的工藝 研究中，制備了高純度綠原酸產(chǎn)品。
[0005] 雖然膜分離技術(shù)，大孔樹脂分離純化技術(shù)和聚酰胺柱層析技術(shù)均已用于綠原酸制 備工藝的研究中，但三者的聯(lián)用技術(shù)在制備高純度綠原酸的研究中尚未見報(bào)導(dǎo)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種采用膜分離、大孔樹脂分離純化和聚酰胺柱層析聯(lián)用 技術(shù)從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法。
[0007] 為實(shí)現(xiàn)上述目的本發(fā)明采用技術(shù)方案為：
[0008] -種從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法：
[0009] 1)膜分離和膜濃縮過(guò)程：將金銀花提取物的水溶液先通過(guò)截留分子量為1000的 中空纖維超濾膜進(jìn)行膜分離，收集透過(guò)液，再用截留分子量200的納濾膜將提取液濃縮至 原體積的10%，收集濃縮液；
[0010] 2)大孔樹脂吸附洗脫過(guò)程：將步驟1)中得到的濃縮液以l-5BV/h的流速通過(guò)大 孔樹脂柱，動(dòng)態(tài)吸附飽和后，用去離子水以l-l〇BV/h的流速淋洗上述大孔樹脂柱至流出液 無(wú)色，再用體積分?jǐn)?shù)為20%-100%的乙醇以5-10BV/h的流速進(jìn)行洗脫，收集乙醇洗脫液直至 無(wú)綠原酸流出，最后將收集所得洗脫液減壓濃縮至膏狀；
[0011] 3)聚酰胺精制過(guò)程：將步驟2)中浸膏用水溶解，其中料液按質(zhì)量體積比為1:5 (g/mL)的比例溶解，溶解后以l-5BV/h的流速通過(guò)聚酰胺柱，動(dòng)態(tài)吸附飽和后，用3-8BV去 離子水以l-l〇BV/h的流速淋洗上述聚酰胺柱，再用體積分?jǐn)?shù)為20%-100%的乙醇水溶液以 5-10BV/h的流速進(jìn)行洗脫，收集乙醇洗脫液直至無(wú)綠原酸流出，噴霧干燥即得綠原酸純度 為98%以上的高純度綠原酸。
[0012] 所述步驟1)金銀花提取物的水溶液為以金銀花為原料經(jīng)水提醇沉法提取所得的 提取物中加入去離子水，室溫下充分?jǐn)嚢韬螅渲瞥?，其中金銀花提取物與去離子水的比例 為 1:10 (W/V)。
[0013] 所述步驟2)的大孔樹脂為符合藥用要求的極性大孔吸附樹脂。
[0014] 所述步驟2)的大孔樹脂為ADS-7型、ADS-17型、NKA-2型、HPD500型或HPD600型 大孔吸附樹脂中的一種。
[0015] 所述步驟3)中聚酰胺的粒徑為30-100目。
[0016] 所述步驟2)和步驟3)中洗脫收集綠原酸后的大孔樹脂柱和聚酰胺柱均可經(jīng)再生 液再生后重復(fù)利用，進(jìn)而達(dá)到連續(xù)操作的目的。
[0017] 所述再生液為無(wú)水乙醇。
[0018] 本發(fā)明有益效果在于：
[0019] 1.本發(fā)明方法采用膜分離技術(shù)不但能解決常規(guī)初步分離純化過(guò)程中醇沉或絮凝 沉淀過(guò)程中綠原酸的損失量大，純化效果差等缺陷，而且可以有效的除去蛋白質(zhì)、多糖等大 分子雜質(zhì)，降低了后續(xù)處理的難度，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0020] 2.本發(fā)明方法整個(gè)綠原酸制備過(guò)程均在室溫下進(jìn)行，減少了能源消耗的同時(shí)降低 了綠原酸的分解，提高了綠原酸產(chǎn)品的純度。
[0021] 3.本發(fā)明方法采用聚酰胺柱層析技術(shù)，將綠原酸與其結(jié)構(gòu)類似物等雜質(zhì)充分分 離，實(shí)現(xiàn)了綠原酸的高純化制備。
[0022] 4.本發(fā)明方法整個(gè)操作過(guò)程操作簡(jiǎn)單，洗脫劑和再生劑均可回收重復(fù)利用，節(jié)約 溶劑，可用于大規(guī)模生產(chǎn)。
[0023] 5.本發(fā)明首先采用膜分離技術(shù)進(jìn)行預(yù)處理，不但可以減小后續(xù)處理的難度，而且 可以保護(hù)樹脂不受有害物質(zhì)的損害，延長(zhǎng)樹脂的使用壽命，對(duì)工業(yè)化生產(chǎn)具有重要的意義

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0024] 圖1為從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的工藝流程圖。

【具體實(shí)施方式】
[0025] 以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明不限于此。
[0026] 本發(fā)明所述實(shí)施例中，金銀花提取物是以金銀花為原料，經(jīng)干燥、粉碎后，加水浸 提，過(guò)濾，濾液加入乙醇，低溫冷藏，靜置過(guò)夜，使雜質(zhì)沉淀；過(guò)濾，濾液濃縮干燥后得到的。
[0027] 本發(fā)明所述實(shí)施例中，綠原酸的純度采用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，所用色譜柱 為辦口618丨1805 018(4.6_\250_，5 4 111)，檢測(cè)波長(zhǎng)為32711111，流動(dòng)相六為0.1%三氟乙 酸水溶液，B為乙腈，流速為lmL/min，進(jìn)樣量為10 μ L，梯度洗脫程序如表1。 「00281 耒IHP丨,C梯庶詵脫,耜序

【權(quán)利要求】
1. 一種從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于： 1) 膜分離和膜濃縮過(guò)程：將金銀花提取物的水溶液先通過(guò)截留分子量為1000的中空 纖維超濾膜進(jìn)行膜分離，收集透過(guò)液，再用截留分子量200的納濾膜將提取液濃縮至原體 積的10%，收集濃縮液； 2) 大孔樹脂吸附洗脫過(guò)程：將步驟1)中得到的濃縮液以l-5BV/h的流速通過(guò)大孔樹脂 柱，動(dòng)態(tài)吸附飽和后，用去離子水以l-l〇BV/h的流速淋洗上述大孔樹脂柱至流出液無(wú)色， 再用體積分?jǐn)?shù)為20%-100%的乙醇以5-10BV/h的流速進(jìn)行洗脫，收集乙醇洗脫液直至無(wú)綠 原酸流出，最后將收集所得洗脫液減壓濃縮至膏狀； 3) 聚酰胺精制過(guò)程：將步驟2)中浸膏用水溶解后以l-5BV/h的流速通過(guò)聚酰胺柱，動(dòng) 態(tài)吸附飽和后，用3-8BV去離子水以1-lOBV/h的流速淋洗上述聚酰胺柱，再用體積分?jǐn)?shù)為 20%-100%的乙醇水溶液以5-10BV/h的流速進(jìn)行洗脫，收集乙醇洗脫液直至無(wú)綠原酸流出， 噴霧干燥即得綠原酸純度為98%以上的高純度綠原酸。
2. 按權(quán)利要求1所述的從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所 述步驟1)金銀花提取物的水溶液為以金銀花為原料經(jīng)水提醇沉法提取所得的提取物中加 入去離子水，室溫下充分?jǐn)嚢韬?，配制成，其中金銀花提取物與去離子水的比例為1:10 (W/ V)。
3. 按權(quán)利要求1所述的從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所 述步驟2)的大孔樹脂為符合藥用要求的極性大孔吸附樹脂。
4. 按權(quán)利要求3所述的從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所 述步驟2)的大孔樹脂為ADS-7型、ADS-17型、NKA-2型、HPD500型或HPD600型大孔吸附樹 脂中的一種。
5. 按權(quán)利要求1所述的從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所 述步驟3)中聚酰胺的粒徑為30-100目。
6. 按權(quán)利要求1所述的從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所 述步驟2)和步驟3)中洗脫收集綠原酸后的大孔樹脂柱和聚酰胺柱均可經(jīng)再生液再生后重 復(fù)利用，進(jìn)而達(dá)到連續(xù)操作的目的。
7. 按權(quán)利要求6所述的從金銀花提取物中制備高純度綠原酸的方法，其特征在于：所 述再生液為無(wú)水乙醇。
【文檔編號(hào)】C07C69/732GK104418742SQ201310390213
【公開日】2015年3月18日 申請(qǐng)日期:2013年8月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月30日
【發(fā)明者】夏傳海, 孫鵬程, 王建華, 孔娜娜 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所