專利名稱：一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用禽蛋蛋黃提取制備磷脂的方法，具體涉及一種利用低溫溶劑沉淀技術(shù)從蛋黃液中提取蛋黃磷脂的方法。
背景技術(shù)：
磷脂普遍存在于人體各組織和器官中，特別是存在于腦、神經(jīng)系統(tǒng)、心臟、肺、腎、脾、血液、乳液、精液和精子中，是生物膜的組成部分。蛋黃磷脂具有很高的營養(yǎng)價值和生理活性，在保護細胞膜、抗衰老、降血脂、防治脂肪肝等方面有顯著療效。除生物學(xué)功能和藥物應(yīng)用外，磷脂在食品工業(yè)、輕工、化工等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用，這是由于磷脂還具有多種功能性特征，如乳化、潤濕、改善物料粘度、抗氧化作用、防止淀粉老化等。 磷脂在動植物體內(nèi)廣泛存在，以禽蛋卵黃中含量最為豐富，占干物質(zhì)總量的8-10%，而鴨蛋黃比雞蛋黃還高出O. 5個百分點以上，所以開發(fā)鴨蛋黃卵磷脂更具經(jīng)濟性。國內(nèi)外對磷脂的提純進行了很多研究，主要有溶劑萃取法、超臨界流體萃取法、吸附法、酶催化精制法及膜分離等方法，其中前兩種方法主要用于粗提，得到PC含量低于70%的粗磷脂，精制純化得到PC含量高于70%的產(chǎn)品主要依靠后三種方法。溶劑萃取法是傳統(tǒng)的PC制備方法。單一溶劑以乙醇提取效果最好，PC提取率與含量分別為71. 6%和51. 4%?；旌先軇┨崛∫砸译?甲醇效果最好，PC的提取率和含量分別為67. 8%和72. 8%。張維農(nóng)等用適量95%乙醇浸提脫水脫油后的大豆油腳，經(jīng)真空濃縮后用乙醚溶解，離心分離去除固體雜質(zhì)，然后加入丙酮沉淀，得到PC含量為65. 8%的大豆粗磷脂產(chǎn)品。Hatta等用ZnCl2乙醇液純化粗磷脂，可得高達99. 6%的磷脂。無機鹽復(fù)合沉淀法利用無機鹽對磷脂分子的選擇性，雖然可以大大提高PC含量，但會在操作中引入金屬離子(如Zn2+、Cd2+)，影響產(chǎn)品質(zhì)量，加重污染。目前利用有機溶劑浸取磷脂的大多數(shù)研究集中在大豆油腳或濃縮磷脂上，對蛋黃磷脂涉及較少。賴炳森等用超臨界C02萃取法去除蛋黃粉中甘油三酯和膽固醇，再用乙醇萃取磷月旨，得到磷脂總含量為95%的產(chǎn)品。Heidlas等以體積分數(shù)為70%的丙烷為夾帶劑，得到蛋黃磷脂總量為85%的萃余物。Lucas Mayer公司公布了超臨界CO2生產(chǎn)去油級卵磷脂的專利技術(shù)，該專利技術(shù)不僅可以采用連續(xù)式或半連續(xù)式工藝操作，而且混合器操作條件溫和，可以大大縮短萃取時間，萃取劑消耗低，能耗大大降低，生產(chǎn)成本也大為降低。超臨界流體萃取提純磷脂是一種與環(huán)境友好的方法，但是設(shè)備費用比較昂貴，且只能去除大豆或蛋黃原料中大部分的中性油脂及膽固醇，溶油能力較強而溶解磷脂能力較弱，只適合制備粗磷脂產(chǎn)品。吸附法一般選擇的吸附劑主要有硅膠，氧化鋁和離子交換樹脂，洗脫液常選用低級醇或氯仿等溶劑。Zhang等以大豆油腳為原料，采用溶劑萃取法和柱色譜法相結(jié)合的工藝，同時制備高純PC和PE，獲得含量為91. 9%的PC和少量含量為74. 2%的PE產(chǎn)品。Gunther等用低沸點石油醚Cl-4醇水(1:1:0. 175,v/v/v)的混合溶劑浸取蛋黃粉得到蛋黃磷脂，進樣到硅膠柱，用混合溶劑洗脫，洗脫液分為三部分收集，中間部分PC含量達94%。柱色譜設(shè)備簡單，生產(chǎn)成本低，是目前唯一能夠用于大規(guī)模生產(chǎn)高純磷脂的方法，但大部分研究停留在分析級制備上，制備過程洗脫液回收困難，易造成環(huán)境污染。Lekh等人采用酶法提高磷脂中PC的含量，所用酶來源于卷心菜中的磷脂酶，其研究結(jié)果將PC80%的大豆磷脂和75%的蛋黃磷脂分別提高至95%和100%。但酶法提純會導(dǎo)致成本增加，酶來源有限，不適合放大生產(chǎn)。Gupta等用正己烷-異丙醇混合溶劑溶解的大豆粗磷脂溶液通過聚丙烯半透膜，收集流過膜的溶液，蒸發(fā)濃縮，可使PC濃度由原始25%提高到51%，雜質(zhì)大大減少。膜分離發(fā)具有能耗低、裝置簡單、操作容易、不產(chǎn)生新的污染等優(yōu)點，分離過程一般在常溫下進行，特別適合分離天然物質(zhì)，但膜不易再生，重復(fù)性差，成本昂貴，工業(yè)上難以應(yīng)用。在此基礎(chǔ)上，開發(fā)出一種 工藝簡單，成本低，設(shè)備要求低，易于工業(yè)化生產(chǎn)的高純度磷脂提取工藝十分必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足提供一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法。具體工藝步驟如下
1、鴨蛋經(jīng)過清洗、消毒、打蛋、分離出蛋黃，蛋黃經(jīng)過攪拌成蛋黃液，添加體積為蛋黃液體積3-5倍的無水食用酒精，在20-40°C下攪拌提取IOmin-1小時，通過過濾分離出提取液，留下的蛋黃固體再重復(fù)提取兩次，去除蛋黃固體合并3次提取液，40°C減壓蒸餾去除乙醇，濃縮成膠狀物；
2、用體積為上述膠狀物1-10倍的短鏈烷烴或短鏈醇或鹵代烷烴溶劑溶解步驟I中的膠狀物，過濾去除不溶物，上清液置于-20 - (TC冰浴中保溫；
所述短鏈烷烴可以是正己烷、石油醚、正戊烷；
所述鹵代烷可以是烴氯仿、二氯甲烷；
所述短鏈醇可以是正丁醇、乙醇、甲醇；
3、接著緩慢倒入體積為上清液1-5倍的-30- O:c冷丙酮溶液，攪拌混勻，然后磷脂沉淀析出，攪拌停止，倒出上清液；
4、對步驟3中的磷脂沉淀用1-5倍體積的-30-0f冷丙酮洗滌5次，每次溶劑經(jīng)過傾
倒去除，通過低溫真空烘干或氮吹法去除殘留溶劑，得到純度> 90%的高純度磷脂。本發(fā)明具有以下優(yōu)點
1、工藝簡單，操作方便，適合大規(guī)模工業(yè)化制備；
2、使用溶劑回收方便，成本較低且環(huán)保；
3、提取流程短，收率高，產(chǎn)品純度高(純度>90%以上);
4、溶劑萃取低溫沉淀法處理量大，設(shè)備簡單，產(chǎn)率高；
表I不同提取方法比較
權(quán)利要求
1.一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法，其特征是 (1)鴨蛋經(jīng)過清洗、消毒、打蛋、分離出蛋黃，蛋黃經(jīng)過攪拌成蛋黃液，添加體積為蛋黃液體積3-5倍的無水食用酒精，在20-40°C下攪拌提取IOmin-1小時，通過過濾分離出提取液，留下的蛋黃固體再重復(fù)提取兩次，去除蛋黃固體合并3次提取液，40°C減壓蒸餾去除乙醇，濃縮成膠狀物； (2)用體積為上述膠狀物1-10倍的短鏈烷烴或短鏈醇或鹵代烷烴溶劑溶解步驟I中的膠狀物，過濾去除不溶物，上清液置于-20 - (TC冰浴中保溫； (3)接著緩慢倒入體積為上清液1-5倍的-30- (TC冷丙酮溶液，攪拌混勻，然后磷脂沉淀析出，攪拌停止，倒出上清液； (4)對步驟(3)中的磷脂沉淀用1-5倍體積的-30-0°C冷丙酮洗滌5次，每次溶劑經(jīng)過傾倒去除，通過低溫真空烘干或氮吹法去除殘留溶劑，得到純度> 90%的高純度磷脂。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法，其特征是 所述短鏈烷烴是正己烷、石油醚或正戊烷；鹵代烷是烴氯仿或二氯甲烷；短鏈醇是正丁醇、乙醇或甲醇。
全文摘要
一種低溫溶劑沉淀法制備高純度蛋黃磷脂的方法，是將蛋黃液用無水食用酒精提取，再用短鏈烷烴或短鏈醇或鹵代烷烴溶劑溶解得到膠狀物，再用冷丙酮溶液溶解，使磷脂沉淀析出，最后用冷丙酮洗滌，烘干，得到產(chǎn)品。該方法提取流程短，收率高，產(chǎn)品純度高(純度≥90%以上)；溶劑萃取低溫沉淀法處理量大，設(shè)備簡單，產(chǎn)率高。
文檔編號C07F9/10GK103012468SQ20131000540
公開日2013年4月3日 申請日期2013年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月8日
發(fā)明者朱建航, 張帆, 范杰平, 肖文婷 申請人:江西昌豐由由生物科技有限公司