一種氧化鋁靜態(tài)吸附除雜質(zhì)及低溫沉淀脫油制備注射用蛋黃卵磷脂的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及分離純化、卵磷脂技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種氧化鋁靜態(tài)吸附除雜質(zhì) 及低溫沉淀脫油制備注射用蛋黃卵磷脂的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 磷脂普遍存在于人體各組織和器官中，特別是存在于腦、神經(jīng)系統(tǒng)、心臟、肺、腎、 脾、血液、乳液中，是生物膜的組成部分。注射用蛋黃卵磷脂具有很高的營養(yǎng)價(jià)值和生理活 性，在保護(hù)細(xì)胞膜、抗衰老、降血脂、防治脂肪肝等方面有顯著療效。除生物學(xué)功能和藥物應(yīng) 用外，磷脂在食品工業(yè)、輕工、化工等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用，這是由于磷脂還具有多種功能 性特征，如乳化、潤濕、改善物料粘度、抗氧化作用等。
[0003] 國內(nèi)外對(duì)磷脂的提純進(jìn)行了很多研究，主要有溶劑萃取法、超臨界流體萃取法、 吸附法、酶催化精制法及膜分離等方法，其中前兩種方法主要用于粗提，得到PC含量低于 70%的粗磷脂，精制純化得到PC含量高于70%的產(chǎn)品主要依靠后三種方法。Lucas Mayer 公司公布了超臨界〇)2生產(chǎn)去油級(jí)卵磷脂的專利技術(shù)，該專利技術(shù)不僅可以采用連續(xù)式或 半連續(xù)式工藝操作，而且混合器操作條件溫和，可以大大縮短萃取時(shí)間，萃取劑消耗低，能 耗大大降低，生產(chǎn)成本也大為降低。超臨界流體萃取提純磷脂是一種與環(huán)境友好的方法，但 是設(shè)備費(fèi)用比較昂貴，且只能去除大豆或蛋黃原料中大部分的中性油脂及膽固醇，溶油能 力較強(qiáng)而溶解磷脂能力較弱，只適合制備粗磷脂產(chǎn)品。溶劑脫油方法中，常用的是用純丙酮 攪拌浸提脫油，但此方法需用大量的丙酮、并多次浸提才可以使甘油三脂、膽固醇、棕櫚酸 符合藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。肖文婷等采用正己烷-丙酮混合溶劑脫油，溶劑用量相對(duì)于純丙酮來 說用量減少，但此方法首先用正己烷溶解待脫油磷脂，在低溫條件下加入冷丙酮分級(jí)沉淀 出卵磷脂，在回收溶劑時(shí)必須將正己烷-丙酮混合溶劑用精餾塔精餾分離，才能回收重復(fù) 使用，精餾塔設(shè)備昂貴且溶劑回收成本高，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了克服以上現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種氧化鋁靜態(tài)吸附除雜質(zhì)及低溫 沉淀脫油制備注射用蛋黃卵磷脂的方法，解決了在卵磷脂精制過程中LPE和PI等雜質(zhì)難以 去除、脫油溶劑用量大、脫油溶劑不易回收再利用等缺點(diǎn)。
[0005] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：此方法采用蛋黃粉或蛋黃顆粒為初始原料，經(jīng)過乙 醇浸提、氧化鋁靜態(tài)吸附，得乙醇浸提物；然后再通過正己烷-丙酮混合溶劑低溫沉淀的方 法去除中性油脂，制備供注射用蛋黃卵磷脂。
[0006] 具體工藝步驟如下：
[0007] 乙醇浸提：向蛋黃粉或蛋黃顆粒中加入7~15倍量（ml/g)的乙醇，在藥液溫度 為25~40°C條件下攪拌浸提50~120min，過濾，總浸提次數(shù)為2~4次，合并浸提液，于 50°C減壓蒸餾、濃縮，靜置至分層完全，去除下層油相。
[0008] 氧化鋁靜態(tài)吸附：向磷脂濃縮液中加入中性氧化鋁，中性氧化鋁加入量為蛋黃 粉或蛋黃顆粒原料的8~10% (g/g)，于25~40°C攪拌吸附1~3h，藥液過0. 45 ym或 0. 22 y m濾膜，濾液50°C減壓濃縮、真空干燥。
[0009] 脫油：向乙醇浸提干燥物中加入28~34倍量（ml/g)的正己烷：丙酮=1:5~ l:8(ml/ml)混合溶劑，攪拌下使藥液升溫至35~45°C，于此溫度下繼續(xù)攪拌50~120min 使沉淀完全溶解，使藥液降溫至-KTC~+KTC，保持此低溫并靜置1. 5~4h，去上清；浸提 次數(shù)為3~5次。最后，所得沉淀于50°C真空干燥，得終產(chǎn)品。
[0010] 所述的浸提所用乙醇的總量優(yōu)選蛋黃粉或蛋黃顆粒原料的9~12倍量（ml/g)，乙 醇浸提的藥液溫度優(yōu)選30~35°C，乙醇浸提次數(shù)優(yōu)選2~3次，每次乙醇攪拌浸提時(shí)間優(yōu) 選 80 ~lOOmin。
[0011]所述的氧化鋁加入量優(yōu)選蛋黃粉或蛋黃顆粒的9 % (g/g)，氧化鋁靜態(tài)吸附的溫 度優(yōu)選30~35°C，氧化鋁靜態(tài)吸附時(shí)的攪拌時(shí)間優(yōu)選1. 5~2. 5h，所用中性氧化鋁的目數(shù) 優(yōu)選80~160目。
[0012] 所用正己烷-丙酮混合溶劑的總體積優(yōu)選乙醇浸提干燥物質(zhì)量的28~30倍量 (ml/g)，正己烷-丙酮混合溶劑低溫沉淀脫油次數(shù)優(yōu)選3~4次，正己烷-丙酮混合溶劑中 正己烷體積：丙酮體積優(yōu)選1:6~1:7 (ml/ml)，升溫?cái)嚢枞芙鈺r(shí)藥液溫度優(yōu)選38~42°C， 每次升溫?cái)嚢枞芙鈺r(shí)的攪拌時(shí)間優(yōu)選60~90min，低溫沉淀時(shí)藥液溫度優(yōu)選-5~+5°C，低 溫沉淀時(shí)的靜置時(shí)間優(yōu)選3~3. 5h。
[0013] 所用乙醇濃度為95~100% (折算成20°C時(shí)所測乙醇度數(shù)）。
[0014] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：
[0015] 1、工藝簡單，操作方便，成本低，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)；
[0016] 2、本方法所用氧化鋁靜態(tài)吸附與其它層析方法相比較，具有易于操作、所用工時(shí) 少、溶劑用量少、能耗低等優(yōu)點(diǎn)；
[0017] 3、與其它文獻(xiàn)報(bào)道的方法相比，本方法所使用的溶劑回收再利用方便，不需再采 購安裝昂貴的精餾塔設(shè)備，投資成本較低且環(huán)保；
[0018] 4、收率高，至少在7%以上，優(yōu)選條件下可達(dá)到9%以上。且磷脂純度高（PC和PE 總含量）在80 %以上，LPE、LPC、PI、甘油三酯、膽固醇、棕櫚酸等雜質(zhì)均符合中國藥典2015 版的要求。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說明。應(yīng)該說明的是，本發(fā)明的實(shí)施例所描述的 制備方法僅是用于說明本發(fā)明，而不是對(duì)本發(fā)明的限制，在本發(fā)明所描述思路下，對(duì)本發(fā)明 制備方法的簡單改進(jìn)都屬于本發(fā)明包含的范圍。
[0020] 實(shí)施例1
[0021] 取600g蛋黃粉置于5000ml錐形瓶中，加入2400ml無水乙醇，于藥液溫度為40°C 時(shí)攪拌浸提2h，過濾布；向?yàn)V餅中再加入1800ml無水乙醇，于藥液溫度為40°C時(shí)攪拌浸提 2h，過濾布，合并2次浸提液，于50°C減壓濃縮，得到濃縮液，靜置至完全分層，去除下相油 相。
[0022]向濃縮液中加入48g 200~300目中性氧化鋁，藥液升溫至25°C攪拌吸附lh，過 0. 45 ym濾膜，濾液于50°C減壓濃縮、真空干燥，即為乙醇浸提干燥物，質(zhì)量為230g。
[0023] 向乙醇浸提干燥物中加入2300ml的正己烷：丙酮=1:5的混合溶劑，攪拌條件 下加熱至35°C溶解，于此溫度繼續(xù)攪拌50min，將藥液置于-KTC冷阱中沉淀4h，去除上清 液；向沉淀中加入2070ml的正己烷：丙酮=1:5的混合溶劑，攪拌條件下加熱至35°C溶 解，于此溫度繼續(xù)攪拌50min，將藥液置于-KTC冷阱中沉淀4h，去除上清液；向沉淀中加入 2070ml的正己烷：丙酮=1:5的混合溶劑，攪拌條件下加熱至35°C溶解，于此溫度繼續(xù)攪 拌50min，將藥液置于-KTC冷阱中沉淀4h，去除上清液。取出沉淀置于真空干燥箱中，于 50°C真空干燥。得樣品質(zhì)量為49. 2g，質(zhì)量總收率為8. 2%。
[0024]檢測結(jié)果中 PC 為 77. 61 %、PE 為 9. 59%、PI 為 1.3%、LPC 為 2. 9%、LPE 為 0.8、 SM為1. 8 ;酸值為12. 1、過氧化值為0. 5、碘值為65、皂化值為199 ;蛋白殘留、甘油三酯、膽 固醇、棕櫚酸均符合中國藥典2015版質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。
[0025] 實(shí)施例2
[0026] 取600g蛋黃粉置于5000ml錐形瓶中，加入3000ml 95%乙醇，于藥液溫度為25°C 時(shí)攪拌浸提50min，過濾布；向?yàn)V餅中再加入2400ml 95 %乙醇，于藥液溫度為25°C時(shí)攪拌 浸提50min，過濾布；向?yàn)V餅中再加入1800ml 95%乙醇，于藥液溫度為25°C時(shí)攪拌浸提 50min，過濾布；向?yàn)V餅中再加入1800ml 95%乙醇，于藥液溫度為25°C時(shí)攪拌浸提50min， 過濾布。合并4次浸提液，于50°C減壓濃縮，得到濃縮液，靜置至完全分層，去除下相油相。
[0027] 向濃縮液中加入60g 200~300目中性氧化鋁，藥液升溫至40°C攪拌吸附3h，過 0. 45 ym濾膜，濾液于50°C減壓濃縮、真空干燥，即為乙醇浸提干燥物，質(zhì)量為249g。
[0028] 向乙醇浸提干燥物中加入2241ml的正己烷：丙酮=1:8的混合溶劑，攪拌條件 下加熱至45°C溶解，于此溫度繼續(xù)攪拌120min，將藥液置于+KTC冷阱中沉淀4h，去除上 清液；向沉淀中加入2241ml的正己烷：丙酮=1:8的混合溶劑，攪拌條件下加熱至45°C溶 解，于此溫度繼續(xù)攪拌120min，將藥液置于+KTC冷阱中沉淀4h，去除上清液；向沉淀中加 入1992ml的正己烷：丙酮=1:8的混合溶劑，攪拌條件下加熱至45°C溶解，于此溫度繼續(xù) 攪拌120min，將藥液置于+KTC冷阱中沉淀4h，去除上清液；向沉淀中加入1992ml的正己 烷：