專(zhuān)利名稱(chēng)：天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥用輔料天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6及其制備方法。這種口服與注射用表面活性劑，是制備乳劑脂質(zhì)體的常用輔料。
在藥物制劑生產(chǎn)中作為注射用的表面活性劑較少。現(xiàn)有的作為注射用表面活性劑，如精制豆磷脂與蛋黃卵磷脂，一般用于脂肪乳劑(O/W型)與脂質(zhì)體的制備。而作為油包水乳劑(W/O型)的乳化劑，可注射用的尚未見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。粗制豆磷脂的方法已在專(zhuān)利CN1047083A中公開(kāi)報(bào)導(dǎo)，它是從大豆磷脂粉中精制提取而得。蛋黃卵磷脂(O/W型)的制備方法也有公開(kāi)報(bào)導(dǎo)，如專(zhuān)利US4，857，236中公開(kāi)了從蛋黃中提取卵磷脂的方法，它采用石油醚、低級(jí)醇和水為混合溶劑，再經(jīng)硅膠柱分離，來(lái)提高蛋黃卵磷脂含量和除掉浴血卵磷脂，制成水包油乳劑的乳化劑。柱分離的主要缺點(diǎn)是容易掛柱，不易洗脫，不適于工業(yè)生產(chǎn)。日本公開(kāi)特許公報(bào)中公開(kāi)的昭62-263192，是以乙醇與正乙烷和水的混合溶劑提取分離蛋黃磷脂，再經(jīng)過(guò)超濾膜處理，提高蛋黃卵磷脂的含量。超過(guò)濾膜要求嚴(yán)格，藥理指標(biāo)不好滿(mǎn)足，不適于大規(guī)模生產(chǎn)。昭62-246525是以市售的混合磷脂再精制的方法，來(lái)提高蛋黃卵磷脂的含量，除掉雜質(zhì)等等。以上專(zhuān)利多是為了提高卵磷脂的含量及除掉雜質(zhì)，提高親水性為目的，是作為水包油乳劑與脂質(zhì)體的藥用輔料。其除掉雜質(zhì)的目的僅為提純蛋黃卵磷脂，而對(duì)于除掉降壓、致敏、致熱等雜質(zhì)未見(jiàn)報(bào)道。但是，在實(shí)際應(yīng)用中往往需要親油性乳化劑，如制備注射用的多層乳劑，動(dòng)脈栓塞給藥的油包水乳劑(W/O)等，均需要親油性表面活性劑，且其藥理安全限度必須達(dá)到要求。迄今為止，還無(wú)此類(lèi)藥用輔料可以工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明的目的是提供一種天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6及其制備方法，該輔料無(wú)毒副作用，有效除掉降壓物、致敏物、致熱物等雜質(zhì)，其制備方法簡(jiǎn)便，易于工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的該蛋黃磷脂-6基本組成重量比為卵磷脂6-7，腦磷脂1.0-0.6，膽固醇0.3-0.7，維生素E1.0-0.6，其親水親油平衡值為6-8。
其制備工藝步驟是取脫脂蛋黃粉用溶劑低級(jí)烷醇浸提，其用量為低級(jí)烷醇∶蛋黃粉＝(3-5)∶1，在40-60℃溫度下，浸提1-2小時(shí)，浸提三次，合并三次浸提液;
在浸提液中于40-60℃下加入吸附劑活性氧化鋁拌勻，其用量為活性氧化鋁∶蛋黃粉＝(0.3-0.8)∶10，吸附1-2小時(shí)后，靜置過(guò)濾。
在濾液中加入藥用活性炭拌勻，其用量為活性炭∶蛋黃粉＝(0.1-0.5)∶10，吸附1-2小時(shí)后，靜置降至室溫抽濾，在真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽干即得天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6。
將抽干得到的蛋黃磷脂-6加入其重量的3-6倍無(wú)水乙醇溶解，于0-4℃下冷藏12-24小時(shí)，濾除沉淀物，收集濾液，真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽干后于滅菌條件下鋁箔包裝抽真空封存，即得精制蛋黃磷脂-6。
由于本發(fā)明采用市售蛋黃粉以低級(jí)烷醇溶劑提取、精制蛋黃磷脂，所以原料來(lái)源易得，方便簡(jiǎn)便，易于工業(yè)化生產(chǎn)。溶劑乙醇等低級(jí)烷醇，減壓下它的沸點(diǎn)低，易于使溶劑清除干凈，其與水互溶性好，能把水除凈，可有效避免帶入有害雜質(zhì)。所用溶劑量以蛋黃粉中磷脂全部提出為宜。用量多浪費(fèi)且增加后處理工作量，用量少提取不完全。提取液中蛋黃磷脂的分離提純方法，不采用現(xiàn)有技術(shù)中的硅膠柱分離法，超濾膜處理法，而是采用適量低級(jí)烷醇溶劑提取后，以吸附劑活性氧化鋁或其它吸附劑活性炭、硅膠、白陶土等除掉降壓物;以藥用活性炭吸附法除掉熱源雜質(zhì);以無(wú)水乙醇沉淀法除致敏物。因此，本發(fā)明分離提純方法制備的蛋黃磷脂-6基本組成為卵磷脂、腦磷脂、膽固醇、維生素E四種，此外還有少量溶血磷脂、磷脂酸等成分，其親水親油值與乳化能力，也因上述組分的含量不同而不同。所得產(chǎn)品蛋黃磷脂-6檢測(cè)結(jié)果表明，其基本成分含量達(dá)到藥理安全限度檢查要求，是一種可作為注射用的親油性表面活性劑。蛋黃磷脂-6不僅可作輔料，而且對(duì)于防止和治療某些神經(jīng)系統(tǒng)、心臟、肺及代謝方面的疾病都有重要作用。
以下結(jié)合實(shí)施方法對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
實(shí)施方法一將市售蛋黃粉采用常規(guī)脫脂方法制取脫脂蛋黃粉，也可直接采用市售脫脂蛋黃粉。
低級(jí)烷醇可選用甲醇或乙醇或丙醇，優(yōu)先選用乙醇，特別是藥用94-95%乙醇為宜。也可將94-95%工業(yè)乙醇精制后使用。以下實(shí)施方法中只以94-95%乙醇為例，不一一列舉其它低級(jí)烷醇。
稱(chēng)取100克脫脂蛋黃粉加入95%乙醇300ml于50℃下拌勻，浸提1小時(shí)，浸提三次。合并三次浸提液。在浸提液中加入吸附活性氧化鋁3.0克，于50℃下拌勻，吸附1小時(shí)后，靜置過(guò)濾。在濾液中加入藥用活性炭2.0克，于50℃下拌勻，吸附1小時(shí)后，靜置降至室溫抽濾，濾液在真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽干得天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6。
將上述抽干得到的蛋黃磷脂-6加入其重量的3倍無(wú)水乙醇，充分溶解于0-4℃下冷藏12小時(shí)，濾除沉淀物，收集濾液。在真空減壓充氮條件下回收乙醇。充分抽干，于滅菌條件下，用鋁箔包裝抽真空封存，即得精制蛋黃磷脂-6。
實(shí)施方法二稱(chēng)取100克脫脂蛋黃粉加入94%乙醇400ml，其余工藝步驟同實(shí)施方法一。
實(shí)施方法三稱(chēng)取100克脫脂蛋黃粉加入95%乙醇500ml于50℃下拌勻，浸提1小時(shí)，浸提三次。合并三次浸提液，在浸提液中加入吸附劑活性氧化鋁8.0克，于55℃下拌勻，吸附1小時(shí)，靜置過(guò)濾，濾液中加入藥和活性炭5.0克，于55℃拌勻，吸附1小時(shí)后，靜置降至室溫抽濾。以下工藝步驟同實(shí)施方法一。
對(duì)所得產(chǎn)品10克蛋黃磷脂-6分析結(jié)果如下其主要成分為卵磷脂(PC)6.5±0.5克腦磷脂(PE)0.8±0.2克膽固醇(Ch)0.5±0.2克維生素E(VE)0.8±0.2克以凱氏定氮法測(cè)得含氮量1.40±0.15%含磷量3.00±0.20%酸值10.19-11.14碘價(jià)65.74-68.67過(guò)氧化值3.78meq/kg丙酮不溶物72.1-76.9%正已烷不溶物0.58-1.18%蛋黃磷脂-6親水親油值測(cè)定應(yīng)用NMR法測(cè)得結(jié)果如下HLB＝18.24R+1.80
平均HLB＝6.59±0.13蛋黃磷脂-6的靜脈注射安全限度試驗(yàn)結(jié)果如下1、熱原檢測(cè)按中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)定測(cè)得結(jié)果如表1以家兔進(jìn)行熱原檢測(cè)室溫18-19℃表1
2、過(guò)敏實(shí)驗(yàn)以豚鼠按表2分組給藥，劑量mL/rat，結(jié)果如表2 3、降壓檢測(cè)3.0%蛋黃磷脂-6
以家貓實(shí)驗(yàn)，先進(jìn)行貓的靈敏度檢測(cè)，合格的貓進(jìn)行降壓實(shí)驗(yàn)，按藥典規(guī)定測(cè)得結(jié)果如表3表3 結(jié)果dT所致反應(yīng)均不大于dS所致的一半，全部合格。
4、溶血試驗(yàn)按常規(guī)體外、體內(nèi)溶血試驗(yàn)取兔血與在兔體內(nèi)注射測(cè)得結(jié)果，3.0%蛋黃磷脂-6無(wú)溶血現(xiàn)象。
5、刺激試驗(yàn)以家兔股四頭肌法、眼結(jié)膜法、耳殼法等三種方法測(cè)得結(jié)果，此天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6無(wú)刺激性。
6、急性毒性試驗(yàn)按常規(guī)方法測(cè)定蛋黃磷脂-6的LD50＞20g/kg，說(shuō)明此天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6毒性很小。
7、一般藥理實(shí)驗(yàn)以家貓作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，測(cè)定心率、血壓、呼吸的變化，注射1.3mL/kg，3.0%蛋黃磷脂-6觀測(cè)5個(gè)時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，如下表4。
3.0%蛋黃磷脂-6對(duì)貓的心率、血壓、呼吸的影響(X±SD，n＝5)表4 測(cè)量結(jié)果，給藥前后連續(xù)觀測(cè)1小時(shí)，對(duì)5個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理貓的心率、血壓、呼吸無(wú)顯著差異。(P＞0.05)。
權(quán)利要求
1.一種藥用輔料天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6，其特征是基本組成重量比為卵磷脂6-7，腦磷脂1.0-0.6，膽固醇0.3-0.7，維生素E1.0-0.6，其親水親油平衡值為6-8。
2.一種制備權(quán)利要求1的蛋黃磷脂-6的方法，其特征是包括以下步驟取脫脂蛋黃粉用溶劑低級(jí)烷醇浸提，其用量為低級(jí)烷醇蛋黃粉＝(3-5)∶1，在40-60℃溫度下，浸提1-2小時(shí)，浸提三次，合并三次浸提液;在浸提液中于40-60℃下加入吸附劑活性氧化鋁拌勻，其用量為活性氧化鋁∶蛋黃粉＝(0.3-0.8)∶10，吸附1-2小時(shí)后，靜置過(guò)濾;在濾液中加入藥用活性炭拌勻，其用量為活性炭∶蛋黃粉＝(0.1-0.5)∶10，吸附1-2小時(shí)后，靜置降至室溫抽濾，在真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽干即得天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是將抽干得到的蛋黃磷脂-6加入其重量的3-6倍無(wú)水乙醇溶解，于0-4℃下冷藏12-24小時(shí)，濾除沉淀物，收集濾液，真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽干后于滅菌條件下鋁箔包裝抽真空封存，即得精制蛋黃磷脂-6。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是所用低級(jí)烷醇為甲醇或乙醇或丙醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是所用低級(jí)烷醇為藥用94-95%乙醇。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥用輔料天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6及其制備方法，其基本組成為卵磷脂6—7，腦磷脂1.0—0.6，膽固醇0.3—0.7，維生素E1.0—0.6，其親水親油平衡值為6—8。其制備工藝步驟是將脫脂蛋黃粉用溶劑低級(jí)烷醇浸提，浸提液用吸附劑活性氧化鋁、藥用活性炭除雜，以無(wú)水乙醇沉淀法進(jìn)行精制，取得精制蛋黃磷脂-6。該制劑無(wú)毒副作用，有效除掉降壓物、致敏物、致熱物等雜質(zhì)，其制備方法簡(jiǎn)便，易于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K47/06GK1107069SQ9411264
公開(kāi)日1995年8月23日 申請(qǐng)日期1994年11月25日 優(yōu)先權(quán)日1994年11月25日
發(fā)明者蘇德森 申請(qǐng)人:沈陽(yáng)藥科大學(xué)