麥冬中的兩個新化合物、制備方法和藥物用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及從麥冬中藥的兩個新化合物及其制備方法，是從麥冬的粗提取中經(jīng)過反復萃取、柱層析、薄層層析的方法所得，化學名稱分別為：化合物1為6β-羥基-3β,5-環(huán)-(25R)-螺甾-1β-亞硫酸；化合物2為1α,11β-雙羥基-杜松烷-5-酮基-11-O-α-L-呋喃糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖。活性實驗證明上述兩個新化合物對人微血管內(nèi)皮細胞管腔形成具有一定的促進作用，可用于制備預防和治療偏頭痛，心肌缺血等疾病的藥物。
【專利說明】麥冬中的兩個新化合物、制備方法和藥物用途
[0001]
【技術領域】
[0002]本發(fā)明涉及中藥化學及醫(yī)藥【技術領域】,具體涉及從麥冬iOphiopogon japonicus(Thund.) Ker-Gawl)中得到的兩個新化合物、制備方法和藥物用途。
【背景技術】
[0003]麥冬通過保護血管內(nèi)皮細胞來完成養(yǎng)陰行血之功效。
[0004]麥冬為臨床滋養(yǎng)陰液的常用之品,是養(yǎng)陰生津的代表藥物之一。麥冬，百合科植物衰冬Ophiogon japonicus (Thumb.) Ker-Gaw1.的干燥塊根。主要含多種糖式:麥門冬阜苷B、D，23，24 二羥基羅斯考皂，麥冬甙元-3-0-a-L-吡喃鼠李糖基(1_2) - β -D-吡喃葡萄糖式，甲基麥冬黃燒酮Α、B,麥冬黃燒酮Α、B, 6-醒基異麥冬黃燒酮Α、B,麥冬式兀,丙三醇以及β_谷留醇、豆留醇。另含揮發(fā)油，從中分得長葉烯、a-廣藿香烯、β-廣藿香烯、香附子烯、愈創(chuàng)奧烯、a-律草烯、樟腦、芳樟醇等成分。麥冬始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味甘、微苦，性微寒，歸肺、胃、心經(jīng)。具有養(yǎng)陰生津、潤肺清心的功效。
[0005]前期研究發(fā)現(xiàn)養(yǎng)陰代表中藥“麥冬”的有效部位群、組分、成分，具有不同程度的保護血管內(nèi)皮細胞的作用，其 中正丁醇部位的藥效作用更為顯著，以標準品麥冬皂苷D為對照進行高效液相分析發(fā)現(xiàn)，其中含有麥冬皂苷D成分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明涉及兩個新化合物的結構及其在制備偏頭痛癥，心肌缺血以及其他心、腦血管相關疾病的藥物中的運用，屬于醫(yī)藥領域。
[0007]本發(fā)明目的在于提供兩個從麥冬中得到的新化合物。
[0008]本發(fā)明的另一目的在于提供提取、分離本發(fā)明新化合物的方法。
[0009]本發(fā)明的另一目的是上述新化合物在制備偏頭痛癥，心肌缺血等疾病的藥物方面的用途。
[0010]本發(fā)明的目的通過下列技術措施實現(xiàn)。
[0011]發(fā)明人從麥冬中分離得到兩個新化合物I和2，其立體結構如附圖1所示。
[0012]新化合物I和2從麥冬中分離得到，其方法包括以下步驟:
(I)取麥冬須根，用溶劑提取，回收提取液，得到稠浸膏。
[0013](2)將稠浸膏經(jīng)過大孔樹脂、正相和反相以及凝膠色譜層析分離，得到目標化合物。
[0014]提取溶劑可以是水、乙醇、甲醇、丙醇、丁醇、丙酮、石油醚、氯仿、乙酸乙酯等溶劑以及任意比例混合的醇水溶劑，優(yōu)選5% —100%的含水甲醇或乙醇。提取方法可以是煎煮、回流、冷浸、滲漉、微波提取或超聲提取，優(yōu)選是回流和超聲提取。
[0015]提取液濃縮后可通過極性或非極性大孔吸附樹脂，用水洗去雜質(zhì)，用含水低于95%的甲醇或乙醇進行洗脫，將含有目標化合物I和2的洗脫液進行濃縮，得到精制液。也可以用正相和反相硅膠，優(yōu)選反相硅膠，用洗脫液洗脫，收集含有目標化合物I和2的濃縮，分別得到精制液。
[0016]濃縮后的精制液分別可在硅膠、氧化鋁等正相吸附材料中進行色譜分離，也可在硅烷鍵合硅膠、含有氰基或氨基的硅烷鍵合硅膠等反相材料中進行色譜分離，收集含有目標化合物的洗脫液，洗脫液重結晶或蒸干溶劑后分別得到新化合物I和2。
[0017]發(fā)明人發(fā)現(xiàn)化合物I和2對人微血管內(nèi)皮細胞管腔形成具有一定的促進作用。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0018]附圖1.化合物I和2的立體結構式 附圖2.化合物I的COSY、HMBC, NOESY譜 附圖3.化合物2的HMBC、NOESY譜
具體實施例
[0019]實施例1.新化合物I (6 β -羥基-3 β，5-環(huán)_(25R)_螺甾-1 β -亞硫酸)的制備。
[0020]干燥麥冬須根粉末4kg，用95%的含水乙醇提取三次，每次10升，合并提取液，提取液過濾，濾液減壓回收溶劑，得稠浸膏200g。稠浸膏用DlOl柱層析進行分離，分別用水、20%和40%含水乙醇進行洗脫，40%含水乙醇洗脫液減壓回收溶劑，得稠浸膏35g。該稠浸膏用正相硅膠柱層析分離、梯度洗脫，洗脫劑為氯仿-甲醇-水，根據(jù)薄層層析情況分成5個部分(fr.A-fr.E)。fr.B(2.6g)進行反復硅膠和凝膠柱層析分離得到化合物6 β -羥基-3 β，5-環(huán)-(25R)-螺留-1 β -亞硫酸，經(jīng)液相檢測其純度達到99%。
[0021 ] 實施例2.新化合物I (6 β -羥基-3 β，5-環(huán)-(25R)-螺甾_1 β -亞硫酸)結構鑒定。
[0022]該化合物為白色無定型粉末，Liebermann-Burchard反應呈陽性提示該化合物是甾體結構。
[0023]IR 顯示有羥基(3496 cm-1), S-0 基團(1210 cm_1),25 (R)螺甾(985，920，900，855 cm-1 (intensity: 92CK900))。
[0024]高分辨質(zhì)譜給出分子式C27H42O7S, M-1:509.2579，根據(jù)分子式計算出該分子的不飽和度為7。
[0025]1H NMR給出2個角甲基，2個甲基，3個連氧次甲基，I個連氧亞甲基，分別為(5ppm): 0.78 (3H, s)，1.62 (3H, s)，1.0 (3H, d, / = 6.8 Hz) ; 0.56 (3H, d, / =5.6 Hz), 5.12 ( 1H, d, J= 6.0), 3.37 (1H, m), 4.48 (1H, dd, /=7.2，14.8), 3.39(1H, m), 3.46 (1H, m)提示該化合物含吲哚和苯乙烯基團。13C NMR譜給出27個碳，其中有4個甲基，I個連氧亞甲基，3個連氧次甲基，I個化學位移為δ 109.0的季碳，該碳可能是螺留中的縮醛碳。上述波譜提示該化合物有25 (R)的螺留骨架，而且其碳譜和化合物sapognin 6β -methoxy-3β , 5-cyclo- (255) -spirostan-1 β -οI (nolinogenin)的碳譜較類似(兩個化合物的碳譜參見表1)，進一步比對發(fā)現(xiàn)除25位碳的立體結構一個為R構型，一個為S構型外，A環(huán)和B環(huán)I位和6位的取代基不同，本化合物分別為亞硫酸基和甲氧基。1H-1H COSY和HMBC譜能夠證實上述推測(參見圖2)。通過NOESY譜(參見圖2)能夠推斷出1-亞硫酸基、3-氫、6-羥基的相對構型是β位，綜上所述該分子結構推斷為6/?-羥基-3/?，5_環(huán)-(257?)-螺留-1盧-亞硫酸。
[0026]該化合物氫譜全歸屬為:IH-NMR (400 MHz, C5D5N): δ 5.12 (1Η, d, J=6.0,H-l), 2.37 (1H, m, Η_2 β )，2.52 (1H, d, J=14.8, H_2 α )，0.98 (1H, m, H_3)，
0.50 (1H, dd, J=4.0, 7.6，H_4 β )，1.31 (1H, d, J=4.0, H-4 a ), 3.37 (1H, m, H_6)，
1.09 (1H, m, H-7 β ), 1.92 (1H, m, H_7 a )，1.42(1? m, H_8)，0.72(1? overlap,H-9), 1.53 (1H, m, H-1l β ), 1.81 (1H, m, H-1l a ), 0.98 (1H, m, Η_12β), 1.54 (1H,m, H-12 a ), 1.09 (1H, m, H—14), 1.50 (1H, m, Η_15β), 1.57(1H, m, H-15 a ),
4.48 (1H, dd, J=7.2, 14.8, H—16), 1.74(1? dd, J=6.4, 14.8, H—17), 0.78 (3H, s,H-18), 1.62 (3H, s, H-19), 1.81 (1H, d, J=6.4, H-20)，1.0(3H, d, J=6.8, H-21),
2.0 (2H, m, H-23), 1.42(2? m, H-24)，2.38 (1H, m, H-25)，3.39 (1H, m, H-26 β )，
3.46 (1H, m, H-26 a )，0.56 (3H, d, J=5.6, H-27)。
[0027]表1.6/β-羥基-3/?，5 -環(huán)-(257?)-螺留-1盧-亞硫酸，Nolinogenin 的 13C化學位移(C5D5N, δ , ppm.0-TMS).__
【權利要求】
1.一種麥冬中具人微血管內(nèi)皮細胞管腔形成促進作用的新化合物1，化學名稱為6β -羥基-3 β，5-環(huán)-(25R)_螺留-1 β -亞硫。
2.一種麥冬中具人微血管內(nèi)皮細胞管腔形成促進作用的新化合物2，化學名稱為1α，11 β -雙羥基-杜松烷-5-酮基-11-0- a -L-呋喃糖基-(1 → 6) - β -D-葡萄糖。
3.—種如權利要求1所述的麥冬中具人微血管內(nèi)皮細胞管腔形成促進作用的新化合物I和新化合物2的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)取麥冬須根，用溶劑提取，回收提取液，得到稠浸膏； (2)將稠浸膏經(jīng)過大孔樹脂、正相和反相以及凝膠色譜層析分離，得到目標化合物。
4.根據(jù)如權利要求3所述的制備方法，其特征在于:提取溶劑可以是水、乙醇、甲醇、丙醇、丁醇、丙酮、石油醚、氯仿、乙酸乙酯等溶劑以及任意比例混合的醇水溶劑。
5.根據(jù)如權利要求3所述的制備方法，其特征在于:用于色譜層析分離的材料可以是大孔樹脂、硅膠、氧化鋁、硅烷鍵合硅膠、含有氰基或氨基的硅烷鍵合硅膠。
6.如權利要求1所述的化合物I在制備預防和治療偏頭痛，心肌缺血等疾病的藥物方面的用途。
7.如權利要求1所述的化合物I在制備預防和治療偏頭痛，心肌缺血等疾病的保健食品方面的用途。
8.如權利要求2所述的化合物2在制備預防和治療偏頭痛，心肌缺血等疾病的藥物方面的用途。
9.如權利要求2所述的化合物2在制備預防和治療偏頭痛，心肌缺血等疾病的保健食品方面的用途。
【文檔編號】C07H15/18GK103848881SQ201210505912
【公開日】2014年6月11日 申請日期:2012年12月3日 優(yōu)先權日:2012年12月3日
【發(fā)明者】鄭向煒, 沈嵐, 馮怡 申請人:上海張江中藥現(xiàn)代制劑技術工程研究中心