一種由葫蘆素b水解制備葫蘆素d的方法
【專利摘要】本發(fā)明是一種由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法，該方法簡(jiǎn)便易行，只需（1）良溶劑將葫蘆素B溶解，得有機(jī)相；（2）配置pH值大于9的堿液和/或緩沖液，得水相；（3）將水相加入到有機(jī)相中，攪拌均勻，得具有有機(jī)相水相比例的反應(yīng)液；（4）將反應(yīng)液在大于20℃溫度下反應(yīng)，之后，冰浴停止反應(yīng)；（5）向停止反應(yīng)的反應(yīng)液加入等體積的乙酸乙酯萃取水解產(chǎn)物，40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去乙酸乙酯，即得所需水解產(chǎn)物。本發(fā)明解決了葫蘆素D來(lái)源單一的問(wèn)題。
【專利說(shuō)明】一種由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說(shuō)是一種由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法。【背景技術(shù)】
[0002]葫蘆素類(Cucurbitacins)成分是從植物中提取的一類高度氧化的四環(huán)三職類化合物，至今已發(fā)現(xiàn)40多種。我國(guó)古代就采用中藥甜瓜蒂，治療黃疸病，又能催吐、祛痰，用于痰涎宿食，神農(nóng)本草曾記載瓜蒂能消除水濕，消滅蠱毒，使涌吐、瀉下，用來(lái)治療嚴(yán)重的水邪，四肢浮腫，咳嗽氣喘，以及誤食毒物，停于胃脘尚未吸收者，由此可見(jiàn)葫蘆素類藥物在我國(guó)、治病救人的歷史之悠久。該類成分多數(shù)存在于葫蘆科植物中，部分存在了其它植物中。目前，我國(guó)批準(zhǔn)生產(chǎn)的葫蘆素又叫葫蘆素BE，為中藥甜瓜蒂(別名:苦丁香)提取物，主要含葫蘆素B、E等成分，現(xiàn)有的提取物中葫蘆素B含量為60%以上，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于我國(guó)部頒標(biāo)準(zhǔn)中。具有抗腫瘤、抗化學(xué)致癌、保肝、提高免疫力等多種生物活性。
[0003]葫蘆素D(cucurbitacin D, CuD),葫蘆素族化合物之一,其藥理作用廣泛,除具有與其它葫蘆素族化合物類似的藥理作用(如:細(xì)胞毒、對(duì)人結(jié)腸(HCT-116)、乳腺(MCF-7)、肺(NC1-H460)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS) (SF-268)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用、抗炎作用等[1，2])外，還能誘導(dǎo)激活胎兒血紅蛋白基因而作為治療鐮刀型細(xì)胞貧血的候選藥物，也有報(bào)道CuD對(duì)地中海貧血治療也有一定效果[3-5]，近年來(lái)其被關(guān)注度越來(lái)越高。
[0004]我國(guó)從甜瓜蒂中提取的葫蘆素，通常為葫蘆素B、E，未見(jiàn)從甜瓜蒂中提取CuD的報(bào)道。而CuD的來(lái)源，除 了直接從葫蘆科植物中提取得到以外，還可以由CuB水解法制得，由它們的結(jié)構(gòu)式可以看出，CuD是CuB酯鍵斷裂后所得產(chǎn)物(見(jiàn)附圖1)，由CuB水解后的HPLC色譜圖(見(jiàn)附圖2)中的新色譜峰保留時(shí)間可知，水解產(chǎn)物的極性大于CuB。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對(duì)葫蘆素D存在的來(lái)源單一，純度低等不足，本發(fā)明的目的是提供一種由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法。
[0006]為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，發(fā)明人提供如下技術(shù)方案:
一種由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法，其特征在于:
1、良溶劑將葫蘆素B溶解，得有機(jī)相，
2、配置pH值大于9的堿液和(或)緩沖液，得水相，
3、將水相加入到有機(jī)相中，攪拌均勻，得具有一定有機(jī)相水相比例的反應(yīng)液，
4、將反應(yīng)液于一定溫度下反應(yīng)適宜的時(shí)間，之后，冰浴停止反應(yīng)，
5、向停止反應(yīng)的反應(yīng)液加入等體積的乙酸乙酯萃取水解產(chǎn)物，40°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去乙酸乙酯，得所需水解廣物。
[0007]本發(fā)明所述用于溶解葫蘆素B的良溶劑，可以是乙醇、乙腈、甲醇、氯仿、二氯甲烷、甲苯、DMF、二甲基亞砜等中的一種或幾種的混合物。作為優(yōu)選，定為乙醇、乙腈、甲醇中的一種或幾種的混合物。[0008]本發(fā)明所述的pH值大于9的水相，可以是pH值大于9的NaOH溶液、KOH溶液、Ba (OH)2溶液、Ca (OH)2溶液、磷酸鹽緩沖液等中的一種或幾種的混合物。作為優(yōu)選，定為NaOH溶液、KOH溶液、磷酸鹽緩沖液中的一種或幾種的混合物。
[0009]發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)水相pH值大于14時(shí)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，葫蘆素D會(huì)被進(jìn)一步堿化成其他物質(zhì)，故本發(fā)明所述水相的PH值應(yīng)為9~14之間。
[0010]本發(fā)明所述的有機(jī)相與水相體積比，可以是1:99、9:1。作為優(yōu)選，定為30:70^70:30ο 作為更優(yōu)選，定為 40:60^60:40ο
[0011]本發(fā)明所述的反應(yīng)溫度，大于20°C。作為優(yōu)選，定為60°C。
[0012]本發(fā)明所述的反應(yīng)時(shí)間，大于10 min ;作為優(yōu)選，定為90 min。
[0013]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:
首次通過(guò)葫蘆素B水解法制備得到了葫蘆素D，該方法簡(jiǎn)單易行，反應(yīng)易于控制而且產(chǎn)率高。
[0014]彌補(bǔ)了現(xiàn)有葫蘆素D來(lái)源單一，工藝復(fù)雜的不足。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0015]圖1是CuB的水解機(jī)理；
圖2是水解后CuB的色譜圖；
圖中1-水解產(chǎn)物(CuD) 2-CuB。
【具體實(shí)施方式】
[0016]為了更清除的理解本發(fā)明，以下結(jié)合發(fā)明人給出的依本發(fā)明的技術(shù)方案所完成的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。
[0017]以下是本發(fā)明人給出的實(shí)施例，本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落入本發(fā)明保護(hù)范圍。
[0018]實(shí)施例1:葫蘆素B水解法制備葫蘆素D 反應(yīng)條件:
【權(quán)利要求】
1.一種由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法，其特征在于: (O良溶劑將葫蘆素B溶解，得有機(jī)相； (2)配置pH值大于9的堿液和/或緩沖液，得水相； (3)將水相加入到有機(jī)相中，攪拌均勻，得具有有機(jī)相水相比例的反應(yīng)液； (4)將反應(yīng)液在大于20°C溫度下反應(yīng)，之后，冰浴停止反應(yīng)； (5)向停止反應(yīng)的反應(yīng)液加入等體積的乙酸乙酯萃取水解產(chǎn)物，40V旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去乙酸乙酯，得所需水解產(chǎn)物。
2.如權(quán)利要求1所述的由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法，其特征在于:用于溶解葫蘆素B的良溶劑，是乙醇、乙腈、甲醇、氯仿、二氯甲烷、甲苯、DMF、二甲基亞砜中的一種或幾種的混合物。
3.如權(quán)利要求1所述的由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法，其特征在于:pH值大于9的水相，可以是pH值大于9的NaOH溶液、KOH溶液、Ba (OH)2溶液、Ca (OH)2溶液、磷酸鹽緩沖液中的一種或幾種的混合物。
4.如權(quán)利要求1所述的由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法，其特征在于:有機(jī)相與水相體積比，是1:99~99:1。
5.如權(quán)利要求1 所述的由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法其特征在于:反應(yīng)液的反應(yīng)溫度定為60°C。
6.如權(quán)利要求1所述的由葫蘆素B水解制備葫蘆素D的方法，其特征在于:反應(yīng)液的反應(yīng)時(shí)間，大于10 min。
【文檔編號(hào)】C07J9/00GK103804451SQ201210456038
【公開(kāi)日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2012年11月14日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月14日
【發(fā)明者】鄧意輝, 程曉波, 王春玲, 佘振南 申請(qǐng)人:沈陽(yáng)藥科大學(xué)