專利名稱：生產(chǎn)雞白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑及生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于獸藥生產(chǎn)領(lǐng)域。尤其涉及一種可顯著提高雞白細(xì)胞干擾素產(chǎn)量的生產(chǎn)雞白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑及生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
干擾素為一類細(xì)胞因子,具有抗病毒和免疫調(diào)節(jié)作用，已廣泛應(yīng)用于抗病毒治療和提高機(jī)體免疫力。人或動(dòng)物的白細(xì)胞在病毒或誘導(dǎo)劑的作用下，可產(chǎn)生干擾素，但所產(chǎn)生干擾素的種類或產(chǎn)量隨不同病毒或誘導(dǎo)劑而發(fā)生變化。例如用PHA誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞，則主要產(chǎn)生Y干擾素(IFN — Y)，而以短小棒狀桿菌誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞，則主要產(chǎn)生α-干擾素。
F系新城疫病毒誘導(dǎo)干擾素的能力較強(qiáng)，所產(chǎn)生的干擾素99%為α-干擾素(IFN — α)，但是其產(chǎn)量并不理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述技術(shù)問(wèn)題，提供一種可顯著提高雞白細(xì)胞干擾素產(chǎn)量的生產(chǎn)雞白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑及生產(chǎn)方法。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種生產(chǎn)雞白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑，其特征在于由豬白細(xì)胞干擾素、左旋咪唑、有機(jī)鍺及去離子水構(gòu)成，各組分的含量為豬白細(xì)胞干擾素10 100IU/ml、左旋咪唑I 2mg/ml及有機(jī)鍺I 2mg/ml。一種上述生產(chǎn)雞白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑的生產(chǎn)方法，其特征在于按如下步驟進(jìn)行
a.用5 IOml去離子水溶解100^200mg左旋咪唑，作為A液；
b.用5 IOml去離子水溶解100^200 mg有機(jī)鍺，作為B液；
c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細(xì)胞干擾素300(T30000IU，作為C液；
d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液；
e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過(guò)濾，即為生產(chǎn)白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑。本發(fā)明對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理，可顯著增加干擾素產(chǎn)量，較單獨(dú)使用新城疫病毒誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)量增加10 100倍，-20°c冷凍保存，可保存12個(gè)月。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :
按如下步驟進(jìn)行
a.用5ml去離子水溶解IOOmg左旋咪唑，作為A液；
b.用5ml去離子水溶解IOOmg有機(jī)鍺(Ge-123)(羧乙基鍺倍半氧化物)，作為B液；
c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細(xì)胞干擾素3000IU，作為C液；
d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液；
e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過(guò)濾，即為生產(chǎn)白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑，各組分的含量為豬白細(xì)胞干擾素10IU/ml、左旋咪唑lmg/ml及有機(jī)鍺lmg/ml，_20°C冷凍保存。所用原料來(lái)源如下
左旋咪唑購(gòu)自山東濟(jì)南百納獸藥有限公司；
有機(jī)鍺(Ge-123)(羧乙基鍺倍半氧化物)購(gòu)自阿拉丁試劑(上海)有限公司；
凍干豬白細(xì)胞干擾素購(gòu)自四川世紅生物技術(shù)有限公司。實(shí)驗(yàn)
先取Iml本發(fā)明實(shí)施例1，加入100mlRPMI-1640完全培養(yǎng)基中(含IO6 IO7雞白細(xì)胞中/ml)，37°C搖動(dòng)培養(yǎng)12小時(shí)；再按100 200血凝單位/ml加入F系新城疫病毒，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)；收獲培養(yǎng)液，4000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清，即為雞白細(xì)胞干擾素粗 制液。用細(xì)胞病變抑制方法檢測(cè)，其中含有IO4a-干擾素(IFN — α)，比單獨(dú)使用新城疫病毒誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)量增加10倍。實(shí)施例2
按如下步驟進(jìn)行
a.用8ml去離子水溶解150mg左旋咪唑，作為A液；
b.用8ml去離子水溶解150mg有機(jī)鍺，作為B液；
c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細(xì)胞干擾素12000IU，作為C液；
d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液；
e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過(guò)濾，即為生產(chǎn)白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑，各組分的含量為豬白細(xì)胞干擾素40U/ml、左旋咪唑I. 5mg/ml及有機(jī)鍺I. 5mg/ml，_20°C冷凍保存。
原料來(lái)源同實(shí)施例I。實(shí)驗(yàn)
先取Iml本發(fā)明實(shí)施例2，加入100mlRPMI-1640完全培養(yǎng)基中(含IO6 IO7雞白細(xì)胞中/ml)，37°C搖動(dòng)培養(yǎng)12小時(shí)；再按100 200血凝單位/ml加入F系新城疫病毒，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)；收獲培養(yǎng)液，4000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清，即為雞白細(xì)胞干擾素粗制液。用細(xì)胞病變抑制方法檢測(cè)，其中含有8*104α-干擾素(IFN — α )，比單獨(dú)使用新城疫病毒誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)量增加80倍。實(shí)施例3:
按如下步驟進(jìn)行
a.用IOml去離子水溶解200mg左旋咪唑，作為A液；
b.用IOml去離子水溶解200mg有機(jī)鍺，作為B液；
c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細(xì)胞干擾素30000IU，作為C液；
d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液；
e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過(guò)濾，即為生產(chǎn)白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑，各組分的含量為豬白細(xì)胞干擾素100U/ml、左旋咪唑2mg/ml及有機(jī)鍺2mg/ml，_20°C冷凍保存。原料來(lái)源同實(shí)施例I。實(shí)驗(yàn)
先取Iml本發(fā)明實(shí)施例3，加入100mlRPMI-1640完全培養(yǎng)基中(含IO6 IO7雞白細(xì)胞中/ml)，37°C搖動(dòng)培養(yǎng)12小時(shí)；再按100 200血凝單位/ml加入F系新城疫病毒，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)；收獲培養(yǎng)液，4000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清，即為雞白細(xì)胞干擾素粗制液。用細(xì)胞病變抑制方法檢測(cè)，其中含有IO5a-干擾素(IFN — α)，比單獨(dú)使用新城疫 病毒誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)量增加100倍。
權(quán)利要求
1.一種生產(chǎn)雞白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑，其特征在于由豬白細(xì)胞干擾素、左旋咪唑、有機(jī)鍺及去離子水構(gòu)成，各組分的含量為豬白細(xì)胞干擾素10 100IU/ml、左旋咪唑I 2mg/ml及有機(jī)鍺I 2mg/ml。
2.一種如權(quán)利要求I所述生產(chǎn)雞白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑的生產(chǎn)方法，其特征在于按如下步驟進(jìn)行 a.用5 IOml去離子水溶解100^200mg左旋咪唑，作為A液； b.用5 IOml去離子水溶解100^200 mg有機(jī)鍺，作為B液； c.用3ml去離子水溶解凍干豬白細(xì)胞干擾素300(T30000IU，作為C液； d.將A液與B液混合，加入ImlC液，作為D液； e.將D液定容至100ml，用除菌濾器過(guò)濾，即為生產(chǎn)白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種生產(chǎn)雞白細(xì)胞干擾素用預(yù)處理劑，各組分的含量為豬白細(xì)胞干擾素10～100IU/ml、左旋咪唑1～2mg/ml及有機(jī)鍺1～2mg/ml，生產(chǎn)方法是按如下步驟進(jìn)行用5～10ml去離子水溶解100~200mg左旋咪唑，作為A液；用5～10ml去離子水溶解100~200mg有機(jī)鍺，作為B液；用3ml去離子水溶解凍干豬白細(xì)胞干擾素3000~30000IU，作為C液；將A液與B液混合，加入1mlC液，作為D液；將D液定容至100ml，用除菌濾器過(guò)濾。本發(fā)明對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理，可顯著增加干擾素產(chǎn)量，較單獨(dú)使用新城疫病毒誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)量增加10～100倍，-20℃冷凍保存，可保存12個(gè)月。
文檔編號(hào)C07K14/555GK102838670SQ201210360228
公開(kāi)日2012年12月26日 申請(qǐng)日期2012年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月25日
發(fā)明者江國(guó)托, 常維山 申請(qǐng)人:大連三儀動(dòng)物藥品有限公司