專利名稱：從甘草中提取純化異甘草素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于異甘草素的提取純化方法，特別涉及一種從甘草中提取純化異甘草素的方法。甘草為豆科植物甘草屬烏拉爾甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)、脹果甘草 (G. inflate Batal.)、光果甘草(G. glabra L.)的干燥根及根莖H J，具有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥之功效。甘草中黃酮類成分具有多種生物活性，除了消炎、抗菌、抗變態(tài)等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、防腫瘤等也有明顯的作用?，F(xiàn)代藥理研究表明甘草苷、異甘草苷、甘草素、異甘草素為甘草黃酮類的主要有效成分。異甘草素(Isoliquiritigenin)，是甘草素的同分異構(gòu)體，黃色結(jié)晶，分子式 C15H1204，分子量256. 25，可溶于甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇等有機(jī)溶劑，熔點(diǎn)206°C 210°C?，F(xiàn)代研究表明，異甘草素有抗氧化、抗?jié)儭⒅委熞钟粜跃癫?、艾滋病、輔助治療糖尿病等功效。
連續(xù)逆流提取是指在提取的過(guò)程中，物料和溶劑同時(shí)連續(xù)運(yùn)動(dòng)，但運(yùn)動(dòng)方向相反，通過(guò)機(jī)械傳輸，連續(xù)定量加料，使物料和溶媒充分接觸，設(shè)備內(nèi)溶劑不斷更新，最終連續(xù)出渣。同時(shí)在設(shè)備內(nèi)部不斷更新溶劑，溶劑在流動(dòng)過(guò)程中不斷獲得物料的有效成份，濃度不斷提高。在連續(xù)進(jìn)液和連續(xù)出液的過(guò)程中，溶劑中存在連續(xù)的濃度梯度，從而使提取液可以獲得比較快的浸出速度，也可以獲得比較高的提取液濃度，同時(shí)節(jié)省了提取溶劑。使用聚酰胺樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合，使得異甘草素分離純化效果更好。目前，異甘草素提取已經(jīng)有了 1個(gè)專利，中國(guó)專利CN1013^115從甘草中提取異甘草素的方法，是先用酸水解，然后堿解，醇提，而其最后純化分離也是使用單一樹脂，而且沒(méi)有重結(jié)晶過(guò)程，提取過(guò)程中消耗有機(jī)溶劑多，效率差，含量低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是充分利用自然資源，提供一種從甘草中提取純化異甘草素的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 10 30的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提
背景技術(shù)：
異甘草素結(jié)構(gòu)式取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，用5-8倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為20% 40%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味，在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。所述混合樹脂為聚酰胺樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合。所述料液比為1 10 30。所述混合樹脂為聚酰胺樹脂、硅膠兩種樹脂的混合，混合質(zhì)量比為5:5。所述聚酰胺樹脂型號(hào)為30-60目；60-100目。所述大孔樹脂，型號(hào)為HPD-100；DlOlB ；HP-30。
具體實(shí)施例方式下面通過(guò)具體的實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明從甘草中提取純化異甘草素的方法，下面的描述僅是為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實(shí)施例1
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :10的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質(zhì)量比為55的聚酰胺樹脂30-60 目與大孔樹脂HPD-100組成，用5倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為20% 乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為 80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味，在 60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為96. 3%。實(shí)施例2
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :20的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質(zhì)量比為5 5的聚酰胺樹脂 60-100目與大孔樹脂DlOlB組成，用6倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為 30%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味， 在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為97. 5%。實(shí)施例3
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :30的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質(zhì)量比為55的聚酰胺樹脂 60-100目與大孔樹脂HP-30組成，用7倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為 40%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味， 在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為98. 1。實(shí)施例4
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :25的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質(zhì)量比為55的聚酰胺樹脂30-60 目與大孔樹脂D101B組成，用8倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為40%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為 80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味，在 60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為98. 6%。實(shí)施例5
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :10的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質(zhì)量比為55的聚酰胺樹脂 60-100目與大孔樹脂HPD-100組成，用8倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為35%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C 條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%， 加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味，在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為99. 1%。實(shí)施例6
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :30的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質(zhì)量比為55的聚酰胺樹脂30-60 目與大孔樹脂HP-30組成，用7倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為25%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為 80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味，在 60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為96. 8%。實(shí)施例7
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :15的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質(zhì)量比為55的聚酰胺樹脂 60-100目與大孔樹脂HP-30組成，用5倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為 30%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味， 在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為97. 7%。
實(shí)施例8
從甘草中提取純化異甘草素的方法，包括如下步驟
(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :20的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；
(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，混合樹脂由質(zhì)量比為55的聚酰胺樹脂30-60 目與大孔樹脂DlOlB組成，用7倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為20%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為 80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味，在 60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。異甘草素含量為97. 6%。
權(quán)利要求
1.從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征是包括如下步驟(1)將甘草粉碎成60目粉末，用體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 10 30的條件下，提取60分鐘，過(guò)濾，得甘草提取液；(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加入8倍體積的濃度為lmol/L的鹽酸溶液， 在90°C，酸解2個(gè)小時(shí)后，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液PH值至12，在90°C，堿解2個(gè)小時(shí)，然后用lmol/L鹽酸溶液調(diào)PH值為7，得異甘草素粗提液；(3)將異甘草素粗提液，上混合樹脂柱，用5-8倍柱體積的去離子水、5倍柱體積的體積百分濃度為20% 40%乙醇水溶液、4倍柱體積的體積百分濃度為80%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集體積百分濃度為80%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，吸去上清液，結(jié)晶加入4倍體積的無(wú)水乙醇溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時(shí)，過(guò)濾，結(jié)晶以去離子水洗至無(wú)醇味，在60°C條件下減壓干燥，即得到純化后的異甘草素。
2.所述混合樹脂為聚酰胺樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征在于所述料液比為 1 10 30。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征在于所述混合樹脂為聚酰胺樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合，混合質(zhì)量比為5: 5。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征在于所述聚酰胺樹脂型號(hào)為=30-60目；60-100目。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述從甘草中提取純化異甘草素的方法，其特征在于所述大孔樹脂，型號(hào)為HPD-100 ；DlOlB ；HP—30。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從甘草中提取純化異甘草素的方法，該方法包括如下步驟(1)將甘草粉碎，用乙醇水溶液采用連續(xù)逆流提取，過(guò)濾，得甘草提取液；(2)揮盡乙醇，加入1mol/L鹽酸溶液酸解2個(gè)小時(shí)，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液pH值至12，堿解2個(gè)小時(shí)后，用1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH值為7，得異甘草素粗提液；(3)將異甘草素粗提液上混合樹脂柱，并進(jìn)行洗脫分離純化重結(jié)晶。本發(fā)明的方法提取的異甘草素為天然提取物，純度高，成本低，生產(chǎn)效率高，質(zhì)量穩(wěn)定可控。
文檔編號(hào)C07C45/79GK102285875SQ20111028783
公開日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年9月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月26日
發(fā)明者吳巍 申請(qǐng)人:天津市尖峰天然產(chǎn)物研究開發(fā)有限公司