專利名稱：從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種從天然植物中提取花色苷的方法，尤其涉及從黑果枸杞果實中提 取花色苷的方法。
背景技術：
眾所周知，制作食品和飲料品等往往需要添加色素，從而取得賞心悅目的良好效 果，但是，現(xiàn)有技術中大量使用的是化學合成色素，長期使用會對人體產(chǎn)生不良影響，危害 人體健康。因此，尋找和制備天然色素引起了人們的普遍關注?；ㄉ帐侨藗冏钍煜さ乃?溶性天然色素，在自然界中廣泛分布，構(gòu)成了植物王國中絕大多數(shù)品種的藍色、紅色、紫色 和黃色等?，F(xiàn)代營養(yǎng)學研究發(fā)現(xiàn)，天然花色苷類物質(zhì)有較強的防止活性氧危害和抗氧化作 用，可消除機體代謝過程中產(chǎn)生的過多自由基，具有延緩衰老、預防各種疾病等功能，在食 品、化妝品、醫(yī)藥領域有著巨大的應用潛力。現(xiàn)有關于花色苷的制備方法主要是根據(jù)原料中花色苷的分布部位選擇合適的試 劑進行萃取。由于花色苷在高溫下不穩(wěn)定，所以其提取中的核心技術是花色苷的穩(wěn)定性、溶 劑選擇、純化方法以及干燥方式等問題，目的在于最大限度地保持花色苷的穩(wěn)定性，提高花 色苷的得率和純度。黑果枸杞為茄科枸杞屬多年生灌木植物，具棘刺，味甘、性平，清心熱，用于治療心 熱病、心臟病、月經(jīng)不調(diào)、停經(jīng)等病癥。黑果枸杞藏藥稱“旁瑪”，因果實成熟后呈紫黑色，由 此得名(見《四部醫(yī)典》、《晶珠本草》等藏醫(yī)藥經(jīng)典著作)，經(jīng)測定色素為花色苷，甙元為紅 色的花色苷元，顏色鮮艷，呈紫紅色。據(jù)研究黑果枸杞的果實色素含量高達387. 9/100g (鮮 果)，在不同PH值、不同加熱時間、不同溫度條件下，色素著色力強，穩(wěn)定性好，而且加工工 藝簡單。對黑果枸杞果實中所含的蛋白氨基酸、游離氨基酸、無機元素、維生素C、B1, B2以 及果肉中的總糖、總酸的分析測定表明黑果枸杞果實中的總糖含量為6.9%，總酸含量為 0. 735% ；含有人體必需的18種氨基酸，其中以天門冬氨基酸、谷氨酸.丙氨酸和脯氨酸的 含量較高，而且多數(shù)呈游離狀態(tài)，其中游離氨基酸約占氨基酸總量的50%，有利于人體直接 吸收。同時果實所含的微量元素也很豐富，除常量元素Na、K、Mg、Ca、Fe之外，還含有一定 量的微量元素Mn、Sr、k、Zn、Cr、CU等。由于微量元素對多種酶的活性和核酸、蛋白質(zhì)的合 成，機體免疫和細胞增殖等具有直接或間接的作用，可用于防癌治癌。綜上所述黑果枸杞花 色苷類色素具有較高的開發(fā)利用價值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種雜質(zhì)含量低、花色苷含量高的從黑果枸杞 果實中提取花色苷的方法。為解決上述問題，本發(fā)明所述的一種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，包括 以下步驟(1)將黑果枸杞果實原料用其質(zhì)量的8 12倍、體積濃度為10% 100%的乙醇溶液浸提取1 30小時后，過濾，得到浸提液；所述乙醇溶液是指用質(zhì)量濃度為2%的酸溶 液調(diào)節(jié)至pH值為1 4的溶液；(2)將所述步驟(1)所得的浸提液在真空度為0. 07Mpa、溫度為30 50°C進行真 空濃縮后，得到固形物濃度> 40%的濃縮液；(3)將所述步驟(2)所得的濃縮液采用大孔樹脂吸附后，用400 800ml、質(zhì)量濃 度為60% 80%的乙醇水溶液洗脫，當洗脫液顏色變深時開始收集，則得到純化的黑果枸 杞果實花色苷提取液；(4)將所述步驟(3)所得的黑果枸杞果實花色苷提取液在真空度為0. 07Mpa、溫度 為30 50°C進行真空濃縮后，得到固形物濃度> 60%的濃縮液；該濃縮液經(jīng)冷凍干燥后， 即得黑果枸杞果實花色苷。所述步驟(1)中的乙醇溶液的加入量為黑果枸杞果實原料質(zhì)量的10倍，其體積濃 度為50 95%。所述步驟(1)中的酸溶液是指鹽酸溶液、醋酸溶液或硫酸溶液中的任意一種。所述步驟(3)中的大孔樹脂為苯乙烯類樹脂。所述步驟(4)中的冷凍干燥的條件是指真空度為10 30 ，溫度為-25 _30°C， 干燥時間為20 M小時。本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比具有以下優(yōu)點1、由于本發(fā)明采用天然原料，即柴達木盆地野生狀態(tài)下黑果枸杞果實作為原料， 因此，成本低廉。2、由于本發(fā)明采用醇提、真空濃縮的方式制備花色苷，因此，所獲得的花色苷含量 高，其雜質(zhì)少，質(zhì)量優(yōu)良。3、由于本發(fā)明在制備過程中只使用水和乙醇，不使用其它有機溶劑及有毒溶劑， 因此，不但工藝簡單，質(zhì)量穩(wěn)定，而且產(chǎn)品無污染，有機溶劑及重金屬殘留低。4、本發(fā)明制備的黑果枸杞花色苷主要為牽?；ㄉ?Petimidin)，本發(fā)明的實施 為規(guī)?；_發(fā)黑果枸杞資源提供了可靠的保證。
具體實施例方式實施例1 一種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，包括以下步驟(1)向IOOg黑果枸杞果實原料中加入800g、體積濃度為10%的乙醇溶液，浸提取 1次，提取時間為1小時后，經(jīng)80目的濾網(wǎng)過濾，得到浸提液。其中乙醇溶液是指用質(zhì)量濃度為2%的鹽酸溶液調(diào)節(jié)至pH值為1的溶液。(2)將步驟⑴所得的浸提液在真空度為0. 07Mpa、溫度為30 50°C進行真空濃 縮后，得到固形物濃度> 40%的濃縮液。(3)將步驟(2)所得的濃縮液采用大孔樹脂吸附后，用800ml、質(zhì)量濃度為60%的 乙醇水溶液洗脫，當洗脫液顏色變深時開始收集，水洗至流出液無色，則得到純化的黑果枸 杞果實花色苷提取液；其中大孔樹脂為苯乙烯類樹脂中的HPD100型大孔樹脂。(4)將步驟(3)所得的黑果枸杞果實花色苷提取液在真空度為0. 07Mpa、溫度為 30 50°C進行真空濃縮后，得到固形物濃度> 60%的濃縮液；該濃縮液在真空度為10Pa，溫度為_25°C的條件下進行冷凍干燥M小時后，即得4. Sg黑果枸杞果實花色苷粉末，其純 度為16. 2%。實施例2 —種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，包括以下步驟(1)向IOOg黑果枸杞果實原料中加入1200g、體積濃度為100%的乙醇溶液，浸提 取3次，提取時間為30小時后，經(jīng)100目的濾網(wǎng)過濾，得到浸提液。其中乙醇溶液是指用質(zhì)量濃度為2%的醋酸溶液調(diào)節(jié)至pH值為3的溶液。(2)將步驟(1)所得的浸提液在真空度為0. 07Mpa、溫度為30 50°C進行真空濃 縮后，得到固形物濃度≥ 40%的濃縮液。(3)將步驟(2)所得的濃縮液采用大孔樹脂吸附后，用600ml、質(zhì)量濃度為80%的 乙醇水溶液洗脫，當洗脫液顏色變深時開始收集，水洗至流出液無色，則得到純化的黑果枸 杞果實花色苷提取液；其中大孔樹脂為苯乙烯類樹脂中的NKA-II型大孔樹脂。(4)將步驟(3)所得的黑果枸杞果實花色苷提取液在真空度為0. 07Mpa、溫度為 30 50°C進行真空濃縮后，得到固形物濃度> 60%的濃縮液；該濃縮液在真空度為30Pa， 溫度為_30°C的條件下進行冷凍干燥20小時后，即得2. 7g黑果枸杞果實花色苷粉末，其純 度為11. 2%。實施例3 —種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，包括以下步驟(1)向IOOg黑果枸杞果實原料中加入1000g、體積濃度為50%的乙醇溶液，浸提取 3次，提取時間為M小時后，經(jīng)100目的濾網(wǎng)過濾，得到浸提液。其中乙醇溶液是指用質(zhì)量濃度為2%的硫酸溶液調(diào)節(jié)至pH值為3的溶液。(2)將步驟⑴所得的浸提液在真空度為0. 07Mpa、溫度為30 50°C進行真空濃 縮后，得到固形物濃度> 40%的濃縮液。(3)將步驟⑵所得的濃縮液采用大孔樹脂吸附后，用600ml、質(zhì)量濃度為70%的 乙醇水溶液洗脫，當洗脫液顏色變深時開始收集，水洗至流出液無色，則得到純化的黑果枸 杞果實花色苷提取液；其中大孔樹脂為苯乙烯類樹脂中的DlOl型大孔樹脂。(4)將步驟(3)所得的黑果枸杞果實花色苷提取液在真空度為0. 07Mpa、溫度為 30 50°C進行真空濃縮后，得到固形物濃度≥ 60%的濃縮液；該濃縮液在真空度為30Pa， 溫度為的條件下進行冷凍干燥22小時后，即得5. 7g黑果枸杞果實花色苷粉末，其純 度為18.6%。實施例4 一種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，包括以下步驟(1)向IOOg黑果枸杞果實原料中加入1000g、體積濃度為95%的乙醇溶液，浸提取 2次，提取時間為20小時后，經(jīng)100目的濾網(wǎng)過濾，得到浸提液。其中乙醇溶液是指用質(zhì)量濃度為2%的硫酸溶液調(diào)節(jié)至pH值為2的溶液。(2)將步驟⑴所得的浸提液在真空度為0. 07Mpa、溫度為30 50°C進行真空濃 縮后，得到固形物濃度≥ 40%的濃縮液。(3)將步驟⑵所得的濃縮液采用大孔樹脂吸附后，用400ml、質(zhì)量濃度為70%的 乙醇水溶液洗脫，當洗脫液顏色變深時開始收集，水洗至流出液無色，則得到純化的黑果枸 杞果實花色苷提取液；
其中大孔樹脂為苯乙烯類樹脂中的AB-8型大孔樹脂。(4)將步驟(3)所得的黑果枸杞果實花色苷提取液在真空度為0. 07Mpa、溫度為 30 50°C進行真空濃縮后，得到固形物濃度> 60%的濃縮液；該濃縮液在真空度為15Pa， 溫度為_27°C的條件下進行冷凍干燥23小時后，即得2. 4g黑果枸杞果實花色苷粉末，其純 度為10. 7%。實施例5 —種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，包括以下步驟(1)向IOOg黑果枸杞果實原料中加入1000g、體積濃度為75%的乙醇溶液，浸提取 1次，提取時間為M小時后，經(jīng)120目的濾網(wǎng)過濾，得到浸提液。其中乙醇溶液是指用質(zhì)量濃度為2%的硫酸溶液調(diào)節(jié)至pH值為3的溶液。(2)將步驟⑴所得的浸提液在真空度為0. 07Mpa、溫度為30 50°C進行真空濃 縮后，得到固形物濃度> 40%的濃縮液。(3)將步驟⑵所得的濃縮液采用大孔樹脂吸附后，用600ml、質(zhì)量濃度為70%的 乙醇水溶液洗脫，當洗脫液顏色變深時開始收集，水洗至流出液無色，則得到純化的黑果枸 杞果實花色苷提取液；其中大孔樹脂為苯乙烯類樹脂中的X-5型大孔樹脂。(4)將步驟(3)所得的黑果枸杞果實花色苷提取液在真空度為0. 07Mpa、溫度為 30 50°C進行真空濃縮后，得到固形物濃度> 60%的濃縮液；該濃縮液在真空度為25Pa， 溫度為_25°C的條件下進行冷凍干燥21小時后，即得6. 2g黑果枸杞果實花色苷粉末，其純 度為19.8%。實施例6 —種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，包括以下步驟(1)向IOOg黑果枸杞果實原料中加入900g、體積濃度為85%的乙醇溶液，浸提取 1次，提取時間為M小時后，經(jīng)120目的濾網(wǎng)過濾，得到浸提液。其中乙醇溶液是指用質(zhì)量濃度為2%的硫酸溶液調(diào)節(jié)至pH值為4的溶液。(2)將步驟⑴所得的浸提液在真空度為0. 07Mpa、溫度為30 50°C進行真空濃 縮后，得到固形物濃度> 40%的濃縮液。(3)將步驟⑵所得的濃縮液采用大孔樹脂吸附后，用500ml、質(zhì)量濃度為75%的 乙醇水溶液洗脫，當洗脫液顏色變深時開始收集，水洗至流出液無色，則得到純化的黑果枸 杞果實花色苷提取液；其中大孔樹脂為苯乙烯類樹脂中的X-5型大孔樹脂。(4)將步驟(3)所得的黑果枸杞果實花色苷提取液在真空度為0. 07Mpa、溫度為 30 50°C進行真空濃縮后，得到固形物濃度> 60%的濃縮液；該濃縮液在真空度為25Pa， 溫度為_25°C的條件下進行冷凍干燥21小時后，即得5. Sg黑果枸杞果實花色苷粉末，其純 度為17.9%。
權利要求
1.一種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，包括以下步驟(1)將黑果枸杞果實原料用其質(zhì)量的8 12倍、體積濃度為10% 100%的乙醇溶液 浸提取1 30小時后，過濾，得到浸提液；所述乙醇溶液是指用質(zhì)量濃度為2%的酸溶液調(diào) 節(jié)至PH值為1 4的溶液；(2)將所述步驟(1)所得的浸提液在真空度為0.07Mpa、溫度為30 50°C進行真空濃 縮后，得到固形物濃度> 40%的濃縮液；(3)將所述步驟(2)所得的濃縮液采用大孔樹脂吸附后，用400 800ml、質(zhì)量濃度為 60% 80%的乙醇水溶液洗脫，當洗脫液顏色變深時開始收集，則得到純化的黑果枸杞果 實花色苷提取液；(4)將所述步驟(3)所得的黑果枸杞果實花色苷提取液在真空度為0.07Mpa、溫度為 30 50°C進行真空濃縮后，得到固形物濃度> 60%的濃縮液；該濃縮液經(jīng)冷凍干燥后，即 得黑果枸杞果實花色苷。
2.如權利要求1所述的從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，其特征在于所述步驟 (1)中的乙醇溶液的加入量為黑果枸杞果實原料質(zhì)量的10倍，其體積濃度為50 95%。
3.如權利要求1所述的從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，其特征在于所述步驟 (1)中的酸溶液是指鹽酸溶液、醋酸溶液或硫酸溶液中的任意一種。
4.如權利要求1所述的從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，其特征在于所述步驟(3)中的大孔樹脂為苯乙烯類樹脂。
5.如權利要求1所述的從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，其特征在于所述步驟(4)中的冷凍干燥的條件是指真空度為10 30 ，溫度為-25 -30°C，干燥時間為20 24小時。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法，該方法包括以下步驟(1)將黑果枸杞果實原料用pH值為1～4的乙醇溶液浸提取1～30小時后，過濾，得到浸提液；(2)將所述步驟(1)所得的浸提液進行真空濃縮后，得到固形物濃度≥40％的濃縮液；(3)將所述步驟(2)所得的濃縮液采用大孔樹脂吸附后，用乙醇水溶液洗脫，當洗脫液顏色變深時開始收集，則得到純化的黑果枸杞果實花色苷提取液；(4)將所述步驟(3)所得的黑果枸杞果實花色苷提取液進行真空濃縮后，得到固形物濃度≥60％的濃縮液；該濃縮液經(jīng)冷凍干燥后，即得黑果枸杞果實花色苷。本發(fā)明工藝簡單，所制備的花色苷雜質(zhì)少，質(zhì)量優(yōu)良，穩(wěn)定性好。
文檔編號C07D311/74GK102060833SQ201010571739
公開日2011年5月18日 申請日期2010年11月29日 優(yōu)先權日2010年11月29日
發(fā)明者丁晨旭, 王洪倫, 索有瑞 申請人:中國科學院西北高原生物研究所