專利名稱：一種從山楂葉中同時(shí)提取牡荊素和槲皮素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種從山楂葉中同時(shí)提取牡荊素和槲皮 素的方法。
背景技術(shù)：
牡荊素，黃酮苷類物質(zhì)，溶于甲醇，易溶于熱水，難溶于苯、氯仿、乙醚等。槲皮素，又名櫟精，槲皮黃素，黃酮醇類物質(zhì)，不溶于水，易溶于乙醇、甲醇、乙酸乙 酯、氯仿、乙醚等有機(jī)溶劑及氫氧化物堿溶液。山楂葉為薔薇科植物山里紅或山楂的干燥葉。具有活血化瘀、理氣通脈的功能。 《中國(guó)藥典》2005版已收載山楂葉以及山楂葉提取物制劑——益心酮片。研究發(fā)現(xiàn)，山楂葉 中所含的黃酮類成分對(duì)心血管系統(tǒng)有明顯的藥理作用，主要含牡荊素葡萄糖苷、牡荊素鼠 李糖苷、蘆丁、牡荊素、槲皮素、金絲桃苷等黃酮成分。牡荊素主要用于治療心血管疾病，牡荊素純度一般要求> 98%。已有成藥注射用 牡荊素用于臨床醫(yī)療。牡荊素主要功能是活血化瘀，理氣通脈。用于瘀血阻脈所致的胸痹， 癥見(jiàn)胸悶憋氣，心前區(qū)刺痛、心悸健忘、眩暈耳鳴。冠心病心絞痛、高脂血癥、心動(dòng)脈供血不 足等癥候者。槲皮素具有較好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用，用于治療慢性支氣管 炎。此外還有降低血壓、增強(qiáng)毛細(xì)血管抵抗力、減少毛細(xì)血管脆性、降血脂、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、 增加冠脈血流量、抗腫瘤作用與抗血小板聚集等作用，對(duì)冠心病及高血壓患者有輔助治療 作用。槲皮素可以作為治療前列腺癌的主要輔助藥物。槲皮素是眾多黃酮類化合物中活性 最高的化合物之一。目前提取牡荊素是采用山楂葉來(lái)提煉，從山楂葉總黃酮中經(jīng)提取、分離、純化等 工藝來(lái)提取牡荊素，并最終制成凍干制劑，如文獻(xiàn)“山楂葉的研究進(jìn)展”中公開(kāi)的方法是采 用醇提水沉法和溶劑萃取法提取，提取物經(jīng)聚酰胺柱和硅膠柱柱分離得到牡荊素；如專利 (申請(qǐng)?zhí)?00510038041.0)“牡荊素的提取方法、用途及制劑”，該專利公開(kāi)的方法是將山楂 葉的粗提取物在強(qiáng)酸性的條件下水溶液中水解，析出結(jié)晶后，再進(jìn)行重結(jié)晶，得到目標(biāo)產(chǎn)物 牡荊素。而槲皮素的主要來(lái)源為蘆丁和銀杏葉，如專利(申請(qǐng)?zhí)柹暾?qǐng)?zhí)?3133636. 1)“酶 法水解蘆丁制備異槲皮素和槲皮素的方法”中公開(kāi)的方法是利用自然界植物中廣泛且大量 存在的蘆丁，采用酶法水解其上的部分或全部糖基，進(jìn)而制備異槲皮素和槲皮素單體；如專 利(申請(qǐng)?zhí)?00810072848.X) “從棉花花瓣中制備槲皮素的方法”，該專利公開(kāi)的方法是以 棉花花瓣為原料，經(jīng)有機(jī)溶劑提取，酸或堿進(jìn)行水解，保溫，得到槲皮素粗品，然后通過(guò)大孔 樹(shù)脂富集得到高純度的槲皮素。而從山楂葉中同時(shí)提取同時(shí)提取牡荊素和槲皮素的方法卻 很少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決技術(shù)問(wèn)題是提供一種從山楂葉中同時(shí)提取牡荊素和槲皮素的方法。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)解決方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的一種從山楂葉中同時(shí)提取牡荊素和槲皮素的方法，其特征在于包含以下步驟1)制備把原料粉碎，加入10-15倍量醇溶液超聲提取2-3次，提取液減壓濃縮 至無(wú)醇，濃縮液加3-5倍水分散，再加入大孔樹(shù)脂柱吸附，水洗糖反應(yīng)陰性，再用5-8倍量 40-70%乙醇溶液洗脫，回收乙醇，得濃縮液；2)酸水解上述濃縮液加酸調(diào)PH2-4水解，濃縮水解液過(guò)濾，沉淀物為牡荊素和槲皮素；3)分離取沉淀物用3-5倍量水回流溶解，趁熱過(guò)濾，固體物為槲皮素粗提物，母 液為牡荊素溶液；4)槲皮素純化將上述槲皮素粗提物用無(wú)水甲醇回流溶解結(jié)晶2-3次，真空干燥 即得槲皮素產(chǎn)品；5)牡荊素純化將上述牡荊素溶液放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶用無(wú)水乙醇回流溶解結(jié)晶 2-3次，真空干燥結(jié)晶物得牡荊素產(chǎn)品。所述步驟1)中的醇溶液為60-90 %的甲醇或乙醇溶液，超聲提取功率為 0. 5-10kw,大孔樹(shù)脂型號(hào)可選AB-8、X_5、LSA-21和HZ806中的一種。所述步驟幻中使用的酸可選鹽酸、硫酸和磷酸中的一種。本發(fā)明采用醇溶液超聲提取，經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂柱吸附分離得到總黃酮物質(zhì)，再用酸 水解，同時(shí)提取牡荊素和槲皮素兩種活性物質(zhì)，提高了原料的利用率，降低了成本，本工藝 具有工業(yè)化意義。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 把山楂葉粉碎，取1kg，投入提取罐，加入15L90%乙醇溶液超聲提取1. 5小時(shí)，抽 濾液體，再加12L80%乙醇溶液提取1次，提取液減壓回收乙醇溶液后得到濃縮液，濃縮液 加4L水分散，加入IL AB-8大孔樹(shù)脂柱吸附，流速2. 5L/h，吸附結(jié)束后，水洗糖反應(yīng)陰性，再 用7L60%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓回收乙醇濃縮，濃縮液加硫酸調(diào)pH4，加熱至7°C 水解，水解液濃縮至1/5體積，濾出沉淀物加入5L水回流溶解，趁熱過(guò)濾，得固體物8. Sg和 母液，固體物用600ml無(wú)水乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，結(jié)晶再用400ml無(wú)水甲醇回流溶解，放 置結(jié)晶，濾出結(jié)晶真空干燥即得槲皮素產(chǎn)品6. 4g，含量93. 7% ；上述母液放冷結(jié)晶，濾出結(jié) 晶用500ml無(wú)水甲醇回流溶解結(jié)晶3次，真空干燥結(jié)晶物得牡荊素產(chǎn)品7. 2g，含量95. 1%.實(shí)施例2 把山楂葉粉碎，取1kg，投入提取罐，加入12L60%乙醇溶液超聲提取2小時(shí)，抽濾 液體，再加12L80%乙醇溶液提取2次，提取液減壓回收乙醇溶液后得到濃縮液，濃縮液加 3. 5L水分散，加入1. 5L LAS-21大孔樹(shù)脂柱吸附，流速1. 5L/h，吸附結(jié)束后，水洗糖反應(yīng)陰 性，再用6L70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓回收乙醇濃縮，濃縮液加硫酸調(diào)pH2，加熱 至80°C水解，水解液濃縮至1/6體積，濾出沉淀物加入4L水回流溶解，趁熱過(guò)濾，得固體物 10. 3g和母液，固體物用500ml無(wú)水甲醇回流溶解，放置結(jié)晶，結(jié)晶再用500ml無(wú)水甲醇回流溶解結(jié)晶2次，濾出結(jié)晶真空干燥即得槲皮素產(chǎn)品5. lg，含量92. 0%;上述母液減壓除去 有機(jī)溶劑，用800ml無(wú)水乙醇回流溶解結(jié)晶2次，真空干燥結(jié)晶物得牡荊素產(chǎn)品7. 8g，含量 94. 2%。實(shí)施例3 把山楂葉粉碎，取1kg，投入提取罐，加入10L80%甲醇溶液超聲提取3小時(shí)，抽 濾液體，再加12L70%甲醇溶液提取1次，提取液減壓回收乙醇溶液后得到濃縮液，濃縮液 加5L水分散，加入2L X-5大孔樹(shù)脂柱吸附，流速3L/h，吸附結(jié)束后，水洗糖反應(yīng)陰性，再 用5L60%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓回收乙醇濃縮，濃縮液加鹽酸調(diào)pH2，加熱至90°C 水解，水解液濃縮至1/10體積，濾出沉淀物加入5L水回流溶解，趁熱過(guò)濾，得固體物8. 2g 和母液，固體物用700ml無(wú)水乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，結(jié)晶再用500ml無(wú)水甲醇回流溶 解，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶真空干燥即得槲皮素產(chǎn)品5. 98，含量94.7% ；上述母液減壓除去有 機(jī)溶劑，用500ml無(wú)水甲醇回流溶解結(jié)晶3次，真空干燥結(jié)晶物得牡荊素產(chǎn)品10. 2g，含量 98. 0%。實(shí)施例4 把山楂葉粉碎，取1kg，投入提取罐，加入12L70%甲醇溶液超聲提取2小時(shí)，抽 濾液體，再加10L70%乙醇溶液提取3次，提取液減壓回收乙醇溶液后得到濃縮液，濃縮液 加3. 5L水分散，加入1. 5LHZ806大孔樹(shù)脂柱吸附，流速1. 5L/h，吸附結(jié)束后，水洗糖反應(yīng)陰 性，再用8L40%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓回收乙醇濃縮，濃縮液加磷酸調(diào)pH3，加熱 至85°C水解，水解液濃縮至1/6體積，濾出沉淀物加入4L水回流溶解，趁熱過(guò)濾，得固體物 9. Ig和母液，固體物用500ml無(wú)水乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，結(jié)晶再用500ml無(wú)水甲醇回流 溶解結(jié)晶2次，濾出結(jié)晶真空干燥即得槲皮素產(chǎn)品7. 18，含量91.9% ；上述母液減壓除去 有機(jī)溶劑，用500ml無(wú)水甲醇回流溶解結(jié)晶2次，真空干燥結(jié)晶物得牡荊素產(chǎn)品9. 8g，含量 91. 3%。實(shí)施例5 把山楂葉粉碎，取1kg，投入提取罐，加入15L90%甲醇溶液超聲提取1小時(shí)，抽 濾液體，再加12L80%甲醇溶液提取1次，提取液減壓回收乙醇溶液后得到濃縮液，濃縮液 加4L水分散，加入IL AB-8大孔樹(shù)脂柱吸附，流速2. 5L/h，吸附結(jié)束后，水洗糖反應(yīng)陰性， 再用6. 5L50%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓回收乙醇濃縮，濃縮液加硫酸調(diào)pH3，加熱至 70°C水解，水解液濃縮至1/10體積，濾出沉淀物加入4. 5L水回流溶解，趁熱過(guò)濾，得固體物 11. 2g和母液，固體物用600ml無(wú)水乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，結(jié)晶再用400ml無(wú)水甲醇回 流溶解結(jié)晶2次，濾出結(jié)晶真空干燥即得槲皮素產(chǎn)品9. 2g，含量93. 8%;上述母液減壓除去 有機(jī)溶劑，用550ml無(wú)水甲醇回流溶解結(jié)晶3次，真空干燥結(jié)晶物得牡荊素產(chǎn)品6. 7g，含量 96. 1%。權(quán)利要求
1.一種從山楂葉中提取牡荊素和槲皮素的方法，其特征在于包含以下步驟1)制備把原料粉碎，加入10-15倍量醇溶液超聲提取2-3次，提取液減壓無(wú)醇溶液， 濃縮液加3-5倍水分散，再加入大孔樹(shù)脂柱吸附，水洗糖反應(yīng)陰性，再用5-8倍量40-70%乙 醇溶液洗脫，回收乙醇，得濃縮液；2)酸水解上述濃縮液加酸調(diào)pH2-4，加熱至70-90°C水解濃縮水解液過(guò)濾，沉淀物為 牡荊素和槲皮素；3)分離取沉淀物用3-5倍量水回流溶解，趁熱過(guò)濾，固體物為槲皮素粗提物，母液為 牡荊素溶液；4)槲皮素純化將上述槲皮素粗提物用無(wú)水甲醇回流溶解結(jié)晶2-3次，真空干燥即得 槲皮素產(chǎn)品；5)牡荊素純化將上述牡荊素溶液放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶用無(wú)水乙醇回流溶解結(jié)晶2-3 次，真空干燥結(jié)晶物得牡荊素產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述從山楂葉中同時(shí)提牡荊素和槲皮素的方法，其特征在于所述步驟 1)中的醇溶液為60-90%的甲醇或乙醇溶液，超聲提取功率為0. 5-lOkw，大孔樹(shù)脂型號(hào)可 選 AB-8、X-5、LSA-21 和 HZ806 中的一種。
3.如權(quán)利要求1所述山楂葉中同時(shí)提牡荊素和槲皮素的方法，其特征在于所述步驟2) 中使用的酸可選鹽酸、硫酸和磷酸中的一種。
全文摘要
本發(fā)明涉及了一種從山楂葉中提取牡荊素和槲皮素的方法，工藝方法是把原料粉碎，用醇溶液超聲提取2-3次，提取液減壓至無(wú)醇，濃縮液加水分散，再加入大孔樹(shù)脂柱吸附，水和40-70％乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮加酸水解，濃縮水解液過(guò)濾，取沉淀物加水回流溶解，趁熱過(guò)濾，固體物和母液分別結(jié)晶純化，真空干燥即得槲皮素產(chǎn)品和牡荊素產(chǎn)品。本發(fā)明工藝操作簡(jiǎn)單、所得產(chǎn)品純度高、原料利用率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D311/30GK102040593SQ20101029316
公開(kāi)日2011年5月4日 申請(qǐng)日期2010年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月27日
發(fā)明者萬(wàn)冬梅, 劉東鋒, 楊成東 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司