專(zhuān)利名稱(chēng)：一種連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾 草酸的方法。
背景技術(shù)：
鼠尾草酸(Carnosic acid)是唇形科(Labiatae)迷迭香屬迷迭香 Rosemary (Rosmarinus officinalis L.)中的主要脂溶性抗氧化成分。迷迭香原產(chǎn)地中海 沿岸國(guó)家，現(xiàn)在世界各地廣為栽培，近年來(lái)，在我國(guó)廣西、云南、浙江、貴州、海南和新疆等地 均有大面積種植。鼠尾草酸作為天然脂溶性抗氧化劑廣泛應(yīng)用于藥品、食品加工和和化妝 品等領(lǐng)域。公開(kāi)號(hào)為CN1441030的中國(guó)專(zhuān)利介紹了一種提取迷迭香天然抗氧化劑的方法，該 法直接采用迷迭香鮮草在新鮮狀態(tài)下經(jīng)水蒸汽蒸餾得到迷迭香精油及含抗氧化劑的原料; 將含抗氧化劑的原料粗粉碎后加入食用級(jí)有機(jī)溶劑，并以1 5至1 3的比例混合于浸 提器中，提取迷迭香浸提液，并經(jīng)濃縮后得浸膏，再進(jìn)行超臨界萃取，高壓分離得萃取液，將 萃取液回收溶劑，噴霧或冷凍干燥得淡黃色抗氧化劑成品。此法得到的是含有鼠尾草酸抗 氧化劑的粗提物，抗氧化活性不強(qiáng)。公開(kāi)號(hào)為CN1327038的中國(guó)專(zhuān)利介紹了超臨界C02反向萃取法提取迷迭香抗氧 化劑的方法，該法首先制取迷迭香粗提物，然后將粉碎的粗提物裝到多層料筒、放入萃取釜 中，在40-60°C，C02壓力10-20MPa下萃取迷迭香精油；然后升高壓力到25_35MPa，并加入 10-20%乙醇或乙酸乙酯改性劑，提取迷迭香抗氧化劑。最后再用超臨界C02脫除殘留溶 劑，得迷迭香抗氧化劑產(chǎn)品，純度95. 9%。采用超臨界C02制備含有鼠尾草酸的迷迭香抗氧 化劑，仍為鼠尾草酸的粗提物，且目前受設(shè)備條件限制，難以擴(kuò)大生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案包括使用含量不低于15%的鼠尾草酸原料，制備純度98%以上的鼠尾草酸，將鼠尾草 酸粗品用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物，得上柱樣品，使用硅膠填充柱，將硅膠用乙酸乙酯分 散后濕法裝柱，上樣后以乙酸乙酯為洗脫劑，柱塞式溶劑泵進(jìn)液，洗脫后的流分分段收集， 減壓濃縮至干回收洗脫劑，得層析產(chǎn)物。回收的洗脫劑重復(fù)使用，層析產(chǎn)物用烴溶劑重結(jié) 晶，結(jié)晶產(chǎn)物減壓干燥，可獲得純度98%以上的鼠尾草酸純品，母液減壓回收乙酸乙酯后可 做為柱層析原料再次純化，使用后的層析柱用含乙酸乙酯-乙醇混合溶劑再生，乙酸乙酯 為平衡劑平衡，平衡后的層析柱可重復(fù)使用。硅膠填充柱有效柱長(zhǎng)30 350cm，柱直徑5 20cm，填充硅膠粒徑為100 400 目，柱壓為0. 1 5MPa。所用的硅膠為含水硅膠，含水率3% -12%。所用的再生劑乙酸乙酯-乙醇混合溶劑的比例為100 2-100 15。
每次上柱樣品中固形物的質(zhì)量與柱中硅膠質(zhì)量之比在1 15 1 100之間。分段收集的流分含量高于92%的進(jìn)入烴溶劑重結(jié)晶過(guò)程。再生劑用量為1 10倍柱體積(BV)，平衡劑用量為5 20倍柱體積(BV)。烴溶劑為正己烷、環(huán)己烷、石油醚和溶劑汽油中的一種。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是1.本發(fā)明改變了傳統(tǒng)的生產(chǎn)工藝，本法的層析柱可重復(fù)使用，使用次數(shù)達(dá)30次以 上。2、純化過(guò)程無(wú)污染，所有溶劑均可回收使用，便于工業(yè)連續(xù)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施作進(jìn)一步詳細(xì)描述使用含量不低于15%的鼠尾草酸原料，制備純度98%以上的鼠尾草酸，將鼠尾草 酸粗品用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物，得上柱樣品，使用硅膠填充柱，將硅膠用乙酸乙酯分 散后濕法裝柱，上樣后以乙酸乙酯為洗脫劑，柱塞式溶劑泵進(jìn)液，洗脫后的流分分段收集， 減壓濃縮至干回收洗脫劑，得層析產(chǎn)物，回收的洗脫劑重復(fù)使用，層析產(chǎn)物用烴溶劑重結(jié) 晶，結(jié)晶產(chǎn)物減壓干燥，可獲得純度98%以上的鼠尾草酸純品，母液減壓回收乙酸乙酯后可 做為柱層析原料再次純化，使用后的層析柱用含乙酸乙酯-乙醇混合溶劑再生，乙酸乙酯 為平衡劑平衡，平衡后的層析柱可重復(fù)使用。硅膠填充柱有效柱長(zhǎng)30 350cm，柱直徑5 20cm，填充硅膠粒徑為100 400 目，柱壓為0. 1 5MPa。所用的硅膠為含水硅膠，含水率3% -12%。所用的再生劑乙酸乙酯-乙醇混合溶劑的比例為100 2-100 15。每次上柱樣品中固形物的質(zhì)量與柱中硅膠質(zhì)量之比在1 15 1 100之間。分段收集的流分含量高于92%的進(jìn)入烴溶劑重結(jié)晶過(guò)程。再生劑用量為1 10倍柱體積(BV)，平衡劑用量為5 20倍柱體積(BV)。烴溶劑為正己烷、環(huán)己烷、石油醚和溶劑汽油中的一種。下面，本發(fā)明將用實(shí)施例進(jìn)行進(jìn)一步的說(shuō)明，但是它并不限于這些實(shí)施例的任一 個(gè)或類(lèi)似實(shí)例。實(shí)施例1 400g 15%鼠尾草酸粗品攪拌回流溶解于2L乙酸乙酯中，冷卻，濾除不溶物，將 含水率12%的100 200目硅膠8kg用乙酸乙酯混懸后，驅(qū)除氣泡，均勻加入到有效柱長(zhǎng) 350cm，內(nèi)徑5cm的玻璃層析柱中，上述溶解鼠尾草酸的樣品用柱塞式溶劑泵上于柱頭，然 后泵入乙酸乙酯洗脫，分段收集流分，HPLC監(jiān)測(cè)，合并含量92%以上的流出液，減壓回收洗 脫劑后得層析產(chǎn)物65g，加入石油醚130mL回流溶解，冷卻析晶，結(jié)晶物再用正己烷重結(jié)晶1 次，減壓過(guò)濾，干燥，得鼠尾草酸純品55g，純度98. 5 %，母液減壓回收溶劑后得濃縮物作為 下次柱層析的原料。含量90%以下的流出液減壓回收洗脫劑后得濃縮物也作為下次柱層 析的原料，回收的洗脫劑下次重復(fù)使用，洗脫后的硅膠柱泵入乙酸乙酯-乙醇(100 2,v/ v) 40L再生，然后再泵入60L乙酸乙酯平衡，平衡后的硅膠柱待下次直接使用。實(shí)施例2 400g 18%鼠尾草酸粗品攪拌回流溶解于2L乙酸乙酯中，冷卻，濾除不溶物，將含水率12%的200 300目硅膠8kg用乙酸乙酯混懸后，驅(qū)除氣泡，均勻加入到有效柱長(zhǎng) 120cm，內(nèi)徑10cm的玻璃層析柱中，上述溶解鼠尾草酸的樣品用柱塞式溶劑泵上于柱頭，然 后泵入乙酸乙酯洗脫，分段收集流分，HPLC監(jiān)測(cè)，合并含量92%以上的流出液，減壓回收洗 脫劑后得層析產(chǎn)物68g，加入環(huán)己烷130mL回流溶解，冷卻析晶，結(jié)晶物再用正己烷重結(jié)晶1 次，減壓過(guò)濾，干燥，得鼠尾草酸純品58g，純度98. 4%，母液減壓回收溶劑后得濃縮物作為 下次柱層析的原料。含量90%以下的流出液減壓回收洗脫劑后得濃縮物也作為下次柱層析 的原料，回收的洗脫劑下次重復(fù)使用，洗脫后的硅膠柱泵入乙酸乙酯-乙醇(100 15, v/ v) 40L再生，然后再泵入60L乙酸乙酯平衡，平衡后的硅膠柱待下次直接使用。實(shí)施例3 80g 16%鼠尾草酸粗品攪拌回流溶解于2L乙酸乙酯中，冷卻，濾除不溶物，將含 水率12 %的300 400目硅膠8kg用乙酸乙酯混懸后，驅(qū)除氣泡，均勻加入到有效柱長(zhǎng) 30cm，內(nèi)徑20cm的玻璃層析柱中，上述溶解鼠尾草酸的樣品用柱塞式溶劑泵上于柱頭，然 后泵入乙酸乙酯洗脫，分段收集流分，HPLC監(jiān)測(cè)，合并含量92%以上的流出液，減壓回收洗 脫劑后得層析產(chǎn)物13g，加入正己烷130mL回流溶解，冷卻析晶，結(jié)晶物再用正己烷重結(jié)晶1 次，減壓過(guò)濾，干燥，得鼠尾草酸純品10. 5g，純度98. 2%，母液減壓回收溶劑后得濃縮物作 為下次柱層析的原料。含量90%以下的流出液減壓回收洗脫劑后得濃縮物也作為下次柱層 析的原料，回收的洗脫劑下次重復(fù)使用，洗脫后的硅膠柱泵入乙酸乙酯-乙醇(100 10， v/v) 20L再生，然后再泵入30L乙酸乙酯平衡，平衡后的硅膠柱待下次直接使用。實(shí)施例4 400g 16%鼠尾草酸粗品攪拌回流溶解于2L乙酸乙酯中，冷卻，濾除不溶物，將 含水率12%的200 300目硅膠6kg用乙酸乙酯混懸后，驅(qū)除氣泡，均勻加入到有效柱長(zhǎng) 350cm，內(nèi)徑5cm的玻璃層析柱中，上述溶解鼠尾草酸的樣品用柱塞式溶劑泵上于柱頭，然 后泵入乙酸乙酯洗脫，分段收集流分，HPLC監(jiān)測(cè)，合并含量92%以上的流出液，減壓回收 洗脫劑后得層析產(chǎn)物65g，加入6#溶劑油120mL回流溶解，冷卻析晶，結(jié)晶物再用6#溶劑 油重結(jié)晶1次，減壓過(guò)濾，干燥，得鼠尾草酸純品57g，純度98. 1 %，母液減壓回收溶劑后得 濃縮物作為下次柱層析的原料。含量90%以下的流出液減壓回收洗脫劑后得濃縮物也作 為下次柱層析的原料，回收的洗脫劑下次重復(fù)使用，洗脫后的硅膠柱泵入乙酸乙酯-乙醇 (100 8，v/v) 40L再生，然后再泵入60L乙酸乙酯平衡，平衡后的硅膠柱待下次直接使用。
權(quán)利要求
一種連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法，本方法使用含量不低于15％的鼠尾草酸原料，制備純度98％以上的鼠尾草酸，將鼠尾草酸粗品用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物，得上柱樣品，使用硅膠填充柱，將硅膠用乙酸乙酯分散后濕法裝柱，上樣后以乙酸乙酯為洗脫劑，柱塞式溶劑泵進(jìn)液，洗脫后的流分分段收集，減壓濃縮至干回收洗脫劑，得層析產(chǎn)物，回收的洗脫劑重復(fù)使用，層析產(chǎn)物用烴溶劑重結(jié)晶，結(jié)晶產(chǎn)物減壓干燥，可獲得純度98％以上的鼠尾草酸純品，母液減壓回收乙酸乙酯后可做為柱層析原料再次純化，使用后的層析柱用含乙酸乙酯-乙醇混合溶劑再生，乙酸乙酯為平衡劑平衡，平衡后的層析柱可重復(fù)使用。
2.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法，其特征在于 硅膠填充柱有效柱長(zhǎng)30 350cm，柱直徑5 20cm，填充硅膠粒徑為100 400目，柱壓為 0. 1 5MPa。
3.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法，其特征在于 所用的硅膠為含水硅膠，含水率3% -12%。
4.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法，其特征在于 所用的再生劑乙酸乙酯-乙醇混合溶劑的比例為100 2-100 15。
5.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法，其特征在于 每次上柱樣品中固形物的質(zhì)量與柱中硅膠質(zhì)量之比在1 15 1 100之間。
6.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法，其特征在于 分段收集的流分含量高于92%的進(jìn)入烴溶劑重結(jié)晶過(guò)程。
7.按照權(quán)利要求1所述的連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法，其特征在于 再生劑用量為1 10倍柱體積(BV)，平衡劑用量為5 20倍柱體積(BV)。
8.按照權(quán)利要求1和6所述的連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法，其特征在 于烴溶劑為正己烷、環(huán)己烷、石油醚或溶劑汽油中的一種。
全文摘要
一種連續(xù)中壓柱層析制備高純度鼠尾草酸的方法，本方法使用含量不低于15％的鼠尾草酸原料，制備純度98％以上的鼠尾草酸，將鼠尾草酸粗品用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物，得上柱樣品，使用硅膠填充柱，將硅膠用乙酸乙酯分散后濕法裝柱，上樣后以乙酸乙酯為洗脫劑，柱塞式溶劑泵進(jìn)液，洗脫后的流分分段收集，減壓濃縮至干回收洗脫劑，得層析產(chǎn)物，回收的洗脫劑重復(fù)使用，層析產(chǎn)物用烴溶劑重結(jié)晶，結(jié)晶產(chǎn)物減壓干燥，可獲得純度98％以上的鼠尾草酸純品，母液減壓回收乙酸乙酯后可做為柱層析原料再次純化，使用后的層析柱用含乙酸乙酯-乙醇混合溶劑再生，乙酸乙酯為平衡劑平衡，平衡后的層析柱可重復(fù)使用，使用次數(shù)達(dá)30次以上。本方法的主要特點(diǎn)為純化過(guò)程無(wú)污染，所有溶劑均可回收使用，便于工業(yè)連續(xù)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07C51/47GK101851158SQ20101018434
公開(kāi)日2010年10月6日 申請(qǐng)日期2010年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月27日
發(fā)明者劉婷婷, 劉芳, 孫震, 楊磊, 王涵, 祖元?jiǎng)? 祖柏實(shí), 趙春建, 馬春慧 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué);祖元?jiǎng)?br>