專利名稱：抗il-17a/il-17f交叉反應(yīng)性抗體及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般涉及識別IL-17F的單克隆抗體(例如完全人的單克隆抗體)、識別異 二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合物的單克隆抗體(例如完全人的單克隆抗體)、和識別未復(fù)合在 一起的IL-17F和IL-17A 二者的單克隆抗體(例如完全人的交叉反應(yīng)性抗體)的生成，及 作為治療劑使用所述單克隆抗體的方法。
背景技術(shù)：
IL-17A(最初叫作CTL-8，而且也稱作IL-17)是IL-17細胞因子家族的古典/創(chuàng) 立成員。在IL-17A之外，IL-17細胞因子家族的成員目前包括共享保守C端區(qū)但N端區(qū)段 不同的蛋白質(zhì) IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL_17E(也叫作 IL-25)和 IL-17F。IL-17A和IL-17F是該家族在序列和生物學(xué)特性這兩個方面最密切相關(guān)的兩個成 員。IL-17F與IL-17A在氨基酸水平共享55%序列同一性。IL-17A和IL-17F都是作為二 硫化物連接的同二聚體分泌的，經(jīng)由受體IL-17R、IL-17RC、或由IL-17R和IL-17RC構(gòu)成的 多聚體受體復(fù)合物來發(fā)信號。二者還在相同的T細胞子集(主要是Thl7 CD4+T細胞)上 共表達。此外，二者已經(jīng)相似地被暗示為人類中和人類疾病的小鼠模型中多種炎性和自身 免疫性疾病的進展和病理的促成因子。具體而言，IL-17A和IL-17F已經(jīng)被暗示為觸發(fā)炎 癥應(yīng)答并由此促成多種自身炎性疾病，包括多發(fā)性硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、和炎性腸病及癌 癥的主要效應(yīng)器細胞因子。IL-17A和IL-17F 二者已證明的體內(nèi)活性闡釋了 IL-17A和IL-17F拮抗劑的臨床 和/或治療潛力，及對IL-17A和IL-17F拮抗劑的需要。具體而言，結(jié)合IL-17A和IL-17F 二者并抑制(拮抗性抗體)IL-17A和I1-17F 二者的一種或多種免疫學(xué)活性的抗體會是有 益的。如此，本領(lǐng)域仍然需要與IL-17A和IL-17F 二者和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物 起交叉反應(yīng)的拮抗劑。發(fā)明概述本發(fā)明提供特異性結(jié)合IL-17F、IL-17F同二聚體、IL-17A、IL-17A同二聚體和/ 或異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合物的單克隆抗體，諸如完全人的單克隆抗體。本發(fā)明的抗 體能夠調(diào)控(例如阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾)IL-17、IL-17A和/或 IL-17A/IL-17F介導(dǎo)的促炎性細胞因子和/或趨化因子生成。本發(fā)明的例示性單克隆抗體包括例如30D12抗體、29D8抗體、1E4抗體、31A3抗 體、39F12抗體、12B12抗體、15B7抗體、4H11抗體、4B11抗體、8B11抗體、38B1抗體、15E6抗 體、5E12抗體、41B10抗體、及其變體。此類抗體的變體包括30D12BF抗體(具有經(jīng)過修飾的重鏈可變區(qū)的30D12抗體變體)、39F12A抗體(具有經(jīng)過修飾的重鏈可變區(qū)的39F12抗 體變體)、和15Ε6Π(抗體(具有經(jīng)過修飾的輕鏈可變區(qū)的15Ε6抗體變體)。或者，單克隆 抗體是與30D12抗體、29D8抗體、1Ε4抗體、31Α3抗體、39F12抗體、12Β12抗體、15Β7抗體、 4Η11抗體、4Β11抗體、8Β11抗體、38Β1抗體、15Ε6抗體、5Ε12抗體、4IB10抗體，及其變體包 括30D12BF抗體、39F12A抗體和15Ε6Π(抗體結(jié)合相同表位的抗體。每一種這些抗體在本文 中分別稱作“huIL-17A/F”抗體。huIL-17A/F抗體包括完全人的單克隆抗體，以及人源化單 克隆抗體和嵌合抗體。優(yōu)選的是，抗體是IgGl。這些抗體顯示對人IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的特異 性，而且它們已經(jīng)顯示出抑制IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F介導(dǎo)的細胞因子生成。 這些抗體具有獨特的特異性。在一些實施方案中，本發(fā)明的huIL-17A/F抗體特異性結(jié)合單 獨的IL-17F和IL-17A 二者(即未復(fù)合在一起)。在一些實施方案中，本發(fā)明的huIL_17A/ F抗體特異性結(jié)合IL-17F、IL-17F同二聚體、和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物。在一些實 施方案中，本發(fā)明的huIL-17A/F抗體特異性結(jié)合IL-17F、IL-17F同二聚體、IL-17A、IL-17A 同二聚體、禾口 IL-17A/IL-17F 異二聚體復(fù)合物。例如，30D12J9D8、1E4、31A3、39F12、12B12、 15B7、4H11、38B1、15E6、30D12BF、4B11、15E6FK、禾口 39F12A 結(jié)合 IL-17F 并與 IL-17A 交叉反 應(yīng)，而且這些抗體還結(jié)合IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物。5E12和41B10抗體結(jié)合IL-17F 和IL-17F同二聚體，但是不結(jié)合IL-17A或IL-17A同二聚體。41B10抗體還結(jié)合IL-17A/ IL-17F異二聚體復(fù)合物。本發(fā)明的完全人的抗體含有重鏈可變區(qū)，其具有氨基酸序列SEQ ID NO :2,6,8, 10、14、18、20、24、28、32、34、38、44、48、52、和54。本發(fā)明的完全人的抗體含有輕鏈可變區(qū)， 其具有氨基酸序列SEQ ID而4、12、16、22、26、30、36、40、46、和56。三個重鏈CDR包括包 含與選自 SEQ ID NO :57、60、66、69、76、79、82、85 和 90 的序列至少 90%,92%,95%,97%, 98%、99%或更多相同的氨基酸序列的CDRl區(qū)；包含與選自SEQ ID NO :58、61、63、65、67、 70、72、74、77、80、83、86、88、91、93 和 94 的序列至少 90%、92%、95%、97%、98%、99%或更 多相同的氨基酸序列的CDR2區(qū)；和包含與選自SEQ ID NO :59、62、64、68、71、73、75、78、81、 84、87、89、92、和95的序列至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或更多相同的氨基酸序 列的⑶R3區(qū)。三個輕鏈⑶R包括包含與選自SEQ ID NO :96、101、104、107和110的序列至 少90%、92%、95%、97% 98 %、99%或更多相同的氨基酸序列的⑶Rl區(qū)；包含與選自SEQ ID NO :97、102、105和108的序列至少90%、92%、95%、97% 98%、99%或更多相同的氨基 酸序列的 CDR2 區(qū)；和包含與選自 SEQ ID NO :98、99、100、103、106、109、111、112 和 113 的序 列至少90%、92%、95%、97% 98%、99%或更多相同的氨基酸序列的⑶R3區(qū)。本發(fā)明特異性結(jié)合IL-17F、IL-17A和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的抗體識別 并結(jié)合IL-17F和IL-17A共享的表位。本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合異二聚體IL-17A/IL-17F 復(fù)合物，其中該抗體結(jié)合包括人IL-17F、IL-17A或二者上一個或多個氨基酸殘基的表位。 本發(fā)明的抗體免疫特異性結(jié)合IL-17F，其中抗體結(jié)合包括人IL-17F上一個或多個氨基酸 殘基的表位。本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合IL-17A，其中抗體結(jié)合包括人IL-17F、IL-17A或二 者上一個或多個氨基酸殘基的表位。huIL-17A/F 抗體結(jié)合在 IL-17F 同二聚體、IL-17A 同二聚體和 IL-17A/IL-17F 異 二聚體復(fù)合物二者上找到的共同表位。與結(jié)合界面處的或以其它方式橫跨IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的表位的抗體不同，huIL-17A/F抗體特異性結(jié)合IL-17A/IL-17F異二聚體 復(fù)合物，而且還識別并結(jié)合未復(fù)合在一起的IL-17F和IL-17A。如此，huIL_17A/F抗體不需 要IL-17A/IL-17F復(fù)合物形成來識別IL-17F和/或IL-17A。huIL-17A/F 抗體展現(xiàn)中和能力并抑制 IL-17F、IL-17A 和 / 或 IL-17A/IL-17F 異二 聚體復(fù)合物的一種或多種生物學(xué)功能。huIL-17A/F抗體能夠結(jié)合IL-17F (包括IL-17F同 二聚體)、IL-17A (包括IL-17A同二聚體)、和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物中每一項。huIL-17A/IL"17F 抗體結(jié)合 IL-17A 同二聚體、IL-17F 同二聚體和 IL-17A/IL-17F 異二聚體復(fù)合物，而且這些抗體展現(xiàn)(i)至少IOOpM或更少的針對IL-17A同二聚體的結(jié)合 親和力，(ii)至少300pM或更少的針對IL-17F同二聚體的結(jié)合親和力，(iii)至少400pM 或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的結(jié)合親和力，(iv)至少13nM或更少的針 對IL-17A同二聚體的中和能力，(ν)至少120nM或更少的針對IL-17F同二聚體的中和能 力，和(vi)至少31nM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的中和能力。在一些實施方案中，huIL-17A/IL-17F抗體結(jié)合IL-17A同二聚體、IL-17F同二 聚體和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，而且這些抗體展現(xiàn)(i)至少40pM或更少的針對 IL-17A同二聚體的結(jié)合親和力，(ii)至少IOpM或更少的針對IL-17F同二聚體的結(jié)合親和 力，和(iii)至少50pM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體的結(jié)合親和力。在一些實施方案中，huIL-17A/IL-17F抗體結(jié)合IL-17A同二聚體、IL-17F同二 聚體和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，而且這些抗體展現(xiàn)(i)至少15pM或更少的針對 IL-17A同二聚體的結(jié)合親和力，(ii)至少IOpM或更少的針對IL-17F同二聚體的結(jié)合親和 力，和(iii)至少30pM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體的結(jié)合親和力。在一些實施方案中，huIL-17A/IL-17F抗體結(jié)合IL-17A同二聚體、IL-17F同二 聚體和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，而且這些抗體展現(xiàn)(iv)至少13nM或更少的針對 IL-17A同二聚體的中和能力，(ν)至少1. 9nM或更少的針對IL-17F同二聚體的中和能力， 和(vi)至少IlnM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的中和能力。在一些實施方案中，huIL-17A/IL-17F抗體結(jié)合IL-17A同二聚體、IL-17F同二聚 體和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，而且這些抗體展現(xiàn)(iv)至少1.6nM或更少的針對 IL-17A同二聚體的中和能力，(ν)至少1. 7nM或更少的針對IL-17F同二聚體的中和能力， 和(vi)至少1. InM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的中和能力。在一些實施方案中，huIL-17A/IL-17F抗體結(jié)合IL-17A同二聚體、IL-17F同二聚 體和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，而且這些抗體展現(xiàn)(iv)至少0. 2nM或更少的針對 IL-17A同二聚體的中和能力，(ν)至少1. 2nM或更少的針對IL-17F同二聚體的中和能力， 和(vi)至少0. 2nM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的中和能力。huIL_17A/F抗體具有下述特征結(jié)合親和力(pM)
所有*huIL-17A/F抗體15E615E6FKIL-17A同二聚體1004015IL-17F同二聚體3001010IL-17A/IL-17F 異二聚體4005030* 所有抗體指下述 huIL-17A/F 抗體15E6、15E6FK、30D12、30D12BF、39F12、 39F12A、和中和能力(nM)，如使用MEF細胞測定法來測量的
所有Λ huIL-17A/F抗體除30D12外的 所有* huIL-17A/F抗體15E615E6FK1L-17A同二聚體13131.60.21L-17F同二聚體1201.91.71.21L-17A/IL-17F 異二聚體31111.10.2* 所有抗體指下述 huIL-17A/F 抗體15E6、15E6FK、30D12、30D12BF、39F12、 39F12A、和 29E8如本文中提到的，結(jié)合親和力是使用本文中，例如實施例5中所描述的測定法來 測定的。如本文中提到的，中和能力是使用本文中，例如實施例7中所描述的小鼠胚胎成纖 維細胞細胞測定法來測定的。在一個優(yōu)選的實施方案中，huIL-17A/IL-17F抗體結(jié)合IL-17A同二聚體、IL-17F 同二聚體和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，而且這些抗體展現(xiàn)(i)至少40pM或更少的 針對IL-17A同二聚體的結(jié)合親和力，(ii)至少IOpM或更少的針對IL-17F同二聚體的結(jié) 合親和力，(iii)至少50pM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的結(jié)合親和力， (iv)至少1. 6nM或更少的針對IL-17A同二聚體的中和能力，(ν)至少1. 7ηΜ或更少的針對 IL-17F同二聚體的中和能力，和(vi)至少1. InM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù) 合物的中和能力。在一個更優(yōu)選的實施方案中，huIL-17A/IL-17F抗體結(jié)合IL-17A同二聚體、 IL-17F同二聚體和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，而且這些抗體展現(xiàn)(i)至少15pM或更 少的針對IL-17A同二聚體的結(jié)合親和力，(ii)至少IOpM或更少的針對IL-17F同二聚體 的結(jié)合親和力，(iii)至少30pM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的結(jié)合親和 力，(iv)至少0. 2nM或更少的針對IL-17A同二聚體的中和能力，(ν)至少1. 2ηΜ或更少的 針對IL-17F同二聚體的中和能力，和(vi)至少0. 2ηΜ或更少的針對IL-17A/IL-17F異二 聚體復(fù)合物的中和能力。在一個優(yōu)選的實施方案中，huIL-17A/IL-17F抗體是15Ε6抗體或與15E6抗體結(jié)合 相同表位或以其它方式與15E6抗體的結(jié)合位點交叉競爭的抗體。在一個更優(yōu)選的實施方 案中，huIL-17A/IL-17F抗體是15Ε6Π(抗體或與15Ε6抗體結(jié)合相同表位或以其它方式與 15Ε6Π(抗體的結(jié)合位點交叉競爭的抗體。在一個最優(yōu)選的實施方案中，huIL-17A/IL-17F 抗體具有結(jié)合上文所述親和力和中和條件，而且與15E6抗體結(jié)合相同表位或以其它方式 與15E6抗體的結(jié)合位點競爭。
優(yōu)選的是，huIL-17A/IL-17F抗體與15E6抗體結(jié)合相同表位或以其它方式與15E6 抗體的結(jié)合位點競爭，而且huIL-17A/IL-17F抗體還結(jié)合IL-17A同二聚體、IL-17F同二聚 體和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物二者，而且這些抗體展現(xiàn)⑴至少40pM或更少的針對 IL-17A同二聚體的結(jié)合親和力，(ii)至少IOpM或更少的針對IL-17F同二聚體的結(jié)合親和 力，(iii)至少50pM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的結(jié)合親和力，(iv)至 少1. 6nM或更少的針對IL-17A同二聚體的中和能力，(ν)至少1. 7ηΜ或更少的針對IL-17F 同二聚體的中和能力，和(vi)至少1. InM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的 中和能力。優(yōu)選的是，huIL-17A/IL_17F抗體與15Ε6Π(抗體結(jié)合相同表位或以其它方式與 15E6FK抗體的結(jié)合位點競爭，而且huIL-17A/IL-17F抗體還結(jié)合IL-17A同二聚體、IL-17F 同二聚體和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，而且這些抗體展現(xiàn)(i)至少15pM或更少的 針對IL-17A同二聚體的結(jié)合親和力，(ii)至少IOpM或更少的針對IL-17F同二聚體的結(jié) 合親和力，(iii)至少30pM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的結(jié)合親和力， (iv)至少0. 2nM或更少的針對IL-17A同二聚體的中和能力，(ν)至少1. 2ηΜ或更少的針對 IL-17F同二聚體的中和能力，和(vi)至少0. 2ηΜ或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù) 合物的中和能力。本發(fā)明的抗體還包括特異性結(jié)合IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F的完全人 的抗體，其中，該抗體在體外展現(xiàn)大于50%的對IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F介導(dǎo) 的促炎性細胞因子生成的抑制。例如，本發(fā)明的抗體展現(xiàn)大于55 %、60 %、65 %、70 %、75 %、 80 %、85 %、90 %、92 %、95 %、97 %、98 %、或 99 % 的對 IL-17 刺激細胞的 IL-6 分泌的抑制。 如本文中使用的，術(shù)語“促炎性細胞因子”指那些促進炎癥和/或與炎癥有關(guān)的免疫調(diào)節(jié)性 細胞因子。促炎性細胞因子和趨化因子包括例如IL-6、IL-8、G-CSFjnGM-CSF。促炎性趨 化因子包括例如 GRO-α、GR0-b、LIX、GCP-2、MIG、IP10、I-TAC、和 MCP-1、RANTES、Eotaxin、 SDF-I、和 MIP3a。本發(fā)明還提供治療或預(yù)防與異常IL-17、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性(例 如異常促炎性細胞因子生成諸如異常IL-6生成)有關(guān)的病理，或減輕與此類病理有關(guān)的癥 狀的方法，這通過對想要此類治療或預(yù)防的受試者施用本發(fā)明的單克隆抗體(例如完全人 的單克隆抗體)來進行。要治療的受試者是例如人。以足以治療、預(yù)防或減輕與病理有關(guān)的 癥狀的量施用單克隆抗體。足以在受試者中治療或預(yù)防病理的單克隆抗體量是例如足以降 低IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F信號傳導(dǎo)(例如IL-17F誘導(dǎo)的一種或多種促炎 性細胞因子(例如IL-6)生成)的量。如本文中使用的，術(shù)語“降低”指本發(fā)明的單克隆抗 體存在下促炎性細胞因子的生成降低，其中生成是例如局部促炎性細胞因子生成(例如炎 癥組織的部位)或全身促炎性細胞因子生成。當(dāng)在本發(fā)明單克隆抗體的存在下促炎性細胞 因子(例如IL-6)生成水平比對照促炎性細胞因子生成水平(即單克隆抗體缺失下促炎性 細胞因子的生成水平)低大于或等于5%、10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、 75%、80%、90%、95%、99%、或 100%時，IL-17F、IL-17A 和 / 或 IL-17A/IL-17F 信號傳導(dǎo) (例如IL-17F誘導(dǎo)的促炎性細胞因子諸如IL-6)降低。使用例如本文中描述的IL-17刺激 的小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)細胞測定法來測量促炎性細胞因子(例如IL-6)生成水平。 本領(lǐng)域技術(shù)人員會領(lǐng)會，促炎性細胞因子生成水平可使用多種測定法來測量，包括例如商品化的ELISA試劑盒。使用本發(fā)明的單克隆抗體(例如完全人的單克隆抗體)治療和/或預(yù)防的病理包 括例如急性炎癥、慢性炎癥(例如與變應(yīng)性狀況和哮喘有關(guān)的慢性炎癥)、自身免疫性疾病 (例如克羅恩氏病、多發(fā)性硬化)、炎性腸病、和移植排斥。依照本發(fā)明的藥物組合物可包括本發(fā)明的抗體和載體。這些藥物組合物可包括在 試劑盒，諸如例如診斷試劑盒中。本發(fā)明還提供可溶性IL-17F蛋白質(zhì)、用于表達IL-17F蛋白質(zhì)的方法、和用于純化 處于可溶性形式的此類蛋白質(zhì)的方法。在一些實施方案中，要治療的病理是一種或多種自身免疫性疾病、炎性病癥和癌 癥。例如但不限于，病理是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、克羅恩氏病、銀屑病、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性 肺病、哮喘、血管發(fā)生和癌癥。依照本發(fā)明的藥物組合物可包括本發(fā)明的抗體和載體。這些藥物組合物可包括在 試劑盒，諸如例如診斷試劑盒中。本領(lǐng)域技術(shù)人員會領(lǐng)會，本發(fā)明的抗體具有多種用途。例如，本發(fā)明的蛋白質(zhì)在病 癥諸如例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、克羅恩氏病、銀屑病、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性肺病、哮喘、血 管發(fā)生和癌癥中用作治療劑來預(yù)防IL-17受體和/或IL-17受體復(fù)合物活化。本發(fā)明的抗 體還用作診斷試劑盒中的試劑或用作診斷工具，或者這些抗體可用于競爭測定法以生成治 療性試劑。發(fā)明詳述本發(fā)明提供特異性結(jié)合IL-17F的單克隆抗體。本發(fā)明進一步提供特異性結(jié)合未 復(fù)合在一起的IL-17F和IL-17A的單克隆抗體(即交叉反應(yīng)性單克隆抗體)。本發(fā)明進一 步提供特異性結(jié)合IL-17F和異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合物(在本文中也稱作IL-17A/ IL-17F異二聚體)的單克隆抗體。本發(fā)明甚至進一步提供結(jié)合IL-17F、IL-17A和異二聚 體IL-17A/IL-17F復(fù)合物的交叉反應(yīng)性單克隆抗體。這些抗體在本文中統(tǒng)稱為“huIL_17A/ F”抗體。所述抗體是例如完全人的抗體。本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合IL-17F，其中該抗體結(jié)合包括人IL-17F的一個或多個 氨基酸殘基的表位。本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合IL-17F和IL-17A 二者，其中該抗體結(jié)合包 括人IL-17F、人IL-17A、或二者的一個或多個氨基酸殘基的表位。本發(fā)明的抗體特異性結(jié) 合IL-17F和異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合物二者，其中該抗體結(jié)合包括人IL-17F、IL-17A、 或二者的一個或多個氨基酸殘基的表位。本發(fā)明的抗體以彡1 μ Μ，例如彡ΙΟΟηΜ，優(yōu)選彡ΙΟηΜ，和更優(yōu)選彡InM的平衡結(jié)合 常數(shù)(Kd)結(jié)合IL-17F表位和/或IL-17A表位。例如，本文中提供的huIL_17A/F抗體展 現(xiàn)大致介于彡InM至約IpM之間的范圍中的Kd。IL-17F的晶體結(jié)構(gòu)揭示該蛋白質(zhì)采取半胱氨酸結(jié)折疊，提示與半胱氨酸結(jié)蛋白質(zhì) 超家族的關(guān)系。然而，IL-17F的半胱氨酸結(jié)基序只利用四個半胱氨酸而非經(jīng)典的六個半胱 氨酸來形成結(jié)。與半胱氨酸結(jié)家族的其它成員一樣，IL-17F也作為與IL-17A的異二聚體 存在。認(rèn)為IL-17A/IL-17F異二聚體經(jīng)由IL-17R和/或多聚體IL-17R/IL-17RC復(fù)合物來 發(fā)信號。最新的證據(jù)顯示了形成IL-17A/IL-17F異二聚體中利用的半胱氨酸殘基與IL-17F 同二聚體形成中利用的半胱氨酸相同。此數(shù)據(jù)提示IL-17F同二聚體或IL-17A/IL-17F異二聚體的受體可結(jié)合二聚體界面處的保守半胱氨酸殘基，與半胱氨酸結(jié)家族中的其它蛋白 質(zhì)一樣。已經(jīng)報告了 IL-17細胞因子家族的眾多免疫調(diào)節(jié)功能，大概是由于它們對許多免 疫信號傳導(dǎo)分子的誘導(dǎo)。IL-17A和IL-17F共享非常相似的生物學(xué)功能。二者促進極其多 種細胞(包括成纖維細胞、角質(zhì)形成細胞、巨噬細胞、上皮細胞和內(nèi)皮細胞)分泌促炎性細 胞因子(例如 IL-6、IL-8、G-CSFJP GM-CSF)、趨化因子(例如 GRO- α、GR0_b、LIX、GCP-2、 MIG、IP10、I-TAC、和 MCP-l、RANTES、Eotaxin、SDF-l、和 MIP3a)和前列腺素類(例如 PGE2)。 二者還顯示出調(diào)節(jié)軟骨基質(zhì)周轉(zhuǎn)。IL-17F還具有與IL-17A截然不同的生物學(xué)功能，諸如刺 激T細胞和外周血單個核細胞(PBMC)增殖和活化，及抑制血管發(fā)生的能力。本發(fā)明的huIL_17A/F抗體用來調(diào)控、阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式 干擾IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的生物學(xué)活性。IL-17F、IL-17A 和/或IL-17A/IL-17F的生物學(xué)活性包括例如結(jié)合IL-17R、IL-17RC和/或多聚體IL-17R/ IL-17RC受體復(fù)合物，及誘導(dǎo)靶細胞中的細胞因子和/或趨化因子表達(例如IL-6、IL-8、 G-CSF、GM-CSF、GRO-α、GR0_b、LIX、GCP-2、MIG、IP10、I-TAC、禾口 MCP-I、RANTES、Eotaxin、 SDF-1、和MIP3a)。例如，通過部分或完全調(diào)控、阻斷、抑制、降低、拮抗、中和、或以其它方式 干擾IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F結(jié)合其受體，或者以其它方式部分或完全調(diào)控、 阻斷、抑制、降低、拮抗、中和IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F復(fù)合物信號傳導(dǎo)活性， huIL-17A/F抗體完全或部分抑制IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F生物學(xué)活性。當(dāng)IL-17F抗體存在下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平同與本 文所述IL-17F抗體的結(jié)合缺失下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平相比 降低至少95%，例如96%,97%,98%,99%^ 100%時，認(rèn)為huIL_17A/F完全調(diào)控、阻斷、 抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F生物學(xué)活 性。當(dāng)IL-17F抗體存在下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平同與本文所 述IL-17F抗體的結(jié)合缺失下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平相比降低 小于 95%，例如 10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、75%、80%、85% 或 90% 時，認(rèn)為 huIL-17A/F抗體部分調(diào)控、阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾IL-17F、IL-17A 和 / 或 IL-17A/IL-17F 活性。當(dāng)IL-17F抗體存在下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平同與本 文所述IL-17F抗體的結(jié)合缺失下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平相比 降低至少95%，例如96%,97%,98%,99%^ 100%時，認(rèn)為huIL_17A/F交叉反應(yīng)性抗體 完全調(diào)控、阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/ IL-17F活性。當(dāng)IL-17F抗體存在下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平同 與本文所述IL-17F抗體的結(jié)合缺失下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平 相比降低小于 95%，例如 10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、75%、80%、85%或 90% 時，認(rèn)為IL-17F交叉反應(yīng)性抗體部分調(diào)控、阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾 IL-17F、IL-17A 和 / 或 IL-17A/IL-17F 活性。定義除非另有定義，連同本發(fā)明使用的科學(xué)和技術(shù)術(shù)語應(yīng)具有本領(lǐng)域普通技術(shù)人員普 遍理解的含義。另外，除非上下文另有要求，單數(shù)術(shù)語應(yīng)包括復(fù)數(shù)，而且復(fù)數(shù)術(shù)語應(yīng)包括單數(shù)。通常，連同本文中描述的細胞和組織培養(yǎng)、分子生物學(xué)、及蛋白質(zhì)和寡或多核苷酸化學(xué) 和雜交使用的命名及它們的技術(shù)就是本領(lǐng)域中眾所周知的且普遍使用的那些。使用標(biāo)準(zhǔn) 技術(shù)來進行重組DNA、寡核苷酸合成、及組織培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化(例如電穿孔、脂轉(zhuǎn)染)。酶促反 應(yīng)和純化技術(shù)是依照制造商的說明書或者如本領(lǐng)域普遍實現(xiàn)或本文所述實施的。在先技 術(shù)和規(guī)程通常是依照本領(lǐng)域公知的常規(guī)方法及如本說明書中引用和討論的各種一般的和 更具體的參考文獻所述實施的。參見例如Sambrook等Molecular Cloning :A Laboratory Manual (第 2 版，Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N. Y. (1989))。連同本文中描述的分析化學(xué)、合成有機化學(xué)、及醫(yī)學(xué)和藥學(xué)化學(xué)使用的命名 及它們的實驗室規(guī)程和技術(shù)就是本領(lǐng)域中眾所周知的且普遍使用的那些。使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)來 進行化學(xué)合成、化學(xué)分析、藥物制備、配制、和投遞、及患者治療。如依照本公開內(nèi)容使用的，除非另外指明，下述術(shù)語應(yīng)理解為具有下述含義如本文中使用的，術(shù)語白介素-17A、IL-17A、IL17A、IL-17、IL17、CTLA8、CTLA-8、 細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原8和白介素-17A前體同義且可互換使用。每一種這些術(shù)語 指同二聚體蛋白質(zhì)，除非另外指明。如本文中使用的，術(shù)語白介素-17F、IL-17F、IL17F、ML-1、ML1、白介素_24、IL_24、 ILM和白介素-17F前體同義且可互換使用。每一種這些術(shù)語指同二聚體蛋白質(zhì)，除非另外 指明。如本文中使用的，術(shù)語“抗體”指免疫球蛋白分子和免疫球蛋白(Ig)分子的免疫 學(xué)活性部分，即含有特異性結(jié)合(與...免疫反應(yīng))抗原的抗原結(jié)合位點的分子。“特異性 結(jié)合”或“與...免疫反應(yīng)”或“針對”意味著抗體與期望抗原的一個或多個抗原決定簇反 應(yīng)且不與其它多肽反應(yīng)或以低得多的親和力(Kd> 10_6)結(jié)合?？贵w包括但不限于多克隆、 單克隆、嵌合、dAb (結(jié)構(gòu)域抗體)、單鏈、Fab、Fab，和F(ab' )2片段、scFv、和Fab表達文 庫。已知基本的抗體結(jié)構(gòu)單元包含四聚體。每個四聚體由相同的兩對多肽鏈構(gòu)成，每 對有一條“輕鏈”(約25kDa)和一條“重鏈”(約50-70kDa)。每條鏈的氨基端部分包括主 要負責(zé)抗原識別，約100至110或更多個氨基酸的可變區(qū)。每條鏈的羧基端部分限定主要負 責(zé)效應(yīng)器功能的恒定區(qū)。一般而言，自人類獲得的抗體分子涉及IgG、IgM、IgA、IgE和IgD 任一類，它們彼此因分子中存在的重鏈的性質(zhì)而不同。某些類還有亞類，諸如IgG1UgG2、和 其它。另外，在人類中，輕鏈可以是κ鏈或λ鏈。如本文中使用的，術(shù)語“單克隆抗體”(MAb)或“單克隆抗體組合物”指一群抗體分 子只含有一種分子種類的抗體分子，其由唯一的輕鏈基因產(chǎn)物和唯一的重鏈基因產(chǎn)物組成 的。具體而言，單克隆抗體的互補決定區(qū)(CDR)在該群的所有分子中是相同的。MAb含有能 夠與抗原的特定表位免疫反應(yīng)的抗原結(jié)合位點，其特征在于獨特的對它的結(jié)合親和力。一般而言，自人類獲得的抗體分子涉及IgG、IgM、IgA、IgE和IgD任一類，它們彼 此因分子中存在的重鏈的性質(zhì)而不同。某些類還有亞類，諸如IgG1UgG2、和其它。另外，在 人類中，輕鏈可以是κ鏈或λ鏈。術(shù)語“抗原結(jié)合位點”或“結(jié)合部分”指免疫球蛋白分子中參與抗原結(jié)合的部分。 抗原結(jié)合位點是由重鏈("H")和輕鏈(“L" )Ν端可變(“V")區(qū)氨基酸殘基形成的。 重鏈和輕鏈V區(qū)內(nèi)稱作“高變區(qū)”的三個高度多樣的區(qū)段插在稱作“框架區(qū)”或"FR"的更保守的側(cè)翼區(qū)段之間。如此，術(shù)語"FR"指免疫球蛋白中在高變區(qū)之間及附近天然找到的 氨基酸序列。在抗體分子中，輕鏈的三個高變區(qū)和重鏈的三個高變區(qū)在三維空間中相對于 彼此部署以形成抗原結(jié)合表面?？乖Y(jié)合表面與所結(jié)合抗原的三維表面互補，而且每一條 重鏈和輕鏈的三個高變區(qū)稱作“互補決定區(qū)”或“⑶R”。將氨基酸指派至每個域依照Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest(National Institutes of Health, Bethesda，Md. (1987 禾口 1991))、或 Chothia & Lesk J.Mol. Biol. 196 :901-917(1987), Chothia 等 Nature 342:878-883(1989)的定義。如本文中使用的，術(shù)語“表位”包括任何能夠特異性結(jié)合免疫球蛋白或其片段或 者T細胞受體的蛋白質(zhì)決定簇。術(shù)語“表位”包括任何能夠特異性結(jié)合免疫球蛋白或T細 胞受體的蛋白質(zhì)決定簇。表位決定簇通常由分子諸如氨基酸或糖側(cè)鏈的化學(xué)活性表面成組 組成，而且通常具有特定的三維結(jié)構(gòu)特征，以及特定的電荷特征。當(dāng)解離常數(shù)< ΙμΜ，例如 (ΙΟΟηΜ，優(yōu)選彡IOnM和更優(yōu)選彡InM時，就說抗體特異性結(jié)合抗原。如本文中使用的，術(shù)語“免疫學(xué)結(jié)合”和“免疫學(xué)結(jié)合特性”指免疫球蛋白分子和 該免疫球蛋白對之特異性的抗原之間發(fā)生的非共價相互作用類型。免疫學(xué)結(jié)合相互作用 的強度或親和力可以在相互作用的解離常數(shù)(Kd)方面表述，其中較小的Kd代表較大的親 和力。選定多肽的免疫學(xué)結(jié)合特性可以使用本領(lǐng)域公知的方法來量化。一種此類方法需 要測量抗原結(jié)合位點/抗原復(fù)合物形成和解離的速率，其中那些速率取決于復(fù)合配偶的濃 度、相互作用的親和力、和幾何參數(shù)，它們以兩個方向同等地影響速率。如此，“結(jié)合速率常 數(shù)”(κ。η)和“解離速率常數(shù)”(K。ff)可通過計算濃度及實際結(jié)合和解離速率來確定(參見 Nature 361:186-87(1993))。比K。ff/K。n能夠消除所有不涉及親和力的參數(shù)，而且等于解離 常數(shù) Kd (—般參見 Davies 等(1990) Annual Rev Biochem 59:439-473)。當(dāng)平衡結(jié)合常數(shù) (Kd) ( ΙμΜ，優(yōu)選彡ΙΟΟηΜ，更優(yōu)選彡ΙΟηΜ，和最優(yōu)選彡IOOpM至約IpM時，如通過測定法 諸如放射性配體結(jié)合測定法或本領(lǐng)域技術(shù)人員知道的類似測定法測量的，就說本發(fā)明的抗 體特異性結(jié)合IL-17F同二聚體、IL-A同二聚體和/或IL-17A/IL-17F異二聚體。如本文中使用的，術(shù)語“分離的多核苷酸”應(yīng)意味著基因組、cDNA、或合成起源或者 其一些組合的多核苷酸，由于其起源，該“分離的多核苷酸”(1)與在自然界中找到該“分離 的多核苷酸”時的多核苷酸的整個或部分不結(jié)合，(2)可操作連接在自然界中不與其連接的 多核苷酸，或C3)在自然界中不作為更大序列的一部分存在。依照本發(fā)明的多核苷酸包括 編碼 SEQ ID NO :2、6、8、10、14、18、20、24、28、32、34、38、44、48 或 54 中呈現(xiàn)的重鏈免疫球蛋 白分子的核酸分子和編碼SEQ ID NO =SEQ ID NO :4、12、16、22、洸、30、36、40、46或56中呈 現(xiàn)的輕鏈免疫球蛋白分子的核酸分子。本文中提到的術(shù)語“分離的蛋白質(zhì)”意味著cDNA、重組RNA、或合成起源或者其一 些組合的蛋白質(zhì)，由于其起源或衍生來源，該“分離的蛋白質(zhì)”(1)與在自然界中找到的蛋白 質(zhì)不結(jié)合，(2)不含來自相同來源的其它蛋白質(zhì)，例如不含海洋蛋白質(zhì)，(3)由來自不同物 種的細胞表達，或(4)在自然界中不存在。術(shù)語“多肽”在本文中作為上位術(shù)語用于指天然蛋白質(zhì)、多肽序列的片段、或類似 物。因此，天然蛋白質(zhì)片段、和類似物是上位多肽的下位。依照本發(fā)明的多肽包含SEQ ID NO :2、6、8、10、14、18、20、24、28、32、34、38、44、48、或54中呈現(xiàn)的重鏈免疫球蛋白分子和 SEQ ID NO =SEQ ID NO :4、12、16、22、26、30、36、40、46、50 或 56 中呈現(xiàn)的輕鏈免疫球蛋白分子，以及由包含重鏈免疫球蛋白分子和輕鏈免疫球蛋白分子(諸如κ輕鏈免疫球蛋白分 子)的組合形成的抗體分子，反之亦然，以及它們的片段和類似物。如本文中使用的，術(shù)語“天然存在的”在應(yīng)用于對象時指能在自然界中找到對象的 事實。例如，在生物體(包括病毒)中存在的，能自自然界中的來源分離及尚未在實驗室中 人為地或以其它方式有意修飾的多肽或多核苷酸序列就是天然存在的。如本文中使用的，術(shù)語“可操作連接”指所描述的各成分的位置處于容許它們以它 們的預(yù)定方式發(fā)揮功能的關(guān)系。與編碼序列“可操作連接”的控制序列是以這樣一種方式 連接的，編碼序列的表達在與控制序列相容的條件下實現(xiàn)。如本文中使用的，術(shù)語“控制序列”指實現(xiàn)與它們連接的編碼序列表達和加工所必 需的多核苷酸序列。此類控制序列的性質(zhì)隨宿主生物體而不同，在原核生物中，此類控制序 列通常包括啟動子、核糖體結(jié)合位點、和轉(zhuǎn)錄終止序列，在真核生物中，此類控制序列通常 包括啟動子和轉(zhuǎn)錄終止序列。術(shù)語“控制序列”意圖最少包括其存在對于表達和加工是至關(guān) 重要的所有成分，而且還可包括其存在是有利的別的成分，例如前導(dǎo)序列和融合配偶序列。 如本文中提到的，術(shù)語“多核苷酸”意味著長度至少10個堿基的核苷酸(或是核糖核苷酸或 脫氧核苷酸或任一核苷酸類型的修飾形式)的聚合物。該術(shù)語包括單鏈和雙鏈形式的DNA。本文中提到的術(shù)語“寡核苷酸”包括通過天然存在的和非天然存在的寡核苷酸連 接而連接在一起的天然存在的和經(jīng)過修飾的核苷酸。寡核苷酸是通常包含200個堿基或更 少長度的多核苷酸子集。優(yōu)選的是，寡核苷酸長度為10至60個堿基，而且長度最優(yōu)選12、 13、14、15、16、17、18、19、或20至40個堿基。寡核苷酸通常是單鏈的，例如用作探針，盡管 寡核苷酸可以是雙鏈的，例如用于構(gòu)建基因突變體。本發(fā)明的寡核苷酸是有義或反義寡核 苷酸。本文中提到的術(shù)語“天然存在的核苷酸”包括脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸。 本文中提到的術(shù)語“經(jīng)過修飾的核苷酸”包括具有經(jīng)過修飾的或取代的糖基團等等的 核苷酸。本文中提到的術(shù)語“寡核苷酸連接”包括寡核苷酸連接，諸如硫代磷酸酯、二 硫代憐酸酉旨、phosphoroselerloate、phosphorodiselenoate、phosphoroanilothioate> phoshoraniladate、phosphoronmidate、等等。參見例如LaPlanche等，Nucl. Acids Res. 14 9081(1986) ；Stec 等，J. Am. Chem. Soc. 106 :6077 (1984) ；Stein 等，Nucl. Acids Res. 16 3209(1988) ；Zon 等，Anti Cancer Drug Design 6:539(1991) ；Zon 等，Oligonucleotides and Analogues :A Practical Approach, pp. 87-108(F. Eckstein 編，Oxford University Press, Oxford England(1991)) ；Stec 等，美國專利 No. 5，151，510 ；Uhlmann 和 Peyman， Chemical Reviews 90:543(1990)。如果需要，寡核苷酸可包括用于檢測的標(biāo)記物。本文中提到的術(shù)語“選擇性雜交”意味著可檢測和特異性結(jié)合。依照本發(fā)明的多 核苷酸、寡核苷酸及其片段與核酸鏈在使對非特定核酸的可檢測結(jié)合的可評估量最小化的 雜交和清洗條件下選擇性雜交。高嚴(yán)格性條件可用于實現(xiàn)本領(lǐng)域已知的和本文中討論的 選擇性雜交條件。通常，本發(fā)明的多核苷酸、寡核苷酸、和片段與感興趣合適序列之間的核 酸序列同源性會是至少80 %，而且更通常優(yōu)選越來越高的同源性，至少85 %、90 %、95 %、 99%、和100%。如果兩種氨基酸序列的序列之間有部分或完全同一性，那么它們是同源 的。例如，當(dāng)兩種序列為最大匹配而比對時，85%同源性意味著85%的氨基酸是相同的。在 使匹配最大化時容許缺口(所匹配的兩種序列任一中)，缺口長度優(yōu)選5或更少，更優(yōu)選2或更少?；蛘?優(yōu)選，如果使用程序ALIGN及突變數(shù)據(jù)矩陣和缺口罰分6或更大，兩種蛋 白質(zhì)序列(或自它們衍生的、長度為至少30個氨基酸的多肽序列)具有大于5(以標(biāo)準(zhǔn)偏 差單位計)的比對得分，那么它們是同源的，如此術(shù)語中本文中所使用的。參見Dayhoff， Μ. 0. , in Atlas of Protein Sequence and Structure, pp. 101-110(Volume 5, National Biomedical Research Foundation(1972))及該卷的增刊2第1-10頁。如果兩種序列或 其部分的序列在使用ALIGN程序最佳比對時大于或等于50%相同，那么它們是更優(yōu)選同源 的。術(shù)語“對應(yīng)”在本文中用于表示多核苷酸序列與整個或部分參照多核苷酸序列同源(即 相同，不是嚴(yán)格進化相關(guān)的)，或者多肽序列與參照多肽序列相同。與之形成對照，術(shù)語“互 補”在本文中用于表示互補序列與整個或部分參照多核苷酸序列同源。舉例而言，核苷酸序 列“TATAC”與參照序列“TATAC”對應(yīng)，而與參照序列“GTATA”互補。下述術(shù)語用于描述兩種或更多種多核苷酸或氨基酸序列之間的序列關(guān)系“參照 序列”、“比較窗口”、“序列同一性”、“序列同一性百分比”、和“實質(zhì)性同一性”?！皡⒄招蛄小?指用作序列比較之基礎(chǔ)的限定序列，參照序列可以是更大序列的子集，例如，序列表中給出 的全長cDNA或基因序列的區(qū)段，或者可以包含完整cDNA或基因序列。通常，參照序列長度 為至少18個核苷酸或至少6個氨基酸，常常長度為至少M個核苷酸或8個氨基酸，而且常 常長度為至少48個核苷酸或至少16個氨基酸。由于兩種多核苷酸或氨基酸序列可各自 (1)包含在兩種分子之間相似的序列(即完整多核苷酸或氨基酸序列的一部分)，而且(2) 可進一步包含在兩種多核苷酸或氨基酸序列之間不同的序列，因此兩種(或更多種)分子 之間的序列比較通常通過在“比較窗口 ”上比較兩種分子的序列以鑒定和比較局部區(qū)域的 序列相似性來實施。如本文中使用的，“比較窗口”指至少18個連續(xù)核苷酸位置或6個氨 基酸的概念性區(qū)段，其中可以將多核苷酸序列或氨基酸序列與至少18個連續(xù)核苷酸或6氨 基酸之序列的參照序列比較且其中對于兩種序列的最佳比對，多核苷酸序列中在比較窗口 中的部分可包含與參照序列(不包含添加或刪除)相比20%或更少的添加、刪除、替代、等 等(即缺口)。可通過Smith和Waterman Adv. Appl. Math. 2 :482 (1981)的局部同源性算 法、通過Needleman和Wunsch J. Mol. Biol. 48 :443(1970)的特異性比對算法、通過Pearson 禾口 Lipman Proc. Natl. Acad. Sci. (U. S. A.) 85 :2444 (1988)的相似性搜索方法、通過這些 算法的計算機化執(zhí)行(Wisconsin Genetics Software Package Release 7. 0 (Genetics Computer Group, 575 ScienceDr. , Madison, Wis·)、Geneworks、或 MacVector 軟件包中的 GAP、BESTFIT、FASTA、和TFASTA)、或通過審查來進行最佳序列比對以進行比對比較窗口，并 選擇通過各種方法產(chǎn)生的最佳比對(即導(dǎo)致比較窗口上最高的百分比同源性)。術(shù)語“序列同一性”意味著兩種多核苷酸或氨基酸序列在比較窗口上是相同的 (即以核苷酸或殘基計)。術(shù)語“百分比序列同一性”是如下計算得到的，即在比較窗口上比 較兩種最佳比對的序列，確定兩種序列中出現(xiàn)相同核酸堿基(例如A，T，C，G，U或I)或殘 基的位置數(shù)目以產(chǎn)生匹配位置數(shù)目，將匹配位置數(shù)目除以比較窗口中的位置總數(shù)(即窗口 大小)，并將結(jié)果乘以100以產(chǎn)生百分比序列同一性。如本文中使用的，術(shù)語“實質(zhì)性同一 性”表示多核苷酸或氨基酸序列的一項特征，其中多核苷酸或氨基酸包含在至少18個核苷 酸(6個氨基酸)位置的比較窗口上、通常在至少M-48個核苷酸(8-16個氨基酸)位置的 窗口上與參照序列相比具有至少85%序列同一性、優(yōu)選至少90至95%序列同一性、更通常 至少99%序列同一性的序列，其中百分比序列同一性是通過將參照序列與如下的序列比較而計算得到的，該序列可包括在比較窗口上占參照序列合計20%或更少的刪除或添加。參 照序列可以是更大序列的子集。如本文中使用的，20種常規(guī)氨基酸及其縮寫遵循常規(guī)用法。參見Immimology-A Synthesis(2nd Edition,Ε. S. Golub禾口D. R. Gren,Eds. ,Sinauer Associates,Sunderland7 Mass. (1991))。20種常規(guī)氨基酸的立體異構(gòu)體(例如D-氨基酸)、非天然氨基酸諸如α-， α-二取代的氨基酸、N-烴基氨基酸、乳酸、和其它非常規(guī)氨基酸也可以是本發(fā)明的多肽的 合適成分。非常規(guī)氨基酸的例子包括4-羥基脯氨酸、Y -羧基谷氨酸、ε -N, N, N-三甲基 賴氨酸、ε -N-乙?；嚢彼?、0-磷酸絲氨酸、N-乙酰基絲氨酸、N-甲酰基甲硫氨酸、3-甲 基組氨酸、5-羥基賴氨酸、σ -N-甲基精氨酸、和其它相似氨基酸和亞氨基酸(例如4-羥基 脯氨酸)。在本文中使用的多肽符號中，左手方向是氨基端方向，而右手方向是羧基端方向， 與標(biāo)準(zhǔn)用法和慣例一致。類似地，除非另有規(guī)定，單鏈多核苷酸序列的左手末端是5'末端，雙鏈多核苷酸 序列的左手方向稱作5'方向。初生RNA轉(zhuǎn)錄物的5'至3'添加的方向稱作轉(zhuǎn)錄方向，DNA 鏈上與RNA具有相同序列且位于RNA轉(zhuǎn)錄物5'末端的5'的序列區(qū)稱作“上游序列”，DNA 鏈上與RNA具有相同序列且位于RNA轉(zhuǎn)錄物3'末端的3'的序列區(qū)稱作“下游序列”。在應(yīng)用于多肽時，術(shù)語“實質(zhì)性同一性”意味著兩種肽序列在最佳比對時(諸如通 過程序GAP或BESTFIT，使用缺省缺口權(quán)重)共享至少80 %序列同一性、優(yōu)選至少90 %序列 同一性、更優(yōu)選至少95%序列同一性、和最優(yōu)選至少99%序列同一性。優(yōu)選的是，不相同的殘基位置因保守氨基酸替代而不同。保守氨基酸替代指具有相似側(cè)鏈的殘基的互換。例如，一組具有脂肪族側(cè)鏈的氨 基酸是甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、和異亮氨酸；一組具有脂肪族-羥基側(cè)鏈的氨基酸 是絲氨酸和蘇氨酸；一組具有含酰胺側(cè)鏈的氨基酸是天冬酰胺和谷氨酰胺；一組具有芳香 族側(cè)鏈的氨基酸是苯丙氨酸、酪氨酸、和色氨酸；一組具有堿性側(cè)鏈的氨基酸是賴氨酸、精 氨酸、和組氨酸；而一組具有含硫側(cè)鏈的氨基酸是半胱氨酸和甲硫氨酸。優(yōu)選的保守氨基酸 替代組是纈氨酸-亮氨酸-異亮氨酸、苯丙氨酸-酪氨酸、賴氨酸-精氨酸、苯丙氨酸-纈 氨酸、谷氨酸-天冬氨酸、和天冬酰胺-谷氨酰胺。如本文中討論的，本發(fā)明涵蓋抗體或免疫球蛋白分子的氨基酸序列中的次要變 異，前提是氨基酸序列中的變異維持至少75 %，更優(yōu)選至少80 %、90 %、95 %，且最優(yōu)選 99%。具體而言，涵蓋保守氨基酸替換。保守替換是那些在它們的側(cè)鏈中相關(guān)的氨基酸家 族內(nèi)發(fā)生的。通常將遺傳編碼的氨基酸分入下述家族(1)酸性氨基酸是天冬氨酸、谷氨 酸；( 堿性氨基酸是賴氨酸、精氨酸、組氨酸；C3)非極性氨基酸是丙氨酸、纈氨酸、亮氨 酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸；而(4)不帶電荷的極性氨基酸是甘氨 酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸。親水性氨基酸包括精氨酸、天 冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、組氨酸、賴氨酸、絲氨酸、和蘇氨酸。疏水性氨基酸包 括丙氨酸、半胱氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、酪氨酸和纈 氨酸。其它氨基酸家族包括(i)絲氨酸和蘇氨酸，它們是脂肪族-羥基家族；(ii)天冬酰 胺和谷氨酰胺，它們是含酰胺家族；(iii)丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸，它們是脂肪 族家族；及(iv)苯丙氨酸、色氨酸、和酪氨酸，它們是芳香族家族。例如，合理預(yù)期用異亮氨 酸或纈氨酸對亮氨酸、用谷氨酸對天冬氨酸、用絲氨酸對蘇氨酸的分離的替換，或者用結(jié)構(gòu)相關(guān)的氨基酸對氨基酸的相似替換不會對所得分子的結(jié)合或特性產(chǎn)生重大影響，尤其是如 果該替換不涉及框架位點內(nèi)的氨基酸的話。通過測定多肽衍生物的比活性，可容易地確定 氨基酸變化是否產(chǎn)生功能性肽。本文中詳細描述測定法。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能容易地制 備抗體或免疫球蛋白分子的片段或類似物。片段或類似物的優(yōu)選氨基端和羧基端存在于功 能域的邊界附近。可通過將核苷酸和/或氨基酸序列數(shù)據(jù)與公共的或私有的序列數(shù)據(jù)庫比 較來鑒定結(jié)構(gòu)和功能域。優(yōu)選的是，使用計算機化比較方法來鑒定結(jié)構(gòu)和/或功能已知的 其它蛋白質(zhì)中存在的序列基序或預(yù)測蛋白質(zhì)構(gòu)象域。鑒定折疊成已知的三維結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì) 序列的方法是已知的。253:164(1991)。如此，前述例子證明本領(lǐng)域技術(shù) 人員能認(rèn)出可用于限定依照本發(fā)明的結(jié)構(gòu)和功能域的序列基序和結(jié)構(gòu)構(gòu)象。優(yōu)選的氨基酸替代是那些⑴降低對蛋白水解的易感性的，⑵降低對氧化的易 感性的，(3)改變形成蛋白質(zhì)復(fù)合物的結(jié)合親和力的，(4)改變結(jié)合親和力的，及(4)賦予或 修飾此類類似物的其它物化或功能特性的。類似物可包括各種序列與天然存在肽序列不同 的突變蛋白。例如，可以在天然存在序列中(優(yōu)選在多肽中形成分子間接觸的結(jié)構(gòu)域以外 的部分中)進行單一或多重氨基酸替代(優(yōu)選保守氨基酸替代)。保守氨基酸替代不應(yīng)實 質(zhì)性改變親本序列的結(jié)構(gòu)特征(例如替換氨基酸不應(yīng)趨于打斷親本序列中存在的螺旋，或 破壞親本序列特征性的其它類型二級結(jié)構(gòu))。本領(lǐng)域公認(rèn)的多肽二級和三級結(jié)構(gòu)的例子記 載于Proteins, Structures and Molecular Principles (Creighton,Ed. ,W. H. Freeman and Company,New York(1984)) ；Introduction to Protein Structure(C. Branden禾口 J. Tooze, eds. ， Garland Publishing, New York, N. Y. (1991)) ；R Thornton et at. Nature 354 105(1991)。如本文中使用的，術(shù)語“多肽片段”指如下的多肽，其具有氨基端和/或羧基端刪 除，但是其中剩余氨基酸序列與自例如全長cDNA序列推導(dǎo)的天然存在序列中的相應(yīng)位置 相同。片段通常長至少5、6、8或10個氨基酸，優(yōu)選長至少14個氨基酸，更優(yōu)選長至少20 個氨基酸，通常長至少50個氨基酸，且甚至更優(yōu)選長至少70個氨基酸。如本文中使用的， 術(shù)語“類似物”指由至少25個氨基酸的區(qū)段構(gòu)成的多肽，其與推導(dǎo)氨基酸序列的一部分具 有實質(zhì)性同一性且在合適的結(jié)合條件下對單獨的IL-17F或IL-17A/IL-17F異二聚體(即 復(fù)合物)有特異性結(jié)合。通常，多肽類似物相對于天然存在序列包含保守氨基酸替代(或 添加或刪除)。類似物通常長至少20個氨基酸，優(yōu)選長至少50個氨基酸或更長，而且常常 可以與全長天然存在肽一樣長。肽類似物作為與模板肽具有類似特性的非肽藥物普遍用于制藥工業(yè)。這些類型的 非肽化合物稱作“肽模擬物”或“模擬肽”。Fauchere, J. Adv. Drug Res. 15 =29(1986) ；Veber 和 Freidinger TINS p. 392(1985)；及 Evans 等 J. Med. Chem. 30 :1229 (1987)。常常借助計 算機化分子建模來開發(fā)此類化合物。在結(jié)構(gòu)上與藥學(xué)有用肽相似的肽模擬物可用于產(chǎn)生等 同的治療或預(yù)防效果。通常，模擬肽在結(jié)構(gòu)上與范本多肽(即具有生化特性或藥理學(xué)活性 的多肽)諸如人抗體相似，但是有一個或多個肽連接任選通過本領(lǐng)域公知的方法被選自下 組的連接替換--CH2NH—、-CH2S-, -CH2-CH2-, -CH = CH—(順式和反式)、-COCH2-, CH(OH)CH2-、和一CH2S0--。用同一類型的D-氨基酸(例如D-賴氨酸替換L-賴氨酸) 對共有序列的一個或多個氨基酸的系統(tǒng)替代可用于生成更穩(wěn)定的肽。另外，可通過本領(lǐng) 域已知的方法來生成包含共有序列或基本上相同的共有序列變異的受約束的肽(Rizo和Gierasch Ann. Rev. Biochem. 61 :387(1992))；例如通過添加內(nèi)部半胱氨酸殘基，其能夠形 成分子內(nèi)二硫橋，使肽環(huán)化。術(shù)語“藥劑/試劑”在本文中用于表示化學(xué)化合物、化學(xué)化合物的混合物、生物學(xué) 高分子、或自生物學(xué)材料制得的提取物。如本文中使用的，術(shù)語“標(biāo)記”或“標(biāo)記的”指摻入可檢測標(biāo)志物，例如通過摻入放 射性標(biāo)記的氨基酸或?qū)⒛芡ㄟ^經(jīng)標(biāo)記親合素(例如含有能通過光學(xué)方法或量熱法來檢測 的熒光標(biāo)志物或酶促活性的鏈霉親合素)來檢測的生物素模塊附著至多肽。在某些情況 中，標(biāo)記物或標(biāo)志物還可以是治療性的。本領(lǐng)域知道而且可以使用多種標(biāo)記多肽和糖蛋白 的方法。用于多肽的標(biāo)記物的例子包括但不限于下述放射性同位素或放射性核素(例如 3H、14C、15N、35S、9°Y、99TC、mIn、125I、131I)、-*#Etl (例如 FITC、羅丹明、鑭系元素磷光體)、 酶標(biāo)記物(例如辣根過氧化物酶、P"半乳糖苷酶、螢光素酶、堿性磷酸酶)、化學(xué)發(fā)光、生物 素基團、受到二級報告物識別的預(yù)定確定的多肽表位(例如亮氨酸拉鏈對序列、二抗的結(jié) 合位點、金屬結(jié)合域、表位標(biāo)簽)。在一些實施方案中，通過各種長度的間隔物臂來附著標(biāo)記 物以降低潛在的位阻。如本文中使用的，術(shù)語“藥劑或藥物”指在正確施用于患者時能夠誘 導(dǎo)期望的治療效果的化學(xué)化合物或組合物。本文中的其它化學(xué)術(shù)語依照本領(lǐng)域的常規(guī)用法使用，如The McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(Parker,S. ,Ed. ,McGraw-Hi11,San Francisco(1985))例 示的。術(shù)語“抗腫瘤劑”在本文中用于指具有抑制人類中新生物(腫瘤)形成或發(fā)展的 功能特性的藥劑，特別是惡性(癌性)損害，諸如癌瘤、肉瘤、淋巴瘤、或白血病。對轉(zhuǎn)移的 抑制通常是抗腫瘤劑的一項特性。如本文中使用的，“基本上純的”意味著對象種類是存在的主要種類(即以摩爾 計，它比組合物中的任何其它各種類更豐富)，而且優(yōu)選的是，基本上純的級分是如下的組 合物，其中對象種類構(gòu)成存在的所有高分子種類的至少約50% (以摩爾計)。通常，基本上純的組合物會包含組合物中存在的所有高分子種類的超過約80%， 更優(yōu)選超過約85%、90%、95%、和99%。最優(yōu)選的是，將對象種類純化至本質(zhì)上同質(zhì)(通 過常規(guī)檢測方法在組合物中檢測不到污染物種類)，其中該組合物本質(zhì)上由單一高分子種 類組成。自身免疫性疾病包括例如獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS，這是一種具有自身免疫 性成分的病毒性疾病)、斑禿、強直性脊柱炎、抗磷脂綜合征、自身免疫性阿狄森氏病、自身 免疫性溶血性貧血、自身免疫性肝炎、自身免疫性內(nèi)耳病(AIED)、自身免疫性淋巴細胞增生 綜合征(ALPS)、自身免疫性血小板減少性紫癜(ATP)、貝切特氏病、心肌病、口炎性腹瀉-皰 疹樣皮炎；慢性疲勞免疫功能障礙綜合征(CFIDS)、慢性炎性脫髓鞘性多神經(jīng)病(CIPD)、瘢 痕性類天皰瘡、冷凝集素病、crest綜合征、克羅恩氏病、德戈斯氏病、青少年皮肌炎、盤狀 狼瘡、特發(fā)性混合性冷球蛋白血癥、纖維肌痛-纖維肌炎、格雷夫斯氏病、格巴二氏綜合癥、 橋本氏甲狀腺炎、特發(fā)性肺纖維化、特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、IgA腎病、胰島素依賴 性糖尿病、青少年慢性關(guān)節(jié)炎(斯提耳氏病)、青少年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、梅尼爾氏病、混合性 結(jié)締組織病、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、惡性貧血、結(jié)節(jié)性多動脈炎、多軟骨炎、多腺性綜合 征、風(fēng)濕性多肌痛、多肌炎和皮肌炎、原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、原發(fā)性膽汁性肝硬化、銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、雷諾氏現(xiàn)象、萊特爾氏綜合征、風(fēng)濕熱、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、結(jié)節(jié)病、硬皮病 (進行性系統(tǒng)性硬化病(PSS)，也稱作系統(tǒng)性硬化病(SS))、斯耶格蘭氏綜合癥、僵人綜合 征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、高安動脈炎、顳動脈炎/巨細胞性動脈炎、潰瘍性結(jié)腸炎、葡萄膜炎、 白癜風(fēng)和韋格納氏肉芽腫病。炎性病癥包括例如慢性和急性炎性病癥。炎性病癥的例子包括阿爾茨海默氏病、 哮喘、特應(yīng)性變態(tài)反應(yīng)、變態(tài)反應(yīng)、動脈粥樣硬化、支氣管哮喘、濕疹、腎小球腎炎、移植物抗 宿主病、溶血性貧血、骨關(guān)節(jié)炎、敗血病、中風(fēng)、組織和器官移植、血管炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病 和呼吸機誘發(fā)的肺損傷。huIL-17F_A 抗體本發(fā)明的單克隆抗體(例如完全人的單克隆抗體)具有抑制IL-17F、IL_17A和/ 或IL-1F/IL-17A誘導(dǎo)的促炎性細胞因子(例如IL-6)生成的能力。通過例如本文中描述 的IL-17刺激的小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)細胞測定法來測定抑制。例示性的本發(fā)明抗體包括例如30D12抗體、29D8抗體、1E4抗體、31A3抗體、39F12 抗體、12B12抗體、15B7抗體、4H11抗體、4B11抗體、8B11抗體、38B1抗體、禾口 15E6抗體、 5E12抗體、41B10抗體、及其變體。此類抗體的變體包括30D12BF抗體(30D12抗體的變 體)、39F12A抗體(39F12抗體的變體)、和15Ε6Π(抗體(15Ε6抗體的變體)。這些抗體顯 示對人IL-17F的特異性，而且它們已經(jīng)顯示出在體外抑制人IL-17F誘導(dǎo)促炎性細胞因子 IL-6。29D8 抗體(“Mab02a，，)、lE4 抗體(“Mab02b”)、31A3 抗體(“Mab02c”)、39F12 抗體 (“Mab06a”)、12B12 抗體(“Mab06b”)、15B7 抗體(“Mab06c”)、4H11 抗體(“Mab09”)、 30D12抗體、8B11抗體、38B1抗體、15E6抗體和4B11抗體還顯示對人IL-17A的特異性，而且 已經(jīng)顯示出在體外抑制人IL-17A誘導(dǎo)的IL-6生成。抗體、1E4抗體、31A3抗體、39F12 抗體、12B12抗體、15B7抗體、4H11抗體、30D12抗體、8B11抗體、38B1抗體、15E6抗體和4B11 抗體還顯示對人IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的特異性。5E12抗體結(jié)合人IL-17F，但是 不結(jié)合人IL-17A、IL-17A同二聚體或人IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物。41B10抗體結(jié)合 人IL-17F和人IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，但是不結(jié)合人IL-17A或IL-17A同二聚體。本文中描述的每一種huIL_17F單克隆抗體包括重鏈可變區(qū)(Vh)和輕鏈可變區(qū) (\)，如下文列出的氨基酸和相應(yīng)核酸序列中顯示的。30D12抗體包括由SEQ ID N0:1中顯 示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :2)和由SEQ ID NO :3中顯示的核酸序列編碼 的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 4)。> 30D12 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 1) CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCACCAGTTATGATATCAACTGGGTGCGA CAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATGAACCCTGACAGTGGTGTCATACGTTATGCACAGAAGTT CCAGGGTAGAGTCACCATGACCAGGAACACCTCCATAAGCACAGCCTACATGGAGCTAAACAGCCTGAGATCTGAGG ACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGAATGGTTCGGGGAGTTACCCTCTTACTACTTCTACTCCGGTATGGACGTC TGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 30D12 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 2) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYDIN WVRQATGQGLEWMGWMNPDSGVIRYAQKFQGRVTMTRNTSISTAYMELNSLRSEDTAVYYCAREWFGELPSYYFYSG MDVffGQGTTVTVSS> 30D12 V1 核酸序列(SEQ ID NO 3) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAG AAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGG CAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGC AGCGTAGCAACTGGCCTCCCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAA> 30D12 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 4) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAW YQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPTFGPGTKVDIK29D8UE4和31A3抗體每一項包括不同的重鏈可變區(qū)，但是共享共同的輕鏈可變 區(qū)。抗體包括由SEQ ID NO :5中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :6)。 1E4抗體包括由SEQ ID NO :7中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :8)。31A3 抗體包括由SEQ ID NO :9中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 10)。^D8、1E4 和31A3抗體的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 12)由SEQ ID NO 11中顯示的核酸序列編碼。> 29D8 Vn 核酸序列(SEQ ID NO 5) CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAA GCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTTTGCTTACACCTTTTCCACCTATGGTATCAGCTGGGTGCGAC AGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTTACAATAGTAACACAAACTATGCACAGAAAGTC CAGGGCAGAATCACCATGACCACAGACACATCCACGCGCACAGCCTACATGGAGCTGAGGGGCCTGAGATCTGACGA CACGGCCGTGTATTTCTGTGCGACTTTCTTCGGTGGTCACTCTGGCTACCACTACGGGTTGGACGTCTGGGGCCAGG GGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 29D8 Vn 氨基酸序列(SEQ ID NO 6) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKAFAYTFSTYGISW VRQAPGQGLEWMGWISAYNSNTNYAQKVQGRITMTTDTSTRTAYMELRGLRSDDTAVYFCATFFGGHSGYHYGLDVW GQGTTVTVSS> 1E4 Ve 核酸序列(SEQ ID NO 7) CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGGCCTCAGTGAAGGTTTCCTGCAAGGCTTCTGTTTACACCTTTACCACTTATGGTATCAGCTGGGTGCGACA GGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGTTTACAATGGTAATACAAACTATGGACAGAATTTCC AGGGCAGAGTCAGCATGACCACAGACACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGAC ACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGTTTCCACGGTGGTCACTCTGGCTACCACTACGGTTTGGACGTCTGGGGCCAAGG GACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 1E4 Ve 氨基酸序列(SEQ ID NO 8) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASVYTFTTYGISWV RQAPGQGLEWMGWISVYNGNTNYGQNFQGRVSMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCASFHGGHSGYHYGLDVWG QGTTVTVSS> 31A3 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 9) CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAA GCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGTTTACACCTTTACCACCTATGGTATCAGTTGGGTGCGAC AGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCACCGTTTACAATGGTAACACAAACTATGCACAGAAGTTC CACGGCAGAGTCACCATGACCACAGACACATCCACAAGTACAGCCTACATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGA CACGGCCGTCTATTACTGTGCGAGTTTCCACGGTGGTCATTCTGGCTACCACTACGGTTTGGACGTCTGGGGCCAAG GGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 31A3 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 10) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASVYTFTTYGIS WVRQAPGQGLEWMGWITVYNGNTNYAQKFHGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCASFHGGHSGYHYGLDV WGQGTTVTVSS> 29D8UE4 和 31Α3 V1 核酸序列(SEQ ID NO 11)GAAATTGTGTTGACNCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCT GGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATNTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCC AGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTA TTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCTCCGTACACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGAGATCAAA> 29D8UE4 和 31A3 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 12)EIVLXQSPATLSLSPGERATLSCR ASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLXYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPYTFGQ GTKLEIK4B11抗體包括由SEQ ID NO :13中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 14)和由SEQ ID NO 15中顯示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 16)。> 4B11 Vy 核酸序列(SEQ ID NO 13) CAGCTGCAGTTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGA AGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTCTGATGACTACATCAGCAGTAGGAGTTACTACTGGGGCTGG ATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGAGTATCTATTATAGTGGGAGCACCTACTACAACCCGTC CCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCCGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAAGTGAGTTCTGTGACCGCCA CAGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAGTGGCTGGAACGGGAACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGAACC CTGGTCACGGTCTCCTCA> 4B11 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 14) QLQLQESGPGLVKPSETLSLTCAVSDDYISSRSYY WGWIRQPPGKGLEfflGSIYYSGSTYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKVSSVTATDTAVYYCARVSGffNGNWFDPffG QGTLVTVSS> 4B11 V1 核酸序列(SEQ ID NO 15) GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAG TGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTC AGCAGTATGGTAGCTCACCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAA> 4B11 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 16) EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPITFGQGTRLEIK39F12和12B12抗體每一項包括不同的重鏈可變區(qū)，但是共享共同的輕鏈可變區(qū)。 39F12抗體包括由SEQ ID NO :17中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID N0:18)。 12B12抗體包括由SEQ ID NO :19中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :20)。 39F12和12B12抗體的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 22)由SEQ ID NO :21中顯示的核酸序列編 碼。> 39F12 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 17) CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAG AAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCCTCAGCAGCTATGCTTTCAGCTGGGTGCG ACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTTTCTTTGGAACAACAAATTACGCACAGAAGT TCCAGGGCAGAGTCATAATTACCGCGGACGAATCCACGAACACAGCCTACATGGAGCTGAGCGGCCTGAGATCTGAG GACACGGCCGTGTATTATTGTGCGAGAGACAGGGATTACTATGGTTTGGGGAGTCCCTTCTACTACTACGGTATGGA CGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 39F12 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 18) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTLSSYAF SWVRQAPGQGLEWMGGIIPFFGTTNYAQKFQGRVIITADESTNTAYMELSGLRSEDTAVYYCARDRDYYGLGSPFYY YGMDVffGQGTTVTVSS
> 12B12 Vy 核酸序列(SEQ ID NO 19) CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAG AAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCCTCAGCAGCTATGCTTTCAGCTGGGTGCG ACAGGCCCCTGGACAAGGCCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTTTCTTTGGAACAGTAAACTACGCACAGAAGT TCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAACACTGCCTATATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAG GACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGACAGGGATTATTATGGTTTGGGGAGTCCCCTCCACTACTACGGTTTGGA CGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 12B12 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 20) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTLSSYAF SWVRQAPGQGLEWMGGIIPFFGTVNYAQKFQGRVTITADESTNTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDRDYYGLGSPLHY YGLDVffGQGTTVTVSS> 39F12 和 12B12 V1 核酸序列(SEQ ID NO 21) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGACT TTCAGTCTGTGACTCCAAAGGAGAAAGTCACCATCACCTGCCGGGCCAGTCAGAGCATTGGTAGTAGCTTACACTGG TACCAGCAGAAACCAGATCAGTCTCCAAAGCTCCTCATCAAGTATGCTTCCCAGTCCTTCTCAGGGGTCCCCTCGAG GTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACCCTCACCATCAATAGCCTGGAAGCTGAAGATGCTGCAGCGTATT ACTGTCATCAGAGTAGTAGTTTACCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA> 39F12 和 12B12 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 22) EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRAS QSIGSSLHWYQQKPDQSPKLLIKYASQSFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLEAEDAAAYYCHQSSSLPWTFGQGTK VEIK4H11抗體包括由SEQ ID NO :27中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 28)和由SEQ ID NO 29中顯示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 30)。> 4H11 I 核酸序列(SEQ ID NO 23) GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCTTGGTCC AGCCTGGGGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGGTTCACCTTCAGTGGCTCTTCTATGCACTGGGTCCGC CAGGCTTCCGGGAAAGGGCTGGACTGGGTTGGCCGTATTAGAAGCAAAGCTAACAGTTACGCGACAGCATATGCTGC GTCGGTGATAGGCAGGTTCACCATCTCCAGAGATGATTCAAAGAACACGGCGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAA CCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTACTACATCAGTGGCTACTACCCTTACTGACTACTACGGTATGGACGTCTGG GGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 4H11 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 24) EVQLVESGGGLVQPGGSLKLSCAASGFTFSGSSMH WVRQASGKGLDWVGRIRSKANSYATAYAASVIGRFTISRDDSKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCTTSVATTLTDYYGM DVffGQGTTVTVSS> 4H11 V1 核酸序列(SEQ ID NO 25) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAG AAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGG CAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAAC AGCGTAGCAACTGGCCTCCATTCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAA> 4H11 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 26) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAW YQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPFTFGPGTKVDIK8B11抗體包括由SEQ ID NO 31中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 32)和由SEQ ID NO 33中顯示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 34)。> 8B11 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 27) GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAC ACCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTTTAACATGGACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATCCATTAGTACTACTAGCAGAATCATATACTCTGCAGACTCTGT GAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAGGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGACGAGG ACACGGCTGTATATTACTGTGCGAGAGTCAGTTACTATGGCCACGGATTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTC ACCGTCTCCTCA> 8B11 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 28) EVQLVESGGGLVHPGGSLRLSCAASGFTFSSFNMD WVRQAPGKGLEWVSSISTTSRIIYSADSVKGRFTISRDNARNSLYLQMNSLRDEDTAVYYCARVSYYGHGFDYWGQG TLVTVSS> 8B11 V1 核酸序列(SEQ ID NO 29) GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCACTGTCTG CATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGCTGGTTAGCCTGGTATCAGCAG AAACCAGAGAAAGCCCCTAAGTCCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGG CAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAC AGTATAATAGTTACCCTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 8B11 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO :30)DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASQGISSWLAW YQQKPEKAPKSLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPLTFGGGTKVEIK與39F12和12B12抗體相比，15B7抗體包括不同的由SEQ ID NO :35中顯示的核 酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 36)，而且共享共同的由SEQ ID NO :21中顯示的核 酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :22)，如先前顯示的。> 15B7 I 核酸序列(SEQ ID NO 31) CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCCTCAGCAGCTATGCTTTCAGCTGGGTGCGA CAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGAATCATCCCTTTCTTTGGAACAGCACACTACGCACAGAAGTT CCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAACACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGG ACACGGCCGTATATTACTGTGCGAGAGATAGGGACTACTATGGTTCGGGGAGTCCCTTCCACTTCTCCGGTTTGGAC GTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 15B7 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 32) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTLSSYAFS WVRQAPGQGLEWMGGIIPFFGTAHYAQKFQGRVTITADESTNTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDRDYYGSGSPFHFS GLDVffGQGTTVTVSS38B1抗體包括不同的由SEQ ID NO 33中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 34)和由SEQ ID NO 35中顯示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 36)。> 38B1 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 33) GAAGTACAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAC AGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTTTGCCATGCACTGGGTCCGG CAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAATTGGAATAGTGGTAGCATAGGCTATGCGGACTCTGT GAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCCGAGG ACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAAAGATATAGCAGCAGCTGGTGAATTCTACTTCGATATGGACGTCTGGGGCCAA GGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 38B1 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 34) EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDFAMH WVRQAPGKGLEWVSGINWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKDIAAAGEFYFDMDV WGQGTTVTVSS> 38B1 V1 核酸序列(SEQ ID NO 35) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGG CAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGC AGCGTAGCAACTGGCCTCCGACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGAGATCAAA> 38B1 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 36) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAW YQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPTFGQGTKLEIK15E6抗體包括不同的由SEQ ID NO 37中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 38)和由SEQ ID NO 39中顯示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 40)。> 15E6 I 核酸序列(SEQ ID NO 37) GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAC AGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTATGCCATGCACTGGGTCCGG CAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAATTGGAATAGTGGTGGCATAGGCTATGCGGACTCTGT GAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGG ACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAGAGATATGGGGGGGTTCGGGGAGTTTTACTGGAACTTCGGTCTCTGGGGCCGT GGCACCCTGGTCACTGTCTCCTCA> 15E6 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 38) EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMH WVRQAPGKGLEWVSGINWNSGGIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCARDMGGFGEFYWNFGL WGRGTLVTVSS> 15E6 V1 核酸序列(SEQ ID NO 39) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGAAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAG AAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGG CAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGC AGCGTAGCAACTGGCCTCCGGCCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 15E6 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 40) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVRSYLAW YQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPATFGGGTKVEIK5E12抗體包括由SEQ ID NO :43中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 44)和由SEQ ID NO 45中顯示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 46)。5E12抗體 結(jié)合IL-17F和IL-17F同二聚體，但是不結(jié)合IL-17A或IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物。> 5E12 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 43) CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAC AGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTATGCCATGCACTGGGTCCGG CAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTTGGAATAGTGGTACCATAGGCTATGCGGACTCTGT GAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGG ACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAAAGAACTGTATATCAGTGACTGGGACTCCTACTCCTACGGTATGGACGTCTGG GGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 5E12 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 44) QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMH WVRQAPGKGLEWVSGISffNSGTIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKELYISDWDSYSYGM DVffGQGTTVTVSS> 5E12 V1 核酸序列(SEQ ID NO 45) GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAG TGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGTATGGTAGCTCACCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 5E12 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 46) EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPFGGGTKVEIK41B10抗體包括由SEQ ID NO :47中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 48)和由SEQ ID NO 49中顯示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 50)。5E12抗 體結(jié)合IL-17F、IL-17F同二聚體、和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，但是不結(jié)合IL-17A。> 41B10 I 核酸序列(SEQ ID NO 47) GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTA AAGCCTGGGGGGTCCCTTAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCG CCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGGTTGGCCGTATTAAAAGCAAAACTGATGGTGGGACAACAGACTACGTTG CACCCGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCAAAAAACACCCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAA ACCGAGGACACAGCCGTATATTACTGTACCACATCGTATAGCAGTTACTGGTTCCCCTACTACTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA> 41B10 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 48) EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSNAWM SWVRQAPGKGLEWVGRIKSKTDGGTTDYVAPVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLKTEDTAVYYCTTSYSSYWFPYYF DYffGQGTLVTVSS> 41B10 V1 核酸序列(SEQ ID NO 49) GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCACTGTCT GCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGCTGGTTAGCCTGGTATCAGCA GAAACCAGAGAAAGCCCCTAAGTCCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCG GCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGCCAA CAGTATAATAGTTACCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAA> 41B10 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO :50)DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASQGISSWLA WYQQKPEKAPKSLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPITFGQGTRLEIK本發(fā)明的huIL_17A/F抗體另外包含例如下文表1中顯示的重鏈互補決定區(qū)(Vh OTR)和表2中顯示的輕鏈互補決定區(qū)⑶Rs)，及其組合。huIL_17F抗體的變體通過修飾親本抗體編碼基因的DNA序列，制備了本文所述數(shù)種huIL_17F抗體的變 體。例如，對30D12和15E6重鏈可變區(qū)和39F12輕鏈可變區(qū)進行了 DNA修飾。具體而言， 這些氨基酸變化導(dǎo)致這些抗體中的多處變化。例如，對30D12重鏈可變區(qū)進行的修飾導(dǎo)致 30D12重鏈中糖基化位點的消除。(N連接的糖基化位點是NXS或NXT，其中X是除P以外 的任何氨基酸)。另外，通過消除(即替代)傾向于化學(xué)修飾的殘基，對30D12和15E6 Vh CDR進行的修飾提供更大的化學(xué)穩(wěn)定性和抗體制備同質(zhì)性。例如，在15E6 VH&CDR2中，能 夠形成異天冬氨酸的天冬酰胺殘基被變成絲氨酸。在30D12 Vh⑶R2和15E6 Vh⑶R3中， 甲硫氨酸殘基分別被變成亮氨酸和異亮氨酸，以消除甲硫氨酸硫氧化的可能性。對30D12 重鏈可變區(qū)和39F12輕鏈可變區(qū)的別的修飾恢復(fù)了初始的人種系框架序列(例如30D12 Vh 框架3中的Asn變成kr，及39F12 Vl框架3中的Ala變成Thr)。30D12、15E6和39F12變體在本文中分別描述為30D12BF、15E6FK和39F12A。下文 列出的氨基酸和相應(yīng)核酸序列顯示每一種這些變體的重鏈可變區(qū)(Vh)和輕鏈可變區(qū)(\)。與親本30D12抗體相比，30D12BF抗體包括不同的由SEQ ID NO 51中顯示的核酸 序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :52)，而且共享由SEQ ID NO :3中顯示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(seq id no :4)。seq id no :51中顯示的核酸序列中經(jīng)過修飾的殘基以粗 體、下劃線和陰影字母指示。seq id no :52中顯示的氨基酸序列中的⑶r以雙下劃線字母 指示，而經(jīng)過修飾的殘基是非粗體、斜體和陰影灰色的。> 30d12bf vh 核酸序列(seq id no 51) caggt g cagctggtgcagtctggggctgaggt gmgaagcctggggcctcagtgmggtctcctgcaaggcttctggatacaccttcaccagttatgatatcaactgggt gcgacaggccactggacaagggcttgagtggatgggatgg￡tgaaccctgacagtggtgtcatacgttatgcacaga
agttccagggtagagtcaccatgaccagggacacctccataagcacagcctacatggagctaagcagcctgagat ctgaggacacggccgtgtattactgtgcgagagaatggttcggggagttaccctcttactacttctactccggtatg gacgtctggggccaagggaccacggtcaccgtctcctca> 30d12bf i 氨基酸序列(seq id no 52)
OVOTVOSCAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYDINWVROATGOGLE WMGW7,NPPSGVIRYAOKFOGRVTMTRDTSISTAYMEL,SSLRSEPTAV YYCAREWFGELPSYYFYSGMDVWGOGTTVTVSS在SEQ ID NO 52中，Met被變成Leu以防止可能的甲硫氨酸硫氧化；NTS基序被 變成DTS以消除框架3中的糖基化位點；而Asn變成kr的回復(fù)突變(變成種系)被引入 框架3。與親本15E6抗體相比，15Ε6Π(抗體包括不同的由SEQ ID NO 53中顯示的核酸序 列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 54)，而且共享由SEQ ID NO :39中顯示的核酸序列編碼 的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID N0:40)。SEQ ID NO :53中顯示的核酸序列中經(jīng)過修飾的殘基以粗 體、下劃線和陰影字母指示。SEQ ID NO :54中顯示的氨基酸序列中的⑶R以雙下劃線字母 指示，而經(jīng)過修飾的殘基是非粗體、斜體和陰影灰色的。> 15e6fk i 核酸序列(seq id no 53) gaagtgcagctggtggagtctgggggaggcttggt acagcctggcaggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcacctttgatgattatgccatgcactgggtcc
ggcaagctccagggaagggcctggagtgggtctcaggtattaattggaqc agtggtggcataggctatgcggact
ctgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactccctgtatctgcmatgaacagtctgagagctg
aggacacggccttgtattactgtgcaagagatatCggggggttcggggagttttactggmcttcggtctctggggc
cgtggcaccctggtcactgtctcctca> 15e6fk i 氨基酸序列(seq id no 54)
EVOLVESGGGLVOPGRSLRLSCAASGFTFDPYAMHWVROAPGKGLE
WVSGINW^SGGIGYADSVKGRFTISRDNAKNST.YT^OMNST.RAFDTAT,
YYCARO/GGFGEFYWNFGLWGRGTLVTVSS在SEQ ID NO :54中，CDR2中的NS被變成SS以防止Asn脫酰胺的可能，而Met被 變成Ile以防止甲硫氨酸硫氧化的可能。與親本39f12抗體相比，39f12a抗體共享由seq id no 17中顯示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 18)，而且包括不同的由SEQ ID NO :55中顯示的核酸序列編 碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID N0:56)。SEQ ID NO :55中顯示的核酸序列中經(jīng)過修飾的殘基以 粗體、下劃線和陰影字母指示。SEQ ID NO :56中顯示的氨基酸序列中的⑶R以雙下劃線字 母指示，而經(jīng)過修飾的殘基是非粗體、斜體和陰影灰色的。> 39F12A V1 核酸序列(SEQ ID NO 55) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGACTTTCAGTC TGTGACTCCAAAGGAGAAAGTCACCATCACCTGCCGGGCCAGTCAGAGCATTGGTAGTAGCTTACACTGGTACCAGC AGAAACCAGATCAGTCTCCAAAGCTCCTCATCAAGTATGCTTCCCAGTCCTTCTCAGGGGTCCCCTCGAGGTTCAGT GGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACCCTCACCATCAATAGCCTGGMGCTGAAGATGCTGCAACGTATTACTGTCA TCAGAGTAGTAGTTTACCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA> 39F12A VL 氨基酸序列(SEQ ID NO 56)
ErVLTOSPDFOSVTPKEKVTITCRASOSIGSSLHWYOOKPDOSPKLLIK YASOSFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLEAEDAA7YYCHQSSSLPWTF
GQGTKVEIK在SEQ ID NO 56中，Ala變成Thr的回復(fù)突變被引入框架3。每一種這些變體另外包含例如下文表1中顯示的重鏈互補決定區(qū)(VhCDR)、表2中 顯示的輕鏈互補決定區(qū)久⑶R)、及其組合。這些克隆中對VH⑶R的修飾在表1中以粗體、 斜體、和下劃線字母顯示。表1 來自結(jié)合并中和huIL_17A/F生物學(xué)活性的抗體克隆的VH⑶R序列
克隆ID重鏈CDRl重鏈CDR2重鏈CDR3基因家族30D12 IgGlSYDIN (SEQ ID NO:57)WMNPDSGVIRY AQKFQG (SEQ ID NO:58)EWFGELPSYYFYSGMDV (SEQ ID NO:59)IGHV1-829D8 “1TYGlSWISAYN SNTN Y AQKVQGFFGGHSGYHYGLDVIGHV1-18
權(quán)利要求
1.一種分離的完全人的單克隆抗體，其結(jié)合IL-17A同二聚體、IL-17F同二聚體和 IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物，其中該抗體展現(xiàn)(i)至少IOOpM或更少的針對IL-17A同 二聚體的結(jié)合親和力，( )至少300pM或更少的針對IL-17F同二聚體的結(jié)合親和力，(iii) 至少400pM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的結(jié)合親和力，(iv)至少13nM或 更少的針對IL-17A同二聚體的中和能力，(ν)至少120nM或更少的針對IL-17F同二聚體 的中和能力，和(vi)至少31nM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的中和能力。
2.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體展現(xiàn)(i)至少40pM或更少的針對IL-17A同二聚體 的結(jié)合親和力，(ii)至少IOpM或更少的針對IL-17F同二聚體的結(jié)合親和力，和(iii)至 少50pM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體的結(jié)合親和力。
3.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體展現(xiàn)(i)至少15pM或更少的針對IL-17A同二聚體 的結(jié)合親和力，(ii)至少IOpM或更少的針對IL-17F同二聚體的結(jié)合親和力，和(iii)至 少30pM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體的結(jié)合親和力。
4.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體展現(xiàn)(iv)至少13nM或更少的針對IL-17A同二聚體 的中和能力，(ν)至少1. 9nM或更少的針對IL-17F同二聚體的中和能力，和(vi)至少IlnM 或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的中和能力。
5.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體展現(xiàn)(iv)至少1.6nM或更少的針對IL-17A同二聚 體的中和能力，(ν)至少1·7ηΜ或更少的針對IL-17F同二聚體的中和能力，和(vi)至少 1. InM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的中和能力。
6.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體展現(xiàn)(iv)至少0.2nM或更少的針對IL-17A同二聚 體的中和能力，(ν)至少1. 2nM或更少的針對IL-17F同二聚體的中和能力，和(vi)至少 0. 2nM或更少的針對IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的中和能力。
7.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體是15E6且包含含有氨基酸序列SEQIDNO 85的Vh CDRl序列、包含氨基酸序列SEQ ID N0:86的Vh CDR2序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO 87 的Vh⑶R3序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO :110的\⑶Rl序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO 97的VlCDR2序列和包含氨基酸序列SEQ ID NO :111的V1^ CDR3序列。
8.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體是15Ε6Π(且包含含有氨基酸序列SEQID NO 85的 Vh CDRl序列、包含氨基酸序列SEQ ID Ν0:94的Vh CDR2序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO: 95的Vh CDR3序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO :110的\ CDRl序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO 97的VlCDR2序列和包含氨基酸序列SEQ ID NO :111的V1^ CDR3序列。
9.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體與15E6抗體結(jié)合相同表位。
10.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體與15Ε6Π(抗體結(jié)合相同表位。
11.權(quán)利要求1的抗體，其中該抗體結(jié)合IL-17A、IL-17F和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù) 合物并阻止IL-17F、IL-17A或IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物之一項或多項結(jié)合其受體。
12.—種分離的完全人的單克隆抗體或其片段，其中所述抗體包含(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO 57、60、66、69、76、79、82、或 85 的 Vh CDRl 區(qū)；(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO :58、61、63、65、67、70、72、74、77、80、83、86、93 或 94 的 Vh CDR2 區(qū)；(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO :59、62、64、68、71、73、75、78、81、84、87、或 95 的 Vh CDR3 區(qū)；(d)包含氨基酸序列SEQ ID NO :96、101、104、107 或 110 的 Vl CDRl 區(qū)；(e)包含氨基酸序歹IjSEQ ID NO :97、102、105 或 108 的 VL CDR2 區(qū)；禾口(f)包含氨基酸序列SEQ ID NO :98、99、100、103、106、109、或 111 的 VL CDR3 區(qū)，其中所述抗體結(jié)合IL-17F和IL-17A。
13.權(quán)利要求12的抗體，其中所述抗體還結(jié)合IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物。
14.權(quán)利要求12的抗體，其中所述抗體是IgG同種型。
15.權(quán)利要求12的抗體，其中所述抗體是IgGl同種型。
16.權(quán)利要求12的抗體，其中所述抗體包含重鏈可變序列，其包含選自SEQIDNO :2、6、 8、10、14、18、20、24、28、32、34、38、52、和 54 的氨基酸序列。
17.權(quán)利要求12的抗體，其中所述抗體進一步包含輕鏈可變序列，其包含選自SEQID NO :4、12、16、22、26、30、36、40 和 56 的氨基酸序列。
18.一種分離的完全人的單克隆抗體，其包含重鏈可變序列和輕鏈可變序列，該重鏈 可變序列包含氨基酸序列SEQ ID NO :2、6、8、10、14、18、20、24、28、32、38、52、或54，該輕鏈 可變序列包含氨基酸序列SEQID NO :4、12、16、22、26、30、36、40、或56，其中所述抗體結(jié)合 IL-17F 和 IL-17A。
19.權(quán)利要求18的抗體，其中所述抗體是IgG同種型。
20.權(quán)利要求18的抗體，其中所述抗體是IgGl同種型。
21.一種分離的完全人的單克隆抗體或其片段，其中所述抗體包含(a)包含氨基酸序列SEQID NO 85或90的Vh CDRl區(qū)；(b)包含氨基酸序列SEQID NO 88或91的Vh CDR2區(qū)；(c)包含氨基酸序列SEQID NO 89或92的Vh CDR3區(qū)；(d)包含氨基酸序列SEQID NO 101或107的\ CDRl區(qū)；(e)包含氨基酸序列SEQID NO 102或108的\ CDR2區(qū)；和(f)包含氨基酸序列SEQID NO 112或113的VLCDR3區(qū)，其中所述抗體結(jié)合IL-17F。
22.權(quán)利要求21的抗體，其中所述抗體不結(jié)合IL-17A或IL-17A同二聚體。
23.權(quán)利要求21的抗體，其中所述抗體是IgG同種型。
24.權(quán)利要求21的抗體，其中所述抗體包含重鏈可變序列，其包含選自SEQIDNO :44和 48的氨基酸序列。
25.權(quán)利要求21的抗體，其中所述抗體進一步包含輕鏈可變序列，其包含氨基酸序列 SEQ ID NO 46 和 50。
26.—種藥物組合物，其包含前述權(quán)利要求任一項的抗體和載體。
27.一種減輕受試者中與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、克羅恩氏病、銀屑病、多發(fā)性硬化、慢性阻塞 性肺病、或哮喘有關(guān)的臨床適應(yīng)證的癥狀的方法，該方法包括以足以減輕與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎、克羅恩氏病、銀屑病、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性肺病、或哮喘有關(guān)的臨床適應(yīng)證的癥狀的 量對有所需要的受試者施用IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的拮抗劑。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述受試者是人。
29.權(quán)利要求27的方法，其中所述拮抗劑是單克隆抗體或其片段。
30.權(quán)利要求29的方法，其中所述單克隆抗體是依照權(quán)利要求1-20任一項的抗體或其片段。
31.一種減輕受試者中自身免疫性疾病、炎性病癥或細胞增殖病癥的癥狀的方法，其中 該方法包括以足以減輕自身免疫性疾病、炎性病癥或細胞增殖病癥的癥狀的量對有所需要 的受試者施用依照權(quán)利要求1-25任一項的抗體。
32.權(quán)利要求31的方法，其中所述受試者是人。
全文摘要
本發(fā)明提供識別IL-17F、IL-17F同二聚體、IL-17A、IL-17A同二聚體、和/或異二聚體IL-17A/IL-17F蛋白質(zhì)復(fù)合物的完全人的單克隆抗體。本發(fā)明進一步提供作為治療劑、診斷劑、和預(yù)防劑使用此類單克隆抗體的方法。
文檔編號C07K16/00GK102083858SQ200980126177
公開日2011年6月1日 申請日期2009年5月5日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月5日
發(fā)明者克爾奇茨托夫·馬斯特納克, 奧利維爾·萊格 申請人:諾維莫尼公司