專利名稱：純化(2s)-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸4-(硝基氧基)丁酯的方法
純化(2S)-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸4-(硝基氧基)丁
酯的方法本發(fā)明涉及純化萘普西諾(naprocinod)的方法和晶體形式的萘普西諾。萘普西諾(naprocinod)是(2S) _2_ (6_甲氧基_2_萘基)丙酸4_ (硝基氧基)丁 酯，也稱作HCT 3012。萘普西諾是萘普生的釋放一氧化氮(NO)的衍生物，具有降低的胃腸道和心血管 毒性。萘普西諾正處在用于治療骨關節(jié)炎的征兆或癥狀的第III期臨床試驗。 WO 01/10814公開了通過2-(S)_(6-甲氧基-2-萘基)丙酰氯與4-硝基氧基 丁 -1-醇在二氯甲烷中于碳酸鉀存在下反應制備萘普西諾的方法。萘普西諾在室溫下是油狀物，該化合物的大規(guī)模純化是困難和很費錢的?，F(xiàn)已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，萘普西諾在低溫下可以得到晶體形式。本發(fā)明的一個目的是純化萘普西諾的方法，該方法包括以下步驟a)將含萘普西諾的混合物溶解或分散在溶劑中；b)在攪拌下將溶液或兩相分散體冷卻到從_20°C至10°C的溫度；c)任選地向溶液中加入萘普西諾的晶種；d)攪拌，并保持溫度在-40°C至10°C ；e)保持溫度在15°C以下，收集形成的固體；最好是，步驟a)的混合物中萘普西諾的含量高于90%重量。步驟a)的溶劑是能夠溶解萘普西諾或形成兩相分散體(含溶劑的萘普西諾油相 分散在萘普西諾于該溶劑中的溶液內(nèi))的溶劑。該溶劑可以是極性或非極性的非質(zhì)子溶 齊U，或是極性質(zhì)子溶劑。非質(zhì)子溶劑可以是烷烴、酯、酮，例如，正己烷(n-exane)、丙酮、甲苯 或THF，或是它們的混合物。溶劑優(yōu)選是極性質(zhì)子溶劑，例如醇、二醇、伯酰胺或它們的混合物。特別優(yōu)選的是 C1-C4脂肪醇，例如甲醇、乙醇、異丙醇或ι-丁醇；二醇，例如二乙二醇；或伯酰胺，例如甲酰 胺；或它們的混合物。步驟b)的溫度優(yōu)選為-15°C至5°C。步驟d)的溫度優(yōu)選為-15°C至5°C。步驟e)的溫度優(yōu)選在10°C以下。本發(fā)明的另一目的是用所述方法得到的產(chǎn)物。本發(fā)明的一個目的是熔點約為15°C的晶體形式的萘普西諾。本發(fā)明方法對于用不同方法得到的高純度(> 99% )或較低純度(彡90%至 99% )的萘普西諾的純化都有效。用WO 01/10814中所述方法得到的萘普西諾可能含有雜質(zhì)，例如 萘普生(S)-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸· HCT 3013 (S) _2_ (6-甲氧基 _2_ 萘基)丙酸 4_ 羥基丁酯· NapOMe (S) -2-(6-甲氧基_2_萘基)丙酸甲酯· HCT 3016 ⑶_2_ (6_甲氧基_2_萘基)丙酸4_氯丁酯
· BD麗1，4- 丁二醇一硝酸酯· BDDN 1，4- 丁二醇二硝酸酯在用WO 03/045896中報道的方法制備的萘普西諾中可能存在(2S)-2_(6_甲氧 基-2-萘基)丙酸(4-甲磺酰氧基)丁酯(“甲磺?；苌铩?。本發(fā)明方法提供了在選擇的溫度下向攪拌的結(jié)晶混合物中任選加入萘普西諾晶 種；這一加入引起混合物立即結(jié)晶。一般來說，在結(jié)晶混合物于選定的溫度下保持0. 5-30小時，優(yōu)選3-12小時后，通 過在結(jié)晶溫度下過濾，分離出固體產(chǎn)物。通過在結(jié)晶溫度下過濾，分離出溶劑化的固體萘普西諾(濕粉)，并用少量預冷過 的溶劑洗。使用不同的后處理步驟，分離出干粉末形式或油狀化合物形式的未溶劑化的、無 溶劑的、純化的萘普西諾a)將溶劑化的固體溶在合適的惰性溶劑(CH2Cl2,甲苯等)中并用水洗。室溫下減 壓蒸發(fā)溶劑，得到不含溶劑的油狀殘余物形式的純化的萘普西諾。b)將溶劑化的固體在約15°C熔化，減壓除去溶劑，得到不含溶劑的油狀殘余物形 式的純化的萘普西諾。c)將溶劑化的固體于真空中保持在低于其熔點的溫度，轉(zhuǎn)化成非溶劑化的固體。 將該干燥產(chǎn)物在熔點下加熱，得到純化的油狀萘普西諾。母液經(jīng)真空濃縮后定量回收萘普西諾，其純度低于起始物萘普西諾的純度。在多種不同的結(jié)晶條件下，根據(jù)HPLC分析，未發(fā)現(xiàn)有新的雜質(zhì)或己有雜質(zhì)的增多ο發(fā)現(xiàn)BD麗和BDDN在母液中定量地積累。觀察到的萘普西諾和雜質(zhì)的穩(wěn)定性的實際后果是可以從結(jié)晶母液中回收到基本 上定量收率的萘普西諾的結(jié)晶產(chǎn)物，并重新利用。純化效力主要取決于雜質(zhì)和溶劑的本性。萘普西諾和溶劑/稀釋劑的比例取決于溶劑/稀釋劑的本性，雜質(zhì)，它們的含量， 起始物萘普西諾的純度，以及目標純度。在給定的反應器中由攪動引起的結(jié)晶體系的湍流不影響純化的效力。極性質(zhì)子溶劑(醇類，二醇類，伯酰胺類)是利用溶液和兩相體系純化被極性雜質(zhì) (例如萘普生、萘普生甲酯、HCT 3013、BDMN*BDDN)污染的萘普西諾的優(yōu)選溶劑。一般來說，極性污染物的含量被降低至其原始數(shù)量的1/5-1/10，極性更強的雜質(zhì) (例如BDMN和BDDN)則被完全去除。伯醇和仲醇(甲醇、乙醇、2-丙醇、1-丁醇)、二醇(二乙二醇)和伯酰胺(甲酰 胺)以及它們的混合物都成功地作了試驗。當在甲醇溶液中進行試驗時，通過將結(jié)晶溫度 從_15°C降低至_25°C，提高了收率而不影響純化效力。使用甲酰胺作為溶劑的溶液法和使用二乙二醇的兩相法的表現(xiàn)相似，其效力接近 于用烷基醇達到的效力。因為溶液法是從萘普西諾在指定溫度下溶于質(zhì)子溶劑中開始，所以收率和生產(chǎn)效 率主要由萘普西諾在該溶劑中的溶解度決定。
一旦油狀的萘普西諾被溶解，其溶液(在甲醇中)在冷卻到結(jié)晶溫度以下時還保 持透明。兩相法的特點是生產(chǎn)效率高得多，這受目標純度的影響。原則上，生產(chǎn)效率(量/ 體積)能接近100%，理想的溶劑應該對雜質(zhì)有高親和性，對萘普西諾有低親和性。在溶液中(于較低的溫度)和在兩相體系中(于較高的溫度)結(jié)晶產(chǎn)生類似的純 化效力和收率，但兩相體系的生產(chǎn)率(數(shù)量/體積)高得多。在相同的溫度下，兩相純化的 效力略低，通過提高結(jié)晶溫度可以增加，而生產(chǎn)率并無明顯下降。在不同溫度下用1份萘普西諾和2份甲醇進行的兩相純化，得到高達19-29%的生 產(chǎn)率和55-88%的收率。兩相法是特選的具有良好的收率，很高的生產(chǎn)率和合理的效力的方法。極性雜質(zhì) 例如BDMN和BDDN被除掉并積累在母液中。對于所研究的在溶液中結(jié)晶，大多數(shù)的收率是從50 %至90 %，生產(chǎn)率為4 %至 10%。極性質(zhì)子溶劑可以與極性非質(zhì)子溶劑聯(lián)合使用，以便影響結(jié)晶的效力。結(jié)晶也可以在非均相條件下被誘發(fā)，此時萘普西諾以不溶性油的形式作為乳狀液 體系的一個組分存在。水可以與極性溶劑成功地聯(lián)合使用。從甲醇、乙醇、異丙醇和凈HCT 3012中結(jié)晶得到的所有分析樣品(濕固體A和干 固體B)的粉末X衍射圖都完全相似，指示在所有的樣品中均存在相同的晶相，與結(jié)晶過程 中使用的溶劑和濕或干的標示無關。在實驗圖譜中觀察到相對強度只有很小的變化，與樣 品制備中產(chǎn)生的擇優(yōu)取向的不同程度一致，而峰的位置在實驗誤差之內(nèi)是可重復的。對于 干和濕的晶態(tài)HCT 3012都就溶劑含量和純度作了分析。從甲醇中得到的樣品以及由凈HCT 3012結(jié)晶的產(chǎn)物的DSC顯示出很相近的起始溫度(約13°C )。實驗步驟在以下的實驗部分中，萘普西諾被報道成HCT 3012。實施例1試劑和設備試劑通過將純HCT 3012和已知的數(shù)量的雜質(zhì)(HCT 3013或HCT3016或甲磺?；?br> 衍生物)混合，制備不同的樣品。為了加晶種，使用高純度的萘普西諾樣品。此樣品由萘普 西諾樣品用甲醇結(jié)晶三次得到，在-18°C下儲存。設備試驗在裝有機械攪拌器的帶夾套1升密封玻璃反應器中進行。為進行過濾， 使用帶夾套的過濾器。1)從醇中結(jié)晶進行了兩個試驗第一個試驗是在甲醇中，另一個在異丙醇中。進行此試驗的粗制 的HCT 3012批料中含有數(shù)量不定的HCT 3013作為主要雜質(zhì)。步驟說明將30g HCT 3012與120ml醇混合，形成一個兩相體系(油質(zhì)相分散在 溶劑中)。將混合物在攪拌下冷卻，加晶種，攪拌1小時以便誘發(fā)成核和晶體生長，然后再 在-10°C下冷卻。將混合物在此溫度保持至少1小時，然后用帶冷卻夾套的過濾器過濾收集 固體。在減壓下加熱除去溶劑。表1表示了純化效果用甲醇時(試驗a)HCT 3013從0.9降至0. 1[HPLC分析，面積％ ]，用異丙醇時(試驗b)從0.6降至0.2。表IHCT 3012在醇存在下結(jié)晶 2)從丙酮/甲醇或丙酮/異丙醇中結(jié)晶進行兩個試驗如下HCT 3012先與丙醇混合，然后將該均相液體逐滴加到醇中。 這些試驗中使用的材料含有HCT 3013作為主要的雜質(zhì)。步驟說明將30g萘普西諾與IOml丙酮在室溫下混合，將該溶液在約30分鐘內(nèi)逐 滴加入保持-10°C和攪拌的醇中(試驗C中為120ml甲醇，試驗d中為120ml異丙醇)，產(chǎn) 物立即沉淀。將懸浮液在-io°c攪拌至少1小時，然后用帶冷卻夾套的過濾器過濾，得到細 而均勻的白色固體。減壓加熱除去溶劑。表2總結(jié)了這些實驗的結(jié)果。兩個試驗中HCT 3013都從0.6%降至0.2%，但用 異丙醇得到的收率較高。表2將HCT 3012/丙酮混合物慢慢加到冷醇中進行的試驗 3)從作為溶劑的異丙醇/丙酮或異丙醇/THF中結(jié)晶進行了一組實驗，從含有THF或丙酮的異丙醇中結(jié)晶HCT 3012。對于這些試驗，故 意制備了含有HCT 3013、HCT 3016和甲磺酰基衍生物作為雜質(zhì)的HCT 3012樣品。步驟說明將30g HCT 3012溶在結(jié)晶溶劑中(室溫下得到溶液)。將溶液冷卻至 加晶種溫度(0至-10°c，在此范圍觀察到兩相液體)。加晶種后，將混合物在同一溫度下攪 拌至少1小時，然后在-10至-15°c下冷卻，用帶冷卻夾套的過濾器過濾收集結(jié)晶的固體。 減壓加熱除去溶劑。以上試驗的分析結(jié)果匯集在表3中。表 3 4)從異丙醇/THF中結(jié)晶向HCT 3012在異丙醇/THF中的飽和溶液加入晶種并在0°C下攪拌，直到觀察到適 當數(shù)量的結(jié)晶產(chǎn)物(成核)。然后慢慢加入HCT 3012在異丙醇/THF中的溶液，仔細監(jiān)測該 混合物以避免形成液態(tài)的HCT 3012。換言之，調(diào)節(jié)加入速度，使得只形成分散在溶劑中的固 體產(chǎn)物。結(jié)果總結(jié)在表4中。步驟說明將17g HCT 3012在0°C下溶于200ml異丙醇和20ml THF的混合物中， 得到渾濁的溶液。加入晶種后，將混合物在這一溫度保持至少一小時。與此同時，將43g HCT 3012于30°C溶在200ml異丙醇和20ml THF的混合物中。在大約4小時內(nèi)將保持30°C的此 溶液逐滴加入到上述加了晶種的混合物中。
然后將混合物再次于-10/_15°C冷卻，用帶冷卻夾套的過濾器過濾，收集結(jié)晶的固 體。將固體在_15°C用異丙醇洗，最后減壓除去溶劑。表 4 5)雜質(zhì)的合成(2S)-2~(6-甲氧基-2-萘基)丙酸 4_ 氯丁酯(HCT 3016)結(jié)構(gòu) 制備30g甲氧基萘甲基乙酰氯溶在120g 二氯甲烷中，將此溶液在0°C冷卻，在2 小時內(nèi)逐滴加入14. 5g 1-氯-3-丁醇在IOOg 二氯甲烷中的溶液。在0°C下3小時反應完 全后，加入60g水，將混合物攪拌10小時。相分離后，向有機相中加入60g水，將混合物攪 拌10小時。相分離后，將有機相濃縮至120ml，加入4. 5g碳酸鉀，將混合物在約40°C回流 4小時。過濾和減壓濃縮后得到油狀物(HPLC純度90% )。(2S)-2-(甲氧基-2-萘基)丙酸4-羥基丁酯(HCT 3013)結(jié)構(gòu) 按照WO 03/045896的制備方法50g(S)_甲氧基萘甲基乙酸與196g 1，4_ 丁二醇 混合并在攪拌下于80°C加熱。加入0.428硫酸，將形成的混合物在801攪拌6.5小時。在 50°C冷卻后，加入甲苯(33g)、水(35g)和己烷(67g)，將形成的兩相體系攪拌30分鐘。相 分離后，在50°C下向水層加入甲苯(25g)和己烷(25g)。將該兩相體系攪拌15分鐘。相分 離后，將水層用甲苯(25g)和己烷(25g)再萃取2次。在50°C向水層中加入甲苯(130g)和 0.2M碳酸鉀水溶液(149g)，將得到的兩相體系攪拌30分鐘，然后相分離。向有機層中加水 (150g)，將形成的兩相體系攪拌15分鐘，然后相分離。再用150g水重復此萃取操作。將有機相減壓蒸發(fā)，得到油狀殘留物。產(chǎn)物的HPLC純度為99%。 (2S)-2-(6-甲氧,某-2-萘某)丙酸(4-甲磺酰氧,某)丁酯(“甲磺酰衍牛物”) 結(jié)構(gòu) 按照WO 03/045896的制備方法將(2S)-2_(6_甲氧基_2_萘基)丙酸4-羥基丁 酯(8.4g)、甲磺酰氯(3.7g)和甲苯(40mL)裝入圓底燒瓶中。向該溶液中逐滴加入三乙胺 (3. Og)，在加料期間溫度自發(fā)地升高到60°C。出現(xiàn)一些固體物質(zhì)的沉淀，加入甲苯(40mL) 以利于攪拌。室溫下攪拌反應混合物3天。加入IM HCl(30mL)，將混合物加熱至60°C使固 體溶解。在60°C下相分離后，用正庚烷(50mL)在50°C將有機相緩慢稀釋。在室溫下冷卻 時產(chǎn)物結(jié)晶。過濾后將其在30°C真空干燥，得到HPLC純度為99%的固體產(chǎn)物。1H-NMR譜 證實了其結(jié)構(gòu)。實施例2實施例2包括實驗01-52分析方法HPLC柱YMCPack ODS-AQ, 150mm 長，4. 6mm 直徑，粒徑 5 μ m柱溫30°C流動相A-乙腈/甲醇/水，混合并加入0. 3mL TFAB-乙腈和 0. 3mL TFA梯度成分 總分析時間102分流動相流速0. 6mL/分注射體積10 μ 1檢測:FLD,232nm(激發(fā)),350nm(發(fā)射)，VWD (可變波長檢測器)在210和232nm計算外標準物
實驗01晶種的制備 HCT 3012的晶種按照實驗02中對固體B所述制備。實驗01的分析結(jié)果 注nq=無法定量；nd=檢測不出。以后各表均同此表 實驗02不加晶種從甲醇中結(jié)晶 將HCT 3012 (US 07600379 ；5. IOg)和甲醇(VffR 08Z2128 ；51g)在氮氣和磁力攪 拌下裝入IOOmL帶夾套的三口玻璃反應器中。將這一多相混合物在室溫和攪拌下保持為得 到透明溶液所需的一段時間(10分鐘)。將溶液冷卻至_15°C (結(jié)晶溫度)，在此溫度和攪 拌下保持15分鐘。溶液保持透明，20分鐘后沒有固體或油狀物沉淀分離。用刮勺刮擦，溶 液變渾，晶體開始分離。未觀察到溫度升高。將該多相混合物在-15°C攪拌3小時，然后經(jīng)150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾 套溫度在約_20°C。濾餅用預冷至_20°C的甲醇(20g)洗，用預冷的(_20°C)塞子壓實。將該固體物質(zhì)收集到預冷至_20°C的50mL圓底燒瓶中，在_20°C保存，得到5. Ilg 濕固體(固體A)。
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將固體A的樣品用HPLC分析，表明含54. 0% HCT 3012。因此，該濕固體含2. 76g HCT 3012和按差值為2. 35g的甲醇，收率54. 1 %。將2. 33g濕固體在_15°C真空干燥(剩余壓力0. Imm Hg)，6小時后得到1. 13g樣 品，其中含1.02g HCT 3012 (固體B)和按差值為0. Ilg的甲醇。實驗02的分析結(jié)果 3. 3. 2. 3.實驗03在_5°C加入晶種從甲醇中結(jié)晶 在氮氣和機械攪拌下將HCT 3012 (US 07600379，12. 71g)和甲醇(VWR 08Z2128, 127g)裝入帶夾套的250mL三口玻璃反應器中。將該多相混合物在室溫下保持攪拌一段為 得到透明溶液所需的時間(10分鐘)。將溶液冷卻至-5°C (結(jié)晶溫度)，在此溫度和攪拌下 保持10分鐘。溶液保持透明。又過20分鐘后，向透明溶液中加入約l-2mg HCT 3012/01 晶種(固體Α)。約2-3分鐘后晶體開始分離。將該多相混合物在_5°C攪拌3小時，然后經(jīng) 150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾套溫度為-20°C。用預冷至_20°C的甲醇(50g)洗濾餅， 用預冷(-20°C )的塞子壓實該濕固體。將固體物質(zhì)收集到預冷(-20°C )的50mL圓底燒瓶中在_20°C保存，得到6. 84g濕 固體(固體A)。固體A的樣品用HPLC分析指示含78. 4% HCT 3012。因此，濕固體含5. 36g HCT 3012和作為差值的1.48g甲醇，收率42.2%。將3. 12g濕固體在-15°C真空干燥(殘余壓力0. ImmHg)，6小時后得到1. 86g樣 品，其中含1.74g HCT 3012 (固體B，相當于30.0% )和按差值為0. 12g的甲醇。
將甲醇母液在約37°C (外置浴)減壓濃縮，得到油狀殘余物(7. 59g)。實驗03的分析結(jié)果 實驗04在_15°C加入晶種從甲醇中結(jié)果 在氮氣和機械攪拌下將HCT 3012 (US 07600379，20. 19g)和甲醇(VWR 08Z2128, 202g)裝入帶夾套的500mL三口玻璃反應器中。將該多相混合物在室溫和攪拌下保持為得 到透明溶液所需的一段時間(10分鐘)。將溶液在約30分鐘內(nèi)冷卻至-15°C (結(jié)晶溫度)， 在此溫度下保持攪拌20分鐘。該溶液保持透明，20分鐘后向此透明溶液中加入約l_2mg HCT 3012/01晶種(固體B)。約2_3分鐘后，晶體開始分離。將該多相混合物在_5°C攪拌 15小時，然后經(jīng)150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾套溫度為約_20°C。用預冷至_20°C的 甲醇(18g)洗濾餅，該濕固體用預冷(-20°C )的塞子壓實。將固體物質(zhì)收集到預冷(-20°C )的50mL圓底燒瓶中在-20°C保存，得到15. 73g 濕固體(固體A)。固體A的樣品用HPLC分析，指示含85. 4%的HCT 3012。因此，濕固體中含13. 43g HCT 3012和按差值為2. 30g的甲醇，收率66. 5%。將3.61g濕固體在-15°C真空干燥(殘余壓力0. ImmHg)，6小時后得到3. 46g樣 品，其中含3. Olg HCT 3012 (固體B，相當于64. 7% )，和按差值為0. 60g的甲醇。將甲醇母液在約37°C (外置浴)減壓濃縮，得到7. 69g油狀殘余物，將其溶在二 氯甲烷(19g)中。有機相分別用17、17和16g水洗三次。將有機相減壓濃縮(外置浴溫 37°C )，得到 7. 37g。
實驗04的分析結(jié)果 實驗05在_15°C加晶種從乙醇中結(jié)晶

(202)在氮氣和機械攪拌下向一只500mL帶夾套的三口玻璃反應器中加入HCT 3012 (US 07600379,20. 20g)和乙醇(Π( 1337350，202g)。將該多相混合物在攪拌下于室溫保持為得 到透明溶液所需的一段時間(20分鐘)。將溶液在_3°C下冷卻，溶液變渾濁(兩相體系油 狀物和溶液)，在-10°C下油狀物分離。將該混合物加熱至+20°C，然后在約30分鐘內(nèi)冷卻 至-5°C (結(jié)晶溫度)，并在此溫度保持攪拌20分鐘。該溶液保持透明。20分鐘后向該透 明溶液中加入約l_2mg HCT 3012/01晶種(固體B)。2_3分鐘后晶體開始分離。將該多相 混合物冷卻并在_15°C攪拌15小時，然后經(jīng)150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾套溫度在 約-20°C。濾餅用預冷至_20°C的乙醇(20g)洗，用預冷(_20°C)的塞子壓實濕固體。將固體物質(zhì)收集在預冷(_20°C )的50mL圓底燒瓶中，在_20°C保存，得到22. 44g 濕固體(固體A)。固體A的樣品用HPLC分析，結(jié)果指示含69. 6% HCT 3012。因此該濕固體含有 15. 62g HCT 3012和按差值為6. 82g的乙醇，收率77. 3%。將3. 75g濕固體在-15°C真空干燥(殘余壓力0. ImmHg)，6小時后得到2. 17g HCT 3012 (固體B)，其中含0. 04%乙醇。粉末XRD圖與實驗部分表No. 1中對實施例49中制備的 HCT 3012報道的完全相似。按照實驗部分所述進行的DSC分析表明熔化起始值為13. 06°C。將乙醇母液在約37°C (外置浴)減壓濃縮，得到5. 45g油狀殘余物，將其溶在二 氯甲烷(120g)中。有機相用水(3X IOOmL)洗。將有機相減壓濃縮(外置浴37°C )，得到 5. OOg0實驗05的分析結(jié)果
實驗06在_15°C加晶種從異丙醇中結(jié)晶 在氮氣和機械攪拌下將HCT 3012 (US 07600379，10. 06g)和異丙醇 (K38782434-825，101g)裝入帶夾套的250mL三口玻璃反應器中。將該多相混合物在室溫 下保持攪拌20分鐘，它仍保持多相。將混合物的溫度升至30°C，使混合物變成透明溶液， 將溶液的溫度冷卻至25°C，溶液又變成多相。向混合物中加入異丙醇(20g)，明顯地增溶了 油狀物。將混合物的溫度冷卻至20°C，然后冷卻至0°C，在此溫度保持15小時，沒有結(jié)晶發(fā) 生。將該兩相體系(油和溶劑)冷卻至_3°C，加入l_2mg種晶晶體(HCT 3012/01晶種，固 體A)。用刮勺刮擦，溶液變渾濁，晶體開始分離。將反應混合物冷卻至_15°C并在氮氣和攪 拌下保持4小時。將混合物經(jīng)150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾套溫度在約-20°C。濾餅用預冷 至-20°C的異丙醇(20g)洗，用預冷(_20°C )的塞子壓緊濕固體。將固體物質(zhì)收集在預冷至-20°C的50mL圓底燒瓶中并在_20°C下保存，得到 10. 29g濕固體(固體A)。固體A的樣品用HPLC分析，結(jié)果指示含63.0% HCT 3012。因此濕固體中含6.48g HCT 3012和按差值為3. 81g的異丙醇，收率64. 5%。(在一項平行實驗中，濕固體A含57% 異丙醇，用PXRD進行分析。粉末XRD圖與實驗部分表No. 1中對實施例49中制備的HCT 3012報道的完全相似)。3. 19g濕固體在-15°C下真空干燥(殘余壓力0. ImmHg)，6小時后 得到2.45g樣品，其中含2. 20g HCT 3012 (固體B，相當于64. 3% )和作為差值的0. 25g異 丙醇。(在一項平行實驗中，將樣品在15°C和0. ImmHg下干燥。粉末XRD圖與實驗部分的 表No. 1對實施例49中制備的HCT 3012報道的完全相似)。
將異丙醇母液在約37°C (外置浴)減壓濃縮，得到2. 02g油狀殘余物，將其溶在二 氯甲烷(36g)中。有機相用水(3 X IOOmL)洗，然后減壓濃縮(外置浴溫37°C )，得到1. 78g。實驗06的分析結(jié)果 實驗07在-25°C加晶種從甲醇中結(jié)晶
HCT 3012 (g)溶劑/稀釋劑 (g)結(jié)晶溫度 CC )時間 (小時)收率％批號tt US07600379 (10. 04)CH3OH 批號tt VWR08Z0365 (101)-251582. 1在氮氣和機械攪拌下向一只250mL的帶夾套三口玻璃反應器中加入HCT 3012 (US 07600379，10. 04g)和甲醇(VWR 08Z2128，IOlg)。將該多相混合物在攪拌下于室溫保持為 得到透明溶液所需的一段時間(20分鐘)。將溶液冷卻至_3°C，在此溫度下保持攪拌15分 鐘。溶液保持透明。20分鐘后向此透明溶液中加入約l-2mg HCT 3012/01晶種(固體B)。 約2-3分鐘后開始結(jié)晶。將此多相混合物冷卻至_25°C，攪拌15小時，然后經(jīng)150mL帶夾套 的過濾器過濾，夾套溫度保持在約-20°C。濾餅用預冷至-20°C的甲醇(12g)洗，濕固體用 預冷(-20°C )的塞子壓緊。將固體物質(zhì)收集在預冷(-20°C )的50mL圓底燒餅中于_20°C 保存，得到10. 30g濕固體(固體A)。固體A的樣品用HPLC分析，結(jié)果指示含80. Og HCT 3012。因此該濕固體含8. 24g HCT 3012和作為差值的2. 06g甲醇，收率82. 1 %。實驗07的分析結(jié)果 實驗08從甲醇/水(95 5)中結(jié)晶 將5g去礦化水在甲醇(VWR 08Z2128，96g)中的溶液在氮氣和機械攪拌下冷卻 至-15°C。將溶液在_15°C保持30分鐘，沒有水的晶體形成。將此溶液在+20°C溫熱，加 入HCT 3012 (US 07600379，10. 08g)。將該多相混合物在攪拌下于室溫保持一段為得到透 明溶液所需的時間(20分)。將溶液冷卻，在8°C時溶液變渾(油狀乳液)，在_3°C加入約 l-2mgHCT 3012/01晶種(固體B)。將該乳狀液在_3°C攪拌15分鐘，然后冷卻至_15°C，在 攪拌下保持15小時。在這之后形成了固體，隨后經(jīng)150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾套 溫度在-20°C。濾餅用預冷至-20°C的甲醇(IOg)洗，濕固體用預冷(-20°C )的塞子壓緊。 將固體收集到預冷(-20°C)的50mL圓底燒瓶中并在-20°C保存，該濕固體由7. 59g松散的 晶體和1.62g硬固體組成。兩種固體的樣品均用HPLC分析，結(jié)果表明· 82. 4%的HCT 3012松散晶體，相當于6. 25g HCT 3012和作為差值的1. 34g甲 醇/水，收率62. 0% ；· 96. 5%的HCT 3012硬固體，相當于1. 56g HCT 3012和0. 06g甲醇/水，收率 15. 5% ； 總收率7. 81g，即，77. 5%。實驗08的分析結(jié)果 實驗09重復實驗04用于制備
在氮氣和機械攪拌下向一只500mL帶夾套的三口玻璃反應器中加入HCT 3012 (US 07600379,20. 03g)和甲醇(VWR 08Z2128，200g)。將此多相混合物在攪拌下于室溫保持一 段為得到透明溶液所需的時間(10分鐘)。將溶液于約30分鐘內(nèi)冷卻至-15°c (結(jié)晶溫 度)，并在攪拌下于此溫度保持20分鐘，溶液保持透明。20分鐘后，向此透明溶液中加入約 l-2mg HCT 3012/01晶種(固體B)。約2-3分鐘后，晶體開始分離。在_15°C攪拌此多相 混合物15小時，然后經(jīng)150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾套溫度在約-20°C。濾餅用預 冷至-20°C的甲醇(18g)洗，濕固體用預冷(-20°C)的塞子壓緊。將固體物質(zhì)收集在預冷 (-200C )的50mL圓底燒瓶中并在_20°C保存，得到18. 12g濕固體(固體A)。固體A的樣品用HPLC分析，結(jié)果指示含83. 3% HCT 3012。因此濕固體中含15. 09g HCT 3012和作為差值的3. 03g甲醇，收率75. 3%。實驗09的分析結(jié)果 實驗10—種摻雜樣品從甲醇中結(jié)晶 將下面列出的物質(zhì)在氮氣和機械攪拌下加到預先裝入帶夾套250mL三口玻璃反 應器內(nèi)的甲醇(VWR 08Z2128，101g)中
萘普生(PM-7BB-KL，100. 4mg)-此產(chǎn)物溶解，得到透明的溶液；· NAPOMe (13560-2,100. 2mg)-此產(chǎn)物溶解，得到透明的溶液；#HCT 3013(批號#13567-2，101. 3mg)_此產(chǎn)物溶解，得到透明的溶液;· HCT 3015 (批號 #13530-5，99. 6mg)_ 發(fā)乳光的混合物;#HCT 3012(批號#US 7600379，10. 03g)-發(fā)乳光的混合物在15分鐘后變成透明
的溶液。取樣并用HPLC分析以確定成分。將溶液冷卻至-3 °C，溶液變渾。加入l_2mg HCT 3012/01晶種(固體B)，將混合 物再攪拌45分鐘，未觀察到晶體形成。將混合物溫度降至_15°C，在攪拌下保持此條件15 小時。將該多相混合物經(jīng)150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾套溫度在約-20°C。濾餅用預 冷至-20°C的甲醇(20g)洗，用預冷(-20°C )的塞子將該濕固體壓緊。將固體物質(zhì)收集在 預冷(_20°C )的50mL圓底燒瓶中，在_20°C保存，得到8. 92g濕固體(固體A)。固體A的樣品用用LC分析，結(jié)果表明含72. 7% HCT 3012。因此濕固體中含6.48g HCT 3012和作為差值的2. 44g甲醇，收率64. 5%。實驗10的分析結(jié)果 實驗11 從 CH3- (CH2) 4-CH3/CH2Cl2/CH30H 中結(jié)晶 將下面列出的產(chǎn)物在氮氣和磁攪拌下加到一只IOOmL帶夾套的三口玻璃反應器 中參己烷(30.3g) 二氯乙烷(3. Og) 甲醇(1.5g)· HCT 3012(3. 04g)將l-2mg HCT 3012/01晶種(固體B)加到預先在_15°C冷卻的乳液中，油相開始 結(jié)晶。將該固_液混合物在_15°C攪拌3小時，然后經(jīng)150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾 套溫度在約_20°C。用預冷至_20°C的塞子將濾餅壓實。將固體物質(zhì)收集到預冷(-20°C )的50mL圓底燒瓶中并保持在_20°C，得到2. 33g 濕固體(固體A)。固體A的樣品用HPLC分析，結(jié)果表明含87. 3% HCT 3012。因此該濕固體含2.03g HCT 3012和作為差值的0. 3g溶劑，收率66. 8%0實驗11的分析結(jié)果 實驗13 從 CH3-(CH2) 4_CH3/CH2C12 中結(jié)晶 將下面列出的產(chǎn)物在氮氣和磁力攪拌下加入IOOmL帶夾套的三口玻璃反應器中參己烷(30.Og) 二氯甲烷(3. Og)· HCT 3012(3. 03g)將l-2mg HCT 3012/01晶種(固體B)加到預先在_15°C冷卻的乳狀液中，在_15°C 攪拌15小時，然后經(jīng)150mL帶夾套的過濾器過濾，保持夾套溫度在約-20°C。濾餅用預冷 (-200C)的塞子壓實。將固體物質(zhì)收集在預冷(-20°C )的50mL圓底燒瓶中，保存在-20°C，得到2. 34g 濕固體(固體A)。固體A的樣品用HPLC分析，結(jié)果指示含100. 4%的HCT 3012。因此該濕固體含 2. 34g HCT 3012，不含溶劑，收率 77. 2%。實驗13的分析結(jié)果 實驗14 自正己烷/CH2Cl2中結(jié)晶HCT 3012 將HCT 3012 (US 07600379，3. 07g)和 CH2Cl2 (FK73180，3. 02g)在氮氣和磁力攪 拌下于室溫加入到帶夾套的三口玻璃反應器(IOOmL)中。逐漸加入正己烷(SA 81835， 4. 15g)，直到溶液變渾。然后在0°C下交替地加入CH2Cl2(7. 06g)和正己烷(9. 23g)以保持 混濁。將該混合物在攪拌下保持-1°C，WAHCT 3012/01結(jié)晶晶種(約l-2mg)，然后將溫 度保持在_13°C，沒有晶體形成。將混合物加熱至20°C，加入另一份正己烷(52.3g)，得到 發(fā)乳光的溶液，然后用冰/鹽浴將該體系冷卻至_13°C，加入另一份HCT 3012/01晶種(約 l_2mg)。幾分鐘后混合物開始結(jié)晶，保持_13°C的溫度2小時，然后冷卻到-20°C。繼續(xù)攪 拌15小時，隨后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度為約_20°C。將濕固體物質(zhì)在預冷的小瓶中于-20°C保存(3. 05g)(樣品A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(0. 12g)(樣品B)。分析結(jié)果
樣品B0. 0520. 0100. 1180. 0000. 9040. 484實驗15凈HCT 3012的結(jié)晶 將HCT 3012 (US 07600379,3. 54g)在磁力攪拌下于室溫裝入小瓶中。將該油狀物 用冰/鹽浴冷卻到-15°C，停止磁力攪拌。加入HCT 3012/01晶種(約l_2mg)，幾分鐘后油 開始結(jié)晶。將小瓶保存在_20°C。粉末XRD圖與實驗部分表No. 1中對實施例49中制備的 HCT 3012報道的完全相似。按照實驗部分中的報道進行的DSC分析顯示，在13. 10°C開始熔化。分析結(jié)果無可利用的數(shù)據(jù)實驗16HCT 3012 自 CH3OH 中(1/2，ν/ν)結(jié)晶 將HCT 3012(10. 05g)在室溫于氮氣和磁力攪拌下加到一只帶夾套的三口玻璃反 應器(IOOmL)中。將該體系冷卻至-15°C，加入HCT 3012/01晶種(約l_2mg)。1小時后加 入CH30H(20.48g)。繼續(xù)攪拌2小時，然后將該混合物經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保 持夾套溫度在約-20°C。將濕固體溶在二氮甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)下減壓濃縮，得到油狀殘余物 (8. 55g)(樣品 A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(0. 90g)(樣品B)。分析結(jié)果 實驗17從CH3OH中結(jié)晶 將HCT 3012(10. 13g)在氮氣和磁力攪拌下加到帶夾套的三口玻璃反應器 (IOOmL)中。將混合物在攪拌下保持在_15°C，WAHCT 3012/01晶種(約l_2mg)。1小時 后將混合物加熱至15°C，加入甲醇(20. 55g)。然后將該體系冷卻至_15°C，加入另一份HCT 3012/01晶種(約l_2mg)，將混合物保持攪拌2小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾， 保持夾套在約-20°C，濾餅用預冷至_20°C的甲醇(IOg)洗。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)下減壓濃縮，得到油狀殘余 物(8.73g)(樣品A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(1.37g)(樣品 B)。分析結(jié)果 注L0Q =最低檢出濃度；以下各表均同此表。實驗18HCT 3012 從 CH3 (CH2) 30H( 1/10，ν/ν)中結(jié)晶 在室溫下將HCT 3012(10. 18g)于氮氣和磁力攪拌下加到一只帶夾套的三口玻璃 反應器(250mL)中。加入1-丁醇(100. 19g)，20分鐘后形成溶液。將體系的溫度冷卻至 15°C，溶液變渾。在_5°C開始形成油滴。加入HCT 3012/01晶種(約l-2mg)，幾分鐘后形 成晶體。將該體系冷卻至_15°C，繼續(xù)攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾， 保持夾套溫度在約_20°C。濾餅用預冷至_20°C的1-丁醇(20g)洗，濕固體用預冷(-20°C ) 的塞子壓實。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (樣品A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(樣品B)。分析結(jié)果 實驗19自CH3OH中結(jié)晶 此實驗按照實驗No. 17進行，當結(jié)晶開始時，保持體系的溫度為_5°C。樣品A和樣品B像實施例17 —樣得到。分析結(jié)果 實驗20從水中結(jié)晶HCT 3012/09 室溫下將HCT 3012 (US 07600379，10. 18g)在氮氣氛和磁力攪拌下加到帶夾套的 三口玻璃反應器(IOOmL)中。將體系冷卻至3°C，加入冷卻(_20°C)的HCT 3012/09晶體 (3. 15g)。繼續(xù)攪拌3小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度在約3°C。將濕固體在_20°C于小瓶內(nèi)保存(3. 37g)(樣品A)。分析結(jié)果沒有可利用的數(shù)據(jù)實驗21從CH3OH中結(jié)晶 在氮氣和機械攪拌下將甲醇(20. Ilg)加到一只帶夾套的IOOmL三口玻璃反應器 中。將其在20°C下保持攪拌。加入HCT 3012 (10. 06g)，將混合物保持攪拌30分鐘，然后冷 卻至IiTCJnAHCT 3012/01晶種(約l-2mg)。約15分鐘后未觀察到固體。將溫度逐漸 降至8°C、6°C和4°C，未觀察到固體。當冷卻至2°C時開始結(jié)晶。然后將混合物加熱至3°C，攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保 持夾套溫度在約_20°C，濾餅用預冷至_20°C的甲醇(IOg)洗。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (7. 25g)(樣品Α)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(2. 32g)(樣品B)。分析結(jié)果 實驗22從CH3OH中結(jié)晶 在氮氣氛和機械攪拌下，將HCT 3012(10. 09g)于室溫下加到帶夾套的三口玻璃 反應器(250mL)中，然后將該油狀物冷卻到_15°C，加入冷卻的(_15°C )甲醇(100. llg)。 將該溶液在_15°C下保持攪拌30分鐘，然后加入HCT 3012/01晶種(約l_2mg)。將混合物 攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套在約0°C，濾餅用預冷至0°C 的甲醇(IOg)洗。將濕固體物質(zhì)溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)下減壓濃縮， 得到油狀殘余物(5. 18g)(樣品A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (4. 65g)(樣品 B)。分析結(jié)果 實驗23摻雜2 % NaP的HCT 3012從CH3OH中結(jié)晶 在氮氣和機械攪拌下將以下物質(zhì)于室溫下加入到一只帶夾套的250mL三口玻璃 反應器中· CH3OHdOO. 26g)· HCT 3012(9. 82g) 萘普生(0. 199g)將該均相混合物冷卻至_3°C，30分鐘后加入HCT 3012/01晶種(約l_2mg)。將溫 度逐漸地(10°c/小時)降至-40°c，在這些條件下繼續(xù)攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾 器(150mL)濾出晶體，并保持夾套溫度在約-20°C。濾餅用預冷至_20°C的MeOH(IOg)洗， 濕固體用預冷(-20°C )的塞子壓實。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (6. 40g)(樣品 A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(3. 26g)(樣品B)。分析結(jié)果 注1)初始純度97. 0%實驗25在2 °C從甲酰胺中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下，將HCT 3012(10. 16g)和甲酰胺(20. Ilg)裝入帶夾套的 IOOmL三口玻璃反應器中。將溶液在15°C保持攪拌30分鐘，然后冷卻至0°C，加入HCT 3012/01晶種(約l-2mg)。約15分鐘后開始結(jié)晶，但不再能磁力攪拌。此時加入另一份甲 酰胺(20. 18g)以幫助磁力攪拌。將該體系在2°C下冷卻，攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套的過 濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度在約0°C，濾餅用預冷的(0°C)甲酰胺(20g)洗。將濕固體物質(zhì)溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余 物(12. 62g)，它主要被甲酰胺污染(樣品A)。分析結(jié)果 3. 1.2. 13實驗26從甲苯/正己烷中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下，將HCT 3012(10. 13g)和甲苯(20. 49g)加入到一只帶夾套 的三口玻璃反應器(IOOmL)中。將溶液在15°C保持攪拌30分鐘，然后冷卻至0°C，加入HCT 3012/01晶種(約l-2mg)。未觀察到固體。將該體系冷卻至_15°C，加入另一份HCT 3012/01 晶種(約l_2mg)，未觀察到固體。將體系冷卻至_25°C，加入另一份HCT 3012/01晶種(約 l-2mg)，未發(fā)現(xiàn)固體。將體系在0°C冷卻并加入正己烷(30g)和另一份HCT 3012/01晶種 (約l-2mg)，未觀察到晶種。最后將體系冷卻至_15°C，加入另一份HCT 3012/01晶種(約 l_2mg)，幾分鐘后結(jié)晶開始。將該混合物攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度為 約_15°C。用預冷至-15°C的甲苯/正己烷混合物(25g，10/15，ν/ν)洗濾餅。將濕固體物質(zhì)溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)下減壓濃縮，得到油狀殘 余物(4.98g)(樣品A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(5.41g)(樣 品B) ο分析結(jié)果
089實驗28在3 V從二乙二醇中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下，將HCT 3012(10. 05g)和二乙二醇(20. 03g)加入到帶夾套 的三口玻璃反應器(IOOmL)中。將混合物在15°C保持攪拌30分鐘，然后冷卻至0°C，加入 HCT 3012/01晶種(約l-2mg)。約15分鐘后結(jié)晶開始。將混合物在3°C冷卻并攪拌15小 時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度在約0°C。濾餅用預冷至0°C的二 乙二醇(15g)洗。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (11. 52g)，它主要被二乙二醇污染(樣品A)。分析結(jié)果 實驗33 摻雜 HCT 3013 的 HCT 3012 在 _10°C從 CH3OH 中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下，向HCT 3013(13567-2,0. 060g)在丙酮(2. 60g)中的溶液于 室溫下加入HCT3012(10. 08g)。將得到的溶液在30分鐘內(nèi)加到一只在_10°C冷卻的裝有甲 醇(31. 60g)的帶夾套三口玻璃反應器(IOOmL)中。將該多相混合物在-10°C保持攪拌1小時，沒有晶體形成。將其在-10°C再攪拌14 小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(50mL)過濾，保持夾套溫度在約_20°C。濾餅用預冷至-20°C 的甲醇(7.9g)洗，濕固體用預冷(-20°C )的塞子壓實。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，溶液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余 物(4. 98g)(樣品 A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(4. 72g)(樣品B)。分析結(jié)果 實驗33 摻雜 HCT 3013 的 HCT 3012 在-10°C從 CH3CH0HCH3 中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下向HCT 3013(13567-2,0. 060g)在丙酮(2. 60g)中的溶液于 室溫下加入HCT 3012 (10. OOg)。將得到的溶液在30分鐘內(nèi)加到在_10°C冷卻的裝有2-丙 醇(31. 60g)的三口帶夾套玻璃反應器(IOOmL)中。將該多相混合物在_10°C保持攪拌1小 時，沒有晶體形成。將其在-10°C再攪拌62小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(50mL)過濾，保持 夾套在約_20°C。濾餅用預冷至_20°C的2-丙醇(7.9g)洗，濕固體用預冷(_20°C )的塞子 壓實。將濕固體物質(zhì)溶在二氯甲烷(50g)中，溶液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(6. 97g)(樣品A)。將異丙醇/丙酮母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(2.57g)(樣品 B)。分析結(jié)果 注1)雜質(zhì)％是根據(jù)加入的HCT 3013計算的，不是用HPLC測定的。2)起始物樣品純度98. 4%。實驗35 摻雜 HCT 3016 的 HCT 3012 在 0°C從 CH3CH0HCH3/THF 中結(jié)晶 在氮氣和磁攪拌下，將以下物質(zhì)按指定的順序在室溫下加到帶夾套的IOOmL三口 玻璃反應器中· 2-丙醇(52. 36g)· THF (5. 95g)
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· HCT 3016(0. 03g)· HCT 3012(10. 08g)將溶液冷卻到0°C，加入HCT 3012/01晶種(約l_2mg)。在將混合物于0°C攪拌 1小時的同時，結(jié)晶開始。將其冷卻至-10°C，經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套 在-20°C。濾餅用預冷(-20°C )的2-丙醇(15. 7g)洗，濕固體用預冷(-20°C )的塞子壓實。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，溶液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余 物(7.79g)(樣品A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(2. 17g)(樣品 B)。分析結(jié)果 注1)雜質(zhì)％是根據(jù)加入的HCT 3013計算的，不是用HPLC測定的。2)起始物純度98. 7%。實驗36從CH3OH中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下將HCT 3012(30. 14g)和甲醇(60. 31g)加到三口帶夾套玻璃 反應器(250mL)中。將混合物在20°C保持攪拌30分鐘，然后將溫度降至3°C，約15分鐘后加 入HCT 3012/01晶種(約l-2mg)。將混合物攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL) 過濾，保持夾套在約-20°C。濾餅用預冷(_20°C)的甲醇(30g)洗。將一部分濕固體(13.16g)轉(zhuǎn)移到圓底燒餅中，在冰/鹽浴中減壓冷卻6小時， 得到干的固體(9.65g)(樣品A干樣)。剩余的濕固體物質(zhì)溶在二氯甲烷(50g)中，在約 370C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(11.64g)(樣品A濕樣)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(8. 54g)(樣品B)。分析結(jié)果 3. 1. 2. 23.實驗 37 從 CH3OH/ 甲苯(3 1，ν/ν)中結(jié)晶 將下面列出的物質(zhì)在氮氣和磁力攪拌下于室溫加入到一只帶夾套的IOOmL三口玻璃反應器中 甲醇(15. 02g) 甲苯(5.01g)· HCT 3012(10. 21g)該溶液在冷卻至3°C時仍保持透明，然后冷卻至-10°C (溶液在_5°C時變渾)，保 持15分鐘，立即加入HCT 3012/01晶種。將混合物在此溫度攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套的 過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度在約-20°C。濾餅用預冷至_20°C的甲醇/甲苯混合物 (10g，7. 5/2. 5，ν/ν)洗，濕固體用預冷(-200C )的塞子壓實。將濕固體物質(zhì)溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余 物(1.84g)(樣品 A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(8. 41g)(樣品B)。分析結(jié)果 實驗38從CH3OH/正己烷(3 1，ν/ν)中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下將下面列出的物質(zhì)于室溫下加入到一只帶夾套的IOOmL三 口玻璃反應器中 甲醇(15. 08g) 正己烷(5. 03g)· HCT 3012(10. 08g)將溶液冷卻至3°C (溶液在15°C變渾)，15分鐘后加入HCT 3012/01晶種(l-2mg)。 30分鐘后未觀察到固體。將該混合物冷卻至0°C，加入另一份HCT 3012/01晶種(約 l-2mg)。30分鐘后未觀察到固體。然后將混合物冷卻至_3°C，幾分鐘后結(jié)晶開始。保持體系 溫度在0°C，攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度在約-20°C。 濾餅用預冷至_20°C的甲醇/正己烷混合物(10g，7. 5/2. 5，ν/ν)洗，濕固體用預冷(_20°C ) 的塞子壓實。將該濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)下減壓濃縮，得到油狀 殘余物(6.54g)(樣品Α)。將母液在約37°C (浴溫)下減壓濃縮，得到油狀殘余物(3.48g) (樣品B)。分析結(jié)果 實驗39摻雜1 % NAP的HCT 3012從CH3OH中結(jié)晶 將下面列出的物質(zhì)在氮氣和磁力攪拌下按指定的順序于室溫下加到帶夾套的 IOOmL三口玻璃反應器中 甲醇(22. Ilg)· HCT 3012(10. 08g) 萘普生(0. IOOg)將此多相混合物冷卻至3°C，15分鐘后加入HCT 3012/01晶種(約l_2mg)。30分 鐘后晶體形成。繼續(xù)攪拌15小時，然后將晶體經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫 度在約-20°C。濾餅用預冷(_20°C )的MeOH(IOg)洗，濕固體用預冷(_20°C )的塞子壓實。 將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(6. 14g) (樣品A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(3. 84g)(樣品B)。分析結(jié)果 注1)初始純度98. 0%實驗40在-15°C從甲醇中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下將HCT 3012(10. 09g)加入到帶夾套的三口玻璃反應器 (IOOmL)中。將該體系在20°C保持攪拌30分鐘，然后冷卻至-15°C，加入預冷的甲醇 (20. 02g)。低溫使磁力攪拌困難。幾分鐘后結(jié)晶開始，將混合物攪拌15小時，然后經(jīng)帶夾套 的過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度為約_20°C，濾餅用預冷(_20°C )的甲醇(40g)洗。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (7. 58g)(樣品 A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(2. 14g)(樣品B)。分析結(jié)果 實驗41在-15°C從CH3OH中結(jié)晶 此實驗按照實驗40進行，使用機械攪拌代替磁力攪拌，并且加晶種結(jié)晶。樣品A和樣品B按照實施例40得到。分析結(jié)果 實驗42在-15°C至3°C從甲醇中結(jié)晶 將HCT 3012(30. 09g)在氮氣和機械攪拌下加到帶夾套的三口玻璃反應器 (IOOmL)中，冷卻至_15°C，加入預冷的甲醇(60. 09g)。5-10分鐘后加入HCT 3012/01晶種(約l_2mg)。當結(jié)晶開始時，將體系逐漸加熱至3°C (在1小時內(nèi))。將混合物攪拌15小 時，然后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套在約-20°C，濾餅用預冷(-20°C )的甲 醇(50g)洗。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (20. 98g)(樣品 A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(8. 19g)(樣品B)。分析結(jié)果 實驗43在3-5 °C從甲醇中結(jié)晶
將HCT 3012 (30. Olg)在氮氣和機械攪拌下加到帶夾套的三口玻璃反應器 (250mL)中。保持該體系在20°C攪拌30分鐘，然后冷卻至3°C，加入預冷的甲醇(60. 04g)。 10-15分鐘后加入HCT 3012/01晶種(約l_2mg)，在約30分鐘內(nèi)結(jié)晶開始。30分鐘后將溫 度保持在4°C，未觀察到晶體的變化，然后將溫度保持在5°C約30分鐘，粉狀晶體變成團塊 并開始融合。然后將混合物保持在4°C并攪拌15小時，隨后經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過 濾，保持夾套溫度為約_20°C，濾餅用預冷(_20°C )的甲醇(50g)洗。將濕固體溶在二氯甲烷(50g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (19. 80g)(樣品 A)。
將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(10. 04g)(樣品B)。分析結(jié)果 實驗45從甲醇/甲苯(45 1，ν/ν)中結(jié)晶 此實驗按照實驗37進行，但是在3°C結(jié)晶1小時，而不是在0°C結(jié)晶15小時。樣品A和樣品B按照實驗37得到。分析結(jié)果 實驗47從CH3CH0HCH3/甲苯中結(jié)晶 此實驗按照實驗45，用2-丙醇代替甲醇進行。樣品A和樣品B按照實驗37得到。分析結(jié)果 實驗49HCT 3012從CH3OH中結(jié)晶(晶種的質(zhì)和量的影響) 將HCT 3012(99. 92g)和甲醇(202. Og)在氮氣和機械攪拌下加到帶夾套的三口玻 璃反應器(500mL)中。將此體系在20°C攪拌30分鐘，然后冷卻至3°C，加入HCT 3012/01 晶種(約l-2mg)。20分鐘后混合物開始結(jié)晶。繼續(xù)攪拌15小時，然后將晶體經(jīng)帶夾套的 過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度在約-20°C。濾餅用預冷(_20°C )的甲醇(50g)洗，濕 固體用預冷(-20°C )的塞子壓實。將濕固體溶在二氯甲烷(IOOg)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (71. 5g)，將其按相同方式結(jié)晶兩次，得到的混合物經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持 夾套在約-20°C，濾餅用預冷(-20°C)的甲醇(30g)洗。將一部分濕固體轉(zhuǎn)移到圓底燒瓶 中，在冰/鹽浴中冷卻下抽真空6小時，得到干的固體(19. 28g)(樣品A干樣)。粉末XRD 圖與實驗部分表No. 1中對以下制備的濕HCT 3012報道的完全相似。按照實驗部分中的報 道進行的DSC分析顯示出在14. OrC開始熔化。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(14. 37g)(樣品B)。分析結(jié)果 實驗50摻雜10% NAP的HCT 3012從甲醇中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下，將以下物質(zhì)在室溫下按指定的順序裝入帶夾套的三口 250mL玻璃反應器中 甲醇(61.03g)· HCT3012(29. 97g) 萘普生(2· 99g)將該多相混合物冷卻至3°C，15分鐘后加入HCT 3012/01晶種(約l_2mg)。1小 時后無結(jié)晶形成。將溫度降至0°c，無晶體形成。然后將溫度保持在-3°c，仍無晶體形成。 加入另一份HCT 3012/01晶種(約l_2mg)，30分鐘后混合物開始結(jié)晶。繼續(xù)攪拌15小時， 然后將晶體經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套在約-20°C。濾餅用預冷(_20°C ) 的甲醇(30g)洗，濕固體用預冷(-20°C )的塞子壓實。將濕固體溶在二氯甲烷(40g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (17. 6g)(樣品 A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(11.71g)(樣品B)。分析結(jié)果 注1)初始純度89.0%實驗51摻雜0. 5%不同雜質(zhì)的HCT 3012從甲醇中結(jié)晶 在氮氣和磁力攪拌下，將以下物質(zhì)在室溫下按給定的順序加到帶夾套的250mL三 口玻璃反應器中參 CH3OH VWR08Z4366 (102. 94g)· HCT 3012(10. 06g)· HCT 3013(0. 051g)· HCT 3016(0. 050g)
參 NapOMe (0. 050g) 萘普生(0. 051g)將該溶液冷卻至3°C，15分鐘后加入HCT 3012/49晶種(約300mg)。2小時后無 晶體形成。保持溫度為0°c，無晶體形成。繼續(xù)攪拌15小時，然后將溫度保持在-3°c，20分 鐘后結(jié)晶開始。繼續(xù)攪拌15小時，將晶體經(jīng)帶夾套的過濾器(150mL)過濾，保持夾套溫度 在約-20°C。濾餅用預冷(-20°C )的甲醇(20g)洗，濕固體用預冷的(-20°C )塞子壓實。將濕固體溶在二氯甲烷(20g)中，在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物 (1.96g)(樣品 A)。將母液在約37°C (浴溫)減壓濃縮，得到油狀殘余物(8. 87g)(樣品B)。分析結(jié)果 注1)起始純度96. 8%實驗52HCT 3012從甲醇中結(jié)晶 此實驗按照實驗51進行，但是使用0. OlOg而不是0. 300g HCT3012/49。分析結(jié)果 實施例05、06、15和49的HCT 3012樣品的粉末XRD分析HCT 3012樣品的粉末XRD分析用一臺Thermo X，tra粉末XRD衍射儀使用Cu K α 輻射進行，該衍射儀以Θ-Θ幾何學方式操作，配有Si(Li)熱電子固態(tài)檢測器和在81-723Κ 的溫度范圍內(nèi)工作的非環(huán)境附屬裝置Anton Paar TTK450低溫室。X射線管電壓和電流設定在42. 5KW和40mA。分析工作在273K進行，保持低溫室溫度在整個分析期間恒定。試樣 直接在用來儲存樣品的冷凍室內(nèi)制備并轉(zhuǎn)移到在冰浴中的操作室內(nèi)。利用Bragg-Brentano 仲聚焦系統(tǒng)的發(fā)散光學在2 θ =3-40°的范圍收集XRD圖譜，步階為0.05°，計數(shù)時間為 每階2秒。發(fā)散和散射狹縫分別設定為2和3mm，而檢測器散射及參考狹縫分別設定為0. 5 禾口 0. 2mm。收集數(shù)據(jù)并用Win XRD w 2. 0-5軟件分析。XRD圖譜用TREOR 90檢索。結(jié)果所有被分析的樣品的粉末XRD圖都完全相似，指示在所有樣品中存在同一晶相， 與結(jié)晶過程中使用的溶劑和濕或干的標示無關。在實驗圖譜中只觀察到相對強度的很小變 化，與樣品制備中產(chǎn)生的擇優(yōu)取向的程度不同相一致，而峰的位置在實驗誤差之內(nèi)是重復 的。作為實例，表No. 1中列出了濕樣品49的圖譜。表No. IHCT 3012樣品A (甲醇，濕)的XRD譜線列表 實施例05、15和49的HCT 3012樣品的DSC分析示差掃描量熱分析在以下條件下用帶有內(nèi)冷裝置的儀器DSC 821e (Mettler-Toledo)進行溫度斜坡-30/+25°C (等溫_30°C 10分鐘，以2。C /分的速率斜線升溫至25°C )加熱速率2°C/分氣體氮氣流量30mL/分樣品座密封的鋁盤計算軟件StareSff 9. 20所有樣品均在_30°C儲存并放入設定在_30°C的儀器中。
表注表中列出的所有數(shù)椐均指分離的濕晶體；
2)在分離濕晶體前于選定的溫度下進行的時間；
3)表中列出的收率指分離出的濕晶體中HCT3012的含量,
Cz S1874014 A S- S M^ 53/64 ^
〔04781——1
(30g/3g)
表注”表中列出的所有數(shù)據(jù)均指分離的濕晶體；
在分離濕晶體前于選定的溫度下進行的時間； 3>表中列出的收率指分離出的濕晶體中HCT 3012的含量。
匯總表711 在溶劑混合物中結(jié)晶
〔0481
權(quán)利要求
一種純化萘普西諾的方法，包括以下步驟a)將含有萘普西諾的混合物溶解或分散在溶劑中；b)將溶液或兩相分散體在攪拌下冷卻至-20℃至10℃；c)任選地用萘普西諾的晶體向溶液加晶種；d)攪拌，并保持溫度為-40℃至10℃；e)保持溫度低于15℃，收集形成的固體。
2.權(quán)利要求1的方法，其中的混合物含有超過90%重量的萘普西諾。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其中步驟a)的溶劑是極性質(zhì)子溶劑或非質(zhì)子溶劑，或是它 們的混合物。
4.權(quán)利要求3的方法，其中的極性質(zhì)子溶劑選自醇、二醇、酰胺或其混合物。
5.權(quán)利要求4的方法，其中的極性質(zhì)子溶劑是甲醇、乙醇、異丙醇或1-丁醇、二乙二醇 或甲酰胺，或它們的混合物。
6.前述任一項權(quán)利要求的方法，其中步驟b)的溫度是從_15°C至5°C。
7.前述任一項權(quán)利要求的方法，其中步驟d)的溫度是從_15°C至5°C。
8.前述任一項權(quán)利要求的方法，其中步驟e)的溫度在10°C以下。
9.用權(quán)利要求1-5中的方法得到的萘普西諾。
10.熔點約為15°C的固體萘普西諾。
全文摘要
本發(fā)明涉及純化萘普西諾的方法，包括以下步驟a)將含有超過90％重量萘普西諾的混合物溶解或分散在溶劑中；b)將溶液或兩相分散體在攪拌下冷卻至-20℃至10℃；c)任選地用萘普西諾的晶體向溶液中加晶種；d)攪拌，并保持溫度為-40℃至10℃；e)在保持溫度低于15℃下收集形成的固體。本發(fā)明的另一目的是晶體形式的萘普西諾。
文檔編號C07C203/04GK101874014SQ200980101116
公開日2010年10月27日 申請日期2009年6月18日 優(yōu)先權(quán)日2008年6月20日
發(fā)明者N·托紐蒂, P·阿萊格里尼, R·里沃爾塔, T·德拉?？? T·斯庫布拉 申請人:尼科克斯公司