專利名稱：作為5-lo抑制劑的吡唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通式(I)的化合物 其中，Q、X、Y、L、R1-R12具有下文指出的含義，但所述化合物不是 (a) 4- (3- {[3-氟-4- (1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲 酰胺或(b) 4- (3- {[4- (1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲 酰胺；本發(fā)明還涉及用于制備此類衍生物的方法及中間產(chǎn)物，含有此類衍生物的組合物及 此類衍生物的用途。
背景技術(shù)：
白三烯(LT)是一組高效的脂肪介體，其在多數(shù)疾病中發(fā)揮重要作用，包含炎性疾 病和過敏疾病狀態(tài)(Samuelsson，B.，1983，Leukotrienes :Science220，568-575)。5-脂氧 合酶(5-L0)使花生四烯酸轉(zhuǎn)化成白三烯A4(LTA4)，然后白三烯A4可通過LTA4水解酶水解 成白三烯B4(LTB4)，或可通過LTC4合成酶介導(dǎo)的催化反應(yīng)而反應(yīng)形成白三烯C4(LTC4)。已實(shí)驗(yàn)顯示，白三烯B4、C4、D4、和E4在哮喘所涉及的炎癥中發(fā)揮作用。此外，吸 入的LTC4和白三烯D4(LTD4)已被報(bào)導(dǎo)為當(dāng)前在人類患者中進(jìn)行的研究中最有效的支氣管 收縮劑。LTC4和LTD4還被報(bào)導(dǎo)為可能使得炎性細(xì)胞遷移至哮喘氣道內(nèi)(0’ Byrne，Chest， Vol 111， (2) 27)?；罨?-脂氧合酶(5-L0)途徑導(dǎo)致多種前炎性白三烯脂類介質(zhì)的生物合成。 已使用數(shù)種LT缺陷型動物模型，特別是5-L0基因敲除小鼠，證實(shí)了白三烯在哮喘和 呼吸疾病中的重要角色(Leuchron Contract No. QLG1-CT-2001-01521, Review, The Leukotrienes :Signaling Molecules in Chronic andDegenerative Diseases Byrum, R. S. , Goulet, J. L. , Snouwaert, J. N. , Griffiths, R. J. &Koller, B. H. (1999), J Immunol 163，6810-6819. Bailie, M. B.，Standiford, Τ. J.，Laichalk, L. L.，Coffey, Μ. J.，Strieter, R. &Peters-Golden, Μ. (1996)，J. Immunol. 157，5221-5224)。此外，干擾 LT 的生物合成 和作用的藥物已作為對抗哮喘和過敏性鼻炎的新穎藥物上市(Drazen，J. F. , Israel, Ε. &0' Byrne, P. (1999)，N. Engl. J. Med. 340，197-206)。關(guān)于脂氧合酶抑制劑的綜述，參見 H. Masamune禾口 L. S. Melvin, Sr. Annual Reports in MedicinalChemistry, 1989, 24, 71-80 頁(Adademic)。特別地，4-(3-(4_(2-甲基-IH-咪唑-1-基)苯基硫基)苯基)_四氫_2H_吡
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發(fā)明內(nèi)容
在一個方面，本發(fā)明涉及化學(xué)式(I)的化合物 或其可藥用鹽或溶劑化物，其中，Q 是-S-或-S(O) _ ；X和Y每個獨(dú)立地選自C和N構(gòu)成的組；L選自如下構(gòu)成的組(a)鍵(b) - (CH2)-(c)-0-(d)-C(O)-R1和R2每個獨(dú)立地選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)甲基(c)乙基R3選自如下構(gòu)成的組(a) — CN(b) — C (0) NH2(c) — C(O)NH(CH3)(d) ^ C(O)N(CH3)2R4是H或鹵素R5選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c) — CN(d) — OCH3R6選自如下構(gòu)成的組
CN 101918392 A^ 明 zP2/111 頁
喃-4-甲酰胺之前在人類臨床試驗(yàn)中被測試過(US 5，883，106和EP 0787127)。
因此，仍需替代性以及可能有所改進(jìn)的5-L0受體拮抗劑，其中，改進(jìn)將期望獲得 更好的物理化學(xué)性質(zhì)(例如溶解度方面)，和/或更好的藥理學(xué)性質(zhì)(例如，體內(nèi)活性、效 力、副作用或藥代動力學(xué)方面)。本文中，本發(fā)明涉及新穎的5-L0受體拮抗劑。
(I)
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(a)H(b)鹵素(c) — CNR7選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c) — CN(d)甲基(e) — OCH3R8在當(dāng)Y是N時(shí)不存在，或R8選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c) — CN(d)甲基(e) — OCH3R9在當(dāng)X是N時(shí)不存在，或R9選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c) — CN(d)甲基(e) — CF3(f) — OCH3Rltl選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c)— CNR11 是 H 或(C1-C7)烷基，R12是H或鹵素但化學(xué)式(I)的化合物不是(a) 4- (3- {[3_氟_4_ (1_甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺，或其可藥用鹽或溶劑化物，或(b)4-(3-{[4_(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲 酰胺，或其可藥用鹽或溶劑化物。在另一個方面，本發(fā)明涉及下述藥物組合物，其包含上文定義的化學(xué)式(I)的化 合物或其可藥用鹽或溶劑化物和一種或多種可藥用賦形劑。在另一個方面，本發(fā)明涉及一種特別用于治療5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥的組 合，該組合包含如上文所定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和一種或 多種另外的治療劑。在另一個方面本發(fā)明涉及如上文定義的化學(xué)式(I)的化合物，或如上文定義的其可藥用鹽或溶劑化物，其用作為藥物。在另一個方面，本發(fā)明涉及一種治療需要治療的患者的5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或 病癥的方法，所述方法通過向所述患者施用治療有效量的如上文定義的化學(xué)式(I)的化合 物或其可藥用鹽或溶劑化物來進(jìn)行。在另一個方面，本發(fā)明涉及如上文定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶 劑化物，其用于治療5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥。在另一個方面，本發(fā)明涉及如上文定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶 劑化物用于制造用于治療5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥的藥物的用途。在另一個方面，本發(fā)明涉及制造化學(xué)式(I)的化合物的方法，所述方法包括(i)在合適的溶劑中使化學(xué)式1的化合物 其中，R1至R6如上文所定義，且Z1是離去基團(tuán)或偶聯(lián)伴侶，與化學(xué)式2的化合物接 觸 其中，X、Y、L和R7至R12如上文所定義，且Z2是氫或保護(hù)基團(tuán)；或，代替⑴( )使化學(xué)式4的化合物 其中，R1至R6如上文所定義，且Z2如⑴中所定義，與化學(xué)式5的化合物接觸
其中，X、Y、L和R7至R12如上文所定義，且ZjB⑴中所定義，以獲得化學(xué)式3的 化合物 (iii)任選地，使該化學(xué)式3的化合物與氧化劑于在合適的溶劑中接觸，以獲得相 對應(yīng)的化學(xué)式18的亞砜 圖1 測得的(25，4幻-4-(2-氟-3-{[4-(1_甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基} 苯基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈和對-甲苯磺酸的1 1摩爾比例鹽結(jié)晶的PXRD 圖案(2 θ角士0.1度)；圖2 與圖1相同的化合物的TGA/SDTA軌跡。熔點(diǎn)吸熱具有位于132. 7°C處的峰 (于 130.9°C開始)。發(fā)明詳述即使未明確指示，也應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明所有方面均不包括下列化合物(a) 4- (3- {[3_氟_4_ (1_甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺或其可藥用鹽或溶劑化物，和(b)4-(3-{[4_(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲 酰胺或其可藥用鹽或溶劑化物。除非另有指示，本發(fā)明中，“化學(xué)式(I)的化合物”的用語意指化學(xué)式(I)或化學(xué) 式(Ia)或化學(xué)式(Ib)或化學(xué)式(Ic)的化合物，其中，化學(xué)式(la)、(Ib)和(Ic)如下所定 義。除非另有指示，本發(fā)明中，“化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物”的用語


意欲指化學(xué)式⑴的化合物、化學(xué)式⑴的化合物的可藥用鹽、化學(xué)式⑴的化合物的可藥 用溶劑化物、化學(xué)式(I)的化合物的可藥用鹽的可藥用溶劑化物。還應(yīng)理解，“化學(xué)式(I) 的化合物”的用語包含如前文定義的化學(xué)式⑴的化合物、其所有的多形體(polymorphs) 和晶體慣態(tài)(crystalhabits)、前藥及其異構(gòu)體(包含光學(xué)、幾何和互變異構(gòu)體)，與化學(xué)式 (I)的經(jīng)同位素標(biāo)記的化合物。上文所述的通式(I)中_烷基意指環(huán)狀、直鏈或分支的完全飽和的烴基，或環(huán)狀、直鏈或分支的完全飽和 的烴基的組合。用語(C1-C7)烷基意指含有1、2、3、4、5、6或7個碳原子的如上文定義的 烷基。用語(C1-C6)烷基意指含有1、2、3、4、5，或6個碳原子的如上文定義的烷基。合適 的(C1-C7)烷基或(C1-C6)烷基的例子包含甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲 丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、正己基、異己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、 —(CH2)-環(huán)丙基、一(CH2)-環(huán)戊基；-鹵素意指選自氟、氯、溴和碘構(gòu)成的組的鹵原子。除非另有指示，鹵素優(yōu)選是氯或 氟；-箭頭指與化學(xué)式⑴的化學(xué)核心相連的殘基側(cè)。本發(fā)明中，短語“治療有效”意欲定量化合物或藥物組合物的量或組合治療的情況 下活性成份的組合量。此量或組合量將達(dá)成治療相關(guān)病癥的目標(biāo)。在本文中使用時(shí)，術(shù)語“治療”用于描述本發(fā)明并且除非另有限定的情況下， 意指施用所述化合物、藥物組合物或組合，以實(shí)現(xiàn)預(yù)防性(preventative)、減輕性 (palliative)、支持性(supportive)、恢復(fù)性(restorative)或治愈性(curative)治療。在本文中使用時(shí)，術(shù)語“預(yù)防性治療”用于描述本發(fā)明時(shí)，意指所述化合物、藥物組 合物或組合被施用至患者，以抑制或停止相關(guān)病癥在患者(特別是在對相關(guān)病癥顯著易感 的群體中的患者或成員)中發(fā)生。在本文中使用時(shí)，術(shù)語“減輕性治療”用于描述本發(fā)明時(shí)，意指所述化合物、藥物組 合物或組合被施用至患者，以治療病癥的征候和/或癥狀，但不一定改良相關(guān)病癥的進(jìn)展 或基本病因。非限制性例子包含降低疼痛、不舒服、腫脹或發(fā)熱。在本文中使用時(shí)，術(shù)語“支持性治療”用于描述本發(fā)明時(shí)，意指所述化合物、藥物組 合物或組合作為治療方案的一部份被施用至患者，但此類治療不限于施用所述化合物、藥 物組合物或組合。非限制性例子包含手術(shù)同時(shí)、之前或之后施用所述化合物或組合至患者； 以及，與另外的藥物或藥劑組合一起施用所述化合物或組合。除非另有其它明確表示，支持 性治療可包含預(yù)防性、減輕性、恢復(fù)性或治愈性治療，特別是當(dāng)此類化合物或藥物組合物與 支持性治療的另外組份組合時(shí)。在本文中使用時(shí)，術(shù)語“恢復(fù)性治療”用于描述本發(fā)明時(shí)，意指此化合物、藥物組合 物或組合被施用至患者以改良一病癥的基本進(jìn)展或病因。非限制性例子包含對于肺部失調(diào) 增加1秒內(nèi)的用力呼吸體積(FEV 1)、抑制進(jìn)展中的神經(jīng)破壞、降低與疾病或失調(diào)等相關(guān)和 有關(guān)的生物標(biāo)志等。在本文中使用時(shí)，術(shù)語“治愈性治療”用于描述本發(fā)明時(shí)，意指化合物、藥物組合 物或組合被施用至患者以使此疾病或失調(diào)完全免除，或疾病或失調(diào)于此治療后不能被檢測
出ο
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在本文中使用時(shí)，“5-L0介導(dǎo)的疾病”，或“5-L0介導(dǎo)的失調(diào)”或“5_L0介導(dǎo)的病癥” 等術(shù)語分別指下述任何疾病、失調(diào)，或病癥(特別是任何病理病癥)，其中5-L0發(fā)揮作用，這 通過控制5-L0本身或通過5-L0造成白三烯釋出，或其產(chǎn)生或作用應(yīng)答于5-L0而加劇或分 泌的其它相似化合物來實(shí)現(xiàn)。在一種實(shí)施方式中，化學(xué)式(I)的化合物具有化學(xué)式(Ia) 或其可藥用鹽或溶劑化物，其中，Q、X、Y、L和R1-R12如上文所定義。在一種實(shí)施方式中，化學(xué)式(I)的化合物具有化學(xué)式(Ib) 或其可藥用鹽或溶劑化物，其中，L選自如下構(gòu)成的組(a)鍵(b) - (CH2)-(c)-0-(d)-C(O) _X和Y每個獨(dú)立地選自C和N構(gòu)成的組，R2選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)甲基(c)乙基R3選自如下構(gòu)成的組(a)— CN(b)—C(O)NH2(c) — C(O)NH(CH3)R4是H或鹵素0129]R5選自如下構(gòu)成的組
0130](a)H
0131](b)鹵素
0132](c)—OCH3
0133]R6是H或鹵素
0134]R7選自如下構(gòu)成的組
0135](a)H
0136](b)鹵素
0137](c) — CN
0138](d)甲基
0139](e)—OCH3
0140]R8在Y是N時(shí)不存在，或R8選自如下構(gòu)成的組
0141](a)H
0142](b)鹵素
0143](c) — CN
0144]R9在X是N時(shí)不存在，或R9選自如下構(gòu)成的組
0145](a)H
0146](b)鹵素
0147](c) — CN
0148](d)甲基
0149](e) — CF3
0150]Rltl選自如下構(gòu)成的組
0151](a)H
0152](b)鹵素
0153](c) — CN
0154]R11 是 H 或(C1-C7)烷基，
0155]R12是H或鹵素。
0156]在一種實(shí)施方式中，化學(xué)式(I)的化合物具有化學(xué)式(Ic)
0157] 或其可藥用鹽或溶劑化物，其中，X、Y和R2-R12如針對化學(xué)式(Ib)所定義的。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)或(Ia)，其中，Q是S。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la)、(Ib)或(Ic)，其中，L選自鍵、-0-和-C (0)-構(gòu)成的組，優(yōu)選地，L是鍵或-0-，更優(yōu)選地，L是鍵。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la)、(Ib)或(Ic)，其中，X 和Y都是C或一者是C且另一者是N。優(yōu)選地，X和Y 二者都是C。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)或(Ia)，其中，R1選自H和甲 基構(gòu)成的組，優(yōu)選地，R1是H。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R2是H或甲基，優(yōu)選地，R2是甲基。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選地 是化學(xué)式(Ic)，其中，R3選自一CN、一 C (0) NH2和一C (0) NHCH3構(gòu)成的組，優(yōu)選地，R3是一CN, 或一C (O)NH2。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R4選自H、Cl和F構(gòu)成的組，優(yōu)選地，R4是F。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R5選自H、一0CH3、C1和F構(gòu)成的組。更優(yōu)選地，R5是H或F，更優(yōu)選地，
R5 是 H。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R6是H或F，優(yōu)選地，R6是H。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R7選自H、Cl和F構(gòu)成的組。優(yōu)選地，R7是H。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R8若存在則選自H、一 CN、F和Cl構(gòu)成的組。優(yōu)選地，R8若存在則是H。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R9若存在則選自H、一 CN、甲基、CF3、F和Cl構(gòu)成的組。優(yōu)選地，R9若存 在則選自H、F和Cl構(gòu)成的組。更優(yōu)選地，R9若存在則是H。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，Rltl是H或F，優(yōu)選地，R10是H。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R11是H或(C1-C6)烷基。優(yōu)選地，R11選自H、甲基、乙基、異丙基、環(huán)戊基、 環(huán)己基、環(huán)庚基、一甲撐基環(huán)丙基，和一甲撐基環(huán)戊基構(gòu)成的組。更優(yōu)選地，Rn是甲基。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R12是H。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，R4、R5、R6和R9間的至少一者，優(yōu)選是R4、R6和R9間的至少一者，更佳是 至少R4，是商素，優(yōu)選是F。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，L選自鍵、-0-和-C (0)-構(gòu)成的組，優(yōu)選地，L是-0-；且X和Y的一者是 C且另一者是N，優(yōu)選地，X是C且Y是N。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，L選自鍵、-0-和-C (0)-構(gòu)成的組，優(yōu)選地，L是-0- ；X和Y的一者是C
17且另一者是N，優(yōu)選地，X是C且Y是N ;R8在Y是N時(shí)不存在，或R8是Cl，且R9在X是N時(shí) 不存在，或R9是Cl。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，L選自鍵、-0-和-C (0)-構(gòu)成的組，優(yōu)選地，L是-0- ；X和Y的一者是C， 且另一者是N，優(yōu)選地，X是C且Y是N氺1、R7、R10和R12每個是H ；R2是甲基；R3是一CN或 一 C (0) NH2 ；R4是H或F，優(yōu)選地，R4是F ；R5、R6每個獨(dú)立地是H或F，優(yōu)選地，R5和R6都是H ； R8在Y是N時(shí)不存在，或R8是Cl ;R9在X是N時(shí)不存在，或R9是Cl ；且R11是甲基。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，L選自鍵、-0-和-C (0)-構(gòu)成的組，優(yōu)選地，L 一鍵；且X和Y每個是C。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，L選自鍵、-0-和-C (0)-構(gòu)成的組，優(yōu)選地，L是鍵；X和Y每個是C ；R8選 自H、F和一 CN構(gòu)成的組，優(yōu)選地，R8是H或F，更優(yōu)選地，R8是H;且R9選自H、F、Cl、一 CN 構(gòu)成的組，優(yōu)選地，R9選自H、Cl和F構(gòu)成的組，更優(yōu)選地，R9是H。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物具有化學(xué)式(I)、(la), (Ib)或(Ic)，優(yōu)選是 化學(xué)式(Ic)，其中，L是鍵；X和Y每個是C ^是H ；R2是H或甲基，優(yōu)選地，R2是甲基；R3選 自一 CN、一 C (0) NH2和一 C (0) NHCH3構(gòu)成的組，優(yōu)選地，R3選自一 CN和一 C (0) NH2構(gòu)成的組； R4是H或F，優(yōu)選地，R4是F ；R5和R6每個獨(dú)立地是H或F，優(yōu)選地，R5和R6都是H ；R10是H 或F，優(yōu)選地，Rw是H ;R7選自H、F和Cl構(gòu)成的組，優(yōu)選地，R7是H ;R8選自H、F和一CN構(gòu) 成的組，優(yōu)選地，R8是H或F，更優(yōu)選地，R8是H ;R9選自H、F、Cl和一CN構(gòu)成的組，優(yōu)選地， R9是H、Cl或F，更優(yōu)選地，R9是H ；R11是甲基；且R12是H。本發(fā)明的優(yōu)選化合物是4-(3-{[3-氟-4-(l-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫_2Η_吡 喃-4-甲酰胺4-(2_氟-3-{[4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)_Ν_甲基四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺4-(2，5-二氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)_Ν_甲基四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺4-(2，4-二氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫_2Η_吡 喃-4-甲酰胺4-(4-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫_2Η_吡 喃-4-甲酰胺(2S，4R)-2-甲基-4-(3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(2S，4R)-4-(2-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_ 甲 基四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(2S，4R)-4-(4-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_ 甲 基四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(2S，4R)-4-(3-氟-5-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_ 甲 基四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺
(25，4幻-4-(2，4-二氟-3-{[4-(1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基)苯基]硫基}苯 基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(2S，4R)-4-(3-氟-5-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_ 甲 基四氫-2H-吡喃-4-甲腈(2S，4R)-4-(2-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_ 甲 基四氫-2H-吡喃-4-甲腈(2S，4R)-4-(3-{[3-氟-4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_ 甲 基四氫-2H-吡喃-4-甲腈(25，4幻-4-(2-氟-3-{[3-氟-4-(1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基)苯基]硫基}苯 基)-2-甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈(25，4幻-4-(3-氟-5-{[3-氟-4-(1-甲基-IH-吡唑 _5_ 基)苯基]硫基}苯 基)-2-甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈4-[3-({3_氟-4-[(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)甲基]苯基}硫基)苯基]四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺4-[3-({4-[(1-甲基-IH-吡唑-5-基)羰基]苯基}硫基)苯基]四氫_2Η_吡 喃-4-甲酰胺4-[3-({3-氰基-4-[(1-甲基-IH-吡唑_5_基)氧]苯基}硫基)苯基]四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(25，4幻-4-[2-氟-3-({4-[(1_甲基-IH-吡唑_5_基)羰基]苯基}硫基)苯 基]-2-甲基四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(25，4幻-4-[2-氟-3-({4-[(1_甲基-IH-吡唑_5_基)羰基]苯基}硫基)苯 基]-2-甲基四氫-2Η-吡喃-4-甲腈4-[3-({5-氯-6-[(1-甲基-IH-吡唑-5-基)氧]吡啶-3-基}硫基)苯基]四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(2S，4R)-4-[3_({5-氯 _6-[(1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基)氧]吡啶 _3_ 基}硫 基)-2_氟苯基]-2-甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈(2S，4R)-4-[3_({5-氯 _6-[(1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基)氧]吡啶 _3_ 基}硫 基)-2_氟苯基]-2-甲基四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺或其可藥用鹽或溶劑化物。在一種實(shí)施方式中，化合物(2S，4R)-4-(2-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基) 苯基]硫基}苯基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺或其可藥用鹽或溶劑化物是優(yōu)選的。在一種實(shí)施方式中，化合物(2S，4R)-4-(2-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基) 苯基]硫基}苯基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈或其可藥用鹽或溶劑化物是優(yōu)選的。 該化合物具有下列化學(xué)式 在一種實(shí)施方式中，化合物(2S，4R)-4-(2-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基) 苯基]硫基}苯基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈甲苯磺酸鹽或其可藥用溶劑化物是優(yōu) 選的。更優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物是(2S，4R)-4_(2-氟-3-{[4-(l-甲基_1Η_吡 唑-5-基)苯基]硫基}苯基)-2_甲基四氫-2Η-吡喃-4-甲腈和對甲苯磺酸的1 1摩 爾比例的鹽。該化合物具有下列化學(xué)式除文獻(xiàn)所知的、實(shí)驗(yàn)程序中例示的其它標(biāo)準(zhǔn)操作，可利用下文流程中所示的反應(yīng)， 或使用本領(lǐng)域已知的方法組合本文所述的方法，來制備化學(xué)式(I)的化合物。因此，此類 流程不受列出的化合物或用于闡述目的的任何特別的取代基所限制。此外，本文給出的 溶劑、溫度和其它反應(yīng)條件可依根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)而改變。除用于制造最終目標(biāo)物的方法 外，本文使用的原材料可商業(yè)獲得，或可通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法來制備，且 可于標(biāo)準(zhǔn)參考書中發(fā)現(xiàn)，諸如，Compendium of Organic Synthetic Methods，第I - VI冊 (Wiley) ；March,Advanced Organic Chemistry 第 5 片反(Wiley 2001) ；Carey 禾口 Sundberg， Advanced Organic Chemistry 第 4 版第 A 和 B 冊(2000，2001) ；Green 和 Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis 第 3 片反(Wileyl999) ；Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions, Wiley,第 2 版，2004 ；Handbook of Heterocyclic Chemistry, A. R. Katritzky 和A.F.Pozharskii，第2版(Pergamon, 2000)和其中引用的參考文獻(xiàn)。除非另有指明，如下的所有流程公開了對其中Q是-S-的化學(xué)式(I)的化合物的 制備。為獲得其中Q是-S(O)-的相應(yīng)化合物(還見如上文所示的化合物18)，氧化步驟可 例如通過在合適的溶劑中使硫基衍生物3與傳統(tǒng)氧化劑(例如，過氧化氫)接觸來進(jìn)行。
在流程1.0中，經(jīng)適當(dāng)取代的化合物1或5(其中，Z1是離去基團(tuán)或偶聯(lián)伴侶，諸如， 鹵素或三氟甲基磺酸鹽)與化合物2或4反應(yīng)，其中，Z2是氫或如文獻(xiàn)中及本申請包括的實(shí) 施例中描述的保護(hù)基團(tuán)，諸如，乙酰基或三異丙基硅烷基。反應(yīng)條件典型地在溶劑(諸如， 二惡烷、四氫呋喃或N，N’ - 二甲基甲酰胺)中使用堿(諸如，叔丁氧基鈉、雙(三甲基硅烷 基)酰胺鈉、碳酸銫或碳酸鉀)?？商砑逾Z、銅，或其它金屬催化劑和另外的試劑和任選的賦 形劑，諸如，乙酸鈀、1，1_雙(二異丙基膦基)二茂鐵、1，1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵鈀 二氯化物二氯甲烷加成物、四(三苯基膦)鈀、雙[(2-二苯基膦基)]苯基醚、四乙基氯化 銨單水合物、氟化銫、四丁基銨氟化物。25-120°C范圍的升高的溫度可能是需要的。另外的 條件和試劑被描述于 Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions，Wiley，第 2 版，2004 ； Chemistry—AEuropean Journal，12 (30)，7782-7796，2006 ；Chem. Pharm. Bull.，2005，53， 965-973 頁；Bioorg. Med. Chem. Lett.，2005，15,2611-2615 頁及其中引述的參考文獻(xiàn)中。 流程1.1流程1. 1適于制造其中R12是H的化學(xué)式⑴的化合物。在流程1. 1種，本發(fā)明的 化合物是從諸如6和7的中間產(chǎn)物制造的，其中，Z3是二甲基氨基或烷氧基。反應(yīng)條件可使 用諸如DMF或THF的溶劑，且可能需要升高的溫度。除了 6和7以及本文實(shí)施例所示的那些 之外，可從合適的原材料開始，使用文獻(xiàn)已知的其它形成吡唑的條件(諸如，‘Handbook of HeterocyclicChemistry', A. R. Katritzky 禾口 k. F. Pozharskii,第 2 版，(Pergamon,2000)
中的那些)。中間產(chǎn)物，諸如7，可購得或可依據(jù)文獻(xiàn)所知的方法制備。 在流程1. 2中，本發(fā)明的化合物是從諸如8和9的中間產(chǎn)物制造的，其中，Z1是適于 如上文定義的親核置換反應(yīng)的離去基團(tuán)。Z1的例子是鹵素、甲磺酸鹽或三氟甲基磺酸鹽。Z4 是親核基。Z4的一個例子是羥基，于此情況下，L將是-O-。反應(yīng)條件典型上使用諸如N-甲 基吡咯烷或DMF的溶劑，且添加諸如叔丁氧鉀、氫化鈉，或碳酸銫的堿。升高的溫度可能是 需要的。親核置換反應(yīng)條件的進(jìn)一步例子在文獻(xiàn)中已知。諸如1的中間產(chǎn)物(其中，R3是CN)，可通過下列過程制造。 流程1. 3水解CN基以獲得相對應(yīng)的酰胺在技術(shù)人員常識范圍內(nèi)。流程1. 3中，使用諸如 DMSO、DMF，或THF的溶劑和諸如氫化鈉、碳酸鉀或碳酸銫的堿，將化合物，諸如10 (其中，Z1 是適于如上文所述親核置換反應(yīng)的離去基團(tuán)(例如，鹵素、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽或三氟甲 基磺酸鹽))，與諸如11的化合物反應(yīng)。反應(yīng)可于0-110°C的溫度范圍進(jìn)行。另外的程序和 條件可于 Chemical &Pharmaceutical Bulletin, 53 (8)，965—973，2005 ； Jpn. KokaiTokkyo Koho,2000191654,IlJul 2000 ；Bioorganic Medicinal ChemistryLetters,15 (10),2611-2615，2005 ;1977Journal of Organic Chemistry,60(13),4264-7,1995Journal of Medicinal Chemistry, 36 (2)，295-6，1993其間引述的參考文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)。諸如2的中間產(chǎn)物可通過下列過程制造。 流程1. 4流程1. 4中，將諸如5的化合物(其中,Z1是如上文定義的離去基團(tuán)，諸如，鹵素或 三氟甲基磺酸鹽)在諸如二惡烷、THF、甲苯，或醚的溶劑中，與諸如三異丙基硅烷硫醇的硫 醇源反應(yīng)?？商砑訅A、催化劑或其它賦形劑。例子包含1，1_雙(二異丙基膦基)二茂鐵、1， 1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵鈀二氯化物二氯甲烷加成物、四(三苯基膦)鈀、PdC12( 二 苯基-膦基二茂鐵)、叔丁氧化鈉或氫化鈉。反應(yīng)中可使用無水條件和升高的溫度。另外 的例子可于Organic Letters, 9 (20), 4081-4083, 2007 Journal of MedicinalChemistry, 50(16)3954-3963,2007 ；Advanced Synthesis &Catalysis，347 (2+3)，313-319，2005 ； Tetrahedron Letters,47 (16),2675-2678, 2006 ; Journal of the American Chemical Society,128 (7),2180-2181,2006 ；EuropeanJournal of Organic Chemistry, (16), 2630-2642，2007 ；Tetrahedron Letters,48(17),3033-3037, 2007 ；Tetrahedron Letters, 44 (35), 6699-6702, 2003及其中引述的參考文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)。諸如5的中間產(chǎn)物(其中，L是-C (0)-)，可通過下列過程制造。 流程1.5流程1. 5中，諸如5的化合物(其中,Z1是如上文定義的離去基團(tuán)，諸如，鹵素)可 通過使諸如12的適適化合物與諸如9的經(jīng)合適的取代的化合物在用于有機(jī)鋰化學(xué)的合適 的溶劑(諸如，THF或醚)中反應(yīng)來制備。特別地，在降低的溫度下、惰性氛圍中，諸如丁基 鋰的有機(jī)鋰堿添加至吡唑，其后，添加諸如12的醛。形成的產(chǎn)物進(jìn)一步通過文獻(xiàn)已知的氧 化條件(諸如，于乙腈中的吡啶氯鉻酸鹽)氧化成酮。其它產(chǎn)生此轉(zhuǎn)化的條件是文獻(xiàn)中已知 的，諸如，Synlett，(6)，765-767，1999 Journal of Organic Chemistry, 49 (24), 4687-95, 1984 Journal of Heterocyclic Chemistry，12 (1)，49-57，1975 及其中引述的參考文獻(xiàn)。諸如5的中間產(chǎn)物(其中，L是-(CH2)-)可通過下列過程制造 流程1. 6在流程1.6中，諸如5的化合物(其中，Z5是硼酸，且Z1是如上文所定義的離去 基團(tuán)或偶聯(lián)伴侶，諸如，鹵素或三氟甲基磺酸鹽)可通過使諸如12的化合物與諸如9的 化合物于文獻(xiàn)中已知且先前描述的鈀介導(dǎo)的偶合條件下反應(yīng)而制備。其它產(chǎn)生此轉(zhuǎn)化的 條件在文獻(xiàn)中已知，諸如，Journal ofHeterocyclic Chemistry，24 (6)，1669-75，1987 和 Tetrahedron Letters, 46 (9)，1501-1504，2005 與其中引述的文獻(xiàn)。諸如6的中間產(chǎn)物(其中L是鍵)，可通過下列過程制造。 在流程1. 7中，諸如4的化合物(其中，Z2是如上文定義的保護(hù)基團(tuán)，諸如，三異丙 基硅烷基)與諸如13的化合物(其中,Z1是如上文所定義的保護(hù)基團(tuán)，諸如，鹵素)在諸如 甲苯、THF或DMF的溶劑中(添加有諸如叔丁氧化鉀、氫化鈉，或雙(三甲基硅烷基)酰胺的 堿)反應(yīng)。可添加另外的賦形劑(諸如，四乙基氯化銨)。反應(yīng)可于25-110°C的溫度范圍 進(jìn)行，產(chǎn)生諸如14的化合物。諸如14的化合物可進(jìn)一步于諸如DMF或THF的溶劑(添加 有N，N- 二甲基二甲基乙縮醛或三烷氧基原甲酸酯)制造成諸如6的化合物，其中，Z3是如 上文所定義的離去基團(tuán)，諸如，二甲基氨基或烷氧基。反應(yīng)可于25-110°C的溫度范圍進(jìn)行。諸如5的中間產(chǎn)物(其中L是鍵)可通過下列過程制造
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流程1. 8流程1. 8中，可使用用于制備中間產(chǎn)物6和6和7的產(chǎn)物而描述的過程，來制備諸 如5的化合物(其中，Z1是如上文所定義的離去基團(tuán)或偶聯(lián)伴侶，諸如，鹵素或三氟甲基磺 酸鹽)。諸如4的中間產(chǎn)物可通過下列過程制造。 流程1. 9在流程1. 9中，諸如1的化合物(其中,Z1是如上文所定義的偶聯(lián)伴侶，諸如，鹵素 或三氟甲基磺酸鹽，且Z2是如上文所定義的保護(hù)基團(tuán)，諸如，三異丙基硅烷基)與諸如三異 丙基硅烷硫醇的硫醇源，在諸如二惡烷、THF、甲苯或醚的溶劑中反應(yīng)。可添加堿、催化劑或 其它賦形劑。例子包含1，1_雙(二異丙基膦基)二茂鐵、1，1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵鈀 二氯化物二氯甲烷加成物、四(三苯基膦)鈀、PdCl2( 二苯基-膦基二茂鐵)、叔丁氧化鈉， 或氫化鈉。無水條件和高溫亦可被用于此反應(yīng)。另外的例子可于Organic Letters, 9 (20), 4081-4083,2007 Journal of Medicinal Chemistry,50(16)3954-3963, 2007 ；Advanced Synthesis &Cgit￡ilysis，347 (2+3) ，313—319，2005 ；Tetrahedron Letters, 47 (16)， 2675-2678,2006 Journal of the AmericanChemical Society,128(7),2180-2181, 2006 ； European Journal of OrganicChemistry, (16),2630-2642, 2007 ；Tetrahedron Letters, 48(17)，3033-3037，2007 ；Tetrahedron Letters，44 (35)，6699-6702，2003及其中引述的參 考文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)。諸如8的中間產(chǎn)物可通過下列過程制造。
流程1. 10在流程1. 10中，諸如4的化合物(其中，Z2是如上文定義的保護(hù)基團(tuán)，諸如，三 異丙基硅烷基)與諸如17的化合物(其中，Zia是諸如鹵素或三氟甲基磺酸鹽的離去基 團(tuán)或偶聯(lián)伴侶，Z,b是諸如鹵素或三氟甲基磺酸鹽的離去基團(tuán)或偶聯(lián)伴侶，從而使得，Z1B 比Z1I3更具反應(yīng)性)使用親核置換反應(yīng)或鈀媒介偶合反應(yīng)(根據(jù)適合想要的取代形態(tài)而 定)反應(yīng)，產(chǎn)生諸如8的化合物。此合成策略的其它例子可于諸如Angewandte Chemie, International Edition,44(39),6348-6354, 2005 ；Journal of MedicinalChemistry, 49(10)，3012-3018，2006 ；Chemistry—A European Journal，13(28)，805卜8060，2007 ； Chemistry—A European Journal, 13(18),5100-5105,2007 ；Tetrahedron Letters, 47 (50), 8973-8976, 2006的文獻(xiàn)及其中引述的文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)。 除實(shí)施例所示方法外，諸如11的中間產(chǎn)物(其中，Z1是如上文定義的離去基團(tuán)，諸 如，鹵素、甲磺?；蚣妆交?可通過諸如，Journal fuerPraktische Chemie (Leipzig)， 328 (5-6),797-804,1986 ； Journal of OrganicChemistry,50 (19),3453-7,1985 ； Journal fuer Praktische Chemie(Leipzig),325(5), 719-28,1983 ； Journal of Organic Chemistry,48(20), 3412-22,1983 Journal of Physical Organic Chemistry,16(3), 175-182，2003及其中引述的參考文獻(xiàn)的文獻(xiàn)中所知的過程來制造。
R4 10 除實(shí)施例所示的方法外，諸如10的中間產(chǎn)物可通過諸如TetrahedronLetters， 44(14)，2903-2905, 2003 ；U.S. ,4874764,170ct 1989 ；Journal ofCombinatorial Chemistry，4(4)，329-344，2002 ；Heterocycles,51(4)，737-750，1999 ；Journal of Medicinal Chemistry, 31 (5)，1005-9，1988及其中引述的參考文獻(xiàn)的文獻(xiàn)中所知的過程制 造。
諸如13的中間產(chǎn)物(其中，Z1是如上文定義的偶聯(lián)伴侶，諸如，鹵素或三氟甲基磺 酸鹽)可購得或可通過文獻(xiàn)已知的過程制造。流程1. 0至1. 10與所涉及的所有中間產(chǎn)物的制備在本申請中所包含的實(shí)施例中 被操作?；瘜W(xué)式(I)的化合物的可藥用鹽包含其酸加成鹽和堿鹽。合適的酸加成鹽是從形成無毒性鹽的酸形成。例子包含乙酸鹽、己二酸鹽、天冬氨 酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、重硫酸鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、右旋樟腦磺酸 鹽、檸檬酸鹽、環(huán)己(基)氨基磺酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖 酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、己氟磷酸鹽、海苯酸鹽(hibenzate)、氫氯酸/氯化物、氫溴 酸/溴化物、氫碘酸/碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺 酸鹽、甲硫酸鹽、萘酸鹽(naphthylate)、2_萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、 棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽(pamoate)、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、焦谷氨酸鹽、蔗糖酸鹽、 硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟乙酸鹽和xinofoate鹽。甲苯 磺酸鹽是優(yōu)選的。在本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式中，化合物是(2S，4R)-4_(2-氟-3-{[4-(l-甲 基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈和對-甲苯磺 酸的1 1摩爾比例的鹽。合適的堿鹽是從形成無毒性鹽的堿形成的。例子包括鋁、精氨酸、芐星 (benzathine)、鈣、膽堿、二乙胺、二乙醇胺、甘氨酸、賴氨酸、鎂、甲葡胺、olamine、鉀、鈉、氨 基丁三醇(tromethamine)禾口鋅鹽。還可形成酸和堿的半鹽(Hemisalts)，例如，半硫酸鹽和半鈣鹽。Handbook of Pharmaceutical Salts Properties, Selection, and Use, Stahl 和 Wermuth(Wiley-VCH，2002)?？赏ㄟ^三種方法中的一種或多種來制備化學(xué)式(I)的化合物的可藥用鹽(i)通過將化學(xué)式(I)的化合物與目標(biāo)酸或堿反應(yīng)；(ii)使用目標(biāo)酸或堿，通過對合適的環(huán)狀前體(例如內(nèi)酯或內(nèi)酰胺)開環(huán)，或通過 從化學(xué)式(I)的化合物的合適前體除去酸或堿不穩(wěn)定的保護(hù)基團(tuán)；或(iii)通過與合適的酸或堿反應(yīng)或者經(jīng)由合適的離子交換柱，來將化學(xué)式(I)的 化合物的一種鹽轉(zhuǎn)化為另一種。所有三種反應(yīng)典型地都在溶液中進(jìn)行。得到的鹽可被沉淀出來，并可通過過濾收集，或者可通過溶劑蒸發(fā)來回收。得到的鹽中的離子化程度可在完全離子化到幾乎不離子 化之間變動。 本發(fā)明化合物可以以完全無定形到完全晶體之間的各種狀態(tài)的形式存在。術(shù)語 “無定形”指材料在分子水平上缺乏長程有序并且根據(jù)溫度展示出固體或液體的物理性質(zhì) 的狀態(tài)。典型地，此類材料不能提供區(qū)別性的χ-射線衍射圖案，并且，雖然展示出固體的性 質(zhì)，但是更規(guī)范地被描述為液體。加熱時(shí)，從固體到液體性質(zhì)的改變發(fā)生，其特征在于典型 是二階的狀態(tài)改變(“玻璃化轉(zhuǎn)變”)。術(shù)語“晶體”指固相，其中，材料在分子水平上具有 規(guī)整有序的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，并提供區(qū)別性的、具有明確的峰的X-射線衍射圖案。此類材料在充 分加熱時(shí)也將展示出液體性質(zhì)，但是從固體到液體的變化特征在于典型是一階的相變(“熔 本發(fā)明的一種優(yōu)選化合物是結(jié)晶形式的(2S，4R) -4- (2_氟_3_ {[4_ (1_甲 基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲和對甲苯磺酸的 11摩爾比例的鹽或其可藥用溶劑化物。優(yōu)選地，當(dāng)使用Cu Ka工輻射(波長〒1.5406 A)測量時(shí)，此類結(jié)晶形式具有下述 X-射線衍射圖案，所述圖案具有以2-θ角表示的下列主要的χ-射線衍射圖案峰(士0. 1度 角)。 更優(yōu)選地，當(dāng)使用Cu Ka工輻射(波長〒1.5406 A)測量時(shí)，此類結(jié)晶形式具有下
述X-射線衍射圖案，所述圖案具有以2-θ角表示的下列主要的X-射線衍射圖案峰。
角度2-θ °
8. 5
13. 5
14. 2
28 本發(fā)明的一種優(yōu)選化合物是結(jié)晶形式的(2S，4R) ~4~ (2~氟_3_ {[4_ (1_甲 基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈和對-甲苯磺 酸的1 1摩爾比例的鹽(有上述兩種X-射線衍射圖案中任一種以及TGA/SDTA軌跡中于 約132. 7°C的熔點(diǎn)吸熱峰)其可藥用溶劑化物。本發(fā)明的化合物還可以非溶劑化物和溶劑化物形式存在。術(shù)語“溶劑化物”在本文 中用于描述包含本發(fā)明化合物和一種或多種可藥用溶劑分子(例如乙醇)的分子復(fù)合物。 當(dāng)所述溶劑是水時(shí)，使用術(shù)語“水合物”。目前接受的用于有機(jī)水合物的一種分類系統(tǒng)界定了分離位點(diǎn)、通道和金屬-離
=f 十力、7jc ^ ^-JaL K. R. Morris 白勺 Polymorphism in PharmaceuticalSolids (Ed.
H. G. Brittain,Marcel Dekker，1995)。分離位點(diǎn)水合物是這樣一些，其中，水分子通過插入 有機(jī)分子而沒有相互直接接觸從而是分離的。在通道水合物中，水分子位于晶格通道中，它 們與其它水分子相鄰。在金屬_離子協(xié)同水合物中，水分子與金屬離子鍵合。當(dāng)溶劑或水緊密結(jié)合時(shí)，復(fù)合物將具有被良好界定的、獨(dú)立于濕度的化學(xué)計(jì)量。但 是，當(dāng)溶劑或水結(jié)合較弱時(shí)，如在通道溶劑化物中和吸濕性化合物的情況下，水/溶劑含量 將取決于濕度和干燥條件。在這些情況下，通常將是非化學(xué)計(jì)量性的。本發(fā)明的范圍內(nèi)還包括多組分復(fù)合物(除了鹽和溶劑化物之外)，其中，藥物和 至少一種其它組分以化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量的量存在。這種類型的復(fù)合物包括籠合物 (藥物_宿主包含體復(fù)合物)和共晶體。后者典型地被定義為通過非共價(jià)相互作用結(jié)合 到一起的中性分子組成成分的晶體復(fù)合物，但還可以是中性分子與鹽的復(fù)合物。共晶體 可通過熔融結(jié)晶、通過從溶劑化物重結(jié)晶或通過物理上將組分碾磨到一起來制備——見 ChemCommun, 17,1889-1896, 0. Almarsson and Μ· J. Zaworotko (2004)。關(guān)于多組分復(fù)合物 的一般性綜述，參見 J Pharm Sci,Μ(8), 1269-1288, Haleblian(August 1975)。當(dāng)經(jīng)歷合適條件時(shí)，本發(fā)明的化合物還可以以中間型狀態(tài)(中間相或液晶)存在。 中間型狀態(tài)是真正的晶體狀態(tài)和真正的液體狀態(tài)(熔融或溶液)之間的中間產(chǎn)物。作為 溫度變化的結(jié)果產(chǎn)生的中間型被描述為“熱致的”，而通過添加第二組分(例如水或另一溶 劑)產(chǎn)生的則被描述為“溶致的”。具有形成溶致中間相潛力的化合物被描述為“兩性的”， 其由具有離子(例如-C00_Na+、-C00-K+或-SO3-Na+)或非離子(例如-Ν +(CH3) 3)極性頭部基 團(tuán)的分子構(gòu)成° 更多信息參見 Crystals and thePolarizing Microscope,N. H. Hartshorne and A. Stuart, 4th Edition (EdwardArriold，1970)。下文中所有提到化學(xué)式(I)的化合物的地方都包括其鹽、溶劑化物、多組分復(fù)合 物和液晶以及其鹽的溶劑化物、多組分復(fù)合物和液晶。如所指出的，化學(xué)式⑴的化合物的所謂“前藥”也在本文范圍內(nèi)。因此，化學(xué)式(I)的化合物的某些本身可能并不具有或僅有極少的藥理學(xué)活性的衍生物施用進(jìn)體 內(nèi)或施用到身體上時(shí)，可轉(zhuǎn)化為具有想要的活性的化學(xué)式(I)的化合物，例如通過水解 切割來轉(zhuǎn)化。這些衍生物被稱為“前藥”。關(guān)干前藥俥用的其它信息可在Pro-drims as Novel Delivery Systems, Vol.14，ACS Symposium Series(T. Higuchi and W. Stella)禾口 Bioreversible Carriers inDrug Design,Pergamon Press,1987(Ed. E. B. Roche，American PharmaceuticalAssociation)中找到?？衫缤ㄟ^用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知是“前-基元”(pro-moieties)的某些基元替 換化學(xué)式(I)的化合物中存在的合話官能閉，來牛產(chǎn)根據(jù)本發(fā)明的前藥，如例如Design of Prodrugs, H. Bundgaard(Elsevier, 1985)中所述。根據(jù)本發(fā)明的前藥的一些例子包括當(dāng)化學(xué)式(I)的化合物含有伯氨或仲氨官能 團(tuán)(-NH2或-NHR，其中R興H)時(shí)，是其酰胺，例如這樣的化合物，其中，化學(xué)式(I)的化合物 的氨基官能團(tuán)中一個或全部兩個氫(根據(jù)情況而定)被(C1-Cltl)烷?；鎿Q。根據(jù)前述例子和其它前藥類型的例子的替換基團(tuán)的其它例子可在前文所述的參 考文獻(xiàn)中找到。此外，某些化學(xué)式(I)的化合物本身可作為其它一些化學(xué)式(I)的化合物的前藥。本發(fā)明的范圍內(nèi)還包括化學(xué)式(I)的化合物的代謝產(chǎn)物，這是施用藥物后體內(nèi)形 成的化合物。根據(jù)本發(fā)明的代謝產(chǎn)物的一些例子包括(i)當(dāng)化學(xué)式(I)的化合物含有甲基基團(tuán)時(shí)，其羥甲基衍生物(-CH3- > -CH2OH)；(ii)當(dāng)化學(xué)式(I)的化合物含有烷氧基基團(tuán)時(shí)，其羥基衍生物(-0R- > -0H)；(iii)當(dāng)化學(xué)式⑴的化合物含有叔氨基基團(tuán)時(shí)，其仲氨基衍生物 (-NR1R2- > -NHR1 或-NHR2)；(iv)當(dāng)化學(xué)式(I)的化合物含有仲氨基基團(tuán)時(shí)，其伯氨基衍生物 (-NHR1- > -NH2)；(ν)當(dāng)化學(xué)式(I)的化合物含有酰氨基基團(tuán)時(shí)，其羧酸衍生物(-CONH2- > C00H)。含有一個或多個不對稱碳原子的化學(xué)式(I)的化合物可作為兩種或多種立體異 構(gòu)體存在。結(jié)構(gòu)異構(gòu)體可通過低能屏障互相轉(zhuǎn)化時(shí)，可出現(xiàn)互變性的異構(gòu)(“互變異構(gòu)”)。 這可在含有例如，亞氨基、酮基或肟基的化合物中表現(xiàn)為質(zhì)子互變異構(gòu)型式，或在含有芳香 族基元的化合物中表現(xiàn)為所謂的價(jià)互變異構(gòu)形式。這使得單種化合物可展現(xiàn)出超過一種類 型的異構(gòu)現(xiàn)象。本發(fā)明范圍內(nèi)包括化學(xué)式(I)的化合物的所有立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)形式，包括 展示出超過一種類型的異構(gòu)現(xiàn)象的化合物以及其一種或多種的混合物。本發(fā)明還包括酸加 成鹽或堿鹽，其中，反離子任選有光學(xué)活性，例如d-乳酸鹽或1-賴氨酸，或外消旋的，例如 dl-酒石酸鹽或dl-精氨酸?？赏ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的傳統(tǒng)技術(shù)，例如，色譜和分級分離結(jié)晶，來分離順/ 反異構(gòu)物。用于制備/分離各對映異構(gòu)體的傳統(tǒng)技術(shù)包括從合適的光學(xué)純的前體進(jìn)行手性 合成或使用例如手性高壓液相色譜(HPLC)來拆分外消旋物(或者鹽或衍生物的外消旋 物)。或者，可將外消旋物(或外消旋前體)與合適的光學(xué)純的化合物(例如醇)反應(yīng)，
30或者，當(dāng)化學(xué)式(I)的化合物含有酸性或堿性基元時(shí)，將其與堿或酸(例如ι-苯乙胺或酒 石酸)反應(yīng)?？赏ㄟ^色譜和/或分級分離結(jié)晶來分離得到的非對映構(gòu)混合物，通過技術(shù)人 員公知的手段，將非對映異構(gòu)體中之一或兩者轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的純對映異構(gòu)體?？衫糜蔁N類(典型地，庚烷或己烷)構(gòu)成的移動相(含有按體積計(jì)0至50% 的異丙醇，典型地，2至20 %的異丙醇，也可含有按體積計(jì)0至5 %的烷基胺，典型地， 0. 的二乙基胺)在不對稱樹脂上使用色譜(典型地，HPLC)來獲得本發(fā)明的對映異 構(gòu)體富集形式的手性化合物(及其手性前體)。洗出液的濃縮提供了富集的混合物， 見，例如，Chromatography and Separation Science by Satinder Ahuja(Academic Press，2003) ；Chiral Separation Techniques :A Practical Approach，3rd by GanapathySubraman i an(Wiley,2007)。當(dāng)任何外消旋物結(jié)晶時(shí)，可出現(xiàn)兩種不同類型的晶體。第一種類型是上文提到的 外消旋化合物(真外消旋物)，其中，產(chǎn)生晶體的一種均相形式，其以等摩爾量含有兩種對 映異構(gòu)體。第二種形式是外消旋混合物或聚集物(conglomerate)，其中，以等摩爾產(chǎn)生晶體 的兩種形式，每種包含單種對映異構(gòu)體。雖然外消旋混合物中存在的兩種晶體形式具有相同的物理性質(zhì)，但它們與真 外消旋物相比較可能具有不同的物理性質(zhì)?？赏ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的傳統(tǒng)技術(shù)來 分離夕卜消旋混合物，見，例如 Stereochemistry of OrganicCompounds, Ε. L. Eliel and S. H. Wilen (Wiley, 1994) 本發(fā)明包括所有可藥用的經(jīng)同位素標(biāo)記的化學(xué)式(I)的化合物，其中，一個或多 個原子被具有相同原子序數(shù)但是原子量或質(zhì)量數(shù)不同于在自然界中占主導(dǎo)的原子量或質(zhì) 量數(shù)的原子替換。適于包括進(jìn)本發(fā)明化合物的同位素的例子包括氫的同位素，例如2H和3H,碳的同 位素，例如"C、13C和14C,氯的同位素，例如36Cl,氟的同位素，例如18F,碘的同位素，例如123I 和1251，氮的同位素，例如13N和15N,氧的同位素，例如150、170和180，磷的同位素，例如32P和 硫的同位素，例如35s。某些經(jīng)同位素標(biāo)記的式(I)化合物，例如，摻入了放射性同位素的那些，可用于藥 物和/或底物的組織分布研究。放射性同位素氚(即3H)和碳_14(即14C)特別有用于該 目的，因?yàn)樗鼈円子趽饺氩⑶胰菀妆粰z測。用較重的同位素(例如氘，即2H)進(jìn)行取代可提供某些治療好處(由于更好的代 謝穩(wěn)定性)，例如，增加的體內(nèi)半壽期或者降低的劑量需求，因此，在某些情況下這可能是優(yōu) 選的。用發(fā)射正電子的同位素(例如"C、18F、150和13N)進(jìn)行取代可用于正電子發(fā)射拓?fù)?(PET)研究，以檢查底物受體占有情況(substrate receptoroccupancy) 通?？赏ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的傳統(tǒng)技術(shù)或與本文實(shí)施例和制備章節(jié)中所述 的那些類似的工藝，使用合適的經(jīng)同位素標(biāo)記的試劑代替之前所用的未經(jīng)標(biāo)記的試劑，來 制備經(jīng)同位素標(biāo)記的化學(xué)式(I)的化合物。根據(jù)本發(fā)明的可藥用溶劑包括這樣一些其中，結(jié)晶的溶劑可經(jīng)同位素取代，例 如，D20、d6-丙酮、d6-DMS0。應(yīng)當(dāng)針對其生物藥物性質(zhì)(例如溶解度和溶解穩(wěn)定性(針對pH)、透過性等)對化學(xué)式(I)化合物加以評估，以選擇對于待治療的特定適應(yīng)癥而言最合適的劑型和施用途徑。意欲用于藥物用途的本發(fā)明的化合物可作為晶體或無定形產(chǎn)物來施用?？赏ㄟ^ 沉淀、結(jié)晶、冷凍干燥、噴霧干燥或蒸發(fā)干燥等方法，來獲得它們，例如可作為固體塞(solid plugs)、粉末或膜獲得。微波或射頻干燥也可用于該目的。它們可單獨(dú)施用或與一種或多種其它的本發(fā)明化合物組合或與一種或多種其它 藥物組合(或作為其任何組合)施用。通常，它們將作為與一種或多種可藥用賦形劑關(guān)聯(lián) 的制劑來施用。術(shù)語“賦形劑”在本文中使用時(shí)用于描述非本發(fā)明化合物的任何成分，諸如， 稀釋劑、載劑和佐劑。對賦形劑的選擇在很大程度上取決于特定施用模式、賦形劑對溶解度 和穩(wěn)定性的影響以及劑型性質(zhì)等多種因素。適于遞送本發(fā)明化合物的藥物組合物及其制備方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員容易獲知 的。此類組合物及其制備方法可在例如Remington’ sPharmaceutical Sciences, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995)中找到。本發(fā)明的化合物可口服施用?？诜┯每砂ㄍ萄室允沟没衔镞M(jìn)入胃腸道，和 /或經(jīng)頰、經(jīng)舌或舌下施用，由此使得化合物直接從嘴進(jìn)入血流。適于口服施用的制劑包括固體、半固體和液體系統(tǒng)，例如片劑；軟或硬膠囊(含有 多顆?；蚣{米顆粒、液體或粉末)；錠劑(包括填充的液體)；咀嚼劑；凝膠；快速分散劑型； 膜劑；囊劑；噴霧和/或頰/粘膜粘附貼片。液體制劑包括懸浮液、溶液、漿劑和酏劑。此類制劑可用作為軟或硬膠囊(例如從 明膠或羥丙甲基纖維素制造的)中的填料，其典型地包含載劑，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙 二醇、甲基纖維素或合適的油，以及一種或多種乳化劑和/或懸浮劑。還可通過對固體的重 構(gòu)來制備液體制劑，例如，從小袋(sachet)來制備。本發(fā)明的化合物還可用于快速溶解的、快速崩解(disintegrating)的劑型，例如 Expert Opinion in Therapeutic Patents, jj_(6), 981-986, Liang andChen (2001)中描述 的那些。對于片劑劑型而言，取決于劑量，藥物可占到劑型的1重量％至80重量％，更典型 地，劑型的5重量％至60重量％。除了藥物之外，片劑通常含有崩解劑(disintegrant)。崩 解劑的例子包括乙醇酸淀粉鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、 交聚維酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、微晶纖維素、經(jīng)低級烷基取代的羥丙基纖維素、淀 粉、預(yù)膠凝化淀粉和藻酸鈉。通常，崩解劑將占劑型的1重量％至25重量％，優(yōu)選5重量％ 至20重量％。粘合劑通常被用來向片劑制劑賦予粘著品質(zhì)。合適的粘合劑包括微晶纖維素、 明膠、糖、聚乙二醇、天然和合成膠、聚乙烯吡咯烷酮、預(yù)膠凝化淀粉、羥丙基纖維素和羥丙 甲基纖維素。片劑還可含有稀釋劑，例如乳糖(單水合物、經(jīng)噴霧干燥的單水合物、無水的 等)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、微晶纖維素、淀粉和磷酸氫鈣二水合物。片劑還可任選包含表面活性劑(例如，十二烷基硫酸鈉和聚山梨醇酯80)和助流 劑(例如二氧化硅和滑石)。如果存在的話，表面活性劑可占片劑的0.2重量％至5重量％， 助流劑可包含片劑的0. 2重量％至1重量％。片劑通常還含有潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂酰延胡索酸鈉
32以及硬脂酸鎂和十二烷基硫酸鈉的混合物。潤滑劑通常占片劑的0. 25重量％至10重量％， 優(yōu)選0. 5重量％至3重量％。其它可能的成分包括抗氧化劑、著色劑、調(diào)味劑、防腐劑和味道掩蓋劑。示例性的片劑含有可最多大約80%的藥物，大約10重量％至大約90重量％的粘 合劑，大約0重量％至大約85重量％的稀釋劑，大約2重量％至大約10重量％的崩解劑以 及大約0. 25重量％至大約10重量％的潤滑劑?？芍苯踊蛴脻L筒壓制片劑摻合物，以形成片劑?；蛘?，片劑摻合物或摻合物的一部 分可在片劑化之前被濕_、干-或熔融制粒、熔融凍結(jié)或擠出。最終的制劑可包含一層或多 層，并可被包覆或不被包覆；其甚至可被裝入膠囊。在 Pharmaceutical DosaRe Forms :Tablets, Vol. 1，H. Lieberman and L. Lachman (Marcel Dekker, New York, 1980)中有對片劑配制的討論。用于人或獸用的可消耗的口服膜劑典型地是易水溶的或水可膨脹的薄膜劑型，其 可迅速溶解或是口腔粘附性的，典型地包含式(I)化合物、膜形成聚合物、粘合劑、溶劑、濕 潤齊 、增塑劑、穩(wěn)定劑或乳化劑、粘性改良劑和溶劑。制劑的一些組分可執(zhí)行超過一種功能?；瘜W(xué)式(I)的化合物可以是水溶性的或水不溶的。水溶性的化合物典型包含溶質(zhì) 的1重量％至80重量％，更典型地，20重量％至50重量％。較不溶的化合物可占到組合物 的更高比例，典型地，可多至溶質(zhì)的88重量％?；蛘?，化學(xué)式(I)的化合物可以是微顆粒珠 粒的形式。膜形成聚合物可選自天然多糖、蛋白或合成水膠體，其典型以0. 01至99重量％的 范圍內(nèi)存在，更典型地，30至80重量％的范圍。其它可能的成分包括抗氧化劑、著色劑、調(diào)味劑和增香劑、防腐劑、唾液刺激劑、冷 卻劑、共溶劑(包括油)、緩和劑(emollients)、膨脹劑、消泡劑、表面活性劑和味道掩蓋劑。根據(jù)本發(fā)明的膜劑典型地是通過對包覆到可去皮的(peelable)襯背支持物或紙 上的薄的水性膜進(jìn)行蒸發(fā)干燥來制備的。這可在干燥爐或風(fēng)洞里進(jìn)行，典型地，在組合式包 衣干燥機(jī)中進(jìn)行，或者，通過冷凍干燥或真空來進(jìn)行。用于口服施用的固體制劑還可被配制為立即釋放和/或改良釋放的。改良釋放制 劑包括延遲的、持續(xù)的、脈沖式的、受控的、靶向的和程序化的釋放。用于本發(fā)明目的的合適的改良釋放制劑在美國專利No. 6，106, 864中有描述。 其它合適的釋放技術(shù)，例如，高能分散劑和滲透和包衣顆粒的細(xì)節(jié)可在Pharmaceutical Technology On-line, 25 (2), 1~14,, Verma et al(2001)中找到。使用咀嚼膠以實(shí)現(xiàn)受控 釋放在WO 00/35298中有描述。本發(fā)明的化合物還可直接施用進(jìn)血流、肌肉或者內(nèi)部器官。用于非腸道施用的合 適手段包括靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、鞘內(nèi)、心室內(nèi)、尿道內(nèi)、胸骨內(nèi)、顱內(nèi)、肌內(nèi)、滑液內(nèi)和皮 下。用于非腸道施用的合適設(shè)備包括針頭(包括微型針頭)注射器、無針頭注射器和輸注 技術(shù)。非腸道制劑典型地是水性溶液，其可含有賦形劑，例如，鹽、碳水化合物和緩沖劑 (優(yōu)選至3至9的pH)，但是，對于一些應(yīng)用而言，它們可更合適地被配制為滅菌非水性溶 液，或者配制為待與合適的介載體(例如滅菌無熱原水)組合使用的干燥形式?？墒褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員公知的標(biāo)準(zhǔn)制藥技術(shù)，容易地在滅菌條件下制備非腸道制
33劑，例如通過凍干來進(jìn)行?？墒褂煤线m的配制技術(shù)，例如，摻入溶解度增強(qiáng)試劑，來增加用于制備非腸道溶液 的式(I)化合物的溶解度。用于非腸道施用的制劑可被配制為立即釋放和/或改良釋放的。改良釋放制劑包 括延遲的、持續(xù)的、脈沖式的、受控的、靶向的和程序化的釋放。式(I)化合物可被配制為 懸浮液或配制為固體、半固體或觸變液體，用于作為施用，提供活性化合物的改良釋放。此 類制劑的例子包括經(jīng)藥物包覆的支架和包含經(jīng)藥物包覆的聚(dl-乳酸-共-羥基乙酸) (PGLA)微球的懸浮液和半固體。本發(fā)明的化合物還可局部、皮(內(nèi))或透皮施用至皮膚或粘膜。用于該目的的典 型制劑包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液、霜劑、油膏、涂粉、敷料、泡沫、膜劑、皮膚貼片、薄片、 植入體、海綿、纖維、繃帶和微乳液。還可使用脂質(zhì)體。典型的載劑包括醇、水、礦物油、液體 石蠟油、白石蠟油、甘油、聚乙二醇和丙二醇?？砂ㄟM(jìn)穿透增強(qiáng)劑，見，例如，JPharm Sci, 88(10),955-958, Finnin and Morgan(October 1999)。局部施用的其它手段包括通過電穿孔、電離子透入、超聲透入(phonophoresis)、 超聲導(dǎo)入(sonophoresis)和微型針頭或無針頭(例如Powder ject 、Bioject 等)注射 來遞送。用于局部施用的制劑可被配制為立即釋放和/或改良釋放的。改良釋放制劑包括 延遲的、持續(xù)的、脈沖式的、受控的、靶向的和程序化的釋放。本發(fā)明的化合物還可鼻內(nèi)施用或通過吸入施用，典型地，以干粉形式(單獨(dú)或作 為混合物，例如，在與乳糖的干燥摻合物中，或作為混合的組分顆粒，例如，與例如磷脂酰膽 堿的磷脂混合)從干粉吸入器施用或者作為氣溶膠噴霧從加壓容器、泵、噴霧、霧化器(優(yōu) 選地，使用電氣流體力學(xué)的霧化器，以產(chǎn)生細(xì)霧)或噴霧器施用，可以使用或不使用合適的 推進(jìn)劑，例如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷，或者，可作為滴鼻液施用。對 于鼻內(nèi)使用而言，粉末可包含生物粘附劑，例如，殼聚糖或環(huán)糊精。加壓容器、泵、噴霧、霧化器或噴霧器含有本發(fā)明化合物的溶液或懸浮液，其中包 含例如，乙醇、水性乙醇或合適的用于活性物質(zhì)的分散、溶解或延長釋放的其它試劑，作為 溶劑的推進(jìn)劑以及任選的表面活性劑，例如，山梨聚糖三油酸酯、油酸或寡聚乳酸。在以干粉或懸浮液制劑使用之前，對藥物產(chǎn)品進(jìn)行微粉化，至適于通過吸入遞送 的尺寸(典型地，小于5微米)。這可通過任何合適的粉碎方法，例如，螺旋噴射研磨、流床 噴射研磨、超臨界流體加工以形成納米顆粒、高壓勻化或噴霧干燥來實(shí)現(xiàn)。用于吸入器或吹藥器(insufflator)的膠囊(例如從明膠或羥丙甲基纖維素制造 的)、泡罩(blisters)或藥筒(cartridges)可被配制為含有本發(fā)明的化合物、合適的粉末 基底(例如，乳糖或淀粉)和性能改良劑(例如1-亮氨酸、甘露醇或硬脂酸鎂)的粉末混 合物。乳糖可以是無水的或者是單水合物的形式，后者是優(yōu)選的。其它合適的賦形劑包括: 右旋糖苷、葡萄糖、麥芽糖、山梨糖醇、木糖醇、果糖、蔗糖和海藻糖。用于使用電氣流體力學(xué)以產(chǎn)生細(xì)霧的霧化器中的合適的溶液制劑可含有每次噴 出(actuation) 1 μ g至20mg的本發(fā)明的化合物，噴出體積可在1 μ 1至100 μ 1之間變動。 典型的制劑可包含式(I)化合物、丙二醇、滅菌水、乙醇和氯化鈉?？捎脕泶姹嫉膫?選溶劑包括甘油和聚乙二醇。
可向本發(fā)明意欲用于吸入/鼻內(nèi)施用的那些制劑中加入合適的香料，例如薄荷醇 和左薄荷醇(levomenthol)，或者加甜劑，例如糖精或糖精鈉。用于吸入/鼻內(nèi)施用的制劑可被配制為立即釋放和/或改良釋放的(使用例如 PGLA)。改良釋放制劑包括延遲的、持續(xù)的、脈沖式的、受控的、靶向的和程序化的釋放。在干粉吸入器和氣溶膠的情況下，通過遞送計(jì)量的量的閥，來確定劑量單位。根據(jù) 本發(fā)明的劑量典型地被安排為施用計(jì)量的量或“噴煙”(含有0.001毫克至10毫克的化學(xué) 式(I)的化合物)?？傮w每日劑量將典型地在0.001毫克至40毫克的范圍內(nèi)，其可以以單 劑量施用，或者更通常地，作為一天內(nèi)分開的劑量施用。本發(fā)明的化合物可直腸或陰道施用，例如，以栓劑、子宮環(huán)或灌腸劑的形式。可可 脂是傳統(tǒng)的栓劑基底，但是也可根據(jù)情況適當(dāng)使用多種備選物。用于直腸/陰道施用的制劑可被配制為立即釋放和/或改良釋放的。改良釋放制 劑包括延遲的、持續(xù)的、脈沖式的、受控的、靶向的和程序化的釋放。本發(fā)明的化合物還可直接施用至眼或耳，典型地，以處于等滲透壓的、pH經(jīng)調(diào)節(jié)的 滅菌鹽水中的微粉化懸浮液或溶液的液滴的形式。適于經(jīng)眼/經(jīng)耳施用的其它制劑包括油 膏、凝膠、可生物降解(例如可吸收的凝膠海綿、膠原)以及不可生物降解(例如硅酮)的 植入體、薄片、隱形眼鏡和顆?；蚰遗菹到y(tǒng)，例如，類脂囊泡(niosomes)或脂質(zhì)體。聚合物， 例如，經(jīng)交聯(lián)的聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明質(zhì)酸、纖維素聚合物(例如羥丙甲基纖維素、羥乙 基纖維素或甲基纖維素)或雜多糖聚合物(例如結(jié)冷膠)可與防腐劑(例如苯扎氯銨)一 起摻入。此類制劑還可通過電離子透入來遞送。用于經(jīng)眼/經(jīng)耳施用的制劑可被配制為立即釋放和/或改良釋放的。改良釋放制 劑包括延遲的、持續(xù)的、脈沖式的、受控的、靶向的和程序化的釋放。本發(fā)明的化合物可與可溶的大分子物質(zhì)(例如環(huán)糊精及其合適的衍生物或含聚 乙二醇的聚合物)組合，以改進(jìn)它們的溶解度、溶解速率、味道掩蓋性、生物可利用性和/或 穩(wěn)定性，以用于上文提到的任何施用模式。例如，已發(fā)現(xiàn)藥物_環(huán)糊精復(fù)合物對于大多數(shù)劑型和施用途徑來說都是有用的。 可使用包含體復(fù)合物和非包含體復(fù)合物。作為與藥物直接復(fù)合的備選，可使用環(huán)糊精作為 輔助添加劑，即，作為載劑、稀釋劑或增溶劑。最常用于這些目的的是α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊 精和Y-環(huán)糊精，其例子可在國際專利申請Nos. WO 91/11172,WO 94/02518和WO 98/55148 中找到。因?yàn)榭赡芟胍┯没钚曰衔锏慕M合，例如，為了治療特定疾病或病況的目的，因 此，兩種或多種藥物組合物(其中至少一種含有本發(fā)明的化合物)可方便地組合成適于共 施用組合物的試劑盒形式，這也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。因此，本發(fā)明的試劑盒包含兩種或多種獨(dú)立的藥物組合物(其中至少一種含有根 據(jù)本發(fā)明的化學(xué)式(I)的化合物)以及裝納所述組合物的裝置，例如，容器、分開的瓶子或 者分開的錫紙包裝(foil packet)。此類試劑盒的一個例子是用于包裝片劑、膠囊等的人所 熟知的泡罩包裝。本發(fā)明的試劑盒特別適于施用不同的劑型(例如口服和非腸道的)，以不同劑量 間隔施用獨(dú)立的組合物或者用于獨(dú)立的組合物相互針對的滴定(titrating)。為協(xié)助依從 性，試劑盒典型地包含施用說明書，并且還可提供所謂的記憶輔助。
為施用給人類患者，本發(fā)明的化合物的每日總劑量典型地在0. Img至IOOOmg的范 圍內(nèi)，當(dāng)然，這取決于施用模式。在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，本發(fā)明化合物的每天總劑量 典型上在0. 1毫克至500毫克的范圍內(nèi)。于本發(fā)明的另一實(shí)施例，本發(fā)明化合物的每天總 劑量典型地在1毫克至300毫克的范圍內(nèi)?？偟拿咳談┝靠梢詥蝿┝渴┯没蛞苑珠_的劑量 施用，根據(jù)醫(yī)師的判斷，其也可落在本文給出的典型范圍之外。這些劑量基于具有大約60kg至70kg的重量的平均人受試者。醫(yī)師將容易決定體 重在該范圍之外的受試者(例如嬰兒和老人)的劑量?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物(單獨(dú)或與一種或多種活 性試劑混合)特別有用于治療5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥。根據(jù)一種優(yōu)選的實(shí)施方式，5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥指過敏性和非過敏性的 氣道疾病、失調(diào)或病癥。過敏性和非過敏性的氣道疾病、失調(diào)或病癥的例子包含選自下述所組成的疾病、 失調(diào)和病癥>任何類型、病因或病原的哮喘，特別是選自異位性哮喘，非異位性哮喘，過敏性 哮喘，異位性支氣管IgE介導(dǎo)的哮喘，支氣管哮喘，特發(fā)性哮喘，真哮喘，病理生理紊亂造成 的內(nèi)因性哮喘，環(huán)境因素造成的外因性哮喘，不知或不明顯原因的特發(fā)性哮喘，支氣管炎哮 喘，氣腫性哮喘，運(yùn)動誘發(fā)的哮喘，過敏原誘發(fā)的哮喘，冷空氣誘發(fā)的哮喘，職業(yè)性哮喘，細(xì) 菌、真菌、原生動物或病毒感染造成的感染性哮喘、非過敏性哮喘，初始性哮喘，哮喘嬰兒綜 合征和支氣管炎構(gòu)成的組的成員的哮喘，>慢性或急性支氣管縮小、慢性支氣管炎、氣道阻塞和肺氣腫，>任何類型、病因或病原的阻塞性或炎性氣道疾病，特別是選自慢性嗜酸細(xì)胞性 肺炎，慢性阻塞性肺病(COPD)，包括慢性支氣管炎、肺氣腫或與COPD有關(guān)或無關(guān)的呼吸困 難的C0PD，特征在于不可逆漸進(jìn)式氣道阻塞的C0PD、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、其它藥 物治療造成的氣道高反應(yīng)性加劇，和與肺動脈高壓有關(guān)的氣道疾病構(gòu)成的組的成員的阻塞 性或炎性氣道疾病，>任何類型、病因或病原的支氣管炎，特別是選自急性支氣管炎、急性喉氣管支氣 管炎、花生支氣管炎、鼻黏膜炎支氣管炎、格魯布性支氣管炎、干燥支氣管炎、感染性哮喘支 氣管炎、增殖性支氣管炎、金黃色葡萄球菌或鏈球菌支氣管炎和肺泡性支氣管炎構(gòu)成的組 的成員的支氣管炎，>急性肺部損傷，>任何類型、病因或病原的支氣管擴(kuò)張癥，特別是選自柱狀支氣管擴(kuò)張癥、囊狀支 氣管擴(kuò)張癥、紡綻狀支氣管擴(kuò)張癥、毛細(xì)管支氣管擴(kuò)張癥、囊性支氣管擴(kuò)張癥、干燥支氣管 擴(kuò)張癥和結(jié)節(jié)性支氣管擴(kuò)張癥構(gòu)成的組的成員的支氣管擴(kuò)張癥。依據(jù)另一實(shí)施例，5-L0介導(dǎo)的疾病進(jìn)一步包含表I中列出的表I(a)炎癥，包括但不限于煙霧誘發(fā)的氣道炎癥和炎癥促進(jìn)的咳嗽，(b)關(guān)節(jié)炎，諸如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、脊柱關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑性狼瘡關(guān)節(jié)炎、幼年 類關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎和痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎；(c)神經(jīng)炎癥；
(d)疼痛(即，使用此類化合物作為止痛藥)，諸如，傷害性或神經(jīng)性疼痛；(e)發(fā)燒(即，使用此類化合物作為解熱劑)；(f)肺結(jié)節(jié)病和硅肺??；(g)心血管疾病，諸如，動脈硬化癥、心肌梗塞(諸如，心肌梗塞后心包炎適應(yīng)癥)、 血栓塞、充血性心臟衰竭、心臟再灌注損傷和與高血壓和/或心臟衰竭有關(guān)的并發(fā)癥，諸 如，血管性器官傷害；(h)心肌癥；(i)中風(fēng)，諸如，缺血性和出血性中風(fēng)；(j)缺血，諸如，腦部缺血和心臟/冠狀動脈繞道造成的缺血，或缺血誘發(fā)的心肌 損傷；(k)再灌注損傷，包括缺血后再灌注損傷；(1)腎再灌注損傷；(m)腦水腫或腦部損傷；(η)神經(jīng)外傷和腦部外傷，諸如，閉鎖性腦部損傷；(ο)神經(jīng)變性失調(diào)；(ρ)中樞神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)(這些包括，例如，炎性或細(xì)胞凋亡組份的失調(diào))，諸如，阿 爾茨海默癥、帕金森癥、亨丁頓舞蹈癥、肌萎縮側(cè)索硬化癥、重癥肌無力、脊髓損傷和周邊神 經(jīng)病變；(q)肝臟疾??；(r)高膽固醇癥和血脂異常癥；(s)胃腸病癥，包括胃炎、胃靜脈曲張、炎性腸病、克羅恩氏癥、胃黏膜炎、腸躁癥和 潰瘍性疾病，包括潰瘍性大腸炎和胃潰瘍；(t)腎炎；(U)眼科疾病，諸如，視網(wǎng)膜炎.神網(wǎng)膜病(諸如，糖尿病視網(wǎng)膜病)、葡萄膜炎、眼 部懼光、非青光眼視神經(jīng)萎縮和與年齡有關(guān)的黃斑部退化(ARMD)(諸如，ARMD-萎縮形式；(ν)眼科病癥，諸如，角膜移植排斥、眼部新生血管疾病、視網(wǎng)膜新生血管疾病(諸 如，損傷或感染后的新生血管)和晶狀體后纖維增生癥；(w)青光眼，諸如，原發(fā)性開角型青光眼(POAG)、幼兒型原發(fā)性開角型青光眼、閉 角型青光眼、剝脫綜合征青光眼、前部缺血性視神經(jīng)病變(AION)、高眼壓癥、Reiger綜合 征、正常眼壓性青光眼、新生血管性青光眼、眼部炎癥和皮質(zhì)類固醇誘發(fā)的青光眼；(χ)眼部組織和眼外傷的急性損傷，諸如，創(chuàng)傷后青光眼、外傷性視神經(jīng)病變和視 網(wǎng)膜中央動脈阻塞(CRAO)；(y)糖尿病，包括I型糖尿病和II型糖尿??；(ζ)糖尿病腎??；(aa)皮膚相關(guān)的病癥，諸如，牛皮癬、濕疹、燒傷、皮膚炎、皮膚瘢瘤、疤痕組織形 成、硬皮癥和血管生成失調(diào)；(bb)病毒和細(xì)菌感染，諸如，敗血癥、敗血性休克、革蘭氏陰性菌膿毒血癥、瘧疾、 腦膜炎、機(jī)會性感染、感染或惡性腫瘤續(xù)發(fā)的惡病質(zhì)、獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)續(xù)發(fā) 的惡質(zhì)癥、AIDS、ARC (AIDS相關(guān)的復(fù)合癥)、肺炎、單純皰疹感染、鼻病毒感染和皰疹病毒；
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(CC)感染造成的肌痛；(dd)流行性感冒；(ee)內(nèi)毒素性休克；(ff)中毒休克綜合征；(gg)自體免疫疾病，諸如，移植物抗宿主的反應(yīng)和器官移植排斥；(hh)骨骼溶蝕疾病，諸如，骨質(zhì)疏松癥；(ii)多發(fā)性硬化癥；(jj)女性生殖系統(tǒng)失調(diào)，諸如，子宮內(nèi)膜異位、經(jīng)痛、陰道炎和念珠菌癥；(kk)病理性(但非惡性)的病癥，諸如，良性血管瘤(諸如，嬰兒良性血管瘤)、鼻 咽纖維血管瘤和骨骼缺血性壞死；(mm)良性和惡性腫瘤/瘤形成，包含任何種類的癌癥，諸如，結(jié)腸直腸癌、腦癌、骨 癌、小腸上皮細(xì)胞衍生的瘤形成(上皮癌)，諸如，上皮細(xì)胞癌，腺癌、消化道癌，諸如，唇癌、 口腔癌、食道癌、小腸癌，和胃癌，結(jié)腸癌、肝癌、膀胱癌、胰臟癌、卵巢癌、子宮頸癌、肺癌、乳 癌、皮膚癌，諸如，鱗狀細(xì)胞和基底細(xì)胞癌、前列腺癌、腎細(xì)胞癌、何杰金氏癥和影響遍布機(jī) 體的上皮細(xì)胞的其它已知癌癥；(nn)全身性紅斑性狼瘡(SLE)；(00)血管新生，包含瘤形成；(pp)轉(zhuǎn)移；(qq)纖維化疾?。?rr)出血；(ss)凝血；(tt)急性時(shí)相反應(yīng)，如，感染和敗血癥和休克期間所見者(例如，(im)敗血性休克、血流性休克等)；(W)厭食癥；(ww)致病菌感染；(XX)假性狂犬病；(yy)鼻氣管炎；(zz)HIV;(aaa)類肉瘤；(bbb)皰疹病毒，包含單純皰疹病毒1型(HSV-I)、單純皰疹病毒2型(HSV-2)；(CCC)巨細(xì)胞病毒(CMV)；(ddd)帶狀皰疹病毒(VZV)；(eee) Epstein-Barr 病毒；(fff)人類皰疹病毒 _6 (HHV-6)；(ggg)人類皰疹病毒-7 (HHV-7)、人類皰疹病毒_8 (HHV-8)；(hhh)肌肉發(fā)育；(iii)黏液素過度生產(chǎn)，和/或黏液高分泌；(jjj)過敏，包括過敏性鼻炎；(kkk)組織破壞；
(111)諸如，喘氣咳嗽等癥候和癥狀；(_)血液失調(diào)，包含再生不良性貧血；(nnn)脊椎關(guān)節(jié)病，包含脊椎關(guān)節(jié)病和腰椎關(guān)節(jié)??；(000)男性生殖系統(tǒng)失調(diào)；(ppp)頭痛，包含偏頭痛、鼻竇頭痛，和緊張性頭痛；(qqq)牙痛；(rrr)風(fēng)濕熱；(SSS)結(jié)締組織損傷或失調(diào)；(ttt)肥胖癥；(mm)肺部失調(diào)和疾病(例如，高濃度氧肺泡損傷)；(vvv)腎結(jié)石；(www)創(chuàng)傷愈合；(XXX)微小損傷；(yyy)輻射損傷；(zzz)滑囊炎；(aaaa)血管疾病；(bbbb)肺水腫；(cccc)結(jié)膜炎；(dddd)肌鍵炎；(eeee)皮質(zhì)性癡呆；(ffff)牙齦炎；(gggg)損傷后發(fā)生的腫脹；(hhhh)結(jié)節(jié)性動脈周圍炎；(iiii)甲狀腺炎；(kkkk)多發(fā)性肌炎；(Illl)Behcet 綜合征；(mmmm)腎病綜合征；(nnnn)過敏反應(yīng)，和(0000)認(rèn)知失調(diào)，包含輕度認(rèn)知障礙和精神分裂癥的認(rèn)知障礙、雙極性失調(diào)和 ADHD。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥指疼痛。疼痛可包含傷害性 或神經(jīng)性疼痛。在該實(shí)施方式中，另外的活性試劑可包含GABA類似物，諸如，加巴噴丁或普 瑞巴林，阿片，諸如，嗎啡、非類固醇抗炎劑(NSAID)、C0X-2抑制劑、類固醇，或類二十烷酸 途徑調(diào)節(jié)劑。生理性疼痛是用以警告來自外在環(huán)境的可能的損害性刺激的危險(xiǎn)而設(shè)計(jì)的重要 保護(hù)機(jī)構(gòu)。此系統(tǒng)經(jīng)由特定的一級感覺神經(jīng)元組操作，其通過經(jīng)周圍傳遞機(jī)構(gòu)的傷害刺激 而活化(評論見Millan，1999，Prog. Neurobiol.，57，1-164)。此類感覺纖維被稱為傷害感 受器，且特征在于具緩慢傳導(dǎo)速度的小直徑軸突。傷害感受器將傷害刺激的強(qiáng)度、時(shí)間和品 質(zhì)編碼，且通過其拓?fù)涫浇M織化投影至脊髓(刺激的位置)。傷害感受器被發(fā)現(xiàn)于感痛神經(jīng)
39纖維(其主要有二種，A-δ纖維(有髓鞘)和C纖維(無髓鞘))上。傷害感受器輸入產(chǎn) 生的活性，于背角復(fù)合式處理后直接或經(jīng)由腦干傳導(dǎo)中繼核轉(zhuǎn)移至丘腦腹側(cè)基底，然后，至 皮質(zhì)，疼痛感覺于此產(chǎn)生。疼痛一般可分為急性或慢性。急性疼痛突然開始，且短暫(通常十二周或更少)。 其通常與特定原因(諸如，特定的損傷)有關(guān)，且通常急遽且嚴(yán)重。此種疼痛可于手術(shù)、牙 齒處理、拉傷或扭傷造成的特定損傷后發(fā)生。急性疼痛一般不會造成任何持續(xù)性心理反應(yīng)。 相反地，慢性疼痛是長期疼痛，典型地持續(xù)多于三個月，且導(dǎo)致顯著的心理和情緒問題。慢 性疼痛的普遍例子是神經(jīng)性疼痛(例如，疼痛性糖尿病神經(jīng)病變、帶狀皰疹后神經(jīng)痛)、腕 管綜合征、背痛、頭痛、癌癥疼痛、關(guān)節(jié)炎疼痛和慢性術(shù)后疼痛。當(dāng)重大損傷經(jīng)由疾病或創(chuàng)傷發(fā)生于身體組織時(shí)，傷害感受器活化特征被改變，且 于周邊、損傷周圍局部和傷害感受器終端處中央具有敏化作用。此類作用導(dǎo)致提高的疼痛 感覺。急性疼痛中，此類機(jī)制有用于促進(jìn)保護(hù)行為，其能更好地使修護(hù)處理發(fā)生。一般的預(yù) 期是一旦損傷愈合，敏感性回到正常。但是，許多慢性疼痛狀態(tài)中，過敏反應(yīng)遠(yuǎn)比愈合程序 更久，這通常是由于神經(jīng)系統(tǒng)損傷的。這類損傷通常導(dǎo)致與適應(yīng)不良和異?；钚杂嘘P(guān)的感 覺神經(jīng)纖維失調(diào)(ffoolf &Salter，2000，Science, 288，1765-1768)。當(dāng)患者癥狀中包括不舒服和異常感覺時(shí)，存在臨床疼痛?；颊呲呄蛴谙喈?dāng)不同，其 可能存在多種不同的疼痛癥狀。此類癥狀包含1)自發(fā)性疼痛，其可為感覺遲鈍、灼熱或刺 痛；2)對創(chuàng)傷刺激的夸大疼痛反應(yīng)(痛覺過敏)；和3) —般無害刺激產(chǎn)生的疼痛(痛覺異 常-Meyer等人，1994，Textbook of Pain，13-44)。雖然遭受各種型式的急性和慢性疼痛的 患者可能具有相似癥狀，但基本機(jī)制可能不同，因此，需要不同的治療策略。因此，疼痛也可 依據(jù)不同病理生理分成數(shù)種不同的亞型，包含傷害性、炎性和神經(jīng)性的疼痛。傷害性疼痛是通過組織損傷或通過可能造成損傷的強(qiáng)烈刺激而誘發(fā)的。疼痛的 傳入通過損傷位置處的傷害感受器的刺激轉(zhuǎn)換而活化，且于其終端水平活化脊髓內(nèi)的神經(jīng) 元。然后，向上經(jīng)脊髓束傳送至腦部，疼痛在此被感覺到(Meyer等人，1994，Textbook of Pain，13-44)。傷害感受器的活化作用活化二種傳入神經(jīng)纖維。有髓鞘的A-δ纖維快速傳 送，其負(fù)責(zé)急遽且刺痛的疼痛感覺，而無髓鞘的C纖維以慢速率傳送，且傳送鈍痛或酸痛。 中度至嚴(yán)重的急性傷害性疼痛是來自于中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷的疼痛、拉傷/扭傷、灼傷、心肌 梗塞和急性胰臟炎、術(shù)后疼痛(任何類型的手術(shù)過程后的疼痛)、損傷后的疼痛、腎絞痛、癌 癥疼痛和背痛的明顯特征。癌癥疼痛可能為慢性疼痛，諸如，腫瘤有關(guān)的疼痛(例如，骨骼 疼痛、頭痛、臉部疼痛或內(nèi)臟性疼痛)，或癌治療有關(guān)的疼痛(例如，化療后的癥候、慢性術(shù) 后疼痛癥狀或輻射后的癥狀)。癌癥疼痛也會應(yīng)答于化療、免疫治療、荷爾蒙治療或放射性 治療而發(fā)生。背痛可能是由于疝氣或脫腸造成的椎間盤突出，或腰椎面關(guān)節(jié)、骶骼關(guān)節(jié)、椎 邊肌或后縱韌帶失調(diào)導(dǎo)致的。背痛可自然解除，但于許多患者，若持續(xù)超過12周，會變成可 能特別減弱的慢性病癥。神經(jīng)性疼痛目前被定義為由神經(jīng)系統(tǒng)中的原發(fā)性損害或功能障礙起始或造成的 疼痛。神經(jīng)損害可由創(chuàng)傷和疾病造成，因此，術(shù)語‘神經(jīng)性疼痛’包含具各種不同病因的許 多失調(diào)。它們包括但不限于周圍神經(jīng)病變、糖尿病神經(jīng)病變、帶狀皰疹后神經(jīng)痛、三叉神經(jīng) 痛、背痛、癌癥神經(jīng)病變、HIV神經(jīng)病變、幻肢痛、腕管綜合征、中樞中風(fēng)后疼痛和與慢性酒 精中毒、甲狀腺低能癥、尿毒癥、多發(fā)性硬化癥、脊髓損傷、帕金森癥、癲癇，和維生素缺乏有關(guān)的疼痛。神經(jīng)性疼痛是病理性的，因?yàn)槠洳痪哂斜Ｗo(hù)作用。其通常在原始原因消散后 仍存在，通常持續(xù)數(shù)年，明顯地減低患者生活品質(zhì)(Woolf和Marmion，1999，Lancet, 353, 1959-1964)。神經(jīng)性疼痛的癥狀難以治療，因?yàn)槠渫ǔ２煌?，即使是在具相同疾病的患者間 也不同(Woolf &Decosterd, 1999, Pain Supp. ,6, S141-S147 ；Woolf and Mann ion, 1999, Lancet，353，1959-1964)。其包含自發(fā)性疼痛，其可為持續(xù)性，和突發(fā)性或異常引起的疼痛， 諸如，痛覺過敏(對傷害刺激的增加敏感性)和痛覺異常(對一般無害刺激的敏感性)。炎癥過程是一系列復(fù)雜的生化和細(xì)胞事件，其應(yīng)答于組織損傷或外在物質(zhì)存在 而被活化，造成腫漲和疼痛(Levine和Taiwo，1994，Textbook ofPain，45-56)。關(guān)節(jié)炎疼 痛是最普遍的炎性疼痛。類風(fēng)濕疾病是發(fā)達(dá)國家最普遍的慢性炎性病癥之一，類風(fēng)濕性 關(guān)節(jié)炎是殘障的普遍原因。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的真正病因未知，但現(xiàn)今的假設(shè)暗示基因和 微生物因素可能是重要的(Grennan &Jayson，1994，Textbook of Pain，397-407)。已承 認(rèn)幾乎1600萬美國人具有無癥狀性骨關(guān)節(jié)炎(OA)退化性關(guān)節(jié)疾病，其中大部份超過60 歲，且此預(yù)期當(dāng)人民年紀(jì)增加時(shí)會增至4000萬，從而成為龐大的公共健康問題(Houge &Mersfelder,2002,Ann Pharmacother.，36，679-686 ；McCarthyet al. ,1994,Textbook of Pain，387-395)。具有骨關(guān)節(jié)炎的大部份患者因?yàn)橄嚓P(guān)疼痛尋求醫(yī)學(xué)協(xié)助。關(guān)節(jié)炎對于社 會心理和身體功能具顯著沖擊，且已知是其后的生命中導(dǎo)致殘障的原因。僵直性脊椎炎也 是造成脊柱和骶骼關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)炎的風(fēng)濕性疾病。其在從在整個生命期間間歇性背痛到攻擊 脊柱、周邊關(guān)節(jié)和其它身體器官的嚴(yán)重慢性疾病間變化。另一種炎性疼痛是內(nèi)臟性疼痛，其包括與炎性腸病(IBD)有關(guān)的疼痛。內(nèi)臟性疼 痛是與內(nèi)臟(包含腹腔器官)有關(guān)的疼痛。此類器官包含性器官、脾臟和部份的消化系統(tǒng)。 與內(nèi)臟有關(guān)的疼痛可被分為消化性內(nèi)臟疼痛和非消化性內(nèi)臟疼痛。造成疼痛的普遍遭遇的 胃腸道(GI)失調(diào)包含功能性腸病(FBD)和炎性腸病(IBD)。此類GI失調(diào)包含廣范圍的疾 病狀態(tài)，其現(xiàn)今僅被適度控制，其包括在FBD方面胃食道逆流、消化不良、腸易激綜合征 (IBS)和功能性腹痛綜合征(FAPS)，以及，在IBD方面，克羅恩氏癥、回腸炎和潰瘍性大腸 炎，這些都規(guī)律地產(chǎn)生內(nèi)臟性疼痛。其它類型的內(nèi)臟性疼痛包含與經(jīng)痛、膀胱炎和胰臟炎有 關(guān)的疼痛和盆腔痛。需注意某些類型的疼痛具有多數(shù)病因，因此可被分類成多于一種領(lǐng)域，例如，背痛 和癌癥疼痛具有傷害性和神經(jīng)性的成份。其它種類的疼痛包含>肌肉和骨骼失調(diào)造成的疼痛，包括肌痛癥、纖維肌痛、脊椎炎、血清陰性(非類風(fēng) 濕性)關(guān)節(jié)病變、非關(guān)節(jié)性風(fēng)濕癥、抗肌萎縮蛋白病、肝糖分解、多發(fā)性肌炎和化膿性肌炎；>心臟和血管疼痛，包括心絞痛、心肌梗塞、二尖瓣狹窄、心包膜炎、雷諾氏現(xiàn)象、 硬化病和骨骼肌缺血造成的疼痛；>頭痛，諸如，偏頭痛(包括有預(yù)兆的偏頭痛和無預(yù)兆的偏頭痛)、叢集性頭痛、緊 張性頭痛、混合式頭痛和與血管失調(diào)有關(guān)的頭痛；和> 口顏疼痛，包含牙痛、耳痛、灼口癥和顳顎關(guān)節(jié)肌筋膜疼痛。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥指病理性肝臟病癥。肝臟 病癥可包含，例如，肝硬化、脂肪肝、肝炎、非酒精性脂肪肝炎(NASH)、肝纖維化、良性肝腫瘤 等。在此實(shí)施例中，另外的活性劑可為抗病毒劑、過氧化物酶體增殖物活化受體(PPAR)-Y配位體，諸如，噻唑烷二酮、轉(zhuǎn)化生長因子β抑制劑等。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥指骨質(zhì)疏松癥。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥指代謝綜合征。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥指病理性高膽固醇。在該 實(shí)施方式中，另外的活性試劑可為膽固醇改良或調(diào)節(jié)劑。膽固醇改良或調(diào)節(jié)劑的例子包 括但不限于HMG-CoA還原酶抑制劑(或“他汀類”)，諸如，洛伐他汀(Mevacor)、阿伐他汀 (Lipitor)、普伐他汀(Pravachol)和辛伐他汀(Zocor)；角鯊烯單氧化酶抑制劑；角鯊烯合 成酶抑制劑(亦稱為角鯊烯合成酶抑制劑)、酰基-輔酶A 膽固醇?；D(zhuǎn)化酶(ACAT)抑 制劑；普羅布考；煙堿酸；纖維酸鹽，諸如，氯貝特、非諾貝特，和吉菲布羅；膽固醇吸收抑制 劑；膽酸螯合劑；和LDL(低密度脂蛋白)受體誘發(fā)劑。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥指心血管病癥。在此實(shí)施 例中，另外的活性試劑可為礦物皮質(zhì)酮受體調(diào)節(jié)劑，諸如，依普利酮或螺內(nèi)酯，血管收縮素 轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑，諸如，喹那普利(Accupril)或福辛普利(Monopril)；血管收縮素受 體拮抗劑；維生素B-6(亦稱為吡哆醇)和其可藥用鹽，諸如，HCl鹽；維生素B-12(亦稱為 氰基鈷胺素)；β _腎上腺素受體阻斷劑；葉酸或其可藥用鹽或酯，諸如，鈉鹽和甲基葡糖胺 鹽；和抗氧化維生素，諸如，維生素C和維生素E與β胡蘿卜素。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥指瘤形成。在此實(shí)施例 中，另外的活性試劑可為α-二氟甲基烏氨酸(DFM0)、5-FU_纖維蛋白原、巖槭葉草酸 (acanthifolic acid)^Rll JHl^l (brequinar sodium)、+貞· (carmofur) > Ciba-Geigy CGP-30694、環(huán)戊基胞嘧啶、阿糖胞苷磷酸鹽硬脂酸鹽、阿糖胞苷共軛體、 Lilly DATHF, Merrel Dow DDFC、地扎胍寧、雙脫氧胞、雙脫氧鳥苷、YoshitomiDMDC、去氧 氟尿苷、Wellcome EHNA、Merck &Co. EX-015、法扎拉濱、氟尿苷、氟達(dá)拉濱磷酸鹽、5-氟 尿嘧啶、Ν-(2'-四氫呋喃基)-5_氟尿嘧啶、Daiichi Seiyaku F0-152、異丙基吡咯嗪、 Lilly LY-188011、Lilly LY-264618、美索苯拉林、甲氨喋呤、Wellcome MZPES、去甲精瞇 (norspermidine)、NCI NSC-127716、NCI NSC-264880、NCI NSC-39661、NCI NSC-612567、 Warner-Lambert PALA、噴司他汀、吡曲克辛、普卡霉素、Asahi Chemical PL-AC、Takeda TAC-788、硫鳥嘌呤、噻唑呋啉、Erbamont TIF、三甲曲沙、酪胺酸激酶抑制劑、酪胺酸蛋白 激酶抑制劑、Taiho UFT、優(yōu)立西汀、Shionogi 254-S、醛磷酰酰類似物、六甲蜜胺、阿那昔 酮、Boehringer Mannheim BBR-2207、倍斯特立普辛、布度鈦、Wakunaga CA-102、卡鉬、卡 氮芥、Chinoin-139、Chinoin-153、苯丁酸氮芥片、順鉬、環(huán)磷酰胺、American Cyanamid CL-286558、Sanofi CY-233、賽普拉、Degussa D-19-384、Sumimoto DACHP (Myr) 2、二苯基 螺莫司汀、二鉬細(xì)胞抑制劑、Erba偏端霉素衍生物、Chugai DWA-2114R、ITIE09、依莫司汀、 Erbamont FCE-24517、雌莫司汀磷酸鈉、福莫司汀、Unimed G-6-M、Chinoin GYKI-17230、 海普沙芬、異環(huán)磷酰胺、異丙鉬、洛莫司汀、馬磷酰胺、二溴衛(wèi)矛醇、Nippon Kayaku NK-121、 NCI NSC-264395、NCI NSC-342215、草酸鉬、Upjohn PCNU、潑尼莫司汀、ProterPTT-119、 雷莫司汀、司莫司汀、SmithKline SK&F-101772、Yakult HonshaSN_22、螺莫司汀、Tanabe Seiyaku TA-077、?；悄就?、替莫唑胺、替羅昔隆、四價(jià)鉬、三甲密醇、Taiho 4181-A、阿柔 比星、放線菌素D、放線菌酮、Erbamont ADR-456、阿洛立辛衍生物、Ajinomoto AN-201-II、 Ajinomoto AN_3、Nippon Soda異霉素、蒽環(huán)類、阿進(jìn)霉素-Α、必蘇卡貝林、Bristol-MyersBL-6859>Bristol-Myers BMY—25067、 BristoI-MyersBMY-25551> Bristol-Myers BMY-26605、Bristol-Myers BMY-27557、Bristol-Myers BMY-28438、博來霉素硫酸鹽、草苔 蟲內(nèi)酯-l、Taiho C-1027、加里剎霉素、色霉素、更生霉素、柔紅霉素、Kyowa Hakko DC-102、 Kyowa Hakko DC-79、Kyowa Hakko DC-88A、Kyowa Hakko DC89-AU Kyowa Hakko DC92-B、 戴特立霉素B、Shionogi D0B-41、阿霉素、阿霉素-纖維素原、艾沙霉素-A、泛艾霉素、三羥 異黃酮、依索比星、埃斯培拉霉素-Al、埃斯培拉霉素-Alb、Erbamont FCE-21954、Fujisawa Π(-973、福司曲星、Fujisawa FR-900482、格立多貝汀、格立卡汀_Α、格林卡米辛、殺莠素、艾 達(dá)霉素、依路汀、北里霉素、凱沙里賀汀、KyowaHakko ΚΜ-5539、Kirin Brewery KRN-8602、 Kyowa Hakko KT—5432、Kyowa Hakko KT—5594、Kyowa Hakko KT—6149、American Cyanamid LL-D49194、Meiji Seika ME 2303、美諾立爾、絲裂霉素、米托蒽醌、SmithKline M-TAG、無 活菌素、Nippon Kayaku NK-313、Nippon KayakuNKT-OUSRI International NSC-357704、 氧化賴氨酸、鈣離子載體、培洛霉素、皮拉汀、吡柔比星、凝血酶原、嘌呤霉素A、Tobishi RA-I、雷帕霉素、力索新、多柔比星、西本諾霉素、恩文霉素、Sumitomo SM_5887、Snow Brand SN-706、Snow Brand SN-07、索仁吉辛 _A、稀疏霉素、SSPharmaceutical SS-21020、SS Pharmaceutical SS-7313B、SS PharmaceuticalSS_9816B、斯堡霉素 B、Taiho 4181-2、他 利徽素、Takeda TAN-868A、松木油、塞立嗪、三克諾秦 A、Upjohn U-73975、Kyowa Hakko UCN-10028A、Fujisawa WF-3405、Yoshitomi Y-25024 佐柔比星、α -胡蘿卜素、α - 二氟 甲基-精胺酸、阿曲汀、Biotec AD-5、Kyorin AHC-52、鴨腳木堿、氨萘非特、安非西尼、安 吖啶、膠元原纖維、放線菌素、抗癌酮Α10、抗癌酮Α2、抗癌酮A3、抗癌酮Α5、抗癌酮AS2-1、 Henkel APD、巴非敵柯林甘氨酸鹽、天冬酰胺酶、Avarol、酒神菊素、巴特立西林、斑弗路 隆、苯并特立普、Ipsen-Beaufour BIM-23015、比生群、Bristo-Myers BMY-4048U Vestar 硼-10、溴異環(huán)磷酰胺、Wellcome BW-502、Wellcome BW-773、卡醋胺、卡美噻嗪氫氯酸鹽、 Ajinomoto CDAF、氯磺胺惡、Chemex CHX-2053、Chemex CHX-100、Warner-Lambert CI-921、 Warner-Lambert CI-937> Warner-Lambert CI-941 > Warner-Lambert CI一958、克蘭氣月尿、克 拉維林定酮、ICN 化合物 1259、ICN 化合物 4711、Contracan、Yakult HonshaCPT-11、克立斯 那托、戲拉德明、細(xì)胞松弛素B、阿糖胞苷、塞托西汀、Merz D-609、DABIS馬來酸鹽、達(dá)卡巴 嗪、德替立普替尼、膜海鞘素-B、二血卟啉醚、二氫侖哌隆、載那林、偏端霉素、Toyo Pharmar DM-341、Toyo Pharmar DM-75、Daiichi Seiyaku DN-9693、伊立普拉濱、依利醋銨、Tsumura EPMTC、麥角堿、依托泊苷、依曲替酯、芬維A胺、Fujisawa FR-57704、硝酸鎵、芫花、Chugai GLA-43,Glaxo GR-63178、舞茸多醣 NMF-5N、十六烷基磷酸膽堿、Green Cross H0-221、高三 尖杉酯堿、羥基尿素、BTG ICRF-187、伊莫福新、異谷酰胺、異維A酸、Otsuka JI-36、Ramot K-477>0tsuak K-76C00Na>Kureha Chemical K-AM>MECT CorpKI-8110>American Cyanamid L-623、白細(xì)胞調(diào)節(jié)素、氯尼達(dá)明、LundbeckLU-23-112、Lilly LY-186641、NCI (US)MAP、 馬利辛、Merrel Dow MDL-27048、Medco MEDR-340、美巴龍、部花青衍生物、甲基苯胺吖 啶、Molecular Genetics MGI-136、茗萘酊、米托萘胺、米托喹酮、莫哌達(dá)醇、毛替垂尼、 Zenyaku Kogyo MST-16、N-(視黃?；?氨基酸、Nisshin FlourMilling N_021、N_ ?；?化_去氫苯胺、那法扎瓊、Taisho NCU-190、諾考達(dá)唑衍生物、Normosang、NCI NSC-145813、 NCI NSC-361456、NCI NSC-604782、NCI NSC-95580、奧曲肽、Ono 0N0-112、奧奎秦辛、 Akzo 0rg-10172、石蒜科生物喊、帕折普汀、Warner-Lambert PD—111707、Warner-Lambert
43PD-115934, Warner-Lambert PD-13114U Pierre Fabre PE-100U ICRlJ太 D、吡咯蒽醌、聚 血卟啉、聚苦味酸、Efamol卟啉、丙雙嗎啉、甲基芐胼、丙谷胺、Invitron蛋白酶微管金接蛋 S I,Tobishi RA-700、雷佐生、Sapporo Breweries RBS、節(jié)制蛋白-P、瑞替普汀、外用 A 酸、 Rhone-Poulenc RP-49532>Rhone-Poulenc RP-56976>SmithKline SK&F-104864>Sumitomo SM-108、Kuraray SMANCS、SeaPharm SP-10094、褐舌藻醇、螺環(huán)丙烷衍生物、螺鍺、UnimecUSS Pharmaceutical SS-554、司特立普定酮、棕葉藻酮、Suntory SUN 0237,Suntory SUN 2071、 過氧化歧化酶、Toyama T-506、Toyama T-680、泰素、Teijin TEI-0303、替尼泊苷、替利泊拉 司汀、Eastman Kodak TJB-29、生育三烯醇、Topostin、Teijin TT-82,Kyowa Hakko UCN-OU Kyowa Hakko UCN-1028、烏克藍(lán)、Eastman KodakUSB_006、長春堿硫酸鹽、長春新堿、長春地 辛、長春酰胺、長春花、長春曲醇、長春利定、睡茄醇、Yamanouchi YM-534、尿鳥苷素、康普立 停、海兔素、艾達(dá)霉素、泛艾霉素、雌莫司汀、環(huán)磷酰胺、9-氨基-2-(S)_喜樹堿、拓?fù)涮婵怠?愛萊諾迪肯(Camptosar)、依西美坦、迪卡佩提(曲普瑞林)或ω-3脂肪酸可與本發(fā)明的化 合物施用。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥指神經(jīng)變性疾病，特別是阿 爾茨海默癥。除用于人類的治療外，本發(fā)明的化合物亦用于伴侶動物、野生動物，和農(nóng)場動物 (包含哺乳動物)的獸醫(yī)治療，用于治療本文公開內(nèi)容中公開的5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病 癥。舉例而言，本發(fā)明的化合物有用于治療馬、狗或貓的5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥。在另一個方面，本發(fā)明涉及下述組合，所述組合特別是用于治療5-L0介導(dǎo)的疾 病、失調(diào)或病癥，所述組合包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和一種或多 種另外的治療劑。本發(fā)明的組合進(jìn)一步含有一種或多種可藥用賦形劑。本發(fā)明組合物的治療劑可共同施用至患者以獲得某些特別想要的治療最終結(jié)果， 諸如，治療上文提到的(例如，表I中列出)一種或多種疾病、失調(diào)或病癥。在本文中使用時(shí)，術(shù)語“共同施用”和“與……組合”在述及本發(fā)明的化合物和一種 或多種其它治療劑時(shí)意欲表示且的確表示并包括下述這些>當(dāng)此類組份被一起配制成單一劑量形式時(shí)，本發(fā)明化合物和治療劑的此類組合 被同時(shí)施用至需要治療的患者，其中，在基本上相同的時(shí)間將此類組份釋放至該患者，>當(dāng)此類組份被彼此分開配制成個別的劑量形式，基本上同時(shí)由所述患者服用 時(shí)，本發(fā)明化合物和治療劑的此類組合被基本上同時(shí)施用至需要治療的患者，其中，此類組 份基本上同時(shí)釋放至該患者，>當(dāng)此類組份被彼此分開配制成個別劑量形式，并由所述患者以每次施用間明顯 有時(shí)間間隔的方式連續(xù)數(shù)次服用，本發(fā)明化合物和治療劑的此類組合被依序施用至需要治 療的患者，其中，所述組份在基本上不同的時(shí)間釋放至所述患者，和>當(dāng)此類組份一起配制成單一劑量形式，以控制方式釋放所述組份時(shí)，本發(fā)明化合 物和治療劑的此類組合被依序施用至需要治療的患者，其中，所述患者于相同和/或不同 時(shí)間被同時(shí)、連續(xù)和/或重疊地施用它們，其中每一部份可以以相同或不同途徑施用。可與本發(fā)明化合物，或其可藥用鹽、溶劑化物或組成物混合使用的治療劑的合適 的例子包含下表II中的那些。在可與本發(fā)明化合物共同施用的多數(shù)治療劑中，一種或多種 5-L0抑制劑是本領(lǐng)域已知的。
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表II(a) 5-脂氧合酶活化蛋白(FLAP)拮抗劑；(b)白三烯拮抗劑(LTRA)，包含LTB4、LTC4、LTD4,和LTE4的拮抗劑；(c)組胺受體拮抗劑，包含Hl和H3拮抗劑；(d)解除充血的α i-和α 2_腎上腺素受體激動劑血管收縮劑擬交感神經(jīng)藥劑；(e)毐蕈堿型M3受體拮抗劑或抗膽堿藥劑；(f) PDE抑制劑，例如，PDE3、PDE4和PDE5抑制劑，諸如，茶堿；(g)色甘酸鈉；(h) COX抑制劑，非選擇性和選擇性的C0X-1或C0X-2抑制劑(諸如，NSAID)；(i)糖皮質(zhì)激素或DAGR(皮質(zhì)醇受體的分離性激動劑)；(j)對內(nèi)源性炎性體有活性的單克隆抗體；(k) β 2激動劑，包含長效β 2激動劑；(1)整合素拮抗劑；(m)黏附分子抑制劑，包含VLA-4拮抗劑；(n) Kinin-B1-和 B2-受體拮抗劑；(ο)免疫抑制劑，包含IgE途徑的抑制劑和環(huán)孢菌素；(ρ)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)(例如，ΜΜΡ9和ΜΜΡ12)的抑制劑；(q)速激肽NK1、NK2和NK3受體拮抗劑；(r)蛋白酶抑制劑，例如，彈性蛋白酶；
(s)腺苷A2a受體激動劑和A2b拮抗劑；(t)尿激酶抑制劑；(u)作用于多巴胺受體上的化合物，例如，D2激動劑；(v)NFkB途徑的調(diào)節(jié)劑，例如，KK抑制劑；(w)細(xì)胞因子信號傳送途徑的調(diào)節(jié)劑，諸如，syk激酶、JAK激酶抑制劑、p38激酶、 EGF-R 或 MK-2 ；(χ)試劑，可分類為化痰劑或止咳劑，和祛痰劑；(y)抗生素；(ζ)抗病毒劑；(aa)疫苗；(bb)趨化因子；(cc)上皮組織鈉通道(ENaC)阻斷劑或上皮組織鈉通道(ENaC)抑制劑；(dd) P2Y2激動劑和其它核苷酸受體激動劑；(ee)血栓素抑制劑；(ff)煙酸；(gg) POT2 合成和 POT2 受體的抑制劑(DPI 和 DP2/CRTH2)；(hh)黏附因子，包含 VLAM、ICAM,和 ELAM ；(ii)他汀類和對高膽固醇癥的其它治療；膽固醇和脂吸收的抑制劑(例如，煙堿 酸、煙酸、膽固醇運(yùn)送劑)(jj)利尿劑；
(kk)鈣離子通道阻斷劑。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑 化物，和表II中列出的用于治療5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥的化合物的任一者。依據(jù)本 發(fā)明的另一實(shí)施例，該5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥選自表I中列出的那些。在一種高度優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含化學(xué)式(I)的化合物或其可 藥用鹽或溶劑化物，和糖皮質(zhì)激素或DAGR(糖皮質(zhì)激素受體的分離性激動劑)。糖皮質(zhì)激素 的例子包括但不限于潑尼松、潑尼松龍、氟尼縮松、曲安奈德醋酸鹽、倍氯米松二丙酸鹽、布 地奈德、氟替卡松丙酸鹽、環(huán)索奈德和莫美他松糖酸鹽?？膳c本發(fā)明化合物混合使用的DAGR 化合物的例子包括但不限于于國際專利申請公告第W0/2000/06522和W0/2004/005229號 中所述的那些。在一種高度優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含化學(xué)式(I)的化合物或其可 藥用鹽或溶劑化物，和COX抑制劑(非選擇性或選擇性的C0X-1或C0X-2抑制劑(NSAIDs)， 諸如，異丁苯乙酸或塞來昔布，或其可藥用鹽)。在一種高度優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含化學(xué)式(I)的化合物或其可 藥用鹽或溶劑化物和β 2激動劑。β 2激動劑的例子包括但不限于沙美物羅、福莫特羅、 QAB-149和卡莫特羅。在一種高度優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含化學(xué)式(I)的化合物或其可 藥用鹽或溶劑化物和蕈毒堿Μ3受體拮抗劑或抗膽堿藥劑。Μ3受體拮抗劑的例子包括但不 限于塞托品、異丙阿托品、惡托品、哌侖西平、替歐西平、阿地安和替侖西平。在一種高度優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含化學(xué)式(I)的化合物或其可 藥用鹽或溶劑化物和組胺受體拮抗劑(其例子包含HI、Η3或H4拮抗劑)。在一種不同的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用 鹽或溶劑化物和利尿劑。利尿劑可選自數(shù)種已知種類，諸如，噻嗪類和相關(guān)的磺酰胺類、留 鉀利尿劑、環(huán)部利尿劑和有機(jī)汞利尿劑。噻嗪類的非限制性例子是芐氟噻嗪、芐噻嗪、氯噻 嗪、環(huán)噻嗪、氫氯噻嗪、氫氟鉀噻嗪、甲氯噻嗪、聚噻嗪和三氯甲噻嗪。留鉀利尿劑的非限制 性例子是氨苯蝶啶(triameterene)和阿米洛利。環(huán)部利尿劑(即，于腎臟的Henle環(huán)部的 上升枝上作用的利尿劑)的非限制性例子是托拉塞米、布美他尼、呋苯胺酸和乙炔丙烯酸。 有機(jī)汞利尿劑的非限制性例子是巰汞鈉、乙氧汞林、普魯卡因和汞撒利及茶堿。在一種不同的實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用 鹽或溶劑化物和鈣離子通道阻斷劑。在一種實(shí)施方式中，鈣離子通道阻斷劑選自非洛地平、 氨氯地平、尼非地平、維拉帕米HC1、尼卡地平HC1、地爾硫卓HC1、阿侖地平、阿托西班、巴尼 地平、布洛米地、西尼地平、二十二碳六烯酸、艾芳地平HC1、法蘇地、依斯拉地平、拉西地平、 勒坎地平、洛美秦、美尼地平、尼芬藍(lán)、尼法地平、尼莫地平、泰克忍、維爾寧、普心寧、尼索地 平。尼特藍(lán)地平、米貝拉地爾，和具利地HCl構(gòu)成的組。在另一實(shí)施方式中，鈣離子通道阻斷 劑選自 NS-7、NW-1015、SB-237376、SL-34. 0829-08、特洛地林、R-維拉帕米、必沙拉米、CAI、 環(huán)戊惡草酮、11^-519、3-312(1、30-3212、他莫拉秦、14-993、芬托派洛、￥]\1-430、(冊-1521、艾 果地平、法尼地平、L-651582、惡地平、拉諾秦、AE-0047、阿折地平、達(dá)塔秦、勒米地平、普拉 尼地平、司莫地爾、替米維林HC1、替尼索、維他尼地平HCl和齊考諾肽構(gòu)成的組。下列實(shí)施例闡述了對中間產(chǎn)物和化學(xué)式(I)的化合物的制備。
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制備中間產(chǎn)物14-(3-溴苯基)_四氫-2H-吡喃_4_甲酰胺將通過EP 1081144所述的過程制造的4_(3_溴苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲腈 (1.05公斤，3. 95摩爾)于98% H2SO4 (3. 00L)內(nèi)于室溫?cái)嚢杓s40小時(shí)。然后，將混合物 倒至冰上，過濾極微細(xì)的懸浮液，且以H2O充份清洗至清洗液的pH呈中性為止。以己烷 清洗白色固體，然后，于35-40°C的真空干燥產(chǎn)生1119克(99. 8%產(chǎn)率)的99. 9%純度的 產(chǎn)物。LC/MS 5 % -100 % CH3CN:H20-0. 01 % TFA 梯度，于 10 分鐘期間4. 68min. (M+H)+。 1H NMR (400MHz，DMS0_d6) δ ppm 7. 50-7. 49 (m, 1H)，7. 43-7. 40 (m, 1H)，7. 36-7. 30 (m, 1H)， 7. 27 (d, J = 7. 92Hz, 1H) 7. 06 (s, 1H)，5. 00 (brs, 1H) 3. 71 (dt, J =11.7，3. 7Hz,2H)，3. 42 (t, J = 10. 7Ηζ，2Η)，2· 38 (d, J = 13. 6Hz，2H)，1. 75 (td, J = 12. 2,4. 3Hz，2H)。中間產(chǎn)物24- (3-(三異丙基硅烷基硫基)苯基)_四氫-2H-吡喃_4_甲酰胺選擇1將步驟1制備的4- (3-溴苯基)-四氫-2H-吡喃_4_甲酰胺(300克，1. 06摩爾)、 叔丁氧化鈉(122 克，1.27 摩爾)、Pd (OAc)2 (4. 74 克，0. 0211 摩爾)和 DIPPF(1，1_ 雙(二 異丙基膦基)二茂鐵)(10. 6克，0.0253摩爾)置于經(jīng)抽空且以N2填充三次的燒瓶內(nèi)。添 加無水二惡烷(2. 3L)，于室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)。向此混合物添加三異丙基硅烷硫醇(221 克，1. 16摩爾)，對形成的混合物加熱回流?；亓饔?小時(shí)后停止，將混合物冷卻至室溫。 然后，將混合物倒入乙酸乙酯(7L)，然后，&H20(2X4L)和鹽水(2L)清洗。合并的水性清洗 液萃取回乙酸乙酯(3L)，然后，&H20(2x2L)和鹽水(IL)清洗。合并的有機(jī)層于MgSO4上 干燥，過濾，并濃縮至干燥。添加乙酸乙酯(0.5L)至固體，于旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器上攪拌混合物， 產(chǎn)生微細(xì)懸浮液。然后，添加己烷(1.5L)，且懸浮液靜置1小時(shí)。固體被過濾，以1 1的 乙酸乙酯-己烷(IL)及其后以己烷清洗。形成的棕色固體于真空干燥，產(chǎn)生334克(80% 產(chǎn)率)的99%純度的產(chǎn)物。從過濾物獲得第二部分，如前文所述清洗并干燥，產(chǎn)生另外的 15 克的產(chǎn)物，總產(chǎn)率為 84%。LC/MS 5% -100% CH3CN:H20-0. 01 % TFA 梯度，10 分鐘 9. 35 分鐘。394. 1(M+H) +。1H NMR(400MHz，CDCl3) δ ppm 7. 52-7. 51 (m，1H) 7. 42-7. 39 (m， 1H)，7. 22-7. 21 (m, 2H)，5. 35 (brs, 1H)，5. 13 (brs, 1H) 3. 78-3. 75 (m, 4H) 2. 36-2. 32 (m, 2H)， 2. 06-2. 00 (m, 2H)，1. 27-1. 16 (m, 3H)，1. 05 (d, J = 7. 25Hz, 18H)。選擇2以氮?dú)獯祪?頸燒瓶(塔頂攪拌器，氮?dú)馊肟?，橡膠蓋)。添加步驟1制備的 4-(3-溴苯基)_四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(10克，0. 03519摩爾)。添加叔丁氧化鈉(4. 1 克，0.04223摩爾)。添加無水甲苯。甲苯應(yīng)當(dāng)盡可能干燥，通過KT為< 0.01%的水是足 夠的。啟動攪拌。以4個真空/氮?dú)獯祪糁芷诖祪舴磻?yīng)混合物，每一周期在60托耳的真空 維持30秒。添加硫醇(9. 1克，0. 04223摩爾)，確保氧未被引入容器內(nèi)。加熱至75°C。添 加PdC12( 二苯基-膦基二茂鐵)(0.258克，0.00035摩爾)。持續(xù)加熱回流(反應(yīng)溫度約 107°C )最少持續(xù)1小時(shí)。反應(yīng)應(yīng)在30分鐘內(nèi)達(dá)回流。使反應(yīng)混合物冷卻至25°C。添加乙酸乙酯(300毫升，30毫升/克)，且對形成的 懸浮液攪拌30分鐘。使懸浮液經(jīng)硅藻土(30克)過濾。用乙酸乙酯(100毫升，待沖洗的
47產(chǎn)物)沖洗硅藻土，合并濾液。通過在70托耳、30°C下真空蒸餾來濃縮濾液，直到濾液體積 的80%被移除為止。于5分鐘期間添加用于結(jié)晶的己烷(200毫升，20毫升/克的欲被結(jié)晶 的產(chǎn)物)至漿體。對混合物加以攪拌并冷卻至5°C。使混合物于5°C維持最少1小時(shí)。通 過過濾分離產(chǎn)物。以己烷沖洗濾餅(100毫升，待沖洗的產(chǎn)物)。于濾器上干燥濾餅至LOD 不多于5%。于45-50°C的真空下干燥固體至LOD不多于1.5%。產(chǎn)量12克(85%產(chǎn)率)。 上文指示的任何的毫升/克的量表示相對于溴甲酰胺的克數(shù)。中間產(chǎn)物35-(4-溴苯基)-1-甲基-IH-吡唑選擇1于125°C對4-溴乙酰苯(10. 60克，53. 25毫摩爾)和N，N，-二甲基甲酰胺二甲 基乙縮醛(2.5當(dāng)量)的N，N’ - 二甲基甲酰胺(15毫升)溶液加熱3小時(shí)。將暗紅色溶 液冷卻至室溫。通過旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)移除揮發(fā)物，提供紅色黏稠性的油。向此物質(zhì)添加無水的 N，N’-二甲基甲酰胺(15毫升)和甲基胼(7. 6克，160毫摩爾，3當(dāng)量)?；旌衔镉谑覝?cái)?拌1小時(shí)，然后，于75°C加熱4小時(shí)。通過旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)移除揮發(fā)物，且粗制殘?jiān)患尤胫列?體積的二氯甲烷內(nèi)。此紅色溶液被應(yīng)用至硅膠筒(cartridge)。分別用乙酸乙酯和己烷的 20 80的混合物洗脫此筒。合并適當(dāng)?shù)募壏?，濃縮產(chǎn)生12. 5克的白色固體。IH NMR(400MHz,氯仿-d) δ ppm 3· 87-3. 95 (m，J = 2. 22Hz,3H)6. 29-6. 36 (m, 1H) 7. 31 (dd, J = 8. 36Hz,2H) 7. 52-7. 56 (m, 1H) 7. 62 (dd, J = 2. 05Hz,2H)。選擇24-溴乙酰苯(20. 0克；0. 10摩爾)和N，N- 二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(28. 5毫 升；0. 20摩爾)在DMF(12毫升)內(nèi)混合到一起，且加熱至110°C持續(xù)4小時(shí)。反應(yīng)期間產(chǎn) 生的甲醇和水被蒸餾(6. 2毫升)。將混合物冷卻至25°C。添加甲基叔丁基醚(100毫升) 和甲基胼(21. 2毫升；0. 40摩爾)，混合物被攪拌過夜。以IM水性氯化銨(3x40毫升)和 水(40毫升)清洗反應(yīng)混合物。通過使用Dean-Stark裝置的共沸蒸餾來干燥有機(jī)相。作 為不同于蒸餾的選擇，通過無水硫酸鎂筒干燥溶液。經(jīng)由硅膠筒(60克)過濾溶液。用甲 基叔丁基醚從此筒沖洗產(chǎn)物。含有產(chǎn)物的級分被合并，且通過蒸餾濃縮至約70毫升。添加 庚烷(120毫升)，且蒸餾持續(xù)至釜的溫度達(dá)98. 40C。約100毫升的蒸餾物被收集。將混合 物冷卻至40°C。接種混合物，溫度于40°C維持30分鐘，同時(shí)結(jié)晶化作用起始?；旌衔镉?0 分鐘期間緩慢冷卻至0°C?；旌衔镉?°C維持30分鐘。混合物被過濾，以冷(0°C )庚烷清 洗固體(3x)。于過濾器上干燥固體。獲得乳色結(jié)晶固體(16. 3克；68%產(chǎn)率)。標(biāo)題化合 物的NMR數(shù)據(jù)如選擇1所示。比較例1
48 4-[3-({4-[1-(2-羥基乙基)-IH-吡唑-5-基]苯基}硫基)苯基]四氫_2H_吡 喃-4-甲酰胺^m 1 :4-{3-Γ(4-乙酰某苯某)硫某1苯某)四氡』-2H-吡_ -4-甲酰胺的制各4-氟乙酰苯(3.0克，21. 7毫摩爾)和4-{3_[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(8. 5克，21. 7摩爾)和四乙基銨氫氯酸鹽(6.9克，42毫摩爾)于 氮氛圍下懸浮于無水甲苯(50毫升)內(nèi)。對此混合物，添加THF中的1.0M叔丁氧化鉀(43 毫升，43毫摩爾)。然后，攪拌的混合物加熱至80°C持續(xù)12小時(shí)。將非均質(zhì)的混合物冷卻至 室溫。乙酸乙酯(100毫升1)和1. ONHCl (水性)(43毫升)和水(50毫升)添加至混合物。 層狀物被劇烈混合攪拌1小時(shí)。通過吸濾收集不可溶的產(chǎn)物，以水和乙基醚(4x50毫升) 清洗，于真空下干燥而提供米色固體，其未被進(jìn)一步純化(4. 80克，13. 5毫摩爾，62%)。反 相LCMS M+H = 356. 2，滯留時(shí)間3. 03分鐘，5%至95%的乙腈，4分鐘，具0. 1 % TFA的水性 緩沖液。步驟2 :N-「(1E)-(二甲基氨基)甲撐基 1-4_「3_(|4_「(2E) ( 二甲基氨基) 丙-2-烯?；?苯基丨硫基)苯基1四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將4-{3-[(4_乙酰基苯基)硫基]苯基}四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(3. 5克， 9. 8毫摩爾)添加至無水DMF (3毫升)。接著，添加DMF的二甲基乙縮醛(3. 5克，29毫摩 爾)。然后，溶液于100°C加熱5小時(shí)。通過于減壓時(shí)的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)移除揮發(fā)物，提供暗紅色 油。此油溶于二氯甲烷，且應(yīng)用至硅膠柱。分別以1 1的庚烷/乙酸乙酯的混合物洗 脫此柱。含有產(chǎn)物的級分被合并，并濃縮而提供棕褐色固體(2. 8克，6. 8毫摩爾，69%)。 IH NMR (400MHz，DMS0-d6)d ppm 1. 69-1. 82 (m，2H) 2. 52-2. 59 (m，2H) 2. 85 (s，3H) 2. 91 (s， 3H) 3. 08 (s，3H) 3. 15 (s,3H) 3. 36-3. 47 (m, 2H) 3. 67-3. 83 (m, 2H) 5. 81 (d, J = 12. 29Hz, 1H) 7. 22 (d, J = 8. 19Hz,2H) 7. 25-7. 30 (m, 1H) 7. 34-7. 42 (m, 2H) 7. 44-7. 50 (m, 1H) 7. 72 (d, J =12. 29Hz, 1H)7. 84 (d, J = 8. 53Hz，2H)8. 35 (s, 1H)步驟3:4-「3-({4-「1-(2-羥基乙基)-1!!-吡嗶-5-基1苯基丨硫基)苯基1四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備N-[(IE)-(二甲基氨基)甲撐基]-4-[3-({4-[(2E)-3-( 二甲基氨基)丙_2_烯酰 基]苯基}硫基)苯基]四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(50毫克，0.011毫摩爾)和2-羥基 乙基胼(152毫克，1. 0毫摩爾)于DMF(1毫升)內(nèi)于80°C攪拌12小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻 至室溫，且揮發(fā)性物被蒸發(fā)。將殘?jiān)苡谛◇w積的DMS0，且使用反相HPLC(乙腈/水梯度) 純化。含有純產(chǎn)物的級分被合并，濃縮而提供白色固體(21毫克，45% )。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) d ppm 1. 71-1. 86 (m, 2H) 2. 38(d, J = 13. 18Ηζ，2Η)3· 38-3. 51(m，2H)3. 63-3. 80 (m, 4H)4. 08 (t, J = 5. 86Hz,2H)4. 84 (t, J = 4. 39Hz，1H) 6. 33 (d，J = 1. 46Hz, 1H) 7. 00 (br.s. , 1H)7. 22 (br. s. , 1H)7. 26 (d, J = 7. 32Hz, 1H)7. 32 (d, J = 8. 05Hz,2H)7. 36-7. 41 (m, 2H)7. 45 (s，1H)7. 47-7. 50 (m, 1H) 7. 52(d, J = 8. 05Hz，2H)。HRMS 計(jì)算 M+H -.424. 1695，發(fā)現(xiàn) 424.1661。實(shí)施例1 4-(3-{[3-氯-4-(l-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫_2Η_吡 喃-4-甲酰胺步驟1 :5-(4_溴-2-氯苯基)_1_甲基-IH-吡唑的制備將0.379克的4’ -溴-2’ -氯乙酰苯( 95%純度)放置在氮?dú)庀拢胰苡?. 5 毫升的無水N，N-二甲基甲酰胺中。添加0.80毫升的二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛，混合物 回流30分鐘。然后，用蒸餾頭替換回流冷凝器，混合物蒸餾至蒸餾頭溫度達(dá)150°C為止。將 混合物冷卻至室溫，添加0. 18毫升的甲基胼，混合物回流30分鐘。冷卻反應(yīng)混合物，將其稀 釋于二乙基醚內(nèi)，以5%水性的氯化鈉萃取4次，以硫酸鎂干燥，過濾，于硅膠上進(jìn)行快速色 譜分離，產(chǎn)生 0. 370 克的無色油。LCMS(M+H)271 ；IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 3. 64(s, 3H) 6. 36 (d, J=L 88Hz, 1H) 7. 42 (d, J = 8. 32Hz, 1H) 7. 51 (d, J = 1. 88Hz, 1H) 7. 69 (dd, J = 8. 32，1. 88Hz, 1H) 7. 94 (d, J=L 88Hz, 1H)。步驟2 :4-(3-{T3-氯(1_甲基_1Η_吡唑基)苯基1硫基丨苯基)四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將468. 2毫克的4_{3_[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}四氫-2H-吡喃_4_甲 酰胺、287. 4毫克的5-(4_溴-2-氯苯基)-1_甲基-IH-吡唑、84. 4毫克的四(三苯基 膦)鈀、37. 7毫克的雙[(2-二苯基膦基)苯基]醚、180.0毫克的氟化銫及191. 1毫克 的四乙基氯化銨單水合物置于以隔膜密封的玻璃瓶，抽真空/以氮?dú)馓畛淙?，添? 毫升的無水異丙醇，其后添加1.07毫升的四氫呋喃中的1.0M叔丁氧化鉀。于室溫?cái)嚢?混合物5分鐘，然后，于80°C加熱40分鐘。冷卻反應(yīng)混合物，于乙酸乙酯中稀釋，以5% 的水性碳酸鉀萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，及通過快速色譜純化，產(chǎn)生410. 2毫克的產(chǎn)物。 HRMS (M+H)計(jì)算 428. 1199，發(fā)現(xiàn) 428. 1172 ； IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 1. 73-1. 89 (m, 2H) 2. 42 (d, J = 13. 43Hz,2H) 3. 41-3. 53 (m, 2H) 3. 63 (s, 3H) 3. 67-3. 77 (m, 2H) 6. 33 (d, J = 2. 15Hz, 1H) 7. 07 (s, 1H) 7. 21 (dd, J = 8. 19，2. 01Hz, 1H) 7. 29 (s, 1H) 7. 38 (d, J=L 88Hz, 1H) 7. 39-7. 43 (m, 2H) 7. 45-7. 49 (m, 2H) 7. 49 (d, J=L 88Hz, 1H) 7. 54 (s, 1H)。實(shí)施例2 4- (3- {[3-氰基-4- (1-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺步驟1 :5_溴-2-(l-甲基-IH-吡唑_5_基)苯甲腈的制備5-溴-2-碘苯甲腈(0.30克，1.0毫摩爾)、(1-甲基-IH-吡唑-5-基)硼酸(188 毫克，1.5毫摩爾)、二氯[1，1’ -雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II) 二氯甲烷加成物(26 毫克，0.05毫摩爾)及碳酸銫(651毫克，2. 00毫摩爾)于80°C于3 1 二惡烷/水(5毫 升)的溶劑混合物內(nèi)一起攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，添加水(25毫升)及IN HCl (5毫升)。將產(chǎn)物萃取進(jìn)二氯甲烷中。通過旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)將有機(jī)混合物濃縮至小體積，其 被應(yīng)用至40克的硅膠筒。以70 30的己烷-丙酮的混合物洗脫此筒。含有產(chǎn)物的級分 被合并并濃縮，產(chǎn)生白色固體產(chǎn)物(210毫克，80%)。步驟2 :4-(3-丨「3_氰基-4-(l-甲基_1Η_吡唑基)苯基1硫基丨苯基)四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺的制備于90°C、氮氛圍下，對無水二惡烷(5毫升)中的5-溴-2-(l-甲基-IH-吡 唑-5-基)苯甲腈(160毫克，0.61毫摩爾)、4-{3_[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基} 四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(264毫克，0.67毫摩爾)、四(三苯基膦)鈀(0) (70毫克， 0061毫摩爾)、雙[(2-二苯基膦基)]苯基醚(32. 8毫克，0.061毫摩爾)、四乙基氯化 銨單水合物(251毫克，1. 52毫摩爾)及碳酸銫(497毫克，1. 5毫摩爾)的混合物加熱 4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。添加IN HCl (4毫升)，其后添加水(20毫升)。以 二氯甲烷(3x15毫升)萃取混合物。混合的萃取物被干燥(硫酸鈉)及濃縮，提供粗 制產(chǎn)物混合物。將殘?jiān)苡谛◇w積的二氯甲烷，并應(yīng)用到120克的硅膠管筒上。使用 6 4的二氯甲烷/丙酮的混合物洗脫產(chǎn)物。產(chǎn)物級分被合并及蒸發(fā)，產(chǎn)生淡棕色固體 (70 毫克，27 % )。IH 匪R (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1. 75-1. 91 (m, 2H) 2. 42 (d, J
=13. 54Ηζ，2Η)3· 43-3. 54(m，2H)3. 69-3. 80(m，5H)6. 51 (s，1H)7. 03 (br. s.，1H)7. 26 (br. s.，1H) 7. 39-7. 44 (m, 1H) 7. 46-7. 57 (m, 5H) 7. 58-7. 66 (m, 1H) 7. 77 (s, 1H) ；HRMS 計(jì)算 M+H 419. 1542，發(fā)現(xiàn) 419. 1534。實(shí)施例3-9的化合物是使用比較例1所述的方法使用適當(dāng)?shù)碾萜鹗疾牧现圃斓?。?shí)施例3
4-(3-{[4-(1-環(huán)戊基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲 酰胺IH NMR (400 MHz, DMSOd6) δ ppm 1. 47-1. 63 (m，2H) 1. 73-1. 88 (m，
4H) 1. 89-2. 04 (m, 4H) 2. 40 (d, J = 13. 54Hz, 2H) 3. 47 (s, 2H) 3. 72 (d, J = 11. 35Hz, 2H)4. 67 (t, J = 7. 14Hz, 1H)6. 30 (d, J = 1. 46Hz, 1H) 7. 02 (br. s. , 1H) 7. 24 (br. s., 1H) 7. 30 (d, J = 6. 59Hz, 1H) 7. 34-7. 44 (m, 6H) 7. 50 (d，J = 1. 46Hz, 1H) 7. 47 (s, 1H) ；HRMS 計(jì) 算 M+H 448. 2059,發(fā)現(xiàn)448. 2028。實(shí)施例4 4-(3-{[4-(1-環(huán)庚基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲 酰胺IH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1. 38 (br. s. , 2Η) 1. 53 (br. s.， 5H) 1. 71 (br. s.，1H) 1. 77 (d, J = 4. 03Hz, 1H) 1. 80 (br. s.，1H) 1. 86 (d, J = 19. 40Hz, 1H) 1. 85 (d, J = 7. 69Hz, 1H) 2. 00 (t, J = 10. 25Hz,2H) 2. 00 (d, J = 19. 76Hz, 1H) 2. 40 (d, J = 13. 54Hz, 2H) 3. 47 (s, 1H) 3. 72 (d, J = 11. 71Hz,2H)4. 31 (d, J = 4. 76Hz，1H) 6. 28 (d， J = 1. 46Hz, 1H) 7. 02 (br. s. , 1H) 7. 24 (br. s. , 1H) 7. 30 (d, J = 6. 59Hz，1H) 7. 35-7. 44 (m， 6H) 7. 48 (d, J = 8. 42Hz,2H) ；HRMS 計(jì)算 M+H :476. 2372，發(fā)現(xiàn)476. 2369。實(shí)施例5 4-(3-{[4-(1-環(huán)己基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲
酰胺IH NMR (400MHz，DMS0-d6) δ ppm 1. 07-1. 35 (m,4H) 1. 59(d, J = 11. 71Hz, 2H) 1. 68-1. 95(m,6H)2. 38 (d, J = 13. 36Hz，2H) 3. 45 (t，J = 10. 70Hz，2H) 3. 70 (d，J = 11. 71Hz,2H) 3. 94-4. 18 (m, 1H) 6. 26 (s, 1H) 7. 00 (br. S.，1H) 7. 21 (br. S.，1H) 7. 25-7. 51 (m, 9H) ；HRMS 計(jì)算 M+H 462. 2215，發(fā)現(xiàn)462. 2215。實(shí)施例6 4-[3-({4-[1_(環(huán)丙基甲基)-IH-吡唑-5-基]苯基}硫基)苯基]四氫_2H_吡 喃-4-甲酰胺IH 匪R (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm ο. 14 (q, J = 4. 88Ηζ，2Η)0· 39 (d, J =
6. 59Hz，2H) 1. 08 (br. s.，1H) 1. 73-1. 84(m，2H)2. 40 (d, J = 13. 54Ηζ，2Η)3· 47 (br. s.， 2Η)3· 72 (d, J=Il. 35Ηζ，2Η)4· OO (d, J = 6. 95Ηζ，2Η)6· 36 (d, J=L 46Hz, 1Η) 7. 02 (br. s.，1Η) 7. 23 (br. s.，1Η) 7. 28 (d, J = 6. 59Hz, 1Η) 7. 32-7. 41 (m, 4Η) 7. 43-7. 49 (m, 3Η) 7. 71-7. 86 (m, 1Η) ；HRMS 計(jì)算 Μ+Η :434· 1902，發(fā)現(xiàn):434· 1908。實(shí)施例7 4-[3-({4-[1-(環(huán)戊基甲基)-IH-吡唑-5-基]苯基}硫基)苯基]四氫_2Η_吡 喃-4-甲酰胺IH NMR(400MHz，DMS0-d6) δ ppm 1. 01-1. 11 (m, 1H) 1. 06(d, J = 5. 86Hz, 1H) 1. 39-1. 50(m，6H) 1. 74-1. 84(m，1H) 1. 79(t，J = 10. 25Hz，2H) 2. 26 (d，J = 7. 32Hz, 1H)2. 40 (d, J = 13. 54Hz，2H)3. 43-3. 51(m，lH)3. 71(d，J = 11. 71Hz，2H) 4. 04 (d，J = 7. 32Hz,2H) 6. 34 (d, J=L 46Hz, 1H) 7. 02 (br. s.，1H) 7. 23 (br. s.，1H) 7. 27 (d, J = 6. 22Hz, 1H)7. 35-7. 41(m，4H)7. 48 (d, J=L 83Hz, 1H) 7. 45 (d, J = 8. 42Hz，3H)。HRMS 計(jì)算 M+H 462. 2215，發(fā)現(xiàn)462. 2208。實(shí)施例8 IH WR(400MHz，DMS0-d6)々ppm 1. 27 (t, J = 7. 14Hz, 3H) 1. 68-1. 86 (m, 2H) 2. 38 (d, J = 13.72Ηζ，2Η)3· 45 (t, J = 10. 52Ηζ，2Η)3· 70 (d, J = 11. 71Ηζ，2Η)4· 09 (q, J = 7. 01Hz, 2Η)7· 00 (br. s.，1Η) 7. 12-7. 52 (m, 11Η) ；HRMS 計(jì)算 Μ+Η :408· 1746，發(fā)現(xiàn):408· 1847。實(shí)施例9 4-(3-{[4-(1-異丙基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫_2Η_吡喃_4_甲 酰胺IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 34(d, J = 6. 59Hz,6H) 1. 78(t, J = 10. 16Hz，2H)2. 38(d，J = 13. 17Hz，2H) 3. 45 (t，J = 10. 70Hz，2H) 3. 70 (d，J = 11. 89Hz, 2H)4. 39-4. 55 (m, 1H) 7. 00 (br. s.，1H) 7. 16-7. 53 (m, 11H) ；HRMS 計(jì)算 Μ+Η :422· 1902，發(fā)現(xiàn) 422. 2011。實(shí)施例10 N-甲基-4-(3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫_2Η_ 口比 喃-4-甲酰胺于無水THF (10毫升)中懸浮4-(3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基} 苯基)四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(100毫克，0.25毫摩爾)。向此混合物中添加氫化鈉(于 礦物油中的50%分散液，25毫克)。于室溫?cái)嚢杌旌衔?0分鐘，然后，添加碘甲烷(0.14 克，1.0毫摩爾)。然后，于環(huán)境溫度攪拌混合物過夜。然后，將水(2毫升)緩慢添加至反應(yīng) 混合物。通過添加IN HC1，將ρΗ調(diào)整至約5。產(chǎn)物被萃取進(jìn)二氯甲烷內(nèi)，使用快速柱色譜
54以97 3的二氯甲烷-甲醇的移動相，來純化產(chǎn)物。含有產(chǎn)物的級分被合并并濃縮，提供 N-甲基-4- (3- {[4- (1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲
酰胺，其呈白色固體(82 毫克，79%)。IH NMR (400 MHz, DMSO-d6) gppml. 78-1. 89 (m,
2H) 2. 38 (d, J = 13. 54Hz,2H) 3. 38-3. 50 (m, 2H) 3. 66-3. 75 (m, 2H) 3. 84 (s,3H) 6. 41 (d, J =1. 83Hz, 1H) 7. 24-7. 31 (m, 1H) 7. 32-7. 43 (m, 5H) 7. 46 (d, J = 1. 83Hz, 1H) 7. 52 (d, J = 8. 42Hz,2H) 7. 58-7. 66 (m, 1H) ；HRMS 計(jì)算 M+H :408· 1746，發(fā)現(xiàn) 408. 1815。實(shí)施例11 4-(3-{[5-氯-6-(1-甲基-IH-吡唑_5_基)吡啶_3_基]硫基}苯基)四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺步驟1 :5_溴-3-氯-2-碘吡啶的制備將1. 11克的5-溴-2，3-二氯吡啶于氮?dú)庀轮糜诟稍锊ＡЧ軆?nèi)，并溶于12毫升的 無水1，2_ 二氯乙烷。添加0.862毫升的碘三甲基硅烷，將溶液于80°C加熱3天。反應(yīng)被冷 卻，稀釋進(jìn)乙酸乙酯內(nèi)，以飽和碳酸鉀水溶液萃取，以水性的 0. 5%偏亞硫酸氫鈉萃取，以 硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，并通過反相色譜純化。產(chǎn)物級分被合并，濃縮移除大部份的乙腈， 以乙酸乙酯及10%水性碳酸鉀稀釋，萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，并粗略地真空干燥 產(chǎn)生 0. 439 克的產(chǎn)物。GCMS (M) 317 ；1H NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 8. 36 (d, J = 2. 15Hz, 1Η)8· 52 (d, J = 2. 15Hz, 1H)。步驟2 5~溴-3-氯-2-(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)吡啶的制備將102. 7毫克的5-溴_2，3_ 二氯吡啶、52. 8毫克的1_甲基吡唑_5_硼酸及24. 9 毫克的1，1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵鈀二氯化物二氯甲烷加成物置于以隔膜密封的 玻璃瓶內(nèi)，抽真空/氮?dú)馓畛淙?。添?. 00毫升的無水二惡烷及0. 630的氮?dú)怙柡?Μ 碳酸銫水溶液，將混合物于80°C加熱20分鐘。反應(yīng)被冷卻，添加43. 2毫克的1-甲基吡 唑-5-硼酸，之后另外加熱15分鐘。反應(yīng)被冷卻，稀釋于乙酸乙酯內(nèi)，以水萃取，以硫酸 鎂干燥，過濾，進(jìn)行快速色譜分離，產(chǎn)生50. 2毫克的產(chǎn)物。LCMS(MiH)ZT51H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 3. 79-3. 88 (m, 3H) 6. 68 (d, J=L 88Hz, 1H) 7. 54 (d, J=L 88Hz, 1H) 8. 53 (d, J=L 88Hz, 1H)8. 83 (d, J = 2. 15Hz, 1H)。步驟3 4~ (3- {Γ5-氯(1_甲基_1Η_吡唑基)吡啶基1硫基丨苯基) 四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將90. 6毫克的4-{3-[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}四氫_2H_吡喃_4_甲酰 胺、48. 4毫克的5-溴-3-氯-2-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)吡啶、14.0毫克的四(三苯基 膦基)鈀、6. 7毫克的雙[(2-二苯基膦基)苯基]醚、35. 4毫克的氟化銫及34. 5毫克的四 乙基氯化銨單水合物置于以隔膜密封的玻璃瓶內(nèi)，抽真空/以氮?dú)馓畛淙?。添?毫升 的無水異丙醇，其后，添加0. 180毫升的四氫呋喃中的1. OM叔丁氧化鉀。混合物于室溫?cái)嚢?分鐘，然后，于80°C加熱30分鐘。反應(yīng)混合物被冷卻，稀釋于乙酸乙酯內(nèi)，以5%水性 碳酸鉀萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，并通過反相色譜純化。產(chǎn)物級分被稀釋進(jìn)乙酸乙酯 內(nèi)，以5%水性碳酸氫鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，真空干燥產(chǎn)生66. 5毫克的產(chǎn)物。 HRMS (M+H)計(jì)算 429. 1152，發(fā)現(xiàn) 429. 1132 ；1H NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 1. 76-1. 88 (m, 2H) 2. 42 (d, J = 13. 96Hz,2H) 3. 43-3. 51 (m, 2H) 3. 68-3. 77 (m, 2H) 3. 83 (s,3H) 6. 65 (d, J =1. 88Hz, 1H) 7. 08 (s, 1H) 7. 28 (s, 1H) 7. 40-7. 50 (m, 3H) 7. 53 (d, J = 2. 15Hz, 1H) 7. 57 (s, 1H)7. 87 (d, J = 2. 15Hz, 1H)8. 46 (d, J = 2. 15Hz, 1H)。實(shí)施例12 4-(3-{[2-氟-4-(l-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫_2Η_吡 喃-4-甲酰胺^M 1 :4-{3-Γ(4-乙酰某_2_氟龍某)硫某1苯某1四氫_2Η_吡_ ~4~甲M安 的制備3，4-二氟乙酰苯(0. 234克，1.50毫摩爾)、4_ {3-[(三異丙基硅烷基)硫基]苯 基}四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(0. 590克，1. 50毫摩爾)、四丁基銨氟化物(0. 66克，2. 54毫 摩爾)及叔丁氧化鉀(1. 0Μ, THF內(nèi)，2. 0毫升，2. 0毫摩爾)添加至無水甲苯(10毫升)。混 合物加溫至90°C，且攪拌4小時(shí)。冷卻至室溫后，添加乙酸乙酯(100毫升)及1. ON HCl (6 毫升)。然后，攪拌混合物30分鐘，通過吸濾收集米色沉淀物。粗制產(chǎn)物于硅膠上使用二 氯甲烷及丙酮的70 30混合物進(jìn)一步純化。產(chǎn)物是淡棕色固體，重量為0.36克(64%)。 LC/MS 5% -100% CH3CN:H20 梯度，于 4. 5 分鐘3. 1 分鐘，374. 2 (M+H)。步驟2:4-「3-({4-「(2鍆-3-(二甲基氨基)丙烯酰基1 氟苯基丨硫基)苯 基1四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將4-{3_[ (4-乙?；?3-氟苯基)硫基]苯基}四氫-2H-吡喃_4_甲酰胺(600 毫克，1.60毫摩爾)添加至無水DMF (5毫升)。然后，添加DMF的二甲基乙縮醛(1. 03克， 8. 7毫摩爾)，于10(TC對溶液加熱4小時(shí)。減壓蒸發(fā)揮發(fā)性物質(zhì)，提供橙色殘?jiān)腆w，其不 經(jīng)另外純化即用于下步驟。步驟3 :4-(3-丨「2_氟_4-(1_甲基-IH-吡唑基)苯基1硫基丨苯基)四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將4-[3-({4-[(2E)-3_( 二甲基氨基)丙_2_烯?；鵠_2_氟苯基}硫基)苯 基]四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(52毫克，0. 121毫摩爾)溶于無水DMF(5毫升)。將此溶 液冷卻至0°C，添加甲基胼(2毫升)。于0°C對溶液攪拌1小時(shí)，然后，于室溫?cái)嚢?0小 時(shí)。通過旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)移除揮發(fā)性物質(zhì)。將黏稠油性殘?jiān)苡谛◇w積的二氯甲烷，并應(yīng)用 至硅膠筒。使用7 3比例的二氯甲烷及丙酮至2 8比例的二氯甲烷及丙酮的梯度洗 脫此筒。含有產(chǎn)物的級分被合并并濃縮，提供產(chǎn)物，其呈白色固體(15毫克，30%)。IH匪R (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1. 80 (t, J = 10. 06Hz,2H)2. 40 (d, J = 12. 44Hz,
2H)3. 42-3. 52 (m,2H)3. 72 (d, J = 11. 71Hz,2H)3. 88(s,3H)6. 49 (s，1H) 7. 02 (br. s.， 1H) 7. 20-7. 29 (m, 2H) 7. 34-7. 43 (m, 4H) 7. 46 (d, J = 9. 52Hz,2H) 7. 54 (d, J = 10. 98Hz, 1H)； HRMS 計(jì)算 M+H :412. 1495，發(fā)現(xiàn) 412. 1454。實(shí)施例13 4-(3-{[2-氯-4-(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫_2Η_吡 喃-4-甲酰胺^M 1 :4-{3-Γ(4-、遼_2_氯,苯某)硫某1苯某1四氡』_2Η_吡_ ~4~甲酰胺的制將1. 15克的4-{3-[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}四氫-2Η-吡喃_4_甲酰 胺、1.016克的4-溴-2-氯碘苯、0.206克的四(三苯基膦)鈀、0.0916克的雙[(2-二苯 基膦基)苯基]醚、0. 525克的氟化銫及0. 631克的四乙基氯化銨單水合物置于燒瓶內(nèi)， 抽真空/以氮?dú)馓畛淙?。添?2毫升的無水異丙醇，其后添加3. 50毫升的四氫呋喃 中的1. OM叔丁氧化鉀。對反應(yīng)混合物回流加熱30分鐘，冷卻，濃縮，于硅膠上進(jìn)行快速 色譜，產(chǎn)生 0. 98 克的產(chǎn)物。HRMS(Μ+Η)計(jì)算 425. 9930，發(fā)現(xiàn) 425. 9923 ；IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 79(ddd, J = 13. 96,10. 47,4. 03Hz, 2H) 2. 41 (d, J = 13. 70Hz,2H)3. 46 (t, J = 10. 88Hz,2H) 3. 68-3. 77 (m, 2H) 6. 82 (d, J = 8. 59Hz, 1H) 7. 08 (br. s.，1H) 7. 28 (br. s.， 1H) 7. 30-7. 34 (m, 1H) 7. 43-7. 51 (m, 4H) 7. 83 (d, J = 2. 15Hz, 1H)。步驟2 :4-(3-{T2-氯_4-(l_甲基_1Η_吡唑基)苯基1硫基丨苯基)四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將117. 5毫克的4-{3_[ (4-溴_2_氯苯基)硫基]苯基}四氫-2H-吡喃_4_甲酰 胺、130. 1克的(1-甲基-IH-吡唑-5-基)硼酸及38. 1毫克的1，1 ‘-雙(二苯基膦基) 二茂鐵鈀二氯化物二氯甲烷加成物置于玻璃瓶內(nèi)，抽真空/以氮?dú)馓畛淙?。添?毫升 的無水二惡烷及0. 55毫升的2M水性碳酸銫，于70°C對混合物加熱30分鐘，冷卻，將二惡 烷相稀釋進(jìn)乙酸乙酯內(nèi)，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，通過反相色譜純化產(chǎn)生71. 9毫克的產(chǎn) 物。HRMS (M+H)計(jì)算 428. 1199，發(fā)現(xiàn) 428. 1133 ； IH NMR (400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1.82(ddd，J =13. 70，10. 47,3. 76Ηζ，2Η)2· 43 (d, J = 13. 96Ηζ，2Η)3· 47 (t, J = 10. 20Ηζ，2Η)3· 73(dt, J =11. 75，3. 52Ηζ,2Η) 3. 85 (s, 3Η) 6. 46 (d, J=L 88Hz, 1Η) 6. 92 (d, J = 8. 32Hz, 1Η) 7. 09 (br. s.，1Η) 7. 30 (br. s.，1Η) 7. 37-7. 48 (m, 3Η) 7. 50 (d, J = 5. 10Hz，2Η) 7. 55 (s, 1Η) 7. 72 (d, J = 1. 88Hz, 1Η)。實(shí)施例14
57 4- (3- {[3-甲基-4- (1-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺步驟1 :5-(4_溴-2-甲基苯基)-1_甲基-IH-吡唑的制備將0. 1克的1-溴-4-碘-5-甲基苯、0. 043克的1_甲基-IH-吡唑_5_基硼酸及 0.045克的1，1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)置于以隔膜密封的玻璃瓶，抽 真空/以氮?dú)馓畛淙?。然后，添?毫升的1，4_ 二惡烷，其后，添加0.5毫升的IM碳酸 銫。于室溫對混合物攪拌30分鐘，于70°C加熱4小時(shí)。反應(yīng)混合物被冷卻，以水稀釋，以乙 酸乙酯萃取。以硫酸鈉干燥乙酸乙酯，過濾，濃縮，通過反相HPLC純化殘?jiān)?，產(chǎn)生0. 05克產(chǎn) 物。LCMS(Μ+Η) :252ο步驟2 4~ (3- {「3-甲基(1_甲基-IH-吡唑基)苯基1硫基丨-苯基)四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺的制備將0. 157克的4-{3_[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}四氫-2Η-吡喃_4_甲酰 胺、0. 068克的四乙基氯化銨、0. 01克的氧二 -2，1-苯撐基雙_( 二苯基膦)、0. 024克的鈀 (0)四-(三苯基膦)、0. 1克的5-(4-溴-2-甲基苯基)-1-甲基-IH-吡唑及0.065克的 氟化銫置于反應(yīng)燒瓶內(nèi)，抽真空及以氮?dú)馓畛淙巍Ｌ砑?毫升的經(jīng)氮?dú)獯祪舻漠惐?，?后，添加0.6毫升的四氫呋喃中的1.0Μ叔丁氧化鉀。然后，混合物回流2小時(shí)。冷卻后，以 水稀釋反應(yīng)混合物，以乙酸乙酯萃取。以硫酸鈉干燥乙酸乙酯萃取物，過濾，濃縮，通過反相 色譜純化，產(chǎn)生 0. 082 克的產(chǎn)物。HRMS (Μ+Η)計(jì)算 408. 1746，發(fā)現(xiàn) 408. 1743 ； lHNMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 74 (s, 3H) 2. 09 (s, 2H) 3. 17 (s, 3H) 3. 38 (s, 2H) 3. 47 (s, 2H) 3. 59 (s, 2H)3. 70(s，2H)6. 26 (s, 1H) 7. 02 (s, 1H) 7. 22 (s, 1H) 7. 26 (d, J = 15. 74Hz，2H)7. 37-7. 48 (m, 3H)7. 62 (s，1H)。實(shí)施例15 4-(3-氟-5-{[4-(l-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫_2H_吡 喃-4-甲酰胺^M 1 4-(3,5- 二氟龍某)四氫-2H-吡_ ~4~甲酰胺的制各將4-(3，5_ 二氟苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲腈(依據(jù) Synthesis (2004)，16， 2625-2628的過程制備)(10克)與100毫升的冰冷硫酸緩慢混合。于145°C對形成的混合 物加熱2小時(shí)。冷卻至室溫后，混合物被倒至冰上，以5N NaOH調(diào)整pH至10。通過過濾分 離固體，以水及己烷沖洗產(chǎn)生2. 2克的產(chǎn)物。LC/MS(M+H) 242 ；IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 79(ddd, J = 13. 83，10. 61，3. 76Hz，2H) 2. 39 (d，J = 13. 16Hz，2H) 3. 41-3. 50 (m， 2 :1-甲某-5-{4-「(三異丙某硅烷某)硫某1苯某丨-IH-吡卩半的制各將5-(4_溴苯基)-1_甲基-IH-吡唑(7. 84克)、叔丁氧化鈉(3.81克)、1， 1’ _雙(二-異丙基膦基)二茂鐵(332毫克)及乙酸鈀(148毫克)放置于氮?dú)庀?，與 60毫升的無水1，4_ 二惡烷混合。形成的混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)，之后添加三異丙基 硅烷硫醇(7.81毫升)，其后回流加熱1小時(shí)。冷卻至室溫后，以乙酸乙酯稀釋混合物， 以水清洗兩次，并以5%水性氯化鈉清洗一次。于硫酸鈉上干燥有機(jī)層，過濾，濃縮，通過 硅膠上的快速色譜純化，產(chǎn)生標(biāo)題化合物。LCMS(M+H) 347 ；IH匪R(400MHz，DMS0_d6) δ. ppm 0. 85-0. 96 (m, 3H) 0. 96-1. 02 (m, 18Η)3· 84(s，3H)7. 40 (s, 1Η)7· 46 (s, 1Η)7· 58 (d, J = 8. 32Ηζ，2Η)7. 63-7. 71(m，2H)。步驟3 :4-(3_氟-5-{Τ4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基1硫基丨苯基)四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺的制備將1-甲基-5-{4-[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}-IH-吡唑(100毫克)放置 于氮?dú)庀?，溶?. 5毫升的無水1-甲基-2-吡咯烷酮。添加水(5. 2uL)，對溶液攪拌40 分鐘。添加四氫呋喃中的1. OM叔丁氧化鉀(0.29毫升)，溶液被攪拌15分鐘。于另一玻 璃瓶內(nèi)，將4-(3，5_ 二氟苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(70毫克)溶于1毫升的無水 1-甲基-2-吡咯烷酮，并添加至主要反應(yīng)混合物中。于135°C對形成的溶液加熱40小時(shí)， 然后，通過反相色譜純化，產(chǎn)生產(chǎn)物(27毫克)。HRMS (M+H)計(jì)算412. 1495，發(fā)現(xiàn)412. 1550 ； IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 1. 72-1. 83 (m, 2H) 2. 37 (d, J= 12. 89Hz,2H)3. 39-3. 49 (m, 2H)3. 72 (dt, J = 11. 55，3. 63Hz，2H)3. 87(s，3H)6. 45(d，J = 1. 88Hz, 1H) 7. 03 (dt, J = 8. 86，1. 88Hz, 1H) 7. 11-7. 17(m，2H)7. 23 (t, J=L 61Hz, 1H) 7. 31 (s, 1H) 7. 44-7. 49 (m, J = 8. 59，2. 01，2. 01Hz，3H)7. 58(ddd, J = 8. 46，2. 15，2. 01Hz，2H)。實(shí)施例164-(3-{[2-氯-4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)_N_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺將80毫克的實(shí)施例13的化合物及10毫升的無水四氫呋喃置于烘干的玻璃瓶內(nèi)。 添加30毫克的氫化鈉(于礦物油中的60%分散液)，于室溫對混合物攪拌30分鐘。添加 0. 035毫升的碘甲烷，于室溫對混合物攪拌2小時(shí)。添加0. 042毫升的冰乙酸，以乙酸乙酯 稀釋反應(yīng)，以水及5%氯化鈉萃取，于硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮，并通過反相色譜純化。產(chǎn) 物級分被稀釋進(jìn)乙酸乙酯，以5%水性碳酸氫鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，真空干燥， 產(chǎn)生 41 毫克的產(chǎn)物。HRMS (M+H)計(jì)算 442. 1356，發(fā)現(xiàn) 442. 1472 ；lHNMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 1. 80-1. 90 (m, 2H) 2. 40 (d, J = 13. 70Hz,2H)2. 54 (d, J = 4. 30Hz,3H)3. 43 (t, J =
、‘N、
5910. 20Ηζ，2Η)3· 71 (dt, J = 11. 88，3· 73Ηζ，2Η)3· 85(s，3H)6. 46 (d, J = 2. 15Ηζ, 1Η)6· 93 (d, J = 8. 32Hz, 1H)7. 38(ddd, J = 7. 12，1. 75，1. 61Hz，1H) 7. 43 (dd，J = 8. 32,1. 88Hz, 1H)7. 45-7. 52 (m, 4H) 7. 68 (q, J = 4. 39Hz, 1H) 7. 72 (d, J=L 88Hz, 1H)。實(shí)施例17 4-(2-氟-3-{[4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)_N_甲基-四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺步驟1 (3-溴-2-氟苯基)甲醇的制備將5. 0克的3-溴-2-氟苯甲酸及40毫升的無水四氫呋喃于氮?dú)庀轮糜诤娓傻臒?瓶內(nèi)，并冷卻至0°c。自添加漏斗添加34. 2毫升的IM硼烷-四氫呋喃復(fù)合物，且混合物于 室溫?cái)嚢柽^夜。添加5毫升的水，且反應(yīng)被濃縮，以二乙基醚稀釋，且以飽和碳酸鉀、水，及 5%氯化鈉萃取，并在硫酸鈉上干燥。溶液被過濾，濃縮，及通過硅石上進(jìn)行的快速色譜純 化。產(chǎn)物級分被濃縮及真空干燥產(chǎn)生4. 26克。GCMS (M) 204 ； IH NMR (400MHz, DMS0-d6) δ ppm 4. 57 (d, J = 5. 91Hz,2H) 5. 39 (t, J = 5. 77Hz, 1H) 7. 15 (t, J = 8. 06Hz, 1H) 7. 44-7. 50 (m, 1H)7. 55-7. 61(m，lH)。2 1-、遼-3-(氯甲某)-2-氟苯的制各將4. 26克的(3-溴-2-氟苯基)甲醇及70毫升的無水二氯甲烷于氮?dú)庀轮糜诤?干的燒瓶內(nèi)。添加1.64毫升的亞硫酰氯，混合物于室溫?cái)嚢柽^夜，以二乙基醚稀釋。添加 50毫升的飽和碳酸鉀，對相加以分離。有機(jī)層以水萃取兩次，再以5%氯化鈉萃取一次，于 硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮，且通過于硅石上進(jìn)行的快速色譜純化。產(chǎn)物級分被濃縮并真空 干燥，產(chǎn)生 2. 72 克的產(chǎn)物。IH NMR(400MHz，DMS0-d6) δ ppm 5. ll(ddd, J = 16. 45，12. 15， 0. 94Ηζ，2Η)7· 16-7. 22 (m, 1Η)7· 44-7. 50 (m, 1Η) 7. 73(ddd, J = 8. 19，6. 85，1. 61Hz, 1Η)。步驟3 (3-溴-2-氟苯基)乙腈的制備將2.7克的1-溴_3-(氯甲基)-2_氟苯、0.83克的氰化鉀及25毫升的無水二甲基 亞砜于氮?dú)庀轮糜诤娓傻臒績?nèi)，且于室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)被稀釋進(jìn)乙酸乙酯內(nèi)，以5% 氯化鈉萃取四次，于硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮，及通過于硅石上進(jìn)行的快速色譜純化。產(chǎn)物 級分被濃縮及真空干燥，產(chǎn)生1. 17克的產(chǎn)物。GCMS (M) 213 ； IH NMR (400MHz，DMS0_d6) δ ppm 4. 14(s,2H)7. 21 (td, J = 7. 85，0. 94Hz，1H) 7. 45-7. 51 (m，J = 7. 32，7. 32，0. 94，0. 81Hz， 1H)7. 71(ddd, J = 8. 12，6. 65，1. 61Hz，1H)。越4 :4-(3-M -2-氟龍某)四氫_2H_吡_ 土甲腈的制各將1. 17克的(3-溴-2-氟苯基)乙腈及15毫升的無水DMSO于氮?dú)庀轮糜诤娓傻?燒瓶內(nèi)。添加459毫克的氫化鈉(于油中的60%分散液)，且于室溫對混合物攪拌1小時(shí)。 添加以2毫升無水DMSO溶解的0. 86克的2-氯乙基醚，于室溫對混合物攪拌過夜。添加0. 65 毫升的冰乙酸，且反應(yīng)被稀釋進(jìn)乙酸乙酯內(nèi)，以水及5%氯化鈉萃取，于硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮，且通過于硅石上進(jìn)行的快速色譜純化。產(chǎn)物級分被濃縮及真空干燥，產(chǎn)生730毫 克的產(chǎn)物。GCMS (M) 283 ；IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 2. 04-2. 15 (m，2H) 2. 17-2. 25 (m， 2H)3. 69 (td, J = 12. 08，1. 88Hz，2H)4. 01 (dd, J = 11. 95，2. 82Hz，2H)7. 27 (td, J = 7. 92， 1. 07Hz, 1H)7. 47-7. 55 (m, 1H) 7. 80(ddd, J = 8. 12，6. 65，1. 61Hz, 1H)。5 4-(3-、遼-2-氟龍某)四氫_2H_吡_ ~4~甲酰胺的制各將705毫克的4-(3_溴_2_氟苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲腈及418毫克的研 磨氫氧化鉀被置于烘干的玻璃瓶內(nèi)，抽真空/以氮?dú)馓畛淙?。添?毫升的叔丁基醇， 于80°C對混合物加熱二小時(shí)。反應(yīng)被冷卻，以乙酸乙酯稀釋，以水萃取兩次，再以5%氯化 鈉萃取一次，于硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮，通過反相色譜純化。產(chǎn)物級分被稀釋進(jìn)乙酸乙 酯內(nèi)，以5%水性碳酸氫鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，真空干燥，產(chǎn)生593毫克的產(chǎn) 物。LCMS (M+H) 302. IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 1. 93(ddd, J = 13. 56,7. 79,5. 77Hz, 2H) 2. 32 (d, J = 13. 70Hz,2H) 3. 59-3. 70 (m, 4H) 7. 01 (br. s.，1H) 7. 07 (br. s.，1H) 7. 17 (td, J =7. 92，0. 81Hz, 1H) 7. 45 (td, J = 7. 65,1. 61Hz, 1H) 7. 62 (ddd, J = 8. 06,6. 44，1. 61Hz, 1H)。步驟6 :4-(l~甲基-IH-吡唑_5_基)苯硫醇的制備于以氬氣填充的套袋內(nèi)，將3. 41克的叔丁氧化鈉置于烘干的燒瓶內(nèi)。添加7. 03克 的5- (4-溴苯基)-1-甲基-IH-吡唑、0. 328克的乙酸鈀及0. 7720克的1，1'-雙(二-異 丙基膦基)-二茂鐵，混合物被抽真空/以氮?dú)馓畛淙巍Ｌ砑?0毫升的無水1,4-二惡 烷，其后添加7. 00毫升的三異丙基硅烷硫醇?；亓骷訜?0分鐘后，反應(yīng)混合物被冷卻，然 后，于氮?dú)庀绿砑?0毫升的2. 5N水性氫氧化鈉及15毫升的DMS0。反應(yīng)于室溫劇烈攪拌 40分鐘，然后，稀釋進(jìn)醚內(nèi)。添加含有 5毫升濃氫氯酸的125毫升的5%水性氯化鈉，使 水相的PH調(diào)整至4，對混合物進(jìn)行萃取，分離，再次以醚萃取水相，混合醚萃取物，以硫酸鎂 干燥，過濾并濃縮，產(chǎn)生暗色液體。粗制產(chǎn)物被稀釋于醚內(nèi)，以100毫升的多份的0. 5N水性 氫氧化鈉萃取兩次(棄置醚)，使水性萃取物混合，以醚萃取水溶液(棄置醚)，以濃氫氯 酸小心調(diào)整pH至3，以醚萃取三次，使醚萃取物混合，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，于硅膠上 進(jìn)行快速色譜產(chǎn)生 4. 4600 克的產(chǎn)物。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 3· 83 (s，3H) 5· 65 (s， 1Η)6· 36 (d, J=L 95Hz, 1H) 7. 40(s，4H)7. 44 (d, J=L 95Hz, 1H)。步驟7 :4-(2_氟-3-{T4-(l-甲基_1Η_吡嗶基)苯基1硫基丨-苯基)四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將277毫克的4-(1-甲基-IH-吡唑_5_基)苯硫醇、400毫克的4_(3_溴_2_氟 苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺、35. 1毫克的雙[(2- 二苯基膦基)苯基]醚、77. 9毫克 的四(三苯基膦)鈀(0)置于烘干的玻璃瓶內(nèi)，抽真空/以氮?dú)馓畛淙?。添?5毫升無 水1，4- 二惡烷及3. 97毫升2M碳酸銫，對混合物于80°C加熱過夜?；旌衔锉焕鋮s，濃縮，且 通過反相色譜純化。將產(chǎn)物級分稀釋于乙酸乙酯內(nèi)，以5%水性碳酸氫鈉萃取，以硫酸鎂干 燥，過濾，及濃縮。以二乙基醚研磨殘?jiān)?，過濾，及真空干燥產(chǎn)生223毫克的產(chǎn)物。HRMS (M+H) 計(jì)算 412. 1495，發(fā)現(xiàn) 412. 1593 ;1H NMR (400MHz，DMS0_d6) δ ppm 1. 89-2. 00 (m, 2H) 2. 32 (d, J = 13. 43Hz，2H)3. 63-3. 69(m，4H)3. 85(s，3H)6. 42(d，J = 1. 88Hz, 1H) 7. 01 (br. s., 1H) 7. 06 (br. s.，1H) 7. 23-7. 36 (m, 4H) 7. 46 (d, J=L 88Hz, 1H) 7. 47-7. 55 (m, 3H)。步驟8 :4-(2_氟-3-{T4-(l-甲基_1Η_吡嗶基)苯基1硫基丨-苯基)-N-甲 基四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備
61
將198毫克的4-(2-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)-四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺及20毫升的無水四氫呋喃于氮?dú)庀轮糜诤娓傻牟Ａ績?nèi)。添加 39毫克的氫化鈉(于礦物油中的60%分散液)，于室溫對混合物攪拌30分鐘。添加0. 050 毫升的碘甲烷，于室溫對混合物攪拌3小時(shí)。添加0. 055毫升的冰乙酸，以乙酸乙酯稀釋反 應(yīng)，以水及5%氯化鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，并通過反相色譜純化。將產(chǎn)物級分 稀釋于乙酸乙酯內(nèi)，以5%水性碳酸氫鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，并真空干燥，產(chǎn)生 108 毫克的產(chǎn)物。HRMS (M+H)計(jì)算 426. 1651，發(fā)現(xiàn) 426. 1750 ；IHNMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 96(ddd, J = 13. 63，8. 12，5. 37Hz，2H)2. 30 (d, J = 13. 43Hz，2H)2. 54 (d, J = 4. 57Hz, 3H)3. 58-3. 70(m，4H)3. 84(s，3H)6. 41(d，J = 1. 88Hz, 1H) 7. 24-7. 37 (m, 4H) 7. 41 (q, J = 4. 48Hz, 1H)7. 46 (d, J=L 88Hz, 1H) 7. 47-7. 54 (m, 3H)。實(shí)施例18 4-(3-氟-5-{[4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基]硫基}-苯基)_N_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺標(biāo)題化合物是使用實(shí)施例16所述的方法并使用實(shí)施例15的化合物作為起始材料 制造的。HRMS (M+H)計(jì)算 426. 1651，發(fā)現(xiàn) 426. 1796 ； IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 1. 81(ddd, J = 13. 90，10. 41，3. 89Hz，2H)2. 35(d，J = 13. 70Hz,2H)2. 54(d, J = 4. 57Hz, 3H) 3. 36-3. 46 (m, 2H) 3. 70 (ddd, J = 11. 55，3. 76，3. 49Hz，2H) 3. 87 (s，3H) 6. 45 (d，J = 1. 88Hz, 1H)7. 03(ddd, J = 8. 39，2. 28，1. 95Hz, 1H) 7. ll(dt，J = 10. 54，1. 98Hz, 1H) 7. 14 (t， J = 1. 48Hz, 1H)7. 46 (dt, J = 8. 86，2. 15Hz，3H) 7. 58 (ddd，J = 8. 46,2. 15,2. 01Hz, 2H)7. 69 (q, J = 4. 21Hz, 1H)。實(shí)施例19 4-(2，5-二氟-3-{[4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)_N_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺^MlA-MM -2,5-二氟苯甲腈的制各將10克的4-溴-2，5-二氟苯胺、4. 48克的氰化銅⑴及110毫升的無水二甲基 甲酰胺于氮?dú)庀轮糜诤娓傻臒績?nèi)，回流加熱過夜。反應(yīng)被冷卻，且添加110毫升的10%水性氰化鈉，且攪拌30分鐘。反應(yīng)以200毫升的水稀釋，且以二氯甲烷萃取三次。合并的有 機(jī)層以5 %碳酸鈉及水萃取，于硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，及通過于硅石上的快速色譜純化。 產(chǎn)物級分被濃縮及真空干燥產(chǎn)生5克的產(chǎn)物。GCMS (M) 154 ；IH NMR(400MHz，DMS0_d6) δ ppm 6. 58-6. 68 (m, 3H) 7. 57 (dd, J=Il. 14,6. 04Hz, 1H)。2 4-氡某-3-、遼-2,5- 二氟龍甲腈的制各5.0克的4-氨基-2，5-二氟苯甲腈、5. 13克的溴、2毫升的水，及50毫升的冰乙酸 于氮?dú)庀轮糜诤娓傻臒績?nèi)，且于室溫?cái)嚢柽^夜。反應(yīng)被濃縮，以二氯甲烷稀釋，以水及5% 碳酸鈉萃取，于硫酸鈉上干燥，過濾，濃縮，及于硅石上通過快速色譜純化。產(chǎn)物級分被濃 縮及真空干燥，產(chǎn)生 6. 9 克的產(chǎn)物。GCMS(M) 232 ；IH NMR(400MHz，DMS0_d6) δ ppm 6. 89 (s, 2H)7. 71 (dd, J = 11. 14，6. 04Ηζ，1Η)。步驟3 4-氨某-3-溴-2,5- 二氟苯甲醛的制各將6. 70克的4-氨基-3-溴-2，5-二氟苯甲腈及0.754克的氧化鉬(IV)置于 Fischer-Porter壓力瓶內(nèi)，抽真空/以氮?dú)馓畛淙?。于氮?dú)夥諊?，添?6毫升的甲酸及 9毫升的以氮?dú)怙柡偷乃?，?0°C對混合物加熱4小時(shí)。反應(yīng)被冷卻，于硅藻土床上過濾，濃 縮，以乙酸乙酯稀釋，以飽和碳酸鈉萃取，于硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，且于硅石上通過快速 色譜純化。產(chǎn)物級分被濃縮并真空干燥，產(chǎn)生4. 61克的產(chǎn)物。GCMS (M) 235 ； IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 6. 94 (br. s.，2H) 7. 44(dd, J = 11. 01,6. 18Hz, 1H)9. 90(d, J = 2. 95Hz, 1H)。步驟4 :3_溴-2, 5-二氟苯甲酵的制備將4. 6克的4-氨基-3-溴_2，5_ 二氟苯甲醛，110毫升的冰乙酸及54毫升的次 磷酸于氮?dú)庀轮糜诤娓傻臒績?nèi)，冷卻至0°c。從添加漏斗，將溶于11毫升水中的1. 96克 的亞硝酸鈉添加至反應(yīng)混合物，維持反應(yīng)溫度低于15°C。將混合物加溫至室溫，并攪拌1 小時(shí)，稀釋于300毫升的冰水內(nèi)，且以二氯甲烷萃取3次。以水萃取合并的有機(jī)層，以10% 氫氧化鈉萃取兩次，以水萃取2次，于硫酸鈉上干燥，過濾，濃縮，且通過于硅石上的快速色 譜純化。濃縮產(chǎn)物級分，于真空下干燥產(chǎn)生2. 79克的產(chǎn)物。GCMS(M)222 ;1H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 7. 66(ddd, J = 8. 06,4. 83,3. 22Hz, 1H)8. 12(ddd, J = 7. 52，5. 37，3. 22Hz, 1H) 10. 13 (d, J = 2. 42Hz, 1H)。步驟5 (3-溴-2，5- 二氟苯基)甲醇的制備將2. 69克的3-溴_2，5_ 二氟苯甲醛及30毫升的無水四氫呋喃于氮?dú)庀轮糜诤?干的燒瓶內(nèi)，并冷卻至0°C。18. 3毫升的硼烷_四氫呋喃復(fù)合物自添加漏斗緩慢添加，將 混合物加溫至室溫，并攪拌3小時(shí)。添加5毫升的水，對反應(yīng)加以濃縮，以二乙基醚稀釋， 并以飽和碳酸鉀萃取。以二乙基醚萃取水性層3次，以水及5%氯化鈉萃取合并的有機(jī)層， 于硫酸鎂上干燥，過濾并濃縮。于靜置過夜時(shí)形成結(jié)晶，對其真空下干燥，產(chǎn)生2. 7克的產(chǎn) 物。GCMS (M) 222. ； IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 4. 57 (d, J = 5. 91Hz,2H)5. 53 (t, J = 5. 91Hz, 1H) 7. 29 (ddd, J = 8. 73，5. 24，3. 22Hz, 1H) 7. 58 (ddd, J = 7. 99，5. 17，3. 22Hz, 1H)。步驟6 :1-溴-3-(氯甲基)-2，5~ 二氟苯的制備將590毫克的(3-溴-2，5-二氟苯基)甲醇及5毫升的無水二氯甲烷于氮?dú)庀轮?于烘干的玻璃瓶內(nèi)，并冷卻至0°C。添加0. 42毫升的亞硫酰氯，對混合物加溫至室溫，并攪 拌2小時(shí)。對反應(yīng)加以濃縮，以二乙基醚稀釋，且添加5毫升的飽和碳酸鉀及另外的水。此 二相被分離，以二乙基醚萃取水性層。有機(jī)層被合并，且以水、5%氯化鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，且通過于硅石上進(jìn)行的快速色譜純化。產(chǎn)物級分被濃縮并真空干燥產(chǎn)生產(chǎn) 生275毫克的產(chǎn)物。GCMS (M-Cl) 220。步驟7: (3_、遼-2，5_ 二氟苯某)乙腈的制各將775毫克的1-溴_3_(氯甲基)_2，5_ 二氟苯，251毫克的氰化鉀及7毫升的無 水二甲基亞砜于氮?dú)庀轮糜诤娓傻牟Ａ績?nèi)，且于室溫?cái)嚢?小時(shí)。以乙酸乙酯稀釋反應(yīng) 混合物，以5%氯化鈉萃取四次，于硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮，且通過于硅石上的快速色譜 純化。產(chǎn)物級分被濃縮，并真空干燥產(chǎn)生277毫克的產(chǎn)物。GCMS(M) 231 ;1H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 4. 13-4. 17 (m，2Η) 7. 40 (ddd，J = 8. 59，5. 37，3. 22Hz，1H) 7. 76 (ddd，J = 8. 06，5. 10,2. 95Hz, 1H)。步驟8 :4-(3_、遼-2，5_ 二氟龍某)四氫_2H_吡_ _4_甲腈的制各將930毫克的(3-溴-2，5-二氟苯基)乙腈，373毫克的氫化鈉(于油中的60% 分散液)及10毫升的無水二甲基亞砜于氮?dú)庀轮糜诤娓傻臒績?nèi)，并于室溫?cái)嚢?5分 鐘。添加0.71毫升的2-氯乙基醚，對混合物攪拌過夜。添加0.53毫升的冰乙酸，以水 稀釋反應(yīng)，并以乙酸乙酯萃取。以5%氯化鈉萃取有機(jī)相兩次，于硫酸鎂上干燥，過濾，濃 縮，且通過于硅石上的快速色譜純化。產(chǎn)物級分被濃縮及真空干燥，產(chǎn)生748毫克的產(chǎn)物。 GCMS (M) 301 ； IH NMR (400MHz，DMS0_d6) δ ppm 2. 03-2. 14(m，2H)2. 16-2. 25 (m, 2H) 3. 68 (td, J = 12. 15，1. 75Hz,2H) 4. 01 (dd, J = 12. 35，2. 42Hz,2H) 7. 41 (ddd, J = 9. 33,5. 84，3. 09Hz, 1H) 7. 85 (ddd, J = 7. 85，5. 03，2. 95Hz, 1H)。步驟9 4-(3-溴-2，5- 二氟苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲酰胺的制備將748毫克的4-(3-溴_2，5_ 二氟苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲腈及417毫克的經(jīng) 研磨的氫氧化鉀置于烘干的玻璃瓶內(nèi)，抽真空/以氮?dú)馓畛淙?。添?0毫升的無水叔丁 基醇，于80°C對混合物加熱1小時(shí)。反應(yīng)被冷卻，濃縮，以乙酸乙酯稀釋，以水萃取一次，以 5 %氯化鈉萃取三次，于硫酸鎂上干燥，過濾并濃縮。以己烷中的50 % 二乙基醚研磨殘?jiān)^ 濾，并于真空下干燥，產(chǎn)生631毫克的產(chǎn)物。LCMS (M+H) 320 ；IH匪R(400MHz，DMS0_d6) δ ppm 1. 91 (dt, J = 13. 63,6. 75Hz,2H)2. 28 (d, J = 13. 43Hz,2H)3. 65 (dd, J = 6. 44,3. 76Hz, 4H) 7. 03 (br. s.，1H) 7. 09 (br. s.，1H) 7. 30 (ddd, J = 10. 07，5. 77，3. 22Hz, 1H) 7. 65 (ddd, J = 7. 59，4. 90,3. 09Hz, 1H)。步驟10 :4-(2，5-二氟-3-{T4-(l-甲基_1Η_吡嗶_5_基)苯基]-硫基丨苯基) 四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將405毫克的4-(3-溴-2，5_ 二氟苯基)四氫_2H_吡喃_4_甲酰胺，265毫克的 4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯硫醇，33. 5毫克的雙[(2-二苯基膦基)苯基]，74. 5毫 克的四(三苯基膦)鈀(0)置于烘干的玻璃瓶內(nèi)，抽真空/以氮?dú)馓畛淙?。添?毫升 的無水1，4-二惡烷及3. 8毫升的2M碳酸銫，于80°C對混合物加熱過夜。反應(yīng)被冷卻，濃 縮，并通過反相色譜純化。產(chǎn)物級分被稀釋于乙酸乙酯內(nèi)，以5%水性碳酸氫鈉萃取，以硫 酸鎂干燥，過濾并濃縮。以于硅石上進(jìn)行的快速色譜第二次純化。產(chǎn)物級分被濃縮，并真 空干燥，產(chǎn)生 137 毫克的產(chǎn)物。HRMS(M+H)計(jì)算 430. 1401，發(fā)現(xiàn) 430. 1459 ；IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 93 (dt, J = 13. 90,6. 88Hz,2H)2. 29 (d, J = 13. 70Hz,2H)3. 66 (dd, J =6. 44，3. 76Hz，4H)3. 87(s，3H)6. 46(d，J = 1. 88Hz, 1H) 7. 01-7. 07 (m, 2H) 7. 09 (br. s., 1H)7. 28 (ddd, J = 9. 87，6. 11，3. 09Hz, 1H) 7. 44 (ddd, J = 8. 53，2. 28，2. 08Hz，2H)7. 48 (d, J
=1. 88Hz, 1H) 7. 57 (dt, J = 8. 59，2. 15Hz,2H)。步驟11 :4-(2,5-二氟-3-{Τ4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基]-硫基丨苯 基)-N-甲基四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺的制備將106毫克的4-(2，5_ 二氟-3-{[4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基]硫基} 苯基)_四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺，48. 6毫克的氫化鈉(于油中的60%分散液)及10毫 升的無水四氫呋喃于氮?dú)庀轮糜诤娓傻牟Ａ績?nèi)，且于室溫?cái)嚢?小時(shí)。添加129毫克的 碘甲烷，于室溫對混合物攪拌1小時(shí)。添加0. 07毫升的冰乙酸，以水稀釋反應(yīng)并以乙酸乙 酯萃取兩次。以5%氯化鈉萃取合并的有機(jī)層，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，并通過反相色譜 純化。將產(chǎn)物級分稀釋進(jìn)乙酸乙酯內(nèi)，以5%水性碳酸氫鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，及真 空干燥產(chǎn)生 28 毫克的產(chǎn)物。HRMS(Μ+Η)計(jì)算 444. 1557，發(fā)現(xiàn) 444. 1658 ；IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 89-1. 99 (m, 2H) 2. 22-2. 31 (m, 2H) 2. 54 (d, J = 4. 57Hz,3H) 3. 60-3. 68 (m, J = 5. 91，4. 03Hz，4H)3. 86(s，3H)6. 44(d，J = 1. 88Hz, 1H) 7. 09 (ddd, J = 7. 85，5. 03， 2. 95Hz, 1H) 7. 30 (ddd, J = 9. 67,6. 04，3. 09Hz, 1H) 7. 38-7. 45 (m, 3H) 7. 47 (d, J=L 88Hz, 1H)7. 56 (dt, J = 8. 66，2. llHz，2H)。實(shí)施例204-(2，4_二氟-3-{[4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_四氫_2H_吡 喃-4-甲酰胺越1 :4_ (2，3，4-三氟苯某)四氫-2H-吡_ 土甲腈的制各將1克的2，3，4_三氟苯基乙腈，0. 52克的氫化鈉(于油中的60%分散液)及10 毫升的無水二甲基亞砜于氮?dú)庀轮糜诤娓傻牟Ａ績?nèi)，于室溫?cái)嚢?0分鐘。添加0. 733毫 升的2-氯乙基醚，于室溫對混合物攪拌過夜。以水稀釋反應(yīng)，且以乙酸乙酯萃取三次。以 IN氯化氫及5%氯化鈉萃取合并的有機(jī)層，于硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮，并通過于硅石上 進(jìn)行的快速色譜純化。產(chǎn)物級分被濃縮并真空干燥，產(chǎn)生175毫克的產(chǎn)物。GCMS(M)241; IH NMR (400MHz，DMS0-d6) δ ppm 2. 10 (ddd, J = 13. 43，11. 95，4. 43Hz，2H) 2. 16-2. 24 (m， 2H)3. 68 (td, J = 12. 15，1. 75Hz，2H)4. 01 (ddd, J = 12. 49，3. 89，1. 34Hz，2H)7. 31-7. 50 (m, 2H)。步驟2:S-「4-(l_甲某-IH-吡卩半-5-某)苯某1乙烷硫醇鹽的制各將1. 60克的4- (1-甲基-IH-吡唑_5_基)苯硫醇置于氮?dú)庀?，并溶?0毫升的 無水四氫呋喃中。添加0. 200克的4- 二甲基-氨基吡啶及0. 70毫升的無水吡啶，其后添加 0. 960毫升的乙酸酐。對反應(yīng)攪拌10分鐘，然后，以醚稀釋，以水萃取，以0. IN水性氫氯酸 萃取，以水性碳酸氫鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，并進(jìn)行快速色譜分離產(chǎn)生1. 57 克的產(chǎn)物。LCMS (M+H) 233 ； IH NMR (400MHz, DMS0-d6) δ ppm 2. 47 (s，3H) 3. 88 (s，3H) 6. 49 (d， J=L 71Hz, 1H) 7. 49 (d, J=L 71Hz, 1H) 7. 52-7. 55 (m, 2H) 7. 62-7. 66 (m, 2H)。步驟3 :4-(2,4-二氟-3_{T4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基1硫基丨-苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲腈的制備將169毫克的S-[4_(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]乙烷硫醇鹽及5毫升的 無水1-甲基-2-吡咯烷酮于氮?dú)庀轮糜诤娓傻牟Ａ績?nèi)，并冷卻至0°C。添加0. 726毫 升的四氫呋喃中的IM的叔丁氧化鉀，對混合物于0°C攪拌1小時(shí)。添加溶于2毫升的無 水1-甲基-2-吡咯烷酮中的175毫克的4-(2，3，4-三氟苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲腈， 于45°C對混合物攪拌過夜。反應(yīng)被冷卻，且添加0. 041毫升的冰乙酸，稀釋于乙酸乙酯內(nèi)， 以5%氯化鈉萃取三次，于硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮，并通過反相色譜純化。將產(chǎn)物級分 稀釋于乙酸乙酯內(nèi)，以5%水性碳酸氫鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，真空干燥，產(chǎn)生 48. 1 毫克的產(chǎn)物。LC/MS(M+H)412 ；IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 2. 11 (td, J = 12. 76， 4. 30Hz,2H) 2. 19-2. 26 (m, 2H) 3. 68 (td, J = 12. 08，1. 61Hz,2H) 3. 82 (s, 3H) 3. 97-4. 05 (m, 2H)6. 40 (d, J = 1. 88Hz, 1H)7. 27(ddd, J = 8. 59, 2. 42, 2. 15Hz, 2H) 7. 40-7. 46 (m, 2H)7. 50(ddd, J = 8. 73，2. 28，2. 15Hz，2H)7. 72 (td, J = 8. 86，6. 18Hz, 1H)。步驟4 :4-(2,4-二氟-3_{T4-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基1硫基丨-苯基) 四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將45毫克的4-(2，4_ 二氟-3-{[4-(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基]硫基} 苯基)_四氫-2Η-吡喃-4-甲腈于氮?dú)庀轮糜诤娓傻溺績?nèi)。添加1. 5毫升的三氟 乙酸-硫酸的4 1(ν/ν)溶液，于室溫對混合物攪拌四天。將反應(yīng)稀釋于乙酸乙酯 內(nèi)，以10%碳酸鈉、水，及5%氯化鈉萃取，于硫酸鎂上干燥，過濾，濃縮，真空下干燥產(chǎn) 生 32 毫克的產(chǎn)物。HRMS(Μ+Η)計(jì)算 430. 1401，發(fā)現(xiàn) 430. 1508 ；IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 1. 89-2. 00 (m, 2H) 2. 30 (d, J = 13. 96Ηζ，2Η)3· 66 (dd, J = 6. 71,3. 76Ηζ，4Η)3· 82 (s, 3Η) 6. 39 (d, J = 2. 15Hz, 1Η) 7. 04 (br. s.，1Η) 7. 06 (br. s.，1Η) 7. 20 (ddd, J = 8. 53，2. 15， 1. 95Ηζ，2Η)7· 30-7. 37 (m, 1Η) 7. 46 (dt, J = 9. 06，2. 18Ηζ，3Η)7· 實(shí)施例214-(4-氟-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_四氫_2Η—吡 喃-4-甲酰胺^M 1 2-(3-、遼-4-氟龍某)乙腈的制各用氰化鈉(1. 16克，22. 4毫摩爾)處理DMS0(80毫升)中的2_溴_4_(溴甲 基)-1_氟苯(5.0克，18. 7毫摩爾)的溶液，并攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)傾倒至乙酸乙酯內(nèi)， 且以5%氯化鈉清洗4次。有機(jī)層于硫酸鎂上干燥，過濾，并濃縮成油。通過硅膠柱色譜純 化提供標(biāo)題化合物，其呈淡琥珀色油(3. 6克，75% )。LC/MS 10% -90% CH3CN:H20梯度， 5 分鐘2. 57 分，214，216(M+H) ；1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 3. 73 (s，2H) 7. 15 (t，J = 8. 40Hz, 1H) 7. 20-7. 32 (m, 1H) 7. 56 (dd, J = 6. 25，2. 35Hz, 1H)。^M2 4-(3-M -4-氟,苯某)-四氫_2H_吡_ ~4~甲腈的制各
66
以氫化鈉(120毫克，3.0毫摩爾)處理DMSO (5毫升)中的2_ (3_溴_4_氟苯基) 乙腈(300毫克，1.40毫摩爾)的溶液，并攪拌1小時(shí)。然后，以2-氯乙基醚(409毫克， 0.335毫升，2. 8毫摩爾)處理反應(yīng)，并攪拌2小時(shí)。以乙酸淬滅反應(yīng)，傾倒至水中，且以乙 酸乙酯萃取3次。以鹽水清洗有機(jī)層，于硫酸鎂上干燥，過濾，且濃縮成油。通過硅膠柱色 譜純化提供標(biāo)題化合物，其呈淡琥珀色油(240毫克，30%)。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 2. 05-2. 15(m，4H)3. 86-3. 94 (m, 2H) 4. 07-4. ll(m，lH)4. 10-4. 15 (m, 1H) 7. 19 (dd, J = 8. 70， 8. IlHz, 1Η)7· 43(ddd, J = 8. 60，4. 30，2. 54Hz, 1H) 7. 68 (dd, J = 6. 25，2. 54Hz, 1H)。步驟3 :4-(4_氟-3-(4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)-四氫_2H_吡 喃-4-甲酰胺的制備以粉末狀的氫氧化鉀(59. 2毫克，1.06毫摩爾)處理叔丁醇(1毫升)中的 4-(3-溴-4-氟苯基)-四氫-2!1-吡喃-4-甲腈(100毫克，0. 352毫摩爾)的溶液，并加熱 至80°C持續(xù)1.5小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，以水稀釋，形成的固體被過濾出并被干燥(93毫 克)。將固體與于1，4_ 二惡烷(3毫升)中的S-4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫 醇鹽(71. 5毫克，0. 31毫摩爾)、四(三苯基膦)鈀(57. 8毫克，0. 05毫摩爾)及雙(2- 二苯 基膦基苯基)醚(32. 3毫克，0. 06毫摩爾)混合。混合物被脫氣，且以Ar(g)吹凈，添加水 性碳酸鈉(1. 21毫升，2M)，對形成的混合物加熱至85°C持續(xù)18小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫， 并且濃縮。將殘?jiān)苡贒MSOd毫升)，通過反相色譜純化產(chǎn)生標(biāo)題化合物(38毫克，39% )。 LC/MS 10% -90% CH3CN:H20 梯度，5 分鐘2. 72 分，412(M+H)。實(shí)施例22 (2S，4R)-2-甲基-4-(3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)-四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺步驟1 :(S)_乙某2-(2-乙氧某-2-氧,乙氧某)丙酸酯將(S)-(-)_乳酸乙酯(738克，6247毫摩爾，Ieq.)及碳酸鉀(856克，6，193毫摩 爾，Ieq.)溶于N，N-二甲基甲酰胺(7. 0L)，于室溫?cái)嚢?0分鐘。將溴乙酸乙酯(1049克， 6，200毫摩爾，0. 98eq.)添加至反應(yīng)混合物，于室溫?cái)嚢?4小時(shí)。反以水(25L)稀釋應(yīng)，以 二氯甲烷(3x3L)萃取。以水(lx3L)清洗合并的有機(jī)相，并濃縮成油。于真空下(ImmHg) 對油加以蒸餾，提供418克(33% )的想要的中間產(chǎn)物。LC/MS(M+H) = 205。2 (S)-2-(2-羥某乙氧,某)M 醇的制各將⑶-乙基2-(2_乙氧基-2-氧乙氧基)丙酸酯(418克，2050毫摩爾，Ieq.) 溶于THF(3. 0L)。攪拌時(shí)，將氫化鋰鋁(2.521^，2520毫摩爾，1.2叫.)逐滴添加至反應(yīng)混 合物，使溫度保持低于60°C。對反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)。通過逐滴添加水(47毫升)使 反應(yīng)淬滅。將氫氧化鈉溶液(94毫升，2. 5N)添加至混合物中，其后添加水(141毫升)。 對混合物攪拌30分鐘。固體被過濾，且以丙酮沖洗。將濾液濃縮成凈油。此油于真空下(< ImmHg, 90-1050C )蒸餾，提供 146 克(59% )想要的醇。IH NMR(400MHz，氯仿 _d) δ ppm
0.93-1. 08 (m, 3H) 3. 20-3. 81 (m, 7H) 4. 10-4. 33 (m, 1H) 4. 50 (d, J = 17. 59Hz, 1H) ；LCMS (M+H) =121。3 (S)-I- it -2-(2-碘乙氧某)丙烷的制各將三苯基膦(45.0克，166毫摩爾，4eq.)及咪唑(11. 7克，166毫摩爾，4eq.)溶于 乙腈(100毫升)及二乙基醚(300毫升)。將碘(52. 4克，206毫摩爾，5eq.)緩慢添加至反 應(yīng)混合物，并攪拌30分鐘。將(S)-2-(2-羥基乙氧基)丙-1-醇(5.0克，42毫摩爾，Ieq.) 逐滴添加至反應(yīng)混合物，且攪拌24小時(shí)，避免暴露給光。形成的固體被過濾，且以乙酸乙酯 清洗。濾液于減壓下濃縮成油狀殘?jiān)?。使?%乙酸乙酯/庚烷經(jīng)由硅石柱過濾殘?jiān)?，?供油。通過手性色譜進(jìn)一步純化形成的油，移除(R)-I-碘-2-(2-碘乙氧基)丙烷的任何 余留物(5% ) ο GC/MS m/z = 340 ； IH NMR(400MHz，氯仿 _d) δ ppm 1. 28 (d, J = 6. 25Hz, 3H) 3. 14-3. 29 (m, 4H) 3. 43-3. 54 (m, 1H) 3. 67-3. 82 (m, 2H)。促講(S)-I-碘-2-(2-I!典乙氧某)丙烷的豐件鈍度的i寸禾早以 Berger MultiGram II SFC 色譜分析儀，使用 Chiral Technologies，Inc 的 Chiralpak AS-H 30x250mm柱進(jìn)行分離。以5% MeOH/95% C02以70毫升/分鐘進(jìn)行等強(qiáng) 度洗脫。將樣品以50毫克/毫升溶于MeOH，2毫升/注射。峰1是微量的對映異構(gòu)體，峰2 是主要的對映異構(gòu)體，峰3是未知的雜質(zhì)。分析以Chiral Technologies, Inc的Chiralpak AD-H 4. 6x250mm柱進(jìn)行。使用20% Me0H/80% C02以3毫升/分鐘進(jìn)行等強(qiáng)度洗脫。峰1 于1. 86分時(shí)洗脫，峰2于1. 99分時(shí)洗脫，雜質(zhì)峰于2. 26分時(shí)洗脫。步驟4 (2S,4R)-4-(3-溴苯基)_2_甲基-四氫_2H_吡喃_4_甲腈的制備將3-溴苯基乙腈(1.04克，5. 3毫摩爾，Ieq.)及(S) 碘_2_ (2_碘乙氧基) 丙烷(2. 13克，6. 25毫摩爾，1.2eq.)溶于二甲基亞砜(20毫升)。將氫化鈉(405毫克， 10. 1毫摩爾，1. 9eq.)添加至反應(yīng)混合物，于室溫?cái)嚢?小時(shí)。以水(10毫升)及乙酸乙 酯(10毫升)稀釋反應(yīng)混合物，且層被分離。以IMHCl (1x10毫升)、水(1x10毫升)及 鹽水(1x10毫升)清洗有機(jī)相。于真空下濃縮有機(jī)相，提供黃色液體。形成非對映異構(gòu) 體的混合物(1 1)，通過反相色譜(40-90%乙腈-水)分離，獲得標(biāo)題化合物(350毫 克，24% )，其為單一異構(gòu)物。通過NMR確認(rèn)立體化學(xué)。IH NMR (400MHz，氯仿-d) δ ppm
1.29 (d, J = 6. 14Hz,3H)l. 71 (dd, J = 13. 31，11. 26Hz，1H) 2. 02-2. 12 (m，3H) 3· 91-4. 00 (m, 2H) 4. 10-4. 16 (m, 1H) 7. 31 (t, J = 8. 02Hz, 1H) 7. 43-7. 46 (m, 1H) 7. 50 (s, 1H) 7. 63 (t, J = 1. 88Hz, 1H). LCMS (M+H) = 280(100% ), 282 (98. 5% ) 步驟5 :(2S，4R)-2_甲基(3_(4_(1_甲基_1Η_吡嗶_5_基)苯基硫基)苯 基)-四氫-2H-吡喃-4-甲腈的制備于室溫時(shí)，將4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(296毫克，1. 27毫 摩爾，Ieq.)、(25，4幻-4-(3-溴苯基)-2_甲基-四氫_2H_吡喃_4_甲腈(350毫克，1. 20 毫摩爾，Ieq.)、四鈀(80毫克，0. 07毫摩爾，0. 05eq.)及DPEphos (37毫克，0. 07毫摩爾， 0. 05eq.)、叔丁氧化鉀(3. 75毫升的THF中的1M，3. 75毫摩爾，3eq.)于異丙醇(5毫升) 中混合。將氮?dú)獯蹬萁?jīng)過反應(yīng)混合物，進(jìn)行5分鐘。溶液加熱至65°C，持續(xù)24小時(shí)。將 反應(yīng)冷卻至室溫，以乙酸乙酯(5毫升)及水(5毫升)稀釋。層被分離，以乙酸乙酯(2x5 毫升)萃取水性相。合并的有機(jī)相于硫酸鈉上干燥，于減壓下移除溶劑。通過反相色譜
68(40-90%乙腈-水)分離形成的油，產(chǎn)生想要的產(chǎn)物(49.4毫克，10% )。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 19 (d, J = 5. 86Hz,3H) 1. 62-1. 74 (m, 1H) 1. 98 (td, J = 12. 81,4. 39Hz, 1H)2. 04-2. 12 (m, 1H)2. 18 (d J = 13. 18Hz，1H) 3. 64-3. 80 (m，2H) 3. 72 (d，J = 12. 45Hz, 1H)3. 85(s,3H)4. 03 (dd, J = 12. 08,4. 03Hz, 1H) 6. 41 (s, 1H) 7. 36-7. 59 (m, 9H) ；ES-HRMS m/ ζ 390. 1696(M+H 計(jì)算:390· 1640)。步驟6 :(2S,4R)-2-甲基(3_(4_(1_甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基硫基)苯 基)-四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備將(2S，4R) _2_甲基_4_ (3_ (4_ (1_甲基-IH-吡唑_5_基)苯基硫基)苯基)-四 氫-2H-吡喃-4-甲腈(443毫克，1. 14毫摩爾，Ieq.)及氫氧化鉀(300毫克，5. 4毫摩爾， 4. 7eq.)溶于叔丁基醇(10. 0毫升)。于60°C對混合物攪拌24小時(shí)。以水(10毫升)稀釋 混合物，并以乙酸乙酯(2x10毫升)萃取。將有機(jī)相濃縮成固體。通過反相色譜(40-90% 乙腈-水)純化粗制固體，提供標(biāo)題產(chǎn)物(143毫克，31% )，其為固體。IH NMR (400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 10 (d, J = 6. 22Hz,3H) 1. 20-1. 31 (m, 1H) 1. 50-1. 63 (m, 1H) 2. 45-2. 62 (m, 3Η)3· 40-3. 51 (m, 2H) 3. 83(s，3H)6. 40 (d, J=L 83Hz，1Η)7· 10 (s，1H) 7. 23-7. 55 (m, 9H)8. 12 (s, 1H) ；ES-HRMS m/z 408. 1816(M+H 計(jì)算:408. 1746)。實(shí)施例23(2S，4R)-4-(4-氟-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_2_ 甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺標(biāo)題化合物是使用實(shí)施例15所述的方法并使用2-(3-溴_4_氟苯基)乙腈作為 起始材料制造的。IH NMR(400MHz,氯仿 _d) δ ppm 1. 22 (d, J = 6. 25Hz,3H) 1. 53 (dd, J = 13. 29, 11. 14Hz, 1H) 1. 82-1. 93 (m, 1H) 2. 27-2. 41 (m, 2H) 3. 67-3. 77 (m, 2H) 3. 91 (s, 3H) 3. 96-4. 03 (m, 1H) 5. 60 (br. s.，1H) 6. 02 (br. s.，1H) 6. 34 (d, J = 2. 15Hz, 1H) 7· 15 (t，J = 8. 50Hz, 1Η) 7. 25-7. 35 (m, 4Η) 7. 37-7. 43 (m, 1Η) 7. 49 (dd, J = 6. 64，2. 35Hz, 1Η) 7. 59 (d, J = 1. 95Hz, 1Η) ；ES-HRMS m/z426. 1662 (Μ+Η 計(jì)算426. 1651)。實(shí)施例24 (2S，4R)-4-(4-氟-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_2_ 甲
基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈用于制備下文中實(shí)施例27的化合物的過程被用于制備下列化合物，其中使用 2-(3_溴-4-氟苯基)乙腈作為起始材料。1H NMR (400MHz，DMS0-d6) δ ppm 1. 16-1. 18 (d, 3H) , 1. 64-1. 7 (m, 1H), 1. 92-1. 99 (m, 1Η)，2. 07-2. 11 (m, 1Η)，2. 17-2. 2 (m, 1Η)，3. 64-3. 73 (m, 2H)，3. 84 (s, 3H)， 4. 0-4. 04 (m, 1H)，6. 41 (m, 1H)，7. 35-7. 38 (d, 2H)，7. 45-7. 49 (m, 2H)，7. 53-7. 55 (d, 2H)， 7. 63 (m, 1H)，7. 67 (m, 1H) ；HRMS M+H 計(jì)算408. 1546，發(fā)現(xiàn) 408. 1619。實(shí)施例25 (2S，4R)-4_(2-氟 _3-(2_ 氟 _4-(1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基)苯基硫基)苯 基)-2-甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈1 (4-、遼-3-氟龍某)(嗎啉某)甲酮的制各向二氯甲烷(50毫升)中的4-溴-3-氟苯甲酸(3. 0克，14毫摩爾)的溶液中， 添加1-乙基-3(3’ -二甲基氨基丙基)甲二酰亞胺氫氯酸鹽(3. 41克，1. 3毫摩爾)、二甲 基氨基吡啶(502毫克，4. 11毫摩爾)及嗎啉(1. 22克，14毫摩爾)。于環(huán)境溫度攪拌3小 時(shí)后，將反應(yīng)傾倒至水(300毫升)中，以水(2x100毫升)清洗，于硫酸鎂上干燥有機(jī)物，過 濾，通過減壓下蒸發(fā)移除溶劑，提供標(biāo)題化合物(3. 68克)，其呈油狀物。1H NMR(400MHz，氯 仿-d) δ ppm3. 31-3. 92 (m, 8H) 7. 05-7. 13 (m, 1Η)7· 20 (dd, J = 8. 40，1. 95Hz, 1H) 7. 62 (dd, J =8. 20,6. 64Hz, 1H)。LCMS :m/z [MH+] 288. 0，290. 0。步驟2 :l-(4-溴-3-氟苯基)乙酮的制備氬氣下，向無水四氫呋喃(45毫升)中的以冰浴冷卻的(4-溴-3-氟苯基)(嗎啉 基)甲酮(3. 14毫克，10. 9毫摩爾)的溶液中，添加甲基氯化鎂(1.22克，16. 4毫摩爾)。 反應(yīng)于冰浴溫度攪拌1小時(shí)，然后，加溫至環(huán)境溫度。反應(yīng)被傾倒至水(350毫升)中，以乙 酸乙酯(3x75毫升)萃取，以鹽水(100毫升)清洗，于硫酸鎂上干燥，過濾，通過減壓下的蒸 發(fā)移除溶劑，提供標(biāo)題化合物(2. 8克)，其呈液體。1H NMR(400MHz，氯仿_d) δ ppm 2. 60 (s, 3H) 7. 52-7. 77 (m, 3H)。步驟3 5-(4~溴-3-氟苯基)_1_甲基-IH-吡唑的制備向N，N-二甲基甲酰胺(10毫升)中的1-(4-溴-3-氟苯基)乙酮(2. 8克，12毫 摩爾)的溶液中，添加N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(3. 45毫升，26毫摩爾)。反應(yīng)加 熱回流三小時(shí)，冷卻至室溫，以甲基胼(2. 5毫升，46毫摩爾)處理，且加熱至75°C持續(xù)18 小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，以乙酸乙酯(3x75毫升)萃取，以鹽水(100毫升)清洗，于硫酸 鎂上干燥，過濾，通過減壓下蒸發(fā)移除溶劑。通過在硅膠上進(jìn)行的快速色譜純化，以乙酸乙 酯庚烷(20 80，以體積計(jì))變化至乙酸乙酯庚烷(60 40，以體積計(jì))的溶液梯度洗脫殘?jiān)峁?biāo)題化合物(1.66克)，其呈固體。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 3.91(s, 3H)6. 34 (d, J = 1. 95Hz, 1H) 7. 11 (dd, J = 8. 01，1. 76Hz，1H) 7. 20 (dd，J = 8. 99,1. 95Hz, 1H) 7. 53 (d, J=L 95Hz, 1H) 7. 65 (dd, J = 8. 20，7. 03Hz, 1H)。LCMS :m/z [MH+] 255.0，257.0。4 :S-2-氟-4-(l-甲某-IH-吡卩半_5_某)苯某乙烷硫醇鹽的制各于氬氣下，向經(jīng)脫氣的無水1，4_ 二惡烷(13毫升)中的5-(4_溴-3-氟苯 基)-1_甲基-IH-吡唑(120毫克，0.470毫摩爾)的溶液中，添加乙酸鈀(8. 1毫克，0.036 毫摩爾)、雙(2- 二苯基膦基苯基)醚(9. 7毫克，0. 018毫摩爾)、碳酸銫(234毫克，0. 719 毫摩爾)及三異丙基硅烷硫醇(205毫克，0.231毫升，1.08毫摩爾)。反應(yīng)加熱至95°C， 持續(xù)45分鐘，冷卻至室溫，并以乙酸酐(1.5毫升)處理。18小時(shí)后，過濾反應(yīng)，以乙酸乙 酯(3x75毫升)萃取濾液，以鹽水(100毫升)清洗，于硫酸鎂上干燥，過濾，通過減壓下的 蒸發(fā)移除溶劑。通過硅膠上進(jìn)行的快速色譜純化殘?jiān)?，其中以乙酸乙酯庚?5 95，以 體積計(jì))改變至乙酸乙酯庚烷(40 60，以體積計(jì))的溶液梯度洗脫，提供標(biāo)題化合物 (50 毫克)，其呈固體。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 2. 50 (s, 3H) 3. 96 (s, 3H) 6. 38 (d, J = 1. 95Ηζ, 1Η)7· 23-7. 29 (m, 2H) 7. 51 (dd, J = 8. 30，6. 步驟5 :(2S,4R)-4-(2-氟-3_(2-氟-4_(1-甲基 _1Η_ 吡唑 基)苯基硫基) 苯某)-2-甲某-四氫-2H-吡_ -4-甲腈的制各于氬氣下，向經(jīng)脫氣的無水1，4_ 二惡烷(3毫升)中的S-2-氟-4-(l-甲 基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(100毫克，0.400毫摩爾)的溶液中，添加((2S， 4幻-4-(3-溴-2-氟苯基)-2_甲基-四氫-2Η-吡喃-4-甲腈)(119毫克，.0400毫摩爾)、 乙酸鈀(13. 7毫克，0. 060毫摩爾)、雙(2- 二苯基膦基苯基)醚(21. 5毫克，0. 040毫摩爾) 及固體碳酸銫(391毫克，1.20毫摩爾)。加熱至85°C持續(xù)18小時(shí)后，反應(yīng)冷卻至室溫， 過濾，通過反相HPLC純化，提供標(biāo)題化合物(44毫克)，其呈玻璃狀固體。1H NMR (400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 19 (d, J = 6. 22Hz,3H) 1. 72 (dd, J = 13. 18，10. 98Hz, 1H) 1. 96-2. 05 (m, 1H)2. 19 (dt, J = 13. 36，1. 19Hz，1H)2. 28(dt，J = 13. 45，2. 24Hz，1H) 3. 69—3. 81 (m， 2H) 3. 89 (s，3H) 4. 00-4. 06 (m, 1H) 6. 52 (d, J=L 83Hz, 1H) 7. 28-7. 35 (m, 2H) 7. 38-7. 51 (m, 4H) 7. 58-7. 63 (m, 1H)。LCMS :m/z [MH+] 425. 1。實(shí)施例26(2S，4R)-4_(2-氟-3_(2_ 氟 _4-(1_ 甲基 _1Η_ 吡唑 _5_ 基)苯基硫基)苯 基)-2-甲基-四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺以粉末狀的氫氧化鉀(41. 6毫克，0. 741毫摩爾)處理叔丁醇(2毫升)中的實(shí)施例
7125的化合物(98毫克，0. 23毫摩爾)的溶液，加熱至70°C，持續(xù)18小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至環(huán) 境溫度，過濾，通過反相HPLC純化，提供標(biāo)題化合物(38毫克)，其呈固體。1H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 09 (d, J = 6. 59Hz,3H) 1. 36-1. 48 (m, 1H) 1. 71-1. 83 (m, 1H) 2. 33-2. 49 (m, 2H) 3. 57-3. 73 (m，2H) 3. 77-3. 85 (m, 1H) 3. 89(s，3H)6. 51 (d, J=L 46Hz, 1H)7. 12 (s， 2H) 7. 25 (t，J = 6. 59Hz,3H) 7. 38 (d, J = 8. 05Hz, 1H) 7. 42-7. 51 (m, 2H) 7. 59 (d, J = 8. 79Hz, 1H)。LCMS :m/z[MH+]444. 2。實(shí)施例27 (2S，4R)-4-(3-氟-5-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_2_ 甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺越1 (2S,4R)土(3-簠土氟苯某)_2_甲某二四氫-2H-吡_ 土甲腈的制各將2-(3-溴-5-氟苯基)乙腈(1.40克，4. 6毫摩爾，Ieq.)及(S) 碘_2_ (2_碘 乙氧基)丙烷(2. 30克，6. 87毫摩爾，1. 5eq)溶于二甲基亞砜(10毫升)。將氫化鈉(450 毫克，11毫摩爾，2. 5eq.)添加至反應(yīng)混合物，于室溫?cái)嚢?小時(shí)。以水(10毫升)及乙酸 乙酯(10毫升)稀釋反應(yīng)混合物，且對層加以分離。以IMHCl (1x10毫升)、水(1x10毫升) 及鹽水(1x10毫升)清洗有機(jī)相。于真空下濃縮有機(jī)相，提供(2S，4R)-4-(3-溴-5-氟 苯基)-2_甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈及(2S，4S)-4-(3-溴-5-氟苯基)-2_甲基-四 氫-2H-吡喃-4-甲腈的非對映異構(gòu)體混合物(1 1)。通過反相色譜(40-90%乙腈-水) 分離非對映異構(gòu)體混合物，獲得標(biāo)題化合物(522毫克，38% )，其呈單一異構(gòu)物。LCMS (M+1) =298(100% ) ,300(98% )。步驟2 :(2S,4R)-4-(3-氟-5-(4-(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基硫基)苯 某)-2_甲某-四氫-2Η-吡_ -4-甲腈的制各 于室溫下，將4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(407毫克，1. 75毫摩 爾，leq.)、(2S，4R)-4_(3-溴-5-氟苯基)-2_甲基-四氫_2H_吡喃_4_甲腈(522毫克， 1. 75 毫摩爾，leq.)、四鈀(111 毫克，0. 096 毫摩爾，0. 05eq.)及 DPEphos (51. 7 毫克，0. 096 毫摩爾，0. 05eq.)、叔丁氧化鉀(5. 25毫升的THF內(nèi)1M，5. 25毫摩爾，3eq.)于異丙醇(10毫 升)中混合。將氮?dú)獯蹬萁?jīng)過反應(yīng)混合物，進(jìn)行5分鐘。將溶液加熱至65°C持續(xù)24小時(shí)。 將溶液冷卻至室溫，以乙酸乙酯(5毫升)及水(5毫升)稀釋。對層加以分離，以乙酸乙酯(2x5毫升)萃取水性相。于硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)相，減壓下移除溶劑。通過反相色譜 (40-90%的乙腈-水)分離形成的油，產(chǎn)生想要的產(chǎn)物(520毫克，73%)。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 16 (d, J = 6. 59Hz，3H) 1. 63-1. 72 (m，1H) 1. 91-2. 01 (m，1H) 2. 04-2. 11 (m, 1H)2. 17 (d, J = 13. 91Hz，lH)3. 61-3. 74(m，2H)3. 86(s，3H)4. 01(dd，J = 12. 08，3. 29Hz， 1H) 6. 45 (s，1H) 7. 12 (d, J = 8. 79Hz, 1H) 7. 34-7. 40 (m, 2H) 7. 46-7. 49 (m, 1H) 7. 51-7. 63 (m, 4H) ；ES-HRMS m/z 408. 1611(M+H 計(jì)算408. 1546)。步驟3 :(2S,4R)-4-(3-氟-5-(4_(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基硫基)苯 某)-2_甲某-四氫-2H-吡_ -4-甲酰胺的制各將(2S，4R) _4_ (3_氟_5_ (4_ (1_甲基-IH-吡唑_5_基)苯基硫基)苯基)~2~甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(370毫克，0. 91毫摩爾，Ieq.)及氫氧化鉀(428毫克，7. 6毫 摩爾，8. 7eq.)溶于叔丁基醇(5. 0毫升)。于60°C對混合物攪拌24小時(shí)。以水(10毫升) 稀釋混合物，并以乙酸乙酯(2x10毫升)萃取。有機(jī)相濃縮成固體。通過反相色譜(40-90% 的乙腈-水)純化粗制固體，提供標(biāo)題產(chǎn)物(126毫克，33% )，其呈固體。IH NMR (400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 09 (d, J = 5. 86Hz,3H) 1. 21-1. 30 (m, 1H) 1. 51-1. 62 (m, 2H) 2. 41-2. 56 (m, 2H)3. 37-3. 49 (m, 2H) 3. 81 (d, J = 2. 93Hz, 1H) 3. 85(s，3H)6. 44 (s, 1H) 7. 01 (d, J = 8. 79Hz, 1H) 7. 09-7. 18 (m, 2H) 7. 22 (s, 1H) 7. 35 (br. s.，1H) 7. 42-7. 48 (m, 2H) 7. 57 (d, J = 8. 05Hz, 2H) ；ES-HRMS m/z 426. 1656(M+H 計(jì)算426. 1651)。實(shí)施例28 (2S，4R)-4-(2，4-二氟-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_2_ 甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺步驟1 :(25,4捫-4-(3-溴-2,4-二氟苯基)-2-甲基-四氫_2H_吡喃土甲腈的 制備將2-(3_溴-2，4_ 二氟苯基)乙腈(1. 60克，9. 4毫摩爾，Ieq.)及 (S)-I-碘-2-(2-碘乙氧基)丙烷(3. 40克，10毫摩爾，1. Ieq.)溶于二甲基亞砜(10毫 升)。將氫化鈉(828毫克，21毫摩爾，2. 2eq.)添加至反應(yīng)混合物，于室溫?cái)嚢?小時(shí)。以 水(10毫升)及乙酸乙酯(10毫升)稀釋反應(yīng)混合物，對層加以分離。以IM HCl (1x10毫 升)、水(1x10毫升)及鹽水(1x10毫升)清洗有機(jī)相。于真空下濃縮有機(jī)相，提供(2S， 4R)-4-(3-溴-2，4-二氟苯基)-2-甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈及(2S，4S)-4-(3-溴-2， 4-二氟苯基)-2-甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈的非對映異構(gòu)體混合物(1 1)。通過反相 色譜(30-85%的乙腈-水)分離非對映異構(gòu)體混合物，獲得標(biāo)題化合物(251毫克，11%)， 其呈單一異構(gòu)物。LC/MS(M+1) = 316(100% ) ,318(98% ) 步驟2:(25,4捫-4-(2,4-二氟-3-(4-(1-甲基-1!!-吡唑_5_基)苯基硫基)苯 基)-2-甲某-四氫-2H-吡_ -4-甲腈的制各將4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(233毫克，1. 0毫摩爾，Ieq.)溶于1-甲基-2-吡咯烷酮(10毫升)，并添加叔丁氧化鉀(1. 0毫升，THF中的1M，1. 0毫 摩爾，leq.)。其后對反應(yīng)混合物進(jìn)行LCMS，至觀察到完全轉(zhuǎn)化成游離硫醇為止。將(2S， 4R)-4-(3-溴-2，4-二氟苯基)-2-甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(251毫克，0. 98毫摩爾， 1. Oeq.)添加至反應(yīng)混合物，且于45°C攪拌24小時(shí)。溶液冷卻至室溫，以乙酸乙酯(5毫升) 及水(5毫升)稀釋。對層加以分離，以乙酸乙酯(2x5毫升)萃取水性相。以鹽水(2x10 毫升)清洗合并的有機(jī)相，于硫酸鈉上干燥，減壓移除溶劑。通過反相色譜(40-90%的乙 腈-水)分離形成的油，產(chǎn)生想要的產(chǎn)物(110毫克，26% )。IH NMR (400MHz, DMS0_d6) δ ppm 1. 18 (d, J = 6· 59Hz，3H) 1· 68-1. 77(m，1H) 1· 95-2. 06(m，1Η)2· 20(d，J = 13. 18Hz, 1H)2. 29 (d, J = 13. 18Hz，lH)3. 68-3. 79(m，2H)3. 81(s，3H)4. 03(dd，J = 12. 45，2. 93Hz， 2H) 6. 39 (s，1H) 7. 26 (d, J = 8. 05Hz,2H) 7. 37-7. 53 (m, 3H) 7. 65-7. 75 (m, 1H) ；ES-HRMS m/z 426. 1515 (M+H 計(jì)算-.426. 1451)。步驟3:(25,4捫-4-(2,4-二氟-3-(4-(1-甲基-1!!-吡唑_5_基)苯基硫基)苯 基)-2-甲某-四氫-2H-吡_ -4-甲酰胺的制各將(2S，4R)-4-(2，4-二氟-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯 基)-2_甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(100毫克，0. 23毫摩爾，leq)溶于3毫升的三 氟乙酸及硫酸的混合物(4 1)。于室溫對反應(yīng)混合物攪拌72小時(shí)。將溶液傾倒至水 (5毫升)內(nèi)，以乙酸乙酯(2x10毫升)萃取。以碳酸氫鈉飽和溶液(1x10毫升)清洗有 機(jī)相，并濃縮成固體。通過反相色譜(40-90%的乙腈-水)純化粗制固體，提供標(biāo)題產(chǎn) 物(37 毫克，36 ，其呈固體。IH NMR (400MHz，DMS0-d6) δ ppm 1. 08 (d, J = 5. 86Hz, 3H) 1. 37-1. 46 (m, 1H) 1. 71-1. 83 (m, 1H) 2. 39 (dd, J = 32. 21，13. 91Ηζ，2Η)3· 57-3. 73 (m, 2Η)3. 78 (d, J = 3. 66Ηζ，1Η)3. 81(s，3H)6. 38(s，lH)7. ll(d，J = 8. 79Hz，2Η) 7. 18 (d，J =8. 05Ηζ,2Η)7. 32 (t, J = 8. 05Hz，1Η) 7. 42-7. 49 (m，3Η) 7. 58-7. 68 (m，1Η) ；ES-HRMS m/ z444. 1592 (M+H 計(jì)算444. 1557)。實(shí)施例29 (2S，4R)-4-(2-氟-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_2_ 甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺越1 (2S,4R)土(3-簠_2_氟苯某)_2_甲某二四氫-2H-吡_ 土甲腈的制各將2-(3-溴-2-氟苯基)乙腈(800毫克，3. 7毫摩爾，leq.)及(S) +碘_2-(2_碘 乙氧基)丙烷(1.27克，3. 74毫摩爾，leq.)溶于二甲基亞砜(10毫升)。將氫化鈉(331 毫克，8.3毫摩爾，2. 2eq.)添加至反應(yīng)混合物，于室溫?cái)嚢?小時(shí)。反以水(10毫升)及乙 酸乙酯(10毫升)稀釋應(yīng)混合物，對層加以分離。以IM HCl (1x10毫升)、水(1x10毫升) 及鹽水(1x10毫升)清洗有機(jī)相。于真空下濃縮有機(jī)相，提供(2S，4R)-4-(3-溴-2-氟苯 基)-2_甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈及(25，45)-4-(3-溴-2-氟苯基)-2_甲基-四 氫-2H-吡喃-4-甲腈的非對映異構(gòu)體混合物(1 1)。通過反相色譜(40-90%的乙
選擇1室溫下，將4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(156毫克，0.67毫摩 爾，leq.)、(2S，4R)-4_(3-溴-2-氟苯基)-2_甲基-四氫_2H_吡喃_4_甲腈(200毫克， 0. 67 毫摩爾，leq.)、四鈀(42. 8 毫克，0. 07 毫摩爾，0. 05eq.)及 DPEphos (19. 9 毫克，0. 07 毫摩爾，0. 05eq.)、叔丁氧化鉀(2.01毫升的THF中的1M，2. 01毫摩爾，3eq.)于異丙醇 (5毫升)中混合。氮?dú)獯蹬萁?jīng)過反應(yīng)混合物，進(jìn)行5分鐘。溶液加熱至65°C，持續(xù)24小 時(shí)。將溶液冷卻至室溫，以乙酸乙酯(5毫升)及水(5毫升)稀釋。層被分離，以乙酸乙 酯(2x5毫升)萃取水性相。于硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)相，減壓移除溶劑。通過反相色譜 (40-90%的乙腈-水)分離形成的油，產(chǎn)生想要的產(chǎn)物(220毫克，80%)。IHNMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 18 (d, J = 5. 86Hz,3H) 1. 66-1. 77 (m, 1H) 1. 95-2. 06 (m, 1H) 2. 22 (dd, J = 35. 87，13. 18Hz，2H)3. 68-3. 80 (m, 2H) 3. 83(s，3H)4. 02 (dd, J = 12. 44，2. 93Hz，1H) 6. 41 (s， 1H)7. 27-7. 58 (m, 8H) ；ES-HRMS m/z 408. 1634(M+H 計(jì)算408. 1516)。選擇2于氮氛圍下，將(25，4幻-4-(3-溴-2-氟苯基)-2-甲基-四氫-2!1-吡喃-4-甲腈 (80克，268毫摩爾)、4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(62克，268毫摩爾)、 四(三苯基膦)鈀(17克，15毫摩爾)、雙(2- 二苯基膦基苯基)醚(8克，15毫摩爾)及 四丁基銨溴化物(4克，13毫摩爾)在甲苯(800毫升)中混合到一起。將2. 5M氫氧化鈉 (365毫升，912毫摩爾)添加至混合物中，對混合物進(jìn)行加熱回流。反應(yīng)通常在3小時(shí)內(nèi)完 成。將混合物冷卻至25°C，對相加以分離。以無水流酸鎂干燥有機(jī)相，減壓下抽去溶劑。通 過正相色譜純化粗制產(chǎn)物。產(chǎn)物(89克)以無定形硬玻璃質(zhì)材料獲得。步驟3 :(2S,4R)-4-(2-氟-3-(4-(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基硫基)苯 某)-2_甲某-四氫-2Η-吡_ -4-甲酰胺的制各將(2S，4R) -4- (2_氟_3_ (4_ (1_甲基-IH-吡唑_5_基)苯基硫基)苯基)_2_甲
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腈-水)分離非對映異構(gòu)體混合物，獲得標(biāo)題化合物(252毫克，23%)，其呈單一異構(gòu)物。 通過 NMR 確認(rèn)立體化學(xué)。(2S，4R) :1H NMR(400MHz，氯仿-d) ^ppm 1. 26 (d, J = 6. 2Hz, 3H) 1. 81 (dd, J = 13. 2，11. OHz, 1Η)2· 08-2. 26 (m, 3Η) 3. 89-4. 02(m，2H)4. 04-4. 16 (m, 1Η) 6. 99-7. 13 (m, 1Η) 7. 32-7. 44 (m, 1Η) (s, 1Η) 7. 51-7. 63 (m, 1Η) ；LC/MS (M+H)= 298(100% ) ,300(98. 5% ). (2S，4S) :1H NMR (400MHz，氯仿 _d) δ ppm 1. 22 (d, J = 6. 2Hz, 3H)2. 05 (dd, J = 14. 5，10. 7Hz, 1H)2. 25-2. 44 (m, 1H) 2. 49-2. 63(m，2H)3. 44-3. 59 (m, 2H) 3. 86-3. 99 (m, 1H) 7. 02-7. 13 (m, 1H) 7. 19-7. 31 (m, 1H) (s, 1H) 7. 53-7. 64 (m, 1H) ；LC/ MS (M+H) = 298 (100% ), 300 (98. 5% ) 步驟2 :(2S,4R)-4-(2-氟-3-(4_(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基硫基)苯
基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(200毫克，0. 49毫摩爾，Ieq.)及氫氧化鉀(428毫克，7. 6毫摩 爾，15eq.)溶于叔丁基醇(5. 0毫升)。于60°C對混合物攪拌24小時(shí)。以水(10毫升)稀 釋混合物，以乙酸乙酯(2x10毫升)萃取。有機(jī)相被濃縮成固體。通過反相色譜(40-90% 的乙腈-水)純化粗制固體，提供標(biāo)題產(chǎn)物(100毫克，48% )，其呈固體。IH NMR(400MHz, 氯仿-d) δ ppm 1. 22 (d, J = 6. 18Hz, 3H) 1. 61 (dd, J = 13. 43，11. 28Hz，1H) 1. 94-2. 03 (m， 2H) 2. 37-2. 51 (m, 2H) 3. 89 (s,3H) 3. 91-3. 98 (m, 2H) 5. 38 (br. s.，2H) 6. 31 (d, J = 2. 15Hz, 1H)7. 13 (t，J = 7. 92Hz, 1H) 7. 21-7. 24 (m, 1H) 7. 33-7. 39 (m, 5H) 7. 52 (d, J=L 88Hz, 1H)； ES-HRMS m/z 426. 1645(M+H 計(jì)算426. 1651)。促講最終化合物的手件純度的稈序以 Berger MultiGram II SFC 色譜分析儀，使用 Chiral Technologies，Inc 的 Chiralpak AS-H 30x250mm柱進(jìn)行分離。使用30% Me0H/70% C0270毫升/分鐘進(jìn)行等強(qiáng)度 洗脫。樣品以3毫克/毫升，5毫升/注射，注射至MeOH內(nèi)。在(2S，4R)-4-(2-氟-3-(4-(l-甲 基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)-2_甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈的情況下，獲 得兩個峰，峰1是微量的對映異構(gòu)體，峰2是主要對映異構(gòu)體。分析以Chiralpak AS-H 4. 6x250mm 柱，20% Me0H/80 % CO2 進(jìn)行；峰 1 于 RT = 4. 446 分時(shí)洗脫，峰 2 于 RT = 6. 345 分時(shí)洗脫。實(shí)施例29bis (2S,4R)-4_(2-氟-3-(4-(l-甲基 _1Η_ 吡唑 _5_ 基)苯基硫基)苯基)_2_ 甲 某-四氫-2Η-__-4-甲腈，甲苯磺酸鹽，1 1摩爾比例將(25,4捫-4-(2-氟-3-(4-(1-甲基-1!!-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_2_甲 基-四氫-2Η-吡喃-4-甲腈-S卩，實(shí)施例29的步驟2制備的化合物-(4. 5克，11. 0毫摩 爾)及對甲苯磺酸(2. 3克，12. 1毫摩爾)在乙酸乙酯(68毫升)中混合到一起。對混合物 加熱至回流，且保持為均質(zhì)。將混合物冷卻至65°C，且保持至結(jié)晶開始。將混合物冷卻至 60°C，且保持30分鐘。將混合物冷卻至25°C，且保持60分鐘?；旌衔锉贿^濾，以乙酸乙酯 清洗固體。獲得白色固體(5. 81克，90%)。TGA/SDTA 分析同時(shí)使用Mettler TGA/SDTA851e熱解重量分析器和差式分析器，來收集重量損失 及樣品溫度對溫度的數(shù)據(jù)。將樣品密封于40 μ L的可刺穿的鋁膠囊內(nèi)。從20°C以5°C/分 鐘加熱樣品，至最高達(dá)40i)°C最大值。使用銦校正溫度及仿真的熱流軸系。TGA/SDTA軌跡 顯示于圖2中。粉末X-射線衍射方法粉末X-射線衍射圖案是使用Bruker D-SAdvance衍射計(jì)測量的。此系統(tǒng)使用 維持于40kV及40mA的銅X-射線源以提供具(Kaave) 1.54184 A的強(qiáng)度重量平均的CuKa ^1.5406 A)及Cu Ka2(1.54439人)輻射。用閃爍計(jì)量器進(jìn)行檢測。使用0.02° /點(diǎn) 的步階式掃描，及1秒/點(diǎn)的計(jì)量時(shí)間，于3至35°范圍的2-Θ收集數(shù)據(jù)。所有分析中， 使用放置于于Bruker塑料取樣杯架中的制造鋁嵌件。樣品原樣被操作，分析期間被旋轉(zhuǎn)以 使得優(yōu)選的定向達(dá)最小。測得的圖案顯示于下文中(峰位置源于圖1的PXRD圖案；2 θ角 士 0. 1 度)
實(shí)施例30 (2S，4R)-4-(3-(3-氟-4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_2_ 甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺步驟1 :S-3_氟-4-(l-甲某-IH-吡啤_5_某)苯某乙烷硫醇鹽的制各將S-3-氟-4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(2. 00克，7. 8毫摩爾， Ieq)、叔丁氧化鈉(753毫克，7. 8毫摩爾，Ieq)、乙酸鈀(35. 2毫克，0. 157毫摩爾)及(1， 1'-雙(二苯基膦)二茂鐵-二氯鈀(115毫克，0. 157毫摩爾)溶于1，4 二惡烷(20毫 升)。于室溫對混合物攪拌1小時(shí)。添加三異丙基硅烷硫醇(1. 49克，7. 80毫摩爾)。形成 的混合物加熱回流1小時(shí)，然后，傾倒至乙酸乙酯(30毫升)內(nèi)。以水(1x20毫升)及鹽水 (1x30毫升)清洗有機(jī)物，然后，于硫酸鈉上干燥。蒸發(fā)有機(jī)物，獲得粗制油。將油溶于16毫 升的THF中的四丁基銨氟化物溶液(IM)中，于室溫下攪拌10分鐘。將乙酸酐(7. 42毫升) 添加至反應(yīng)混合物，攪拌20分鐘。將反應(yīng)混合物傾倒至水(25毫升)內(nèi)，以二氯甲烷(2x20 毫升)萃取。以鹽水(1x20毫升)清洗有機(jī)相，于硫酸鈉上干燥，并濃縮。通過色譜(庚烷 /乙酸乙酯)(0-100% )純化形成的油，提供琥珀色油。不進(jìn)行進(jìn)一步純化。LCMS(M+1)= 251。步驟2 (2S, 4R) ~4~ (3~ (3~氟(1_甲基-IH-吡唑_5_基)苯基硫基)苯 某)-2_甲某-四氫-2H-吡喃-4-甲腈的制各于室溫下，將S-3-氟-4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(692毫克， 2. 76毫摩爾，1. leq)、(2S，4R) _4_ (3_溴苯基)_2_甲基-四氫_2Η_吡喃_4_甲腈(700毫克， 2. 50毫摩爾，leq)、四(三苯基膦)鈀(150毫克，0. 130毫摩爾，0. 05eq)及DPEphos (70. 0毫 克，0. 130毫摩爾，0. 05eq)、叔丁氧化鉀(7. 50毫升的THF中的1M，7. 49毫摩爾，3eq)在異丙 醇(10毫升)中混合。將氮?dú)獯蹬萁?jīng)過反應(yīng)混合物，進(jìn)行5分鐘。將溶液加熱至65°C持續(xù)24 小時(shí)。將溶液冷卻至室溫，以乙酸乙酯(5毫升)及水(5毫升)稀釋。對層加以分離，以乙酸 乙酯(2x5毫升)萃取水性相。合并的有機(jī)相于硫酸鈉上干燥，減壓移除溶劑。通過反相色譜
(40-90%的乙腈-水)分離形成的油，產(chǎn)生想要的產(chǎn)物(620毫克，61%)。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) d ppm 1. 17 (d, J = 5. 86Hz,3H) 1. 66-1. 74 (m, 1H) 1. 94-2. 03 (m, 1H) 2. 07-2. 14 (m, 1H)2. 20 (d, J = 13. 18Hz，1H)2. 47-2. 50(m，2H)3. 72(s，3H)4. 03(dd，J = 12. 45，2. 93Hz， 1H) 6. 38 (s，1H) 7. 15 (d, J = 8. 05Hz, 1H) 7. 25 (d, J = 10. 25Hz, 1H) 7. 44-7. 51 (m, 3H) 7. 55 (t, J = 7. 69Hz, 1H) 7. 59-7. 63 (m, 1H) 7. 65-7. 68 (m, 1H)。ES-HRMSm/z 408. 1584 (M+H 計(jì)算 408.1546)。步驟3 :(2S,4R)-4-(3-(3-氟-4-(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)苯基硫基)苯 某)-2_甲某-四氫-2Η-吡_ -4-甲酰胺的制各將(2S，4R) _4_ (3_ (3_氟_4_ (1_甲基-IH-吡唑_5_基)苯基硫基)苯基)~2~甲 基-四氫-2Η-吡喃-4-甲腈(380毫克，0. 93毫摩爾，Ieq)及氫氧化鉀(812毫克，14. 5毫摩 爾，15. 5eq)溶于叔丁基醇(5. 0毫升)中。于60°C對混合物攪拌24小時(shí)。以水(10毫升) 稀釋混合物，以乙酸乙酯(2x10毫升)萃取。濃縮有機(jī)相至固體。通過反相色譜(40-90% 的乙腈-水)純化粗制固體，提供標(biāo)題產(chǎn)物(210毫克，53% )，其呈固體。IH NMR (400MHz, DMS0-d6) d ppm 1. 10 (d，J = 5. 86Hz，3H) 1. 23-1. 33 (m，1H) 1. 59 (td，J = 12. 81，4. 39Hz， 2H)2. 58 (d, J = 13. 18Hz，lH)3. 39-3. 51(m，2H)3. 71(s，3H)3. 84(dd，J = 11. 71，2. 93Hz， 1H) 6. 37 (s，1H) 7. 04-7. 17 (m, 3H) 7. 30-7. 54 (m, 7H)。ES-HRMS m/z426. 1589 (M+H 計(jì)算 408.1651)。實(shí)施例31(2S，4R)-4_(2-氟-3_(3_ 氟 _4-(1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基)苯基硫基)苯 基)-2-甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺步驟(2S,4R)-4-(2-氟-3-(3_氟-4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯 基)-2-甲某-四氫-2H-吡_ -4-甲腈的制各于室溫下，S-3-氟-4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(539毫克， 2. 15毫摩爾，1. leq)、(2S，4R)_4_(3_溴_2_氟苯基)_2_甲基-四氫_2Η_吡喃_4_甲 腈(580毫克，1.94毫摩爾，leq)、四(三苯基膦)鈀(117毫克，0. 101毫摩爾，0.05eq)及 DPEphos (54. 4毫克，0. 101毫摩爾，0. 05eq)、叔丁氧化鉀(5. 84毫升的THF中的1M，5. 84毫 摩爾，3eq)于異丙醇(10毫升)內(nèi)混合。氮?dú)獯蹬萁?jīng)過反應(yīng)混合物，進(jìn)行5分鐘。將溶液加熱 至65°C，持續(xù)24小時(shí)。將溶液冷卻至室溫，以乙酸乙酯(5毫升)及水(5毫升)稀釋。對層 加以分離，以乙酸乙酯(2x5毫升)萃取水性相。于硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)相。通過反相色 譜(40-90%的乙腈-水)分離形成的油，產(chǎn)生想要的產(chǎn)物(274毫克，33%)。lHNMR(400MHz， DMS0-d6) d ppm 1. 19 (d, J = 5. 86Hz，3H) 1. 68-1. 77 (m，1H) 2. 02 (td，J = 12. 81，4. 39Hz， 1H)2. 20 (d, J = 13. 91Hz, 1H) 2. 29 (d, J = 13. 18Hz，1H) 3. 69-3. 81 (m，5H) 4. 03 (dd，J = 12. 45，2. 93Hz, 1H)6. 39 (s, 1H) 7. 15 (d, J = 8. 05Hz, 1H) 7. 29 (d, J = 10. 25Hz, 1H) 7. 38 (t, J=8. 05Hz, 1H) 7. 46-7. 52 (m, 2H) 7. 57 (q, J = 7. 57Hz,2H)。ES-HRMS m/z 426. 1445 (M+H 計(jì) 算426. 1451)。步驟2 :(2S,4R)-4-(2-氟-3_(3-氟-4-(l-甲基 _1Η_ 吡唑 基)苯基硫基) 苯某)-2_甲某-四氫-2H-吡_ -4-甲酰胺的制各將(2S，4R)-4_(2-氟_3-(3_ 氟 _4-(1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基)苯基硫基)苯 基)-2_甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(160毫克，0. 376毫摩爾，Ieq)及氫氧化鉀(812 毫克，14. 5毫摩爾，15. 5eq)溶于叔丁基醇(5. 0毫升)。于60°C對混合物攪拌24小時(shí)。 以水(10毫升)稀釋混合物，以乙酸乙酯(2x10毫升)萃取。有機(jī)相濃縮成固體。通過 反相色譜(40-90%的乙腈-水)純化粗制的固體，提供標(biāo)題產(chǎn)物(115，69%)，其呈固 體。IH NMR(400MHz，DMS0-d6)d ppm 1. 08 (d，J = 5. 86Hz，3H) 1. 37-1. 45 (m，1H) 1. 77 (td， J = 13. 00，4. 76Hz, 1H) 2. 36 (d, J = 13. 18Hz, 1H) 2. 44 (d, J = 13. 18Hz, 1H) 3. 57-3. 70 (m, 2H)3. 71(s，3H)3. 79 (dd, J = 11. 71，2. 93Hz, 1H)6. 38 (s，1H)7. 04-7. 17(m，4H)7. 30 (t, J =8. 05Hz, 1H) 7. 41-7. 48 (m, 2H) 7. 49-7. 51 (m, 1H) 7. 54 (t, J = 7·32Ηζ，1Η)。ES-HRMS m/z 444. 1521 (M+H 計(jì)算444. 1557)。實(shí)施例32 (2S，4R)-4_(3-氟-5_(3_ 氟 _4-(1_ 甲基 _1Η_ 吡唑 _5_ 基)苯基硫基)苯 基)-2-甲基-四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺步驟1 :(25,4捫-4-(3-氟-5-(3-氟-4-(1-甲基-IH-吡唑基)苯基硫基) 苯某)-2_甲某-四氫-2Η-吡_ -4-甲腈的制各于室溫下，將S-3-氟-4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(349毫 克，1.39毫摩爾，1. leq)、(2S，4R) _4_ (3_溴_2_氟苯基)_2_甲基-四氫_2Η_吡喃_4_甲 腈(375毫克，1.26毫摩爾，leq)、四(三苯基膦基)鈀(75毫克，0. 065毫摩爾，0. 05eq)及 DPEphos (35毫克，0. 065毫摩爾，0. 05eq)、叔丁氧化鉀(3. 77毫升的THF中的1M，3eq)于異 丙醇(10毫升)中混合。氮?dú)獯蹬萁?jīng)過反應(yīng)混合物，進(jìn)行5分鐘。溶液加熱至65°C，持續(xù)24 小時(shí)。將溶液冷卻至室溫，以乙酸乙酯(5毫升)及水(5毫升)稀釋。對層加以分離，以乙酸 乙酯(2x5毫升)萃取水性相。于硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)相，減壓移除溶劑。通過反相色譜 (40-90%的乙腈-水)分離形成的油，產(chǎn)生想要的產(chǎn)物(300毫克，56%)。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) d ppm 1. 17 (d, J = 5. 86Hz,3H) 1. 66-1. 74 (m, 1H) 1. 98 (td, J = 13. 00,4. 76Hz, 1H) 2.08-2. 14 (m, 1H)2. 21 (d, J = 13. 91Hz, 1H) 3. 62-3. 71 (m, 2H) 3. 73 (s, 3H) 4. 02 (dd, J =12. 45，2. 93Hz, 1H) 6. 41 (s, 1H) 7. 25-7. 33 (m, 2H) 7. 39-7. 47 (m, 3H) 7. 50-7. 56 (m, 2H)。 ES-HRMS m/z 426. 1565 (M+H 計(jì)算426. 1451)。步驟2 :(2S,4R)-4-(3-氟-5_(3-氟-4_(1-甲基 _1Η_ 吡唑 基)苯基硫基) 苯某)-2-甲某-四氫-2H-吡_ -4-甲酰胺的制各將(2S，4R)-4_(3-氟_5-(3_ 氟 _4-(1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基)苯基硫基)苯
80基)-2_甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(169毫克，0. 397毫摩爾，Ieq)溶于二甲基亞砜 (6.0毫升)中。將氫氧化鈉(0.476毫升，2. 5N)添加至反應(yīng)混合物，其后添加過氧化氫 (0. 476,35% )0于室溫對混合物攪拌10分鐘。以乙酸乙酯(10毫升)稀釋混合物，并以 水(1x10毫升)、鹽水(1x10毫升)清洗。于硫酸鈉上干燥有機(jī)相，并濃縮成固體。通過 反相色譜(40-90%的乙腈-水)純化粗制的固體，提供標(biāo)題產(chǎn)物(117，66%)，其呈固體。 IH NMR(400MHz, DMS0_d6) dppm 1. 10 (d, J = 5. 86Hz, 3H) 1. 23-1. 32 (m, 1H) 1. 58 (td, J = 12. 81,4. 39Ηζ, 1Η)2· 46 (br. s.，1H) 2. 57 (br. s.，1H) 3. 41-3. 50 (m, 2H) 3. 73(s，3H)3. 84 (dd, J = 11. 71,2. 93Hz, 1H) 6. 40 (s, 1H) 7. 15-7. 23 (m, 4H) 7. 27-7. 32 (m, 2H) 7. 37 (s, 1H) 7. 47-7. 53 (m, 2H)。ES-HRMS m/z 444. 1606 (M+H 計(jì)算:444· 1557)。實(shí)施例33 4-{3-[3-氟-4-(2-甲基_2!1-吡唑-3-基甲基)苯基硫烷基]-苯基}-四氫-吡 喃-4-羧酸酰胺步驟1 :5-(4_溴-2-氟-苯甲基)_1_甲基吡唑的制備將1-甲基-IH-吡唑-5-基硼酸(224毫克，1. 78毫摩爾，Ieq. )、4_溴_1_(溴甲 基)-2_氟苯(500毫克，1. 87毫摩爾，1. 05eq. )、Pd (PPh3) 4 (0. 05eq.)及2N水性的碳酸鈉溶 液(2.4eq)加入到甲苯乙醇(4 3)中，且以氮?dú)獯祪?。?0°C對反應(yīng)混合物加熱2_20 小時(shí)。反應(yīng)混合物被濃縮。以醚萃取殘?jiān)?，于硫酸鈉上干燥，過濾并濃縮。通過快速色譜分 離純化粗制材料，以己烷中的0-100%二氯甲烷的梯度洗脫，獲得得0. 60克的中間產(chǎn)物，其 呈粗制的油。APCI (+) = 269，271步驟2 :4-{3-「3-氟-4-(2_甲基_2H_吡唑基甲基)苯基硫烷基]-苯基丨-四 氫_吡喃-4-羧酸酰胺的制備向無水異丙醇中的4-(3-(三異丙基硅烷基硫基)苯基)_四氫-2H-吡喃_4_甲 酰胺(630毫克，1.60毫摩爾，1. Oeq)的溶液，添加5_ (4-溴_2_氟-苯甲基)甲基吡唑 (430 毫克，1. 60 毫摩爾，1. Oeq)、四乙基氯化銨(Ieq)、氟化銫(1. Oeq)、DPEPhos (0. 066eq) &Pd(PPh3)4(0.22eq)。對混合物脫氣，以氮?dú)馓畛洹Ｈ缓?，添加叔丁氧化鉀溶?1M， THF內(nèi)，2eq)，于70°C加熱形成的混合物并攪拌持續(xù)15小時(shí)。于減壓下移除溶劑。以硅膠 使得殘?jiān)蕽{體，通過快速色譜純化，其中使用1-5%甲醇/氯仿作為洗脫劑，分離出17 毫克(4%)的標(biāo)題產(chǎn)物,其呈白色固體。IH NMR(DMS0-D6，300MHz) d ppm :7. 43-7. 36 (m， 3H)，7. 42-7. 24 (m, 6H)，7. 28-7. 17 (m, 4H)，7. 10-7. 04 (m, 3H)，5. 90 (d, J=L 7Hz, 1H)， 4. 01 (s. 2H)，3. 75 (s, 3H)，3. 71 (dm, J=Il. 6Hz,2H)，3. 41 (bt, J = 10. 2Hz,2H) ,2. 5)s, 3H)， 2. 39 (bd, J = 13. 8Hz，2H)，1. 77(m，2H)。APCI (+)m/z = 426amu。實(shí)施例34 4-[3-({4-[(1-甲基-IH-吡唑_5_基)羰基]苯基}硫基)苯基]四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺^M 1 (4-氟龍某)(1-甲某-1H-5-某)甲醇的制各將1-甲基-IH-吡唑(1. 32克，16. 1毫摩爾)溶于無水THF(50毫升)中。將溶 液冷卻至-78 V，經(jīng)油注射器添加1. 6M的nBuLi溶液(1. 2equiv)。于_78°C對溶液攪拌5 分鐘，之后添加4-氟苯甲醛(2.0克，16. 1毫摩爾)。然后，移除冰浴，且使混合物平衡達(dá)室 溫，攪拌1小時(shí)。然后，通過添加IN氯化銨(25毫升)淬滅反應(yīng)。以乙酸乙酯(50毫升)及 水(25毫升)稀釋反應(yīng)。層狀物被合并，收集有機(jī)相，以水再次清洗。有機(jī)層被干燥(硫酸 鈉)及濃縮，產(chǎn)生(4-氟苯基)(1-甲基-1H-5-基)甲醇，呈黏稠油。產(chǎn)率=3. 1克，93%。步驟2 (4-氟苯基)(1-甲基-IH-吡唑_5_基)甲酮的制備將(4-氟苯基)(1_甲基-1H-5-基)甲醇(3. 1克，15. 1毫摩爾)懸浮于乙腈(20 毫升)中。添加氯鉻酸吡啶(6.4克，30.2毫摩爾))，于501對反應(yīng)加熱4小時(shí)。將水(20 毫升)添加至反應(yīng)混合物，造成沉淀物形成。使用吸濾收集沉淀物。以水充份清洗，于真空 下干燥，提供產(chǎn)物，(4-氟苯基)(1_甲基-IH-吡唑-5-基)甲酮，其呈米色固體。產(chǎn)率= 1.65 克，53%。IH NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 4. 23(s,3H)6. 66 (s, 1H) 7. 20 (t，J = 8. 45Hz， 2Η) 7. 55 (s，1Η) 7. 95 (dd, J = 8. 19，5. 63Ηζ,2Η)。步驟3:4-「3-({4-「(1-甲基_1Η_吡嗶_5_基)羰基1苯基丨硫基)苯基1四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺的制備將(4-氟苯基-1-甲基-IH-吡唑-5-基)甲酮(250毫克，1. 2毫摩爾)及 4-{3_[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(482毫克，1.2毫摩 爾)添加至甲苯/THF的1 1溶液(20毫升)。將混合物加熱至80°C，其變得均質(zhì)。添加 四正丁基銨氟化物(1.5equiV，呈THF中的IM溶液)，于80°C攪拌，持續(xù)12小時(shí)。將反應(yīng)冷 卻至室溫。細(xì)微的棕色沉淀物在5小時(shí)期間形成。通過吸濾收集沉淀物，4-[3-({4-[(1_甲 基-IH-吡唑-5-基)羰基]苯基}硫基)苯基]四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺，以水及乙基醚 清洗。產(chǎn)率=265 毫克，51%。IHNMR(400MHz，DMS0-d6) δ. ppm 1. 75-1. 87 (m, 2H) 2. 42 (d, J =13. 18Ηζ，2Η)3· 48(t, J = 10. 61Ηζ，2Η)3· 74(d, J = 11. 35Ηζ，2Η)4· 07(s，3H)6. 75(d, J = 2. 20Hz, 1H) 7. 03 (br. s.，1H) 7. 24 (br. s.，1H) 7. 30 (d, J = 8. 42Hz,2H) 7. 41 (d, J = 4. 03Hz, 1H) 7. 48 (d, J = 4. 76Hz,2H) 7. 55 (s, 1H) 7. 57 (d, J = 2. 20Hz, 1H) 7. 80 (d, J = 8. 42Hz,2H)。 HRMS 計(jì)算 M+H:422. 1538，發(fā)現(xiàn) 422. 1651。實(shí)施例35
82 4-[3-({4-[(l-甲基_1Η_吡唑_5_基)甲基]苯基}硫基)苯基]四氫-2Η-吡 喃-4-甲酰胺步驟1 :5-(4_溴苯甲基)-1_甲基-IH-吡唑的制備將0.25克的4-溴苯甲基溴化物、0.208克的1_甲基_5_ (4，4，5，5_四甲基-1，3， 2-二惡硼烷-2-基)-IH-吡唑及0. 022克的四-(三苯基膦)鈀(0)置于以隔膜密封的玻 璃瓶內(nèi)，抽真空/以氮?dú)馓畛淙巍Ｈ缓螅砑?毫升的1，4_ 二惡烷，其后，添加2毫升的 IM碳酸銫。于室溫對混合物攪拌30分鐘，于70°C加熱4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，以水稀釋， 以乙酸乙酯萃取。以硫酸鈉干燥乙酸乙酯，過濾，濃縮，通過反相HPLC純化殘?jiān)?，產(chǎn)生0. 13 克的產(chǎn)物。LCMS(M+H) :2520步驟2 :4-「3-({4-「(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)甲基1苯基丨硫基)-苯基1四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺的制備將0. 59克的4-(3_(三異丙基硅烷基硫基)苯基)四氫_2Η_吡喃_4_甲酰胺、 0. 253克的四乙基氯化銨、0. 04克的氧二 -2，1-苯撐基雙_( 二苯基膦)、0. 89克的鈀(0) 四-(三苯基膦)、0. 377克的5- (4-溴苯甲基)-1-甲基-IH-吡唑及0. 228克的氟化銫置于 反應(yīng)燒瓶內(nèi)，抽真空及以氮?dú)馓畛?次。添加10毫升的以氮?dú)獯祪舻漠惐?，其后，添?. 5 毫升的四氫呋喃中的1. OM叔丁氧化鉀。然后，令混合物回流2小時(shí)。冷卻后，以水稀釋反應(yīng) 混合物，以乙酸乙酯萃取。以硫酸鈉干燥干燥乙酸乙酯萃取物，過濾，濃縮，通過反相色譜純 化,產(chǎn)生 0. 202 克的產(chǎn)物。HRMS (Μ+Η)計(jì)算 408. 1746 觀察.408. 2033IHNMR (400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 71-1. 81 (m, 2H) 2. 36 (d, J = 13. 54Hz,2H) 3. 45 (t, J = 10. 80Hz,2H) 3. 71 (br. s.， 1H) 3. 68 (s, 4H) 4. 03 (s, 2H) 5. 98 (s, 1H) 6. 98 (br. s.，1H) 7· 11 (d, J = 6. 95Hz, 1Η) 7. 21 (d, J =8. 42Ηζ，3Η) 7. 26-7. 36 (m, 2Η) 7. 30 (d, J = 8. 78Ηζ，4Η)。實(shí)施例36 4-[3_({3-氯-4-[(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)羰基]苯基}硫基)苯基]四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺^M 1 (2-氯,-4-氟龍某)(1-甲某-IH-吡P半_5_某)甲醇的制各經(jīng)由注射器，向冷卻至_78°C的無水四氫呋喃(35毫升)中的N-甲基吡唑(1. 0 克，12. 18毫摩爾)的溶液中，添加1.6M的正丁基鋰(9.1毫升)溶液。于_78°C對反應(yīng)攪 拌5分鐘，之后添加2-氯-4-氟苯甲醛(1. 93克，12. 2毫摩爾)。然后，移除冰浴，于室溫 對反應(yīng)攪拌18小時(shí)。添加IM氯化銨(12毫升)，以乙酸乙酯(50毫升)稀釋反應(yīng)。分離層 狀物，以水(20毫升)及飽和氯化鈉(20毫升)清洗有機(jī)層，之后在無水硫酸鈉上干燥。過
4-[3-({4-[(1-甲基-IH-吡唑_5_基)羰基]-3-(三氟甲基)苯基}硫基)苯 基]四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺^M 1 (4-氟-2-(三氟甲某)苯某)(1-甲某-IH-吡卩半_5_某)甲醇的制各經(jīng)由注射器，向冷卻至_78°C的于無水四氫呋喃(35毫升)中的N-甲基吡唑(1. 0
84
濾，減壓下蒸發(fā)溶劑，提供粗制的黃色油。通過正相色譜純化，提供標(biāo)題化合物，其呈澄清的 油(0. 94 克)。LC/MS 5-100% 的乙腈 /tfa-水 /tfa (4 分鐘梯度)2. 87 分[_)+ = 241]。1H NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 7. 72 (1H, dd, J = 8. 8,6. 4Hz)，7· 43 (1H, dd, J = 8. 9,2. 6Hz)，7. 27-7. 38 (1H, m)，7. 24 (1H, d, J = 1. 7Hz)，6. 30 (1H, d, J = 5. 5Hz)，6. 01 (1H, d, J = 5. 5Hz)，5. 59 (1H, d, J = 1. 7Hz)，3. 86 (3H, s)2 (2-氯,-4-氟龍某)(1-甲某-IH-吡P半_5_某)甲酮的制各向乙腈(5毫升)中的(2-氯-4-氟苯基)(1-甲基-IH-吡唑-5-基)甲醇(0. 94 克，3. 91毫摩爾)的懸浮液中，添加氯鉻酸吡啶(1. 26克，5. 86毫摩爾)。于50°C對反應(yīng)加 熱18小時(shí)。將水(13毫升)添加至反應(yīng)混合物，造成沉淀物形成。通過吸濾收集沉淀物，以 水(100毫升)充份清洗。然后，以乙基醚(100毫升)清洗沉淀物，二次濾液被合并。分離 層狀物，以水(50毫升)及飽和氯化鈉(50毫升)清洗有機(jī)層，之后在無水硫酸鈉上干燥。 過濾及于減壓下蒸發(fā)溶劑，提供標(biāo)題化合物，呈灰白色固體(0. 86克)。LC/MS 5-100 % 乙腈 /tfa-水 /tfa (4 分鐘梯度)3. 47 分鐘[(M+H)+ = 239]。1H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 7. 60-7. 74(2H，m)，7. 56(lH，d，J = 2. 0Hz)，7. 33-7. 43(lH，m)， 6. 53 (1H, d, J = 2. 0Hz)，4. 17 (3H, s)步驟3 :4-「3_({3-氯-4-「(l-甲基_1Η_吡唑基)羰基1苯基丨硫基)苯基1 四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備向二甲基甲酰胺(14毫升)中的(2-氯-4-氟苯基)(1-甲基-IH-吡唑_5_基) 甲酮(500毫克，2. 10毫摩爾)及4-{3_[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺(825毫克，2. 10毫摩爾)的溶液中，添加四氫呋喃中的1. OM四丁基銨氟化物 溶液(2. 72毫升，2. 72毫摩爾)，于室溫對反應(yīng)攪拌18小時(shí)。向反應(yīng)混合物添加水(50毫 升)，使產(chǎn)物沉淀。通過吸濾收集沉淀的產(chǎn)物，以水及乙基醚清洗。沉淀物經(jīng)真空干燥提供 標(biāo)題化合物，其呈黃色固體(0. 82克)。LC/MS 5-100 % 乙腈 /tfa-水 /tfa (4 分鐘梯度)3. 53 分鐘[(M+H) + = 456]。 1HNMR (400MHz, DMS0-d6) δ ppm 7. 37—7. 61 (6H，m)，7. 31 (2H，s), 7. 21 (1Η, dd, J = 8.0， 1. 7Hz)，7. 10 (1H, s)，6. 55 (1H, d, J = 2. OHz)，4. 15 (3H, s)，3. 66-3. 79 (2H, m)，3. 47 (2H, t, J = 10. 6Hz)，2. 42 (2H, d, J = 13. 7Hz)，1. 73-1. 89 (2H, m)實(shí)施例37
克，12. 18毫摩爾)的溶液中，添加1.6M的正丁基鋰溶液(9. 1毫升)。于-78°C對反應(yīng)攪 拌5分鐘，之后添加4-氟-2-三氟甲基苯甲醛(2. 34克，12. 2毫摩爾)。然后，移除冰浴， 于室溫對反應(yīng)攪拌18小時(shí)。添加IM氯化銨(12毫升)，以乙酸乙酯(50毫升)稀釋反應(yīng)。 分離層狀物，以水(20毫升)及飽和氯化鈉(20毫升)清洗有機(jī)層，之后在無水硫酸鈉上干 燥。過濾并減壓下蒸發(fā)溶劑，提供粗制的黃色油。通過正相色譜純化提供標(biāo)題化合物，其呈 黃色固體(1.39克)。LC/MS 5-100% 乙腈/tfa-水/tfa(4 分鐘梯度)3. 11 分鐘[(M+H)+= 275]。1H NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 7. 92 (1H, dd, J = 8. 6,5. 6Hz)，7. 57-7. 72 (2H, m)，7. 22 (1H, d, J = 1. 9Hz)，6. 42 (1H, d, J = 5. 6Hz)，6. 03 (1H, d, J = 5. 4Hz)，5. 49 (1H, d, J = 1. 9Hz)， 3. 84 (3H, s)2 (4-氟-2-(三氟甲某)苯某)(1-甲某-IH-吡卩半_5_某)甲酮的制各向乙腈(10毫升)中的(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)(1-甲基_1Η_吡唑_5_基) 甲醇(1. 37克，5. 0毫摩爾)的懸浮液，添加氯鉻酸吡啶(1. 62克，7. 49毫摩爾)。于50°C 對反應(yīng)加熱18小時(shí)。向反應(yīng)混合物中添加水(13毫升)，造成沉淀物形成。通過吸濾收集 沉淀物，以水(100毫升)充份清洗。然后，以乙基醚(100毫升)清洗沉淀物，二次濾液被 合并。分離層狀物，以水(50毫升)及飽和氯化鈉(50毫升)清洗有機(jī)層，之后在無水硫酸 鈉上干燥。過濾及減壓下蒸發(fā)溶劑，提供標(biāo)題化合物，其呈黃色油(1.23克)。LC/MS 5-100 % 乙腈 /tfa-水 /tfa(4 分鐘梯度)3. 54 分鐘[(M+H)+ = 273]。1H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 7. 77-7. 92(2H，m)，7. 65-7. 75(lH，m)，7. 56(lH，d，J = 2. 0Hz)， 6. 51 (1H, d, J = 2. 0Hz)，4. 17 (3H, s)步驟3 :4-「3-({4-「(l-甲基_1Η_吡嗶基)羰基1_3_(三氟甲基)苯基丨硫 基)苯基1四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備向二甲基甲酰胺(14毫升)中的(4-氟_2-(三氟甲基)苯基)(1-甲基-IH-吡 唑-5-基)甲酮(510毫克，1.87毫摩爾)及4-{3_[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(885毫克，2. 25毫摩爾)的溶液中，添加四氫呋喃中的四丁基銨 氟化物的1. OM溶液(2. 44毫升，2. 44毫摩爾)，于室溫對反應(yīng)攪拌18小時(shí)。將水(50毫 升)添加至反應(yīng)混合物，沉淀出產(chǎn)物。通過吸濾收集沉淀的產(chǎn)物，以水及乙基醚清洗。真空 干燥沉淀物，提供標(biāo)題化合物，其呈棕褐色固體(0.83克)。LC/MS 5-100%乙腈/tfa-水/ tfa (4 分鐘梯度)3. 57 分[(M+H)+ = 490]。1H 匪R (400MHz，DMS0-d6) δ ppm 7. 23-7. 74 (9H, m)，7. 09 (1H, s)，6. 54 (1H, d, J = 2. OHz)，4. 16 (3H, s)，3. 64-3. 83 (2H, m)，3. 47 (2H, t, J = 10. 5Hz)，2. 42 (2H, d, J = 13. 5Hz)，1. 68-1. 92 (2H, m)實(shí)施例38 4-[3-({3- 基-4-[(1-甲基-IH-吡唑_5_基)羰基]苯基}硫基)苯基]四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺向含有實(shí)施例36的化合物、氰化鈉(103毫克，2. 10毫摩爾)及溴化鎳(II) (230毫 克，1.05毫摩爾)的微波容器中，添加1-甲基-2-吡咯烷酮(5毫升)。將反應(yīng)置于200°C， 120W的微波裝置內(nèi)，進(jìn)行1分鐘。于乙酸乙酯(50毫升)及水(50毫升)間分配反應(yīng)混合 物。以鹽水(50毫升)清洗有機(jī)層，于硫酸鎂上干燥，過濾，蒸發(fā)提供粗制固體。通過反相 色譜純化提供標(biāo)題化合物，其呈灰白色固體(6毫克)。LC/MS 5-100 % 乙腈 /tfa-水 /tfa(5 分鐘梯度)4· 62 分[(Μ+Η)+ = 447]。 1HNMR (400MHz, DMS0_d6) δ ppm 7. 70-7. 89 (2H, m)，7· 41-7. 66 (6Η, m)，7· 31 (1Η, br. s.)， 7. 10(lH,br. s.)，6. 74(lH，d，J = 2. 0Hz)，4. 13 (3H, s)，3. 73(2H，d，J = 11. 7Hz)，3. 47 (2H, t, J = 10. 4Hz)，2. 42 (2H, d, J = 13. 7Hz)，1. 72-1. 90 (2H, m)實(shí)施例39(2S，4R) _2_甲基_4_ (3_ (4_ (1_甲基_1Η_吡唑_5_羰基)苯基硫基)苯基)-四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺將如下文所示的實(shí)施例55的化合物(77毫克，0.18毫摩爾)溶于5毫升的 4 ITFA T2S04的溶液中。將混合物加熱至60°C，持續(xù)2小時(shí)。反應(yīng)被冷卻，以2. 5N NaOH 中和，萃取進(jìn)乙酸乙酯(5毫升)內(nèi)，于硫酸鎂上干燥，過濾，并濃縮成173毫克的油。通過反 相手性色譜分離產(chǎn)物，其以淡黃色固體獲得。IH NMR(400MHz,DMSO-(I6) δ ppm 7. 79(2H，m，J =8. 4Hz)，7. 57 (1H, d，J = 2. 2Hz)，7. 53 (1H, s)，7. 31-7. 50 (4H, m)，7. 27 (2H, m，J = 8. 4Hz)， 7. 12 (1H, s)，6. 75 (1H, d, J = 2. 2Hz)，4. 06 (3H, s)，3. 81-3. 88 (1H, m)，3. 39-3. 51 (2H, m)， 2. 55-2. 61 (2H, m)，1. 54-1. 64 (1H, m)，1. 24-1. 33 (1H, m)，1. 10 (3H, d, J = 6. 2Hz)。實(shí)施例40 (2S，4R) _2_甲基_4_ (3_ (4_ (1_甲基-IH-吡唑_5_羰基)苯基硫基)苯基)-四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺將(2S，4R)-4-(2-氟-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-羰基)苯基硫基)苯基)_2_甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(150毫克，0.36毫摩爾)溶于5毫升的4 ITFA H2SO4 溶液中。將混合物加熱至60°C持續(xù)2小時(shí)。反應(yīng)被冷卻，以2. 5N NaOH中和，萃取進(jìn)乙酸 乙酯(5毫升)內(nèi)，于硫酸鎂上干燥，過濾，并濃縮成173毫克的油。通過反相手性色譜分 離產(chǎn)物，其以淡黃色固體獲得。IH NMR (400MHz, DMS0_d6) δ ppm 7. 83 (2H, m, J = 8. 4Hz)，
7. 59-7. 65 (2H, m)，7. 51-7. 57 (1H, m)，7. 36 (1H, t, J = 7. 9Hz)，7. 29 (2H, m, J = 8. 4Hz)， 7. 09-7. 18(2H，m)，6. 81(lH，d，J = 2. 2Hz)，4. 11 (3H, s)，3. 80-3. 88(lH，m)，3. 63-3. 78 (2H, m)，2· 44(2H，d，J = 19. OHz)，1. 78-1. 87(lH，m)，1. 43-1. 52(lH，m)，1. 13(3H，d，J = 6. 2Hz)。 HRMS 計(jì)算 M+H 454. 1601，found 454. 1603。實(shí)施例414- (3- (5-氯-6- (1-甲基_1Η_吡唑_5_基氧)吡啶_3_基硫基)苯基)-四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺步驟1 甲基-IH-吡唑-5-醇的制備向反-3-甲氧基丙烯酸甲酯(2. 32克，20. 0毫摩爾)的MeOH (6毫升)溶液中，添 加甲基胼(0.92克，20.0毫摩爾)。于90°C對反應(yīng)攪拌18小時(shí)?；旌衔锉焕鋮s并被濃縮成 半固體，其不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 7. 02 (d, J=L 76Hz, 1H)，5· 23 (d, J=L 95Hz, 1H)，3. 42(s，3H)，2· 44 (dt, J = 3. 71，1. 86Hz, 1Η)。步驟2 :4-(3-(5-氯-6-(1-甲基-IH-吡唑-5-基氧)吡啶基硫基)苯基)-四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺的制備以碳酸銫(255毫克，0. 783毫摩爾)處理12毫升的NMP中的4_ {3_[ (5，6_ 二氯 吡啶-3-基)硫基]苯基}四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(310毫克，0. 809毫摩爾)及1_甲 基-IH-吡唑-5-醇(120毫克，0. 41毫摩爾)的溶液，于110°C對其攪拌1小時(shí)。反應(yīng)被 冷卻，通過反相色譜分離產(chǎn)物成淡黃色固體(21毫克，18% )。IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 8. 14 (dd, J = 8. 42,2. 20Hz, 1H)，7. 29-7. 41 (m, 3H)，7. 25 (s, 1H)，7. 16-7. 21 (m, 1H)， 7. 06 (s, 1H) ,6. 09 (d, J = 2. 20Hz, 1H) ,3. 70 (dt, J = 11. 81，3. 98Hz，2H)，3. 60 (s，3H)， 3. 40-3. 48(m，2H)，2· 31-2. 43 (m, 2H)，1. 70-1. 81(m，2H)。HRMS 計(jì)算 Μ+Η :445· 1101，發(fā)現(xiàn) 445. 1106。實(shí)施例424-(3-(5-氯-6-(1-甲基_1Η_吡唑_5_羰基)吡啶_3_基硫基)苯基)-四 氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺于氮氛圍下，將氫化鈉(27. 2毫克，0. 679毫摩爾)添加至于無水DMF(6毫升)中 的4-{3-[(5，6_ 二氯吡啶-3-基)硫基]苯基}四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(200毫克， 0. 522毫摩爾)、1_甲基-IH-吡唑-5-甲醛(57. 5毫克，0. 522毫摩爾)及1，3- 二甲基咪 4-(4-甲氧基-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_四氫_2H_吡 喃-4-甲腈禾口4-(4-甲氧基-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基硫基)苯基)_四氫_2H_吡 喃-4-甲酰胺^M 1 2-、遼_4-(、遼甲某)-1_甲氧某苯的制各向四氯化碳(40毫升)中的2-溴-1-甲氧基-4-甲基苯(2. 5克，12毫摩爾)的 溶液中，添加N-溴琥珀酰亞胺(2. 77克，15.5毫摩爾)及苯甲酰基過氧化物(0. 331克， 1. 37毫摩爾)?；亓?8小時(shí)后，將反應(yīng)冷卻至環(huán)境溫度，倒至水(200毫升)中，以二氯甲 燒(3x75毫升)萃取，于硫酸鎂上干燥，過濾，通過于減壓下的蒸發(fā)移除溶劑。通過在硅膠上 進(jìn)行快速色譜來純化殘?jiān)渲幸砸宜嵋阴ジ?5 95，以體積計(jì))改變至乙酸乙酯 庚烷(50 50，以體積計(jì))的溶劑梯度洗脫，提供標(biāo)題化合物(2.71克)，其呈油狀物。1H NMR(400MHz，氯仿 _d) δ ppm 3. 91 (s, 3H) 4. 45 (s, 2H) 6. 86 (d, J = 8. 60Hz, 1H) 7. 31 (dd，J = 8. 40，2. 15Hz, 1H) 7. 60 (d, J = 2. 15Hz, 1H)。LCMS :m/z [M-Br] 198. 9,200. 9。2 2-(3-、遼-4-甲氧,某苯某)乙腈的制各于氮?dú)庀?，向無水二甲基亞砜(30毫升)中的2-溴_4-(溴甲基)-1_甲氧基苯 (2. 71克，9. 68毫摩爾)的溶液中，添加氰化鈉(549毫克，10. 6毫摩爾)。2小時(shí)后，將反應(yīng) 倒至5%氯化鈉(200毫升)內(nèi)，以乙酸乙酯(3x75毫升)萃取，以鹽水(100毫升)清洗，于 硫酸鎂上干燥，過濾，通過減壓下蒸發(fā)移除溶劑。通過于硅膠上進(jìn)行的快速色譜純化殘?jiān)?其中以乙酸乙酯庚烷(5 95，以體積計(jì))改變成乙酸乙酯庚烷(50 50，以體積計(jì)) 的溶劑梯度洗脫，提供標(biāo)題化合物(1.45克)，其呈油狀物。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 3. 69 (s，2H) 3. 91 (s，3H) 6. 90 (d, J = 8. 40Hz, 1H) 7. 23-7. 27 (m, 1H) 7· 51 (d，J = 2. 15Hz, 1H)。越3 :4-(3-M-4-甲氧,某苯某)-四氫_2H_吡_ 土甲腈的制各于氬氣下，向無水N，N-二甲基甲酰胺(5毫升)中的2-(3_溴-4-甲氧基苯基)
唑氯(20. 8毫克，0. 157毫摩爾)的混合物中。將反應(yīng)加熱至65°C過夜。將反應(yīng)混合物倒 至冰水內(nèi)，以乙酸調(diào)整pH。以乙酸乙酯萃取產(chǎn)物，以水及飽和硫酸鈉清洗有機(jī)層，之后在 無水硫酸鈉上干燥。過濾，減壓下蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生固體，通過反相色譜對其加以純化，提供 想要的產(chǎn)物(4. 4 毫克)。1H NMR (400MHz, DMS0_d6) d ppm 1. 63-1. 93 (m, 2H) 2. 29-2. 47 (m, 2H) 3. 42-3. 58 (m, 2H) 3. 72 (dt, J = 11. 44，3. 98Hz，2H) 4. 17 (s，3H) 6. 71 (d，J = 2. 20Hz, 1H)7. 10 (s，1H)7. 29 (s，1H) 7. 41-7. 51 (m, 3H) 7. 54-7. 65(m，2H)7. 84 (d，J = 2. 20Hz, 1H)8. 36 (d, J=L 83Hz, 1H)。實(shí)施例43和44乙腈(500毫克，2. 21毫摩爾)的溶液中，添加氫化鈉(186毫克，4. 64毫摩爾)。攪拌1小 時(shí)后，添加2-氯乙基醚(0.556毫升，4. 64毫摩爾)，攪拌持續(xù)18小時(shí)。其后，將反應(yīng)倒至 水(150毫升)中，以乙酸乙酯(3x75毫升)萃取，以鹽水(100毫升)清洗，于硫酸鎂上干 燥，過濾，通過減壓下蒸發(fā)移除溶劑，提供標(biāo)題化合物(662毫克)，其呈油狀物。LCMS :m/ ζ [ΜΗ+] 295. 2，297. 2步驟4 :4-(4-甲氧基-3-(4-(1-甲基_1Η_吡唑基)苯基硫基)苯基)-四 氫-2Η-吡喃-4-甲腈的制備于氬氣下，向經(jīng)脫氣的1，4_ 二惡烷(10毫升)中的-(3-溴_4_甲氧基苯基)-四 氫-2Η-吡喃-4-甲腈(635毫克，2. 14毫摩爾)的溶液中，添加S_4-(l-甲基-IH-吡 唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(498毫克，2. 14毫摩爾)、乙酸鈀(48毫克，0. 214毫摩爾)及 雙(2- 二苯基膦基苯基)醚(57. 6毫克，0. 107毫摩爾)及叔丁氧化鈉(412毫克，4. 29毫 摩爾)。加熱至10(TC持續(xù)20分鐘后，將反應(yīng)冷卻至室溫，且倒至水(200毫升)中，并且過 濾。以乙酸乙酯(3x75毫升)萃取濾液，以鹽水(100毫升)清洗，于硫酸鎂上干燥，過濾，通 過減壓下蒸發(fā)移除溶劑。通過于硅膠上進(jìn)行的快速色譜純化殘?jiān)?，其中以乙酸乙酯庚?(50 50，以體積計(jì))改變成乙酸乙酯庚烷(100 0，以體積計(jì))的溶劑梯度洗脫，提供標(biāo) 題化合物(610 毫克)，其呈固體。1H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 91-2. 08 (m，4H) 3. 34 (s， 3H) 3. 54-3. 65 (m, 2H) 3. 84 (s, 3H) 3. 92-3. 96 (m, 1H) 3. 96-4. 00 (m, 1H) 6. 41 (d, J = 2. 20Hz, 1H) 7. 21 (d, J = 8. 79Hz, 1H) 7. 30 (d, J = 8. 05Hz,2H) 7. 36 (d, J = 2. 93Hz, 1H) 7. 46 (d, J = 2. 20Hz, 1H) 7. 51 (d，J = 8. 79Hz,2H) 7. 55 (dd, J = 8. 79,2. 93Hz, 1H)。LCMS :m/z [MH+] 406. 2。步驟5 :4-(4_甲氧基-3-(4-(1-甲基_1Η_吡嗶基)苯基硫基)苯基)_四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺的制備向叔丁醇(3毫升)中的4- (4-甲氧基-3- (4- (1-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基硫 基)苯基)-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(100毫克，0. 247毫摩爾)的溶液中，添加氫氧化鉀。 加熱至70°C持續(xù)18小時(shí)后，將反應(yīng)冷卻至環(huán)境溫度，倒至水(200毫升)中，以乙酸乙酯 (3x75毫升)萃取，以鹽水(100毫升)清洗，于硫酸鎂上干燥，過濾，通過減壓下蒸發(fā)移除溶 劑，提供標(biāo)題化合物(100毫克)，其呈固體。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 1.94-2. 07 (m， 2H) 2. 27-2. 31 (m, 1H) 2. 31-2. 37 (m, 1H) 3. 70-3. 79 (m, 4H) 3. 88 (s, 3H) 3. 89 (s, 3H) 5. 26 (br. s.，2H)6. 31(d，J = 1. 95Hz, 1H)6. 98 (d, J = 8. 59Hz，1H) 7. 28-7. 39 (m，6H) 7. 51 (d，J = 1. 95Hz,1H)。LCMS :m/z [MH+]424. 2實(shí)施例45 1 (4-、遼-3-氟龍某)(嗎啉某)甲酮的制各向二氯甲烷(50毫升)中的4-溴-3-氟苯甲酸(3.0克，14毫摩爾)的溶液中， 添加1-乙基-3(3’ -二甲基氨基丙基)甲二酰亞胺氫氯酸鹽(3. 41克，1. 3毫摩爾)、二甲基氨基吡啶(502毫克，4. 11毫摩爾)及嗎啉(1. 22克，14毫摩爾)。環(huán)境溫度下攪拌3小 時(shí)后，將反應(yīng)倒至水(300毫升)中，以水(2x100毫升)清洗，有機(jī)物于硫酸鎂上干燥，過 濾，通過減壓下蒸發(fā)移除溶劑，提供標(biāo)題化合物(3. 68克)，其呈油狀物。1H NMR(400MHz，氯 仿-d) δ ppm 3. 31-3. 92 (m, 8H) 7. 05-7. 13 (m, 1H) 7. 20(dd, J = 8. 40，1. 95Hz, 1H) 7. 62(dd, J =8. 20,6. 64Hz, 1H)。LCMS :m/z [MH+] 288. 0，290. 0。步驟2 :l-(4-溴-3-氟苯基)乙酮的制備于氬氣下，向以冰浴冷卻的無水四氫呋喃(45毫升)中的(4-溴-3-氟苯基)(嗎 啉基)甲酮(3. 14毫克，10. 9毫摩爾)的溶液中，添加甲基氯化鎂(1. 22克，16. 4毫摩爾)。 于冰浴溫度對反應(yīng)攪拌1小時(shí)，然后，加溫至環(huán)境溫度。將反應(yīng)倒至水(350毫升)內(nèi)，以乙 酸乙酯(3x75毫升)萃取，以鹽水(100毫升)清洗，于硫酸鎂上干燥，過濾，通過減壓下蒸 發(fā)移除溶劑，提供標(biāo)題化合物(2. 8克)，其呈液體。1H NMR(400MHz，氯仿_d) δ ppm 2. 60 (s, 3H) 7. 52-7. 77 (m, 3H)。步驟3 5-(4~溴-3-氟苯基)_1_甲基-IH-吡唑的制備向N，N-二甲基甲酰胺(10毫升)中的1-(4-溴-3-氟苯基)乙酮(2. 8克，12毫 摩爾)的溶液中，添加N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(3. 45毫升，26毫摩爾)。對反應(yīng)加 熱回流3小時(shí)，將其冷卻至室溫，以甲基胼(2. 5毫升，46毫摩爾)處理，加熱至75°C持續(xù)18 小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，以乙酸乙酯(3x75毫升)萃取，以鹽水(100毫升)清洗，于硫酸 鎂上干燥，過濾，通過減壓下蒸發(fā)移除溶劑。通過于硅膠上進(jìn)行的快速色譜純化殘?jiān)?，其?以乙酸乙酯庚烷(20 80，以體積計(jì))改變至乙酸乙酯庚烷(60 40，以體積計(jì))的溶 劑梯度洗脫，提供標(biāo)題化合物(1.66克)，其呈固體。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 3.91(s, 3H)6. 34 (d, J = 1.95Ηζ，1Η)7. 11 (dd, J = 8. 01，1. 76Hz，1H) 7. 20 (dd，J = 8. 99,1. 95Hz, 1H)7. 53(d, J = 1. 95Hz, 1H) 7. 65(dd, J = 8. 20，7. 03Hz, 1H)。LCMS :m/z [MH+] 255. 0,257. 0。步驟4 :S-2~氟-4-(l-甲基_1Η_吡嗶_5_基)苯基乙烷硫醇鹽的制備于氬氣下，向經(jīng)脫氣的無水1，4_ 二惡烷(13毫升)中的5-(4_溴-3-氟苯 基)-1_甲基-IH-吡唑(120毫克，0.470毫摩爾)的溶液中，添加乙酸鈀(8. 1毫克，0.036 毫摩爾)、雙(2- 二苯基膦基苯基)醚(9. 7毫克，0. 018毫摩爾)、碳酸銫(234毫克，0. 719 毫摩爾)及三異丙基硅烷硫醇(205毫克，0. 231毫升，1. 08毫摩爾)。將反應(yīng)加熱至95°C 持續(xù)45分鐘，冷卻至室溫，以乙酸酐(1.5毫升)處理，并攪拌18小時(shí)。反應(yīng)被過濾，以乙 酸乙酯(3x75毫升)萃取濾液，以鹽水(100毫升)清洗，于硫酸鎂上干燥，過濾，減壓下蒸 發(fā)移除溶劑。通過于硅膠上進(jìn)行的快速色譜純化殘?jiān)渲幸砸宜嵋阴ジ?5 95， 以體積計(jì))改變至乙酸乙酯庚烷(40 60，以體積計(jì))的溶劑梯度洗脫，提供標(biāo)題化合 物(50 毫克)，其呈固體。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 2. 50 (s, 3H) 3. 96 (s, 3H) 6. 38 (d, J =1. 95Ηζ, 1Η)7· 23-7. 29 (m, 2H) 7. 51 (dd, J = 8. 30，6. 93Hz, 1H) 7. 55 (d, J = 2. 15Hz, 1H)。 LCMS :m/z[MH+]251. 1步驟5 :4_(2-氟-3-(2-氟-4-(1-甲基_1Η_吡嗶基)苯基硫基)苯基)_四 氫-2H-吡喃-4-甲腈的制備于氬氣下，向經(jīng)脫氣的無水1，4_ 二惡烷(3毫升)中的S-2-氟-4-(l-甲 基-IH-吡唑-5-基)苯基乙烷硫醇鹽(100毫克，0.400毫摩爾)的溶液中，添加((2S，4幻-4-(3-溴-2-氟苯基)-2_甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈)(119毫克，.0400毫摩爾)、 乙酸鈀(13. 7毫克，0. 060毫摩爾)，及雙(2- 二苯基膦基苯基)醚(21. 5毫克，0. 040毫摩 爾)及碳酸銫(391毫克，1. 20毫摩爾)。加熱至85°C持續(xù)18小時(shí)后，將反應(yīng)冷卻至室溫， 過濾，并通過反相HPLC純化，提供標(biāo)題化合物(44毫克)，其呈玻璃狀固體。1H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 19 (d, J = 6. 22Hz,3H) 1. 72 (dd, J = 13. 18，10. 98Hz, 1H) 1. 96-2. 05 (m, 1H)2. 19 (dt, J = 13. 36，1. 19Hz，1H)2. 28(dt，J = 13. 45，2. 24Hz，1H) 3. 69—3. 81 (m， 2H) 3. 89 (s，3H) 4. 00-4. 06 (m, 1H) 6. 52 (d, J=L 83Hz, 1H) 7. 28-7. 35 (m, 2H) 7. 38-7. 51 (m, 4H) 7. 58-7. 63 (m, 1H)。LCMS :m/z [MH+] 425. 1。實(shí)施例46 4-(3-{[3-氟-4-(l-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫_2Η_吡 喃-4-甲腈向3毫升的二氯甲烷中的4-(3-{[3-氟-4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫 基}苯基)四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺(50毫克，0. 12毫摩爾)的溶液中，添加吡啶(0.099 毫升，1. 22毫摩爾)，其后添加三氟乙酸酐(0. 119毫升，0. 854毫摩爾)。于室溫對反應(yīng)攪拌 30分鐘，并蒸發(fā)成殘?jiān)?。通過反相色譜純化提供標(biāo)題化合物。IH NMR (400MHz，DMS0-d6) δ ppm 7. 42-7. 75(6H，m)，7· 27 (1H, dd, J = 10. 6，1. 6Hz)，7. 16 (1H, dd, J = 8. 1，1. 6Hz)，6· 39 (1H, d, J = 1. 5Hz)，3. 95-4. 09 (2H, m)，3. 58-3. 78 (5H, m)，2. 01-2. 20 (4H, m)實(shí)施例474- (3- {[5-氯-6- (1-甲基-IH-吡唑_5_基)吡啶_3_基]硫基}苯基)四 氫-2H-吡喃-4-甲腈向3毫升的二氯甲烷中的4-(3-{[5_氯_6-(1_甲基-IH-吡唑_5_基)吡 啶-3-基]硫基}苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(35毫克，0.082毫摩爾)的溶液中，添 加吡啶(0. 066毫升，0. 82毫摩爾)，其后添加三氟乙酸酐(0. 08毫升，0. 574毫摩爾)。于室 溫對反應(yīng)攪拌30分鐘，并蒸發(fā)成殘?jiān)Ｍㄟ^反相色譜純化提供標(biāo)題化合物。IH NMR (400MHz, DMS0-d6) δ ppm 8.53(lH，d，J = 1. 8Hz), 8. 01 (1H, d, J = 2. OHz) ,7. 73 (1H, br. s.), 7. 47-7. 68 (4H, m)，6. 66 (1H, d, J = 2. OHz)，3. 95-4. 08 (2H, m)，3. 84 (3H, s)，3. 57-3. 73 (2H, m)，2. 00-2. 21(4H，m)
91
4-(3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]亞硫?；鶀苯基)四氫_2H_ 口比
92實(shí)施例48 4-(2-氟-3-{[4-(l-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫_2H_吡 喃-4-甲腈向3毫升的二氯甲烷中的4-(2-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫 基}苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(30毫克，0.073毫摩爾)的溶液中，添加吡啶(0.059 毫升，0. 73毫摩爾)，其后添加三氟乙酸酐(0. 071毫升，0. 511毫摩爾)。于室溫對反應(yīng)攪拌 30分鐘，并蒸發(fā)成殘?jiān)?。通過反相色譜純化提供標(biāo)題化合物。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 7. 27-7. 64 (8H, m)，6. 44 (1H, d, J = 1. 8Hz)，4. 01 (2H, dd, J = 12. 1,2. 6Hz)，3. 86 (3H, s)，3. 69 (2H, t, J = 11. 4Hz)，2. 03-2. 29 (4H, m)實(shí)施例49 4- (3- {[4- (1-甲基-IH-吡唑_5_基)苯基]硫基}苯基)四氫_2H_吡喃~4~甲
腈向3毫升的二氯甲烷中的4-(3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯 基)四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(50毫克，0. 13毫摩爾)的溶液中，添加吡啶(0. 103毫升， 1. 27毫摩爾)，其后，添加三氟乙酸酐(0. 124毫升，0. 889毫摩爾)。于室溫對反應(yīng)攪拌30 分鐘，并蒸發(fā)成殘?jiān)?。通過反相色譜純化提供標(biāo)題化合物。IH NMR (400MHz, DMSO-(I6) δ ppm 7. 28-7. 65 (9H, m)，6. 43 (1H, d, J = 1. 8Hz)，3. 93-4. 10 (2H, m)，3. 85 (3H, s)，3. 53-3. 74 (2H, m)，1. 96-2. 19 (4H, m)實(shí)施例50
喃-4-甲酰胺將187. 2毫克的4-(3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺及2毫升的1，1，1，3，3，3_六氟-2-丙醇置于烘干的玻璃瓶內(nèi)。 添加40ul的過氧化氫，于室溫對混合物攪拌2小時(shí)。通過添加8毫升的二氯甲烷及2毫 升的5%水性硫代硫酸鈉淬滅反應(yīng)。對反應(yīng)混合物攪拌10分鐘，然后，以水清洗，以硫酸 鎂干燥，過濾，濃縮，并通過反相色譜純化。將產(chǎn)物級分稀釋進(jìn)乙酸乙酯，以5%水性碳酸 氫鈉萃取，以硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，真空干燥產(chǎn)生175毫克的產(chǎn)物。HRMS(M+H)計(jì)算 410. 1538，發(fā)現(xiàn) 410. 1511. IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 74-1. 85 (m，2H) 2. 45 (d，J = 12. 89Hz，2H)3. 47(t, J = 11. 01Hz，2H)3. 73(dt, J = 11. 55，3. 49Hz，2H)3. 85(s，3H)6. 47 (d, J = 2. 15Hz, 1H) 7. 10 (s, 1H) 7. 32 (s, 1H) 7. 48 (d, J = 1. 88Hz, 1H) 7. 52 (d, J = 5.10Hz， 2H) 7. 61 (td, J = 4. 43，1. 61Hz, 1H) 7. 70 (ddd, J = 8. 46，2. 15，2. 01Hz，2H) 7. 83 (dt, J = 8. 39，1. 98Hz，3H)。實(shí)施例51 4-[3-({3-氰基-4-[(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)氧]苯基}硫基)苯基]四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺步驟1 :5_碘-2-(l-甲基-IH-吡唑_5_基氧)苯甲腈的制備以碳酸銫(396毫克，1.22毫摩爾)處理5毫升的1_甲基_2_吡咯烷酮中的 2-氟-5-碘苯甲腈(100毫克，0. 405毫摩爾)及2-甲基-2，4-二氫-3H-吡唑-3-酮(63.6 毫克，0.648毫摩爾)的溶液，于110°C攪拌2小時(shí)。以50毫升的水稀釋反應(yīng)，以2x50毫升 的乙酸乙酯萃取。以50毫升的水、50毫升的鹽水清洗合并的有機(jī)層，于硫酸鎂上干燥，過 濾，蒸發(fā)提供粗制材料。通過正相色譜純化提供標(biāo)題化合物，其呈白色固體(93毫克)。LC/ MS 5-100% 乙腈 /tfa-水 /tfa(6 分鐘梯度)4. 74 分鐘[(M+H)+ = 326]。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 8. 33 (1H, d, J = 2. 2Hz)，8. 04 (1H, dd，J = 8· 9，2. 2Ηζ)，7. 45 (1Η, d, J = 2. OHz)，6. 95 (1Η, d, J = 8. 9Ηζ)，5. 99 (1Η, d, J = 2. OHz)，3. 67 (3Η, s)步驟2 :4-「3-({3-氰基-4-「(1-甲基_1Η_吡唑_5_基)氧1苯基丨硫基)苯基1 四氫-2Η-吡喃-4-甲酰胺的制備將4- {3-[(三異丙基硅烷基)硫基]苯基}四氫-2Η-吡喃_4_甲酰胺(131毫克， 0. 332毫摩爾)、5_碘-2-(1-甲基-IH-吡唑-5-基氧)苯甲腈(90毫克，0. 28毫摩爾)、雙 [(2-二苯基膦基)苯基]醚(7. 5毫克，0.014毫摩爾)及四(三苯基膦)鈀(19. 6毫克， 0.017毫摩爾)置于燒瓶內(nèi)，抽真空/以氬氣填充三次。然后，添加無水1，4_ 二惡烷(2毫 升)，其后，添加0. 554毫升的2Μ水性碳酸銫(以氬氣飽和)。于80°C對反應(yīng)加熱4小時(shí)，并 冷卻至室溫。以50毫升的水稀釋反應(yīng)混合物，并以2x50毫升的乙酸乙酯清洗。以50毫升 的水、50毫升的鹽水清洗合并的有機(jī)層，于硫酸鎂上干燥，過濾，并蒸發(fā)，提供粗制材料。通過正相色譜純化提供標(biāo)題化合物，其呈白色固體(41毫克)。LC/MS 5-100%乙腈/tfa-水 /tfa(6 分鐘梯度)4.46 分鐘[(M+H) + = 435]。IH 匪R (400MHz，DMS0-d6) 6ppm 7.92(lH，d， J = 2. 4Hz)，7. 60 (1H, dd，J = 8. 9，2. 2Hz)，7. 31-7. 51 (4H, m)，7. 12-7. 31 (3H, m)，7. 07 (1H, br. s.)，5. 98 (1H, d, J = 2. OHz)，3. 61-3. 82 (5H, m)，3. 45 (2H, t, J = 10. 5Hz)，2. 39 (2H, d, J = 13. 7Hz)，1. 68-1. 87 (2H, m)。實(shí)施例52 (2S，4R) -4- (3- (5-氯 _6_ (1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基氧)吡啶 _3_ 基硫基)_2_ 氟 苯基)-2-甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺步驟1 甲基-IH-吡唑-5-醇的制備向甲醇(6毫升)中的3-甲基丙烯酸甲基酯(2. 44毫克，20毫摩爾)的溶液中，添 加甲基胼(921毫克，20毫摩爾)。于90°C對反應(yīng)攪拌12小時(shí)，然后，冷卻至室溫并濃縮，產(chǎn) 生粗制產(chǎn)物，其呈灰白色半固體(2. 97克，96.8% )。IH NMR(400MHz, DMS0_d6) δ ppm 7. 21 (s, 1H)，7· 09 (d, J = 2. 05Hz, 1H)，5· 31 (d, J =2. 05Hz, 1Η)，3. 49(s，3H)。步驟2 5~溴-3-氯-2-(1-甲基_1Η_吡唑_5_基氧)吡啶的制備向DMF (4毫升)中的5_溴_2，3_ 二氯吡啶(3. 22克，14毫摩爾)及1_甲基-IH-吡 唑-5-醇(1.4克，14毫摩爾，于DMF (4毫升)內(nèi))的溶液中，添加碳酸銫(13. 9克，42毫摩 爾)。于100°C對反應(yīng)攪拌3小時(shí)，然后，以乙酸乙酯(50毫升)稀釋，并以水(1x50毫升) 及鹽水(1x50毫升)清洗。于硫酸鎂上干燥有機(jī)相，并過濾。蒸發(fā)濾液，產(chǎn)生粗制產(chǎn)物，其 呈油狀物，于靜置時(shí)固化(3. 2克，79% )。LC/MS(5% -95% CH3CNiH2O)梯度，5分鐘2. 89 分。289M+H。3 :S-5-氯,-6-(l-甲某-IH-吡卩半_5_某氧,)吡啶_3_某乙烷硫醇鹽的制各于氮?dú)庀拢瑢?，1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵鈀二氯化物(202毫克，0.276毫摩 爾)及1，1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵(77. 1毫克，0. 139毫摩爾)置于燒瓶內(nèi)，其后，添 加20毫升的1，4-二惡烷中的5-溴-3-氯-2-(1-甲基-IH-吡唑-5-基氧)吡啶(1.60 克，5. 5毫摩爾)。對反應(yīng)脫氣15分鐘，其后，添加三異丙基硅烷硫醇(1. 17毫克，6. 16毫摩 爾)及THF中的1. OM叔丁氧化鉀(6. 10毫升，684毫克，6. 10毫摩爾)。于92°C對混合物 加熱3小時(shí)。添加1. OM的叔丁氧化鉀(6.0毫升，6.0毫摩爾)、1，1'-雙(二苯基膦基) 二茂鐵鈀二氯化物(202毫克，0.276毫摩爾)及1，1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵(77. 1毫 克，0.139毫摩爾)。使反應(yīng)加熱回流4小時(shí)。將混合物冷卻至室溫。添加飽和NH4Cl (30毫 升)，以乙酸乙酯(30毫升)萃取混合物。收集有機(jī)層。添加TBAF的溶液(1. 0M, THF內(nèi)) (7. 65毫升，2. 00克，7. 65毫摩爾)，攪拌10分鐘。添加乙酸酐，于室溫對反應(yīng)攪拌10分 鐘。將混合物倒至水內(nèi)，以二乙基醚(2x30毫升)萃取。于硫酸鎂上干燥有機(jī)層，過濾并收
94集。于硅石上純化，提供標(biāo)題化合物，其呈淡黃色固體(210毫克，13% )。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 8. 27 (d, J = 2. 05Hz, 1H)，8. 16 (d, J = 2. 05Hz,2H)，7. 44 (d, J = 2. 39Hz)，
6.14 (d, J = 2. 05Hz, 1H)，3. 64(s，5H)。步驟4 (2S, 4R) ~4~ (3~ (5~ 氯 (1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基氧)吡啶 _3_ 基硫 某)-2_氟丨苯某)-2_甲某-四氫-2H-吡_ -4-甲腈的制各向(25，4幻-4-(3-溴-2-氟苯基)-2-甲基-四氫-2!1-吡喃-4-甲腈(231毫克，
0.775毫摩爾)及S-5-氯-6-(1-甲基-IH-吡唑-5-基氧)吡啶_3_基乙烷硫醇鹽(220毫 克，0. 775毫摩爾)的經(jīng)脫氣的二惡烷(3毫升)溶液中，添加DPEphos (42毫克，0.078毫摩 爾)及乙酸鈀(II) (27毫克，0. 116毫摩爾)。向其中添加經(jīng)脫氣的2N Cs2C03。于N2下密 封玻璃瓶，加熱至90°C，持續(xù)18小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，以25毫升的水淬滅，以乙酸乙酯 (2x25毫升)萃取，合并萃取物，于硫酸鎂上干燥，過濾，并濃縮成棕褐色油。通過反相色譜 分離產(chǎn)物。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 8. 31 (d，J = 2. 20Hz，1H)，8. 23 (d，J = 1. 83Hz， 1H)，7. 37-7. 45 (m，2H)，7. 22-7. 29(m，2H)，6. 11 (d, J = 2. 20Hz，1H)，4. 02 (dd，J = 12.08， 2. 93Hz, 1H)，3. 68-3. 80 (m, 2H)，3. 61 (s, 3H)，2. 26 (d, J = 13. 54Hz, 1H)，2. 16 (br. s.，1H)，
1.99 (td, J = 12. 90，4. 58Hz, 1H)，1. 70 (dd, J = 13. 18，10. 98Hz, 1H)，1. 18 (d, J = 6. 22Hz, 3H)步驟5 (2S, 4R) ~4~ (3~ (5~ 氯 (1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基氧)吡啶 _3_ 基硫 某)-2_氟,苯某)-2_甲某-四氫-2H-吡_ -4-甲酰胺的制各將(2S,4R)-4-(3-(5-氯 _6-(1_ 甲基-IH-吡唑 _5_ 基氧)吡啶 _3_ 基硫 基)-2-氟苯基)-2-甲基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(77毫克，0. 17毫摩爾)溶于5毫升的 4 ITFA T2SO4W溶液。將混合物加熱至90°C持續(xù)2小時(shí)。反應(yīng)被冷卻，以2. 5N NaOH中 和，萃取進(jìn)乙酸乙酯(5毫升)內(nèi)，于硫酸鎂上干燥，過濾，并濃縮成100毫克的油。通過反相 手性色譜分離產(chǎn)物。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 8. 17-8. 22 (m, 1H)，8· 11-8. 15 (m, 1Η)，
7.36-7. 43 (m, 2Η)，7. 06-7. 23 (m, 3H)，6. 08-6. 12 (m, 1H)，3. 75-3. 84 (m, 1H)，3. 61 (s，4H)，
2.31-2. 41 (m, 1H)，1. 69-1. 80 (m, 1H)，1. 34-1. 45 (m, 1H)，1. 19-1. 25 (m, 1H)，1. 03-1. 10 (m, 3H)。實(shí)施例53 (2S，4R) ~4~ (2~氟_3_ (4_ (1_甲基-IH-吡唑_5_羰基)苯基硫基)苯基)_2_甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈向(2S，4R) _4_ (3_溴_2_氟苯基)_2_甲基-四氫_2H_吡喃_4_甲腈(286毫克， 0.959毫摩爾)及S-4-(l-甲基-IH-吡唑_5_羰基)苯基乙烷硫醇鹽(250毫克，0.959 毫摩爾)的經(jīng)脫氣的二惡烷(3毫升)溶液中，添加DPEphos (51. 7毫克，0. 096毫摩爾)及 Pd(II) (OAc)2(33毫克，0. 144毫摩爾)。向其中添加經(jīng)脫氣的2N Cs2C03(2毫升)。玻璃瓶于N2下封蓋，加熱至90°C持續(xù)18小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，以25毫升的水淬滅，以乙酸乙 酯(2x25毫升)萃取，合并萃取物，于硫酸鎂上干燥，過濾，及濃縮成棕褐色油(620毫克)。 通過反相手性色譜分離產(chǎn)物，其以淡黃色油獲得。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) 5ppm7.81(d, J = 8· 42Ηζ，3Η)，7· 54-7. 64(m，2H)，7· 39(t，J = 7. 87Hz，1Η)，7. 34 (d，J = 8·42Ηζ，2Η)， 6. 75 (d, J = 2. 20Hz, 1H)，4· 06(s，3H)，3· 99-4. 05 (m, 1H)，3· 68-3. 81 (m，2H)，2· 28 (dt, J =13. 18，2. 20Hz, 1H)，2. 19 (dt, J = 13. 54，1. IOHz, 1Η)，1. 97-2. 06 (m, 1Η)，1. 73 (dd, J = 13. 18，10. 98Hz, 1H)，1. 14-1. 22 (m, 3H)。HRMS 計(jì)算 M+H 436. 1495，發(fā)現(xiàn) 436. 1494。實(shí)施例54 (2S，4R)-4-(2-氟-3-(4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基亞硫?；?苯基)_2_甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈將(2S，4R) _4_ (2_氟_3_ (4_ (1_甲基-IH-吡唑_5_基)苯基硫基)苯基)_2_甲 基-四氫-2H-吡喃-4-甲腈(70毫克，0. 17毫摩爾，Ieq)溶于六氟異丙醇(10. 0毫升)。 將過氧化氫30% (4.0毫升，40毫摩爾)添加至此溶液，且攪拌24小時(shí)。以鹽水(10毫 升)及乙酸乙酯(15毫升)稀釋反應(yīng)混合物，分離層狀物。將有機(jī)相在真空下濃縮成 油。通過反相色譜對油加以純化，獲得想要的產(chǎn)物(70.0毫克，96% )。IH NMR(400MHz, DMS0-d6) d ppm 1. 16(dd, J = 6. 22,3. 29Hz,3H) 1. 60-1. 77 (m,2H) 1. 92-2. 03 (m, 2H)2. 07-2. 23 (m, 2H) 3. 84(s，3H)4. 00 (d, J = 11. 71Hz, 1H)6. 49 (s, 1H) 7. 48 (s, 1H) 7. 56 (t, J = 8. 05Hz, 1H)7. 64-7. 71 (m，1H) 7. 73-7. 84 (m，4H) 7. 89 (t，J = 6. 22Hz，1H)。ES-HRMSm/z 424. 1504 (M+H 計(jì)算424. 1495)。使用如上公開的過程及一般流程，還可制備下列化合物
PlateMate被用于將2 μ L的DMSO中的化合物溶液添加至聚丙烯板中的80 μ L血液中。于室 溫對具有添加的血及化合物的板培養(yǎng)10分鐘，然后，使用Micromultidrop，將2 μ L的60% 乙醇中的卡西霉素(800ng/ml) (A23187C-7522，Sigma)及花生四烯酸(30 μ Μ) (NU-Chek PREP, INC. S-1133)的溶液添加至血液。然后，于37°C的淺水浴中對此類板培養(yǎng)15分鐘。 然后，于4°C時(shí)以800g旋轉(zhuǎn)此類板10分鐘。移除上清液，通過Elisa(Caymen Chemical)進(jìn) 行分析。自人類全血牛產(chǎn)類二十烷酸自健康或哮喘人類的捐贈者，將人類全血收集于10毫升的肝素管(Vacutainer tubes ；Becton Dickenson, Franklin Lakes, NJ)內(nèi)。白勺，i^ffi Multi—Drop 的384-孔分配器(Titertek，Huntsville，Alabama)取80 μ L分配于384孔的聚丙烯板的 每一孔內(nèi)。將不同濃度的化合物溶于DMS0，然后，使用PlateMate Plus 的自動吸量工作站 (Matrix Technologies, Hudson, NH)以2yL/孔添加至血液。于室溫下，將化合物與血液預(yù) 培養(yǎng)10分鐘，其后，以溶于60%乙醇中的40μΜ鈣離子載體(A23187，Sigma Chemical Co， St. Louis, MO, Cat. #C-7522)及 30 μ M 花生四烯酸(S-1133，NU-Chek PREP, Inc.，Elysian， MN, Cat. #S-1133)刺激。于37°C的淺水浴內(nèi)培養(yǎng)15分鐘后，于4°C以800g對血液離心處 理10分鐘，收集上清液，通過ELISA，依據(jù)制造商的指示(Cayman Chemical Company, Ann Arbor, MI)來測量白三烯及前列腺素的量。此檢驗(yàn)以2. 5% DMSO的最終濃度進(jìn)行。鼠,氣應(yīng)·_二+娜白姓一用雄性Lewis 大鼠(175-200 克)，Charles River Laboratories,Wilmington,ΜΑ) 進(jìn)行此研究。通過向背部的肩胛骨區(qū)域內(nèi)皮下注射20毫升的無菌空氣，產(chǎn)生氣囊。使氣囊 發(fā)展1天。藥物施用前，動物(每組6只)被斷食，但可自由取得水，持續(xù)16至24小時(shí)。將 溶于生理食鹽水中的2毫升的的卡拉膠懸浮液(FMC BioPolymer, Philadelphia, PA, Cat. #GP209-NF)注射至氣囊前1小時(shí)，通過灌食施用藥物或載劑?？ɡz注射后3小時(shí)，將 1毫升的生理食鹽水中的50 μ g/ml鈣離子載體(A23187，Sigma Chemical Co，St. Louis, Μ, Cat. #C-7522)注射于氣囊內(nèi)，其后10分鐘通過灌洗收集氣囊流體。于4°C以3500rpm對 流體進(jìn)行10分鐘的離心處理，收集上清液以供分析。通過ELISA，依據(jù)制造商指示(Cayman Chemical Company, Ann Arbor，MI)，對白三烯及前列腺素加以定量。過敏性及非過敏性氣道疾病檢驗(yàn)獲得的結(jié)果報(bào)導(dǎo)于下表III中。
表III(a)熒光強(qiáng)度5-L0X酶分析IC50(b)自人類全血IC50生產(chǎn)類二十烷酸(c)大鼠氣囊內(nèi)的卡拉膠誘發(fā)的類二十烷酸的生產(chǎn)，于3mpk的抑制％(d) US 5，883，106 及 EP 0787127 中公開的 4_ (3_ (4_ (2-甲基-IH-咪唑-1-基) 苯基硫基)苯基)-四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺 括號內(nèi)的數(shù)字表示特定實(shí)施例的步驟。例如，29(2)指實(shí)施例29的步驟2制備的 化合物。PK參數(shù)的決定雄性 Sprague-Dawley 大鼠購自 Charles River Laboratories(Wilmington, DE)，且適應(yīng)其周圍環(huán)境約1周，且隨意提供食物及水。于研究前一天，以異氟烷(有效) 麻醉動物，然后，于頸動脈及頸靜脈植入血管導(dǎo)管。給藥前，動物于CuledBioanalytical Systems, Inc.)籠內(nèi)適應(yīng)過夜。使用CulexABS的”照料(tend) ”功能維持頸動脈導(dǎo)管的開 放?？诜o藥前，動物被斷食過夜( 18小時(shí))，且于給藥后4小時(shí)喂食。使用單交叉設(shè)計(jì) 實(shí)施給藥，于第1天口服給藥，其后于第2天經(jīng)由頸靜脈導(dǎo)管以靜脈內(nèi)給藥。兩種途徑都以 1毫克/公斤給藥。給藥的早晨測定體重。通過Culex于0. 03、0. 08、0. 25、0. 5、1、1.5、2、 4、6、8、12、18，及24小時(shí)的預(yù)定時(shí)間點(diǎn)實(shí)施血液收集。樣品收集于冷肝素管內(nèi)，以3000rpm 離心處理10分鐘，將形成的血漿小份分裝進(jìn)96-孔的板以供生物分析。樣品于血漿收獲后 盡早冷凍，研究完全后，板于-80°C冷凍至實(shí)施生物分析為止。靜脈內(nèi)給藥后0至24小時(shí)收 集尿液樣品。200μ L樣品被小份分裝至樣品板，用血漿樣品分析。約1.8毫升的剩余尿液 樣品被轉(zhuǎn)移至取樣管，如果需要的話，被保留以供另外分析，剩余的樣品被棄置。通過LC-MS 相對于標(biāo)準(zhǔn)樣品來進(jìn)行分析。疼痛疾病分析^^ 所有程序均按照輝瑞動物管理及使用委員會(Pfizer Animal Care andUse
110Committee)的指導(dǎo)方針，且依據(jù)NIH的實(shí)驗(yàn)室動物福利指導(dǎo)方針(NIHguidelines on laboratory animal welfare)進(jìn)行。除另有指示外,所有試劑可自Sigma (St. Louis，Μ0)獲得?？ɡ荒_掌測試化合物以干燥粉末于室溫貯存。在含有0.5%甲基纖維素及0.025 % Tween-20的載劑內(nèi)制備化合物，且通過經(jīng)口喂食施用(體積=1毫升)。使用重150-250 克的雄性Sprague-Dawley大鼠(Harlan, Indianapolis, IN)。研究日前，大鼠被斷食且自 由取得水過夜。每一組由6只大鼠組成?？ɡz作為普通生理食鹽水中的懸浮液制備， 以27號針將0. 1毫升的體積經(jīng)皮內(nèi)注射至經(jīng)C02/02麻醉的大鼠的右后掌的爪墊內(nèi)。未注 射的左后掌作為正常對照組。化合物在卡拉膠注射前施用?？ɡz注射后3小時(shí)后測定痛 覺過敏，這通過測量針對應(yīng)用到后掌的機(jī)械壓力的退縮應(yīng)答來實(shí)現(xiàn)(Randall L0, Selitto JJ(1957)A method for measurement of analgesic activity on inflamedtissue. Arch Int Pharmacodyn Ther 111 :409_419)。弗氏完全佐劑(CFA)成年的雄性 Sprague Dawley 大鼠(Harlan, Indianapolis, IN or CharlesRiver Laboratories，Portage，MI) (190-250克)被用于此類研究。大鼠于口服給藥前被斷食，整 個實(shí)驗(yàn)期間允許自由取得食物及水。每個治療組由5或6只大鼠組成。在炎性疼痛的CFA 大鼠模型中，將150 μ 1的1毫升/毫升的CFA懸浮液(懸浮液礦物油中的熱滅活結(jié)核分支 桿菌(Mycobacteriumtuberculosis))注射進(jìn)經(jīng)C02/02麻醉的大鼠后掌的跖面內(nèi)。該注射 立即誘發(fā)局部發(fā)炎，掌腫脹及疼痛作為機(jī)械痛敏(MH)測量。對側(cè)未發(fā)炎的掌顯示可與對照 /正常動物者可比擬的閾值。基線疼痛測量在CFA注射后一天使用Randall-Selitto壓痛 儀(測量大鼠后掌的MH)針對所有大鼠進(jìn)行。藥物研究于CFA后48小時(shí)通過急性經(jīng)口喂 食而進(jìn)行。機(jī)械性痛覺過敏于單次給藥后2-3小時(shí)進(jìn)行。內(nèi)半月板橫斷(MMT)重 275-375 克的雄性 Sprague-Dawley 大鼠(Harlan, Indianapolis, IN)被用于此 類研究。每組由6或8只大鼠組成。對大鼠進(jìn)行右膝的MMT。在氣體麻醉系統(tǒng)下，通過修剪 毛發(fā)及其后使用優(yōu)碘(betadine)清理，準(zhǔn)備右腿脛關(guān)節(jié)的中間方面上的皮膚以供手術(shù)。鈍 器切開，使內(nèi)膝關(guān)節(jié)側(cè)韌帶露出，其被橫切以露出內(nèi)半月板。半月板被切成二片(遠(yuǎn)端仍附 接)。半月板的近端留在膝關(guān)節(jié)中。縫合關(guān)閉皮膚(Ethicon的單絲耐綸尺寸5.0)。手術(shù) 后10-14天拆線。所有行為測試于手術(shù)后一個月開始。在MMT手術(shù)后發(fā)展出一致基線疼痛 應(yīng)答的大鼠中，對化合物加以評估。化合物經(jīng)口服施用，化合物施用后2-2. 5小時(shí)評估疼痛 應(yīng)答。給藥前24小時(shí)針對所有大鼠測量基線疼痛。脊神經(jīng)結(jié)扎(SNL)使用重 275-375 克的雄性 Sprague-Dawley 大鼠(Harlan，Indianapolis, IN)。大 鼠于整個研究期間可自由取得食物及水。每一組由5只大鼠組成。大鼠在SNL on the左L5 及 L6 進(jìn)行 SNL (Kim SH, Chung JM. ；An experimentalmodel for peripheral neutopathy produced by segmental spinal nerve ligation inthe art. Pain,1992 ；50 :355_363)。 手術(shù)擦拭/準(zhǔn)備(優(yōu)碘，酒精)后，骨盆帶(無名骨)被觸診，使用后上腸骨的水平位置作為 切口中點(diǎn)于背中線左側(cè)皮膚上切開4公分切口。在中骶骨區(qū)域，以解剖刀刺入，沿腹柱(于矢狀切面)左側(cè)滑行(in the sagital plane)至刀片感覺碰到骶骨為止。剪刀尖部經(jīng)由 戮刺引入，且使肌肉及韌帶與脊柱分離以露出2-3公分的脊柱，往下至骶骨/橫突的水平位 置。清理肌肉及筋膜的骨結(jié)構(gòu)，以鑒別出左L6的橫突。腰骶部筋膜被分割以使咬骨鉗尖部 能于L6突的尾部端緣下輕輕滑動。橫突被夾住且移除至L4及L5神經(jīng)可接近為止(它們 一起被包覆于恰暴露出的肌肉下的筋膜)。小玻璃鉤置于L4，L5神經(jīng)的中間(向下，抵住 脊柱)，尖部于神經(jīng)下側(cè)旋轉(zhuǎn)以使其鉤住。使其等自周圍肌肉組織輕輕升高。L5在背內(nèi)側(cè)， 鉤被些微降低，且向中線移動使L4(側(cè)/深神經(jīng))放開。當(dāng)L4自鉤落下時(shí)，同時(shí)避免拉緊 或拉伸，這會造成左后掌麻痹及使動物不可用。一旦L4與L5鉤脫離，用長度短的6-0絲線 圍繞鉤尖部的球捆綁兩次，且通過神經(jīng)下返回。L5神經(jīng)的輕柔但牢固(手指拉緊)的結(jié)扎 是使用深系手/儀器(de印-tiehand/instrument)位置以平結(jié)進(jìn)行的。神經(jīng)在結(jié)扎兩側(cè)上 些微腫脹。一旦L5被結(jié)扎，于薦骨端緣下以鉤子固定L6。鉤子在骶髂緣處的骨骼下以與水 平面呈45度角滑行。L6被輕輕升高及結(jié)扎。以4-Ovicryl線縫合肌肉上的筋膜，以手術(shù)固 定針閉合皮膚。固定針于手術(shù)后10-14天移除。所有的行為測試于手術(shù)后一個月開始?；衔镆钥诜┯茫衔锸┯煤?-2. 5小時(shí)評估疼痛應(yīng)答。基線疼痛測量在給 藥前24小時(shí)對所有大鼠進(jìn)行。行為測試機(jī)械件痛覺過敏后掌的機(jī)械性痛覺過敏是使用Randall-Selitto方法以壓痛儀(Ug0-Basile)測 量的。每一后掌(先對側(cè)然后發(fā)炎側(cè)(同側(cè)))順序置于鈍虎鉗狀的平臺上，以固定增加速 率向掌上應(yīng)用壓力，直到大鼠對刺激產(chǎn)生應(yīng)答為止(移動，奮力掙扎，發(fā)出聲音)。然后，記 錄使大鼠應(yīng)答所需的壓力量(以克測量)。對側(cè)掌退縮閾值(PWT)及被注射的掌的退縮閾 值間的差異被用來測定痛覺過敏反應(yīng)。觸感痛覺異常(TA)通過于以一系列的經(jīng)校正的細(xì)微長絲(von Frey長絲，Stoelting Co.，Wood Dale, IL)探測腳底表面后測量腳掌退縮，來測定觸感痛覺異常(靜態(tài))。von Frey長絲的 強(qiáng)度范圍為0. 4至Sg。此類長絲用作為無害的機(jī)械性刺激，來量化機(jī)械性觸痛感。大鼠被置 于升高的金屬絲網(wǎng)地板及移動性塑料覆蓋物上的透明塑料籠內(nèi)適應(yīng)30分鐘。一系列的長 絲被依序施用(每個3次)至右后掌的腳底表面，直到大鼠產(chǎn)生退縮應(yīng)答為止。腳掌舉高被 記錄為陽性應(yīng)答，次最輕的長絲被選用于下次測量。無應(yīng)答時(shí)，使用增加重量的下一長絲。 此模式(此上下法最先由 Dixon WJ(1980)描述于 Efficient analysisof experimental observations, Annu Rev Pharmacol Toxicol 20:441—462)持續(xù)進(jìn)fiS直至Ij在 亍為最初改 變后進(jìn)行了四次測量或直到產(chǎn)生連續(xù)陰性應(yīng)答為止。形成的正及負(fù)分?jǐn)?shù)的順序被用于內(nèi)插 得到腳掌退縮閾值(g)。承重差異后掌間的承重差異(WBD)是使用測力板(LintonInstrumentation, NorfoIkUK) 測量的。大鼠被置于平感應(yīng)器(二個板/每一個用于每一后掌)上，以測量每一后掌的承 重。取得九個讀數(shù)，報(bào)導(dǎo)中間值。心血管疾病檢驗(yàn)材料及方法
112[1048]LDLr空小鼠動脈硬化樽型njg Jackson Laboratories (Bar Harbor, Maine) ^tH W^ffi LDL -/- /Jn 鼠(6周大)單獨(dú)放置于恒溫環(huán)境，該環(huán)境具有交替式12-小時(shí)光照黑暗周期。所有時(shí)間 都可獲得水。對標(biāo)準(zhǔn)喂鼠飼料2至4周的適應(yīng)期后，小鼠被改變成經(jīng)改良的西式飲食小鼠 (Western Diet Mice) (D06092202, Research Dietslnc.)，且以 0. 075% 的添加膽固醇持續(xù) 12至36周。然后，使用區(qū)段式隨機(jī)過程將小鼠分配成8-20只小鼠/組的治療組，以使所 有組具有相似的血清膽固醇及體重中間值及范圍，且使其能自由取得利用改良式Western Diet (D060922, Research Diets Inc.)+/-不同濃度的PF-4332150的飲食混合物。調(diào)整飲食 中藥物的濃度，使得小鼠每天的飲食消耗導(dǎo)致可預(yù)期的血漿曝露。在整個治療期的選定時(shí) 間，通過眶竇或心臟穿刺，將用于血清脂類、炎性介體及其它生物標(biāo)記物、肝臟酶及藥代動 力學(xué)分析的血液收集于1毫升的肝素管(Vacutainer tubes ；Becton Dickenson,Franklin Lakes,NJ)中，于室溫進(jìn)行900xg持續(xù)10分鐘，血清被倒出。治療期后，移出肝臟、心臟、胰 臟及血管組織，將其置于10%緩沖福爾馬林(Sigma Aldrich，St. Louis)中，或快速冷凍于 液氮內(nèi)以供后續(xù)分析。組織及血清脂類的測定總膽固醇分析組織總膽固醇分析使用總膽固醇E試劑盒(Total Cholesterol Ekit) (Wako Chemicals USA，VA，USA)按照制造商的說明書進(jìn)行。5微升的樣品(于PBS pH 7.4(Invitrogen,WI,USA)中、檢驗(yàn)線性范圍內(nèi)稀釋)添加至96-孔的透明底的板(Costar， NY, USA)。每塊96-孔的透明底的板還含有指定孔，其中具有5微升的具有18. 75-200毫克 /分升范圍的濃度的提供的膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物。通過添加75毫升的提供的緩沖溶液至凍干顏色 試劑，制備2x顏色試劑溶液。向每個孔中添加95微升的2x顏色試劑溶液，其后于37°C培 養(yǎng)30分鐘。于Tecan Safire 2中于600nm測量比色變化。經(jīng)由膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物的線性曲線 擬合來定量總膽固醇。游離膽固醇分析使用游離膽固醇E 試劑盒(Free Cholesterol E ki) (Wako Chemicals USA, VA，USA)依據(jù)制造商的說明書進(jìn)行游離膽固醇組織分析。將5微升的樣品(于PBS pH 7.4(Invitrogen,WI,USA)中、檢驗(yàn)線性范圍內(nèi)稀釋)添加至96-孔的透明底的板(Costar， NY,USA)中。每塊96-孔的透明底的板還含有指定孔，其中具有5微升的具有10-100毫克 /分升范圍的濃度的提供的膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物。通過將75毫升的提供的緩沖溶液添加至凍干 顏色試劑，來制備2x顏色試劑溶液。將95微升的2x顏色試劑溶液添加至每一孔，其后于 37°C培養(yǎng)30分鐘。于Tecan Safire 2于600nm測量比色變化。經(jīng)由膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物的線性 曲線擬合來定量游離膽固醇。甘油三酯分析使用L-型 TG H 試劑盒(L-Type TG H kit) (Wako Chemicals USA, VA, USA)依據(jù) 制造商的說明書進(jìn)行甘油三酯組織分析。將5微升的樣品(于PBS pH7.4(Invitrogen,WI, USA)中、檢驗(yàn)線性范圍內(nèi)稀釋)添加至96-孔的透明底的板(Costar，NY，USA)。每塊96-孔 的透明底的板還含有指定孔，其中具有5微升的具有5. 5-110毫克/分升范圍的濃度的提 供的甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)物。向每孔添加150微升的L-型TG H酶顏色試劑A (Rl)，其后搖動5分鐘，然于37°C培養(yǎng)5分鐘。于Tecan Safire 2上于600nm測量比色變化，數(shù)值被保留，用 于數(shù)據(jù)的背景歸一化。向每孔添加75微升的L-型TG H酶顏色試劑B (R2)，其后搖動5分 鐘，然于37°C培養(yǎng)30分鐘。于Tecan Safire 2上于600nm測量比色變化。通過甘油三酯 標(biāo)準(zhǔn)的線性曲線擬合測定濃度前，減去第一次讀取的背景值。非酯化的脂肪酸分析使用Wako NEFA C試劑盒(Wako Chemicals USA, VA, USA)依據(jù)制造商的說明書 進(jìn)行非酯化脂肪酸(NEFA)的組織分析。將10微升的樣品(于PBSpH 7. 4(Invitrogen, WI, USA)中、檢驗(yàn)線性范圍內(nèi)稀釋)添加至96-孔的透明底的板(Costar, NY, USA)。每塊 96-孔的透明底的板還含有指定孔，其中具有10微升的具有0.05-1毫摩爾的濃度的提供的 NEA標(biāo)準(zhǔn)物。通過添加提供的緩沖溶液A至凍干顏色試劑，來制備顏色試劑A。將75微升 的顏色試劑A添加至每孔，其后搖動5分鐘，然于37°C培養(yǎng)5分鐘。于Tecan Safire 2于 550nm測量比色變化，數(shù)值被保留以供數(shù)據(jù)的背景歸一化。通過添加提供的緩沖溶液B至凍 干顏色試劑而制備顏色試劑B。將150微升的顏色試劑B添加至每一孔，其后搖動5分鐘， 然于37°C培養(yǎng)30分鐘。于Tecan Safire 2上于550nm測量比色變化。通過NEFA標(biāo)準(zhǔn)物 的線性曲線擬合測定濃度前，減去第一次讀取的背景值。與脂蛋白結(jié)合的膽固醇分析使用快速蛋白液相色譜(FPLC)，利用Superose 6HR柱及對脂蛋白內(nèi)膽固醇量的 連續(xù)柱后分析，來分析進(jìn)行與脂蛋白結(jié)合的膽固醇。經(jīng)由Varian430自動取樣器(Varian Inc.，Ca，USA)向 Superose 6-10/300GL 柱(AmershamBiosciences, Sweden)上注身寸 50 μ L 之前，通過0.6μ的96-孔過濾板對血漿樣品進(jìn)行預(yù)先過濾。脂蛋白通過0.518毫升/分 鐘的等強(qiáng)度尺寸排除(用0.9%生理食鹽水作為移動相)而分離。進(jìn)入設(shè)定為37°C的CRX 400柱后反應(yīng)器(Pickering Laboratories, Ca，USA)前，將洗脫液與以0. 182毫升/分鐘 (總流速的26% )泵出的50%的膽固醇Rl溶液(Roche Diagnostics, IN, USA)混合。膽固 醇染色反應(yīng)后，于490nm以Varian Pro-Star UV-Vis檢測器檢測洗脫的脂蛋白-膽固醇。 通過用各相對膽固醇分布乘以如上文所述酶促測定的總血漿膽固醇，來定量每一脂蛋白中 的膽固醇濃度(mg/dL)。經(jīng)由高效液相餼譜蒸發(fā)光散射檢測(HPLC-ELSD)進(jìn)行中性脂質(zhì)分析用3毫升的2，2，4-三甲基戊烷(TMP)及異丙基醇(IPA)的4 1混合物，對組織 樣品加以萃取。將IOyL的2毫克/毫升的花生四烯醇(AA)溶液添加至每份樣品，作為分 析的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)。無光條件下，于室溫對樣品搖動24小時(shí)。萃取后，將1毫升的水添加至樣 品，旋轉(zhuǎn)震蕩15分鐘。然后，于l，500rpm對樣品離心處理15分鐘。將2毫升的有機(jī)相(上 層)轉(zhuǎn)移至玻璃瓶以供分析，于N2下干燥。用50uL的TMP重構(gòu)每一樣品，旋轉(zhuǎn)震蕩，然后 轉(zhuǎn)移至具有IOOuL的玻璃插入物的2毫升的HPLC玻璃瓶。色譜通過Agilent柱加熱器單元將Waters Spherisorb S3W 4. 6x100mm分析柱 保持于30°C。HPLC自動取樣器被程序化，以在整個操作期間使樣品溫度維持于20°C。每種 樣品注射10微升。移動相由二種溶劑的梯度組成。溶劑A是三甲基戊烷(TMP ；MalIincrodt 6051-08)且溶劑B是乙酸乙酯(EA ；MalIincrodt 3442-10)。梯度被描述于下表 檢測于45°C以8增量及維持于3. 1巴的N2壓力操作ELSD。將通過儀器獲得的 模擬信號送至Agilent A/D界面模塊，其在此處轉(zhuǎn)化成數(shù)字輸出。該轉(zhuǎn)化基于10，OOOmAU/ V設(shè)定點(diǎn)處，且數(shù)據(jù)速率設(shè)置為IOHz (0.03分鐘)。然后，形成的數(shù)字輸出被應(yīng)用至 AgilentChemStation 軟件，用于峰面積積分。使用膽固醇(Sigma-Aldrich 362794)及 膽固醇油酸酯(Sigma-AldrichC9253)的校正曲線將膽固醇及膽固醇酯的濃度轉(zhuǎn)化成Pg/ mL。二條校正曲線都是對二階多項(xiàng)方程式Y(jié) = A+B(X)+C(X2)最佳擬合的。膽固醇應(yīng)答在 20至800 μ g/mL之間是線性的。膽固醇酯應(yīng)答在20至700 μ g/mL之間是線性的。雙標(biāo)記膽固醇吸收模式將可自Jackson Laboratory獲得的6周大的雄性LDLr-/-小鼠放置于正常的12 小時(shí)的光照及黑暗周期下，于整個研究期間都可自由取得食物及水。使用Purina 5001喂 鼠飼料使小鼠適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境7天，其后適應(yīng)改良的西式飲食7天，其后分成數(shù)個治療組。 使用前文所述的雙標(biāo)記糞便同位素比例方法，來測定測試物體對腸膽固醇吸收的沖擊的評 估。4天的研究飲食混合物曝露后，向未經(jīng)斷食且未經(jīng)麻醉的小鼠給予溶于150 μ 1的100% 中鏈甘油三酯(MCT)油中的3H-谷甾烷醇(2.78uCi)及14C-膽固醇(1. 74uCi)的灌胃喂 食。小鼠被立即轉(zhuǎn)移至各線底籠子內(nèi)，它們在此處繼續(xù)攝入其各自研究飲食混合物，持續(xù)另 外的72小時(shí)，期間，每天收集并且集中糞便。集中3-天的全部糞便樣品于N2氣下干燥，磨成粉，研究中的每一動物的樣品被氧 化為3H及14C同位素含量(DPM)(經(jīng)由WBAL-IMS COE利用的用于量化14C及3H濃度的標(biāo)準(zhǔn) 雙計(jì)量方法)。通過減去背景和除以平均氧化效率，對經(jīng)校正的DPM值加以精確。此數(shù)值被 用于計(jì)算以nCi計(jì)的最終不穩(wěn)定同位素活性，其后除以被氧化的干燥糞便樣品的質(zhì)量以提 供以nCi/毫克糞便計(jì)的不穩(wěn)定同位素含量。14C對3H含量的比例針對每只動物測定的，膽 固醇吸收％以下列方式測定 針對所有組測定“膽固醇吸收％”的平均值及平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差。與未經(jīng)治療的小鼠相比，使用單側(cè)P-值(P < 0. 05)的Durmette配對比較，確定治療組的統(tǒng)計(jì)顯著性。14C-乙酸酯并入不可皂化及可皂化的脂類(5L0CS-001)將Jackson Laboratory的21周大的雄性LDLr-/-小鼠放置于正常的12小時(shí)的 光亮及黑暗周期下，它們能自由取得水及研究飲食，但在研究的最后1天的6小時(shí)斷食期間 僅提供水。小鼠適應(yīng)改良的西式飲食(D06092202，Research Diets Inc.) 7天，其后分成數(shù) 個治療組。急性及慢性治療的小鼠于胃灌食載劑或測試物體前2. 5小時(shí)被斷食。對急性及 慢性測試物體曝露組而言，在胃內(nèi)載劑或測試物體遞送后1. 5小時(shí)，遞送單次腹腔內(nèi)注射 生理食鹽水中的25uCi的[I-14C]-乙酸鹽。在[I-14C]-乙酸鹽曝露后2. 5小時(shí)，通過吸入 C02對小鼠行安樂死，收集血液，其后對其加以處理以分離血清。按照前文所述，于0. 175毫 升與0. 3毫升間的血清，測定[I-14C]-乙酸鹽向可皂化(SAP)及不可皂化(NONSAP)的血清 脂類中的并入。SAP及NONSAP脂類的每毫升血清的DPM是針對每只動物測定的，平均值及 平均值的標(biāo)準(zhǔn)差是針對所有組測定的。使用未配對的學(xué)生T測試(Student’ s T-test) (P < 0. 05)來評估與未經(jīng)治療的小鼠相比的治療組的統(tǒng)計(jì)顯著性?？扇芗Ｎ飿?biāo)記物在各種不同時(shí)間從用于此計(jì)劃的多種效力研究收集小鼠血清或血漿樣品。在公司 內(nèi)部及外部的數(shù)種不同分析系統(tǒng)對樣品加以測試。ADVIA 1650化學(xué)系統(tǒng)被用于對堿性 磷酸酶(ALPAMP)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)及天冬氨酸鹽氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)進(jìn)行體外診斷 定量測定。(ALPAMP)堿性磷酸酶水解PNPP底物形成對硝基酚，其被上色(黃色)且提供其本 身的發(fā)色原。此反應(yīng)后，在410nm處，對對硝基酚的形成速率進(jìn)行色度測量，其與堿性磷酸 酶活性成正比。2-氨基-2-甲基-1丙醇(AMP)緩沖液被用于使反應(yīng)pH維持于10. 3-10. 4。 鎂及鋅離子添加至AMP緩沖液，以使酶活化及穩(wěn)定。(ALT)通過添加α -酮戊二酸鹽作為第二試劑，起始反應(yīng)。通過其在340nm的吸收 率來測量NADH濃度，吸收率減少速率與ALT活性成正比。(AST)通過其在340nm的吸收率來測量NADH濃度，吸收率減少速率與AST活性成 正比。通過添加α-酮戊二酸鹽作為第二試劑來起始此反應(yīng)。ADVIA 1650 化學(xué)系統(tǒng)是使用 Bayer Assayed 化學(xué)對照組 1 (REF05788372 ； Prod-No. T03-1220-62)及對照組 2 (REF 00944686 ；Prod. No. T03-1221-62)控制的。使用RANDOX提供的最佳化標(biāo)準(zhǔn)試劑盒測量谷氨酸鹽脫氫酶(GLDH)。此程序測量 非特異性蠕變(creep)。 當(dāng)NADH被氧化時(shí)，以分光光度法在340nm測量每分鐘吸收率的減少，其與GLDH活 性成正比。血清及血漿樣品被外送至LinCo及Rules BasedMedicine,以在優(yōu)選分析物的特 定組中進(jìn)行分析。組織學(xué)及影像分析的方法組織學(xué)麻醉后立即移除組織(包含主動脈竇及根、心臟、脂肪、肝臟、肌肉等)，將 其置于10%的中性緩沖福爾馬林中或于液隊(duì)中冷凍，并如前文所述那樣包埋以切片。冷凍的組織樣品被冷凍切片，并針對脂類用紅油-O(ORO)染色(Bowles等人，2004)，針對膠原蛋 白用天狼星紅(PSR)染色(Rubio等人，1988)。使用具ImageProPlus的計(jì)算機(jī)輔助影像分 析，來計(jì)算面積百分率ORO (Bowles等人，2004)及PSR (Rubio等人，1988)。對于固定組織的分析，組織于10% NBF內(nèi)于室溫固定24小時(shí)。使用Tissue Tek VIP 5組織處理器，通過梯度酒精及二甲苯將組織脫水進(jìn)石蠟內(nèi)。組織被包埋于新的石蠟 內(nèi)，使用Leica RM 2235旋轉(zhuǎn)式切片機(jī)以4微米厚切片，置于載玻片上。為測量主動脈根斑塊的面積及組成，如Nishina等人所述般自主動脈根切下 一系列的切片，其從瓣膜小葉開始，每一玻片收集二切片，產(chǎn)生一階段。以Masson三色 (Prophet)染色階段2、8、14、20、26及32，將其用于斑塊的面積測量及組成。在每一復(fù)合 斑塊(3或4型)上測量斑塊的組成。使用適用于小鼠組織的對抗α-SMC肌動蛋白的抗 體(小鼠的抗人類α-肌動蛋白，Cat.No.M0851)及動物研究試劑盒(Animal Research Kit(ARK)，Cat. No. K3955) ( 二者都得自 DAKO Corp.，Carpenteria, CA)對病變內(nèi)的平滑肌 細(xì)胞(SMC)面積加以顯示。用如所述(Lutgens等人)般的針對大鼠巨噬細(xì)胞蛋白ED-I的 抗體(Serotec，Ltd.，Oxford, UK)對巨噬細(xì)胞染色。以下列標(biāo)準(zhǔn)將斑塊定義為1、2、3或4型1型-1-2層的發(fā)泡細(xì)胞，無新生內(nèi)膜炎性細(xì)胞擴(kuò)大IB型-比1型更平滑。無炎性?；|(zhì)組織-膠原蛋白。穩(wěn)定2型-多層發(fā)泡細(xì)胞，突出于腔內(nèi)，極少滲入斑塊內(nèi)。疊層/中層完整。外膜區(qū)域 無炎性細(xì)胞。2B型-2型，加上含有更多的纖維組份及更多的基質(zhì)組織2C型-2&2b型，加上于外膜區(qū)含有顯著的炎性組份3型-于腔及中層具大的斑塊侵入。膽固醇裂隙。炎性滲入物，不規(guī)則表面，外膜 側(cè)上無發(fā)炎，退化的中層。3B型-增加的基質(zhì)組份4型-與3類似，但外膜發(fā)炎，平滑的斑塊表面，內(nèi)皮完整，斑塊中可能有/沒有 發(fā)炎反應(yīng)使用CAST系統(tǒng)測量斑塊面積及組成的程序用Olympus Denmark的CAST (計(jì)算機(jī)輔助體視學(xué)工具盒)，0. 9修訂版，來分析斑 塊的面積及組成。在于IOx物鏡下沿著斑塊的周界描繪，測量所有斑塊的面積。于IOx物 鏡下使用“曲折取樣”測量復(fù)合斑塊(3或4型)的組成。對于含有2或更多塊復(fù)合斑塊的 樣品，向影像應(yīng)用7x7點(diǎn)探針，且任意取樣于感興趣的整個區(qū)域上。對于僅含有1塊復(fù)合斑 塊的樣品，應(yīng)用8x8點(diǎn)探針。于每一取樣點(diǎn)，截面的右上象限的組織被鑒定為發(fā)泡細(xì)胞、膠 原蛋白及膽固醇裂隙等。取樣組織的百分率盡可能接近100%，但不超過100%。復(fù)合斑塊(三色)
SaudersCompany, Philadelphia, PA pp20~21(1995-Tietz Nff =Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd Edition. WB SaundersCompany, Philadelphia, PA pp30~33(1995)嘔吐評估已觀察到，人類中，較早的化合物在類似于治療性抑制諸如哮喘或炎性失調(diào)等疾 病的5-脂氧合酶所預(yù)期的曝露那樣，口服施用后產(chǎn)生反胃及嘔吐。施用此類化合物后的此 類胃腸癥候的發(fā)生限制了其臨床用途。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以區(qū)別口服化合物溶解及吸收期間的局部胃腸嘔吐刺激與經(jīng)由血流于 全身性曝露期間產(chǎn)生的嘔吐刺激。以前時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物是經(jīng)由全身性曝露產(chǎn)生反胃及嘔吐， 而非經(jīng)由溶解及吸收位置處的胃腸道內(nèi)的局部濃度。這暗示改變釋放位置或減慢化合物 溶解的配方改良不能有效降低胃腸副作用。在通過IV灌注向8-12公斤的特別育種的比格 狗施用4-(3-{[4-(1_甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲 酰胺后(使用負(fù)載劑量，其后緩慢灌注，在30分鐘至1小時(shí)獲得峰值血液量)觀察到此類 現(xiàn)象。更特別地，化合物被稀釋于經(jīng)磷酸鹽緩沖的生理食鹽水內(nèi)至下述濃度通過灌注泵經(jīng) 由靜脈導(dǎo)管施用10毫克/公斤總體積，總劑量中的約90%在前5分鐘遞送，剩余劑量在其 后25分鐘投藥。預(yù)計(jì)，產(chǎn)生與以口服遞送所見的全身性藥代動力情況相似的曝露的相似遞 送方法產(chǎn)生相似結(jié)果。更快速的施用方法及得到的高血漿濃度不被預(yù)期能區(qū)分有用化合物 與無用化合物。例如，IV推注投藥可能產(chǎn)生比自GI道吸收后的化合物所達(dá)成的那樣更高峰 值的血漿濃度及全身性胃腸作用，可具有可接受的峰值血漿濃度及治療效率。此類化合物 的施用期間及之后，針對任何不想要的臨床作用(最顯著地，嘔吐或其它胃腸不適的癥狀) 對狗加以觀察。周期性的血清及血漿樣品在前6小時(shí)取得，以記載5-脂氧合酶的全身性抑 制與此化合物的曝露量。因此需要鑒定出不具有類似不想要的作用從而能在對諸如哮喘的 炎性疾病的治療中具有增加的利用性的新化合物。對于本發(fā)明化合物而言，可例如通過以 10毫克/公斤，100毫克/公斤斷食，及100毫克/公斤喂食的劑量口服施用指定化合物， 并評估狗的嘔吐，來評估嘔吐。預(yù)期狗嘔吐的降低可推出人的反胃或嘔吐的降低或去除。
權(quán)利要求
化學(xué)式(I)的化合物，或其可藥用鹽或溶劑化物，其中，Q是 S 或 S(O) ；X和Y每個獨(dú)立地選自C和N構(gòu)成的組；L選自如下構(gòu)成的組(a)鍵(b) (CH2) (c) O (d) C(O) R1和R2每個獨(dú)立地選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)甲基(c)乙基R3選自如下構(gòu)成的組(a)←CN(b)←C(O)NH2(c)←C(O)NH(CH3)(d)←C(O)N(CH3)2R4是H或鹵素R5選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c)←CN(d)←OCH3R6選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c)←CNR7選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c)←CN(d)甲基(e)←OCH3R8在Y是N時(shí)不存在，或R8選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c)←CN(d)甲基(e)←OCH3R9在X是N時(shí)不存在，或R9選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c)←CN(d)甲基(e)←CF3(f)←OCH3R10選自如下構(gòu)成的組(a)H(b)鹵素(c)←CNR11是H或(C1 C7)烷基，R12是H或鹵素但化學(xué)式(I)的化合物不是(a)4 (3 {[3 氟 4 (1 甲基 1H 吡唑 5 基)苯基]硫基}苯基)四氫 2H 吡喃 4 甲酰胺，或其可藥用鹽或溶劑化物，或(b)4 (3 {[4 (1 甲基 1H 吡唑 5 基)苯基]硫基}苯基)四氫 2H 吡喃 4 甲酰胺，或其可藥用鹽或溶劑化物。FPA00001141261100011.tif
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其選自如下構(gòu)成的組4_ (3-{[3-氟-4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺4- (2-氟-3- {[4- (1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)-N-甲基四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺4-(2，5_ 二氟-3-{[4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_N_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺4-(2，4_ 二氟-3-{[4-(l-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺4_ (4-氟-3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(2S，4R)-2-甲基-4-(3-{[4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(25，4幻-4-(2-氟-3-{[4-(1_甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(25，4幻-4-(4-氟-3-{[4-(1_甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(25，4幻-4-(3-氟-5-{[4-(1_甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(25，4幻-4-(2，4-二氟-3-{[4-(1_甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_甲 基四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(25，4幻-4-(3-氟-5-{[4-(1_甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲腈(25，4幻-4-(2-氟-3-{[4-(1_甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲腈(25，4 -4-(3-{[3-氟-4-(1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_甲基四 氫-2H-吡喃-4-甲腈(2S，4R) -4- (2-氟-3- {[3-氟-4- (1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_甲 基四氫-2H-吡喃-4-甲腈(2S，4R) -4- (3-氟-5- {[3-氟-4- (1-甲基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)_2_甲 基四氫-2H-吡喃-4-甲腈4_[3-({3-氟-4-[(1-甲基-IH-吡唑-5-基)甲基]苯基}硫基)苯基]四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺4_ [3- ({4- [ (1-甲基- IH-吡唑-5-基)羰基]苯基}硫基)苯基]四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺4_ [3-({3-氰基-4-[(1-甲基-IH-吡唑-5-基)氧]苯基}硫基)苯基]四氫-2H-吡 喃-4-甲酰胺(2S，4R) -4- [2-氟-3- ({4- [ (1-甲基-IH-吡唑-5-基)羰基]苯基}硫基)苯基]-2-甲 基四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(2S，4R) -4- [2-氟-3- ({4- [ (1-甲基-IH-吡唑-5-基)羰基]苯基}硫基)苯基]-2-甲 基四氫-2H-吡喃-4-甲腈4-[3-({5_氯-6-[(l-甲基-IH-吡唑-5-基)氧]吡啶-3-基}硫基)苯基]四 氫-2H-吡喃-4-甲酰胺(25，4 -4-[3-({5-氯-6-[(1-甲基-IH-吡唑-5-基)氧]吡啶 _3_基}硫基)_2_ 氟 苯基]-2-甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈(25，4 -4-[3-({5-氯-6-[(1-甲基-IH-吡唑-5-基)氧]吡啶 _3_基}硫基)_2_ 氟 苯基]-2-甲基四氫-2H-吡喃-4-甲酰胺 或其可藥用鹽或溶劑化物。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物，具有如下化學(xué)式的(2S，4R)-4-(2-氟-3-{[4-(l-甲 基-IH-吡唑-5-基)苯基]硫基}苯基)-2-甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈， 或其可藥用鹽或溶劑化物。
4.如權(quán)利要求3所述的化合物，(25，4幻-4-(2-氟-3-{[4-(1_甲基-IH-吡唑-5-基) 苯基]硫基}苯基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈甲苯磺酸鹽或其可藥用溶劑化物。
5.如權(quán)利要求4所述的化合物，其是(25，4幻-4-(2-氟-3-{[4-(1-甲基-1!1-吡 唑-5-基)苯基]硫基}苯基)-2_甲基四氫-2H-吡喃-4-甲腈和對甲苯磺酸的1 1摩 爾比例的鹽，其是晶體，并且，當(dāng)使用Cu Ka1輻射(波長=.1.5406 A)測量時(shí)，其X-射線 衍射圖案具有以2- θ角(士0. 1度)表示的下述主要χ-射線衍射圖案的峰
6.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-5中一項(xiàng)或多項(xiàng)定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可 藥用鹽或溶劑化物，和一種或多種可藥用賦形劑。
7.特別用于治療5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥的組合，所述組合包含權(quán)利要求1-5中 一項(xiàng)或多項(xiàng)定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和一種或多種另外的治 療劑。
8.如權(quán)利要求7所述的組合，選自如下構(gòu)成的組-包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和糖皮質(zhì)激素或DAGR的組合； -包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和COX抑制劑，非選擇性或選擇 性的C0X-1或C0X-2抑制劑，的組合；-包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和β 2激動劑的組合； -包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和毐蕈堿型Μ3受體拮抗劑或抗 膽堿藥劑的組合；-包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和組胺受體拮抗劑的組合；-包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和利尿劑的組合；-包含化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，和鈣離子通道阻斷劑的組合。
9.權(quán)利要求1-5中一項(xiàng)或多項(xiàng)定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，其用作為藥物。
10.在需要治療的患者中治療5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥的方法，所述方法通過向 所述患者施用治療有效量的權(quán)利要求1-5中一項(xiàng)或多項(xiàng)定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可 藥用鹽或溶劑化物來進(jìn)行。
11.權(quán)利要求1-5中一項(xiàng)或多項(xiàng)定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物， 其用于治療5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥。
12.權(quán)利要求1-5中一項(xiàng)或多項(xiàng)定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物 的用于制造用于治療5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥的藥物的用途。
13.權(quán)利要求7-12中任意一項(xiàng)所述的發(fā)明，其中，所述5-L0介導(dǎo)的疾病、失調(diào)或病癥選 自如下疾病構(gòu)成的組>任何類型、病因或病原的哮喘，特別是選自異位性哮喘，非異位性哮喘，過敏性哮喘， 異位性支氣管IgE介導(dǎo)的哮喘，支氣管哮喘，特發(fā)性哮喘，真哮喘，病理生理紊亂造成的內(nèi) 因性哮喘，環(huán)境因素造成的外因性哮喘，不知或不明顯原因的特發(fā)性哮喘，支氣管炎哮喘， 氣腫性哮喘，運(yùn)動誘發(fā)的哮喘，過敏原誘發(fā)的哮喘，冷空氣誘發(fā)的哮喘，職業(yè)性哮喘，細(xì)菌、 真菌、原生動物或病毒感染造成的感染性哮喘、非過敏性哮喘，初始性哮喘，哮喘嬰兒綜合 征和支氣管炎構(gòu)成的組的成員的哮喘，>慢性或急性支氣管縮小、慢性支氣管炎、氣道阻塞和肺氣腫，>任何類型、病因或病原的阻塞性或炎性氣道疾病，特別是選自慢性嗜酸細(xì)胞性肺炎， 慢性阻塞性肺病(COPD)，包括慢性支氣管炎、肺氣腫或與COPD有關(guān)或無關(guān)的呼吸困難的 C0PD，特征在于不可逆漸進(jìn)式氣道阻塞的C0PD、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、其它藥物治 療造成的氣道高反應(yīng)性加劇，和與肺動脈高壓有關(guān)的氣道疾病構(gòu)成的組的成員的阻塞性或 炎性氣道疾病，>任何類型、病因或病原的支氣管炎，特別是選自急性支氣管炎、急性喉氣管支氣管 炎、花生支氣管炎、鼻黏膜炎支氣管炎、格魯布性支氣管炎、干燥支氣管炎、感染性哮喘支氣 管炎、增殖性支氣管炎、金黃色葡萄球菌或鏈球菌支氣管炎和肺泡性支氣管炎構(gòu)成的組的 成員的支氣管炎，>急性肺部損傷，>任何類型、病因或病原的支氣管擴(kuò)張癥，特別是選自柱狀支氣管擴(kuò)張癥、囊狀支氣管 擴(kuò)張癥、紡綻狀支氣管擴(kuò)張癥、毛細(xì)管支氣管擴(kuò)張癥、囊性支氣管擴(kuò)張癥、干燥支氣管擴(kuò)張 癥和結(jié)節(jié)性支氣管擴(kuò)張癥構(gòu)成的組的成員的支氣管擴(kuò)張癥，>任何類型的過敏性鼻炎，包括季節(jié)過敏性鼻炎、常年性過敏性鼻炎、血管運(yùn)動性鼻 炎、藥物性鼻炎和花粉熱，>疼痛，包括傷害性或神經(jīng)性疼痛， 申經(jīng)退化疾病，和>心血管病癥。
14.制造權(quán)利要求1-5中一項(xiàng)或多項(xiàng)定義的化學(xué)式(I)的化合物或其可藥用鹽或溶劑 化物的方法，該方法包括(i)在合適的溶劑中使化學(xué)式1的化合物 其中，R1至R6如權(quán)利要求1所定義，且Z1是離去基團(tuán)或偶聯(lián)伴侶，與化學(xué)式2的化合物接觸 其中，X、Y、L和R7至R12如權(quán)利要求1所定義，且Z2是氫或保護(hù)基團(tuán)；或，替代步驟(i) ( )使化學(xué)式4的化合物其中，R1至R6如權(quán)利要求1所定義，且Z2如 中所定義，與化學(xué)式5的化合物接觸 其中，X、Y、L和R7至R12如權(quán)利要求1所定義，且Zjn (i)中所定義， 以獲得化學(xué)式3的化合物(iii)任選地，使該化學(xué)式3的化合物與氧化劑于合適的溶劑中接觸，以獲得相應(yīng)的化 學(xué)式18的亞砜
全文摘要
本發(fā)明涉及化學(xué)式(I)的化合物其制備方法、其作為5-脂氧合酶抑制劑的用途及含有其的藥物組合物。
文檔編號C07D405/14GK101918392SQ200880117868
公開日2010年12月15日 申請日期2008年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月26日
發(fā)明者喬恩·戈登·賽博, 卡利俄潘·伊亞那, 埃德加多·阿爾維拉, 托德·邁克爾·麥德達(dá)克斯, 斯科特·薩特弗德·烏達(dá)德, 格雷斯·瑪麗·瓦格納, 理查德·艾蘭·沃恩德伊姆柏斯, 科爾比·雷·薩姆伯, 米歇爾·安·施密特, 羅納德·愛德華·賽德爾, 邁克爾·布倫特·托勒夫森, 馬修·J·格蘭拓, 馬修·威廉·瑪哈尼, 馬克·艾蘭·馬薩, 馬格利特·拉那漢·格拉派奧斯 申請人:輝瑞有限公司