專利名稱：睡眠改善劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型的睡眠改善劑，具體涉及改善睡眠的睡眠改善劑。
背景技術(shù)：
在現(xiàn)代社會(huì)中，困擾于由于壓力和24小時(shí)型生活習(xí)慣而失眠的人有增加的趨勢(shì)。 在厚生勞動(dòng)省從2003年開始的"健康。'< >9 t & 睡眠指針検討會(huì)"(為了創(chuàng)造健康的 睡眠指南研討會(huì))的報(bào)告中，"因失眠而苦惱的人"的比例上升至21.4%，成為嚴(yán)重問題。 因此，希望舒適睡眠的人前所未有地增加，與此相應(yīng)，對(duì)改善失眠的藥物的需要今后也會(huì)日 益增加?，F(xiàn)在，使用著各種各樣的安眠藥，但是，這些安眠藥的大部分存在睡醒后頭痛、不適 感、身體依賴等副作用，所以未必可以說能夠得到自然的睡眠。因此，開發(fā)能夠得到更舒適 睡眠的治療藥至關(guān)重要。 在日本和中國等，自古以來使用的生藥、中藥中，失眠的處方有很多，在日本沖 繩，作為民間藥物，已知在失眠時(shí)食用百合科植物萱草(Hemerocallis fulva L. var. sempervirens)的根和葉。該萱草通稱為頭腦遲鈍草(睡眠的草的意思)，在失眠時(shí)直接服 用根或葉的生體或者對(duì)根或葉進(jìn)行煎煮等后服用。迄今為止，報(bào)告了使小鼠口服攝取該植 物的干燥粉末時(shí)的睡眠增加作用(非專利文獻(xiàn)l)。另外，在專利文獻(xiàn)l中記載了對(duì)萱草進(jìn) 行發(fā)酵處理而得到的發(fā)酵處理物具有睡眠改善作用。但是，在這些報(bào)告中并沒有明確本植 物中的睡眠調(diào)節(jié)活性成分。 非專利文獻(xiàn)l :Uezu， E. "Effect of Hemerocallis on sleep in mice "Psychiatry
Clin. Neurosci. 1998， 52(2) ，136-137. 專利文獻(xiàn)1 :日本特開2006-62998號(hào)公報(bào)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種新型的睡眠改善劑和鎮(zhèn)靜劑。 為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明的發(fā)明人等對(duì)有效成分進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)在沖繩自然 生長的百合科植物萱草(Hemerocallis fulva L. var. sempervirens)成分的氧代江瑤羥烯 氨酸對(duì)于鎮(zhèn)靜和改善睡眠效率有效，基于這樣的見解，完成了本發(fā)明。
S卩，本發(fā)明涉及以下的睡眠改善劑和鎮(zhèn)靜劑。 項(xiàng)l. 一種睡眠改善齊U，其含有下述化學(xué)式I所示的氧代江瑤羥烯氨酸
(oxypinnatanine)或其衍生物作為有效成分。
<formula>formula see original document page 3</formula> 項(xiàng)2.下述化學(xué)式I所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物用于改善睡眠效率的使<formula>formula see original document page 4</formula> 項(xiàng)3.
有效成分。
HOOC—C—H2C—C——C——HN
I I II
NH2OH O
HOH2C ( J )
-種鎮(zhèn)靜劑，其含有下述化學(xué)式I所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物作為
H H HOOC—C—H2C—C——C——HN
NH，
OH O
HOH2C ( i ■)
項(xiàng)4.下述化學(xué)式I所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物用于鎮(zhèn)靜的使用,
H H HOOC—C—H2C—C—C—HN
NH，
OH O
HOH2C ( J ) 發(fā)明效果 根據(jù)本發(fā)明，通過攝取作為萱草成分的氧代江瑤羥烯氨酸，能夠改善睡眠。特別是 本發(fā)明的睡眠改善劑，能夠有意義地延長非快速眼動(dòng)睡眠。另外，本發(fā)明的睡眠改善劑除了 具有優(yōu)異的睡眠改善作用以外，還具有優(yōu)異的鎮(zhèn)靜作用，所以也可以用作鎮(zhèn)靜劑。


圖1表示對(duì)大鼠口服給藥100mg/kg氧代江瑤羥烯氨酸時(shí)和只給予載體時(shí)的非快 速眼動(dòng)睡眠(NREM sle印)的效果。 圖2表示對(duì)小鼠口服給藥100mg/kg氧代江瑤羥烯氨酸時(shí)和只給予載體時(shí)的給藥 后的(A)運(yùn)動(dòng)量的變化和(B)合計(jì)運(yùn)動(dòng)量。 圖3表示對(duì)小鼠口服給藥10mg/kg氧代江瑤羥烯氨酸時(shí)和只給予載體時(shí)的睡眠覺 醒量的變化。
具體實(shí)施例方式
在本發(fā)明中，所謂"睡眠改善劑"用于通過改善起床時(shí)的困倦、順利入睡、減少中途 驚醒等作用，誘發(fā)安眠、引導(dǎo)良好的睡眠狀態(tài)。另外，在本發(fā)明中，所謂"鎮(zhèn)靜劑"用于通過 使人或動(dòng)物的精神鎮(zhèn)靜，使其放松或改善睡眠。 本發(fā)明的睡眠改善劑含有下述化學(xué)式I所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物作
為有效成分。
4<formula>formula see original document page 5</formula> 本發(fā)明的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物的制造方法沒有限定，例如，可以將植物、 具體將沖繩的藥用植物萱草(Hemerocallis fulva L. var. sempervirens)作為原料，通過 提取離析而配制。 在從萱草離析調(diào)制氧代江瑤羥烯氨酸時(shí)，用作原料的萱草可以是全草，也可以是 其一部分。該氧代江瑤羥烯氨酸的調(diào)制沒有限制，例如，經(jīng)過用包含有機(jī)溶劑的溶劑對(duì)萱草 的全草或其一部分進(jìn)行提取和分離的工序而進(jìn)行。 例如，將新鮮的萱草的全草切細(xì)，用有機(jī)溶劑在室溫提取5天 3周左右，然后，對(duì) 其進(jìn)行過濾并濃縮濾液，通過組合各種柱色譜對(duì)得到的溶劑提取物進(jìn)行分離，能夠得到本 發(fā)明的氧代江瑤羥烯氨酸。在此，作為有機(jī)溶劑，可以列舉甲醇、乙醇、丁醇、丙酮、乙酸乙 酯、氯仿等。優(yōu)選的有機(jī)溶劑是甲醇、乙醇、丁醇、氯仿等。還可以使用水和水與這些有機(jī)溶 劑的混合液等進(jìn)行提取。另外，作為柱色譜，可以列舉開放式柱色譜、高速液體色譜(HPLC)、 分離再循環(huán)HPLC等，在這些柱色譜中可以組合各種柱色譜用的載體(順相硅膠、逆相硅膠 (0DS)、凝膠過濾(S印hadex)、離子交換樹脂(Diaion HP-20))等。作為優(yōu)選的柱色譜的組 合，可以列舉在開放式柱色譜中組合離子交換樹脂(Diaion HP-20)、順相硅膠、逆相硅膠 (0DS)、凝膠過濾(S印hadex、 GS)等，在分離再循環(huán)HPLC中組合凝膠過濾(S印hadex、 GS)， 在HPLC中組合逆相硅膠(0DS)等。 另外，用作本發(fā)明的睡眠改善劑的有效成分的氧代江瑤羥烯氨酸也包括上述化學(xué) 式(I)所包含的結(jié)構(gòu)異構(gòu)體。 本發(fā)明的睡眠改善劑可以只由上述化學(xué)式(I)所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍 生物構(gòu)成，也可以根據(jù)使用形態(tài)含有載體、基材或添加物等其它成分。在本發(fā)明的睡眠改善 劑中，作為上述化學(xué)式(I)所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物的配合比例，根據(jù)該睡眠 改善劑的使用形態(tài)、所期待的效果的程度、使用者的性別和年齡等而有所不同，作為一個(gè)例 子，可以列舉相對(duì)于該睡眠改善劑的總重量，化學(xué)式(I)所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍 生物的比例為0.01 100重量％、優(yōu)選為0. 1 10重量％。
本發(fā)明的睡眠改善劑可以作為醫(yī)藥、食品等使用。 本發(fā)明的睡眠改善劑的給藥形態(tài)、劑型可以是口服給藥、非口服給藥的任意一種。 作為口服給藥，可以列舉散劑、顆粒劑、膠囊劑、片劑、咀嚼片等固體制劑，溶液劑、糖漿劑等 液體制劑。另外，作為非口服給藥劑，可以列舉注射劑、噴霧劑等。優(yōu)選的給藥形態(tài)是片劑 和膠囊劑等口服給藥。 本發(fā)明的睡眠改善劑使用公知的制劑化方法，特別是適合于口服攝取的制劑化技 術(shù)，進(jìn)行制劑化。 例如，將本發(fā)明的睡眠改善劑用作醫(yī)藥時(shí)，將作為活性成分的處于游離或酸加成 鹽形態(tài)的有效量的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物與醫(yī)藥上允許的載體均勻混合，從而制造 該醫(yī)藥組合物。根據(jù)對(duì)給藥而言希望的制劑形態(tài)，該載體可以采取廣泛范圍的形態(tài)。這些 醫(yī)藥組合物優(yōu)選為適合口服給藥的單位服用形態(tài)。在口服服用形態(tài)的組合物的調(diào)制中，可以使用任意有用的藥理上能夠允許的載體。例如，懸濁液和糖漿劑那樣的口服液體調(diào)制物
可以使用水、蔗糖、山梨糖醇、果糖等糖類，聚乙二醇、丙二醇等二醇類，芝麻油、橄欖油、大
豆油等油類，對(duì)羥基苯甲酸烷基酯等防腐劑，草莓香料、薄荷等香料類進(jìn)行制造。 散劑、丸藥、膠囊和片劑可以使用乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖等賦形劑，淀粉、藻酸
鈉等崩解劑，硬脂酸鎂、滑石等潤滑劑，聚乙烯醇、羥丙基纖維素、角蛋白等粘合劑，脂肪酸
酯等表面活性劑，甘油等增塑劑來制造。出于容易給藥的理由，片劑和膠囊是最有用的單位
口服給藥劑型。在制造片劑或膠囊劑時(shí)，可以使用固體的醫(yī)藥載體。 口服給藥本發(fā)明的睡眠改善劑時(shí)，其有效給藥量根據(jù)對(duì)象患者的年齡、體重、病 情、給藥方法等而有所不同，通常給藥使得有效成分(氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物)為 1 10000mg/kg/日左右，優(yōu)選為10 1000mg/kg/日左右。另外，其給藥時(shí)間通常是就寢 前的1 6小時(shí)，更優(yōu)選為2 5小時(shí)。
實(shí)施例 以下，為了具體說明本發(fā)明，記載本發(fā)明的睡眠改善劑的有效成分氧代江瑤羥烯 氨酸的制造例、用于明確本發(fā)明的睡眠改善劑和鎮(zhèn)靜效果的實(shí)施例、以及本發(fā)明的睡眠改 善劑的制劑例。但是，本發(fā)明不限定于這些實(shí)施例等。
實(shí)施例1 氧艦,'琉氡扁先隨誠 將新鮮的萱草的全草切細(xì)，以甲醇為溶劑，在室溫提取1周。然后，對(duì)其進(jìn)行過濾 并濃縮濾液，在開放式柱色譜中組合離子交換樹脂(Diaion HP-20)、順相硅膠、凝膠過濾 (S印hadex、GS)，在分離再循環(huán)HPLC中組合凝膠過濾(S印hadex、GS)，對(duì)得到的固體(以下 稱為"甲醇提取物")進(jìn)行分離，得到氧代江瑤羥烯氨酸。
關(guān)于氧代江瑤羥烯氨酸得到的數(shù)據(jù)結(jié)果如下。
無色針狀結(jié)晶(H20-MeOH) :mp 152—153 °C (decomp.) ;IR(KBr) v隨3350， 1660， 1615， 1504cm—1. 丄H NMR(D。0，400MHz) 5 :6.40(1H， m，2' )，6. 19(1H， d d d， J = 4，4，2H z，4，)， 5.63(1H，d d d d， J = 14， 4， 4， 2H z， 5，) ， 4. 74 (1H， d d d d， J = 14， 4， 4， 2Hz， 5，) ， 4. 34(1H，d d， J = 9，4Hz，3) ，4. 26(1H，d d， J = 14，2Hz，6') ，4. 18(1H，d d， J = 14，2Hz，6') ， 3. 98(1H， d d，7，4Hz，5) ，2. 34(1H， d d d， J = 15， 7， 4Hz， 4) ， 2. 22(1H， d d d， J = 15，9，4Hz，4).
nC NMR(D20， 100MHz) 5 c :178. 7(2) ， 175. 9(6) ， 138. 6(3， ) ， 129. 1 (4，)， 87. 5 (2， ) ， 76. 6 (5' ) ， 71. 7 (3) ， 58. 9 (6' ) ， 55. 2 (5).
試驗(yàn)例1
1.方法
1)使用動(dòng)物 從Japan SLC株式會(huì)社購買Sprague-Dawley大鼠(雄性、出生后8周、體重250 280g)。 2)飼養(yǎng)方法 使用置于隔音室內(nèi)的丙烯酸樹脂制的舍籠分別管理大鼠。在每隔12小時(shí)的明暗 周期(早上7點(diǎn)開始明亮期)下，給予大鼠用固定型飼料(飼料名稱Labo MR Stock)，任 其自由攝取飼料和水。
3)腦電波、肌電位測定用電極的處理手術(shù)和在測定裝置中的連接 對(duì)大鼠實(shí)施腦電波、肌電位測定用電極的處理手術(shù)(Huang Z. L. etal. ， J. Neuro
sci. 2003， 23(14)， 5975-83. ， 0kada T. et al. ， Biochem. Biophys. Res.Commun.2003，
312 (1) ， 29-34.)，使其在恢復(fù)室內(nèi)恢復(fù)10天。此后，移入記錄室，在電極上連接測定用電
線，使其適應(yīng)4天。 4)樣品給藥 將氧代江瑤羥烯氨酸溶解在水中，使用探針以給藥用量100mg/kg 口服給藥。給藥在19:00(暗期的開始時(shí)刻)進(jìn)行，第1天只給予水作為單獨(dú)溶劑的對(duì)照，在第2天給藥氧代江瑤羥烯氨酸(n = 6)。
5)腦電波、肌電位的記錄和解析 腦電波和肌電位，在增幅(腦電波0. 5-30Hz、肌電位20-200Hz)后，以取樣速度128Hz數(shù)字化記錄。解析使用腦電波記錄軟件"Sle印Sign" (KISSEI COMTEC公司生產(chǎn))，以IO秒鐘的數(shù)據(jù)為l個(gè)時(shí)期，通過腦電波和肌電位的頻率數(shù)成分、波形，將各時(shí)期自動(dòng)判定為覺醒、非快速眼動(dòng)睡眠、快速眼動(dòng)睡眠的任意一種。得到的判定結(jié)果最終由實(shí)驗(yàn)者本人確認(rèn)，根據(jù)需要進(jìn)行修正。對(duì)給藥后12小時(shí)內(nèi)的腦電波數(shù)據(jù)進(jìn)行解析，計(jì)算出每1小時(shí)的覺醒、非快速眼動(dòng)睡眠、快速眼動(dòng)睡眠的時(shí)間。另外，解析腦電波的能譜，解析9波和S波的強(qiáng)度。 2.結(jié)果 給藥后6小時(shí)中的非快速眼動(dòng)睡眠的合計(jì)時(shí)間 與給予載體(水)時(shí)相比，對(duì)于給藥用量100mg/kg，可以看出延長非快速眼動(dòng)睡眠
時(shí)間的效果(圖1)。
試驗(yàn)例2
1.方法
1)使用動(dòng)物 從Japan SLC株式會(huì)社購買Sic :ICR小鼠(雄性、出生后10周、體重38 40g)。
2)飼養(yǎng)方法 使用置于動(dòng)物行動(dòng)量測定室內(nèi)的丙烯酸樹脂制的舍籠分組飼養(yǎng)(每組8只)，使其馴化7天。在每隔12小時(shí)的明暗周期(早上7點(diǎn)開始明亮期)下，給予大鼠用固定型飼料(飼料名稱Labo MR Stock)，任其自由攝取飼料和水。
3)樣品給藥 將氧代江瑤羥烯氨酸溶解在水中，使用探針以給藥重量100mg/kg 口服給藥。給藥在19:00(暗期的開始時(shí)刻)進(jìn)行，第1天只給予水作為單獨(dú)溶劑的對(duì)照，在第2天給藥氧代江瑤羥烯氨酸(n = 8)。 4)步行運(yùn)動(dòng)測定(運(yùn)動(dòng)量)的記錄和解析 使用紅外線監(jiān)測器，檢測從動(dòng)物放出的紅外線，計(jì)算運(yùn)動(dòng)量。紅外線監(jiān)測器連續(xù)記錄12小時(shí)。記錄使用Biotex 16CH Act MonitorBAI2216 (biotechs公司生產(chǎn))進(jìn)行。解
析計(jì)算出運(yùn)動(dòng)量的經(jīng)時(shí)變化和在各時(shí)間的合計(jì)運(yùn)動(dòng)量。
2.結(jié)果 給藥后6小時(shí)中的合計(jì)運(yùn)動(dòng)量
與給予載體(水)時(shí)相比，對(duì)于給藥量100mg/kg，可以看出統(tǒng)計(jì)學(xué)上有意義的運(yùn)動(dòng)
量的減少。
試驗(yàn)例3
1.方法
1)使用動(dòng)物 從株式會(huì)社Oriental BioService購買C57BL/6小鼠(雄性、出生后10周、體重
25 28g)。 2)飼養(yǎng)方法 使用置于隔音室內(nèi)的丙烯酸樹脂制的舍籠分別管理小鼠。在每隔12小時(shí)的明暗周期(早上8點(diǎn)開始明亮期)下，給予小鼠用固定型飼料(飼料名稱Labo MR Stock)，任其自由攝取飼料和水。 3)腦電波、肌電位測定用電極的處理手術(shù)和在測定裝置中的連接 對(duì)小鼠實(shí)施腦電波、肌電位測定用電極的處理手術(shù)，使其在恢復(fù)室內(nèi)恢復(fù)10天。
此后，移入記錄室，在電極上連接測定用電線，使其適應(yīng)4天。 4)樣品給藥 將氧代江瑤羥烯氨酸溶解在水中，使用探針以給藥用量10mg/kg 口服給藥。給藥在20:00(暗期的開始時(shí)刻)進(jìn)行，第1天只給予水作為單獨(dú)溶劑的對(duì)照，在第2天給藥氧代江瑤羥烯氨酸(n = 4)。
5)腦電波、肌電位的記錄和解析 腦電波和肌電位，在增幅(腦電波0. 5-30Hz、肌電位20-200Hz)后，以取樣速度128Hz數(shù)字化記錄。解析使用腦電波記錄軟件"Sle印Sign" (KISSEI COMTEC公司生產(chǎn))，以IO秒鐘的數(shù)據(jù)為l個(gè)時(shí)期，通過腦電波和肌電位的頻率數(shù)成分、波形，將各時(shí)期自動(dòng)判定為覺醒、非快速眼動(dòng)睡眠、快速眼動(dòng)睡眠的任意一種。得到的判定結(jié)果最終由實(shí)驗(yàn)者本人確認(rèn)，根據(jù)需要進(jìn)行修正。對(duì)給藥后12小時(shí)內(nèi)的腦電波數(shù)據(jù)進(jìn)行解析，計(jì)算出每1小時(shí)的覺醒、非快速眼動(dòng)睡眠、快速眼動(dòng)睡眠的時(shí)間。另外，解析腦電波的能譜，解析9波和S波的強(qiáng)度。 2.結(jié)果 給藥后4小時(shí)中的非快速眼動(dòng)睡眠的合計(jì)時(shí)間 與給予水時(shí)相比，對(duì)于給藥用量10mg/kg，可以看出統(tǒng)計(jì)學(xué)上有意義地延長非快速眼動(dòng)睡眠時(shí)間的效果(圖3)。制劑例l:片劑按照常規(guī)方法，由下述組成調(diào)制片劑。
氧代江瑤羥烯氨酸200mg乳糖60mg馬鈴薯淀粉30mg聚乙烯醇2mg硬脂酸鎂lmg焦油色素微量制劑例2 :散劑
按照常規(guī)方法，由下述組成調(diào)制散劑。 氧代江瑤羥烯氨酸 200mg 乳糖 275mg 產(chǎn)業(yè)上的可利用性 本發(fā)明的氧代江瑤羥烯氨酸能夠作為睡眠改善劑和鎮(zhèn)靜劑使用。
權(quán)利要求
一種睡眠改善劑，其特征在于含有下述化學(xué)式I所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物作為有效成分F2008800176603C00011.tif
2.下述化學(xué)式I所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物用于改善睡眠效率的使用<formula>formula see original document page 2</formula>
3. —種鎮(zhèn)靜劑，其特征在于含有下述化學(xué)式I所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物作為有效成分<formula>formula see original document page 2</formula>
4.下述化學(xué)式I所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物用于鎮(zhèn)靜的使用<formula>formula see original document page 2</formula>
全文摘要
本發(fā)明的課題在于提供一種新型的睡眠改善劑和鎮(zhèn)靜劑。通過提供含有下述化學(xué)式(I)所示的氧代江瑤羥烯氨酸或其衍生物作為有效成分的睡眠改善劑和鎮(zhèn)靜劑，解決上述課題。
文檔編號(hào)C07D307/30GK101711240SQ200880017660
公開日2010年5月19日 申請(qǐng)日期2008年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月29日
發(fā)明者中村憲夫, 內(nèi)山奈穗子, 和田雅史, 小西天二, 里出良博, 黃志力 申請(qǐng)人:財(cái)團(tuán)法人大阪生物科學(xué)研究所;學(xué)校法人同志社;株式會(huì)社科蕾?zèng)_繩