專利名稱：¹⁸F-標(biāo)記的葉酸酯類的制作方法
"F-標(biāo)記的葉酸酯類發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及新的"F-葉酸酯(folate)方文射性藥物，其中氟-18是通 過三唑-或四唑-連接基共價連接到葉酸酯或其衍生物，它們的制備方法， 以及它們在診斷和監(jiān)測癌癥和炎癥和自身免疫疾病及其治療中的用途。背景用于遞送效應(yīng)物部分例如診斷或治療劑的細(xì)胞特異性靶向作用是 一個廣泛研究的領(lǐng)域，并且已導(dǎo)致非侵入性診斷和/或治療醫(yī)學(xué)應(yīng)用的 發(fā)展。特別是，在核醫(yī)學(xué)操作和治療的領(lǐng)域，其應(yīng)用放射活性物質(zhì)發(fā) 射電磁輻射如Y -射線或光子或粒子發(fā)射輻射，需要這些放射活性物質(zhì) 在靶向的細(xì)胞或組織中的選擇性定位，以實(shí)現(xiàn)用于特異性組織的顯像 的高信號強(qiáng)度、評價疾病和/或監(jiān)測治療性治療的作用，或者實(shí)現(xiàn)高輻 射劑量以用于給特定患病位置遞送充足劑量的電離輻射，而在其它組 織例如健康組織中無輻射損傷的風(fēng)險。因此重要關(guān)注的是確定和評價 細(xì)胞特異性結(jié)構(gòu)，并且特別是腫瘤(即癌癥)或者炎癥和自身免疫性疾 病中存在的結(jié)構(gòu)，例如受體、抗原、半抗原等，它們能通過各自的生物學(xué)栽體而特異性地被靶向。葉酸酯受體(FR)已被鑒定為是這些結(jié)構(gòu)中的一種。FR是一種高度 親和性(K。 < 10—9 M)的膜相關(guān)蛋白。在正常組織和器官中，F(xiàn)R-表達(dá)高 度局限于僅僅很少數(shù)器官(例如腎、肺、脈絡(luò)叢和胎盤)，在這些地方 它大量地存在于上皮細(xì)胞的腔表面，并且因此在循環(huán)中無葉酸酯供應(yīng)。 FR- ot通常在多種特定細(xì)胞類型中過表達(dá)，例如上皮性腫瘤(例如卵巢、 頸脊、子宮內(nèi)膜、乳房、結(jié)腸直腸、腎、肺、鼻咽)，而FR-e通常在 白血病細(xì)胞中過表達(dá)(約70 %的急性髓細(xì)胞性白血病(AML)為FR-I3陽 性)。因此兩者均可用作有價值的腫瘤標(biāo)記物以用于選擇性腫瘤耙向作用(Elnakat and Rat議，Adv. DrugDeliv. Rev. 2004; 56:1067-84)。 此外，近來發(fā)現(xiàn)被診斷為患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者中的活化的(但不 是休眠的)滑液巨噬細(xì)胞具有功能上活化的 FR- e (Nakashima-Matsushita et al， Arthritis & Rheumatism, 1999， 42 (8): 1609-16)。因此，活化的巨噬細(xì)胞可以用葉酸酯綴合物選擇性 地靶向進(jìn)入關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)中，這開創(chuàng)了類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷和治 療的可能性(Paulos et al， Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56: 1205-17)?；诘す羌芡ㄟ^苯甲?；被糠志Y合結(jié)合到谷氨酸根上的葉 酸，和其衍生物因此在過去15年被集中地作為靶向劑進(jìn)行了研究以用 于將治療和/或診斷劑遞送到具有葉酸酯受體的細(xì)胞群，以便使治療和 /或診斷劑在此類細(xì)胞中相比于正常細(xì)胞中而言達(dá)到選擇性的濃度。多種葉酸衍生物和綴合物是已知的，并且已作臨床或臨床前評價， 其包括葉酸酉旨放射性藥物(Leamon and Low, Drug Discov. Today 2001; 6:44-51; US 4， 276， 280)、氟化的葉酸酯化學(xué)治療劑(US 4， 628， 090)、 與4匕學(xué)治療劑的葉酸酉旨綴合物(Leamon and Reddy， Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56: 1127-41; Leamon et al， Bioconjugate Chem. 2005; 16: 803-11)、與蛋白和蛋白毒素的葉酸酯綴合物(Ward et al，. J. Drug Target. 2000; 8:119-23; Leamon et a 1， J. Biol. Chem. 1993; 268:24847-54; Leamon and Low, J. Drug Target. 1994; 2:101-12)、 與反義寡核苷酸(oliconucleotides)的葉酸酯綴合物(Li et al， Pharm. Res. 1998; 15:1540-45; Zhao and Lee， Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1193-204)、與脂質(zhì)體的葉酸酯綴合物(Lee and Low, Biochim. Biophys. Acta-Biomembr. 1995; 1233:134-44; Gabizon et ai， Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1177-92)、與半抗原分子的 葉酸酉旨綴合物(Paulos et al， Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17)、與MRI造影劑的葉酸酯綴合物(Konda et al, Magn. Reson. Mat. Phys. Biol. Med. 2001; 12: 104-13)等等。通常所有 的這些衍生物和綴合物在葉酸的谷氨酸根部分被修飾，這適用于已知的羧酸偶合法。葉酸酯放射性藥物可以特別有用的，可用于改善癌癥和炎癥和自 身免疫疾病治療的效果的診斷和評價。其可包括治療應(yīng)答的評價和/ 或預(yù)測并且因此改善放射量測定。適用于放射成像的典型顯像技術(shù)是本領(lǐng)域已知的，并且包括正電子發(fā)射斷層攝影法(PET)、 二維或單光子 發(fā)射計算機(jī)斷層攝影(spect)成像、y照相法、閃爍法等。PET和SPECT均將放射性示蹤劑用于成像、繪圖和測定所選耙位 置的活性。雖然PET仍使用正電子發(fā)射核素，其要求附近的回旋加速 器；而spect使用通過發(fā)生器系統(tǒng)獲得的單光子發(fā)射核素，這可以使 它使用更方便。然而，SPECT提供了相對于PET更低的靈敏度，此外 還缺乏少數(shù)近似定量方法。在PET的情況下，正電子湮沒產(chǎn)生兩個511 keV的y射線，其為充分開發(fā)的定量方法提供了基礎(chǔ)。因此PET是一 種最精密的功能成像技術(shù)，以評價配體或代謝底物在腦和其它器官中 的局部攝取和親和性，并且因此提供了基于代謝活性的成像的測定方 法。這是例如通過給受試者施用正電子發(fā)射同位素而實(shí)現(xiàn)的，由于其 經(jīng)歷放射性衰變，由正電子/電子湮沒而產(chǎn)生的y射線是通過PET掃描 機(jī)檢測的。在適合用于PET的同位素的選擇中需要考慮的因素包括正電子發(fā) 射同位素的足夠的半衰期以容許在施用于患者之前制備任選在藥學(xué)可 接受的載體中的診斷組合物，以及足夠剩余的半衰期以產(chǎn)生足夠的活 性以容許PET掃描的體外測量。此外，適合的同位素應(yīng)當(dāng)具有足夠短 的半衰期以限制患者暴露于不必要的輻射。通常，用于PET的適合的 放射性藥物可以是以金屬同位素為基礎(chǔ)的，例如鎵或銅。然而，這二 者需要螯合劑以用于俘獲該金屬，其可能對立體和化學(xué)性質(zhì)有作用。 另外，放射性藥物可以基于共價連接的同位素，其提供了最小的結(jié)構(gòu) 改變。用于共價連接并且適用于PET掃描的放射性核素通常是具有短 半衰期的同位素，例如"C (約20min)、13N (約10min)、150 (約2 min)、 18F (約110 rain)。迄今為止，許多基于螯合物的葉酸酯放射性藥物已被合成并且被成功地評價為用于對葉酸酯受體-陽性腫瘤成像的診斷劑。最廣泛研究的衍生物是用mIn和99mTc標(biāo)記的(Siegel et al. ， J. Nucl. Med. 2003 44:700; MUller et al. ， 丁. Orga醒et. Chem. 2004， 689: 4712)， 其用于SPECT;或者是用"Ga標(biāo)記的，其用于PET (Mathias et al.， Nucl. Med. Biol. 2003， 30 (7): 725)。然而，上述的所有均需要一種 適宜的螯合劑，該螯合劑通常要通過其谷氨酸根部分與葉酸連接。因此具有共價連接的同位素的葉酸酯放射性藥物將是非常感興趣 的。特別是"F-標(biāo)記的葉酸酯放射性藥物是最適合PET成像的，原因 在于它的優(yōu)異的成像特征將會滿足所有上述考慮。與其它適宜的放射 性核素("C、 13N、 "0)相比，"F是非常有用的，因?yàn)樗鼈儼胨テ陂L，大 約為110分鐘，并且因?yàn)樗ㄟ^發(fā)射具有最低正電子能的正電子而衰 減，這可得到具有高分辨率PET的最清晰的影像。此外，"F的更長的 半衰期允許更復(fù)雜并且伴隨分配到PET中央而無需放射化學(xué)設(shè)備的合 成法。然而，葉酸的結(jié)構(gòu)不能適用于直接用"F放射標(biāo)記。因此迄今為止， 僅有非常少的"F-標(biāo)記的葉酸衍生物報道于文獻(xiàn)中(Bettioet al.， J. Nucl. Med. ， 2006， 47(7)， 1153; WO 2006/071754)。此外，當(dāng)前寺艮 道的放射合成是費(fèi)時間的，并且僅得到低于5%的低放射化學(xué)產(chǎn)率 (Bettio et al.， J. Nucl. Med. ， 2006， 47(7)， 1153)。因此當(dāng)前 已知的"F-標(biāo)記的葉酸酯類或其衍生物不能夠滿足對適合于腫瘤代謝 成像以改善癌癥和炎癥和自身免疫疾病的診斷和治療的特異性放射性 藥物的需求。申請人現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生新的"F-標(biāo)記的葉酸酯放射性藥物的有效的 和通用的方法，其中氟-18是通過三唑或四唑-連接基與葉酸酯或其衍 生物連接的，例如與葉酸的谷氨酸根官能團(tuán)連接。初步的體外研究表 明了它們作為用于F R -陽性腫瘤的強(qiáng)有力診斷劑的適用性。發(fā)明概述本發(fā)明在第一方面涉及新的"F-葉酸酯放射性藥物(下文亦稱為本發(fā)明化合物)，其中氟-18是通過三唑或四唑連接基連接到葉酸酯或 其衍生物，例如連接到葉酸酯或衍生物的谷氨酸根官能團(tuán)。在一個具體的實(shí)施方案中，該新的葉酸酯放射性藥物是式I化合物，其中P 是葉酸酯或其衍生物，S" S2相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基，和Ar! 是三唑或四唑。優(yōu)選地，S和S2相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支 鏈d-Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代-CN、 -Hal、 -OH、 -NH2、 -SH、 -S03H或-N02，并且其中 一個或多個非-相鄰的012基 團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-O-、 -CO-、 -CO-0-、 -O-CO-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-O-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH=CH、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取 代的或者被以下取代-CN、 -Hal、 -N02、 -COR'或-COOR'，其中R'表示 H或C,-C6烷基，或者其組合。更特別地，本發(fā)明涉及具有式II的化合物<formula>formula see original document page 22</formula>其中X,至X;相互獨(dú)立地是C或N
R和R2相互獨(dú)立地是H、 Hal、 -0R'、 -NHR'、 C1-C12烷基、C1-C12 烷氧基、C1-C12烷?；2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、(C1-C12烷氧 基)羰基和(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或Cl-C6烷基，
R3、 R4相互獨(dú)立地是H、甲?；?、亞氨基甲基、亞硝基、C1-C12 烷基、Cl-C12烷氧基、Cl-C12烷?；?、卣素取代的C1-C12烷酰基，
R5是H、 d-Cu烷基、C廣Cu烷氧基、C廣Cu烷?；?、C廣"鏈烯基、 C廣C!2炔基、(d-d2烷氧基)羰基和(d-C2烷基氨基)羰基，
R6、 R,相互獨(dú)立地是直鏈或支鏈C廣Cu烷基，其是未取代的或者被 以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，或者式III基團(tuán)
<formula>formula see original document page 23</formula>III
其中Si和s2相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈 d-Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02， 并且其中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-O-、 -CO-、 -CO-0-、 -O-CO-、 -NR'-、 -N-、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-O-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、Hal、 N02、 COR'或COOR'，其中R'表示H或d-"烷基，或者其組合，和
An是三唑或四唑，
條件是R6和R7中的一個是式III的基團(tuán)，
m是O或1，
p 是0、 1或2，和
q具有1至7的值。
在進(jìn)一步特定的實(shí)施方案中本發(fā)明關(guān)注式IV化合物<formula>formula see original document page 24</formula>
其中
X6、 X7相互獨(dú)立地是C、 N或O,
R8、 R9相互獨(dú)立地是H或者直鏈或支鏈C廣Cu烷基，其是未取代的 或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或多個嵌 入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -CO-0-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-，或式V的基團(tuán)
<formula>formula see original document page 24</formula>其中S2、 S3相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈 C1-C12烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或 N02,并且其中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替 -0-、 -CO-、 -CO-O-、 -O-CO-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-O-、 -O-CO-NR'-、 -NR'_C0-NR'-、 -CH-CH-、 -C s C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代: CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R',其中R'表示H或C「C6烷基，
條件是沒有兩個雜原子是相互相鄰的， An是三唑或四唑，和 X,至Xs、 Id至R6、 m、 p和q如上文定義， 條件是l是式III的基團(tuán)或者R8和R9中的一個是式V的基團(tuán)。在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明涉及它們的制備方法。更特別地，本發(fā)
明化合物可以使用疊氮化物與炔類或炔取代基例如腈類的1， 3-偶極 環(huán)加成作用以高產(chǎn)率獲得。
在另一方面，本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物的藥物組合物。
在再另一方面，本發(fā)明涉及在癌癥和炎癥和自身免疫疾病的治療 的體外或體內(nèi)診斷和監(jiān)測中的用途。
在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物用于表達(dá)葉酸酯-受體的細(xì)胞或細(xì)胞群的診斷成像的用途。
更特別地，本發(fā)明包括表達(dá)葉酸酯-受體的細(xì)胞或細(xì)胞群的診斷成 像的方法，其包括例如用于在組織樣品中表達(dá)葉酸酯受體的細(xì)胞，例 如腫瘤細(xì)胞或活化的巨噬細(xì)胞的體外檢測方法。此方法還可在體內(nèi)進(jìn) 行。
為此，在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物方便和 有效的施用于需要診斷成像和/或監(jiān)測癌癥和炎癥和自身免疫疾病的 治療的受試者的用途。本發(fā)明方法的受試者優(yōu)選是哺乳動物，例如動 物或人，優(yōu)選人。
本發(fā)明的此方法可以與癌癥和炎癥和自身免疫疾病的診斷或治療 的任何其它方法組合來進(jìn)行，所述其它方法包括使用其它已開發(fā)的診 斷劑和/或治療劑的方法，以及利用x-射線計算機(jī)斷層成像(CT)、磁 共振成像(MRI)、磁共振功能性成像(fMRI)、單光子發(fā)射計算機(jī)斷層攝 影(SPECT)、光學(xué)成像和超聲的方法。
本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點(diǎn)根據(jù)以下其詳細(xì)說明和權(quán)利要求明顯看出。
附圖簡述


圖1. "F-點(diǎn)擊(Click)葉酸酯 (Y - (4-(4-(4-["F]氟丁 基)-1， 2， 3-三唑-l-基)丁基)葉酸酰胺的合成。
圖2. y-(4-疊氮基-丁酰基(butiony1))-葉酸酰胺的合成。圖3. 使用"F-點(diǎn)擊葉酸酯的離體生物分布研究顯示的在葉酸酯 受體-陽性組織中的特異性攝取。
圖4. 使用18F-點(diǎn)擊葉酸酯的PET影像與使用[18F]FDG的PET影 像比較。
發(fā)明詳述
本發(fā)明在第一方面涉及新的"F-葉酸酯放射性藥物(下文亦稱為 本發(fā)明化合物)，其中氟-18通過三唑或四唑連接基連接到葉酸酯或其 衍生物，例如連接到葉酸的谷氨酸根官能團(tuán)。
如用于本文的術(shù)語"葉酸酯"，包括基于稠合的嘧啶雜環(huán)的化合物， 其連接到對位帶有如下文定義的基團(tuán)S,的氨基苯甲?；糠?。如用于 本文的，"稠合的嘧啶雜環(huán)"包括與其它5-或6-元雜環(huán)稠合的嗜啶， 例如蝶啶或吡咯并嘧啶二環(huán)。如用于本文的優(yōu)選的代表性的葉酸酯類 是基于葉酸酯骨架，即蝶酰-谷氨酸或N-[4(蝶啶-6-基甲基氨基)苯甲 ?；鵠-谷氨酸)及其衍生物，并且包括任選取代的葉酸、亞葉酸、蝶酰 谷氨酸(pteropolyglutamic acid)和葉酸酯受體-結(jié)合的蝶"定類例如 四氫蝶呤類、二氫葉酸酯類、四氫葉酸酯類以及它們的去氮雜(deaza) 和二去氮雜(dideaza)類似物。葉酸是用于本發(fā)明化合物的優(yōu)選的基本 結(jié)構(gòu)。術(shù)語"去氮雜"和"二去氮雜"類似物是指本領(lǐng)域公認(rèn)的類似物， 其具有取代天然存在的葉酸結(jié)構(gòu)中的一個或兩個氮原子的碳原子。例 如，該去氮雜類似物包括1-去氮雜、3-去氮雜、5-去氫雜、8-去氮雜 和1Q-去氮雜類似物。該二去氮雜類似物包括，例如，1，5-二去氮雜、 5,10-二去氮雜、8， 10-二去氮雜和5， 8-二去氮雜類似物。優(yōu)選的去氮 雜類似物化合物包括N-[4-[2-[ (6R)-2-氨基-l， 4， 5， 6， 7， 8-六氫-4-氧代吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-基]乙基]苯甲?；鵠-L-谷氨酸(洛美曲 索)和N- [4- [1- [ (2， 4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]丙基]苯曱酰基]-L-谷 氨酸(依達(dá)曲沙)。更特別地，該新的葉酸酯放射性藥物是式I化合物,
<formula>formula see original document page 27</formula>其中
P 是葉酸酯或其衍生物，
Si， s2相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基，和 Ar! 是三哇或四哇。
優(yōu)選地，S!和S2相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支 鏈C1-C12烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 或N02，并且其中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代 替-O-、 -CO-、 -CO-O-、 -0-C0-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-0-、 -0-C0-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代 CN、 Hal、 N02、 COR'或COOR'，其中R'表示H或Cl-C6烷基，或者其組 合。
在另一特定的實(shí)施方案中，該新的葉酸酯放射性藥物是式II化合
物<formula>formula see original document page 27</formula>
其中
X,至X5相互獨(dú)立地是C或N， R和R2相互獨(dú)立地是H、 Hal、
-OR'、 -NHR'、 C1-C12烷基、C1-C12
烷氧基、Cl-C12烷?；2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、(CI-C12烷氧基)羰基和(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或Cl-C6烷基，
R3、 R4相互獨(dú)立地是H、曱酰基、亞氨基甲基、亞硝基、C1-C12
烷基、Cl-C12烷氧基、Cl-C12烷酰基、卣素取代的C1-C12烷酰基， R5是H、 d-Cu烷基、d-Cu烷氧基、d-Cu烷?；?、C廣Cu鏈烯基、
C2-C12炔基、(d-Cu烷氧基)羰基和(C)-C12烷基氨基)羰基，
R6、 R,相互獨(dú)立地是直鏈或支鏈C「Cu烷基，其是未取代的或者被
以下至少一個取代CN、 Hal、或N02,或者式III基團(tuán)
-S，-Ar,—S2-18F 工ll
其中S:和S2相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈
C1-C12烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或 N02，并且其中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替 -0-、 -CO-、 -CO-O-、 -0-C0-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-O-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-,或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代 CN、 Hal、跳、C0R'或C00R'，其中R'表示H或C廣C6烷基，或者其組合，
和
An是三唑或四唑，
條件是R6和R,中的一個是式III的基團(tuán)，
m 是0或1，
p 是0、 1或2，和
q 具有1至7的值。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，Rs是CN、 Hal、 N02，或者基團(tuán)Rs和R7是式 III的基團(tuán)。
在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，l是CN、 Hal、 N02，或者基團(tuán)115和116 是式III的基團(tuán)。
要理解為，縮寫"N"和"C"代表所有可能的飽和度，即N包括-NH-和-N-連接并且C包括-CH廣和-CH-連接。
要進(jìn)一步理解為，(H)q代表在所示環(huán)中的所有H取代基(即在X3、 C6、 C7和X,上)。例如q - 5為完全飽和的未取代的類似物(X3 = X4 -N、 p = O)或q = 7為完全飽和的未取代的5， 8-二去氮雜類似物(X3 = X4 = C、 p = 0)以及q = 1為具有X3 = X4 - N、 p - 0的完全不飽和 的類似物。
S:優(yōu)選是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈C廣Cu烷基，其是 未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個 或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地,皮以下代替-0-、 -CO-、 -CO-O-、 -NR'-、 -NR'-C0-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C芝C-，或者5-或 6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R',其中R'表示H或C廣a烷基，或者其組合，更優(yōu)選單鍵 或間隔基單元，例如直鏈或支鏈d-ds烷基，其是未取代的或者被以 下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或多個非-相鄰的 CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -CO-O-、 -NR'-、
-NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -CH=CH-、 -C = C-、或未取代的5-或6-元芳香 環(huán)。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，S,是單鍵或者直鏈或支鏈C廣Cu烷基，其 中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-O-、 -CO-、 -CO-O-、 -NR'-、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -CsC-。
在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，S!可代表氨基酸，即具有氨基基團(tuán)(例 如，冊2或冊3+)和羧基基團(tuán)(例如，C00H或COO—)的化合物。在特定的 實(shí)施方案中，該氨基酸可以為ot-氨基酸、p-氨基酸、D-氨基酸或L-氨基酸。該氨基酸可以為天然存在的氨基酸(例如，丙氨酸、纈氨酸、 亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、 絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、門冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、精氨酸或組氨酸等)或者其可以為其衍生物。衍 生物的實(shí)例包括任選取代的氨基酸，例如具有一個或多個選自以下的
取代基CN、 Hal和/或冊2。該氨基酸還可包括任何其它非-天然存在 的氨基酸，例如正亮氨酸、正纈氨酸、L-或D-萘基丙氨酸 (naphthalanine)、鳥氨酸、高精氨酸以及其它肽技術(shù)領(lǐng)域公知的(參 見，例如M. Bodanzsky， "Principles of Peptide Synthesis," 第 l和第2修訂版，Springer- Verlag， New York, NY， 1984和1993， 以及Stewart and Young, "Solid Phase Peptide Synthesis,"第2 版，Pierce Chemical Co. ， Rockford, IL， 1984， 二者通過引用并 入本文)。氨基酸和氨基酸類似物/衍生物可以商業(yè)購得(Sigma Chemical Co. ; Advanced Chemtech)或者使用本領(lǐng)域已知的方法合成。 在另 一特定的實(shí)施方案中，該氨基酸還可以是聚氨基酸的一部分(亦稱 為多肽)，其中如上文定義的多種相同或不同的氨基酸是共價連接的， 即通過常規(guī)肽或其它鍵連接。優(yōu)選的氨基酸包括例如谷氨酸、門冬氨 酸、谷氨酰胺、天冬酰胺(aspartine)、賴氨酸、精氨酸、半胱氨酸 及其衍生物，并且優(yōu)選的聚氨基酸包括均聚物其各自的均聚物(即聚谷 氨酸、聚門冬氨酸等)。最優(yōu)選的是任選取代的門冬氨酸和谷氨酸。
S2優(yōu)選是單鍵或者直鏈或支鏈d-Cu烷基，其是未取代的或者被 以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香 環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R'，其中R' 表示H或d-C6烷基，或者其組合，更優(yōu)選單鍵或者直鏈或支鏈d-d2 烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02。
最優(yōu)選地，S2是單鍵或者直鏈或支鏈d-Cu烷基。
如上文所示，如用于本文的優(yōu)選的代表性的葉酸酯類是基于葉酸 酯骨架其中S!是谷氨酸殘基，及其衍生物。為此，在另一特定的實(shí)施 方案中，該新的葉酸酯放射性藥物是式IV化合物<formula>formula see original document page 31</formula>
其中
X6、 X7相互獨(dú)立地是C、 N或0，
R8、 R9相互獨(dú)立地是H或者直鏈或支鏈C1-C12烷基，其是未取 代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02,并且其中一個或多 個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -CO-O-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C^C-,或式V的基團(tuán)
<formula>formula see original document page 31</formula>
其中S2、 S3相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈
d-Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02， 并且其中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -C0-、 -C0-0-、 -0-C0-、 -NR'-、 -N-、 -NR'-C0-、 -C0-NR'-、 -NR'-C0-0-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-， 或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、Hal、 N02、 C0R'或C00R'，其中R'表示H或d-C6烷基，或者其組合，
An是三喳或四喳，
和
Xi至X5、 R,至R6、 m、 p和q是根據(jù)式II化合物定義的，并且優(yōu) 選的實(shí)施方案如下文定義，條件是R6是式III的基團(tuán)或者Rs和R9中的一個是式V的基團(tuán)。
S2和S3優(yōu)選相互獨(dú)立地是單鍵或者直鏈或支鏈d-Cu烷基，其是
未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 COR' 或C00R'，其中R'表示H或d-C6烷基，或者其組合，更優(yōu)選直鏈或支 鏈C-C,2烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或 N02。
最優(yōu)選地，Ss和S3相互獨(dú)立地是單鍵或者直鏈或支鏈d-Cu烷基。 Ar,是式V-a和V-b的三唑或四唑<formula>formula see original document page 32</formula>
V-a V-b 其中虛線表示與所述間隔基團(tuán)連接的位置，和
Z!至Z5相互獨(dú)立地是C或N，這樣全部N的總和為3或4, 并且優(yōu)選為選自式V-c、 V-d和V-e<formula>formula see original document page 32</formula>
其中虛線表示與所述間隔基團(tuán)連接的位置，和R〃是H、 Hal、 NH-C0R'、 NH-S(U'、 C02R'、 C0R'、或者直鏈或支鏈C1-C12烷基，其是 未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 0H、 NH2、 S03H、 SH、 C02H、 或N02，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代 CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R'，其中R'表示H或C,-C6烷基。
在特定的實(shí)施方案中，L是CN、 Hal、 N02、或基團(tuán)R5，并且R8和 IU中的一個是式V的基團(tuán)。
在另一特定的實(shí)施方案中，l是CN、 Hal、 N02、或基團(tuán)R5、 H或 者是直鏈或支鏈d-Cu烷基，該烷基是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且R9是式V的基團(tuán)。
在進(jìn)一步特定的實(shí)施方案中，l是CN、 Hal、 N02、或基團(tuán)R5， R9 是H或者直鏈或支鏈C1-C12烷基，其是未取代的或者被以下至少一個 取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或多個嵌入的、非-相鄰的CH2 基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -C0-0-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C5C-，并且Rs是式V的基團(tuán)。
在進(jìn)一步特定的實(shí)施方案中，Rs和R9相互獨(dú)立地是H或者直鏈或 支鏈C1-C12烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 或N02,并且其中一個或多個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地 被以下代替-0-、 -CO-、 -C0-0-、 -CO-NR'-、 -CH=CH-、 -C = C-，并
且Re是式V的基團(tuán)。
為此，在另一特定的實(shí)施方案中，該新的葉酸酯放射性藥物是式 VI、 Via或VIb的化合物，
<formula>formula see original document page 33</formula>其中
X至X5相互獨(dú)立地是C或N, X6、 X7相互獨(dú)立地是C、 N或0，
R!和R2相互獨(dú)立地是H、 Hal、 -OR'、 -NHR'、 C1-C12烷基、C1-C12 烷氧基、Cl-C12烷?；?、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、(CI-C12烷氧 基)羰基和(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或Cl-C6烷基，
R3， R4相互獨(dú)立地是H、甲酰基、亞氨基甲基、亞硝基、C1-C12 烷基、Cl-C12烷氧基、Cl-C12烷酰基、卣素取代的C1-C12烷酰基，
R6是H、 CN、 Hal、 N02、 C廣Cu烷基、d-Cu烷氧基、C「Cu烷?；?、 C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、(C廣Cu烷氧基)羰基或(d-C12烷基氨基)羰 基，
Rs、 Rg相互獨(dú)立地是H或者直鏈或支鏈Cl-C12烷基，其是未取代 的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或多個 嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-O-、 -CO-、 -CO-O-、 -CO-NR'-、 -CH=CH-、 -C = C-，
S2、 S3相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈d-Cu烷 基其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其 中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、-CO-、 -CO-O-、 -O-CO-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-C0-0-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-， 或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、Hal、 N02、 COR'或COOR'，其中R'表示H或d-Ce烷基，或者其組合，
Ar,是三唑或四唑，
m是0或1，
p是0、 1或2，和
q具有1至7的值。
S2和S3優(yōu)選相互獨(dú)立地是單鍵或者直鏈或支鏈d-Cu烷基，其是 未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 COR' 或C00R'，其中R'表示H或d-"烷基，或者其組合，更優(yōu)選直鏈或支 鏈C廣Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或 N02。
最優(yōu)選地，S2和S3相互獨(dú)立地是單鍵或者直鏈或支鏈d-Cu烷基。 在進(jìn)一步特定的實(shí)施方案中，該新的葉酸酯放射性藥物是式Vila 至VIIf或者Villa至VIIIf的化合物<formula>formula see original document page 35</formula><formula>formula see original document page 36</formula><formula>formula see original document page 37</formula>VIIIb
vnic
VIIId
N H
N H<formula>formula see original document page 38</formula>
其中
X!至X5相互獨(dú)立地是C或N， X6、 X7相互獨(dú)立地是C、 N或O，
R!和R2相互獨(dú)立地是H、 Hal、 -OR'、-腿'、Cl-C12烷基、C1-C12 烷氧基、Cl-C12烷?；2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、(C1-C12烷氧 基)羰基和(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或C1-C6烷基，
R3、 R,相互獨(dú)立地是H、甲?；?、亞氨基甲基、亞硝基、C1-C12 烷基、Cl-C12烷氧基、Cl-C12烷酰基、閨素取代的C1-C12烷?；?br> R6是H、 CN、 Hal、 N02、 C「Cu烷基、C「(^烷氧基、d-(^烷酰基、 C廣d2鏈烯基、C廣Cu炔基、(C廣d2烷氧基)羰基或(d-d2烷基氨基)羰 基，
R8、 R,相互獨(dú)立地是H或者直鏈或支鏈C1-C12烷基，其是未取代 的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或多個 嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-O-、 -C0-、-CO-O-、 -C0-NR'-、 -CH-CH-、 -C^C-,
S2、S3相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈C廣d2烷
基其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其 中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地,皮以下代替-0-、-C0-、 -C0-0-、 -O-CO-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-0-、 -0-C0-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-， 或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、Hal、 N02、 COR'或COOR',其中R'表示H或C)-Ce烷基，或者其組合，
R〃是H、 Hal、 NH-COR'、 NH-S02R'、 C02R'、 COR'、或者直鏈或支鏈 C-Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 0H、 NH2、 S03H、 SH、 C02H、或N02，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未 取代的或者^皮以下取代CN、 Hal、 N02、 COR'或C00R'，其中R'表示H
或C「C6烷基，
ra是0或1，
p是0、 1或2，和
q具有1至7的值。
如上文所述進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案也適用于式VI至VIII的化合物。
優(yōu)選地，Ri和R2可以相互獨(dú)立地為H、烷基、-0R5、 -NHR'，更優(yōu)
選-0R'、-醒',其中R'表示H或C廣C6烷基。
優(yōu)選地，R3是H、甲酰基、d-Cu烷基或d-Cu烷?；?。 優(yōu)選地，L是H、亞硝基、d-Cu烷氧基或C!-Cu烷酰基。 優(yōu)選地，R5是H、 C廣Cu烷基、C廣Cu烷氧基、C廣Cu烷?；?C「C12
烷氧基)羰基或(d-Cu烷基氨基)羰基，更優(yōu)選H或d-C^烷基。
優(yōu)選地，R6是H、 CN、 Hal、 N02、 C廣Cu烷基、d-"烷氧基、C-C12
烷酰基或(d-Cu烷氧基)羰基，更優(yōu)選H、 CN、 Hal、 N02或C廣Cs烷基。 本發(fā)明化合物的一個特定的實(shí)施方案包括例如這樣的化合物，其
中(a) X!至Xs是N， R是NYA， 1是0， R,是Y" m是l， p是0或1 并且q是l或3，或者
(b) X至Xs是N， Id是NY^2， R2是NH" 114是Y3, m是l， p是0
并且q是l。
為此，在進(jìn)一步特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明例如涉及式IX、 IXa、 X或Xa的化合物，其中，
X6、 X7相互獨(dú)立地是C、 N或0,
Y!、 丫2相互獨(dú)立地選自H、甲?；?、直鏈或支鏈d-Cu烷基，該烷 基是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02,并且其中 一個或多個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替
-0-、 -CO-、 -C0-0-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-，
丫3選自H、甲?；?、亞硝基、直鏈或支鏈C廣仏2烷基，該烷基是未 取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或 多個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、-C0-、
-C0-0-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C^C-，
R8、 R9相互獨(dú)立地是H或者直鏈或支鏈C1-C12烷基，該烷基是未 取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或 多個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、-C0-、 -C0-0-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-，
R〃是H、 Hal、 NH-COR'、 NH-S02R'、 C02R'、 COR'、或者直鏈或支鏈 d-C,2烷基，該烷基是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 0H、 NH2、 S03H、 SH、 C02H、或N02，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán) 是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 COR'或C00R'，其中R'表 示H或C廣。烷基，和
S2、 S3相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈d-C!2烷 基，該烷基是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02， 并且其中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -C0-、 -C0-0-、 -0-CO-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-0-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、Hal、 N02、 COR'或COOR'，其中R'表示H或d-C6烷基，或者其組合。
優(yōu)選地，R〃是H、 Hal、 NH-COR'、 NH-S02R'、 C02R'、 COR'、或者直 鏈或支鏈d-Cu烷基，該烷基是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 0H、 NH2、 S03H、 SH、 C02H或N02。
術(shù)語"烷基"，當(dāng)單獨(dú)或組合使用時，優(yōu)選是指含有1至12個碳原 子的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、 仲丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、庚基、辛 基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。更優(yōu)選的烷基基團(tuán)含有1 至8，更優(yōu)選1至4個碳原子。
如用于本文的，術(shù)語"鏈烯基"，單獨(dú)或者與其它基團(tuán)組合，是指 含有2至12個碳原子的直鏈或支鏈烯基基團(tuán)，例如甲叉(me thy 1 ene)、 乙埽(ethylene)、 丙烯(propylene)、 異丙蹄(isopropylene) 、 丁烯 (butylene)、叔丁烯(t-butylene)、仲丁烯(sec-butylene)、異丁烯 (isobutylene)、 戊蹄(amylene)、 異戊蜂(isoamylene)、 戊二烯 (pentylene)、 異戊二烯(isopentylene)、 己烯(hexylene)等。優(yōu)選 的鏈烯基基團(tuán)含有2至6個碳原子。
如用于本文的術(shù)語"炔基"是指具有一個或多個碳-碳三鍵的碳原 子的直鏈或支鏈。優(yōu)選的炔基基團(tuán)含有2至12，更優(yōu)選2至6個碳原 子。
如用于本文的術(shù)語"烷氧基"是指如上文定義的垸基，其被氧取代， 例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、叔丁氧基等。
如用于本文的術(shù)語"烷酰基"是指甲?；蛘呤侨缟衔亩x的被 羰基末端取代的烷基例如乙?；?、丙酰基、丁酰基、戊?；?。
如用于本文的術(shù)語"烷基氨基"是指如上文定義的被氮取代的烷 基，其包括單烷基氨基例如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、叔丁基 氨基等，以及二烷基氨基例如二甲基氨基、二乙基氨基、曱基丙基氨基等。
術(shù)語"卣素"如用于本文的是指任何17族元素，并且包括氟、氯、 溴、碘和砹(o)。
在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供了合成本發(fā)明化合物的方法。申請 人已發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物可以通過包括在加熱條件下或在催化劑存在 下使疊氮化物與炔或炔取代物(substitute)的環(huán)加成作用的方法以有效的方式獲得。這些反應(yīng)稱為Huisgen 1， 3-偶極環(huán)加成作用(加熱 條件)和點(diǎn)擊(Click)-反應(yīng)(催化條件)，并且已描述于現(xiàn)有技術(shù)中 (Kolb and Sharpless，腸g飽c瞎/y 7Wa/ 2003，《，1128; Kolb et al. J/^e^ C力e邁.2001， W， 2004; Rostovtsev， V. V. et al. J/^e^. C力e邁.// r. 2002， W， 2596; US 2005/02222427; WO 06/116629)。更特別地，其中的A尸是三唑的式I化合物是通過疊 氮化物Ra-N3與炔Rb-C^C-Re的環(huán)加成作用而獲得的，其中的A 是四 唑的式I化合物是通過疊氮化物Ra-N3與氰化物Rb-CsN的環(huán)加成作用 而獲得的。所有可能的組合均在本文中關(guān)注，即Ra為葉酸酯衍生物并 且Rb為"F-標(biāo)記的基團(tuán)，以及Rb為葉酸酯衍生物并且匯為"F-標(biāo)記的 基團(tuán)。因此，該反應(yīng)的模塊化和通用性質(zhì)使得使用多種多樣的連接基 以將放射性同位素偶合到葉酸。
在一個特定的實(shí)施方案中，該環(huán)加成作用是在加熱條件下進(jìn)行的， 即在10至200 。C的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行，優(yōu)選為10至100 。C。
在另一實(shí)施方案中，該環(huán)加成作用是在催化劑存在下進(jìn)行的，該 催化劑例如過渡金屬絡(luò)合物，例如Ru和Cu(I)。優(yōu)選的催化劑是Cu(I) 鹽，例如Cu(I)的氯化物、溴化物、碘化物?；蛘?，Cu(I)可以通過Cu(n) 鹽的原位還原而獲得。此反應(yīng)可以在多種質(zhì)子性和非質(zhì)子性溶劑中、 在寬范圍的溫度(例如10至100。C，優(yōu)選室溫)以及多種pH (例如4 至12)下，在氧化或還原條件下并且在其它官能團(tuán)存在下進(jìn)行而不需 要保護(hù)基團(tuán)，所述溶劑例如曱醇、乙醇、2-丙醇、叔丁醇、正丁醇和/ 或水或其緩沖溶液。
對于熟練技術(shù)人員選擇適宜的條件是顯而易見的(亦參見US 2005/0222427,該文獻(xiàn)以及該文獻(xiàn)中引證的文獻(xiàn)通過引用并入本文)。
用于環(huán)加成作用反應(yīng)的，-標(biāo)記的原料，即"F-標(biāo)記的炔、炔取代 物或疊氮化物是在取代反應(yīng)中分別用具有適宜離去基團(tuán)的炔、炔取代 物或疊氮化物而獲得的。炔上的離去基團(tuán)可以是本領(lǐng)域已知的任何常 規(guī)的離去基團(tuán)，并且包括例如鹵素，硝基，重氮鹽，磺酸酯，其包括 甲磺酸酯、曱苯磺酸酯、五氟苯甲酸酯等。通常，該取代反應(yīng)是在選自以下的極性非質(zhì)子性溶劑中進(jìn)行的乙腈、丙酮、1，4-二氧雜環(huán)己 烷、四氫呋喃(THF)、 N-甲基吡咯烷酮(NMP)、 二甲氧基乙烷(DME)、 二甲基乙酰胺(DMA)、 N，N-二甲基曱酰胺(DMF) 、 二甲基亞砜(DMSO)和 六曱基磷酰胺(HMPA)及其混合物。
因此，在一個示例性的反應(yīng)中，選擇的炔或炔取代物，只要有適 宜的離去基團(tuán)，就用TF]氟化物標(biāo)記，所述的["F]氟化物是通過相轉(zhuǎn) 移催化劑例如碳酸四丁基銨或氨基聚醚類化合物(例如Kryptofix 2. 2. 2)聯(lián)用碳酸鉀或草酸鉀、在標(biāo)準(zhǔn)條件下(例如，乙腈，IOO X:， 10-15 min)的取代反應(yīng)中活化的。將所得的[18F]-標(biāo)記的炔與適宜的溶劑共蒸 餾到選擇的催化劑(例如Cu(I) I)中。在標(biāo)準(zhǔn)條件下(例如抗壞血酸Na， 在DMF， H20和DIPEA中，在80°C下)向此混合物中加入選擇的疊氮基-葉酸或衍生物，得到最終標(biāo)記的產(chǎn)物，其RCY為25 - 35 %。
或者，選擇的疊氮化物，只要有適宜的離去基團(tuán)，就用「F]氟化 物標(biāo)記，所述的[18F]氟化物是通過相轉(zhuǎn)移催化劑例如碳酸四丁基銨或 氨基聚醚類化合物(例如Kryptofix 2. 2. 2)聯(lián)用碳酸鉀或草酸鉀活化 的，得到["F]-標(biāo)記的疊氮化物，接著將其與選擇的炔取代的葉酸或衍 生物在標(biāo)準(zhǔn)條件下在催化的1, 3-偶極環(huán)加成作用中偶合。
在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明葉酸酯放射性藥物的方便 且有效地施用于有診斷成像需要的受試者的用途。
因此本發(fā)明提供了用于表達(dá)葉酸酯-受體的細(xì)胞或細(xì)胞群的診斷 成像的方法，所述方法包括以診斷成像量施用至少一種本發(fā)明葉酸酯 放射性藥物的步驟，以及獲得所述細(xì)胞或細(xì)胞群的診斷影像。
此成像可以在體外或體內(nèi)在表達(dá)葉酸酯-受體的細(xì)胞或細(xì)胞群上 進(jìn)行。
因此，本發(fā)明提供了用于體外檢測組織樣品中的表達(dá)葉酸酯受體 的細(xì)胞的方法，其包括使所述組織樣品與有效量的至少 一種本發(fā)明葉 酸酯放射性藥物接觸并且達(dá)到足夠的時間和條件，使結(jié)合發(fā)生并通過 PET成像檢測此結(jié)合。
在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明葉酸酯放射性藥物的方便且有效地施用于有診斷成像或者監(jiān)測癌癥和炎癥和自身免疫疾病的治 療的需要的受試者的用途。
在另一方面，本發(fā)明提供了同時診斷和治療的方法，其包括給有 此需要的受試者施用診斷有效量至少一種本發(fā)明葉酸酯放射性藥物以 及治療活性劑，以及獲得所述組織的診斷影像以觀察療程。
本發(fā)明方法的受試者優(yōu)選是哺乳動物，例如動物或人，優(yōu)選人。
劑量取決于期望效果的性質(zhì)(例如診斷或治療的形式)，治療的種 類和頻率，診斷器械，制劑應(yīng)用的形式，以及接受者的年齡、體重、 營養(yǎng)、狀態(tài)，同步治療的種類(如果有的話)。
然而，最優(yōu)選的劑量可以適合于個體受試者，這是本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以理解和確定的，而不需要過多的試驗(yàn)。這通常包括標(biāo)準(zhǔn)劑量的 調(diào)整，例如如果患者有較低體重的話降低劑量。
治療可以以較小量開始，在最佳量以下，為了達(dá)到最佳效果可以
增力口量o
在PET掃描機(jī)上的成像操作發(fā)生在施用該放射性示蹤劑之后的數(shù) 分鐘至2-4小時內(nèi)。時間安排取決于成像靶標(biāo)和放射性示蹤劑的動力 學(xué)以及希望的信息。
本發(fā)明葉酸酯放射性藥物的優(yōu)選施用途徑是通過靜脈注射。
用于注射的適宜形式包括本發(fā)明上述葉酸酯放射性藥物的無菌水 溶液或分散液。通常該放射性藥物被配制在生理緩沖溶液中。
葉酸酯放射性藥物可歷經(jīng)本領(lǐng)域認(rèn)可的技術(shù)滅菌，所述的技術(shù)包 括但不限于，添加抗細(xì)菌劑或抗真菌劑，例如，對羥基苯甲酸酯、三 氯叔丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等。優(yōu)選地，它們在施用之前歷經(jīng) 無菌過濾以消除對額外滅菌劑的需求。
對于待注射的溶液而言，優(yōu)選的單位劑量為約0. 01 mL至約10mL。 靜脈施用之后，如果需要，體內(nèi)器官或肺瘤的成像可以發(fā)生在放射標(biāo) 記試劑已被施用于受試者之后的數(shù)分鐘至2-4小時內(nèi)，使得足夠量的 施用劑量在所選靶區(qū)域累積。
本發(fā)明葉酸酯放射性藥物還可以用于取自受試者的組織檢查物中的表達(dá)葉酸酯受體的細(xì)胞的體外檢測。因此，在進(jìn)一步的實(shí)施方案中， 本發(fā)明提供了用于組織樣品中的表達(dá)葉酸酯受體的細(xì)胞例如腫瘤細(xì)胞 的體外檢測的方法，其包括使所述組織樣品與有效量的本發(fā)明葉酸酯 放射性藥物接觸并且達(dá)到足夠的時間和條件，使結(jié)合發(fā)生并通過成像 技術(shù)檢測此結(jié)合。
可以通過熟練技術(shù)人員已知的操作收集樣品，例如通過收集組織 檢查物或者體液，通過抽吸氣管或肺樣品等。
能測定的組織樣品包括懷疑含有表達(dá)葉酸酯受體的細(xì)胞的任何組 織，所述細(xì)胞例如腫瘤細(xì)胞、上皮細(xì)胞、腎、胃腸或肝膽管系統(tǒng)及其 它?？梢杂美顼@微鏡用薄片切片機(jī)將樣品切開以有助于顯微鏡檢查 和觀測。在與一種本發(fā)明葉酸酯放射性藥物孵育之前或者之后，還可 以將樣品用適宜的固定劑固定，以改善樣品組織的組織學(xué)質(zhì)量。
足以使本發(fā)明葉酸酯放射性藥物與細(xì)胞上的葉酸酯受體結(jié)合的時 間和條件包括標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)條件，即樣品可以在體外培養(yǎng)并且與本發(fā) 明絡(luò)合物或組合物的一種在生理介質(zhì)中孵育。這些條件是熟練技術(shù)人 員已知的。另選地，可以將樣品固定，然后與本發(fā)明葉酸酯放射性藥 物在等滲或生理緩沖溶液中孵育。
為了所有的應(yīng)用，方便的是在或者接近它們使用的地方制備本發(fā) 明的化合物。
根據(jù)本公開內(nèi)容，本文公開和要求保護(hù)的所有化合物和/或方法可 以被制備并完成而不需要過多的試驗(yàn)。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見 的是，可以將變型用于本發(fā)明而不會偏離本發(fā)明的范圍。本文提供的
實(shí)施例將是說明性的并且不是窮盡的；因此，說明性的實(shí)施例將不會 認(rèn)為是以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例 材料和方法
紅外光鐠是在Jasco FT/IR-6200 ATR-IR上記錄的。核磁共振波 譜是用Bruker 400 MHz或500 MHz波譜4義以相應(yīng)的溶劑信號作為內(nèi)標(biāo)記錄的?；瘜W(xué)位移是以相對于四曱基硅烷(O. 00 ppm)的百萬分之一 (ppm)報告的。偶合常數(shù)值/是以赫茲(Hz)給出；以下縮寫用于試驗(yàn)部 分以用于描述'H-NMR波譜單峰(s)、 二重峰(d)、三重峰(t)、多重 峰(m)、雙二重峰(dd)。復(fù)雜多重峰的化學(xué)位移是以它們出現(xiàn)的范圍給 出的。低分辨率質(zhì)i瞽(LR-MS)是用Micr纖ss Quattro micro API LC-ESI記錄的。
對水敏感的反應(yīng)是在氬氣下在火焰干燥的玻璃器皿中進(jìn)行的。反 應(yīng)用薄層色鐠法(TLC，在EM Science 0. 25 mm厚、預(yù)涂覆珪膠60 F-254 玻璃載板上進(jìn)行)或HPLC監(jiān)測。HPLC是在配備有L-74QQ可調(diào)吸收檢 測器的Merck-Hitachi L-7000系統(tǒng)上進(jìn)4亍的。分析型HPLC是用 XBridge⑧柱(C18， 5戶，4.6 x 150 mm， Waters)使用以下溶劑系統(tǒng)(1 mL/min)進(jìn)行的:0. 1 % TFAaq (溶劑A)，乙腈(溶劑B) ， 1 mL/min; 0-1 min， 95 % A; 1-15 min， 95 —5%A; 15-20 min， 5 % A; 20 — 22 min， 5 — 95 % A; 22 — 25 min， 95 % A。半制備型HPLC是用XBridge⑧半制 備柱(C18, 5pm， 10 x 150 mm， Waters) 、 3 mL/min的恒強(qiáng)度的 (isochratic) NH4HC03 (10 mM， 88 %) / CH3CN(12%)進(jìn)行的。全部化 學(xué)品是如供應(yīng)的那樣而不像另外描述地使用的。
n.c.a.廣/7處^##辦備 N.c.a. ["F]氟化物是C/c/o/2e W/夕回旋加速器(IBA， Belgium)上通過"0(p,n"F核反應(yīng)制備的。同 位素97%富集的[180]水是通過16MeV質(zhì)子束使用2. 1 ml液體靶輻照 的。使用氦氣流將[18F]氟/ [180]水溶液從該靶轉(zhuǎn)移到裝配有合成熱室 的操作器。
將["F]氟化物(~ 20 - 30 GBq)捕獲到陰離子交換柱(Sep-Pak Light Accel 1 Plus QMA， Waters AG)中，該柱是用5 ml 0.5M碳酸鉀 溶液和5 ml水預(yù)先處理，同時回收[180]水用于循環(huán)。使用碳酸鉀(2 rag) 和Kryptofix 2.2.2 (10mg)在1.5 ml乙腈/水(4: 1)中的溶液將該 [18F]氟化物直接洗脫到10 ml密封的反應(yīng)容器中。在85 - 90 'C下通過 真空和氮?dú)饬鞒ト軇?。接著，加入lml的干燥乙腈三次，再蒸發(fā)至 干燥。實(shí)施例1: "F-點(diǎn)擊葉酸酯標(biāo)準(zhǔn)品的合成
(a) 6-["F]氟-1-己炔的合成
將在干燥的THF (12 mL)中的5-己炔-l-基對曱苯磺酸酯(330 mg， 1.3mmo1)(根據(jù)van Hest et al. J. Am. Chem. Soc. 2000， 7"， 1282 所述的操作通過5-己炔-l-醇的甲苯磺酰化制備)、Kryptofix 2. 2. 2 (620 mg， 1. 6 Dimol)和KF (97 mg， 1. 6 mmol)在回流下攪拌20小時。 在環(huán)境壓力下分級蒸餾的揮發(fā)性組分，得到在THF中為42%溶液的 6-["F]氟-l-己炔(200mg, 62 %): Bp: 65-70 。C / 1 atm.; ^-NMR (CDCU S 4.51 (t， 1H， /= 6.0 Hz) ， 4.40 (t， 1H， / - 6. 0 Hz)， 2.23 (dt， 2H， / - 7. 6和2. 8 Hz)， 1.95 (t， 1H， /= 2.8 Hz)， 1.80-1.73 (m， 2H)， 1. 65-1. 61 (m， 2H) ppm。
(b) Y-(4-疊氮基-丁酰基(butionyl))-葉酸酰胺的合成 參考編號見圖2。
N-B0C-氨基-丁烷-疊氮化物(2)是從單-BOC-二氨基丁烷(1)根據(jù) Link et al. (/. ^瓜C力e邁.2004，"《10598)所述操作制備 的。中間體2在CH2C12/TFA (20%)中在室溫下脫保護(hù)過夜，真空干燥 之后，得到無色油狀物的4-疊氮基-丁烷-胺的TFA鹽(3) (0. 44 g， 94 %):力-腿(CDCU S 4.54 (bs， 1H)， 3.27 (t， 2H， /=6.5Hz)， 3.25-3.10 (ra， 2H) ， 1.63-1.50 (m， 4H), 1.14 (s， 9H) ppm; LR-MS: [M+H]+= 215. 21 (C,HisN》2的計算值214.26)。
在火焰干燥的燒瓶中在氬氣下將BocGluOMe (4， 2" mg, 1. Ommol) 溶解在千燥的DMF (5mL，過分子篩4 A)中，再加入Et3N (210—， 1.5 當(dāng)量)。在0X:下加入HBTU (380 tng， 1.0 mmol)，再將該混合物攪拌半小時。在OC下將該活化的酸的溶液通過套管轉(zhuǎn)移到含有Et3N (210 pL， 1. 5當(dāng)量)的TFA胺鹽3 (228 mg， 1. 0 mmol)在干燥的DMF (5 mL) 中的溶液中。2小時之后，將該混合物溫?zé)嶂潦覝?，再攪拌過夜。在 減壓下除去揮發(fā)性成分，并通過快速色鐠法在硅膠上用CH2Cl2/MeOH (60:1至30:1)將殘余物純化，得到無色油狀物的產(chǎn)物5 (330 mg， 92 %)。使中間體5在CH2Ch/TFA (20%)中在室溫下脫保護(hù)過夜，真空干 燥之后，得到淡黃色油狀物的Glu(4-疊氮基-丁酰胺)0Me的TFA鹽 (6) (740 mg,定量的)^-NMR (CDC1》S 10. 15-8. 60 (bs， 3H) ， 6.74 (t， 1H， / = 5. 6 Hz) ， 4. 14 (dd， 1H， / = 7. 7和3. 7 Hz) ， 3. 80 (s， 3H)， 3.31-3.26 (m， 2H) ， 3.25-3.18 (m， 2H)， 2.59-2.45 (m， 2H)， 2.38-2.27 (m， 1H)， 2.24-2.13 (m， 1H)， 1.63-1.50 (m， 4H) ppm; LR-MS: [M+H]+= 258. 23 (C^HJ^的計算值257.29)。
在火焰干燥的燒瓶中在氬氣下將N2-N，N-二甲基氨基亞曱基-10-甲?；?蝶酸7 (198 mg， 0.5 mmol)混懸在千燥的DMF (10 mL,過分 子篩4人)中，再加入Et3N (104 pL， 0. 75mmo1)。在0。C下加入HBTU (380 mg， 0.5 mmol),再將該混合物攪拌1小時。在(TC下向所得橙 色溶液中加入TFA胺鹽6 (186 mg， 0. 5 mmol)在干燥的含有Et3N (210 ^L， 1.5 mmol)的DMF (9 mL)中的溶液。將所得澄清黃色溶液在O'C 下攪拌1小時，然后使其溫?zé)嶂潦覝?。在減壓下除去揮發(fā)性成分，并 通過快速色鐠法在硅膠上用CH2Cl2/MeOH (17: 1至10: l)將該殘余物純 化，得到黃色固體的產(chǎn)物8 (290 mg， 92%)。將疊氮基葉酸酯8(63mg, 0.1 mmol)溶解于1 M NaOH (3 mL)中，并在室溫下攪拌過夜。將所得 混濁溶液通過CeliteTM過濾使之澄清。通過添加HCl (首先為37%HC1， 然后為1 M HC1)將該黃色溶液的pH調(diào)節(jié)至pH ~2，導(dǎo)致產(chǎn)物沉淀。 將該混懸液離心(10 min， 3500 rpm)，傾出淡黃色上清液，并在減壓 下將固體產(chǎn)物干燥，得到黃色粉末的Y-(4-疊氮基-丁?；?-葉酸酰胺 的五鹽酸鹽9 (75 mg，定量的)mp > 200°C; ^-NMR (DMS0-d6) 5 12.21-11.95 (bs， 1H)， 8.64 (s， 1H) ， 8.18 (d， 1H， /= 7.2Hz)， 7.85 (t， 1H， /- 5.7 Hz)， 7.65 (d， 2H， / = 9. 0 Hz) ， 7.00—6.82(bs， 2H)， 6.93 (t， 1H， /- 6. 2Hz)， 6.64 (d， 2H, / - 9. 0 Hz)， 4.49 (d， 2H， /- 5.9 Hz) ， 4.32- 4.22 (m， 1H)， 3.29 (t， 2H， / -6.8Hz)， 3.03 (q， 2H， /-6. 5Hz)， 3.09-2.96 (m， 2H) ， 2.12-1.83 (m， 2H)， 1.55-1.45 (m， 2H) ， 1.45-1.35 (m， 2H)(—個NH未觀 測到)ppm; "C-NMR (薦0-d6) 5 173.8， 171.5， 166.3， 160.8， 156.6， 153.8， 150.8， 148.7， 148.5， 128.9， 127.9, 121.3， 111.2， 52.2， 50.3， 45.9， 37.9， 32.0， 26.6, 26.3， 25.7 ppm; HR-MS: [M]+= 537.2127 (CnH27NuOs的計算值537.2197);元素分析(在括弧內(nèi)算得 的C23H27N 05(HCl)5°>Hi) C 39.16 (38.38)， H 4.09 (4.48)， N 21.43 (21.40)， 0 (11.11)， Cl (24.63)。
(c) "F-點(diǎn)擊葉酸酯標(biāo)準(zhǔn)品的合成
將Y_(4-疊氮基丁基)-葉酸酰胺(五鹽酸鹽，14 mg， 0.02 mmol) 混懸于fBuOH/H20 (1:1， 2 mL)中，并加入6-[19F]氟-1-己炔(48 mg， 0.2 mmol)、 Cu(0Ac)2 (0. 8 mg， 20 mol%)和抗壞血酸鈉(1. 5 mg, 40mol%)。 將該混合物在75。C下攪拌30 min，然后HPLC顯示疊氮化物原料完全 轉(zhuǎn)化。將該混合物冷卻至室溫，并通過添加數(shù)滴NaOH 1M將所得混懸 液溶解。添加HC1 (1 M)至最終pH為2，導(dǎo)致產(chǎn)物沉淀。將該混合物 離心(IO min, 3500 rpm)，并傾出淡黃色上清液。干燥固體，得到棕 色粉末(20 mg)。將粗產(chǎn)物溶解于NaOH 0.1 M (0.4 raL)中，并通過半 制備型HPLC純化。將收集的含有產(chǎn)物的級分在減壓下濃縮，并將該殘 余物溶解在NaOH (1 M， 1 mL)中。添加HC1 (1 M)至最終pH為2,導(dǎo) 致產(chǎn)物沉淀。離心(10min， 3500 rpm)，傾出淡黃色上清液，并干燥 固體，得到黃色粉末的終產(chǎn)物的五鹽酸鹽(9 mg， 53 %): 4-固R (DMSO-d6) S 12.02-11.85 (bs， 1H)， 8.66 (s， 1H) ， 8.19 (d， 1H， /= 7.8 Hz)， 7.86-7.80 (m， 2H) ， 7.65 (d, 2H， /= 8.7 Hz)， 7.35-6. 95 (寬峰m， 2H) ， 6.65 (d， 2H， /=8.7Hz)， 4.53—4.47 (m， 3H)， 4. 40 (t， 1H， /- 5. 8 Hz) ， 4. 32-4. 23 (m， 3H) ， 3. 54-3. 32 (bs， 1H)， 3. 08-2. 97 (m， 2H) ， 2.62 (t， 2H， /=6. 6Hz)， 2.22-2.13 (m，2H)， 2. 09-2. 00 (m， 1H)， 1.98-1.88 (m， 1H)， 1.79-1.60 (m， 6H)， 1.36-1.26 (m， 2H) ppm; 13C-NMR (DMS0-d6) 5 173.8， 171.5， 166.3， 160.7， 155.0， 153.5， 150.7， 149.1， 148.5， 146.5， 129.0， 128.0， 121.7， 121.4， 111.2， 84.2， 83.0， 52.2, 48.8， 45.9, 37.7， 32.0， 29.3， 27.2， 26.5， 26.1， 24.8， 24. 5 ppm; LR-MS: [M+H] + = 638. 24 (C29H36FNn05的計算值637. 67);元素分析(在括弧內(nèi)算得 C29H36NnOs(HCl)5。/。值)C 42.72 (42.48)， H 5.18 (5.04), N 18.17 (18,79)， 0 (9.76)， F (2.32)， Cl (21.62)。
實(shí)施例2: "F-點(diǎn)擊葉酸酯的合成
<formula>formula see original document page 51</formula>
向獲得的干燥的[18F]氟化物-穴狀化合物絡(luò)合物中加入在1. 2 ml 乙腈中的5-己炔-1-基對甲苯磺酸酯(25 pl)。通過PTFE管將反應(yīng)容 器與含有碘化銅(I) (2.5mg)的第二反應(yīng)容器連接，并將它置于千水/ 異丙醇冷卻浴中。將在第一反應(yīng)容器中的反應(yīng)混合物加熱至 95 - 100 。C ，同時將"F-標(biāo)記的產(chǎn)物6- [18F]氟-l-己炔用乙腈共蒸餾到 第二反應(yīng)容器中(bp (6-[，]氟-l-己炔)=106 。C)。得到6-[，]氟 -l-己炔的放射性化學(xué)產(chǎn)率為70 - 85 %，放射化學(xué)純度為90 - 98 %。 12min之后，將含有在約0. 8 - 1. 0 ml乙腈中的6-[18F]氟-l-己炔的 第二反應(yīng)容器分離，并使之溫?zé)嶂潦覝?。向此混合物中順次加?. 3 ml 水、25 pl DIEA、在0. 15 ml水中的25 mg抗壞血酸鈉和在0. 2ml DMF 中的Y-(4-疊氮基-丁?；?-葉酸酰胺(參見實(shí)施例l(b))。將該混合 物加熱至80 。C，并在20分鐘內(nèi)使之冷卻至60 。C。該粗制混合物的18F-點(diǎn)擊-葉酸酯的含量為55 - 65 %。
為了半制備型HPLC純化，將該混合物用2 ml HPLC溶劑稀釋。在 RP18 ;fi(Phenomenex Gemini 5p C18， 250 x 10 mm)上使用如下梯度進(jìn)行分離。溶劑A = lOmM碳酸氬銨溶液，B -甲醇，0-30min: A: 90%+ 40%， 30 -40 min: A:40%， 40-45min: A: 40% + 90%。
在100 'C下、減壓和氮?dú)饬飨鲁シ蛛x的"F-點(diǎn)擊葉酸酯的HPLC 溶劑。將產(chǎn)物配制在生理學(xué)磷酸鹽緩沖溶液中。
實(shí)施例3:使用"F-點(diǎn)擊葉酸酯的琳斧、傳^和庠傳~#《 使用肝微粒體，將18F-點(diǎn)擊葉酸酯應(yīng)用于體外血漿穩(wěn)定性研究和 代謝產(chǎn)物研究。
將"F-點(diǎn)擊葉酸酯與人和鼠科動物血漿在37。C下在振蕩水浴中孵 育。在不同的時間點(diǎn)取等分部分，并通過HPLC分析。示蹤劑顯示了高 穩(wěn)定性。在0-120min的期間沒有檢測到脫氟或其它放射活性降解產(chǎn) 物。
使用人和鼠科動物肝微粒體的代謝物研究是在37t:下在 0-30min的時間跨度內(nèi)進(jìn)行的。在0、 5、 15和30 min取等分部分。 該研究顯示在30min內(nèi)沒有"F-點(diǎn)擊葉酸酯的放射活性代謝物或者降
使用8只帶KB移植腫瘤的棵鼠，將1SF-點(diǎn)擊葉酸酯用于岸#^參 為、爺^^:。將~2MBq的放射性示蹤劑注入各動物。在一個封閉組(4 只動物)中，在注射放射性示蹤劑之前10 min注射200 pg天然葉酸。 注射之后45min處死動物。葉酸酯受體-陽性KB腫瘤顯示出放射性示 蹤劑的高度特異性攝取，具有94 %特異性封閉的比率。此外，具有78 % 特異性封閉的特異性攝取也發(fā)現(xiàn)于腎中，已知其表達(dá)葉酸酯受體。在 膽嚢、腸和糞便中發(fā)現(xiàn)高度非特異性攝取，這顯示放射性示蹤劑的強(qiáng) 烈的肝膽管消除。
圖3顯示了 "F-點(diǎn)擊葉酸酯在葉酸酯受體-陽性組織中的高度特異 性攝取。
使用'8F-點(diǎn)擊葉酸酯的本^PET成像是在帶KB移植物腫瘤的棵鼠 中進(jìn)行的。將~ 11 MBq的放射性示蹤劑注入各動物。在一個封閉組中， 在注射放射性示蹤劑之前10 min注射200 pg天然葉酸。注射之后15min至45min獲得PET掃描。
通過PET使用1SF-點(diǎn)擊葉酸酯將KB腫瘤成像。由于腫瘤與背景基 數(shù)比值小，KB腫瘤僅為中度可見。在腹部區(qū)域(膽嚢、腸)中放射活性
的高度蓄積顯示放射性示蹤劑的強(qiáng)烈的肝膽管消除。
使用["F]FDG的PET成像是用相同動物在18F-點(diǎn)擊葉酸酯研究之 后4天進(jìn)行的。將 9MBq的「F]FDG注入各動物。注射之后30 min至 60min獲得PET掃描。["F]FDG掃描不能對葉酸酯受體-陽性KB腫瘤 顯像。雖然rF]FDG是在PET腫瘤成像中最常用的放射性示蹤劑，但 是已知「F]FDG是不適合KB移植腫瘤的成像的(Bettioet al， J. Nucl. Med. 1998; 47: 1153-60)。
圖4顯示了使用"F-點(diǎn)擊葉酸酯的PET成像(左側(cè))，其與使用 [18F] FDG的PET成像(右側(cè))比較，箭頭顯示了 KB移植腫瘤的位置。
權(quán)利要求
1.式I化合物，P-S1-Ar1-S2-18FI其中P是葉酸酯或其衍生物，S1、S2相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基，和Ar1是三唑或四唑。
2. 權(quán)利要求1的化合物，其中S!和S2相互獨(dú)立地是單鍵或間隔 基單元，例如直鏈或支鏈C-Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一 個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或多個非-相鄰的C仏基團(tuán)可以 獨(dú)立地凈皮以下代替-0-、 -CO-、 -CO-O-、 -O-CO-、 -NR'-、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-O-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH=CH-、 -C蕓C-， 或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R'，其中R'表示H或C!-Ce烷基，或者其組合。
3. 權(quán)利要求1的化合物，其具有式II<formula>formula see original document page 2</formula>II其中Xi至X5相互獨(dú)立地是C或N,Ri和R2相互獨(dú)立地是H、 Hal、 -0R'、 -NHR'、 CI-C12烷基、C1-C12 烷氧基、Cl-C12烷酰基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、(C1-C12烷氧 基)羰基和(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或Cl-C6烷基，R3、 R4相互獨(dú)立地是H、曱?；啺被鶗趸?、亞硝基、Cl-C12烷 基、Cl-C12烷氧基、C1-C12烷?；?、囟素取代的C1-C12烷?；琑5是H、 d-Cu烷基、d-Cu烷氧基、C廣Cu烷?；?、C2-"鏈烯基、 C2-C12炔基、(d-Cu烷氧基)羰基和(Ci-C12烷基氨基)羰基，R6、 R,相互獨(dú)立地是直鏈或支鏈d-Cu垸基，其是未取代的或者被以 下至少一個取代CN、 Hal、或N02，或者式III基團(tuán)<formula>formula see original document page 3</formula>其中Si和s2相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈 Cl-C12烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02， 并且其中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-O-、 -CO-、 -CO-0-、 -O-CO-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-C0+、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH=CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-， 或者5-或6_元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R'，其中R'表示H或C廣"烷基，或者其組合，和Ar!是三唑或四唑，條件是R6和R7中的一個是式III的基團(tuán)，m 是0或1，p 是0、 1或2,和q 具有1至7的值。
4. 權(quán)利要求3的化合物，其中Re是直鏈或支鏈d-Cu烷基，其是 未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02,并且117是式111 的基團(tuán)。
5. 權(quán)利要求3的化合物，其中R7是直鏈或支鏈d-Cu烷基，其是 未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且116是式111 的基團(tuán)。
6. 前迷權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中S,是單鍵或間隔基單元， 例如直鏈或支鏈d-Cw烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代 CN、 Hal、或卯2，并且其中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -CO-O-、 -NR'-、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代 CN、 Hal、 N02、 COR'或COOR'，其中R'表示H或C「C6烷基,或者其組合。
7. 前迷權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中S2是單鍵或者直鏈或支鏈 d-Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02， 或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 -COR'或-COOR',其中R'表示H或d-Ce烷基，或者其組合，更優(yōu)選 單鍵或者直鏈或支鏈C廣Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取 代CN、 Hal、或N02。
8. 式IV化合物IV其中X6、 X7相互獨(dú)立地是C、 N或0R8、 R9相互獨(dú)立地是H或者直鏈或支鏈C、-Cu烷基，其是未取代的 或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或多個嵌入 的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -CO-O-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -CsC-，或式V的基團(tuán)——S3 Ar廣S2-化FV其中S2、S3相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈d-Cu 烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02,并且 其中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、-C0-、 -CO-O-、 -O-CO-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-O-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH=CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-， 或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 COR'或COOR',其中R'表示H或d-a烷基，或者其組合，Ar!是三喳或四峻，和Xi至X" Ri至Re、 p和q如在權(quán)利要求3中定義的，條件是l是式III的基團(tuán)或者Rs和R9中至少一個是式V的基團(tuán)。
9. 權(quán)利要求8的化合物，其中S2和S3相互獨(dú)立地是單鍵或者直 鏈或支鏈d-Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 或冊2，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代 CN、 Hal、 N02、 -COR'或-COOR'，其中R'表示H或d-a烷基,或者其組合， 更優(yōu)選直鏈或支鏈d-"烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代 CN、 Hal、或N02。
10. 前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中Ar,選自式V-c、 V-d和V-e其中虛線表示與所述間隔基團(tuán)連接的位置，并且R〃是H、 Hal、 NH-COR'、 NH-S02R'、 C02R'、 COR'，其中R'表示H或CI-C6烷基，或者直 鏈或支鏈d-Cu烷基，該C廣Cu烷基是未取代的或者被以下至少一個取 代CN、 Hal、 0H、 NH2、 S03H、 SH、 C02H、或N02，或者5-或6-元芳香 環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 COR'或C00R'，其中R'表示H或d-G烷基，或者其組合。
11. 權(quán)利要求8的化合物，其中116是CN、 Hal、 N02、或者基團(tuán)R5 并且Rs和R9中的至少一個是式V的基團(tuán)。
12. 權(quán)利要求8的化合物，其中R6是CN、 Hal、 N02、或者基團(tuán)R5， Rs是H或者直鏈或支鏈d-"烷基，其是未取代的或者被以下至少一個 取代CN、 Hal或N02，其中一個或多個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可 以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -CO-O-、 -CO-NR'-、 -CH=CH-、 -C =C-，并且IU是式V的基團(tuán)。
13. 權(quán)利要求8的化合物，其中Re是CN、 Hal、 N02、或者基團(tuán)R5, l是H或者直鏈或支鏈d-Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個 取代CN、 Hal或N0"其中一個或多個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可 以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -C0-0-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C =C-，并且Rs是式V的基團(tuán)。
14. 權(quán)利要求8的化合物，其中Rs和R,相互獨(dú)立地是H或者直鏈 或支鏈C,-d2烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal 或N02，其中一個或多個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以 下代替-0-、 -CO-、 -CO-O-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-，并且R6 是式V的基團(tuán)。
15. 權(quán)利要求1的化合物，其具有式VI、 VIa或VIb，VI<formula>formula see original document page 7</formula>O^X7-R9■ 、i八i 八/VIb其中Xi至X5相互獨(dú)立地是C或N， X6、 X7相互獨(dú)立地是C、 N或0，R,和R2相互獨(dú)立地是H、 Hal、 -0R'、 -NHR'、 CI-C12烷基、C1-C12 烷氧基、Cl-C12烷?；2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、(C1-C12烷氧 基)羰基和(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或Cl-C6烷基，R3、 R4相互獨(dú)立地是H、曱?；?、亞氨基甲基、亞硝基、Cl-C12烷 基、C1-C12烷氧基、Cl-C12烷酰基、卣素取代的C1-C12烷酰基，R6是H、 CN、 Hal、 N02、 C廣C2烷基、C廣Cu烷氧基、C廣Cu烷酰基、 C廣d2鏈烯基、C廣d2炔基、(C廣d2烷氧基)羰基或(d-d2烷基氨基)羰基，R8、 ！U相互獨(dú)立地是H或者直鏈或支鏈C1-C12烷基，其是未取代的 或者被以下至少一個取代CN、 Hai、或N02,并且其中一個或多個嵌入 的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -CO-0-、 -C0-NR'-、 -CH-CH-、 -C蕓C-，S2、 S3相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈d-"烷 基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其 中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、 -C0-0-、 -0-C0-、 -NR'-、 -N=、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-C0-0-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH=CH-、 -C^C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R'，其中R'表示H或C廣C6烷基，或者其組合，AlTi是三唑或四唑，m是0或1，p 是0、 1或2,和q 具有1至7的值。
16. 權(quán)利要求15的化合物，其中S2和S3相互獨(dú)立地是單鍵或者直 鏈或支鏈d-Cu烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 或N02,或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代 CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R'，其中R'表示H或C「Cs烷基。
17. 權(quán)利要求15或16的化合物，其中An選自式V-c、 V-d和V-e其中虛線表示與所述間隔基團(tuán)連接的位置，并且R〃是H、 Hal、 NH-COR'、 NH-S02R'、 C02R'、 C0R'，其中R'表示H或Cl-C6烷基，或者直 鏈或支鏈C1-C12烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 0H、 NH2、 S03H、 SH、 C02H、或N02,或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳 香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 COR'或C00R',其中 R'表示H或Cr"烷基，或者其組合。
18.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其為式VIIa至VIIf或者VIIIa 至VIIIf，<formula>formula see original document page 9</formula><formula>formula see original document page 10</formula><formula>formula see original document page 11</formula>VIIIdVIIIf其中X,至X;相互獨(dú)立地是C或N， X6、 X7相互獨(dú)立地是C、 N或0,R,、 R2相互獨(dú)立地是H、 Hal、 -0R'、 -NHR'、 CI-C12烷基、CI-C12 烷氧基、C1-C12烷酰基、C2-C12鏈烯基、C2-C12炔基、(C1-C12烷氧 基)羰基和(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或Cl-C6烷基，R3、 R4相互獨(dú)立地是H、曱酰基、亞氨基曱基、亞硝基、Cl-C12烷 基、Cl-C12烷氧基、Cl-C12烷?；⒇账厝〈腃I-C12烷?；?，R6是H、 CN、 Hal、 N02、 d-Cu烷基、C廣Cu烷氧基、C)-C^烷酰基、NHC廣Cu鏈烯基、C2-d炔基、(C廣Cu烷氧基)羰基或(C廣d2烷基氨基)羰基，R8、 Rg相互獨(dú)立地是H或者直鏈或支鏈Cl-C12烷基，其是未取代的 或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或多個嵌入 的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地神皮以下代替-0-、 -CO-、 -CO-0-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C^C-,S2、 S3相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈Ct-Cu烷 基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其 中一個或多個非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -C0-、 -C0-0-、 -0-C0-、 -NR'-、 -N-、 -NR'-C0-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-0-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-、 -S-、 -S03R'-、 -PR'-， 或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R',其中R'表示H或C廣Cs烷基，或者其組合，R〃是H、 Hal、 NH-C0R'、 NH-S02R'、 C02R'、 C0R'、或者直鏈或支鏈 d-d2烷基，該烷基是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、 0H、 NH2、 S03H、 SH、 C02H、或N02，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取 代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 C0R'或C00R',其中R'表示H或 d-C6烷基，和m 是0或1，p 是Q、 1或2，和q 具有1至7的值。
19. 前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中Ri和R2相互獨(dú)立地是H、 烷基、-0R'、 -NHR'，其中R'表示H或C,-C6烷基。
20. 前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R3是H、甲?；?、C1-C12 烷基或CI-C12烷?；?。
21. 前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中l(wèi)是H、亞硝基、CI-C12 烷氧基或C1-C12烷?；?br> 22. 前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R5是H、 C1-C12烷基、 C1-C12烷氧基、CI-C12烷?；?C廣Cu烷氧基)羰基或(d-Cu烷基氨基) 羰基。
23. 前迷權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R6是H、 CN、 Hal、 N02、 d-C^烷基、d-G烷氧基、C,-Cu烷?；?d-Cu烷氧基)羰基。
24. 前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其具有式IX、 IXa、 X或Xa，其中，X6、 X7相互獨(dú)立地是C、 N或O,Y:、 丫2相互獨(dú)立地選自H、曱?；?、直鏈或支鏈d-Cu烷基，該烷基 是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個 或多個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、-C0-、-C0-0-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C^C-，Y3選自H、甲?；?、亞硝基、直鏈或支鏈(V"Cu烷基，該烷基是未 取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其中一個或多 個嵌入的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、一C0-0-、 一CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C蕓C-，Rs、 1U相互獨(dú)立地是H或者直鏈或支鏈C1-C12烷基，其是未取代的 或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02,并且其中一個或多個嵌入 的、非-相鄰的CH2基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -C0-、 -CO-O-、 -CO-NR'-、 -CH-CH-、 -CsC-,R〃是H、 Hal、 NH-COR'、 NH-S02R'、 C02R'、 COR',其中R'表示H或 Cl-C6烷基，或者直鏈或支鏈C1-C12烷基，該烷基是未取代的或者被以 下至少一個取代CN、 Hal、 0H、 NH2、 S03H、 SH、 C02H、或N02，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 COR'或COOR',其中R'表示H或C廣C6烷基，或者其組合，和S2、 S3相互獨(dú)立地是單鍵或間隔基單元，例如直鏈或支鏈C1-C12烷 基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02，并且其 中一個或多個非-相鄰的CH!基團(tuán)可以獨(dú)立地被以下代替-0-、 -CO-、-C0-0-、 -O-CO-、 -NR'-、 -NR'-CO-、 -CO-NR'-、 -NR'-CO-O-、 -O-CO-NR'-、 -NR'-CO-NR'-、 -CH-CH-、 -C = C-，或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是 未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 COR'或COOR'，其中R'表示H 或Cl-C6烷基，或者其組合。
25. 權(quán)利要求24的化合物，其中S2和S3相互獨(dú)立地是直鏈或支鏈 C1-C8烷基，其是未取代的或者被以下至少一個取代CN、 Hal、或N02， 或者5-或6-元芳香環(huán)，該芳香環(huán)是未取代的或者被以下取代CN、 Hal、 N02、 COR'或COOR'，其中R'表示H或C1-C6烷基。
26. 制備權(quán)利要求1的化合物的方法，其包括步驟(a)使疊氮基衍 生化的葉酸與"F-標(biāo)記的炔或炔取代物在1， 3-環(huán)加成作用中反應(yīng)，和(b) 分離該化合物。
27. 權(quán)利要求26的方法，其中該18F-標(biāo)記的炔或炔取代物是在取 代反應(yīng)中通過使具有離去基團(tuán)的炔或炔取代物與[，]氟化物反應(yīng)得到 該"F-標(biāo)記的炔或炔取代物而制備的。
28. 制備權(quán)利要求1的化合物的方法，其包括步驟(a)將用炔或炔 取代物衍生化的葉酸與"F-標(biāo)記的疊氮化物在1， 3-環(huán)加成作用中反應(yīng)， 和(b)分離該化合物。
29. 權(quán)利要求28的方法，其中該18F-標(biāo)記的疊氮化物是在取代反 應(yīng)中通過使具有離去基團(tuán)的疊氮化物與[18F]氟化物反應(yīng)得到該"F-標(biāo)記 的疊氮化物而制備的。
30. 權(quán)利要求26至29的方法，其中該環(huán)加成作用是在加熱條件下 或在催化劑存在下進(jìn)行的。
31. 權(quán)利要求26的方法，其包括步驟(a)使具有適宜離去基團(tuán)的 (C2-C12)炔-l或其取代物與["F]氟化物反應(yīng)，和(b)使所獲得的產(chǎn)物與 疊氮基-葉酸或衍生物在Cu(I)-催化的1， 3-偶極環(huán)加成作用中偶合。
32. 權(quán)利要求28的方法，其包括步驟(a)使具有適宜離去基團(tuán)的 (C1-C12)疊氮化物與[18F]氟化物反應(yīng)，和(b)使所獲得的產(chǎn)物與用炔基 或其取代物衍生化的葉酸在Cu(I)-催化的1， 3-偶極環(huán)加成作用中偶合。
33. 權(quán)利要求1至25的化合物在體外或體內(nèi)用于表達(dá)葉酸酯-受體 的細(xì)胞或細(xì)胞群的診斷成像中的用途。
34. 權(quán)利要求1至25的化合物用于方便且有效地施用于有診斷成 像需要的受試者的用途。
35. 表達(dá)葉酸酯-受體的細(xì)胞或細(xì)胞群的診斷成像的方法，所述方 法包括以診斷成像的量施用至少一種權(quán)利要求1至25的化合物，和獲 得所述細(xì)胞或細(xì)胞群的診斷影像。
36. 權(quán)利要求35的方法，其中在體外或體內(nèi)進(jìn)行表達(dá)葉酸酯-受體 的細(xì)胞或細(xì)胞群的診斷成像。
37. 體外檢測組織樣品中的表達(dá)葉酸酯受體的細(xì)胞的方法，其包括 使所述組織樣品與有效量的權(quán)利要求1至25的化合物接觸足夠的時間 和條件以使得結(jié)合發(fā)生，和通過PET成像檢測此結(jié)合。
38. 診斷成像或監(jiān)測受試者的方法，其包括步驟(i)以診斷成像量 施用至少一種權(quán)利要求1至25的化合物，和(ii)使用PET通過檢測來 自所述至少 一種化合物的信號以進(jìn)行診斷成像。
39.監(jiān)測受試者的癌癥和炎癥和自身免疫疾病的治療的方法，其包 括步驟(i)給有此需要的受試者施用診斷成像量至少一種權(quán)利要求1至 25的化合物以及治療活性劑，和(ii)使用PET通過檢測來自所述至少一 種化合物的信號進(jìn)行診斷成像以觀察癌癥和炎癥和自身免疫疾病的治 療病程。
40.權(quán)利要求38或39的方法，其與癌癥和炎癥和自身免疫疾病的診 斷或治療的任何其它方法組合使用。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的¹⁸F-葉酸酯放射性藥物，其中氟-18是通過三唑-或四唑-連接基共價連接到葉酸酯或其衍生物，它們的制備方法，以及它們在診斷和監(jiān)測癌癥和炎癥和自身免疫疾病的治療中的用途。
文檔編號C07D475/04GK101657454SQ200880002714
公開日2010年2月24日 申請日期2008年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月11日
發(fā)明者R·莫澤, S·M·艾梅塔美, T·L·曼德, T·L·羅斯, V·格羅恩 申請人:默克阿潑洛發(fā)股份公司