專利名稱：：一種高含量、高活性口服云芝糖肽及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于藥品領域，具體涉及一種口服吸收的高含量、高活性云芝糖肽及其制備方法和用途。
背景技術：
：免疫增強劑云芝糖肽是從云芝深層發(fā)酵菌絲體中采用一次水提醇沉法提取的糖肽粗品，是少數幾種能口服吸收的糖肽類免疫增強劑之一。能抑制人肺癌、胃癌、食道癌、白血病、腹水癌等多種癌細胞的增殖，同時可有效提高人體免疫機能，增進食欲，緩解疼痛，提高耐缺氧能力，降低放化療引起的毒副反應，國內已經作為腫瘤的輔助治療藥物上市銷售。中國專利89105471.5報道了"一種云芝糖肽的生產方法"，其提取方法為將云芝菌絲體破碎后，在9010(TC熱水中回流浸取35小時，浸取液用l:3~4(V/V)比例的乙醇在04。C醇析68小時，得醇析物，干燥即得黑褐色的云芝糖肽。以此工藝生產的云芝糖肽在水中溶解性差，產品中糖含量為30~40%,肽含量為10~25%。另一種產品云芝胞內糖肽在水中易溶，國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的國家藥品標準WS廣XG-021-2002中規(guī)定，其糖含量》35%，肽含量》20%。其他供口服用云芝提取物中糖和肽的含量均低于云芝糖肽。中國專利200410103414.3也公開了一種從云芝糖肽粗品中提取注射用云芝糖肽的方法，得到了高純度的云芝糖肽，其中多糖含量>75%，蛋白含量《15%，平均分子量范圍30Kd300Kd。但是其產品及其純化工藝還是存在三方面不足第一，采用Savege法進行脫蛋白雖然可以脫除游離蛋白，但是也不可避免地脫除了具有生理活性的部分多糖肽和多糖，造成了活性成分的損失、產品得率下降；第二，采用分子量為30Kd和300Kd的超濾膜截留除去分子量小于30Kd和大于300Kd物質時也造成了相應的活性糖肽的損失，產品得率進一步下降。而且分子量小于30Kd或大于300Kd的糖肽也具有增強免疫活性和抗腫瘤作用，并無研究表明其活性比分子量在30Kd300Kd的糖肽弱。第三，經過多次純化后，雖然產品中多糖含量從3540%提高到75%以上，但產品得率已經成倍下降、成本成倍上升，所以只能作為注射用中藥原料，且其糖肽，特別是含有部分游離蛋白和多量不明雜質的糖肽類中藥注射劑，在注射給藥時不可避免地產生過敏反應等毒副反應，增加了腫瘤患者的臨床風險。
發(fā)明內容本發(fā)明目的在于提供一種高含量、高活性口服云芝糖肽，易溶于水，而且盡可能保留了云芝糖肽中的活性成分。本發(fā)明的第二個目的在于提供這種高含量、高活性口服云芝糖肽的制備方法。本發(fā)明第三個目的在于提供這種高含量、高活性口服云芝糖肽在制備抗腫瘤藥物方面的應用。一種高含量、高活性口服云芝糖肽，糖肽總量>70°/。；經HPLC凝膠柱層析、GPC軟件統(tǒng)計分析，產品中重均分子量在10Kd以上的多糖肽在占糖肽總量中的含量>80%。這種口服云芝糖肽盡可能保留了云芝糖肽中的活性成分，而且在水中易溶。其中糖含量為5080%，肽含量為1630%。這種高含量、高活性口服云芝糖肽為云芝子實體或發(fā)酵生產的云芝菌絲體中提取純化的產物，既可以從云芝子實體或菌絲體中直接水提醇沉純化得到，也可以從市售的云芝糖肽、云芝胞內糖肽、云芝胞外糖肽等云芝提取物粗品中純化得到。由于云芝糖肽中的多糖富含羥基，且具有三維立體結構，在乙醇沉淀時很容易與色素等物質結合而形成共沉淀，帶進了大量雜質，降低了產品中多糖肽的含量，影響了產品的質量。為了減少雜質與多糖共沉淀的形成，提高產品質量，本發(fā)明采用調節(jié)pH、微孔濾膜精密過濾或離心分離提取液、減壓濃縮、邊攪拌邊緩慢加入乙醇進行沉淀且攪拌平衡一定時間、多次水提醇沉進行純化的技術方案。還可進一步采用膜濾和柱層析技術進行精制得到更高純度的云芝糖肽。這種高含量、高活性口服云芝糖肽制備方法如下(1)取云芝粗提取物混懸或溶解于8010(TC熱水中，提取分離云芝粗提取物溶液，或者用8010(TC熱水提取云芝菌絲體或者云芝子實體制備云芝粗提取物溶液；(2)將云芝粗提取物溶液或者云芝粗提取物混懸液的ph值控制在4~8，過濾或離心分離得到澄清提取液，濃縮至比重為1.05~1.3;(3)采用水提醇沉法進行純化，獲得濃縮料。步驟(1)中所述的云芝粗提取物包括云芝糖肽、云芝胞內糖肽、云芝多糖以及云芝菌絲體或子實體的水提取物。步驟(2)中所述的過濾為0.15nm的微孔濾膜精密過濾。所述的離心速率為4000—12000rpm。步驟(3)中所述水提醇沉的方法為(a)邊攪拌邊加入1~5倍體積80%~100%的乙醇，繼續(xù)攪拌0.52小時；(b)過濾或離心分離得到沉淀，揮干乙醇；(c)用15倍重量水復溶沉淀，重復步驟(a)和(b)1~2次。將步驟(3)得到的產物進行干燥、粉碎，或者采用膜分離技術或柱層析技術進行精制后干燥、粉碎。所述的膜分離技術為透析和超濾；所述柱層析技術為DEAE-纖維素柱、DEAE-S印hadex柱、S印hadex凝膠柱、Saphrose凝膠柱、Biogel凝膠柱或大孔吸附樹脂柱層析分離技術。所述的干燥為噴霧干燥、減壓干燥、冰凍干燥或常壓干燥。這種高含量、高活性口服云芝糖適用于腫瘤的預防和治療，可應用于制備抗腫瘤藥物，單用和聯用環(huán)磷酰胺抗瘤時，本品比現有的云芝糖肽具有更有效的抗腫瘤作用，對骨髓功能和免疫功能的保護作用也更好。與醫(yī)藥學上可接受的原輔料復配后制成各種口服制劑，包括散劑、丸劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑或口服液等常釋和緩釋制劑。本發(fā)明的高含量、高活性口服云芝糖純度高，制備工藝簡單、成本低，抗腫瘤效果及對骨髓和免疫功能的保護作用更好。具體實施方式舉以下實施例的目的是為了更好地理解本發(fā)明，本發(fā)明不受以下實施例的限制。實施例1取云芝糖肽10kg，加100L水，在9(TC溶解提取2小時，調節(jié)pH4-8，以0.5um的微孔濾膜精密過濾得到澄清提取液。殘渣重復提取2次，澄清提取液合并，減壓濃縮至密度為1,2;邊攪拌邊緩慢加入3倍體積95%的乙醇進行沉淀，繼續(xù)攪拌l小時，離心分離沉淀，60°C減壓干燥，粉碎，即得高含量、高活性口服云芝糖肽。lg該糖肽可完全溶解于5ml水中，其中糖肽總量為75.6%，糖含量為52.4%，肽含量為23.2%，分子量在10kd以上的多糖肽占糖肽總量84.6%。實施例2取云芝多糖10kg，加40L水，IO(TC溶解提取0.5小時，調節(jié)pH4，5000轉/分高速離心分離得到澄清提取液。殘渣重復提取3次，澄清提取液合并，減壓濃縮至密度為1.05，邊攪拌邊緩慢加入4倍體積80%的乙醇進行沉淀，繼續(xù)攪拌2小時，離心分離沉淀，50。C減壓干燥燥，粉碎，即得高含量、高活性口服云芝糖肽。lg該糖肽可完全溶解于5ml水中，其中糖肽總量為72.2%，糖含量為51.9%，肽含量為20.3%，分子量在10kd以上的多糖肽占糖肽總量81.8%。實施例3取云芝胞內糖肽10kg，加200L的水，80。C溶解提取6小時，調節(jié)pH8，過5"m的微孔濾膜精密過濾得到澄清提取液。殘渣重復提取1次，澄清提取液合并，減壓濃縮至密度為1.3，邊攪拌邊緩慢加入2倍體積無水乙醇進行沉淀，繼續(xù)攪拌0.5小時，過濾分離沉淀，冷凍干燥，粉碎，即得高含量、高活性口服云芝糖肽。lg該糖肽可完全溶解于5ml水中，其中糖肽總量為75.1%，糖含量為50.8%，肽含量為24.3%,分子量在10kd以上的多糖肽占糖肽總量為86.8%。實施例4液體發(fā)酵云芝菌絲體10kg，用水清洗祛除殘留培養(yǎng)基，加50L水，IOO'C提取3小時，板框壓濾，濾渣重復提取2次，濾液合并，調節(jié)pH6，5000轉/分離心分離得到澄清液體，7(TC減壓濃縮至密度為1.2，邊攪拌邊緩慢加入4倍體積95%的乙醇進行沉淀，繼續(xù)攪拌1小時，過濾分離沉淀，揮干乙醇。重復上述水提醇沉1次，沉淀7(TC減壓干燥，粉碎，即得高含量、高活性口服云芝糖肽。lg該糖肽可完全溶解于5ml水中，其中糖肽總量為73.9%，糖含量為51.6%，肽含量為22.3%，分子量在10kd以上的多糖肽占糖肽總量85.1%。實施例5云芝子實體10kg，切成小塊，加100L水，100。C提取3小時，板框壓濾，濾渣重復提取2次，濾液合并。過0.5"m的微孔濾膜精密過濾得到澄清提取液，70。C減壓濃縮至密度為1.2，邊攪拌邊緩慢加入4倍量95。/。的乙醇進行沉淀，繼續(xù)攪拌l小時，過濾分離沉淀，揮干乙醇。重復上述水提醇沉1次，沉淀用5倍質量的水復溶，經10kd的超濾膜超濾，收集分子量》10kd的部分，507(TC減壓濃縮，濃縮液噴霧干燥，即得高含量、高活性口服云芝糖肽。lg該糖肽可完全溶解于5ml水中，其中糖肽總量為93.1%，糖含量為68.6%，肽含量為24.6%，分子量在10kd以上的多糖肽占糖肽總量95.1%。實施例6取按實施例1制備的高活性、高含量云芝糖肽10kg，加100L水90。C溶解，過0.5um的微孔濾膜精密過濾得到澄清提取液，上Sepharose凝膠柱進行層析精制，收集分子量^10kd的部分，70。C減壓濃縮，噴霧干燥，粉碎，即得精制的高含量、高活性口服云芝糖肽。lg該糖肽可完全溶解于5ml水中，其中糖肽總量為95.2%，糖含量為69.6%，肽含量為25.6%，分子量在10kd以上的多糖肽占糖肽總量97.8%。實施例7取按實施例2制備的的高活性、高含量云芝糖肽10kg，微晶纖維素lkg，硬脂酸鎂0.05kg，滑石粉0,20kg，置混合機中混合均勻，分裝膠囊，即得高活性、高含量云芝糖肽膠囊。實施例8取按實施例3制備的的高活性、高含量云芝糖肽10kg，微晶纖維素lkg，羧甲基淀粉鈉0.5kg，置混合機中混合均勻，用70%乙醇水溶液濕法制粒，7(TC干燥，整粒，加硬脂酸鎂0.05kg，滑石粉0.20kg，總混均勻，壓片，即得高活性、高含量云芝糖肽片。實施例9取按實施例1制備的的高活性、高含量云芝糖肽10kg，溶解于190L純水，微孔濾膜過濾，分裝于有效容積10ml的口服液瓶中，121'C滅菌20分鐘，即得高活性、高含量云芝糖肽口服液。實施例IO高含量、高活性口服云芝糖肽的藥理學實驗1材料1.1藥品與試劑云芝糖肽(以下用PSP表示，糖肽總量為55.2%，糖含量為38.3%，肽含量為16.8%，分子量在10kd以上的多糖肽含量為53.7%)，批號050901;實施例1中的高含量、高活性的可溶性口服云芝糖肽(用pPSP表示，糖肽總量為75.6%，糖含量為52.4%,肽含量為23.2%，分子量在10kd以上的多糖肽含量為84.6%)，批號051111，均由上海新康制藥廠提供。環(huán)磷酰胺(CTX)，200mg/瓶，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司產品，批號05101721。1.2實驗動物昆明種小鼠，雄性，體重18土2g，由中國科學院上海實驗動物中心提供。1.3細胞株肉瘤180(S180)腹水型瘤株由上海藥物研究所提供。1.4主要儀器SysmexF—820半自動血細胞分析儀(日本東亞)。2方法2.1荷瘤模型制作方法處死S180腹腔傳代小鼠，常規(guī)消毒后腹腔注入滅菌生理鹽水(NS)5ml，抽取腹水，再用滅菌NS稀釋瘤細胞至8X106個/ml(死亡率<5%)。按無菌操作要求接種于小鼠右前肢腋下皮下0.2ml/只。2.2動物分組與給藥方法分組每批次90只動物，除10只用于正常對照組外，其余均荷瘤，次日隨機分為8組，每組10只。分組包括荷瘤模型對照組、CTX對照治療組、聯用治療組和單用治療組。CTX對照治療組、聯用治療組的CTX用量均為30mg/kg(注射)，pPSP及PSP均為口服給藥。聯用治療組CTX+pPSP低劑量組(200mg/kg)、CTX+pPSP中劑量組(400mg/kg)、CTX+pPSP高劑量組(800mg/kg)、CTX+PSP中劑量(400mg/kg);單用治療組pPSP中劑量組(400mg/kg)、PSP中劑量組(400mg/kg)。批次共分2個批次批次I、1I分別于荷瘤后第8、12天處理。給藥方法各組都在荷瘤次日起給藥，腹腔注射(i.p.)和灌胃(i.g.)給藥各每天一次，各0.1ml/10g;i.p.連用7天；i.g.用至大處理前一天，即荷瘤后第7天(批次i)和第ii天(批次n)。荷瘤模型組i.p.和i.g.都為NS;CTX對照治療組i.p.CTX，30mg/kg;i.g.NS;聯用治療組i.p.CTX，30mg/kg;分別i.g.pPSP:200mg/kg、400mg/kg、800mg/kg或PSP:400mg/kg。單用治療組i.p.NS;i.g.pPSP:400mg/kg或PSP:400mg/kg。2.3觀察指標與檢測方法各批次觀察體重增長、進食、排便、毛發(fā)、活動等一般情況；其中批次II兼做血常規(guī)(第4、8、12天剪尾采血)。各批次大處理時，先稱體重、采血(批次II);處死后取瘤、胸腺、脾臟稱重，進而換算出抑瘤率、胸腺指數、脾臟指數；批次I、II另取右后肢股骨作骨髓有核細胞(BMNC)計數。血常規(guī)檢測使用血細胞分析儀測定白細胞(WBC)、血紅蛋白(HB)、血小板(PLT)。抑瘤率(％):即(荷瘤模型組瘤重一治療組瘤重)/荷瘤模型組瘤重X100X。胸腺指數、脾臟指數(mg/10g體重)即胸腺重量、脾臟重量與體重的比值。BMNC計數先除盡股骨外周軟組織，再用3%醋酸溶液10ml沖出全部骨髓，過4號針頭，使成單細胞懸液，顯微鏡下計數BMNC。2.4統(tǒng)計分析計量資料以^土S表示。多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用q檢驗。3結果3.1pPSP、PSP對荷瘤小鼠的抗腫瘤效應單用時，pPSP、PSP都只在第12天體現抑瘤效應；聯用CTX時，兩者都能在第8、12天可增強抑瘤效應，提高抑瘤率；聯用不同劑量的pPSP對抑瘤效應增強程度無明顯區(qū)別(見表l、2)。表lpPSP、PSP對荷瘤小鼠的抑瘤作用組別瘤重(mg)8天12天荷瘤模型628±3151720±673CTX對照治療138±52##280±64###CTX+pPSP低劑量84±27*198±56*CTX+pPSP中齊懂79±29**188±73*CTX+pPSP高劑量63±28**207±57*CTX+PSP中齊糧73±23**201±88*pPSP中劑量488±2671043±487#PSP中劑量567±2721100±533#與荷瘤模型組比較#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001;與CTX對照治療組比較*P<0.05，**P<0.01。表2pPSP、PSP對荷瘤小鼠的抑瘤率比較組別抑瘤率(％)8天12天CTX對照治療78.083.7CTX+pPSP低劑量86.788.5CTX+pPSP中劑量87.589.0CTX+pPSP高劑量卯.O88.0CTX+PSP中齊懂88.488.3pPSP中劑量22.439.4PSP中劑量9.736.13.2pPSP、PSP對荷瘤小鼠免疫器官的影響單用時，pPSP具有對抗荷瘤所致的胸腺指數降低的作用，PSP則僅有對抗降低的趨勢；兩者對脾臟指數的動態(tài)變化無差異，對荷瘤第12天脾臟指數回降都有抑制作用。聯用CTX時，pPSP比PSP更早促進胸腺指數、脾臟指數的回升。聯用不同劑量的pPSP對胸腺指數、脾指數無明顯劑量依賴關系(見表3、4)。表3pPSP、PSP對荷瘤小鼠胸腺指數的影響胸腺指數(mg/10g)組別8天12天正常對照46.3±9.036.8±4.4荷瘤模型37.7±4.132.6±5.2CTX對照治療14.7±2.9###24.7±4.6弁#CTX+pPSP低劑量18.5±2.927.6±6.9CTX+pPSP中劑量19.7±3.5女★30.3±5.1大CTX+pPSP高劑量20.9±3.4女女★33.0±7.7CTX+PSP中劑量17.3±4.930.8±3.0大女pPSP中劑量43.5±6.434.9±4.3PSP中劑量40.2±6.434.05.5與荷瘤模型組比較#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001;與CTX對照治療組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。表4pPSP、PSP對荷瘤小鼠脾臟指數的影響脾臟指數(mg/10g)組別_8天12天正常對照52.1±8.2###40.18.8荷瘤模型73.9士12.055.0±12.6CTX對照治療21.9±6.6##井108.1±11.2井##CTX+pPSP低劑量27.5土8.4148.8±45.4CTX+pPSP中劑量28.7±6.1女121.1±19.2CTX+pPSP高劑量28.34.6143.6±39.2大CTX+PSP中劑量24.8±8.9123.9±18.5女pPSP中劑量73.212.166.3±6.0PSP中劑量79.6±16.169.1±11.3與荷瘤模型組比較#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001;與CTX對照治療組比較*P<0.05。3.3pPSP、PSP對荷瘤小鼠外周血象的影響單用時，pPSP明顯增加外周血白細胞、血紅蛋白、血小板的數量;PSP明顯增加外周血白細胞數量、但對血紅蛋白、血小板的數量影響較小。聯用CTX時，兩者都不能阻止CTX的初期降低白細胞的作用，但都能促進后期白細胞的回升;兩者都有對抗CTX降低血紅蛋白的作用；兩者對血小板都無明顯影響。聯用不同劑量的pPSP對血常規(guī)改善無明顯劑量依賴關系(見表5~7)。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表7pPSP、PSP對荷瘤小鼠PLT的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>206與荷瘤模型組比較#P<0.05，##P<0.001;與CTX+PPSP低劑量組比較*P<0.01，**P<0.001。3.4pPSP、PSP對荷瘤小鼠骨髓功能的影響單用時，兩者對荷瘤所致的骨髓有核細胞減少都有明顯的促進回升作用。聯用CTX時，兩者對荷瘤及CTX所致的骨髓有核細胞減少都有明顯的促進回升作用；并且存在PPSP劑量越大，回升作用越強的趨勢(見表8)。表8pPSP、PSP對荷瘤小鼠骨髓有核細胞數的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>與荷瘤模型組比較#P<0.05,##P<0.01，弁弁井P〈0.001;與CTX對照治療組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001;與CTX+PPSP低劑量組比較&P<0.05。3.5pPSP、PSP對荷瘤小鼠一般情況的影響單用時，兩者對體重增長、進食、排便、毛發(fā)、活動等均無明顯影響。聯用CTX時，兩者對CTX所致的排稀軟糞便、毛發(fā)稀疏干枯、活動抑制均有所改善；但對于體重增長延緩，初期反而有加重的趨勢，且pPSP量越大越明顯，至后期才與CTX對照治療組無差異。4結論S180皮下荷瘤小鼠的瘤體呈進行性增長，小鼠的體重增長、進食、排便、毛發(fā)、活動等一般情況與正常小鼠無明顯差異；雖然外周血象基本無異常變化，但是骨髓有核細胞數明顯減少，表明荷瘤導致一定程度的骨髓抑制；胸腺指數降低和脾臟指數先升后降，表明荷瘤導致免疫功能的抑制。單用CTX治療時，瘤體生長明顯受抑；但是抑制骨髓功能和免疫功能進一步加??；并出現一般情況的惡化，如，體重增長延緩、進食減少、排稀軟糞便、毛發(fā)稀疏干枯、蜷縮少動等。單用pPSP或PSP治療時，能發(fā)揮一定程度的抑瘤作用，并在一定程度上保護了骨髓功能和免疫功能。CTX聯用pPSP或PSP治療時，則抑瘤作用進一步加強，同時聯用pPSP或PSP能減輕荷瘤與CTX所致的骨髓功能和免疫功能的抑制，有效緩解一般情況的惡化。相比之下，單用和聯用CTX抗瘤時，對骨髓功能和免疫功能的保護，pPSP優(yōu)于PSP。權利要求1、一種高含量、高活性口服云芝糖肽，其特征在于，糖肽總量≥70％，重均分子量在10kd以上的多糖肽在糖肽總量中的含量≥80％。2、權利要求1所述一種高含量、高活性口服云芝糖肽，其特征在于，其中糖含量為50%80%，肽含量為16%~30%。3、一種高含量、高活性口服云芝糖肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)取云芝粗提取物混懸或溶解于8010(TC水中，提取分離云芝粗提取物溶液，或者用8010(TC熱水提取云芝菌絲體或者云芝子實體制備云芝粗提取物溶液；(2)將云芝粗提取物溶液或者云芝粗提取物混懸液的ph值控制在48，過濾或離心分離得到澄清提取液，濃縮至比重為1.051.3;(3)采用水提醇沉法進行純化，獲得濃縮料。4、權利要求3所述一種高含量、高活性口服云芝糖肽的制備方法，其特征在于，將步驟(3)的產物進行干燥、粉碎，或者采用膜分離技術或柱層析技術進行精制后干燥粉碎。5、權利要求3所述一種高含量、高活性口服云芝糖肽的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述的云芝粗提取物包括云芝糖肽、云芝胞內糖肽、云芝多糖以及云芝菌絲體或子實體的水提取物。6、權利要求3所述一種高含量、高活性口服云芝糖肽的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的過濾為0.l~5um的微孔濾膜精密過濾;所述離心速率為4000—12000rpm。7、權利要求3所述一種高含量、高活性口服云芝糖肽的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述水提醇沉方法為(a)邊攪拌邊加入1~5倍體積80~100%的乙醇，繼續(xù)攪拌0.52小時；(b)過濾或離心分離得到沉淀，揮干乙醇；(c)再用1~5倍重量水復溶沉淀，重復步驟(a)和(b)1~2次。8、權利要求4所述一種高含量、高活性口服云芝糖肽的制備方法，其特征在于，所述的膜分離技術為透析或超濾。9、權利要求4所述一種高含量、高活性口服云芝糖肽的制備方法，其特征在于，所述的柱層析技術為DEAE-纖維素柱、DEAE-S印hadex柱、S印hadex凝膠柱、Saphrose凝膠柱、Biogel凝膠柱或大孔吸附樹脂柱層析分離技術。10、權利要求3所述一種高含量、高活性口服云芝糖肽的制備方法，其特征在于，所述的干燥為噴霧干燥、減壓干燥、冰凍干燥或常壓干燥。11、權利要求1所述一種高含量、高活性口服云芝糖肽在制備抗腫瘤藥物方面的應用，其特征在于，與醫(yī)藥學上可接受的原輔料復配后制成口服制劑，包括散劑、丸劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑或口服液。全文摘要本發(fā)明涉及一種高含量、高活性口服云芝糖肽及其制備方法和應用。這種高含量、高活性口服云芝糖肽在水中易溶，糖肽總量≥70％，重均分子量在10kd以上的多糖肽占糖肽總量80％以上。其中糖含量50％～80％，肽含量16％～30％。制備方法為(1)取云芝粗提取物混懸或溶解于80～100℃水中，提取分離云芝粗提取物溶液，或者用80～100℃熱水提取云芝菌絲體或者云芝子實體制備云芝粗提取物溶液；(2)將云芝粗提取物溶液或者云芝粗提取物混懸液的pH值控制在4～8，過濾或離心分離得到澄清提取液，濃縮至比重為1.05～1.3；(3)用水提醇沉法進行純化。得到的產品比現有的云芝糖肽具有更有效的抗腫瘤作用，對骨髓功能和免疫功能的保護作用也更好，適用于腫瘤的預防和治療。文檔編號C07K1/34GK101249259SQ20081003421公開日2008年8月27日申請日期2008年3月4日優(yōu)先權日2008年3月4日發(fā)明者瑤劉,周海賓,華張,雷張,茅仁剛,萍袁申請人:上海師范大學;上海新康制藥廠