專利名稱：：腺苷a3受體激動劑的制作方法腺苷A3受體激動劑本發(fā)明涉及有機化合物、其制備方法和其作為藥物的用途。一方面，本發(fā)明提供了游離形式或鹽形式的式(I)化合物其中W表示含有1-4個環(huán)氮原子并任選地含有1-4個選自氧和疏的其它雜原子的N-連接的3-至12-元雜環(huán)基團，該基團任選地被下述取代基所取代氧代、d-Q-烷氧基、C6-do-芳基、R"或任選地被羥基取代的d-CV烷基；或者R1是任選地凈皮OH取代的-NH-C廣CV烷基羰基、-NH-C3-C8-環(huán)烷基羰基、-NH-SO;rCVC8-烷基、-^1-(:7畫<:14-芳烷基羰基、-NH-C(=0)-3到12元雜環(huán)基團、-NH-C(=0)-C6-C1(r芳基，或任選地被Rla取代的-NH-C(O)-C(二O)-NH-C廣Q-烷基，其中Rla是包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的3到12元雜環(huán)基團，所述3到12元雜環(huán)任選地被下述取代基所取代鹵素、氰基、氧代、OH、羧基、氨基、硝基、C,-CV烷基、d-Cs-烷基磺?；?、氨基羰基、C,-Q-烷基羰基或任選地被氨基羰基取代的W選自d-CV烷基、及-和S-l-苯基乙基、未取代的節(jié)基基團，和在一個或多個位置上被選自下述的基團所取代的苯乙基或節(jié)基基團d-Q-烷基、氨基、鹵素、C廣Cs-鹵代烷基、硝基、OH、乙酰氨基、C廣Q-烷氧基和磺基，或Rh是鹵素、三氟曱基、氰基、C廣Cs-烷基、C廣Q-烷氧基、乙烯基或乙炔基；D是氧、硫、NH、d-Cs-烷氧基、d-CV烷硫基或-CO-烷基氨基；且G是部分飽和、全飽和或全不飽和的5-8元環(huán)，其任選地具有1-3個獨立地選自氧、硫和氮的雜原子，或者是由兩個稠合的部分飽和、全飽和或全不飽和的3-6元環(huán)組成的二環(huán)，其獨立地任選地具有1-4個獨立地選自氮、疏和氧的雜原子；其中所述的G任選地被卣素、d-CV烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、氰基、Qrd(T環(huán)烷基、羥基或CVQ-烷氧基獨立地單-、二-或三-取代，或者G是氰基、d-Cs-烷氧基羰基、C3-C,環(huán)烷氧基羰基、C(0)NR4r5、C(S)NR4r5、C(nh)nr4nr5、C(n(d-C3)烷基)NR4R5或C(n(C3國do)環(huán)烷S)NR4R5;W選自H、卣素、任選地被囟素或OH取代的d-CV烷基、d-Q-烷氧基、氨基、CVCs-烷基氨基、C2-do-鏈烯類、任選地被C,-Q-烷基取代的Crd。-炔類、任選地被d-Cs-烷基或OH取代的芳基、巰基和d-C8-坑硫基;R4是鍵、h、d-do-烷基、羥基、d-do-烷氧基、C3-C『環(huán)烷氧基，R2是其中或任選地通過d-CV烷基連接的部分飽和、全飽和或全不飽和的5-8元環(huán)，其任選地具有1-3個獨立地選自氧、硫和氮的雜原子，或者是任選地通過d-CV烷基連接的二環(huán)或具有任選的d-Cs-橋的二環(huán)，所述二環(huán)或橋連的二環(huán)任選地具有l(wèi)-4個獨立地選自氮、硫和氧的雜原子，其中所述d-d()-烷基、d-do-烷氧基、C3-C,tr環(huán)烷氧基或R4環(huán)任選地獨立地被下述基團單-、二-或三-取代卣素、C廣CV烷基、三氟甲基、硝基、氰基、C3-C10-環(huán)烷基、OH或CrCV烷氧基；RS是鍵、H、d-Qr烷基或d-d。-環(huán)烷基，或1^4和RS與它們所連接的氮一起形成全飽和或部分不飽和的4-9元環(huán)，所述的環(huán)任選地橋連，任選地具有l(wèi)-3個獨立地選自氧、碌u和氮的雜原子，所述的環(huán)任選地獨立地被下述基團單-或二-取代氧代、幾基、CVCs-烷氧基、d-Cs-烷基、氨基、單-/V-或二-7V，7V-CVC8-烷基氨基羰基、單-7V-或二-"7\^0:3-(:1()-環(huán)烷基氨基羰基、7V-d-C8-烷基-7V-C3-Cnr環(huán)烷基氨基羰基、單-7V-或二-7V，7V-d-C8-烷基氨基、單-^V-或二-7V，7V-C3-d。-環(huán)烷基氨基、7V-C!-C8-烷基-7V-C3-CKr環(huán)烷基氨基、甲酰氨基、d-CV烷基羰基氨基、Qrd。-環(huán)烷基羰基氨基、Q-Cs-烷氧基羰基氨基、W-C,-Cr烷氧基羰基-/V-C,-C8-烷基氨基、d-Cs-氨磺?；?、C,-Cs-烷基磺?；被3-C,(r環(huán)烷基磺?；被?，或部分飽和、全飽和或全不飽和的5-8元環(huán)，其任選地通過d-CV烷基連接，任選地具有l(wèi)-3個獨立地選自氧、好u和氮的雜原子，或者是由兩個稠合的部分飽和、全飽和或全不飽和的3-6元環(huán)組成的二環(huán)，其獨立地任選地通過CrCs-烷基連接，任選地具有1-4個獨立地選自氮、硫和氧的雜原子，并且任選地被下述基團單-或二-取代囟素、三氟曱基、三氟曱氧基、C廣CV烷基或d-Qr烷氧基。在另一方面，本發(fā)明提供了游離形式或鹽形式的式(I)化合物其中W表示N-連接的3到12元雜環(huán)基團，其包含1-4個環(huán)氮原子并且任選地包含l-4個選自氧和硫的其它雜原子，或者R1是-NH-d-CV烷基羰基；R"是d-C8-烷基或任選地被卣素取代的爺基，或者R"是鹵素、三氟甲基、氰基、d-CV烷基、d-CV烷氧基、乙烯基或乙炔基；D是氧、硫、NH、d-CV烷氧基、d-Q-烷硫基或-CO-烷基氨基；且G是部分飽和的、全飽和的或全不飽和的5至8元環(huán)，其任選地具有l(wèi)-3個獨立地選自氧、硫和氮的雜原子，或者是由兩個稠合的部分飽和、全飽和或全不飽和的3-6元環(huán)組成的二環(huán)，其任選地具有1-4個獨立地選自氮、硫和氧的雜原子；其中所述的G任選地被卣素、d-CV烷基獨立地單-、二-或三-取代；且R3選自H、卣素、任選地被卣素或OH取代的d-Cs-烷基、d-Cs-烷R2是其中氧基、氨基、C,-CV烷基氨基、C2-do-鏈烯類、任選地被d-CV烷基取代的C2-d。-炔類、任選地被d-Cs-烷基或OH取代的C6-Cht芳基、巰基和C廣C8-坑硫基。根據(jù)式(I)，R1合適的為包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-12元雜環(huán)基團。優(yōu)選的Ri是5-6元雜環(huán)基團，例如三唑。根據(jù)式(I)，！^也合適的為-NH-CrC8-烷基羰基。所述的-NH-d-CV烷基羰基優(yōu)選-NHC(0)CH3。根據(jù)式(I),W合適的為R，其中R^合適的是卣素，例如氯；D合適的是d-Cs-烷氧基；且G合適的是五元雜環(huán)基團，例如被甲基單取代的異噴、唑。根據(jù)式(I)，112也合適的為被閨素單取代的千基基團。優(yōu)選的卣素是碘。根據(jù)式(I),W也合適的為C廣Cs-烷基。優(yōu)選甲基。根據(jù)式(I)，W合適的為H、卣素或任選地被d-Cs-烷基取代的C2-C10-炔類。定義用在說明書中的術(shù)語具有下列舍義"任選地被取代的"是指所涉及的基團可以在一個或多個位置被任意一個或任意組合的下文所列的基團所取代。本文所用的"鹵代"或"卣素"可以是氟、氯、溴或碘。本文所用的"羥基"是OH。本文所用的"d-Cs-烷基"表示具有1-8個碳原子的直鏈或支鏈烷基。優(yōu)選的d-Q-烷基為d-Q-烷基。本文中所用"d-C8-烷氧基"表示具有1-8個碳原子的直鏈或支鏈的烷氧基，例如O-C,-Cs-烷基。優(yōu)選的d-CV烷氧基為d-CV烷氧基。本文所用的"C廣C8-烷基氨基"和"二-d-C8-烷基氨基"表示分別被一個或兩個如上所定義的CVCs-烷基取代的氨基，所述烷基可以相同或不同。本文所用的"CrC8-烷基羰基"和"d-CV烷氧基羰基"表示通過碳原子與羰基連接的分別如上所定義的d-Cs-烷基或d-CV烷氧基。本文所用的"C6-do-芳基"表示含有6至10個碳原子的一價碳環(huán)芳族基團，其可以是例如單環(huán)基團，例如苯基；或者二環(huán)基團，例如萘基。本文所用的"C7-C"-芳烷基"表示被如上所定義的C6-C,。-芳基取代的如上所定義的烷基，例如d-C4-烷基。優(yōu)選的C7-C"-芳烷基是C7-do-芳烷基，例如苯基-d-C4-烷基。本文所用的"C廣Q-烷基氨基羰基"和"C3-C8-環(huán)烷基氨基羰基"表示通過碳原子與羰基連接的分別如上所定義的d-Q-烷基氨基和CVQ-環(huán)烷基氨基。優(yōu)選的d-CV烷基氨基羰基和QrC8-環(huán)烷基氨基羰基分別是CrC4-烷基氨基羰基和QrC8-環(huán)烷基氨基羰基。本文所用"C3-ds-碳環(huán)基團"表示具有3-15個環(huán)碳原子的碳環(huán)基團，例如單環(huán)基團，其為芳族的或非芳族的，例如環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基或苯基；或雙環(huán)基團，例如二環(huán)辛基、二環(huán)壬基、二環(huán)癸基、茚滿基或茚基，它們都可以被一個或多個、通常為1個或2個d-CV烷基再次取代。本文所用的"包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的3-12元雜環(huán)"可以是例3口p夫喃、p比p各、p比p各烷、p比哇、p米哇、三峻、異三峻、四唾、噢二唑、異蓉唑、，噪二唑、吡"定、哌咬、吡噪、巧惡唑、異惡唑、吡嚷、峻漆、嘧啶、派、秦、吡咯烷、嗎啉代、三溱、t懲噪或噻唑。優(yōu)選的雜環(huán)包括哌溱、吡咯烷、嗎淋代、咪唑、異三唑、吡唑、四唑、蓉峻、三唑、蓉二峻、p比啶、哌啶、吡喚、呋喃、噁唑、異噁唑、噁二唑和氮雜環(huán)丁烷。所述3-12元雜環(huán)可以是未取代的或取代的。在本說明書和所附的權(quán)利要求書中，除非需要另外說明，術(shù)語"含有"或其變化形式如"包含"或"包括"可理解為包括所述的整體或步驟或者所述整體或步驟的組，但不排除任何其它整體或步驟或者任何其它整體或步驟的組。正如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的那樣，只有在化學(xué)上可能的取代基的組合是本發(fā)明的實施方案。特別優(yōu)選的具體式(I)化合物是在下文實施例中描述的化合物。立體異構(gòu)體是那些有不對稱碳原子的化合物。這些化合物以單一的光學(xué)活性異構(gòu)體形式或其混合物的形式存在，例如以非對映異構(gòu)體混合物的形式存在。本發(fā)明包括單一光學(xué)活性的i和51異構(gòu)體以及其混合物。單一異構(gòu)體可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法，例如手性高效液相色語CHPLC)進行分離?；プ儺悩?gòu)體是以平衡狀態(tài)存在的兩種或多種結(jié)構(gòu)異構(gòu)體的其中之一，其容易從一種異構(gòu)體形式轉(zhuǎn)化為另一種異構(gòu)體形式。本發(fā)明的化合物可以以非溶劑化的和溶劑化的形式存在。本文所用的術(shù)語"溶劑化物"是描述一種分子復(fù)合物，其包含本發(fā)明的化合物和一種或多種可藥用的溶劑分子，例如乙醇。當(dāng)所述溶劑為水時使用術(shù)語"水合物，，。合成本發(fā)明另一方面還提供了制備游離形式或鹽形式的式(I)化合物的方法，該方法包括以下步驟(i)(A)為了制備式(I)的化合物，將式(Ia)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>其中W和RS如上文所定義，與乙酰氯在堿存在下進行反應(yīng)；(B)為了制備其中RS是C2-CV炔基的式(I)化合物，將式(Ib)的化合物(lb)其中X是離去基團，與式H'可以是d-CV烷基；R的化合物進行反應(yīng)，其中R(C)為了制備式(I)的化合物，將式(Ic)的化合物NR、(lc)其中R'和RS如上文所定義；且X是離去基團，與式H2N-I^的化合物在堿存在下反應(yīng)，其中W如上文所定義；和(ii)將所得的游離形式或可藥用鹽形式的式(I)化合物回收。式(I)化合物可以例如采用下面所述以及實施例中所述的反應(yīng)和技術(shù)制進行。有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，在分子上存在的官能性應(yīng)與待進行的轉(zhuǎn)化一致。有時候需要對此加以判斷，調(diào)整合成步驟的順序或選擇某個特定的反應(yīng)流程，以獲得所需要的本發(fā)明化合物。在下述反應(yīng)流程中所示的合成中間體和終產(chǎn)物上各種取代基可以以其具有合適保護基的完全修飾的形式存在(如果本領(lǐng)域技術(shù)人員認為需要的話)，或者以其前體形式存在，該前體稍后可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法將其處理成最終形式。這些取代基也可以在合成順序的各種階段添加或在合成順序完成后添加。在許多情況下，常規(guī)應(yīng)用的官能團操作方法可以用于將一種中間體轉(zhuǎn)化為另一種中間體，或者將一種式(I)化合物轉(zhuǎn)化為另一種式(I)化合物。此類操作方法的實例有酯或酮轉(zhuǎn)化為醇；酯轉(zhuǎn)化為酮；S旨、酸和酰胺的相互轉(zhuǎn)換；醇和胺的烷基化、酰化和磺?；灰约捌渌喾N方法。取代基也可以采用常規(guī)反應(yīng)如烷基化、?；⒇栈蜓趸瘉硖砑?。此類操作方法在本領(lǐng)域中是眾所周知的，許多參考書總結(jié)了此類操作的流程和方法。某些參考書中給出了用于許多官能團操作的有機合成的Marc/^Oz^朋/cC7^附&^);,第五版，Wiley和Chichester編輯(2001);Om^e/ims/veOrg"w/c7Vfl/i^/i^附a,/0W51，Larock編輯，VCH(1989);C^附/7fr/re"57Ve(7rg朋/cF"w"/o鼎/G>om/7rmws/6^附a,/開51，Katritzky等人(系歹'J編輯)，Pergamon(1995);和O附尸re/1ew57Ve(,gflw/c5ys幼e5^，Trost和Fleming(系列編輯)，Pergamon(1991)。還應(yīng)該認識到在該領(lǐng)域任何合成途徑的設(shè)計中，另一個重要的考慮因素是明智地選擇用于保護本發(fā)明所述化合物中存在的反應(yīng)性官能團的保護基。在同一分子中可以選擇多種保護基，從而使得這些保護基團的每一種均可以被除去而不會除去同一分子中的其它保護基，或者根據(jù)需要的結(jié)果，可以使用相同的反應(yīng)步驟除去多個保護基。向本領(lǐng)域技術(shù)人員描述了多種備選方案的權(quán)威參考書為尸/y,e"ZveO諸戸/"6^g朋/ciS戸幼e57s，Greene和Wuts編輯，WileyandSons(1999)。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，只有在化學(xué)上可能的取代基的組合是本發(fā)明的實施方案。藥理學(xué)活性和用途式(I)化合物及其可藥用鹽作為藥物是有用的。具體而言，它們激活腺苷A3受體，即，它們充當(dāng)A2A受體激動劑。在WO05/063246、WO02/055085、WO95/02604和WO06/011130中描述了它們作為A3激動劑的性質(zhì)。下文實施例的化合物在下面的試驗中具有低于5.0pM的Ki值和EC50值。例如，實施例1的化合物在Ki結(jié)合試驗中具有0.91nM的Ki值，在A3[35S-GTPYS功能試驗中具有11.0nM的ECs。值。A3結(jié)合試驗的方案縮寫詞列表A3腺苷A3受體BSA牛血清白蛋白CHO中國倉鼠卵巢DMSO二甲亞石風(fēng)EDTA乙二胺四乙酸FCS胎牛血清HEPES4-(2-羥基乙基)旅唪-l-乙磺酸I-AB-MECA6-(4-氨基-3-碘千基)-5'-斗曱基氨甲?；?腺苷Kd解離常數(shù)MgCl2氯化鎂NaCl氯化鈉Tris-HCl三(羥曱基)-氨基曱烷鹽酸鹽腺苷是廣泛的生物學(xué)功能的內(nèi)源性調(diào)節(jié)物，其與至少四種細胞表面受體亞型相互作用，所述受體亞型分為A,、A2A、A2B和A3，它們都與G蛋白偶聯(lián)。參見Linden,Zev尸to臓"/7V;aV^/，巻41，775-787頁(2001)。直到最近，大多數(shù)腺苷的抗炎作用才被認為通過A2A受體產(chǎn)生。但是,A3亞型可以在不同的病理學(xué)如炎癥和神經(jīng)變性[參見Kohno等人，所oc/^附O附附""，巻219，904-910頁(1996)j和哮喘[參見Jacobson等人，A^wo/^ffr附"co/o^v,巻36,1157-1165頁(1997)中起基礎(chǔ)作用。腺苷衍生物4-氨基千基-5'-A^曱基-曱酰氨基腺苷(AB-MECA)是有效的A3受體選擇性激動劑，其用作參照化合物。參見Varani等人，Z#e&Z，巻63，第5期，81-87頁(1998)。本發(fā)明化合物在使用碘化配體^I-AB-MECA與從穩(wěn)定表達人A3受體的CHO細胞中制備的膜的A3結(jié)合試驗中進行測試。方法材料CHO腺普A3膜[125I-AB-MECA:安瑪西亞-法瑪西亞生物技術(shù)公司(AmershamPharmaciaBiotech)(目錄號TRK).CGS21680:Tocris公司(1063)UnifilterGF/B96-孔板珀金埃爾默公司(PerkinElmer)(目錄號6005174)96-孔U型底聚丙烯板格瑞納公司(Greiner)(目錄號650201)TopSeal:CanberraPackard公司(目錄號6005185)BSA:西格瑪公司(Sigma)目錄號A-6003腺苷脫氨酶(1000U/mL):羅氏診斷試劑有限公司(RocheDiagnosticsLimited)(目錄號102121)Microscint-20(1L):珀金埃爾默公司(目錄號6013611)所有其它化學(xué)品均來自西格瑪公司A^膜的制備緩沖液緩沖液A:10mMHEPES，0.9%NaCl，0.2%EDTA，pH7.4緩沖液B:10mMHEPES,10mMEDTA，pH7.4緩沖液C:10mMHEPES，0.1mMEDTA,pH7.4A3培養(yǎng)基500mLIscove改良的DMEM培養(yǎng)基，含有Glutamax(目錄號31980-022，Invitrogen公司)、50mLFCS(熱滅活的)(目錄號10108-157，Invitrogen公司)、5mLHEPES(1M)(目錄號15630-056，Invitrogen公司)。制備方法將A3CHO細胞在37。C和5。/。C02下培養(yǎng)在旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶中，直到達至'J950/"匚々。接著加入40mL水冷卻的緩沖液A(提升緩沖液)，并將旋轉(zhuǎn)瓶it回培養(yǎng)箱10分鐘。接著使用滅菌的刮刀將細胞從瓶壁上刮下，轉(zhuǎn)移至冰上的50mL的Falcon管中。隨后用10mL緩沖液A沖洗旋轉(zhuǎn)瓶的瓶壁。將其轉(zhuǎn)入Falcon管中，接著將該管在4'C下于500g離心5分鐘。除去上清液，將25mL水冷的緩沖液B(裂解緩沖液)加入沉淀中。使用polytron在冰上對沉淀進行勻漿(攪動4次，每次5秒，在每次攪動之間間隔20秒)。勻漿后，使用BeckmanAvantiJ-251超速離心機，將管子在4。C下于39,000g離心25分鐘。除去上清液，向管中加入20mL冰冷的緩沖液C(冷凍緩沖液)。使用polytron在冰上對沉淀再次進行勻漿，接著使用BeckmanAvantiJ-251超速離心機在4。C下于39,000g離心25分鐘。除去上清液，將沉淀重新懸浮于lmL冰冷的緩沖液中。使用牛血清白蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)品，通過BradfordProteinMicro-assay(BioRacf)來估計蛋白定量。用緩沖液C調(diào)整膜濃度，按照所需將試樣等分，急速冷凍，之后儲存于-80"C。結(jié)合試驗緩沖液試驗緩沖液50mMTris陽HCl，pH7.4，10mMMgCl2，1mMEDTA和0.1。/ow/vBSA。儲存于4。C,一旦加入BSA，可保持1周。清洗緩沖液50mMTris-HCl，pH7.4和0.9%NaCl。儲存于4。C。化合物的準(zhǔn)備在DMSO中制備lOmM的參照化合物和待測化合物溶液。將母液在包含4。/。(v/v)DMSO的試驗緩沖液中稀釋，得到的終濃度為40pM。K^測定使用放射標(biāo)記的激動劑["Sl卜AB-MECA在0.002-5nM濃度范圍內(nèi)進行CHOA3膜的放射配體結(jié)合，以獲得飽和結(jié)合。使用2.5jiig的膜在總體積200pL的試驗緩沖液中進行結(jié)合試驗，一式兩份。在10|iiM的激動劑I-AB-MECA存在下測定非特異性結(jié)合。結(jié)合試驗在U型底聚丙烯96-孔板上，在終體積200jnL/孔中進行該試驗。試驗的組分按下述加入50jLiL在含有4。/。(v/v)DMSO的試驗緩沖液中的待測化合物?？偨Y(jié)合量使用50pL溶媒進行測定。使用50^L的40|nMI-AB-MECA測定非特異性結(jié)合，得到的最終試驗濃度為10|nM。50pL[125II-AB-MECA，濃度為1nM(4x)，得到的最終試驗濃度為0.25nM。100CHOA3膜，在含有4U/mL腺苷脫氨酶(ADA)(最終試驗濃度為2U/mL)的試驗緩沖液中濃度為25jig/mL,得到的最終試驗濃度為2.5pg/孔。在Biomek2000上制備化合物稀釋液，得到一系列的40-0.002|iiM(4x)的10個濃度。使用TomtecQuadra將50pL的各濃度轉(zhuǎn)移至Dynex96-孔板中。在不存在I-AB-MECA下測定總結(jié)合量，在存在IO^iM的I-AB-MECA的條件下測定非特異性結(jié)合。CHOA3膜在使用前迅速解凍，在含有4U/mL(2x)腺苷脫氨酶的試驗緩沖液中稀釋到濃度為25ng/mL。混射性配體[^I1-AB-MECA進行稀釋，向96-孔板各孔中加入50nL，得到的放射性配體終濃度為0.25nM。將100|nL的稀釋的膜制備物加入各孔，得到的總蛋白濃度為2，5嗎/孔，向各孔中加入50nL試驗緩沖液。將96-孔板簡單混勻，在室溫下孵育120分鐘。使用自動化的Tomtec9600收集器，將樣品從試驗板采集到UnifilterGF/B板(向其中各孔加入50pL0.5。/。(w/v)的聚乙烯亞胺)。將UnifilterGF/B板在50。C下孵育3小時或在室溫下過夜，以使濾膜千燥。將襯膜用于UnifilterGF/B板，向各孔中加入Microscint-20,按照生產(chǎn)商的說明書用TopSeal-S將板子密封。使用PackardTopCount(125I-Scintillation，1分鐘/孑L)對UnifilterGF/B板進行計數(shù)。采用次數(shù)/分鐘(cpm)來測定IC5()，并根據(jù)它們使用下述的方程確定Ki。參見Cheng和Prusoff，所oc/^/w尸/^/tw""/，巻22，3099-3018頁(1973)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>其中C:放射性配體的濃度；和Kd=配體的解離常數(shù)。As35S1-GTPyS結(jié)合功能試-驗縮寫詞列表-GTPyS的摩爾濃度(nM)=放射性濃度(mCi/mL)x1000母液的比活性(Ci/mmo1)舉例在第5天，活性為0.961^Ci/jaL(按照安瑪西亞公司目錄后面的卩5SI放射性衰減表獲得，參考=1^iCi/pL)，因此對于一批比活性為1082Ci/mmo1的[35S-GTP丫S而言換算為mCi/mmo1,摩爾濃度為^82jnM。試-驗方法在白色的非結(jié)合表面的96-孔Optiplate板上，在終體積為250pL/孔中進行該試驗。按照下述加入試驗的組分將25jiL試驗緩沖液加入96-孔Optiplate板的各孔中。向每孔中再加入25|nL的10|LiMGDP。向孑LAl到Dl和E12到H12中加入25^iL的10。/oDMSO/試驗緩沖液-用于測定基礎(chǔ)效應(yīng)的對照。向孑LEl到Hl和A12到D12中加入25pL的100nMI-AB-MECA在10。/。DMSO/試驗緩沖液中的溶液-用于測定最大刺激的對照。26將化合物在帶有槍頭更換的Biomek上稀釋(在10。/。DMSO/試驗緩沖液中進行1:3稀釋)，將25jiL—式兩份轉(zhuǎn)移至Optiplates。將35S-GTPyS稀釋到1.25nM(見上文)，并將25pL加入各孔，得到的最終試驗濃度為0.125nM[35s-GTPyS/孔。將膜在試驗緩沖液中稀釋到25pg/inL。將SPA珠子的母液在試驗緩沖液中稀釋，得到的濃度為5mg/mL。在加入板子之前(在使用前不超過20分鐘內(nèi))，將珠子與膜按1:2的比例(50^L珠子100pL膜)混合。將150jaL的珠子與膜的混合物加入各孔。將板子用TopSeal密封，在室溫下孵育40-170分鐘。將板子在室溫下于850xg離心10分鐘(JouanB4i)，立即在PackardTopcount上采用程序["Sdpml按1分鐘/孔進行讀板。因此，本發(fā)明的藥物可以用于治療由腺苷A3受體激活所介導(dǎo)的病癥。例如，本發(fā)明可以用于治療如WO04/045627所述的風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。還有，本發(fā)明是基于下述的令人驚奇的發(fā)現(xiàn)，即，施用A3腺苷受體激動劑(A3RAg)減輕了如WO05/063246所述的多發(fā)性硬化癥的癥狀。根據(jù)一項實施方案，本發(fā)明涉及治療人類個體的多發(fā)性硬化癥(MS)的方法，該方法包括向需要此類治療的個體施用有效量的A3RAg。在本發(fā)明中，術(shù)語"多發(fā)性硬化癥"(MS)是指CNS的炎性疾病，其中神經(jīng)絕緣的髓鞘部分丟失，導(dǎo)致多種病理癥狀。MS包括多種類型，例如復(fù)發(fā)/緩解型(RRMS)、繼發(fā)性漸進型(SPMS)、進行性復(fù)發(fā)型(PRMS)和原發(fā)性漸進型(PPMS)。在本發(fā)明中，術(shù)語"治療"或"神經(jīng)痛的保護"是指疾病的臨床癥狀的任何改善，和/或MS病人惡化速度或復(fù)發(fā)率的降低，以及病人良好生存的改善。例如，改善可以表現(xiàn)為一種或多種下述情況肌無力降低、肌痙攣減少、痙攣狀態(tài)減少、平衡改善和記憶改善。本發(fā)明還基于下述發(fā)現(xiàn)，即，腺苷受體激動劑抑制病毒在細胞內(nèi)復(fù)制，如WO02/055085所述。因此，本發(fā)明提供了用于抑制病毒的細胞內(nèi)復(fù)制的方法，其包括向細胞施用有效量的至少一種A3RAg。本發(fā)明的激動劑是腺苷A3受體的完全激動劑或部分激動劑。如本文所用，如果化合物能夠完全抑制腺苷酸環(huán)化酶(A3)，則化合物為腺苷A3受體的"完全激動劑"，如果化合物能夠部分地抑制腺苷酸環(huán)化酶(A3),則化合物為腺苷A3受體的"部分激動劑"。本發(fā)明還提供了抑制病毒在細胞內(nèi)復(fù)制的藥物組合物，其包括有效量的至少一種所述的A3RAg，還提供了該活性成分(即A3RAg)在制備這類藥物組合物中的用途。本發(fā)明特別是用于，但不限于，抑制HIV病毒在人類細胞中的復(fù)制。本發(fā)明的方法在如WO95/02604所述的體內(nèi)應(yīng)用中可以特別有效。例如，如WO95/02604所述，A3腺苷受體激動劑可以用于治療任何涉及肌醇-1,4，5-三磷酸酯(IP3)、二?；视?DAG)和自由基的釋放以及后續(xù)的花生四烯酸級聯(lián)反應(yīng)的疾病狀態(tài)或病癥。因此，本發(fā)明的方法可以用來治療高血壓、運動過度、過度緊張、急性缺氧、抑郁癥和不育癥，其中例如在癥狀發(fā)作或出現(xiàn)的約幾分鐘到約1小時內(nèi)迅速使用一種上述的化合物。該方法還用于治療慢性疾病狀態(tài)和病癥，特別是其中長期預(yù)防性或治療性地施態(tài)?？梢园凑毡景l(fā)明的方法長期治療的疾病狀態(tài)和病癥的例子包括炎性病癥如血管炎癥和關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、創(chuàng)傷愈合、中風(fēng)、心力衰竭、急性脊髓損傷、急性頭部損傷或外傷、癲癇發(fā)作、新生兒缺氧(腦癱；預(yù)防性的治療包括通過胎盤血液循環(huán)的長期給藥)、由于動靜脈畸形和閉塞性腦動脈疾病所致的慢性缺氧、與興奮性中毒相關(guān)的重度神經(jīng)性障礙、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的其它疾病、心臟病、腎病和避孕。而且，發(fā)現(xiàn)上述化合物增加基礎(chǔ)血壓或全身血壓，因此長期施用這類化合物可以用來治療惡性低血壓。例如，施用IB-MECA導(dǎo)致基礎(chǔ)或全身血壓(例如約70mmHg到約卯mmHg)的顯著升高(例如約10-30t)。還發(fā)現(xiàn)這類化合物是有效的大腦保護劑。因此，上述化合物可以用于治療和/或預(yù)防多種病癥，包括例如癲癇發(fā)作、短暫缺血性休克、中風(fēng)、源于血栓或腦出血的局部缺血、源于心搏驟停的全心缺血、外傷、新生兒麻痹、低血容量性休克、支氣管擴張，和作為促進睡眠的藥物、作為治療脫髓鞘疾病如多發(fā)性硬化癥的藥物和作為神經(jīng)保護藥用于例如大腦出血性損傷、脊髓缺血-再灌注損傷、高血糖和相關(guān)的神經(jīng)病。上述化合物，特別是例如IB-MECA，還被發(fā)現(xiàn)具有認知保護作用，因此可以用于治療其中誘發(fā)這類作用對于例如治療阿爾茨海默癥和其它癡呆和認知障礙證明有效的病癥。根據(jù)WO06/011130,向人類個體施用A;jRAg減輕了干燥綜合征(SS)的癥狀。因此，根據(jù)一項實施方案，本發(fā)明涉及治療人類個體的SS的方法，其包括向需要此類治療的個體施用有效量的A3RAg。在一個優(yōu)選的實施方案中，A3RAg^皮局部施用于例如眼睛或皮膚。在另一個優(yōu)選的實施方案中，A3RAg^t口服施用。在本發(fā)明中，術(shù)語"SS"是指造成KCS的自身免疫病，其中免疫細胞攻擊和^C壞產(chǎn)生淚液和唾液的腺體。在本發(fā)明的一個實施方案中，該術(shù)語是指被歸類為繼發(fā)性SS的病癥。在優(yōu)選的實施方案中，所述的繼發(fā)性SS源自風(fēng)濕性病癥。該病的癥狀可以包括眼、口、皮膚、鼻和陰道干燥，并且可以影響其它的身體器官，包括腎、血管、肺、肝、胰腺和腦。本發(fā)明的方法預(yù)期用作治療或預(yù)防包括SS在內(nèi)的干眼病的眼科臨床癥狀和體征。SS的眼科臨床癥狀包括但不限于異物感、灼燒和瘙癢；SS的眼科臨床體征包括但不限于通過熒光素和玫瑰紅染色的角膜和結(jié)膜糜爛，以及淚液膜石皮裂時間。本發(fā)明的藥物可以與WO01/23399、WO95/02604、WO05/063246、WO02/055085和WO06/011130中所述的其它活性劑聯(lián)合使用。本發(fā)明的藥物可以通過任何適宜的途徑施用，例如以片劑或膠嚢的形式口服施用；胃腸外施用，例如靜脈內(nèi)施用；通過吸入施用，或者按WO01/23399、WO95/02604、WO05/063246、WO02/055085和WO06/011130所述的方法施用。在另一方面，本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含游離形式或可藥用鹽形式的式(I)化合物和任選地可藥用的稀釋劑或載體。該藥物組合物可以包含如上文所述的共同治療劑，例如抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥或鎮(zhèn)咳藥。這類組合物可以使用常規(guī)的稀釋劑或賦形劑并采用制劑領(lǐng)域公知的技術(shù)進行制備。因此，口服劑型可以包括片劑和膠嚢劑。用于局部給藥的制劑可以釆用霜劑、軟膏劑、凝膠劑或經(jīng)皮遞送系統(tǒng)，例如貼劑。用于吸入的組合物可以包括氣霧劑或其他霧化的制劑或干粉制劑。其它的制劑可以是如WO01/23399、WO95/02604、WO05/063246、WO02/055085和WO06/011130所述。當(dāng)然，在實踐本發(fā)明中所用的式(I)化合物的劑量將沖艮據(jù)例如所治療的具體病癥、所需要的效果和在WO01/23399、WO95/02604、WO05/063246、WO02/055085和WO06/011130中所述的給藥方式而變化。通過以下實施例來舉例說明本發(fā)明。實施例1-5式I的化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>實施例1(l&4/)-4-(2,6-二氯-噤呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯醇將2，6-二氯噤呤(10g，52,卯mmo1)、(1&4/)-順式-4-乙酰氧基-2-環(huán)戊烯-l-醇(lOg，70,40mmo1)、三(雙亞千基丙酮)二鈀(0)(3.20g，3.50mmol)和聚合物支持的三苯基膦(3mmol/g，11.60g，35.00mmol)放置在氬氣氛下的烘干的燒瓶中。加入無水除氧的THF(80L)，并將反應(yīng)混合物輕柔攪拌5分鐘。加入三乙胺(20mL),并將反應(yīng)混合物在50。C下攪拌。在1小時后，通過LCMS顯示反應(yīng)完成。將反應(yīng)混合物冷卻，過濾并真空除去溶劑。在快速柱色譜(硅膠，二氯曱烷:甲醇25:1)純化后得到了標(biāo)題化合物。Hnmr(CDC13，400MHz);8.30(s，1H),6.40(m，1H)，5.90(m，1H)，5.50(m，1H)，4.95(m，1H)，3.05(m，1H)，2'10(m，IH)，MS(ES+)m/e271(MH+).碳酸(15;4/)-4-(2，6-二氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基酯乙基酯將(LS，4R)-4-(2，6-二氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯醇(9.5g，35.05mmol)放置在氬氣氛下的烘干的燒瓶中。先后加入無水THF(200mL)和無水吡咬(5.54g，70.1mmol)。緩慢加入氯曱酸乙酯(15.21g，140.2mmol)，以使溫度不高于40。C，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌。在1小時后，通過LCMS顯示反應(yīng)完成。真空除去溶劑，將殘余物分配在二氯甲烷(200mL)和水(200mL)中。有機層用水(150mL)和鹽水(150mL)洗滌，經(jīng)MgS04干燥，過濾并真空除去溶劑。從甲醇中結(jié)晶后得到標(biāo)題化合物。&醒R(CDC13,400MHz);8.20(s，1H)，6.45(m，IH)，6.25(m，1H),5.75(m,IH)，5.70(m，IH)，4'25(q，2H)，3.20(m,1H)，2.05(m，1H)，1.35(t，3H)，MS(ES+)m/e343(MH+).二-Boc-[(lS，4/)-4-(2，6-二氯-噤呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基-胺將碳酸(1&4/)-4-(2，6-二氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基酯乙基酯(2.5g，7.29mmol)、亞氨基二曱酸二-叔丁基酯(1.74g，8.02mmol)、三(雙亞節(jié)基丙酉同)二鈀(0)(0,33g，0.36mmol)和三苯基膦(0，29g，1.09mmol)放置在氬氣氛下的烘干的燒瓶中。加入無水除氧的THF(30mL)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌。3小時后通過LCMS顯示反應(yīng)完成。真空除去溶劑，通過快速柱色語(硅膠，乙酸乙S旨:異己烷4:1)純化后得到標(biāo)題化合物。NMR(CDC13,400MHz);8.70(s，1H),6.20(m，1H)，5.85(m，1H)，5.80(m，1H)，5.40(m，1H),3.20(m，1H)，2.15(m,1H)，1.55(s，18H)，MS(ES+)m/e470(MH+).(l&2/，3S，5/)-3-(二-叔丁氧基羰基氨基)-5-(2，6-二氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊烷-l，2-二醇通過將四氯化釕三水合物(60mg，0.29mmo1)溶于含有高碘酸鈉(682mg，3.19mmol)的水(5mL)中制備深紅色/橙色的四氧化釕水溶液，將其一次性地加入(15，4/)-1-(二-叔丁氧基羰基氨基)-4-(2,6-二氯噪呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯(1.00g，2.12mmol)在乙酸乙酯乙腈l:l(30mL)中的冷卻溶液中(冰/水浴，0'C)。將所得的混濁棕色混合物在水/水上攪拌10分鐘，接著加入飽和的偏亞硫酸氫鈉水溶液(25mL)猝滅，攪拌1小時。混合物通過加入乙酸乙酯(75mL)稀釋，先后用水(2x25mL)和鹽水(20mL)洗滌，隨后用硫酸鎂干燥。過濾并減壓除去揮發(fā)性成分后，得到淺黃色固體狀的所需產(chǎn)物，其不經(jīng)進一步純化而使用。(l&2/，3S，5/)-3-(二-叔丁氧基羰基氨基)-5-[2-氯-6-(3-碘芐基氨基)-嘌呤_9-基1-環(huán)戊烷-1，2-二醇將3-》輿千基胺(500mg，2.15mmol)和三乙胺(400pL，291mg，2.9mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，將其加入(1S，2/，3S，5/)-3-(二-叔丁氧基羰基氨基)-5-(2，6-二氯-噤呤-9-基)-環(huán)戊烷-l，2-二醇(1.07g，2.12mmol)在二氯甲烷(20mL)的溶液中。在環(huán)境溫度下攪拌反應(yīng)4天，隨后減壓除去揮發(fā)性成分。4吏用ArgonautFlashmasterPersonal系統(tǒng)，從凈且的殘余物通過快速沖主色i普純化得到所需產(chǎn)物。將殘余物溶在最小量的二氯甲烷中，上樣于用異己烷預(yù)飽和的70gVarianMegabondElutFlashSi柱。產(chǎn)物經(jīng)異己烷(250mL)和1:1的乙酸乙S旨:異己烷(1L)先后洗脫純化；將純流分合并，減壓除去溶劑，得到淺褐色泡沫狀的產(chǎn)物(610mg;41%產(chǎn)率)。LC-MS:MH+701.49。(Ly，2/，36"，5/)-3-氨基-5-[2-氯-6-(3-碘-千基氨基)-噪呤-9-基-環(huán)戊烷國l，2-二醇將(1&2/，35，5/)-3-(二-叔丁氧基羰基氨基)-5-[2-氯-6-(3-碘節(jié)基氨基)-噤呤-9-基-環(huán)戊烷-l，2-二醇(590mg，0.84mmol)溶于曱醇(10mL);加入4.0M氯化氫在1，4-二噁烷(10mL)中的溶液，將該淺黃色溶液在環(huán)境溫度下攪拌l小時，之后通過TLC發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成。減壓除去揮發(fā)性成分，得到淺褐色固體(450mg，定量產(chǎn)率)。LC-MS:MH+501.15。7V-((l&27，3S，4/)-4-[2-氯-6-(3-碘節(jié)基氨基)-噤呤-9-基卜2，3-二羥基環(huán)戊基}-乙酰胺將(lS，27，3S，5/)-3-氨基-5-2-氯-6-(3-碘-節(jié)基氨基)-嘌呤-9-基]-環(huán)戊烷-1，2-二醇(45011^，0.84mmol)混懸于含有三乙胺(380]LiL，275mg，2,73mmo1)的二氯甲烷(10mL)中。加入乙酰氯(65jiL，72mg，0.91mmo1)，將所得淺黃色溶液在環(huán)境溫度下攪拌l小時。加入甲醇(5mL)來摔滅所有殘余的乙酰氯，減壓除去所有揮發(fā)性成分，得到棕色泡沫。將產(chǎn)物首先使用ArgonautFlashmasterPersonal系統(tǒng)通過快速柱色譜進行純化。將棕色泡沫溶于二氯甲烷(10mL)中，并吸附到硅膠(3g)上。將其上樣于用乙酸乙酯預(yù)飽和的20gIsoluteFlashSi柱。產(chǎn)物用5%甲醇的乙酸乙酯溶液洗脫，從含有純產(chǎn)物的流分中減壓除去溶劑，得到無色固體。從曱醇中結(jié)晶得到無色結(jié)晶固體(210mg，46%產(chǎn)率)。LC-MS:MH+543.17實施例22，6-二氯-9-((li，4S)-4-[l，2，3I三唑-2-基-環(huán)戊-2-烯基)-9#-噤呤將碳酸(1&4^)-4-(2，6-二氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基酯乙基酯(1.0g，2.91mmol)在氬氣下溶于無水脫氧的THF(20mL)中。先后加入三苯基膦(115mg，(K44mmo1,0.15當(dāng)量)、[1，2，3]三唑(200nL，238mg,3.45mmol)和Pd2(dba)3(133mg,0,146mmo1，5mol%)。將反應(yīng)混合物在50。C下攪拌2小時，并使之冷卻到室溫，隨后減壓除去揮發(fā)性成分。產(chǎn)物使用ArgonautFlashmasterPersonal通過快速柱色謙純化。將殘余物重新懸浮于二氯甲烷(5mL)中，隨后上樣于用異己烷預(yù)飽和的25gIsoluteFlashSi柱。將產(chǎn)物用異己烷(500mL)、異己烷乙酸乙酯4:l(250mL)和異己烷乙酸乙酯l:l(750mL)洗脫。從含有純化產(chǎn)物的流分中減壓除去溶劑，并將產(chǎn)物從乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到淺褐色固體(280mg，30%產(chǎn)率)。LC-MSMH+321.80(1/，2&3W，5。-3-(2，6-二氯-嘌呤-9-基)-5-[l，2，3三唑-2-基-環(huán)戊烷-l，2-二醇將2，6-二氯-9-((lW,45)-4-ll,2,3三唑-2-基-環(huán)戊-2-烯基)-9/f-嘌呤(1當(dāng)量)溶于含有7V-甲基嗎啉-AL氧化物(2當(dāng)量)的THF(O.lM)中。將4%的四氧化鋨水溶液(IOmol。/。)力口入，在室溫下攪拌反應(yīng)24小時，隨后再加入4%的OsO4水溶液(10mo1。/。)，再攪拌24小時。反應(yīng)物用乙酸乙酯稀釋，用0.2MHC1水溶液和鹽水先后洗滌，接著用硫酸鎂干燥。過濾并減壓除去溶劑后得到粗產(chǎn)物，其通過快速柱色語/結(jié)晶進行純化。(1/，25V3及，55)-3-[2-氯-6-(3-碘-千基氨基)-嘌呤-9-基l-5-[l，2，3三唑-2-基-環(huán)戊烷-1，2-二醇將3-碘芐基胺(1當(dāng)量)和三乙胺(l.l當(dāng)量)溶于二氯曱烷(對于3-碘千基胺為約0.4M)，加入到(1/，25，3/，55>3-(2,6-二氯噪呤-9-基)-5-[1，2，3三唑畫2-基-環(huán)戊烷-1，2-二醇在二氯曱烷(1當(dāng)量；O.IM)的溶液中。在室溫下攪拌反應(yīng)過夜，隨后減壓除去揮發(fā)性成分。通過快速柱色謙/結(jié)晶純化所需產(chǎn)物。實施例3(l&4R)4-(6-氯-:2-碘-噤呤-9-基)-環(huán)戊-:2-烯醇將6-氯-2-碘-噤呤(參見Taddei等人，Og丑/owo/C7^附，巻2,665-670頁(2004);1當(dāng)量)、(15VtW)-順式-4-乙酰氧基-環(huán)戊-2-烯醇(1.33當(dāng)量)和聚合物支持的三苯基膦(0.66當(dāng)量)混合，在室溫下置于真空中24小時。將新蒸餾過的除氧的THF加入(達到對于(lS,4/)-順式-4-乙酰氧基-環(huán)戊-2-烯醇為l.OM)，隨后加入Pd2(dba)3(5mo1。/。)。將混合物在室溫下攪拌15分鐘，隨后加入三乙胺(通過氫氧化鉀干燥)(3當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在50。C下攪拌1小時，使之冷卻到室溫并過濾。減壓除去揮發(fā)性成分，產(chǎn)物通過快速柱色譜/結(jié)晶純化。碳酸(l&4/0-4-(6-氯-2-碘-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基酯乙基酯將吡咬(3當(dāng)量)加入到0.2M的(151，4及)-4-(6-氯-2-碘-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯醇(l當(dāng)量)在無水THF中的溶液中。緩慢加入氯甲酸乙酯(4當(dāng)量)，并確保反應(yīng)溫度不高于40。C。一旦加入完成，就在室溫下攪拌反應(yīng)直到反應(yīng)完成。通過過濾除去所有沉淀物，減壓除去揮發(fā)性成分。將殘余物溶于二氯甲烷，用0.1M鹽酸、水(x2)和鹽水先后洗滌，隨后用硫酸鎂干燥。過濾并減壓除去溶劑，接著通過快速柱色語/結(jié)晶純化，得到所需產(chǎn)物。乙?；?[(l&4/)-4-(6-氯-2-碘-噤呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基-氨基甲酸叔丁基酯將碳酸(lS，4/)-4-(6-氯-2-碘-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基酯乙基酯(l當(dāng)量)、乙?；?氨基曱酸叔丁基酯(參見Tanaka等人，C7^w尸/^w附5"http://，巻36，第8期，3215-3129頁(1988);1.15當(dāng)量)和三苯基膦(0.15當(dāng)量)在氬氣氛下于烘干的燒瓶中混合。先后加入無水脫氧的THF(達到對于碳酸(lS，4及)-4-(6-氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基酯乙基酯為0.3M)和Pd2(dba)3(5mol%)。將反應(yīng)混合物在5(TC下攪拌1小時，使之冷卻到室溫，隨后減壓除去揮發(fā)性成分，并將產(chǎn)物通過快速柱色語/結(jié)晶純化。乙酰基-[(lS，2i，3S，4W)-4-(6-氯-2-碘-嘌呤-9-基)-2，3-二羥基-環(huán)戊基卜氨基甲酸叔丁基酯將乙?；?l(l&4W)-4-(6-氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基]-氨基甲酸叔丁基酯(l當(dāng)量)、甲磺酰胺(1當(dāng)量)和AD-mix-a(1.5g/mmol底物)在叔丁醇:水l:l中混合(達到對于乙?；?[(lS,4/)-4-(6-氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基卜氨基曱酸^又丁基酯為O.IM)。加入四氧化鋨(5mol%，其為4%的水溶液)，并將反應(yīng)混合物劇烈攪拌過夜。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)物分配在乙酸乙酯和水中；有機相用新鮮的水(x2)和鹽水先后洗滌，隨后用硫酸鎂干燥。過濾并減壓除去揮發(fā)性成分，得到所需產(chǎn)物。乙?；?[(15"，2/，351,4/)-2,3-二羥基-4-(2-碘-6-甲基氨基-嘌呤-9-基)-環(huán)戊基l-氨基曱酸叔丁基酯在-20。C下將乙?；?[(lS，2/，3S，4i)-4-(6-氯-2-碘-嘌呤-9-基)-2，3-二幾基-環(huán)戊基-氨基甲酸井又丁基酯加入大大過量的液體甲胺中，攪拌30分鐘，隨后使之加溫到室溫。所需產(chǎn)物通過快速柱色語/結(jié)晶純化。7V-(lS，2/,3S，4/)-2，3-二羥基-4-(2-碟-6-甲基氨基-嘌呤-9-基)-環(huán)戊基畫乙酰胺將乙酰基-[(lS，2/，3S，4/)-2，3-二羥基-4-(2-碘-6-曱基氨基-噤呤-9-基)-環(huán)戊基]-氨基甲酸叔丁基酯溶于二氯甲烷(約0.1M)并在冰/水上冷卻到0°C。加入足夠量的三氟乙酸，得到20%的溶液，在水上攪拌反應(yīng)直到反應(yīng)完成。減壓除去揮發(fā)物，通過快速柱色語/結(jié)晶純化產(chǎn)物。7V-[(lS,2i，35"，4i)-4-(2-己-l-炔基-6-曱基氨基-嘌呤-9-基)-2,3-二羥基-環(huán)戊基j-乙酰胺制備0.05M的iV-(l&2及，3S，4及)-2，3-二羥基-4-(2-碘-6-甲基氨基-嘌呤-9-基)-環(huán)戊基卜乙酰胺(1當(dāng)量)在7:2的無水DMF和三乙胺混合物中的溶液。向其中加入碘化亞銅(I)(l當(dāng)量)和二(三苯基膦)氯化鈀(2mo1。/。)，隨后加入1-己炔(6當(dāng)量)。將所得混合物在室溫下攪拌直到反應(yīng)完成，減壓除去揮發(fā)性成分。產(chǎn)物通過快速柱色譜/結(jié)晶純化。實施例4(l&4/)-4-(6-氯-噤呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯醇將6-氯嘌呤(1當(dāng)量)、(LSV^)-順式4-乙酰氧基-環(huán)戊-:2-烯醇(1.33當(dāng)量)和聚合物支持的三苯基膦(0.66當(dāng)量)合并，在室溫下放置于真空中24小時。加入新蒸餾的除氧的11^(達到對于(1&4/)-順式-4-乙酰氧基-環(huán)戊-2-烯醇為1.0M),隨后加入Pd2(dba)3(5mo1。/。)。將混合物在室溫下攪拌15分鐘，隨后加入三乙胺(用氫氧化鉀干燥)(3當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在50。C下攪拌1小時，使之冷卻到室溫并過濾。減壓除去揮發(fā)性成分，產(chǎn)物通過快速柱色譜/結(jié)晶純化。碳酸(lS，47)-4-(6-氯-噤呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基酯乙基酯將吡，定(3當(dāng)量)加入0.2M的(15"，4/)-4-(6-氯-噤呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯醇(1當(dāng)量)在無水THF的溶液中。緩慢加入氯甲酸乙酯(4當(dāng)量)，并確保反應(yīng)溫度不高于40。C。一旦加入完成，在室溫下攪拌反應(yīng)直到反應(yīng)完成。過濾除去所有沉淀物，減壓除去揮發(fā)性成分。將殘余物溶于二氯甲烷，用0.1M鹽酸、水(x2)和鹽水先后洗滌，隨后用硫酸鎂干燥。過濾并減壓除去溶劑，接著通過快速柱色語/結(jié)晶純化，得到所需產(chǎn)物。乙?；?(lS，4/)-4-(6-氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基]-氨基甲酸叔丁基酯將碳酸(lS，4/0-4-(6-氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基酯乙基酯(1當(dāng)量)、乙?；?氨基甲酸叔丁基西旨(參見Tanaka等人(1988),上文；1.15當(dāng)量)和三苯基膦(0.15當(dāng)量)在氬氣氛下于烘干的燒瓶中混合。加入無水脫氧的THF(達到對于碳酸(lS，4W)-4-(6-氯-噪呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基酯乙基酯為0.3M)，隨后加APd2(dba)3(5mol%)。將反應(yīng)混合物在50。C下攪拌1小時，并使之冷卻到室溫，隨后減壓除去揮發(fā)性成分，通過快速柱色i普/結(jié)晶純化產(chǎn)物。乙?；?[(lS，2i,3S,4/)-4-(6-氯-噤呤-9-基)-2，3-二羥基-環(huán)戊基]-氨基甲酸叔丁基酯將乙?；?[(LS，4及)-4-(6-氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基]-氨基甲酸叔丁基酯(l當(dāng)量)、甲磺酰胺(1當(dāng)量)和AD-mix-a(1.5g/mmol底物)在叔丁醇:水l:l中混合(達到對于乙?；?[(l&4/)-4-(6-氯-嘌呤-9-基)-環(huán)戊-2-烯基-氨基甲酸4又丁基酯為O.IM)。加入四氧化鋨(5mo1。/。，其為4%的水溶液)，將反應(yīng)混合物劇烈攪拌過夜。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)物分配在乙酸乙酯和水中；有機相用新鮮的水(x2)和鹽水先后洗滌，隨后用硫酸鎂干燥。過濾并減壓除去揮發(fā)性成分，得到所需產(chǎn)物。乙?；?((lS，2/，3S，4/)-2，3-二羥基-4-[6-(3-碘-節(jié)基氨基)-噤呤-9-基-環(huán)戊基}-氨基甲酸叔丁基酯將3-碘千基胺(1當(dāng)量)和三乙胺(l.l當(dāng)量)溶于二氯甲烷(對于3-碘千基胺為約0.4M)，并將其加入到乙?；?1(1&2/，3&4/)-4-(6-氯-噪呤-9-基)-2，3-二羥基環(huán)戊基]-氨基甲酸叔丁基酯在二氯甲烷(l當(dāng)量；O.IM)的溶液中。在加熱下攪拌反應(yīng)過夜，隨后減壓除去揮發(fā)性成分。通過快速柱色語/結(jié)晶純化所需產(chǎn)物。A4(lS，2/，3S，4/)-2，3-二羥基-4-l6-(3-碘-千基氨基)-嘌呤-9-基卜環(huán)戊基}-乙酰胺將乙酰基-{(1&2/，3&4/)-2，3-二羥基-4-[6-(3-碘-節(jié)基氨基)-喋呤-9-基卜環(huán)戊基}-氨基甲酸#又丁基酯溶于二氯甲烷(約O.IM)，并在水/水上冷卻到0。C。加入足夠量的三氟乙酸，得到20%的溶液，在冰上攪拌反應(yīng)直到反應(yīng)完成。減壓除去揮發(fā)物，將產(chǎn)物通過快速柱色鐠/結(jié)晶純化。實施例5乙?；?((1^2凡35(，4/)-4-{6-[5-氯-2-(3-甲基-異噁唑-5-基甲氧基)-千基氨基卜嘌呤-9-基}-2，3-二羥基-環(huán)戊基)-氨基甲酸叔丁基酯將5-氯-2-(3-甲基異噁唑-5-基甲氧基)千基胺(參見DeNinno等人，/Me"C&附，巻46，353-355頁(2003)增補材料；1當(dāng)量)和三乙胺(l.l當(dāng)量)溶于二氯曱烷(對于3-碘千基胺為約0.4M)，并將其加入到乙酰基-[(1&2/，3&4及)-4-(6-氯-嘌呤-9-基)-2，3-二羥基環(huán)戊基]-氨基甲酸叔丁基酯在二氯甲烷(l當(dāng)量；0.1M)的溶液中。在加熱下攪拌反應(yīng)過夜，隨后減壓除去揮發(fā)性成分。通過快速柱色譜/結(jié)晶純化所需產(chǎn)物。7\4(1&2/，35<，4/)-4-{6-[5-氯-2-(3-曱基-異？惡唑-5-基甲氧基)-千基氨基1_噤呤_9-基}-2，3-二幾基-環(huán)戊基)-乙酰胺將乙酰基-((15"，2/，3S，4及)-4-(6-[5-氯-2-(3-甲基-異喁唑-5-基甲氧基)-千基氨基-嘌呤-9-基}-2，3-二羥基-環(huán)戊基)-氨基甲酸叔丁基酯溶于二氯甲烷(約0.1M)中，并在冰/水上冷卻到0°C。加入足夠量的三氟乙酸，得到20%的溶液，在冰上攪拌反應(yīng)直到反應(yīng)完成。減壓除去揮發(fā)物，通過快速柱色譜/結(jié)晶純化產(chǎn)物。權(quán)利要求1.游離形式或鹽形式的式(I)化合物其中R1表示含有1-4個環(huán)氮原子并任選地含有1-4個選自氧和硫的其它雜原子的N-連接的3-至12-元雜環(huán)基團，該基團任選地被下述取代基所取代氧代、C1-C8-烷氧基、C6-C10-芳基、R1a或任選地被羥基取代的C1-C8-烷基；或者R1是-NH-C1-C8-烷基羰基、-NH-C3-C8-環(huán)烷基羰基、-NH-SO2-C1-C8-烷基、-NH-C7-C14-芳烷基羰基、-NH-C(＝O)-3到12元雜環(huán)基團、-NH-C(＝O)-C6-C10-芳基或任選地被R1a取代的-NH-C(＝O)-C(＝O)-NH-C1-C8-烷基，其中R1a是包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的3到12元雜環(huán)基團，所述3到12元雜環(huán)任選地被下述取代基所取代鹵素、氰基、氧代、OH、羧基、氨基、硝基、C1-C8-烷基、C1-C8-烷基磺?；?、氨基羰基、C1-C8-烷基羰基或任選地被氨基羰基取代的C1-C8-烷氧基；R2選自C1-C8-烷基、R-和S-1-苯基乙基、未取代的芐基基團和在一個或多個位置上被選自下述的基團所取代的苯乙基或芐基基團C1-C8-烷基、氨基、鹵素、C1-C8-鹵代烷基、硝基、OH、乙酰氨基、C1-C8-烷氧基和磺基，或R2是其中R2a是鹵素、三氟甲基、氰基、C1-C8-烷基、C1-C8-烷氧基、乙烯基或乙炔基；D是氧、硫、NH、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷硫基或-CO-烷基氨基；且G是部分飽和、全飽和或全不飽和的5-8元環(huán)，其任選地具有1-3個獨立地選自氧、硫和氮的雜原子，或者是由兩個稠合的部分飽和、全飽和或全不飽和的3-6元環(huán)組成的二環(huán)，其獨立地任選地具有1-4個獨立地選自氮、硫和氧的雜原子；其中所述的G任選地被鹵素、C1-C8-烷基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、氰基、C3-C10-環(huán)烷基、羥基或C1-C8-烷氧基獨立地單-、二-或三-取代，或者G是氰基、C1-C8-烷氧基羰基、C3-C10-環(huán)烷氧基羰基、C(O)NR4R5、C(S)NR4R5、C(NH)NR4NR5、C(N(C1-C3)烷基)NR4R5或C(N(C3-C10)環(huán)烷基)NR4R5；R3選自H、鹵素、任選地被鹵素或OH取代的C1-C8-烷基、C1-C8-烷氧基、氨基、C1-C8-烷基氨基、C2-C10-鏈烯類、任選地被C1-C8-烷基取代的C2-C10-炔類、任選地被C1-C8-烷基或OH取代的芳基、巰基和C1-C8-烷硫基；R4是鍵、H、C1-C10-烷基、羥基、C1-C10-烷氧基、C3-C10-環(huán)烷氧基，或任選地通過C1-C8-烷基連接的部分飽和、全飽和或全不飽和的5-8元環(huán)，其任選地具有1-3個獨立地選自氧、硫和氮的雜原子，或者是任選地通過C1-C8-烷基連接的二環(huán)或具有任選地C1-C8-橋的二環(huán)，所述二環(huán)或橋連的二環(huán)任選地具有1-4個獨立地選自氮、硫和氧的雜原子，其中所述的C1-C10-烷基、C1-C10-烷氧基、C3-C10-環(huán)烷氧基或R4環(huán)任選地獨立地被下述基團單-、二-或三-取代鹵素、C1-C8-烷基、三氟甲基、硝基、氰基、C3-C10-環(huán)烷基、OH或C1-C8-烷氧基；R5是鍵、H、C1-C8-烷基或C1-C10-環(huán)烷基，或R4和R5與它們所連接的氮一起形成全飽和或部分不飽和的4-9元環(huán)，所述的環(huán)任選地橋連，任選地具有1-3個獨立地選自氧、硫和氮的雜原子，所述的環(huán)任選地獨立地被下述基團單-或二-取代氧代、羥基、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷基、氨基、單-N-或二-N，N-C1-C8-烷基氨基羰基、單-N-或二-N，N-C3-C10-環(huán)烷基氨基羰基、N-C1-C8-烷基-N-C3-C10-環(huán)烷基氨基羰基、單-N-或二-N，N-C1-C8-烷基氨基、單-N-或二-N，N-C3-C10-環(huán)烷基氨基、N-C1-C8-烷基-N-C3-C10-環(huán)烷基氨基、甲酰氨基、C1-C8-烷基羰基氨基、C3-C10-環(huán)烷基羰基氨基、C1-C8-烷氧基羰基氨基、N-C1-C8-烷氧基羰基-N-C1-C8-烷基氨基、C1-C8-氨磺酰基、C1-C8-烷基磺?；被?、C3-C10-環(huán)烷基磺酰基氨基，或部分飽和、全飽和或全不飽和的5-8元環(huán)，其任選地通過C1-C8-烷基連接，任選地具有1-3個獨立地選自氧、硫和氮的雜原子，或者是由兩個稠合的部分飽和、全飽和或全不飽和的3-6元環(huán)組成的二環(huán)，其獨立地任選地通過C1-C8-烷基連接，任選地具有1-4個獨立地選自氮、硫和氧的雜原子，并且任選地被下述基團單-或二-取代鹵素、三氟甲基、三氟甲氧基、C1-C8-烷基或C1-C8-烷氧基。2.如權(quán)利要求l所述的化合物，其中W表示N-連接的3到12元雜環(huán)基團，其包含1-4個環(huán)氮原子并且任選地包含l-4個選自氧和硫的其它雜原子，或者R1是-NH-d-Cs-烷基羰基；!^是d-C8-烷基或任選地被卣素取代的千基，或者其中R"是鹵素、三氟甲基、氰基、C廣Cs-烷基、C廣Cs-烷氧基、乙烯基或乙炔基；D是氧、硫、NH、CVQ-烷氧基、Q-CV烷硫基或-CO-烷基氨基；且G是部分飽和的、全飽和的或全不飽和的5至8元環(huán)，其任選地具有l(wèi)-3個獨立地選自氧、硫和氮的雜原子，或者是由兩個稠合的部分飽和、全飽和或全不飽和的3-6元環(huán)組成的二環(huán)，其任選地具有1-4個獨立地選自氮、硫和氧的雜原子；其中所述的G任選地被卣素、CKV烷基獨立地單-、二-或三-取代；且RJ選自H、卣素、任選地被卣素或OH取代的d-CV烷基、CrCs-烷氧基、氨基、d-Cs-烷基氨基、C2-d。-鏈烯類、任選地被d-Cs-烷基取代的C2-do-炔類、任選地被d-CV烷基或OH取代的C6-do-芳基、巰基和Ci-Cs-坑石充基。3.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中W為包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的5-12元雜環(huán)基團，或者R1為-NH-d-Qr烷基羰基；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R2a是卣素；D是d-Cs-烷氧基；且G是被曱基取代的五元雜環(huán)基團，或者W為被閨素取代的千基，或者R2為d-Cs-烷基;且W為H、卣素或任選地被d-Cs-烷基取代的C2-d(r炔類。4.如權(quán)利要求1所述的式I化合物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R1、R2和R3為<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>5.用作藥物的如權(quán)利要求1-4中任意一項所述的化合物。6.包含如權(quán)利要求l-4中任意一項所述的化合物的藥物組合物。7.如權(quán)利要求1-4中任意一項所述的化合物在制備治療由腺苷A3受體激活所介導(dǎo)的病癥的藥物中的用途。8.如權(quán)利要求7所述的化合物的用途，其中所述的由腺苷A3受體激活所介導(dǎo)的病癥是風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。9.制備式(l)化合物的方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(I)其中R1、112和113如上文所定義，該方法包括下述步驟:(i)(A)為了制備式(I)的化合物，將式(Ia)的化合物(la)其中112和113如上文所定義，與乙酰氯在堿存在下進行反應(yīng)；(B)為了制備其中RS是C2-CV炔基的式(I)化合物，將式(Ib)的化合物(lb)其中X是離去基團，與式H可以是CVCV烷基；_R的化合物進行反應(yīng)，其中R(C)為了制備式(I)的化合物，將式(Ic)的化合物(lc)HOOH其中R'和RS如上文所定義；且X是離去基團，與其中112如上文所定義的式112^112的化合物在堿存在下反應(yīng)；和(ii)將所得的游離形式或可藥用鹽形式的式(I)化合物回收。全文摘要式(I)的化合物及其制備以及它們作為藥物的用途，其中R¹、R²和R³如本文所定義。文檔編號C07D403/08GK101426785SQ200780014290公開日2009年5月6日申請日期2007年4月19日優(yōu)先權(quán)日2006年4月21日發(fā)明者R·A·費爾赫斯特,R·J·泰勒申請人:諾瓦提斯公司