專利名稱：一種斑蝥素分離純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化工領(lǐng)域，特別涉及分離純化方法。
背景技術(shù)：
斑蝥素是由芫菁科(Meloidae)昆蟲產(chǎn)生的單萜類防御物質(zhì)。人類利 用斑蝥素的歷史可以追溯到公元前1、 2世紀(jì)的中國，在古醫(yī)書《神農(nóng)本 草經(jīng)》中就已有藥用"斑蝥"(芫菁科昆蟲)的記載。此后在歷代著名醫(yī) 書中都有關(guān)于芫菁蟲的記錄?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為斑蝥素有抗腫瘤的藥理作用， 對(duì)肝癌、喉癌、賁門癌、食道癌、消化道腫瘤等癌癥有顯著療效，特別 是對(duì)原發(fā)性肝癌有特效。除抗癌外，尚有治療病毒性慢性乙型肝炎、白 血病、狂犬病、皮膚病毒、真菌的功能，同時(shí)還具有壯陽、升高白細(xì)胞 等療效。歐洲國家過去常用斑蝥素^i墮胎劑、起泡劑等；如今常應(yīng)用斑 蝥素來去除皮膚上的瘡、疣、瘤等皮膚頑疾。
中國專利公開號(hào)CN1374310公開了一種"斑蝥S吏鈉的制備工藝"， 中國專利公開號(hào)CN1966508公開了 "一種提取斑蝥素的方法"，都是 采用重結(jié)晶法提取分離斑蝥素，工藝流程為采用酸水解處理斑蝥蟲體， 用有機(jī)溶劑提取，采用不同比例混合的有機(jī)溶劑洗滌，后采用重結(jié)晶法 得到純品的過程。以上工藝的主要缺點(diǎn)如下(l)在操作的過程中，洗 滌的步驟消耗大量的乙醇、石油醚等有機(jī)溶劑；同時(shí)這些浪費(fèi)的乙醇、 石油醚等有機(jī)溶劑對(duì)操作人員的危害較高，并且污染環(huán)境嚴(yán)重。(2)操 作粗放，洗滌過程中浪費(fèi)較多的斑蝥素，對(duì)自然資源是嚴(yán)重的浪費(fèi)；產(chǎn) 率較低，導(dǎo)致成本增加。(3)重結(jié)晶后仍有較多的斑蝥素與雜質(zhì)無法分 離。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)而增加一種產(chǎn)率高，純度高，有機(jī) 溶劑用量少，安全環(huán)保，工藝簡化的斑蝥素分離純化方法。
本發(fā)明的一種斑蝥素分離純化方法，包括以下步驟 (1)選取底部有出水孔的容器，加入斑蝥素粗提物，放入40-50倍 體積的水，加熱到水沸騰，打開閥門，放出熱水，冷卻至室溫，加入15 倍體積的三氯曱烷萃取，重復(fù)操作10-20次，濃縮回收萃取液，得淡黃 色晶體；
(2 )加入80倍體積的乙酸乙酯8(TC加熱回流10分鐘，趁熱過濾， 自然冷卻結(jié)晶，抽濾，用無水乙醇與(30°C-60°C )石油醚體積比為1:2 洗滌，室溫下涼干，獲得的斑蝥素純品。
上述的斑蝥素分離純化方法，其中粗提物的制備方法為將斑蝥蟲 體置于60。C下烘干，粉碎成40目左右的粉末，放入反應(yīng)器中，加入3倍 重量的三氯曱烷，搖勻，加入2倍重量的蒸餾水，加鹽酸調(diào)制PH-l,靜 止48 h,取出分液，過濾，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至無液體流出，即得。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，由以上^t支術(shù)方案可知，工藝所需材料簡單， 只有水和熱能，減少了乙醇、石油醚等有機(jī)溶劑的使用量；同時(shí)減少了 有機(jī)溶劑對(duì)環(huán)境的污染和操作人員的危害。采用三氯曱烷萃取后得到的 斑蝥素純度較高，使下一步的重結(jié)晶更加簡單，且產(chǎn)率高于傳統(tǒng)工藝。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1:
粗提物的制備將斑蝥蟲體置于6CTC下烘干，粉碎機(jī)粉碎成40目左 右的粉末，放入反應(yīng)器中，加入3倍重量的三氯甲烷，搖勻，加入2倍 重量的蒸餾水，加鹽酸調(diào)制PH-l,靜止48 h,取出分液，過濾，用旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至無液體流出，即得斑蝥素粗提物，備用。
選取底部有出水孔的容器，加入斑蝥素粗^提物15g(經(jīng)測定斑蝥素含 量為2.86g),放入40倍體積的水，加熱到水沸騰，打開閥門，放出熱水， 冷卻至室溫，加入15倍體積的三氯甲烷萃取，重復(fù)操作10次，濃縮回 收萃取液，得淡黃色晶體。
重結(jié)晶過程加入80倍體積的乙酸乙酯80。C加熱回流10分鐘，趁 熱過濾，自然冷卻結(jié)晶，抽濾，用無水乙醇(30°C-60°C )石油醚二1:2 (體積比)洗滌，室溫下涼干，獲得的斑蝥素純品1.76 g(純度〉9890, 產(chǎn)率為61.4%。
實(shí)施例2:
選取底部有出水孔的容器，加入斑蝥素粗提物15g(經(jīng)測定斑蝥素含 量為2.86g),放入50倍體積的水，加熱到水沸騰，打開閥門，放出熱水， 冷卻至室溫，加入15 ^f咅體積的三氯曱烷萃^1,重復(fù)操作15次，濃縮回 收萃取液，得淡黃色晶體。重結(jié)晶過程與實(shí)施例l相同。
本實(shí)施例獲得的斑蝥素純品1. 93 g (純度〉98%),產(chǎn)率為67. 57%。
實(shí)施例3:
選取底部有出水孔的容器，加入斑蝥素粗提物15g(經(jīng)測定斑蝥素含 量為2.86g),放入50倍體積的水，加熱到水沸騰，打開閥門，放出熱水， 冷卻至室溫，加入15倍體積的三氯曱烷萃取，重復(fù)操作20次，濃縮回 收萃取液，得淡黃色晶體。重結(jié)晶過程與實(shí)施例l相同。
本實(shí)施例獲得的斑蝥素純品1.95 g (純度〉98%),產(chǎn)率為68.32%。
權(quán)利要求
1、一種斑蝥素分離純化方法，包括以下步驟(1)選取底部有出水孔的容器，加入斑蝥素粗提物，放入40-50倍體積的水，加熱到水沸騰，打開閥門，放出熱水，冷卻至室溫，加入15倍體積的三氯甲烷萃取，重復(fù)操作10-20次，濃縮回收萃取液，得淡黃色晶體；(2)加入80倍體積的乙酸乙酯80℃加熱回流10分鐘，趁熱過濾，自然冷卻結(jié)晶，抽濾，用無水乙醇與30℃-60℃石油醚體積比為1∶2洗滌，室溫下涼干，獲得的斑蝥素純品。
2、 如權(quán)利要求1所述的斑蝥素分離純化方法，其中粗提物的制備方法 為將斑蝥蟲體置于60。C下烘干，賴、淬成40目的粉末，放入反應(yīng)器中，加 入3倍重量的三氯曱烷，搖勻，加入2倍重量的蒸餾水，加鹽酸調(diào)制PH= 1, 靜止48 h,取出分液，過濾，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至無液體流出，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種斑蝥素分離純化方法，包括以下步驟(1)選取底部有出水孔的容器，加入斑蝥素粗提物，放入40-50倍體積的水，加熱到水沸騰，打開閥門，放出熱水，冷卻至室溫，加入15倍體積的三氯甲烷萃取，重復(fù)操作10-20次，濃縮回收萃取液，得淡黃色晶體；(2)加入80倍體積的乙酸乙酯80℃加熱回流10分鐘，趁熱過濾，自然冷卻結(jié)晶，抽濾，用無水乙醇與(30℃-60℃)石油醚體積比為1∶2洗滌，室溫下涼干，獲得的斑蝥素純品。具有產(chǎn)率高，純度高，有機(jī)溶劑用量少，安全環(huán)保，工藝簡化的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07D493/18GK101108854SQ200710077858
公開日2008年1月23日 申請(qǐng)日期2007年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月27日
發(fā)明者侯曉暉, 李曉飛, 陳祥盛 申請(qǐng)人:貴州大學(xué)