專利名稱：核苷的選擇性o-?；闹谱鞣椒?br> 核苷的選擇性o-酰基化
本發(fā)明涉及在多相的含水溶劑混合物中于堿性條件下利用DMAP和 羧酸酐進(jìn)行核苷羥基的選擇性O(shè)-?；囊徊椒椒ā?br> 核苷化合物包括糖部^(天然存在的核苷中通常是核糖或2-脫氧核糖) 以及雜環(huán)堿基，通常為腺嘌呤、鳥嘌呤、胞嘧咬、胸腺嘧咬或尿嗜咬。許 多核苷在雜環(huán)堿基上有堿性的氨基取代，表現(xiàn)出氨基醇類的化學(xué)反應(yīng)性。 氨基醇類的氮原子通常是最具有反應(yīng)性并容易被?；墓倌軋F(tuán)。
核苷化合物及其衍生物被認(rèn)為在病毒和肺瘤疾病的化療中起重要作用 (參見，例如P. L. Sarma等人，CWr. r印.M^/. C&附.2004 4:895-919; W. B. Parker等人，C"ir. /"ve" Z)r"^ 2004 5(6):592-596)。盡管核苷衍生
物通常是有效的化學(xué)治療劑，但其臨床應(yīng)用往往受到欠佳的物理性質(zhì)的限 制，導(dǎo)致藥代動(dòng)力學(xué)曲線不佳。核苷的前藥有時(shí)表現(xiàn)出藥效、生物利用度 和穩(wěn)定性的增強(qiáng)，其導(dǎo)致治療有效量的活性成分向細(xì)胞內(nèi)靶點(diǎn)的遞送增強(qiáng)。 核苷的官能團(tuán)的烷基化、?；蚱渌H脂性修飾通常增強(qiáng)其穿過腸壁的凈皮 動(dòng)擴(kuò)散(跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn))。或者，可將官能團(tuán)連接載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的底物， 引起前藥的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)。J,L. Kraus等人，C"/r. C/^附.2003
10(18):1825-1846; P. Ettmayer等人，/ M^/C&附"2004 47(10):2393-2404; K. Beaumont等人，C"/r. Z)r"gAfe似6. 2003 4:461-485; H. Bundgaard，藥 物前體的設(shè)計(jì)前藥設(shè)計(jì)中用于不同官能團(tuán)的生物可逆的衍生物和化學(xué)個(gè) 體(Design of Prodrugs: Bioreversible derivatives for various functional groups and chemical entities in Design of Prodrugs), H. Bundgaard (主編) Elsevier Science Publishers,阿姆斯特丹1985; G. M. Pauletti等人，柚. Drwg De/Zv.及ev. 1997 27:235-256;以及K. Beaumont等人，C"m Z)r"g Af"fl6. 2003 4:461-485)。
核苷前藥設(shè)計(jì)的一種策略是對(duì)糖部分的羥基取代基進(jìn)行?；Ｄ蜞?定的糖殘基的選擇性三?；延袌?bào)道(H. B. Lassan等人，7V"c/^^V/e 7V"c/eWVfey 1998 17(9-11):1851-1856和C.-T. Chen等人，Oz^. i^汰2001 3(23):3729-3732.)。胸腺嘧啶和尿嘧吱核苷的羥基在相轉(zhuǎn)移條件下選擇性的 O-?；饔靡惨驯粓?bào)道(M. Sekine， 尸/w/. Ze汰1993 1(4):251-256)。 被帶有氨基取代基的雜環(huán)堿基所取代的核苷較少進(jìn)行該類選擇性轉(zhuǎn)化。制 備l-(2，3，5-三-O-乙?；?D-口-阿拉伯呋喃糖苷)胞嗜啶鹽酸鹽0m-C HC1) 利用了2步方法，包括全乙?；驮跓o水ZnBr2、 MeOH和CHCl3存在下 對(duì)N-乙?；I合的選擇性水解(M. Bobeck等人，/ C^/w. 198730(11):2154-2157)。 J. A. Martin等人在2003年11月19日提交的美國專 利號(hào)6,846,810中報(bào)道了類似的制備4-氨基-l-((2R，3R，4S，5R)-5-疊氮基-3，4-二羥基-5-羥甲基-四氫呋喃-2-基)-lH-嘧啶-2-酮的三-0-?；苌锏亩?策略。含胞嘧啶的核苷的糖取代基在酸性條件下的選擇性O(shè)-?；驯粓?bào) 道導(dǎo)致胞苷、2'-脫氧胞苷和flmC (阿糖胞苷)的O-?；?R. G. Breiner等 人，丄C&附.1990 33(9):2596-2602; A.P. Martinez等人，丄AfM. C7^抓 1966 9(2):268)。盡管不希望受到機(jī)制假說的限制，這些轉(zhuǎn)化反應(yīng)在酸性條 件下進(jìn)行，其對(duì)堿基上的氨基取代基質(zhì)子化并由此抑制N-?；饔?。已有 報(bào)道在MeCN/TEA/DMAP (催化量)存在下用乙酸酐進(jìn)行鳥苷和脫氧鳥 苷的選擇性O(shè)-?；?A. Matsuda等人，5^fi溈&^ 1986 385-386)。胞苷在類 似條件下的選擇性O(shè)-?；惨驯粓?bào)道(M. A. Zinni等人，Mo/. Oi,. J5 2004 29:129-132)。盡管這些條件導(dǎo)致了 一些選擇性O(shè)-?；漠a(chǎn)物，但O-酰化產(chǎn)物的產(chǎn)率并不令人滿意。本發(fā)明提供了在堿性條件下于多相的含水溶劑混合物中對(duì)式I的核苷 進(jìn)行選擇性O(shè)-酰化的方法，其中<formula>formula see original document page 5</formula>(I) <formula>formula see original document page 5</formula>(II)<formula>formula see original document page 6</formula>
A為Al、 A2或A3,
RJ為氫、疊氮基、d—6烷基或Q.3?；?br> Ral和Ra2獨(dú)立地為氫或羥基；
R"和Rb2為氫或-02CR2;且
議2為Cw。烷基或苯基；
所述方法包括下述步驟
(i) 將I和DMAP溶于多相的含水溶劑混合物中，加入堿的水溶液將 pH值調(diào)節(jié)為7-13;
(ii) 任選地加入足量的飽和NaCl水溶液，產(chǎn)生兩相的反應(yīng)混合物；
(iii) 加入?；瘎┖妥阋跃S持pH值為7-13的額外的堿；
(iv) 監(jiān)測反應(yīng)，當(dāng)轉(zhuǎn)化到達(dá)滿意水平時(shí)停止加入所述的?；噭┖退?述的械；
(v) 任選地用藥學(xué)上可接受的酸處理O-酰基核苷，以分離所述O-?；?核苷的酸加成鹽。
?；塑帐怯行У那八帲淠軌?qū)颊哌f送治療有效量的生物活性核 苷。此外，O-?；暮塑昭苌锍３Ｊ侵苽浜塑疹愃莆锏挠杏玫幕瘜W(xué)中 間體。天然核苷或其衍生物的選擇性?；?jīng)常由于許多核苷中的多處反應(yīng) 位點(diǎn)而存在問題。該問題在核苷衍生物在雜環(huán)堿基上具有堿性的胺取代基 時(shí)尤為突出，其通常是分子中最具有反應(yīng)活性的官能團(tuán)。取代基的化學(xué)反 應(yīng)性有時(shí)限制了化學(xué)轉(zhuǎn)換中使用的試劑 核糖的疊氮基取代獲得了 一些新 的藥用活性的化合物。不幸的是疊氮化物在酸性介質(zhì)下可能是不穩(wěn)定的， 并且疊氮取代基是熱不穩(wěn)定的，因此存在爆炸的危險(xiǎn)。另外，在糖部分上的進(jìn)一步取代可以基本上改變?nèi)狈λ鋈〈奶烊缓塑盏姆磻?yīng)性。因此需 要在低溫非酸性條件下進(jìn)行選擇性酰化的條件?；衔锏拇笠?guī)模生產(chǎn)進(jìn)一 步限制了可使用的試劑。在容易再循環(huán)或作為廢物丟棄的不易燃的溶劑中 進(jìn)4亍反應(yīng)是有利的。需要進(jìn)一步的方法，其減少可能增加生產(chǎn)成本的不連 續(xù)的化學(xué)步驟和單元操作的數(shù)目。因此希望這類方法不需要引入保護(hù)基團(tuán)。 本方法已被證明為核苷選擇性?；挠行Ш屯ㄓ猛緩?。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中提供了核苷化合物的o-?；椒ǎ▽⑿枰；暮塑栈衔锶芙庠诙嘞嗟暮軇┗旌衔镏?；若需形成兩相，任 選地加入足量的鹽水以形成兩相的混合物；以及向兩相混合物中加入 DMAP。將反應(yīng)溶液冷卻至大約5。 C，加入足夠的堿調(diào)節(jié)pH值至約7到 約13，并加入酰化劑。反應(yīng)通過方便的技術(shù)進(jìn)行監(jiān)測，加入額外的?；瘎?直到反應(yīng)達(dá)到所期望的終點(diǎn)。加入額外的所需要的堿以維持溶液pH值在 需要的范圍內(nèi)。在反應(yīng)后處理過程中，將產(chǎn)物任選地與藥學(xué)上可接受的酸 接觸，以分離O-酰化核苷的酸加成鹽。在本文的說明性實(shí)施例中，所述的 ?；瘎榈图?jí)鏈烷酸的酸酐；然而本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，已知許多備 選的?；磻?yīng)并且它們可替代地用于本反應(yīng)條件中。本方法中使用的含水溶劑包括含水的THF、含水的二 惡烷、含水的乙 腈、含水的甲基叔丁基醚和含水的乙酸乙酯。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了如上所述用于將式I的核糖或 阿拉伯糖衍生物進(jìn)行選擇性O(shè)-酰化的方法，其中R"和R"為OH。本領(lǐng) 域寺支術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，所有的實(shí)施方案同樣包括脫氧核糖和脫氧阿拉伯糖 的化合物(其中R"和/或Ra2為氫)。同樣應(yīng)當(dāng)清楚，如果Rla和/或R2a為氫 原子，則Rlb和/或R2b也分別是氫原子。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供了如上所述用于將式I的核糖或阿拉伯 糖4汙生物進(jìn)行選擇性O(shè)-?；姆椒?，其中W為氫或疊氮基且R"和Ra2 為OH。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供了如上所述用于將式I的核糖或阿拉伯 糖衍生物進(jìn)行選擇性O(shè)-?；姆椒ǎ渲蠷1為疊氮基，Ral和Ra2為OH。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供了如上所述用于將式I的核糖或阿拉伯糖衍生物進(jìn)行選擇性O(shè)-?；姆椒?，其中W為烷基或?；琑"和Ra2為 OH。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供了如上所述用于將式I的核糖或阿拉伯 糖衍生物進(jìn)行選擇性O(shè)-酰化的方法，其中W為氫或疊氮基，R"和R"為 OH， A為Al (4'-疊氮基-胞苷或4'-疊氮基-flmC)、 A2 (4'-疊氮基-鳥苷)或 A3 (4'-疊氮基-腺苷)。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的多相 的含水有機(jī)溶劑混合物為含水的醚。在本發(fā)明的另 一個(gè)實(shí)施方案中提供了 如上所述的方法，其中所述多相的含水有機(jī)溶劑混合物為含水的THF。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的pH 值范圍為約7.5-12。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法， 其中所述的pH值范圍為約8-10。本發(fā)明的另 一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的堿為 堿金屬氫氧化物的水溶液、堿金屬碳酸氫鹽的水溶液或堿金屬碳酸鹽的水 溶液。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的堿為 氫氧化鉀或氫氧化鈉的水溶液。本發(fā)明的另 一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的?；?劑為羧酰氯、羧酸酐或?；溥?。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的酰化 劑為丁酸酐、異丁酸酐、己酸酐、戊酸酐或苯曱酸酐。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的?；?劑為異丁酸酐。本發(fā)明的另 一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的核苷 為4'-疊氮基-胞苷或4'-疊氮基-^flC，含水有機(jī)溶劑為含水的THF,堿的 水溶液為NaOH的水溶液，pH范圍為約8-10，?；瘎楫惗∷狒?。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的核苷為4'-疊氮基-胞苷或4'-疊氮基-amC，含7jC有機(jī)溶劑為含水的THF,堿的 水溶液為NaOH的水溶液，pH范圍為約8-10，?；瘎楫惗∷狒?，該方 法進(jìn)一步包括使O-?；暮塑张c藥學(xué)上可接受的酸接觸生成酸加成鹽的 步驟。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中提供了如上所述的方法，其中所述的核苷 為4'-疊氮基-胞苷或4'-疊氮基-flmC，含水有機(jī)溶劑為含水的THF,堿的 水溶液為NaOH的水溶液，pH范圍為約8-10,?；瘎楫惗∷狒摲?法進(jìn)一步包括使O-?；暮塑张c鹽酸或甲磺酸接觸生成鹽酸鹽或甲磺酸 加成鹽。盡管該實(shí)施方案涉及0-?；?，-疊氮基-胞苷或4'-疊氮基-flmC 的鹽，但鹽的形成是可用于其他O-?；暮塑盏耐ㄓ梅椒ā１景l(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供了將核苷衍生物?；姆椒ǎ渲袎A基 為尿苷或任選地4皮取代的胸腺嘧啶，包括將所述的核苷化合物溶解在多相 的含水有機(jī)溶劑混合物中進(jìn)行酰化，若需形成兩相，任選地加入足夠的鹽 水以形成兩相的混合物，并向兩相混合物中加入DMAP。將反應(yīng)溶液冷卻 至大約5。C，加入足量的堿調(diào)節(jié)pH值至7-13,加入?；瘎?。反應(yīng)通過方 便的技術(shù)進(jìn)行監(jiān)測，并加入額外的酰化劑直到反應(yīng)達(dá)到所需終點(diǎn)。加入額 外的所需的堿以維持溶液pH值在需要的范圍內(nèi)。在反應(yīng)后處理過程中， 將產(chǎn)物任選地與藥學(xué)上可接受的酸反應(yīng)，以分離O-酰化的核苷的酸加成 鹽。在本文的說明性實(shí)施例中，所述的?；瘎榈图?jí)鏈烷酸的酸酐；然而 本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，已知許多備選的?；噭?例如低級(jí)鏈烷酸形 成的酰氯)或方法可用于活化鏈烷酸，并且其可替代地用于本反應(yīng)的條件 中。尿苷和胸苷衍生物的?；袝r(shí)伴有來自尿苷和胸苷的0-和/或N-?；?的副產(chǎn)物形成，在本反應(yīng)條件下未觀察到這類現(xiàn)象。本文所用的術(shù)語"一個(gè)"，指一個(gè)或多個(gè)該實(shí)體，例如一個(gè)化合物指一個(gè)或多個(gè)化合物或至少一個(gè)化合物。因此，術(shù)語"一個(gè)"、"一個(gè)或多個(gè)，，以 及"至少一個(gè)"在此處可替換的使用。術(shù)語"如上所定義"指發(fā)明概述中各組或各方法步驟的最廣泛定義，或本發(fā)明中最為通用的實(shí)施方案。"任選的"或"任選地"指隨后所述的事件或情況可以但并不需要發(fā)生， 該術(shù)語包括了出現(xiàn)和不出現(xiàn)該事件或情況的實(shí)例。本文所用的術(shù)語"?；瘎?，指酸酐、酰卣、氯羰基醇鹽(例如氯甲酸乙酯)或N-保護(hù)的a氨基酸的活化衍生物。本文所用的術(shù)語"酸酐，，，指 通式為RC(O)-O-C(O)R的化合物，其中R如權(quán)利要求1所定義。本文所 用的術(shù)語"酰囟"，指通式為RC(O)X的化合物，其中X為卣素。術(shù)語"酰 基咪唑"指通式為RC(O)X的化合物，其中X為N-咪哇基。本文所用的 術(shù)語化合物的"活化的衍生物"，指原始化合物短暫的反應(yīng)形式，其使化 合物在所需化學(xué)反應(yīng)中激活，在所述反應(yīng)中原始的化合物僅為中等反應(yīng)性 或無反應(yīng)性?；罨ㄟ^形成比原始化合物具有更高自由能的衍生物或分子 內(nèi)的化學(xué)基團(tuán)來實(shí)現(xiàn)，其使得活化形式更容易與其他試劑反應(yīng)。在本發(fā)明 中，羧基基團(tuán)的活化尤為重要，活化羧基的相應(yīng)活化劑或活化基團(tuán)將在下 文更詳細(xì)地描述。本發(fā)明特別涉及羧酸酐和羧酰氯。所述方法可用于在酰 化劑為N-羧酸酐N-氨基曱酸乙酯-N-羧酸酐(UNCA)時(shí)引入氨基酸衍生物 (W. D. Fuller等人，/.爿附.C7^附.1990 112:7414-7416，其引入本文作 為參考)。本文所用的術(shù)語"鏈烷酸"指化合物RC(O)OH，其中R為如本文所 定義的烷基。術(shù)語"低級(jí)鏈烷酸"指其中R為本文所定義的低級(jí)烷基的基 團(tuán)。本文所用的術(shù)語"烷基"表示包含l至IO個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和 的單價(jià)烴殘基。術(shù)語"低級(jí)烷基，，表示包含1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴 基。本文所用的"Cno烷基"指包括1-10個(gè)碳的烷基。其中的一個(gè)或多個(gè) 碳原子可以任選地被氧、硫、取代的或未取代的氮原子所代替。烷基基團(tuán) 的例子包括但不限于低級(jí)烷基，包括曱基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、 異丁基、，權(quán)丁基或戊基、異戊基、新戊基、己基、庚基和辛基。本文所用的術(shù)語"酰基"，表示式-C(-O)R的基團(tuán)，其中R為氫或本文 所定義的低級(jí)烷基。該術(shù)語或本文所用的"烷羰基"，表示式C(-O)R的 基團(tuán)，其中R為本文所定義的烷基。本文所用的術(shù)語"疊氮基"，指N3(N^N^N-)基團(tuán)。本文所用的術(shù)語"多相的含水溶劑混合物"，指水和有機(jī)共溶劑的混 合物，其產(chǎn)生了兩相或多相的混合物。該多相的含水溶劑混合物可以來自 水溶性較差的共溶劑，或可以調(diào)節(jié)水相成分的離子強(qiáng)度(例如通過加入鹽 水)來限制共溶劑在水相中的溶解性并由此產(chǎn)生多相的系統(tǒng)。本文所用的術(shù)語"羧酸酐"指通式為(RCO)20的化合物，其中R為本 文所定義的烷基或苯基。術(shù)語"堿金屬氫氧化物"指式MOH的化合物，其中M為鋰、鈉、鉀 或銫。"堿金屬碳酸氫鹽"指基團(tuán)MHC03，其中M為鈉或鉀，"堿金屬 碳酸鹽"指基團(tuán)M2C03,其中M為鈉或鉀。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解， 其他堿也可用來維持pH值在需要的范圍，這些堿也落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。本文所用的術(shù)語"核苷"，指糖的l位(異頭碳)連接嘌呤或嘧咬堿 基的化合物。通常核苷的糖部分是核糖和阿拉伯糖及其脫氧和雙脫氧的衍 生物。術(shù)語"4'-疊氮基-胞苷"、"4'-疊氮基-腺苷"、"4'-疊氮基-鳥苷"和 "4，-疊氮基-flmC"分別指化合物(/H,V)。HO OH HO OH HO OH HO OHC/) (") (/") (zv)術(shù)語化合物的"藥學(xué)上可接受的鹽，，指在藥學(xué)上可以接受的鹽，其具有 母體化合物所需的藥理學(xué)活性。這類鹽包括(l)酸加成鹽，與無機(jī)酸例如 鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的鹽，或與有機(jī)酸例如乙酸、丙 酸、己酸、環(huán)戊烷丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、蘋 果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯曱酸、3-(4-羥基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羥基乙 烷磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲M酸、樟腦磺酸、4-曱基 二環(huán)[2.2.2-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基 乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羥萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、粘康 酸等形成的鹽；或(2)母體化合物中酸性質(zhì)子被金屬離子例如堿金屬離子、 堿土金屬離子或鋁離子替代生成的鹽；或與有才咸例如乙醇胺、二乙醇胺、 三乙醇胺、氨基丁三醇、N-甲基葡糖胺等的配合物。本申請(qǐng)中所用的縮寫詞包括乙酰基(Ac)，乙酸(HOAc), l-N-羥基苯 并三唑(HOBt)，大氣壓(Atm)，高壓液相色鐠(HPLC)，甲基(Me)，叔丁氧 基羰基(Boc)，乙腈(MeCN)， 二叔丁基焦碳酸酯或boc酐(80(:20)， 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDCI)，芐基(Bn)， 丁基(Bu)，甲醇 (MeOH)，節(jié)氧羰基(cbz或Z)，熔點(diǎn)(mp)，羰基二咪唑(CDI)， MeSOH甲 磺?；騇s)， 1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2,2]辛烷(DABCO)，質(zhì)語(ms)，甲基叔丁基 醚(MTBE), 1，5-二氮雜雙環(huán)[4,3.01壬-5-烯(DBN)， 1，8-二氮雜雙環(huán)5.4.0十 一碳-7-烯(DBU)， N-甲基嗎啉(NMM), N-甲基吡咯烷酮(NMP), 1，2-二氯 乙烷(DCE)， N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，吡啶重鉻酸鹽(PDC), 二氯 甲烷(DCM)，丙基(Pr)，磅/平方英寸(psi)， 二異丙基乙胺(DIPEA， Hunig 堿)，吡啶(pyr)，室溫為rt或RT, N，N-二甲基乙酰胺(DMA),叔丁基二曱 基珪烷基或,-BuMe2Si (TBDMS)， 4-N,N-二甲氨基吡啶(DMAP)，三乙胺 (Et3N或TEA)， N,N-二甲基甲酰胺(DMF)， 二甲基亞砜(DMSO)，三氟乙 酸(TFA)，薄層色鐠法(TLC),乙酸乙酯(EtOAc)，四氫呋喃(THF),乙醚 (Et20)，三甲基硅烷基或Me3Si (TMS)，乙基(Et)，對(duì)曱苯磺酸一水合物 (TsOH或pTsOH)， 4-甲基-C6H4S02-或甲^t酰基(Ts)，異丙基(Z-Pr), N-^J^甲酸乙酯-N-羧酸酐(UNCA)，乙醇(EtOH)。傳統(tǒng)命名法包括前綴正(")， 異(/-)、仲(^c-)、叔(teW-)和新(MM)，當(dāng)其與烷基部分連用時(shí)具有其常規(guī)含 義(J. Rigaudy和D. P. Klesney，有機(jī)化學(xué)命名法(7V(9附e"c^"" iw Og做/c C7^附Z勿)，IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.)。下面的實(shí)施例給出了本發(fā)明范圍內(nèi)以及本發(fā)明所包括的代表性方法的例子。提供這些實(shí)施例使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠更清楚地理解和實(shí)施本發(fā)明。 它們不能被視為限制本發(fā)明的范圍，而僅作為論釋和例證所用。實(shí)施例1異丁酸(2R，3S，4S，5R)-5-(4-氨基-2-氧代-2H-嘧啶-l-基)-2-疊氮基-3，4-雙 異丁酰氧基-四氫呋喃-2-基甲基酯<formula>formula see original document page 13</formula>向4-氨基-l-((2R，3S，4S，5R)-5-疊氮基-3，4-二羥基-5-羥曱基-四氫呋喃 -2-|)-lH->^^-2^l^(l，2.0g，7.04mmol)、THF(12mL)jK(8mL)和DMAP (0.09g， 0.70mmol)的溶液中加入足量的鹽水形成兩相溶液(大約2mL)。將 所得兩相混合物冷卻至約5°C，同時(shí)以維持反應(yīng)混合物的pH值為約8.5的 速率加入異丁酸酐(3.56g， 22.52mmol)和50% KOH水溶液。通過色譜法監(jiān) 測反應(yīng)進(jìn)程，原料在加入3.2當(dāng)量的酸酐后用完。加入EtOAc(50mL)，并 用稀釋的鹽水清洗有機(jī)相2次。將合并的水相清洗液用EtOAc清洗2次 (15mL)。合并兩次的EtOAc液，用水清洗1次。合并所有的EtOAc提取 液，干燥(Na2S04)并在真空中濃縮。將殘余物在IPA(10mL)中，并用甲磺 酸(約0.7g)研磨。加入庚烷(10mL)并將混合物在室溫下攪拌固化。加入庚 烷/IPA的溶液，加熱混合物至60。C，使之緩慢冷卻至室溫。將所得固體過 濾，用IPA/庚烷淋洗，在60。C下真空干燥，得到3.35g (理論值80.5%)的 2a:熔點(diǎn)為167-169QC。按類似的方法制備丁酸(2R，3S，4S，5R)-5-(4-氨基-2-氧代-2H-嘧啶-l-基)-2-疊氮基-3，4-雙丁酰氧基-四氫呋喃-2-基甲基酯(2b, R=CO-"-C3H7; 1.45g;理論值83.3%)，除了以丁酸酐代替異丁酸酐。實(shí)施例2異丁酸5-(4-氨基-2-氧代-2H-嘧啶-l-基)-2-疊氮基-3，4-雙異丁酰氧基-四氫呋喃-2-基甲基酯向3 (12.0kg)和DMAP (0.46kg)的THF (48L)和水(36L)的漿體中加入 50%的KOH水溶液以調(diào)節(jié)pH值至約8.5。將所得混合物冷卻至10°C并 加入異丁酸酐(21.6kg)，同時(shí)維持pH值在8-ll(通過同時(shí)添加50%KOH), 溫度在約10-15°C。用HPLC監(jiān)測反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后加入EtOAc (35L)， 通過CELITE⑧過濾。濾液分成兩相，水相用EtOAc萃取2次(2 x 30L)。 將合并的EtOAc相用稀鹽水洗滌，蒸餾EtOAc并用IPA代替。所得溶液 用庚烷稀釋，使4沉淀。將所得漿體置于約0。C,通過過濾分離固體，用 庚烷-IPA的混合物清洗，在約50°C下真空爐中千燥，得到17,01kg(理論 值89%)的4， HPLC分析其純度為99.3%。實(shí)施例3異丁酸2-(6-氨基-嘌呤-9-基)-4-異丁酰氧基-5-異丁酰氧基甲基-四氫呋 喃-3-基酯5 6: R = COCHMe2標(biāo)題化合物4姿照實(shí)施例1所述的方法由腺苷(5， 10g, 37.42mmo1)、DMAP(0.46g，3.74mmo1)、 THF (40mL)和H20 (30.0mL)制備。完全轉(zhuǎn)化 共需要5.8當(dāng)量的異丁酸酐，得到17.8g(理論值100%)的6。實(shí)施例43 4: R = COCHMe2使用酰氯的?；饔孟?-氨基-l-((2R，3S，4S，5R)-5-疊氮基-3，4-二羥基-5-羥甲基-四氫呋喃 畫2-基)-lH-嘧咬-2-酮(3， 6.0g， 18.01mmol)、 THF (35mL)、鹽水(10mL)和 DMAP(0.2g)的溶液中加入足量的鹽水形成兩相溶液(大約2mL)。將所得的 兩相混合物冷卻至約5°C，同時(shí)以維持反應(yīng)混合物的pH值為約8.5的速率 加入異丁酰氯和50。/。KOH水溶液。通過HPLC監(jiān)測反應(yīng)，持續(xù)添加反應(yīng) 物，直到所有的原料被消耗。HPLC分析表明存在三-和四-酰基的產(chǎn)物。 用稀硫酸將反應(yīng)混合物的pH值調(diào)至約1.5，攪拌過夜，使四酰基化產(chǎn)物水 解。產(chǎn)物用EtOAc萃取，將合并的萃取液用水充分洗涂，將pH值調(diào)至約 1.5。將所得的EtOAc溶液干燥(MgS04)，過濾蒸發(fā)，得到7.8g的4，經(jīng)含 量測定為85.3%。使用羰基二咪唑和異丁酸的?；?(1,0g,3.00mmo1)、 DMAP(37mg)、 THF (1.0mL)和水(4.0mL)的漿 體中加入50%的NaOH,直到pH值為7-8，隨后用飽和的NaHCX)3調(diào)節(jié) 到pH9.5。向異丁酸(0.8g，9.00mmol)在THF(10mL)的溶液中加入羰基二咪 哇(1.3g， 9.0mmo1)，持續(xù)攪拌至無氣泡產(chǎn)生。在室溫下將后一種溶液緩慢 加入含有3的漿體。通過加入堿使pH維持在約9。 HPLC分析表明產(chǎn)物 中有單、雙、三?；?，其中后兩者占優(yōu)勢。若繼續(xù)加入酰基咪唑，反應(yīng)將持續(xù)進(jìn)行，直至所有原料均轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物。以其特定形式或以實(shí)施所述功能的特定方法來表示，或以獲得所公開征，在適宜條件下，可單獨(dú)或以其任何組合的形式用于以不同的方式來實(shí) 現(xiàn)本發(fā)明。上述發(fā)明通過具體說明和實(shí)施例進(jìn)行了 一些細(xì)節(jié)性的描述，用于論釋 和幫助理解。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)對(duì)其進(jìn) 行改變和修飾是顯而易見的。因此，應(yīng)當(dāng)理解以上的說明書意欲說明而非 限制。因此本發(fā)明的范圍不是由上述的說明書確定，而是由下面所附的權(quán)利要求及其等價(jià)條款的全部范圍所確定。本申請(qǐng)中引用的所有專利、專利申請(qǐng)和公開物整體引入本文用作參考， 正如獨(dú)立地引述每個(gè)單獨(dú)的專利、專利申請(qǐng)或公開物那樣。
權(quán)利要求
1.在堿性反應(yīng)條件下將核苷I進(jìn)行選擇性O(shè)-?；瘉碇苽銸-?；塑誌I的方法id="icf0001" file="S2006800345960C00011.gif" wi="120" he="77" top= "59" left = "54" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>其中，A為A1、A2或A3，R1為氫、疊氮基、C1-6烷基或C1-3酰基；Ra1和Ra2獨(dú)立地為氫或羥基；Rb1和Rb2為氫或-O2CR2；且R2為C1-10烷基或苯基；所述方法包括下述步驟(i)將I和DMAP溶于多相的含水溶劑混合物中，加入堿的水溶液將pH值調(diào)節(jié)為7-13；(ii)任選地加入足量的飽和NaCl水溶液，產(chǎn)生兩相的反應(yīng)混合物；(iii)加入酰化劑和足以維持pH值為7-13的額外的堿；(iv)監(jiān)測反應(yīng)，當(dāng)轉(zhuǎn)化到達(dá)滿意水平時(shí)停止加入所述的酰化試劑和所述的堿；(v)任選地用藥學(xué)上可接受的酸處理O-?；塑眨苑蛛x所述O-?；塑盏乃峒映甥}。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中R"和R"均為OH且R"和Rb2 均為-02012。
3. 如權(quán)利要求2所述的方法，其中R1為H或N3。
4. 如權(quán)利要求3所述的方法，其中R1為N3。
5. 如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述式I的核苷為4'-疊氮基胞苷、 4'-疊氮基-鳥苷、4'-疊氮基-腺苷或4'-疊氮基-ffmC。
6. 如權(quán)利要求l所述的方法，其中所述的多相的含水有機(jī)溶劑混合物 為含水的醚。
7. 如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述的多相的含水有機(jī)溶劑為含水 的四氫p夫喃。
8. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的pH值范圍為7.5-12。
9. 如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述的pH值范圍為8-10。
10. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的堿為堿金屬氫氧化物、堿 金屬碳酸氫鹽或堿金屬碳酸鹽。
11. 如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述的堿為KOH。
12. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的?；瘎轸人狒ⅤＢ然??；渫邸?br> 13. 如權(quán)利要求12所述的方法，所述的?；瘎楫惗∷狒?、己酸酐、 三戊酸酐、丁酸酐或苯甲酸酐。
14. 如權(quán)利要求13所述的方法，其中所述的酰化劑為異丁酸酐。
15. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述式I的核苷為4'-疊氮基胞苷 或4，-疊氮基wmC,所述的含7jC有機(jī)溶劑為兩相的含水的四氫呋喃溶劑， 所述的堿為NaOH，所述的pH范圍為約8-10和所述的?；瘎楫惗∷狒?br> 16. 如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述的方法進(jìn)一步包括將所述的 O-酰化核苷與藥學(xué)上可接受的酸接觸，生成酸加成鹽。
17. 如權(quán)利要求15所述的方法，其中所述的藥學(xué)上可接受的無機(jī)或有 機(jī)酸為鹽酸或甲磺酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及在多相的含水溶劑混合物中于堿性條件下利用DMAP和羧酸酐進(jìn)行核苷羥基的選擇性O(shè)-?；囊徊椒椒ā?br> 文檔編號(hào)C07H19/167GK101268092SQ200680034596
公開日2008年9月17日 申請(qǐng)日期2006年9月12日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月22日
發(fā)明者K·薩爾馬 申請(qǐng)人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司