專利名稱：用于治療神經(jīng)病學(xué)、精神病學(xué)或疼痛病癥的5-(苯基異噁唑基乙氧基)-三唑-3-基取代的 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物在治療中的用途。
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物在治療mGluR5-介導(dǎo)的病癥中的用途。
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物用于治療以下疾病的用途阿爾茨海默氏病、老年性癡呆、AIDS誘導(dǎo)的癡呆、帕金森氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化、亨廷頓舞蹈病、偏頭痛、癲癇、精神分裂癥、抑郁癥、焦慮癥、急性焦慮癥、眼科病癥例如視網(wǎng)膜病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、青光眼、聽(tīng)覺(jué)神經(jīng)性病癥例如耳鳴、化療誘導(dǎo)的神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛和三叉神經(jīng)痛、耐受性、依賴性、脆性X綜合癥(Fragile X)、孤獨(dú)癥、智力遲鈍、精神分裂癥和唐氏綜合癥(Down′s Syndrome)。
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物用于治療如下病癥的用途偏頭痛相關(guān)性疼痛、炎癥性疼痛、神經(jīng)性疼痛病癥例如糖尿病性神經(jīng)病、關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕疾病(rheumatiod diseases)、下腰(low back)痛、術(shù)后疼痛和與各種病況(包括癌、心絞痛(angina)、腎或膽絞痛、月經(jīng)、偏頭痛和痛風(fēng))有關(guān)的疼痛。
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物用于治療以下疾病的用途中風(fēng)、頭創(chuàng)傷、缺氧性和缺血性損傷、低血糖、心血管疾病和癲癇。
本發(fā)明還涉及如上定義的式I-III的化合物用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于治療第I組mGluR受體介導(dǎo)的病癥和上列的任何病癥。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案涉及式I-III的化合物用于治療胃腸道病癥的用途。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及式I-III的化合物用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于抑制短暫性下食道括約肌松弛、用于治療GERD、用于預(yù)防胃食管反流、用于治療回流、用于治療哮喘、用于治療喉炎、用于治療肺病、用于發(fā)育停滯的管理、用于治療應(yīng)激性腸病(IBS)和用于治療機(jī)能性消化不良(FD)。
在本文中，術(shù)語(yǔ)“TLESR”短暫性下食道括約肌松弛根據(jù)Mittal，R.K.，Holloway，R.H.，Penagini，R.，Blackshaw，L.A.，Dent，J.，1995；Transient lower esophageal sphincter relaxation.Gastroenterology 109，pp.601-610定義。
術(shù)語(yǔ)“反流”在此處定義為來(lái)自胃的流體能夠進(jìn)入食管，因?yàn)檫@時(shí)機(jī)械屏障暫時(shí)消失。
術(shù)語(yǔ)“GERD”，胃食管反流病在本文中根據(jù)van Heerwarden，M.A.，Smout A.JP.M.，2000；Diagnosis of reflux disease.Baillière’sClin.Gastroenterol.14，pp.759-774定義。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及式I-III的化合物用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于治療咳嗽。在一個(gè)實(shí)施方案中，要治療的咳嗽是慢性咳嗽。在另一個(gè)的實(shí)施方案中，要治療的咳嗽是急性咳嗽。術(shù)語(yǔ)慢性咳嗽根據(jù)Kardos P等人(The German Respiratory Society`s Guidelinefor the Diagnosis and Treatment of Patients with Acute and ChronicCough Medizinische Klinik 2004；99(8)468-75)定義為持續(xù)超過(guò)8周的咳嗽。然而，慢性咳嗽也可以定義為持續(xù)超過(guò)3周的咳嗽，或者持續(xù)超過(guò)2個(gè)月的咳嗽。術(shù)語(yǔ)“急性咳嗽”根據(jù)上述參考文獻(xiàn)定義為持續(xù)少于8周的咳嗽。
上述式I-III的化合物可用于治療或預(yù)防肥胖癥或超重(例如，促進(jìn)體重減輕和維持體重減輕)、預(yù)防或逆轉(zhuǎn)體重增加(例如，反彈，包括藥物誘導(dǎo)的或戒煙之后發(fā)生的)、用于調(diào)節(jié)食欲和/或飽食感、飲食病癥(例如，暴食、厭食、食欲過(guò)盛、和強(qiáng)迫性飲食)和渴望(對(duì)于藥物、煙草、酒精、任何引發(fā)食欲的大量營(yíng)養(yǎng)素或非必要食物)。
本發(fā)明還提供治療患有mGluR5介導(dǎo)的病癥或上列任何病癥或處在患有所述病癥危險(xiǎn)下的患者中的所述病況的方法，包括對(duì)該患者給予有效量的如上定義的式I-III的化合物。
治療性或預(yù)防性處理特定的病癥所需的劑量必然會(huì)根據(jù)治療的宿主、給藥途徑和治療疾病的嚴(yán)重程度發(fā)生改變。
在本說(shuō)明書(shū)的上下文中，術(shù)語(yǔ)“治療”和“處理”包括阻止或者預(yù)防，除非明確指出不是這樣。術(shù)語(yǔ)“治療學(xué)的”和“治療地”應(yīng)作相應(yīng)地解釋。
在本說(shuō)明書(shū)中，除非另有說(shuō)明，術(shù)語(yǔ)“拮抗劑”和“抑制劑”意指化合物通過(guò)任何方式部分地或者完全地阻斷引起配體產(chǎn)生響應(yīng)的轉(zhuǎn)導(dǎo)通道。
除非另有說(shuō)明，術(shù)語(yǔ)“病癥”是指與代謝型谷氨酸受體活性有關(guān)的任何病況和疾病。
非醫(yī)學(xué)用途 除了在治療醫(yī)學(xué)方面的用途之外，式I-III的化合物以及這種化合物的鹽和水合物可用作藥理學(xué)工具，用于體外和體內(nèi)試驗(yàn)系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)和標(biāo)準(zhǔn)化，所述試驗(yàn)系統(tǒng)用于在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(例如貓、狗、兔、猴、大鼠和小鼠)中評(píng)價(jià)mGluR相關(guān)活性的抑制劑的效果，作為新治療劑研究的一部分。
制備方法 中間體的合成

最終化合物的合成

一般方法 所有的起始原料都是市售的或者在文獻(xiàn)中早有描述。
1H和13C NMR譜在Bruker 300、Bruker DPX400或Varian+400光譜儀上記錄，1H NMR分別以300、400和400MHz操作，使用TMS或殘余溶劑信號(hào)作為參考，除非另有陳述，使用氘代氯仿作為溶劑。所有報(bào)告的化學(xué)位移δ以ppm計(jì)，顯示記錄中出現(xiàn)的信號(hào)的精細(xì)分裂(s單峰，br s寬的單峰，d雙峰，t三重峰，q四重峰，m多重峰)。
在線液相色譜分離之后進(jìn)行的質(zhì)譜檢測(cè)分析在由Alliance 2795(LC)和ZQ單四極質(zhì)譜儀構(gòu)成的Waters LC-MS上記錄。質(zhì)譜儀裝備有以陽(yáng)離子和/或陰離子模式操作的電噴射離子源。離子噴射電壓是±3kV并且以0.8s的掃描時(shí)間掃描m/z 100-700的質(zhì)譜。為柱(X-TerraMS，Waters，C8，2.1×50mm，3.5μm)施加5％到100％的乙腈-10mM乙酸銨水溶液或0.1％TFA水溶液。
使用Perkin Elmer 241旋光計(jì)測(cè)量旋光性，在23℃在589nm下使用10cm的比色池。
縮略語(yǔ)表 aq. 水性 DMF 二甲基甲酰胺 EtOAc乙酸乙酯 NH4Cl氯化銨 Novozyme

用于聚合物結(jié)合型南極假絲酵母脂肪酶(candida antarcticalipase)的注冊(cè)商標(biāo) r.t.或RT 室溫(除非另有說(shuō)明，為16到26℃的溫度) 實(shí)施例 中間體的合成 實(shí)施例1 4-(3-氯苯基)-2，4-二氧代丁酸乙酯
將乙醇鈉(117.8g，1.73mol)分批加入到0℃的3-氯苯乙酮(178.5g，1.15mol)和草酸二乙酯(188mL，1.39mol)的乙醇(3L)溶液中。將混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)然后在70℃加熱2小時(shí)。在冷卻之后，將混合物用3M鹽酸酸化(pH～3)。蒸除溶劑并且向混合物加入EtOAc。有機(jī)物層用水和飽和鹽水洗滌。蒸除溶劑，得到粗的標(biāo)題產(chǎn)物，其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。MS(M+-1)＝253。
實(shí)施例2 5-(3-氯苯基)異噁唑-3-羧酸乙酯
將4-(3-氯苯基)-2，4-二氧代丁酸乙酯(max 294g，1.16mol)和羥胺鹽酸鹽(120.4g，1.73mol)的乙醇(4L)溶液在80℃加熱4小時(shí)。在冷卻(過(guò)夜)到約5-10℃之后，將混合物過(guò)濾，用冷乙醇洗滌并且真空干燥，得到標(biāo)題化合物(214.5g，74％)。1H NMR7.82(s，1H)，7.72(m，1H)，7.47(m，2H)，4.03(s，3H)。MS(M++1)＝252。
實(shí)施例3 [5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]甲醇
將硼氫化鈉(96.7g，2.6mol)緩慢加入到0℃的5-(3-氯苯基)異噁唑-3-羧酸乙酯(214.5g，0.85mol)的甲醇(2.5L)溶液中。將反應(yīng)混合物在50℃加熱2小時(shí)，并且在室溫用EtOAc猝滅。蒸除大部分溶劑并且向剩余的粗品加入EtOAc。有機(jī)物層用水、飽和鹽水洗滌，并且濃縮，得到標(biāo)題化合物，其直接用于下一步。MS(M++1)＝210。
實(shí)施例4 5-(3-氯苯基)異噁唑-3-甲醛
將含[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]甲醇(178.6g，852mmol)的二氯甲烷(2L)滴加到含氯鉻酸吡啶鎓(400g，1.86mol)的二氯甲烷(2L)中。將得到的漿狀物在室溫下攪拌過(guò)夜。將漿狀物過(guò)濾通過(guò)硅藻土并將濾液蒸餾。向剩余的溶液加入EtOAc。有機(jī)物層用水、飽和鹽水洗滌，并且濃縮，得到粗制標(biāo)題化合物，其直接用于下一步。1H NMR(DMSO-d6)10.13(s，1H)，8.08(br s，1H)，7.95(m，1H)，7.61(m，3H)。MS(M++1)＝208。
實(shí)施例5 1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇
在0℃將MeMgBr(3M，在THF中，313mL，937,2mmol)滴加到含5-(3-氯苯基)異噁唑-3-甲醛(177g，252mmol)的THF(3L)。使混合物達(dá)到室溫，在該溫度下攪拌3小時(shí)，然后用0℃的NH4Cl水溶液猝滅，并且蒸除溶劑。向殘余物加入EtOAc并且過(guò)濾通過(guò)硅藻土短柱。有機(jī)物層用水、飽和鹽水洗滌并且濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)二氧化硅上的急驟柱色譜法純化，使用庚烷/EtOAc＝80∶20，得到標(biāo)題化合物(70g，37％)，為白色-黃色固體。1H NMR7.73(m，1H)，7.63(m，1H)，7.38(m，2H)，6.57(s，1H)，5.07(q，1H)，2.44(s，1H)，1.59(d，3H)。
實(shí)施例6 (1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇乙酸酯
在Ar下將1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇(106.5g，476mmol)和Novozyme

(13g)聚集在干燥甲苯(1.5L)中。在加入乙酸乙烯酯(66mL，716mmol)之后，反應(yīng)在室溫進(jìn)行過(guò)夜，隨后通過(guò)硅藻土過(guò)濾并且用DCM洗滌。真空蒸發(fā)溶劑并使粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)二氧化硅上的柱色譜法，使用二氯甲烷/甲醇＝20∶1，得到標(biāo)題化合物(50g，47％)。1HNMR7.76(m，1H)，7.65(m，1H)，7.41(m，2H)，6.54(s，1H)，6.07(q，1H)，2.13(s，3H)，1.66(d，3H)。LC-MS(M++1)＝266。
實(shí)施例7 (1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇
將(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇乙酸酯(56g，211mmol)和氫氧化鋰一水合物(10.6g，253mmol)與THF/水(7/5，1.2L)混合并且在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。真空中使混合物的體積減到約1/2，隨后用鹽水稀釋，用乙醚萃取，然后用MgSO4干燥并且在真空中濃縮，得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物通過(guò)二氧化硅上的急驟柱色譜法純化，使用庚烷/EtOAc＝70∶30，得到標(biāo)題化合物(40g，85％)。1H NMR7.73(m，1H)，7.63(m，1H)，7.38(m，2H)，6.57(s，1H)，5.07(q，1H)，2.44(s，1H)，1.59(d，3H)。
實(shí)施例8 2-異煙?；?N-甲基肼硫代甲酰胺
向溫和加熱(35℃)和機(jī)械攪拌的異煙酰肼(435g)在異丙醇(6.0L)中的懸浮液中分成幾小份加入(甲基亞氨基)(硫代)甲烷(230g)。在完成加入之后，將反應(yīng)混合物加熱(70℃)6小時(shí)，在30分鐘之后加入另外的異丙醇(600ml)。在將反應(yīng)混合物冷卻(冰浴)到17℃之后，過(guò)濾出得到的沉淀物并且用異丙醇(1.0L)洗滌。然后將固體空氣干燥過(guò)夜，得到615g標(biāo)題化合物，為白色粉末。
實(shí)施例9 4-甲基-5-吡啶-4-基-2，4-二氫-3H-1，2，4-三唑-3-硫酮
在室溫向機(jī)械攪拌的2-異煙酰基-N-甲基肼硫代甲酰胺(610g)在水(5.0L)中的懸浮液中加入碳酸氫鈉(390g)。然后在2小時(shí)內(nèi)將反應(yīng)混合物慢慢加熱到70℃，并且在該溫度下維持另外的3.5小時(shí)，然后冷卻(冰浴)到17℃，隨后通過(guò)慢慢(在90分鐘內(nèi))加入濃鹽酸(約470mL)調(diào)節(jié)pH到3。隨后將反應(yīng)混合物過(guò)濾，將收集的固體用稀鹽酸洗滌(0.1N，2×1.0L)，得到濕濾餅，將其在溫和的空氣流下在100mbar干燥1.5天，得到544g標(biāo)題化合物。
實(shí)施例10 4-[4-甲基-5-(甲硫基)-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶
向機(jī)械攪拌并且冷卻(9℃)的4-甲基-5-吡啶-4-基-2，4-二氫-3H-1，2，4-三唑-3-硫酮(267g)和碘甲烷(197.7g)在丙酮(2.6L)中的懸浮液中加入氫氧化鈉溶液(54g，在600mL水中)，加入速率(為約20mL/min)以維持溫度為10到15℃。然后加入另一部分的水(50mL)并且允許溫度回到21到24℃。在另一個(gè)2小時(shí)之后，從反應(yīng)混合物真空蒸除丙酮(水浴保持在30℃)。然后加入另一部分的水(750mL)，然后冷卻(17到18℃)并且通過(guò)過(guò)濾收集形成的沉淀物。然后將固體用水(2×1L)洗滌，然后在溫和的空氣流下在100mbar干燥3天，得到235g的標(biāo)題化合物，為白色粉末。1H NMR(DMSO-d6)2.7(s，3H)3.6(s，3H)7.7(m，2H)8.8(d，2H)。
實(shí)施例11 4-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶
在冷卻下向機(jī)械攪拌的得自前述步驟的4-[4-甲基-5-(甲硫基)-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶(228g)在水(1.15L)和乙酸(1.15L)的混合物中的溶液中分批加入高錳酸鉀(234g)，加入速率使得溫度為12到17℃(約45分鐘)。然后將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后在冰浴上冷卻，期間在2.5小時(shí)內(nèi)加入氫氧化鈉溶液(5N)以調(diào)節(jié)pH到約10。向反應(yīng)混合物加入

(100g)和氯仿(1.6L)，然后過(guò)濾。從濾液分離有機(jī)相并將得到的水相用氯仿萃取(2×1L)。將濾餅用氯仿萃取兩次(2×1.5L)。將合并的有機(jī)相用硫酸鎂干燥，過(guò)濾，并且真空濃縮，得到158g標(biāo)題化合物，為白色粉末。通過(guò)用氯仿(2×2L)萃取濾餅并將溶液真空濃縮得到另一份產(chǎn)物(78g，白色粉末)。1H NMR(DMSO-d6)3.6(s，3H)3.9(s，3H)7.8(s，2H)8.8(s，2H)。
實(shí)施例12 3-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶
與如本文中所述的4-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶類似地通過(guò)由相應(yīng)步驟組成的相應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，從煙酰肼開(kāi)始，代替異煙酰肼。1H NMR3.59(s，3H)3.99(s，3H)7.52(m，1H)8.02(dt，1H)8.83(dd，1H)8.91(m，1H)。
最終化合物的合成 實(shí)施例13 3-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶
將(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇(5.40g，24.1mmol)溶解于DMF(45mL)。向其中加入3-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶(5.75g，24.1mmol)和碳酸銫(10.1g，31.4mmol)。在60℃攪拌過(guò)夜之后，加入水。將混合物用二氯甲烷萃取，隨后將有機(jī)物層在真空中濃縮，得到粗品，將其通過(guò)二氧化硅上的柱色譜法純化，使用二氯甲烷/甲醇＝98/2，得到標(biāo)題化合物(7.10g，77％)。1HNMR8.90(d，1H)，8.72(m，1H)，8.04(dt，1H)，7.76(bs，1H)，7.66(m，1H)，7.45(m，1H)，7.40(m，2H)，6.73(s，1H)，6.35(q，1H)，3.57(s，3H)，1.93(d，3H)。1H NMR(DMSO-d6)8.90(d，1H)，8.71(dd，1H)，8.13(dt，1H)，7.99(s，1H)，7.86(m，1H)，7.58(m，3H)，7.40(s，1H)，6.19(q，1H)，3.54(s，3H)，1.81(d，3H)。LC-MS(M++1)＝382.[α]DRT(2.92g/L，CDCl3)＝-46.575° 實(shí)施例14 4-(5-{(消旋)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶
將1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇(63.4mg，0.28mmol)、DMF和氫化鈉(60％，在油中的分散物，15.1mg，0.38mmol)在惰性氣氛下混合并且在室溫?cái)嚢?小時(shí)，隨后加入4-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶(45mg，0.19mmol)。在80℃攪拌24小時(shí)之后，將混合物冷卻到室溫，用EtOAc稀釋并且用水和鹽水洗滌。將有機(jī)相干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并且真空濃縮。粗的殘余物通過(guò)二氧化硅上的柱色譜法純化，使用含5％甲醇的EtOAc，分離標(biāo)題化合物(11.7mg)。1H-NMR8.81(bs，2H)，7.77(s，1H)，7.67(m，3H)，7.42(m，2H)，6.73(s，1H)，6.36(q，1H)，3.62(s，3H)，1.94(d，3H)。
實(shí)施例15 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶
方法1在chiralpak AD柱上用異丙醇作為洗脫液進(jìn)行4-(5-{(消旋)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶的制備性手性HPLC分離，得到標(biāo)題化合物，為第一個(gè)洗脫的對(duì)映體。
方法2通過(guò)使用含碳酸銫的DMF，使(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇與4-[4-甲基-5-(甲基磺酰基)-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶偶聯(lián)，與3-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶類似地制備標(biāo)題化合物。1H NMR(DMSO-d6)8.73(m，2H)，7.97(br.s，1H)，7.85(m，1H)，7.74(m，2H)，7.58(m，2H)，7.39(s，1H)，6.20(q，1H)，3.60(s，3H)，1.81(d，3H)。[α]DRT(5.827g/L，CDCl3)＝-48.567° 實(shí)施例16 4-(5-{(1S)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶
如實(shí)施例4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(方法1)中所述的制備性手性HPLC分離法分離標(biāo)題化合物，為第二洗脫的對(duì)映體。1H-NMR8.81(bs，2H)，7.77(s，1H)，7.67(m，3H)，7.42(m，2H)，6.73(s，1H)，6.36(q，1H)，3.62(s，3H)，1.94(d，3H)。
實(shí)施例17 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶鹽酸鹽 通過(guò)在50℃將10μl的32重量％HCl水溶液分兩份加入到35mg4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶游離堿在500μl乙醇中的透明溶液中生產(chǎn)標(biāo)題的鹽。將漿狀物冷卻到10℃并且在攪拌下保持過(guò)夜，然后將鹽濾出，用500μl乙醇洗滌并且在室溫下真空干燥。
所述鹽為結(jié)晶，具有明顯的熔融行為并且在90-95％RH下具有增加的水分吸收。
此外，類似地在乙醇、異丙醇和乙酸乙酯中制備標(biāo)題鹽，并且在乙醇中以1g的規(guī)模制備。所有的批次產(chǎn)生相同的結(jié)晶變型，盡管在一些批次中無(wú)定形物含量略微更高。熔點(diǎn)為150℃到160℃。
進(jìn)一步對(duì)從乙醇以1g規(guī)模生產(chǎn)的鹽研究其固有的溶解速率并與4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶相比較。與游離堿相比，該鹽具有1000倍的固有溶解速率。堿和鹽的溶解速率使用小體積旋轉(zhuǎn)盤(pán)方法測(cè)量。從純化合物壓縮圓盤(pán)并且中心安裝在圓盤(pán)支座上，暴露面積0.07cm2。在37℃下將以500rpm旋轉(zhuǎn)的圓盤(pán)支座浸入50mL USP磷酸鹽緩沖液(pH 6.8)中。使用具有連續(xù)循環(huán)的流通池和蠕動(dòng)泵的分光光度計(jì)UV-在線分析化合物。
實(shí)施例18 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶硫酸鹽 通過(guò)將500μl水與33mg 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶游離堿、500μl甲醇和7μl98重量％硫酸混合得到的透明溶液蒸發(fā)，得到油狀的鹽(oiled salt)。通過(guò)將油狀的鹽在500μl乙醇中重結(jié)晶生產(chǎn)標(biāo)題的鹽。
標(biāo)題的鹽是結(jié)晶，具有實(shí)質(zhì)的無(wú)定形內(nèi)容物，沒(méi)有明顯的熔融行為，并且在60-70％相對(duì)濕度時(shí)潮解。
此外，通過(guò)在1.5小時(shí)內(nèi)將三份的5μl濃硫酸(98％)加入到68℃含66-68mg 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶游離堿的1ml異丙醇或1ml乙醇透明溶液中生產(chǎn)標(biāo)題的鹽。該從乙醇生產(chǎn)的鹽具有128℃的熔點(diǎn)，盡管其在70-80％RH時(shí)潮解。
生物學(xué)評(píng)價(jià) 在表達(dá)mGluR5D的細(xì)胞系中功能性評(píng)價(jià)mGluR5拮抗作用 可以使用用于藥理學(xué)活性的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)分析本發(fā)明的化合物的性質(zhì)。谷氨酸受體試驗(yàn)的實(shí)例是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，在例如Aramori等人，Neuron 8757(1992)；Tanabe等人，Neuron 8169(1992)；Miller等人，J.Neuroscience 156103(1995)；Balazs，等人，J.Neurochemistry 69151(1997)中有所描述。將這些出版物中描述的方法并入本文作為參考。方便地，可以通過(guò)測(cè)量表達(dá)mGluR5的細(xì)胞中胞內(nèi)鈣[Ca2+]i的活動(dòng)化的試驗(yàn)(FLIPR)或者測(cè)量肌醇磷酸酯周轉(zhuǎn)的另一個(gè)試驗(yàn)(IP3)來(lái)研究本發(fā)明的化合物。
FLIPR試驗(yàn) 將如WO97/05252所述的表達(dá)人mGluR5d的細(xì)胞以每孔100,000個(gè)細(xì)胞的密度在膠原蛋白涂層的黑色側(cè)面透明底96孔板上接種，并且在接種之后24小時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所有的試驗(yàn)在緩沖液(pH 7.4)中進(jìn)行，緩沖液包含127mM NaCl，5mM KCl，2mM MgCl2，0.7mM NaH2PO4，2mM CaCl2，0.422mg/ml NaHCO3，2.4mg/ml HEPES，1.8mg/ml葡萄糖和1mg/ml BSA級(jí)分IV。將96孔板中的細(xì)胞培養(yǎng)物加載在上述緩沖液中60分鐘，所述緩沖液包含在0.01％普流羅尼酸(pluronic acid)(有專利權(quán)的非離子型表面活性劑多元醇，CAS編號(hào)9003-11-6)中的4μM熒光鈣指示劑fluo-3的乙酰氧基甲基酯(Molecular Probes，Eugene，Oregon)。在加載期之后，除去fluo-3緩沖液并且替換為新鮮的試驗(yàn)緩沖液。使用0.800W和0.4秒CCD攝像機(jī)快門速度的激光設(shè)置進(jìn)行FLIPR實(shí)驗(yàn)，激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為488nm和562nm。每個(gè)實(shí)驗(yàn)用存在于細(xì)胞板的各個(gè)孔中的160μl緩沖液引發(fā)。從拮抗劑板加入40μl，隨后從激動(dòng)劑板加入50μL。在拮抗劑和激動(dòng)劑加入之間有90秒的間隔。在兩次加入中的每次完成之后，都立即以1秒為間隔采集熒光信號(hào)50次，隨后以5秒為間隔采樣3次。反應(yīng)測(cè)量為對(duì)激動(dòng)劑響應(yīng)的峰高度減去采樣周期內(nèi)背景熒光的差。使用線性最小二乘擬合程序進(jìn)行IC50測(cè)定。
IP3試驗(yàn) 另外的mGluR5d功能試驗(yàn)描述在WO97/05252中，其基于磷脂酰肌醇周轉(zhuǎn)。受體的激活刺激磷脂酶C活性并且引起肌醇1，4，5-三磷酸酯(IP3)的形成增加。
將穩(wěn)定地表達(dá)人mGluR5d的GHEK以40×104細(xì)胞/孔接種在24孔聚L-賴氨酸涂層板上，在包含1μCi/孔的[3H]myo-肌醇的培養(yǎng)基中。將細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)夜(16小時(shí))，然后洗滌三次并且在37℃在補(bǔ)充有1單位/ml谷丙轉(zhuǎn)氨酶和2mM丙酮酸(pyruvate)的HEPES緩沖鹽水(146mM NaCl，4.2mM KCl，0.5mM MgCl2，0.1％葡萄糖，20mMHEPES，pH 7.4)中培養(yǎng)1小時(shí)。將細(xì)胞在HEPES緩沖鹽水中洗滌一次并且在包含10mM LiCl的HEPES緩沖鹽水中預(yù)培養(yǎng)10分鐘。將化合物在37℃一式兩份培養(yǎng)15分鐘，然后加入谷氨酸(80μM)或DHPG(30μM)并且培養(yǎng)另外的30分鐘。通過(guò)在冰上加入0.5ml高氯酸(5％)終止反應(yīng)，在4℃培養(yǎng)至少30分鐘。將樣品收集在15ml聚丙烯管中并且用離子交換樹(shù)脂(Dowex AG1-X8甲酸鹽形式，200-400目，BIORAD)柱分離肌醇磷酸酯。進(jìn)行肌醇磷酸酯的分離首先通過(guò)用8ml30mM甲酸銨洗脫甘油磷脂酰肌醇(glycero phosphatidyl inositol)。然后，用8ml 700mM甲酸銨/100mM甲酸洗脫總的肌醇磷酸酯并且收集在閃爍管中。然后將這些洗脫液與8ml的閃爍體混合并且通過(guò)閃爍計(jì)數(shù)測(cè)定[3H]肌醇結(jié)合。將從一式兩份樣品計(jì)數(shù)得到的dpm繪圖并且使用線性最小二乘擬合程序生成IC50測(cè)定數(shù)據(jù)。
縮寫(xiě) BSA牛血清白蛋白 CCD電荷耦合裝置 CRC濃度反應(yīng)曲線 DHPG 3，5-二羥苯基甘氨酸 DPM每分鐘衰變數(shù) EDTA 乙二胺四乙酸 FLIPR 熒光圖像讀板器 GHEK 包含GLAST的人胚腎 GLAST 谷氨酸/天冬氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 HEPES 4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪乙磺酸(緩沖劑) IP3三磷酸肌醇 一般地，所述化合物在上述試驗(yàn)中是活性的，IC50值低于10000nM。在本發(fā)明的一個(gè)方面中，IC50值低于1μM。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，IC50值低于100nM。
篩選有效對(duì)抗TLESR的化合物 使用成年Labrador獵狗，跨性別，訓(xùn)練為在Pavlov吊索中站立。形成粘膜到皮膚的食管造口，并且在進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)之前允許狗完全恢復(fù)。
活動(dòng)性測(cè)量 簡(jiǎn)言之，在禁食約17小時(shí)(水自由供應(yīng))之后，通過(guò)食管造口引入多腔套筒/側(cè)孔組件(Dentsleeve，Adelaide，South Australia)以測(cè)量胃、下食道括約肌(LES)和食道的壓力。使用低柔順性測(cè)壓輸液泵(Dentsleeve，Adelaide，South Australia)對(duì)組件灌注水。將充滿空氣的管送往口腔方向以測(cè)量吞咽，并且在LES上3cm處用銻電極監(jiān)控pH。將所有的信號(hào)增強(qiáng)并且在個(gè)人電腦上以10Hz接收。
在已經(jīng)得到脫離禁食胃/LES階段III活動(dòng)活性的基線測(cè)量之后，在前腿靜脈中靜脈內(nèi)(i.v.，0.5ml/kg)給予安慰劑(0.9％NaCl)或試驗(yàn)化合物。在i.v.給藥之后的十分鐘，通過(guò)組件的中央腔以100ml/分鐘向胃輸入營(yíng)養(yǎng)餐(10％蛋白胨、5％右旋葡萄糖、5％英脫利匹特(Intralipid)，pH 3.0)，到30ml/kg的最終體積。輸注營(yíng)養(yǎng)餐之后，以500ml/分鐘的速度輸入空氣，直到得到10±1mmHg的胃內(nèi)壓力。然后在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中保持壓力在這個(gè)水平，使用輸注泵進(jìn)一步輸入空氣或從胃排出空氣。從營(yíng)養(yǎng)輸入的開(kāi)始到空氣注入的結(jié)束的實(shí)驗(yàn)時(shí)間為45分鐘。已經(jīng)證實(shí)該方法是引起TLESR的可靠方法。
TLESR定義為下食道括約肌壓力(相對(duì)于胃內(nèi)壓力)以＞1mmHg/秒速率的降低。在松弛開(kāi)始之前≤2s不應(yīng)該有咽部信號(hào)，在有所述咽部信號(hào)的那種情況下，松弛屬于吞咽誘導(dǎo)的。LES和胃之間的壓力差應(yīng)該小于2mmHg，并且完全松弛的持續(xù)時(shí)間超過(guò)1秒。
權(quán)利要求
1.式I的化合物
及其可藥用鹽、水合物、異構(gòu)物和/或?qū)τ丑w。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物是S-對(duì)映體。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物是R-對(duì)映體。
4.式II的化合物
及其可藥用鹽、水合物、和/或異構(gòu)物。
5.式III的化合物
及其可藥用鹽、水合物、和/或異構(gòu)物。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物，為結(jié)晶形式。
7.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物的鹽酸鹽。
8.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物的硫酸鹽。
9.選自以下的鹽4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶鹽酸鹽和4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶硫酸鹽。
10.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的化合物，其用于治療。
11.藥物組合物，包括權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的化合物作為活性成分，以及藥理學(xué)和藥學(xué)可接受的載體。
12.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽或光學(xué)異構(gòu)體在生產(chǎn)用于治療mGluR5受體介導(dǎo)的病癥的藥物中的用途。
13.權(quán)利要求12的用途，其中所述病癥是神經(jīng)病學(xué)病癥。
14.權(quán)利要求12的用途，其中所述病癥是精神病學(xué)病癥。
15.權(quán)利要求12的用途，其中所述病癥是胃腸道病癥。
16.權(quán)利要求12的用途，其中所述病癥是以下的任一種胃食管反流疾病、IBS、機(jī)能性消化不良、咳嗽、肥胖癥、阿爾茨海默氏病、老年性癡呆、AIDS誘導(dǎo)的癡呆、帕金森氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化、亨廷頓舞蹈病、偏頭痛、癲癇、精神分裂癥、抑郁癥、焦慮癥、急性焦慮癥、強(qiáng)迫癥、眼科病癥例如視網(wǎng)膜病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、青光眼、聽(tīng)覺(jué)神經(jīng)性病癥例如耳鳴、化療誘導(dǎo)的神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛和三叉神經(jīng)痛、耐受性、依賴性、癖嗜和渴望病癥、神經(jīng)發(fā)育病癥包括脆性X綜合癥、孤獨(dú)癥、智力遲鈍、精神分裂癥和唐氏綜合癥、偏頭痛相關(guān)性疼痛、炎癥性疼痛、神經(jīng)性疼痛病癥例如糖尿病性神經(jīng)病、關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕疾病、下腰痛、術(shù)后痛、與各種病況包括心絞痛、腎或膽絞痛、月經(jīng)、偏頭痛和痛風(fēng)有關(guān)的疼痛；中風(fēng)、頭創(chuàng)傷、缺氧性和缺血性損傷、低血糖、心血管疾病和癲癇。
17.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是慢性疼痛病癥。
18.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是急性疼痛病癥。
19.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是焦慮癥。
20.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是抑郁癥。
21.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是帕金森氏病。
22.權(quán)利要求16的用途，其中所述疼痛病癥是神經(jīng)性疼痛病癥。
23.權(quán)利要求16的用途，其中所述疼痛病癥是偏頭痛。
24.權(quán)利要求16的用途，其中所述疼痛病癥是炎癥性疼痛。
25.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是胃食管反流疾病。
26.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是咳嗽。
27.治療或預(yù)防m(xù)GluR5受體介導(dǎo)的病癥的方法，其中對(duì)需要這種治療或預(yù)防的受試者給予有效量的權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的化合物。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述病癥是神經(jīng)病學(xué)病癥。
29.權(quán)利要求27的方法，其中所述病癥是精神病學(xué)病癥。
30.權(quán)利要求27的方法，其中所述病癥是以下的任一種胃食管反流疾病、IBS、機(jī)能性消化不良、咳嗽、肥胖癥、阿爾茨海默氏病、老年性癡呆、AIDS誘導(dǎo)的癡呆、帕金森氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化、亨廷頓舞蹈病、偏頭痛、癲癇、精神分裂癥、抑郁癥、焦慮癥、急性焦慮癥、強(qiáng)迫癥、眼科病癥例如視網(wǎng)膜病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、青光眼、聽(tīng)覺(jué)的神經(jīng)性病癥例如耳鳴、化療誘導(dǎo)的神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛和三叉神經(jīng)痛、耐受性、依賴性、癖嗜和渴望病癥、神經(jīng)發(fā)育病癥包括脆性X綜合癥、孤獨(dú)癥、智力遲鈍、精神分裂癥和唐氏綜合癥、偏頭痛相關(guān)性疼痛、炎癥性疼痛、神經(jīng)性疼痛病癥例如糖尿病性神經(jīng)病、關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕疾病、下腰痛、手術(shù)后疼痛、與各種病況包括心絞痛、腎或膽絞痛、月經(jīng)、偏頭痛和痛風(fēng)有關(guān)的疼痛；中風(fēng)、頭創(chuàng)傷、缺氧性和缺血性損傷、低血糖、心血管疾病和癲癇。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是慢性疼痛病癥。
32.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是急性疼痛病癥。
33.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是焦慮癥。
34.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是抑郁癥。
35.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是帕金森氏病。
36.權(quán)利要求30的方法，其中所述疼痛病癥是神經(jīng)性疼痛病癥。
37.權(quán)利要求30的方法，其中所述疼痛病癥是偏頭痛。
38.權(quán)利要求30的方法，其中所述疼痛病癥是炎癥性疼痛。
39.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是胃食管反流疾病。
40.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是咳嗽。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)/(II)/(III)的新化合物、它們?cè)谥委熤械挠猛尽⒁约鞍ㄋ鲂禄衔锏乃幬锝M合物。
文檔編號(hào)C07D413/14GK101273037SQ200680034398
公開(kāi)日2008年9月24日 申請(qǐng)日期2006年9月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月29日
發(fā)明者A·米尼迪斯, D·溫斯博, A·斯拉西, M·伊薩克, C·艾里松, V·普羅菲爾, P·-O·貝里斯特倫, L·愛(ài)德華茲, J·阿羅拉, 濤 忻 申請(qǐng)人:阿斯利康(瑞典)有限公司