專利名稱：：色氨酸衍生物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及色氨酸衍生物及其用途、特別是骨質(zhì)疏松癥治療藥、成骨細(xì)胞活化劑。
背景技術(shù)：
：骨質(zhì)疏松癥是因擔(dān)負(fù)骨形成的成骨細(xì)胞和擔(dān)負(fù)骨吸收的破骨細(xì)胞的作用的平衡失調(diào)而產(chǎn)生的疾病。一般認(rèn)為活化成骨細(xì)胞的化合物及抑制破骨細(xì)胞的化合物對(duì)治療骨質(zhì)疏松癥有效。雌激素被認(rèn)為可使成骨細(xì)胞活化、抑制破骨細(xì)胞而可用于骨質(zhì)疏松癥的治療，但由于其同時(shí)對(duì)骨以外的細(xì)胞、特別是生殖器官產(chǎn)生作用，有可能使子宮癌、乳癌的發(fā)生危險(xiǎn)性增加等副作用。另外，日本厚生省(衛(wèi)生部)于2004年1月29日發(fā)布了安全性信息，即長(zhǎng)期脲用雌激素時(shí)，存在提高乳癌、癡呆癥發(fā)病的可能性，呼吁人們引起注意。而且雌激素的分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜，因此合成復(fù)雜而困難。據(jù)報(bào)道，具有吲哚骨架的黑色素(N-乙l基-5-甲氧色胺)對(duì)成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞兩者均有抑制作用(非專利文獻(xiàn)l)，但關(guān)于色氨酸衍生物與其對(duì)成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞的作用的關(guān)系卻未見(jiàn)有任何^^道。[非專利文獻(xiàn)lN,Suzuki,andA.Hattori，J.PinealRes"g，253-258(2002)
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明要解決的i果題本發(fā)明的目的是提供作為藥品有用的色氨酸衍生物、特別是使成骨細(xì)胞活化的色氨酸衍生物及使用該色氨酸衍生物的骨質(zhì)疏松癥治療藥、成骨細(xì)胞活化劑。解決課題的方法本發(fā)明包括以下的發(fā)明。(1)下式(I)表示的化合物或其鹽,<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>式中，X表示卣原子；W表示氫原子、取代或非取代的d，6-烷基、取代或非取代的Cw烯基、取代或非取代的C2-6-炔基、取代或非取代的芳基、取代或非取代的芳烷基、取代或非取代的?；?、取代或非取代的芳基磺酰基、取代或非取代的Cw-烷基磺酰基、取代或非取代的C2-7-烷氧羰基、或羥基；RZ表示取代或非取代的Cwr烷基；R3、RS及I^相同或不同，表示氫原子或卣原子；R"表示氫原子、或者取代或非取代的d-6-烷基；If表示氫原子、或者取代或非取代的Cm-烴基。(2)上述(1)所述的式(I)表示的化合物或其鹽，其中，X為溴原子、Ri為氫原子、取代或非取代的d-6-烷基、取代或非取代的C2-6-烯基、取代或非取代的<:2.6-炔基、取代或非取代的芳基、取代或非取代的芳烷基、取代或非取代的?；?、取代或非取代的芳基磺?；?、取代或非取代的Qu6-烷基磺酰基、或者取代或非取代的<:2.7-烷氧羰基、W為甲基、R3、rS及R^目同或不同，為氫原子或溴原子、W為甲基、R^Cw-烷基。(3)醫(yī)藥組合物，含有上述(l)或(2)所述的化合物或其藥學(xué)上可容許的鹽作為有效成分。(4)骨質(zhì)疏松癥治療藥，含有上述(1)或(2)所述的化合物或其藥學(xué)上可容許的鹽作為有效成分。(5)成骨細(xì)胞活化劑，含有上述(1)或(2)所述的化合物或其鹽。發(fā)明效果根據(jù)本發(fā)明，可提供使成骨細(xì)胞活化的色氨酸衍生物及使用該色氨酸衍生物的骨質(zhì)疏松癥治療藥、成骨細(xì)胞活化劑。另外，本發(fā)明的色氨酸衍生物比雌激素容易合成，可大量生產(chǎn)。具體實(shí)施方式以下，詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。本發(fā)明中，d,烷基、及各取代基中的"d-6-烷基"例如可舉出曱基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基。d-『烷基例如可舉出甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七垸基、十八烷基、十九烷基、二十烷基、二十一烷基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、杯己基。上述式(I)中，！^表示的d-;n-烷基優(yōu)選d-6-烷基，更優(yōu)選甲基。C2-6-烯基例如可舉出乙烯基、l-丙烯基、烯丙基、l-丁烯基、2-丁烯基、戊烯基、己烯基。C2-6-炔基例如可舉出乙炔基、l-丙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、3-丁炔基、戊炔基、己炔基。芳基例如可舉出苯基、曱苯基、萘基等芳香族烴基；呋喃基、噻嗯基、吡咯基、噍哇基、異噁嗤基、漆喳基、異漆喳基、咪唑基、p比唑基、吡咬基、嘧咬基、峻喚基、吡嗪基、喹啉基、異喹啉基等芳香族雜環(huán)基。芳烷基例如可舉出節(jié)基、苯乙基。Cn烴基例如可舉出甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七坑基、十八烷基、十九烷基、二十烷基、二十一烷基等直鏈或支鏈的d.21-烷基；環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等Cm-環(huán)烷基；乙烯基、l-丙烯基、烯丙基、l-丁烯基、2-丁烯基、戊烯基、己烯基、油烯基等<:2.21-烯基；乙炔基、l-丙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、3-丁炔基、戊炔基、己炔基等<:2.21-炔基；苯基、甲苯基、萘基等芳香族烴基；節(jié)基、苯乙基等芳烷基；金剛烷基等交聯(lián)環(huán)烴基；螺環(huán)烴基；稠環(huán)烴基。酰基例如可舉出甲?；?、乙酖基、丙?；?、丁酰基、戊?；?戊醛基)、己?；菴w-脂肪族?；槐綍貂；⒓妆锦；确枷阕艴；?芳?；?。芳基磺?；缈膳e出苯基磺酰基(苯磺?；?、對(duì)甲苯磺酰基、M酰基等芳香族烴-磺?；?；呋喃磺?；?、逸汾磺酖基、吡M?；?、噍唑磺?；?、異嚙唑磺?；?、漆唑磺?；愢邕蚧酋；?、咪唑磺酰基、吡唑磺?；?、吡啶磺酰基、嗜啶磺酰基、噠溱磺酰基、吡喚磺?；^#^?；悤?huì)^t?；确枷阕咫s環(huán)磺酰基。C"-烷基磺酖基例如可舉出甲磺?；?、乙磺?；?。C2.7-烷氧羰基是指被d.6-烷氧基取代的羰基，例如可舉出甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、叔丁氧羰基。卣原子例如可舉出氟原子、氯原子、溴原子、碘原子。上述式(I)中，R1、R2或R4表示的d-6-烷基及d-2!-烷基、W表示的C2-6-烯基、C2-6-炔基、d-6-烷基磺酰基及C2-r烷氧羰基以及R"表示的Cwr烴基可以被選自芳基、?；?、羥基、羧基、鹵原子、Cw烷氧基(例如甲氡基、乙M、丙氡基)等中的l種以上取代基取代。上述式(I)中，W表示的芳基、芳烷基、?；胺蓟酋；杀贿x自Cw-烷基、C^-烯基、C2-6-炔基、芳基、?；⒘u基、羧基、鹵原子、d-6-烷氧基(例如甲氧基、乙氧基、丙氧基)等中的l種以上取代基取代。上述式(I)表示的化合物的鹽優(yōu)選藥學(xué)可容許的鹽，例如可舉出與鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、焦硫酸、偏磷酸等無(wú)機(jī)酸，或檸檬酸、苯甲酸、乙酸、丙酸、富馬酸、馬來(lái)酸、磺酸(例如，甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸、萘璜酸)等有機(jī)酸的鹽。另外，當(dāng)存在酚性羥基或氣基時(shí)，可使用鈉鹽、鉀鹽等堿金屬鹽。上述式(I)表示的化合物中，Ri為氫原子的化合物例如可通過(guò)將上述式(I)中x為氫原子的化合物(例如，n-乙?；?5-曱氧基色氨酸甲酯)進(jìn)行離化來(lái)制造。另外，通過(guò)將上述式(I)中W為羥基、x為氫原子的化合物(例如，n-乙?；?l-羥基-5-曱氧基色氨酸甲酯)進(jìn)行面化，可以制造上述式(I)中W為羥基、x為卣原子的化合物。上述式(I)表示的化合物中，Ri為取代或非取代的d-6-烷基、取代或非取代的C2-6-烯基、取代或非取代的C2-6-炔基、取代或非取代的芳基、取代或非取代的芳烷基、取代或非取代的?；⑷〈蚍侨〈姆蓟酋；⒒蛘呷〈蚍侨〈膁-6-烷基磺跣基的化合物例如可通過(guò)將如上所述獲得的上述式(I)中Ri為氫原子、x為卣原子的化合物在n，n-二甲基甲酰胺等有機(jī)溶劑中、堿催化劑的存在下，與式rLx(式中，W表示取代或非取代的d-6-烷基、取代或非取代的C2-6-烯基、取代或非取代的<:2.6-炔基、取代或非取代的芳基、取代或非取代的芳烷基、取代或非取代的?；⑷〈蚍侨〈姆蓟酋；?、或者取代或非取代的d.6-烷基磺?；?，x表示卣原子)表示的化合物反應(yīng)來(lái)制造。上述式(I)表示的化合物中，W為取代或非取代的C2.7-烷氧羰基的化合物例如可通過(guò)將上述式(I)中Ri為氫原子、x為卣原子的化合物在氯仿等有機(jī)溶劑中、堿催化劑的存在下，與式(R1)20(式中，R1表示取代或非取代的Cw烷氧歉基)表示的化合物反應(yīng)來(lái)制造。上述式(I)表示的化合物中，W為羥基的化合物例如可通過(guò)將上述式(I)中Ri和x為氬原子的化合物用過(guò)氧化氫及鴒酸鈉處理后，進(jìn)行卣化來(lái)制造。上述式(I)表示的化合物中，R"為氫原子的化合物例如可通過(guò)將上述式(I)中x和R"為氫原子的化合物(例如，R1、R3、R5、R"為氫原子的化合物)進(jìn)行卣化(例如，以乙酸、氯仿等為溶劑，用溴或n-溴代琥珀酰亞胺等溴化劑處理)來(lái)制造。上述式(I)表示的化合物可通過(guò)在堿催化劑的存在下水解，使?；?-CO-R2)脫離后，用酸酐(r2'CO-0-COR20等處理，引入其他?；瑏?lái)轉(zhuǎn)換?；?。此時(shí)，由于作為中間體的脫酰化物一般容易在空氣中被氧化，因此優(yōu)選不純化而直接用于后續(xù)的酰化工序。上述式(I)表示的化合物中，W為氫原子的化合物例如可通過(guò)將W為曱基的化合物與氫氧化鈉水溶液一起加熱、水解來(lái)制造。在對(duì)如上所述所得的生成物進(jìn)行純化時(shí)，可采用通常使用的方法，例如有采用硅膠等為栽體的柱層析法或采用甲醇、乙醇、氯仿、二甲亞砜、水等的重結(jié)晶法。柱層析法的洗脫溶劑可舉出甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、己烷、二氯甲烷、乙酸乙基、及它們的混合溶劑等。上述式(I)表示的化合物及其鹽(以下稱"色氨酸衍生物(I)")具有^f吏成骨細(xì)胞活化的作用，作為用于與骨相關(guān)的各種疾病例如骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防或治療的醫(yī)藥組合物，另外，作為成骨細(xì)胞活化劑，在各種領(lǐng)域例如再生醫(yī)療、牙科領(lǐng)域、魚(yú)類繁殖、家畜健康生育的食肉生產(chǎn)、卵生方面是有用的。另外，色氨酸衍生物(I)具有自由基消除作用，作為用于預(yù)防或治療失眠癥、生活習(xí)慣病的醫(yī)藥組合物也是有用的。而且，本發(fā)明的色氨酸衍生物也期待作為上述以外的藥品例如血管擴(kuò)張劑、降壓劑、氬基酸補(bǔ)充劑、抗癌劑、血小板凝集抑制劑等的可能性。以本發(fā)明的色氨酸衍生物為有效成分的骨質(zhì)疏松癥治療藥可以與其他骨質(zhì)疏松癥治療藥例如鈣制劑、維生素D類制劑、激素類制劑、降鈣素類制劑、雙磷酸酯制劑、異丙氧黃酮制劑等聯(lián)合使用。此時(shí)，根據(jù)需要可以適當(dāng)增減后述的給藥劑量。以下，對(duì)色氨酸衍生物(I)的給藥劑量及制劑化進(jìn)行說(shuō)明。色氨酸衍生物(I)可以直接或與常用制劑栽體一起給予動(dòng)物和人體。給藥形態(tài)沒(méi)有特別限定，可根據(jù)需要適當(dāng)選擇使用，可舉出片劑、膠囊劑、顆粒劑、細(xì)粒劑、散劑、緩釋制劑、混懸液、乳劑、糖漿劑、酏劑等口服劑、注射劑、栓劑、涂敷劑、貼劑等非口服劑?？诜├缈墒褂玫矸邸⑷樘?、白糖、甘露醇、羧甲基纖維素、玉米淀粉、無(wú)機(jī)鹽類等按照常規(guī)方法制造。此種制劑除了上述適當(dāng)?shù)馁x形劑以外，還可以使用粘合劑、崩解劑、表面活性劑、潤(rùn)滑劑、流動(dòng)性促進(jìn)劑、矯味劑、著色劑、香料等。粘合劑例如可舉出淀粉、糊精、阿拉伯膠粉末、明膠、羥丙基淀粉、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、結(jié)晶纖維素、乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇。崩解劑例如可舉出淀粉、羥丙基淀粉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素。表面活性劑例如可舉出十二烷基疏酸鈉、大豆卵磷脂、蔗糖脂肪酸酯、聚山梨酸酯80。潤(rùn)滑劑例如可舉出滑石、蠟類、氫化植物油、蔗糖脂肪酸酯、硬脂酸鎂、硬脂酸鉤、》更脂酸鋁、聚乙二醇。流動(dòng)性促進(jìn)劑例如可舉出輕質(zhì)硅酸酐、氫氧化鋁干膠、合成硅酸鋁、硅酸鎂。注射劑可按常規(guī)方法制造，稀釋劑一般使用注射用蒸餾水、生理鹽水、葡萄糖水溶液、橄欖油、t眛油、花生油、大豆油、玉米油、丙二醇、聚乙二醇等。近而根據(jù)需要可以添加滅菌劑、防腐劑、穩(wěn)定劑。另外，從安定性角度出發(fā)，注射劑可以是事先填充于安瓿等后冷凍，采用通常的凍干技術(shù)除去水分，在臨用前再由該凍千物調(diào)制成液體制劑。而且，才艮據(jù)需要還可以適當(dāng)添加等張劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、無(wú)痛化劑等。作為其他非口服劑，可舉出外用液劑、軟骨等涂敷劑，貼劑、用于直腸內(nèi)給藥的栓劑等，按照常規(guī)方法來(lái)制造。本發(fā)明的制劑根據(jù)劑型、給藥途徑等，可釆用1日1次數(shù)次至1次數(shù)次/周~月的給藥方式。為了發(fā)揮預(yù)期效果，口服劑根據(jù)患者的年齡、體重、患病程度，通常成人以1日數(shù)次服用色氨酸衍生物(I)的重量l200mg為宜。為了發(fā)揮預(yù)期效果，非口服劑根據(jù)患者的年齡、體重、患病程度，通常成人以l日l(shuí)50mg的重量，靜注、滴注、皮下注射、肌肉注射色氨酸衍生物(I)為宜。記栽的內(nèi)容。實(shí)施例以下，舉出實(shí)施例更具體地說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍并不局限于此。[實(shí)施例l]由(S)-(+)-N-乙?；?5-甲氧基色氨酸甲酯(1)合成(S)-(+)-N-乙?；?2,6-二溴代-5-甲氧基色氛酸甲酯(2),(S)-(+)-N-乙?；?2，4，7-三溴代-5-甲氡基色氨酸甲酯(3)，(S)-(+)-N-乙酖基-2，4，6-三溴代-5-甲氡基色氣酸甲酯(4)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>向?qū)?6.6mg(0.20mmo1)的(S)-(+)-N-乙?；?5-甲氧基色氨酸甲酯(1)(按M.SomeiandY.Fukui，Heterocycles，^，1859(1993)所述的方法合成。雖價(jià)格昂貴但有市售品)溶解于4.5mL的乙酸而成的溶液中，加入另外將458.0mg的溴及41.8mg的乙酸鈉溶解于5,0mL的乙酸中調(diào)制而成的溴溶液l,OmL(0.59mmo1)，在室溫下攪拌30分鐘。向反應(yīng)液中加入1.0mL的10。/。硫代硫酸鈉水溶液，加入氯仿-甲醇(95:5，v/v)混合溶劑后，加入40%氫氧化鈉7江溶液，使整體呈堿性。然后，用氯仿-甲醇(95:5，v/v)混合溶劑萃取。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)相，用無(wú)7jc硫酸鈉干燥，然后，在減壓下蒸餾除去溶劑，得到黃色固體。以硅膠為載體、以氯仿-甲醇(99.5:0.5,v/v)混合溶劑為洗脫溶劑實(shí)施柱層析法，按洗脫順序，得到28.4mg的分離困難的(S)-(+)-N-乙?；?2,6-二溴代-5-甲氧基色氨酸甲酉旨(2)及(S)-(十)-N-乙?；?2，4，7-三溴代-5-甲氧基色氨酸甲酯(3)的混合物、然后是53.7mg(52%)的(S)-(+)-N-乙?；?2，4，6-三溴代-5-甲ll&色氨酸曱酯(4)。[化合物(4)mp198-199'C(無(wú)色粒狀晶、由乙酸乙酯重結(jié)晶)IR(KBr):3307，1730，1647，1556，1300,1232，1028em1^-醒R(CDC13)5:1.88(3H,s)，3.29(1H，dd，J=9.8，14.6Hz),3.58(1H，dd，J=5.2，14.6Hz)，3.77(3H，s)，3.88(3H，s)，5.01(1H，ddd，J-5.2,8.6，9.8Hz，加入020后變?yōu)閐d，J-5.2,9.8Hz)，6.17(1H，brd,J=8.6Hz，加入020后消失)，7.37(1H，s)，8.70(1H，brs，加入020后消失)質(zhì)譜m/z:530(M+)，528(M+)，526(M+),524(M+)元素分析計(jì)算值C15H15Br3N204:C，34.19;H,2.87;N，5.32;實(shí)測(cè)值C，34.24;H，2.89;N，5.18旋光度[aD26+14.8。(DMSO，c=0.200)，aD27+1.47。(MeOH，c=0.204)[aID28+4.40(CHCl3,c=0.203)[實(shí)施例2由(S)-(+)-N-乙?；?2，4，6-三溴代-5-甲氧基色氨酸甲酯(4)合成(S)-(+)-N-乙?；?2，4，6-三溴代-l-叔丁氧絲-5-甲H^色氨酸甲酯(5)向?qū)?9,3mg(0.09mmo1)的(S)-(+)-N-乙酰基-2，4，6-三溴代-5-甲氧基色氨酸甲酯(4)溶解于氯仿10.0mL而成的溶液中，加入將3.4mg(0.03mmo1)的二甲氨基吡啶及30.6mg(0.14mmo1)的二碳酸二叔丁酯溶解于1.0mL的氯仿而成的溶液，在室溫下攪拌30分鐘。在減壓下蒸餾除去反應(yīng)液，得到黃色油狀物。以硅膠為栽體、以氯仿-甲醇(99:1，v/v)混合溶劑為洗脫溶劑，用柱層析法純化，得到收率為57.5mg(98%)的目標(biāo)物(5)。mp126-128。C(無(wú)色針狀晶、由氯仿-己烷重結(jié)晶)IR(KBr):3435，1759，1732，1651，1396,1275，1159，1111cm1iH-匪R(CDC13)3:1.69(9H，s)，1.89(3H，s)，3.38(1H，dd,J=10.1，14.3Hz)，3.65(1H，dd，J-5.2，14.3Hz),3.75(3H，s)，3.卯(3H，s)，5.07(1H，ddd，J=5.2，8.5，10.1Hz，加入020變?yōu)閐d，J=5.2，10.1Hz),6.14(1H，brd，J=8.5Hz，加入020后消失)，8.39(1H，s)質(zhì)鐠m/z:630(M+)，628(M+),626(M+)，624(M+)元素分析計(jì)算值C20H23Br3N2O6:C，38.30;H，3.70;N，4.47;實(shí)測(cè)值C，38.18;H，3.74;N，4.45旋光度[aD24+3,3。(CHCl3,c=0.200)[實(shí)施例3由(S)-(+)-N-乙?；?2,4，6-三溴代-5-甲氧基色氨酸甲酯(4)合成(S)-(+)-N-乙?；?l-烯丙基-2，4,6-三溴代-5-甲緣色氨酸曱酯(6)向?qū)?9.8mg(0.08mmo1)的(S)-(+)-N-乙跣基-2，4，6-三溴代-5-甲氧基色氨酸甲酯(4)溶解于2.5mL的N，N-二甲基曱酰胺而成的溶液中，加入36.5mg(0.26mmo1)的碳酸鉀，再加入0.13mL(d=1.398，1.51mmol)的烯丙基溴，在室溫下攪拌30分鐘。向反應(yīng)液中加入水，用乙酸乙酯萃取。用飽和食鹽水洗涂有機(jī)相，用無(wú)7JC琉酸鈉干燥，然后，在減壓下蒸餾除去溶劑，得到黃色油狀物。以硅膠為載體，以氟仿為洗脫溶劑，用柱層析法純化，得到收率為42.4mg(99%)的目標(biāo)物(6)。mp191-192'C(無(wú)色針狀晶，由乙酸乙酯重結(jié)晶)IR(KBr):3303，1732，1645，1547，1228，1016cm1iH-匪R(CDC13)3:1.86(3H,s)，3.34(1H,dd，J-9.8，14.7Hz)，3.62(1H，dd，J=5.4，14.7Hz)，3.74(3H，s)，3.89(3H，s),4.75(2H，m)，4.83(1H，d,J=17.1Hz)，5.01(1H，ddd,J=5.4，8.7，9.8Hz，加入020后變?yōu)閐d，J=5.4，9.8Hz)，5.19(1H，d，J=10.3Hz)，5.86(1H，tdd，J=4.8，10.3，17.1Hz),6.12(1H，brd，J=8.7Hz，加入D20后消失)，7.41(1H，s)質(zhì)譜m/z:570(M+)，568(M+)，566(M+),564(M+元素分析計(jì)算值C18H19Br3N204:C,38.12;H，3.38;N，4.94;實(shí)測(cè)值C，37.97;H，3.43;N，4.86旋光度(Xd26+13.8o(CHC13，c=0.203)[實(shí)施例4由(S)-(+)-N-乙?；?2，4，6-三渙代-5-甲氧基色氨酸甲酯(4)合成(S)-(+)-N-乙?；?2，4，6-三溴代-5-甲氧基-l-炔丙基色氛酸甲酯(7)7向?qū)?3.6mg(0.04mmo1)的(S)-(+)-N-乙?；?2，4，6-三溴代-5-曱氧基色氨酸甲酯(4)溶解于2.0mL的N，N-二甲基甲酰胺而成的溶液中，加入21.6mg(0.16mmo1)的碳酸鉀，再加入0.08mL(d=1.335，0.9mmol)的炔丙基溴，在室溫下攪拌30分鐘。向反應(yīng)液中加入水，用乙酸乙酯萃取。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后，在減壓下蒸餾除去溶劑，得到粉紅色油狀物。以硅膠為載體，以氯仿為洗脫溶劑，用柱層析法進(jìn)行純化，得到收率為23.9mg(94%)的目標(biāo)物(7)。mp284-285。C(分解點(diǎn)、封管測(cè)定、無(wú)色針狀晶、由氯仿-甲醇重結(jié)晶)IR(KBr):3284，3224，2114，1724，1647，1552，1230，1016cm1H-匪R(DMSO-d6)5:1.82(3H,s)，3.28(1H，dd，J=7.1，14.9Hz)，3.33(1H，dd，J=8.7，14.9Hz)，3.33(1H，t，J=2.4Hz)，3.48(3H，s)，3.80(3H，s)，4，47(1H，ddd，J-7.1,7.1，8.7Hz,加入D20后變?yōu)閐d，J=7.1，8.7Hz)，5.13(2H，dt，J=2.4，4.2Hz)，8.02(1H，s)，8.44(1H，brd，J=7.1Hz,加入020后消失)質(zhì)鐠m/z:568(M+)，566(M+)，564(M+)，562(M+)元素分析計(jì)算值C18H17Br3N204:C，38.26;H，3.03;N，4.96;實(shí)測(cè)值C，38.11;H，3.12;N，4.83旋光度[")24+7.7。(DMSO，c-0.202)[實(shí)施例5由(S)-(+)-N-乙?；?2，4，6-三溴代-5-甲氧基色氨酸甲酯U)合成(S)-(+)-N-乙酰基-l-爺基-2，4，6-三溴代-5-甲ll^色氨酸甲酯(8)向?qū)?9.6mg(0.04mmo1)的(S)-(+)-N誦乙跣基-2，4,6畫(huà)三溴代-5-甲猛色氨酸曱酯(4)溶解于1.5mL的N，N-二甲基甲酰胺而成的溶液中，加入18.0mg(0.13mmo1)的碳酸鉀，再加入0.09mL(d=1.44，0.7mmol)的芐基溴，在室溫下攪拌30分鐘。向反應(yīng)液中加入水，用乙酸乙酯-甲醇(95:5，v/v)混合溶劑萃取。用飽和食鹽水洗涂有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后，在減壓下蒸餾除去溶劑，得到黃色油狀物。以硅膠為栽體、以氯仿-甲醇(99:1，v/v)混合溶劑為展開(kāi)溶劑，實(shí)施薄層色譜法，將Rf值為0.18^.29的帶用氯仿-曱醇(95:5，v/v)混合溶劑萃取，得到收率為22.0mg(96%)的目標(biāo)物(8)。mp226-227°C(無(wú)色針狀晶、由曱醇重結(jié)晶)IR(KBr):3298,1732，1643，1550，1414，1230，1018cnT11H-NMR(DMSO-d6)S:1.80(3H,s)，3.28(1H，dd，J-7.1,14.4Hz)，3.40(1H,dd，J=8.5，14.7Hz，加入020后顯現(xiàn))，3.47(犯，s)，3.79(3H，s)，4.55(1H,ddd，J=7.1，7.1,8.5Hz，加入020后變?yōu)閐d，J-7.1,8.5Hz)，5.53(2H，s)，6.96(2H,d,J=7.1Hz)，7.25(1H，t,J=7.1Hz)，7.31(2H，t,J=7.1Hz)，7.90(1H，s)，8.45(1H，d，J-7.1Hz，加入020后消失)質(zhì)i普m/z:620(M+)，618(M+)，616(M+)，614(M+)元素分析計(jì)算值C22H21Br3N204:C，42.82;H,3.43;N，4.54;實(shí)測(cè)值C，42.69;H，3.47;N,4.56旋光度aD24+8.3。(CHC13,c=0.204)[實(shí)施例6由(S)-(+)-N-乙酰基-2，6-二溴代-5-甲氧基色氨酸甲酯(2)，(S)-(+)-N-乙?；?2，4，7-三溴代-5-甲氧基色氨酸甲酯(3)的混合物，合成(S)-(+)-N-乙?；?2，6-二溴代-l-叔丁氧羰基-5-甲氧基色氨酸甲酯(9)以及分離化合物(3)向?qū)?3,3mg分離困難的化合物(2)，(3)(由NMR測(cè)得為1:2的存在比)的混合物溶解于10.0mL的氯仿而成的溶液中，加入將9.6mg(0.08mmo1，全部混合物視為三溴化物，為0.5當(dāng)量)的二甲氨基吡啶及68.9mg(0.31mmo1，全部混合物視為三溴化物，為2.0當(dāng)量)的二碳酸二叔丁酯溶解于1.0mL的氯仿中而成的溶液，在室溫下攪拌10小時(shí)。在減壓下蒸鋪除去反應(yīng)液，得到黃色油狀物。以硅膠為載體、以氯仿-甲醇(99:1,v/v)混合溶劑為洗脫溶劑實(shí)施珪膠柱層析法，按洗脫順序得到39.0mg的化合物(9)及62.0mg的化合物(3)。[化合物(3)mp218-220°C(無(wú)色棱晶、由氯仿-己烷重結(jié)晶)IR(KBr):3435,3303，1728，1653,1552cm1iH曙NMR(CDC13)6:1.87(3H，s),3,31(1H,dd,J=10.0,14.6Hz)，3.58(1H，dd，J=5.1，14.6Hz)，3.75(3H，s),3.91(3H，s)，5.00(1H,ddd,J=5.1，8.5，10.0Hz，加入020后變?yōu)閐d，J-5.1,10.0Hz)，6.12(1H，brd，J=8.5Hz，加入020后消失)，7.05(1H，s)，8.31(1H，brs,加入020后消失)質(zhì)鐠m/z:530(M+),528(M+),526(M+)，524(M+)元素分析計(jì)算值ClsHlsBr3N204:C,34.19;H，2.87;N,5.32;實(shí)測(cè)值C，34.00;H，2.91;N，5.22旋光度[alo24+5.1。(CHCl3，c=0.207)[化合物(9)無(wú)色油IR(薄膜)3286,2981，1743，1735，1654cm1^國(guó)匪R(CDC13)3:1.70(9H，s)，1.99(3H，s)，3.21(1H，dd，J=7.6，15.0Hz)，3.24(1H，dd，J=5.7，15.0Hz)，3.69(3H，s)，3.97(3H，s)，4.85(1H，dt，J=5.7，7.6Hz，加入020后變?yōu)閐d,J=5.7，7.6Hz),6.15(1H，brd，J=7.6Hz，加入020后消失)，7.17(1H，s)，8.32(1H，s)高分辨質(zhì)譜m/z:元素分析計(jì)算值C20H24Br2N2O6:549.9960(M+)，547.9981(M+)，546.0011(M+);實(shí)測(cè)值549.9932，547.9963，546.0003旋光度[(xId24+12.9。(CHC13，c-0.210)[實(shí)施例7J由(S)-(+)-N-乙?；?2，6-二溴代-l-叔丁氧羰基-5-甲氧基色氨酸曱酯(9)合成(S)-(十)-N-乙酰基-2，6-二溴代-5-甲猛色氨酸甲酯(2)92向?qū)?8.3mg(0.03mmo1)的(S)-(十)-N-乙酰基-2,6-二溴代-l-叔丁氧羰基-5-甲氧基色氨酸曱酯(9)溶解于3.2mL的氯仿而成的溶液中，在冰水冷卻下加入0.8mL的三氟乙酸使之成為10。/o溶液。再在室溫下攪拌12小時(shí)。向反應(yīng)液中加入氯仿，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機(jī)相。再用飽和食鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后，在減壓下蒸餾除去溶劑，得到無(wú)色油狀物。以珪膠為載體、以氯仿-甲醇(99:1，v/v)混合溶劑為洗脫溶劑實(shí)施柱層析法，得到10,3mg(70%)的化合物(2)。mp174-175°C(無(wú)色棱晶、由甲醇-水重結(jié)晶)IR(KBr):3363，1745，1716，1660，1647cm1，IR(CHC1〗)1739，1674cm1iH畫(huà)匪R(CDC13)8:1.98(3H，s)，3.21(1H,dd，J=4.6,14.0Hz)，3.24(1H，dd，J=4,6，14.0Hz)，3.70(3H，s)，3.93(3H，s)，4.90(1H，dt，J-7.6,4.6Hz，加入DzO后變?yōu)閠，J-4.6Hz),6.05(1H，brd，J=7.6Hz，加入020后消失)，7.07(1H，s)，7.48(1H,s),8.01(1H，br，加入D20后消失)質(zhì)傳m/z:450(M+)，448(M+)，446(M+)元素分析計(jì)算值ClsH16Br2N204:C，40.20;H，3.60;N,6.25;實(shí)測(cè)值C，40.27;H，3.71;N，6.17旋光度[ai)27+12.00(MeOH，c=0.217)實(shí)施例8色氨酸衍生物對(duì)骨細(xì)胞的影響試驗(yàn)才艮據(jù)N.Suzuki,andA.Hattori，J.PinealRes.，^，253-258(2002)所述的方法，試驗(yàn)研究色氨酸衍生物對(duì)骨細(xì)胞的影響。將雌金魚(yú)(體重30g左右)用MS222(3-氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽)(Aldrich)麻醉，剝離指定片數(shù)的魚(yú)鱗。將該魚(yú)鱗用含有1%抗生素(青霉素-鏈霉素混合物)的Eagles的最少蜂養(yǎng)液(大日本制藥制)洗滌2次。將相同的培養(yǎng)液以lml/孔，分別注入到24孔的培養(yǎng)板中，向每孔中加入上述魚(yú)鱗多片(通常為8片)，同時(shí)，向各孔中分別加入10"M的色氨酸衍生物。然后，將之在25。C下培養(yǎng)6小時(shí)。另外，制作了不添加色氨酸衍生物的組(對(duì)照組)，用來(lái)比較對(duì)骨細(xì)胞的作用。此時(shí)，設(shè)定了破骨細(xì)胞用和成骨細(xì)胞用的2組。即，制做了對(duì)照組、1(^M的色氨酸衍生物(各有2孔)的合計(jì)4孔。因此，在24孔板中可配制6種色氨酸衍生物。培養(yǎng)后，除去培養(yǎng)液，加入混有10。/o福爾馬林的0.05M二甲胂酸緩沖液(pH7.4)，進(jìn)行固定。在測(cè)定酶活性之前，將該魚(yú)鱗在4。(下*于0.05M二甲胂酸緩沖液中。(1)破骨細(xì)胞所受到的影響抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活性測(cè)定取出實(shí)施了上述固定處理的魚(yú)鱗，測(cè)定魚(yú)鱗的重量。測(cè)定后，將魚(yú)鱗裝入96孔的微板中，分別向各孔中加入混有20mM酒石酸及10mM磷酸對(duì)硝基苯酚(底物)的lOOmM乙酸緩沖液(pH5.3)200^1，在25'C下反應(yīng)20分鐘，然后加入3mol氫氧化鈉水溶液(50^1)使反應(yīng)終止。然后，將反應(yīng)終止液100fil轉(zhuǎn)移到另外的微板中，用分光光度計(jì)(405nm)測(cè)定由TRAP產(chǎn)生的對(duì)硝基苯酚(p-NP)的量。破骨細(xì)胞的活性表示為每lg魚(yú)鱗l分鐘內(nèi)分解磷酸對(duì)硝基苯酚所產(chǎn)生的p-NP的量。結(jié)果示于表l。[表ljTRAP活性<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>0.700±0.041***p<0.001(2)成骨細(xì)胞受到的影響堿性磷酸酶(ALP)活性測(cè)定取出實(shí)施了上述固定處理的魚(yú)鱗，測(cè)定魚(yú)鱗的重量。測(cè)定后，將魚(yú)鱗裝入96孔的孩吏板中，分別向各孔中加入混有10mM磷酸對(duì)硝基苯酚(底物)、lmM氯化鎂及O.lmM氯化鋅的lOOmM的Tris-HCl緩沖液(pH9.5)200nl，在25。C下反應(yīng)15分鐘，加入3mol氬氧化鈉水溶液(50nl)使反應(yīng)終止。然后，將反應(yīng)終止液100pl轉(zhuǎn)移到另外的微板中用分光光度計(jì)(405nm)測(cè)定由ALP產(chǎn)生的p-NP的量，求出活性。結(jié)果示于表2。CH30NHCOCH3COOCH3[表2jALP活性色氨酸衍生物濃度(M)對(duì)硝基苯酚產(chǎn)生量(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差)(nmol/g魚(yú)鱗/分鐘)化合物編號(hào)R1R3R5R64HBrBrH1062.62士0.20錫5BocBrBrH1062.48±0.42*6CH2=CH-CH2-BrBrH1062.39±0.40*7CHeC-CH2-BrBrH2.50±0.518千基BrBrH1.71±0.32黑色素1061.06±0.17*對(duì)照組(未添加)1.37±0.18p<0.05**頭p<0.001由表1和表2可知，相對(duì)于黑色素對(duì)破骨細(xì)胞及成骨細(xì)胞兩者均有抑制作用，本發(fā)明的色氨酸衍生物卻具有成骨細(xì)胞活化作用。由此結(jié)果可知，由本發(fā)明的色氨酸衍生物可獲得優(yōu)良的骨質(zhì)疏松癥治療藥。本說(shuō)明書(shū)中引用的全部刊物、專利、專利申請(qǐng)均直接參照原文而引用到本說(shuō)明書(shū)中。產(chǎn)業(yè)實(shí)用性本發(fā)明可用于骨質(zhì)疏松癥治療藥、成骨細(xì)胞活化劑等醫(yī)藥領(lǐng)域。權(quán)利要求1.下式(I)表示的化合物或其鹽，式中，X表示鹵原子；R1表示氫原子、取代或非取代的C1-6-烷基、取代或非取代的C2-6-烯基、取代或非取代的C2-6-炔基、取代或非取代的芳基、取代或非取代的芳烷基、取代或非取代的?；⑷〈蚍侨〈姆蓟酋；?、取代或非取代的C1-6-烷基磺?；?、取代或非取代的C2-7-烷氧羰基、或羥基；R2表示取代或非取代的C1-21-烷基；R3、R5及R6相同或不同，表示氫原子或鹵原子；R4表示氫原子、或者取代或非取代的C1-6-烷基；R7表示氫原子、或者取代或非取代的C1-21-烴基。2.權(quán)利要求l所述的式(I)表示的化合物或其鹽，其中，X為溴原子、W為氫原子、取代或非取代的Cw-烷基、取代或非取代的C^烯基、取代或非取代的Cw炔基、取代或非取代的芳基、取代或非取代的芳烷基、取代或非取代的酰基、取代或非取代的芳基磺?；?、取代或非取代的Cw烷基磺?；⒒蛘呷〈蚍侨〈?lt;:2.7-烷氧羰基、W為曱基、r3、rS及R目同或不同，為氫原子或溴原子、r"為甲基、r"為C^-烷基。3.醫(yī)藥組合物，含有權(quán)利要求1或2所述的化合物或其藥學(xué)上可容許的鹽作為有效成分。4.骨質(zhì)疏松癥治療藥，含有權(quán)利要求1或2所述的化合物或其藥學(xué)上可容許的鹽作為有效成分。5.成骨細(xì)胞活化劑，含有權(quán)利要求1或2所述的化合物或其鹽。全文摘要本發(fā)明提供一種使成骨細(xì)胞活化的色氨酸衍生物及使用該色氨酸衍生物的骨質(zhì)疏松癥治療藥、成骨細(xì)胞活化劑。即，本發(fā)明提供式(I)表示的化合物或其鹽、以及含有式(I)所示化合物或其鹽的骨質(zhì)疏松癥治療藥及成骨細(xì)胞活化劑。(式中，X表示鹵原子；R¹表示氫原子、取代或非取代的C_1-6-烷基、取代或非取代的C_2-6-烯基、取代或非取代的C_2-6-炔基、取代或非取代的芳基、取代或非取代的芳烷基、取代或非取代的?；⑷〈蚍侨〈姆蓟酋；?、取代或非取代的C_1-6-烷基磺?；?、取代或非取代的C_2-7-烷氧羰基、或羥基；R²表示取代或非取代的C_1-21-烷基；R³、R⁵及R⁶相同或不同，表示氫原子或鹵原子；R⁴表示氫原子、或者取代或非取代的C_1-6-烷基；R⁷表示氫原子、或者取代或非取代的C_1-21-烴基。)文檔編號(hào)C07D209/30GK101233105SQ20068002661公開(kāi)日2008年7月30日申請(qǐng)日期2006年6月29日優(yōu)先權(quán)日2005年7月20日發(fā)明者服部淳彥,染井正德,鈴木信雄申請(qǐng)人:染井正德;服部淳彥;鈴木信雄