專利名稱：表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒?br> 技術領域：
本發(fā)明涉及一種以茶葉提取物表沒食子兒茶素沒食子酸酯為原料制備其乙酰化物的方法。
背景技術：
茶葉作為我國重要的經(jīng)濟作物和出口創(chuàng)匯產(chǎn)品，在精深加工方面得到了較多研究，尤其 是茶葉中特征性功能成分——茶多酚的開發(fā)利用。茶多酚在醫(yī)藥、保健方面上功效突出，有 抗氧化、清除自由基、抗衰老、抗癌、抗突變、抗菌、抗齲齒、抗HIV病毒等方面的藥理作 用，其最主要的活性組分為表沒食子兒茶素沒食子酸酯(簡稱EGCG)，其結構式如下
々W
OH
(-)-EGCG 。
EGCG的生物活性是茶葉抗氧化、清除自由基、抗衰老、抗癌、健身、健齒防齲、清理腸 道等的重要依據(jù)，也是開發(fā)EGCG類保健產(chǎn)品、藥品的理論基礎。但是，美國、日本等科學家 研究發(fā)現(xiàn)，EGCG雖然可以進入體液循環(huán)和體內器官中起著生物活性，但真TH進入體液循環(huán)和 體內器官的量并不多，并且穩(wěn)定性不高，也就是說生物利用度不高。如果能夠提高EGCG類化 合物的生物利用度，其利用價值將為更高。
根據(jù)美國、日本的最新研究，發(fā)現(xiàn)EGCG全乙酰化物是其中具有發(fā)展前景的化合物之一， 可以有效地提高EGCG的生物利用度。因而，EGCG的乙?；镌谑称?、飲料、醫(yī)藥和保健品 等行業(yè)具有廣泛的應用前景，其產(chǎn)品的開發(fā)大有市場潛力。
但是，有關EGCG乙?；锏难芯?，目前國際上還處于功能性確證的動物實驗階段；有關 實驗中所使用的化合物，均為EGCG全(八)乙?；铩嶋H上，EGCG的乙酰化物種類極多， 其分子結構式中可發(fā)生乙?；牧u基有8個，可以組合形成不同乙?；潭鹊囊阴；?。在 不同乙?；潭鹊腅GCG乙?；镏?，其化學性質與生物活性差別較大，有可能不同乙酰化程
度的化合物活性反而更好。有關不同乙?；潭鹊腅GCG乙?；锏闹苽浞椒ê彤a(chǎn)品開發(fā)等研
究，國內外均未涉及。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是克服上述現(xiàn)有EGCG產(chǎn)品的生物利用度不高的缺陷，提供一 類EGCG乙酰化物的制備方法，以合成并分離純化得到不同乙酰化程度的EGCG乙?；?單 乙?；涟艘阴；?單一物或混合物，使茶葉中的有效成分EGCG能夠得到更為充分、有效的 利用，提高茶葉的利用價值。
本發(fā)明的技術方案如下表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)乙酰化物的制備方法，其 步驟如下以表沒食子兒茶素沒食子酸酯為反應底物，乙酸酐為乙酰供體，吡啶為催化劑， 醇類、酯類或酮類有機溶劑為反應介質，化學合成得表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏?單一物或混合物溶液，除去有機溶劑。本發(fā)明采用的化學合成方法能夠有效地將EGCG進行不 同程度乙?；奶幚?，形成各種不同乙?；潭鹊腅GCG乙?；锏膯我晃锘蚧旌衔?。
不同乙?；潭鹊腅GCG乙?；?R=H或者Ac， Ac為乙?；鶊F)<formula>formula see original document page 4</formula>
EGCG全乙?；?EGCG八乙?；?(全部I^Ac)
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所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒?，所述的醇類有機溶劑為甲醇、 乙醇或丙醇，酯類有機溶劑為乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸甲酯，酮類有機溶劑為丙酮、丁酮、 戊酮或甲基異戊酮。
所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒?，化學合成時的反應時間為 10min 24hr,反應溫度為10'C 50'C。
所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒?，所得的沒食子兒茶素沒食子酸
酯乙酰化物為表沒食子兒茶素沒食子酸酯的單乙?；?、二乙酰化物、三乙?；?、四乙酰 化物直至八乙?；锏娜我环N單一物或任二種以上的混合物。
所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒?，制備低乙?；潭?單乙?；?至四乙?；?的條件為醇類溶劑條件下反應10min 90min，或者，酯類或酮類溶劑條件下 反應60min 12hr;制備高乙?；潭?四乙酰化至八乙?；?的條件為醇類溶劑條件下 反應60min 15hr,或者，酯類或酮類溶劑條件下反應8hr 24hr。本發(fā)明通過反應介質一溶 劑和反應時間的恰當組合，按照需要調節(jié)表沒食子兒茶素沒食子酸酯的乙?；潭?，從而可 以得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏膯我晃锘蚧旌衔?。
所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒?，由各種不同乙?；潭鹊谋頉] 食子兒茶素沒食子酸酯乙酰化物組成的混合物的分離純化步驟為采用葡聚糖凝膠S印hadex LH-20、聚酰胺或硅膠材料裝入層析柱，將混合物流經(jīng)層析柱，然后用不同濃度的洗脫溶劑進 行洗脫分離，收集不同組分的洗脫液，在低溫真空條件下進行濃縮。
所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒?，所述的洗脫溶劑為甲醇、乙醇、 丙酮或乙酸乙酯水溶液。
所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒?，所述的濃縮條件溫度為30 7(TC，真空度《0. lban結晶條件用溶劑乙醇或其與乙醚的混合溶液，溶解所得的濃縮物， 在《10'C下結晶；干燥條件溫度《-IO'C,真空度《0.5mbar。
本發(fā)明具有以下有益效果采用的化學合成方法能夠有效地將EGCG進行不同程度乙?；?的處理，形成各種不同乙?；潭鹊腅GCG乙?；铮煌ㄟ^葡聚糖凝膠S印hadex LH-20、聚 酰胺或硅膠材料處理，能夠分離純化出不同的EGCG乙?；飭误w，使EGCG的生物利用度得 以有效提高，從而提高了 EGCG的利用價值，充分利用了茶葉資源，提高提取茶葉所能帶來的 經(jīng)濟效益。
具體實施例方式
實施例1
稱取100 g EGCG，以10 L乙醇進行溶解，加入100 ml乙酸酐，加入100 ml吡啶，室 溫條件反應10小時，反應結束后加水l L，在50'C、真空度《0. 1 bar的條件下濃縮，再經(jīng) 冷凍干燥處理，溫度《-20'C、真空度《0.5mbar的條件下可以得到EGCG乙?；锂a(chǎn)品95g， 其中含有高乙?；铮珽GCG四、五、六、七、八(全)乙?；锏瘸煞?。
實施例2
稱取100 g EGCG，以10 L甲醇進行溶解，加入100 ml乙酸酐，加入100 ml吡啶，20 'C條件反應20分鐘，反應結束后加水l L，在55'C、真空度《0. 1 bar的條件下濃縮，再經(jīng) 冷凍干燥處理，溫度《-2CTC、真空度《0. 5mbar的條件下可以得到EGCG乙?；锂a(chǎn)品91g， 其中含有EGCG單乙?；?、EGCG二乙?；?、EGCG三乙酰化物、EGCG四酰化物等成分。
實施例3
稱取100 g EGCG，以10 L乙酸乙酯進行溶解，加入100 ml乙酸酐，加入100 ml吡啶， 30'C條件反應16小時，反應結束后加水l L，在35'C、真空度《0. 1 bar的條件下濃縮，再 經(jīng)冷凍干燥處理，溫度《-20'C、真空度《0. 5mbar的條件下可以得到EGCG乙酰化物產(chǎn)品93g， 其中含有高乙酰化物，EGCG四、五、六、七、八(全)乙?；锏瘸煞?。
實施例4
稱取100 g EGCG，以10 L丙酮進行溶解，加入100 ml乙酸酐，加入100 ml吡啶，25 'C條件反應4小時，反應結束后加水l L，在30'C、真空度《0. 1 bar的條件下濃縮，再經(jīng) 冷凍干燥處理，溫度《-20'C、真空度《0.5mbar的條件下可以得到EGCG乙?；锂a(chǎn)品90g， 其中含有EGCG單乙?；铩GCG二乙?；铩GCG三乙?；?、EGCG四?；锏瘸煞帧?br> 實施例5
稱取1000 g EGCG,以100 L乙醇進行溶解，加入500 ml乙酸酐，加入50 ml吡啶，室 溫條件反應4小時，反應結束后加水5 L，在50'C、真空度《0. 1 bar的條件下濃縮。
取S印hadex LH-20凝膠，裝柱，以乙醇水溶液洗漆并飽和。上述濃縮液緩慢通過S印hadex LH-20層析柱，然后分別以30%、 50%、 80%濃度的乙醇水溶液洗脫，收集不同部分洗脫液。將 含有不同乙?；潭鹊腅GCG乙酰化物溶液，分別進行濃縮、結晶、干燥處理。在50'C、真 空度《0. 1 bar的條件下濃縮；溫度《-40'C、真空度《0. 5 mbar的條件下冷凍干燥處理；可 以得到EGCG高乙?；锏膯误w產(chǎn)品210g，其中分別為EGCG八(全)乙?；飭误w、EGCG七 乙?；飭误w、EGCG六乙酰化物單體、EGCG五乙?；飭误w。
本發(fā)明的保護范圍并不限于上述實施例，凡與本發(fā)明的技術方案相同或等同的技術內容 均落入本發(fā)明的保護范圍內。
權利要求
1、表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙酰化物的制備方法，其步驟如下以表沒食子兒茶素沒食子酸酯為反應底物，乙酸酐為乙酰供體，吡啶為催化劑，醇類、酯類或酮類有機溶劑為反應介質，化學合成得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙酰化物的單一物或混合物溶液，除去有機溶劑。
2、 根據(jù)權利要求l所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒?，其特征在于 所述的醇類有機溶劑為甲醇、乙醇或丙醇，酯類有機溶劑為乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸甲酯， 酮類有機溶劑為丙酮、丁酮、戊酮或甲基異戊酮。
3、 根據(jù)權利要求1或2所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙酰化物的制備方法，其特征 在于化學合成時的反應時間為10min 24hr,反應溫度為10'C 5O'C。
4、 根據(jù)權利要求3所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙酰化物的制備方法，其特征在于 所得的沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；餅楸頉]食子兒茶素沒食子酸酯的單乙?；?、二乙 ?；?、三乙?；铩⑺囊阴；镏敝涟艘阴；锏娜我环N單一物或任二種以上的混合物。
5、 根據(jù)權利要求4所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟?制備單乙?；镏了囊阴；锏臈l件為醇類溶劑條件下反應10min 90min，或者，酯類或 酮類溶劑條件下反應60min 12hr;制備四乙?；镏涟艘阴；锏臈l件為醇類溶劑條件 下反應60min 15hr，或者，酯類或酮類溶劑條件下反應8hr 24hr。
6、 根據(jù)權利要求5所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙酰化tf的制備方法，其特征在于 由各種不同乙酰化程度的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锝M成的混合物的分離純化步 驟為釆用葡聚糖凝膠S印hadex LH-20、聚酰胺或硅膠材料裝入層析杜，將混合物流經(jīng)層析 柱，然后用不同濃度的洗脫溶劑進行洗脫分離，收集不同組分的洗脫液，在低溫真空條件下 進行濃縮。
7、 根據(jù)權利要求6所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙酰化物的制備方法，其特征在于 所述的洗脫溶劑為甲醇、乙醇、丙酮或乙酸乙酯水溶液。
8、 根據(jù)權利要求6所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟?所述的濃縮條件溫度為30 70'C，真空度《0. lbar;結晶條件用溶劑乙醇或其與乙醚的 混合溶液，溶解所得的濃縮物，在《10'C下結晶；干燥條件溫度《-l(TC，真空度《0.5mbar。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種以茶葉提取物表沒食子兒茶素沒食子酸酯為原料制備其乙?；锏姆椒ā，F(xiàn)有的表沒食子兒茶素沒食子酸酯的生物利用度不高，使茶葉的利用價值受到限制。本發(fā)明以表沒食子兒茶素沒食子酸酯為反應底物，乙酸酐為乙酰供體，吡啶為催化劑，醇類、酯類或酮類有機溶劑為反應介質，化學合成得表沒食子兒茶素沒食子酸酯乙?；锏膯我晃锘蚧旌衔锶芤?，除去有機溶劑。本發(fā)明制得各種不同乙?；潭鹊腅GCG乙?；锏膯我晃锘蚧旌衔?，提高了茶葉的利用價值。
文檔編號C07D311/04GK101190910SQ20061015497
公開日2008年6月4日 申請日期2006年11月29日 優(yōu)先權日2006年11月29日
發(fā)明者江和源 申請人:江和源