專利名稱：一種長春堿和長春新堿的純化方法
技術領域：
本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物化學領域，特別是一種抗癌植物長春花的粗提物中的有效成分——長春堿、長春新堿的分離和精制工藝。
背景技術：
長春堿(Vinblastine，VLB)、長春新堿(Vincristine，VCR)是夾竹桃科植物長春花中的有效成分。硫酸長春堿(Vinblastine Sulfate)為國家基本藥物，主要適用于治療霍其金病及惡性淋巴瘤，亦可用于治療絨毛膜上皮癌與乳腺癌等癥。硫酸長春新堿(Vincristine Sulfate)，為國家基本藥物，主要適用于治療急性白血病及霍其金病、惡性淋巴瘤、小細胞肺癌及乳腺癌等，也可用于乳腺癌、支氣管肺癌、軟組織肉瘤，睪丸腫瘤、卵巢癌、消化道癌及惡性循環(huán)性黑色素瘤及神經(jīng)母細胞瘤等。硫酸長春堿、硫酸長春新堿等已廣泛應用于臨床，是目前國際上應用最廣泛的天然植物抗癌藥物之一。
迄今為止，我國只有報道長春堿提取的專利，而對于長春堿分離精制的專利未見專門報道。目前我國只有少數(shù)長春花提取物生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的長春堿的純度能夠達到國際標準，但其生產(chǎn)成本相當高昂，耗費大量的原料，降低了企業(yè)的利潤；而多數(shù)廠家則生產(chǎn)純度要求不高的長春堿原料藥或長春堿粗品，產(chǎn)品純度不足95％，不能滿足國際市場對高純度長春堿(≥98％)的需求，長春堿得率也低于30％，降低了其工業(yè)化生產(chǎn)的價值，造成了很大的浪費，在客觀上加大了生產(chǎn)成本，同時也降低了產(chǎn)品的國際競爭力。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種長春堿、長春新堿的分離方法，來生產(chǎn)高純度、高得率的長春堿和長春新堿。
為了達到上述目的，本發(fā)明采用的技術方案包括將長春花粗提物經(jīng)?；磻笳{(diào)pH＝6-10，再經(jīng)紫外光照射，然后用連續(xù)重結晶法分離，得到純度≥98％的硫酸長春堿，再將重結晶所用的母液減壓濃縮，將濃縮品經(jīng)柱層析純化，并分段收集，得到長春堿、長春新堿。所述的酰化反應是用酸和酸酐的組合溶液來完成的。所述紫外照射是用波長為210-390nm，照射劑量為5-20w/m2，照射時間為10-45分鐘。所述的?；磻c紫外照射的步驟可互換，即亦可先進行紫外輻射，再進行酰化反應。所述的重結晶的溶劑為甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等溶劑的一種或其中幾種的混合。所述的重結晶的溶液的濃度為75-100％。所述的柱層析的填料為硅膠或氧化鋁，柱層析的洗脫方式采用梯度洗脫，柱層析的洗脫劑為氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、石油醚、正己烷、甲醇、乙醇中的一種或其中幾種的梯度配比溶液。還可以將經(jīng)酰化反應的長春花粗提物直接用柱層析法分離，分段收集，減壓蒸干洗脫劑后，得到長春堿、長春新堿，再經(jīng)過重結晶得到純度≥98％的長春堿和長春新堿。
本發(fā)明的優(yōu)點是1.本發(fā)明改變了傳統(tǒng)的生產(chǎn)工藝，通過酰化反應和紫外光照反應將長春新堿的含量由原來的不足2％提高到8-10％，長春堿的含量由60％提高到65-75％，同時也提高了長春堿和長春新堿的純度，采用本工藝所得到的各種長春花堿的純度≥98％，符合國際標準。
2.本發(fā)明具有方法流程簡單，操作簡便易行，工藝實用、方便，能耗少，安全可靠，生產(chǎn)成本低，適合于較大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式下面對本發(fā)明實施作進一步詳細描述將長春花粗提物經(jīng)?；磻笳{(diào)pH＝6-10，再經(jīng)紫外光照射，然后用連續(xù)重結晶法分離，得到純度≥98％的硫酸長春堿，再將重結晶所用的母液減壓濃縮，將濃縮品經(jīng)柱層析純化，并分段收集，得到長春堿、長春新堿。所述的?；磻怯盟岷退狒慕M合溶液來完成的。所述紫外照射是用波長為210-390nm，照射劑量為5-20w/m2，照射時間為10-45分鐘。所述的?；磻c紫外照射的步驟可互換，即亦可先進行紫外輻射，再進行?；磻Ｋ龅闹亟Y晶的溶劑為甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等溶劑的一種或其中幾種的混合。所述的重結晶的溶液的濃度為75-100％。所述的柱層析的填料為硅膠或氧化鋁，柱層析的洗脫方式采用梯度洗脫，柱層析的洗脫劑為氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、石油醚、正己烷、甲醇、乙醇中的一種或其中幾種的梯度配比溶液。還可以將經(jīng)?；磻拈L春花粗提物直接用柱層析法分離，分段收集，減壓蒸干洗脫劑后，得到長春堿、長春新堿，再經(jīng)過重結晶得到純度≥98％的長春堿和長春新堿。
下面，本發(fā)明將用實施例進行進一步的說明，但是它并不限于這些實施例的任一個或類似實例。
實施例1長春花粗提物10g(約含硫酸長春堿60％，硫酸長春新堿1.2％)，加入25mL甲酸和乙酸酐(1.5∶1)的混合溶劑，反應1.5h后，氨水調(diào)pH＝8，用波長為366nm的紫外線照射，照射劑量為5w/m2，照射時間為15min，反應完畢后用三倍量的二氯甲烷萃取，濃縮至干，溶于20ml水中，用10％的硫酸乙醇溶液酸化后，倒入沸騰的無水乙醇600ml溶解，冷卻析晶，過濾，濾餅真空干燥，再溶于60℃95％乙醇溶液中，冷卻析晶，過濾，濾餅真空干燥，得硫酸長春堿2.43g(98.4％)。將重結晶母液濃縮后用硅膠柱層析分離，分別用石油醚∶二氯甲烷(10-1∶5-10)、二氯甲烷∶甲醇(99-80∶1-20)梯度洗脫，分段收集，得硫酸長春堿3.21g(98.21％)、硫酸長春新堿0.52g(98.33％)。
實施例2
長春花粗提物10g(約含硫酸長春堿60％，硫酸長春新堿1.3％)，甲醇和80％的乙醇溶液溶解后，氨水調(diào)pH＝8，用波長為254nm的紫外線照射，照射劑量為10w/m2，照射時間為12min，加入30mL甲酸和乙酸酐(1∶1)的混合溶劑，反應0.5h后，氨水調(diào)pH＝9，300ml二氯甲烷萃取，濃縮至干，堿性氧化鋁柱層析分離，分別用石油醚∶二氯甲烷(10-1∶5-10)、二氯甲烷∶甲醇(99-80∶1-20)梯度洗脫，分段收集，濃縮至干后，得到長春堿和長春新堿，再經(jīng)重結晶得到長春堿5.73g(98.51％)、長春新堿0.58g(98.2％)。
權利要求
1.一種長春堿和長春新堿的純化方法，其特征在于將長春花粗提物經(jīng)?；磻笳{(diào)pH＝6-10，再經(jīng)紫外光照射，然后用連續(xù)重結晶法分離，得到純度≥98％的硫酸長春堿，再將重結晶所用的母液減壓濃縮，將濃縮品經(jīng)柱層析純化，并分段收集，得到長春堿、長春新堿。
2.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，其中所述的?；磻怯盟岷退狒慕M合溶液來完成的。
3.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，其中所述的紫外照射是用波長為210-390nm，照射劑量為5-20w/m2，照射時間為10-45分鐘。
4.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，其中所述的?；磻c紫外照射的步驟可互換，即亦可先進行紫外輻射，再進行?；磻?。
5.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，其中所述的重結晶的溶劑為甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等溶劑的一種或其中幾種的混合。
6.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，其中所述的重結晶的溶液的濃度為75-100％。
7.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，其中所述的柱層析的填料為硅膠或氧化鋁，柱層析的洗脫方式采用梯度洗脫，柱層析的洗脫劑為氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、石油醚、正己烷、甲醇、乙醇中的一種或其中幾種的梯度配比溶液。
8.根據(jù)權利要求1所述的工藝方法，還可以將經(jīng)?；磻拈L春花粗提物直接用柱層析法分離，分段收集，減壓蒸干洗脫劑后，得到長春堿、長春新堿，再經(jīng)過重結晶得到純度≥98％的長春堿和長春新堿。
全文摘要
一種長春堿和長春新堿的純化方法，它是將長春花粗提物經(jīng)?；磻笳{(diào)pH＝6－10，再經(jīng)波長為210－390nm，照射劑量為5－20w/m
文檔編號C07D471/18GK1724539SQ20051001017
公開日2006年1月25日 申請日期2005年7月13日 優(yōu)先權日2005年7月13日
發(fā)明者祖元剛, 楊磊, 羅猛, 祖柏實, 李慶勇, 付玉杰, 劉莉娜, 牟璠松, 田 浩, 趙文灝, 王俐, 施曉光, 王磊 申請人:東北林業(yè)大學, 祖元剛