專利名稱：合歡皂甙衍生物的化學合成的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于有生物活性的皂甙衍生物的制備領域。
合歡皂甙是豆科植物合歡(Albizzia Julibrissin Durazz.)莖皮的藥效成份，中國藥點一部(1995年版)記載合歡皮有解郁安神、活血消腫的功能，用于心神不安、憂郁失眠、肺癰瘡腫、跌撲傷痛等癥。日本學者報道合歡皂甙J1還具有抑制腫瘤的細胞毒活性。這些合歡皂甙的結構共性是都含有一個結構為α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→4)-[β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖的四糖。該四糖以酯連接的方式接在金合歡酸的28位。結構與功能的關系研究表明若水解掉上述四糖，合歡皂甙就同時喪失其生理活性(參見文獻T Nohara et al，J.Nat.Prod.1997，60，102-107)。由此可知該四糖是合歡皂甙藥性不可或缺的成分。
本發(fā)明的目的在于提供一種簡易的合歡皂甙衍生物的化學合成法。核心是用部分苯甲?；奶腔纫阴啺孵スw與膽固醇等配糖體偶聯(lián)可得到高產(chǎn)率、立體專一的單糖皂甙衍生物，以它們?yōu)槠鹗嘉?，能簡易而有效地合成各種皂甙化合物。同時，本發(fā)明的合成策略也解決了傳統(tǒng)皂甙合成過程中，在缺乏鄰基參與效應的情況下(與配糖體相連的單糖上2-位接有其它寡糖)，無法控制配糖體糖苷鍵立體選擇性的矛盾。
本發(fā)明的合成方法在于1.用部分苯甲?；奶腔纫阴啺孵?為供體與膽固醇等配糖體偶聯(lián)，可得到高產(chǎn)率、立體專一的單糖皂甙衍生物4。該皂甙衍生物的糖基化位點用乙?；R時保護，用3％乙酰氯的二氯甲烷-甲醇(1∶1)混合液處理，可選則性地脫除乙?；?，得2-OH的皂甙衍生物5。
2.全苯甲?；陌⒗秽腔纫阴啺孵?與4位為游離羥基的α-L-鼠李吡喃糖苷7進行標準糖基化反應，高產(chǎn)率地得到雙糖8。
3.將雙糖糖苷8用90％三氟乙酸水溶液處理，可得二醇化合物9。將9在二氯甲烷-吡啶-苯甲酰氯中，區(qū)域選擇性地單苯甲?；没衔?0。10與全乙?；钠咸烟腔纫阴啺孵?1進行標準糖基化反應，得到三糖糖苷12。三糖糖苷12經(jīng)過脫除1位烯丙基、活化異頭碳羥基，可制得三糖供體15。
4.三糖供體15與單糖皂甙受體5進行糖基化反應，得到全酰化的合歡皂甙衍生物16。
5.用甲醇鈉的甲醇溶液或氨氣的甲醇溶液脫除16所有的?；Ｗo基，得到合歡皂甙衍生物17。
6.所述的(標準)糖基化反應，是指以無水二氯甲烷、乙腈、甲苯或乙醚為溶劑，以三甲基硅三氟甲磺酸酯(TMSOTf)或三氟化硼乙醚溶液為催化劑，反應溫度為-42-零度。
7.所合成的合歡皂甙衍生物17對P388(鼠白血癥)表現(xiàn)出較好的細胞毒活性(GI50＝22.5微克/毫升)。 下面結合實施例對本發(fā)明進行詳細的說明。(1)2-氧-乙?；?3，4，6-三-氧-苯甲?；?β-D-葡萄吡喃糖基膽固醇甙4的合成1.05當量的葡萄糖供體2與受體膽固醇3(2克，5.17毫摩爾)在0℃下、20毫升二氯甲烷中以TMSOTf(100微升，0.55毫摩爾)為催化劑進行糖基化反應3小時后，加入1.0毫升的三乙胺中和，經(jīng)常規(guī)處理和柱層析分離后得膽固醇甙4(4.24克，91％)。[α]D25-15°(c1，CHCl3)；1HNMR(CDCl3)δ3.52(m，1H，OCH)，4.06(m，1H，H-5)，4.47(dd，1H，J5，6a6.0，J6a，6b12.0Hz，H-6)，4.56(dd，1H，J5，6b3.2Hz，H-6)，4.79(d，1H，J1，27.9Hz，H-1)，5.23(dd，1H，J2，39.7Hz，H-2)，5.35(bd，1H，＝CH)，5.55(t，1H，J4，59.7Hz，H-4)，5.71(t，1H，J3，49.7Hz，H-3)，7.30-8.00(m，15H，Ph).(2)3，4，6-三-氧-苯甲?；?B-D-葡萄吡喃糖基膽固醇甙5的合成將葡萄糖的膽固醇甙4(1克，1.1毫摩爾)溶于35毫升二氯甲烷-甲醇(1∶1)混合液中，滴加1.2毫升乙酰氯。室溫攪拌24-36小時，TLC檢測反應完成，加三乙胺中和，用水洗二氯甲烷相后，蒸干，上硅膠柱分離得化合物5(0.85克，89％)。[α]D25-28°(c1，CHCl3)；1HNMR(CDCl3)δ2.60(bs，1H，OH)，3.60(m，1H，OCH)，3.79(dd，1H，J7.8，J9.5Hz，H-2)，4.06(m，1H，H-5)，4.48(dd，1H，J6.2，J12.0Hz，H-6)，4.54(dd，1H，J3.5Hz，H-6)，4.66(d，1H，J7.8Hz，H-1)，5.35(bd，1H，＝CH)，5.53(t，1H，J9.5Hz，H-4)，5.62(t，1H，H-3)，7.30-8.00(m，15H，Ph).(3)烯丙基2，3，5-三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→4)-2，3-氧-異丙叉基-α-L-鼠李吡喃糖苷8的合成1.05當量的2，3，5-三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯呋喃糖基三氯乙酰亞胺酯6(制備見Y.Du，Q.Pan and F.Kong，Carbohydr.Res.2000，323，28-35)在0℃下與受體7(1.06克，4.34毫摩爾，制備參閱文獻Y.Du，F(xiàn).Kong，J Carbohydr Chem.，1999，18，655-666)在二氯甲烷中以TMSOTf(25微升，0.14毫摩爾)為催化劑進行糖基化反應，2小時后，經(jīng)常規(guī)處理和柱層析分離后得二糖8(2.47克，83％)。[α]D25-11°(c1，CHCl3)；1HNMR(CDCl3)δ1.30(s，3H，CH3)，1.31(d，3H，H-6)，1.55(s，3H，CH3)，3.69(dd，1H，J7.2，9.9Hz，H-4)，3.76(dq，1H，H-5)，4.00-4.21(m，3H)，4.33(dd，1H，J7.0，5.8Hz，H-3)，4.59(m，1H，H-4’)，4.7(dd，1H，J5.6，11.8Hz，H-5’a)，4.8(dd，1H，J3.6Hz，H-5’b)，5.04(s，1H，H-1)，5.20-5.35(m，2H)，5.54(d，1H，J4.6Hz，H-3’)，5.60(s，1H，H-2’/H-1)，5.81(s，1H，H-1’/H-2’)，5.87-5.95(m，1H)，7.28-8.09(m，15H，ph).(4)烯丙基2，3，5-三-氧-苯甲酰基-α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→4)-α-L-鼠李吡喃糖苷9的合成將雙糖8(3克，4.36毫摩爾)溶于35毫升90％的三氟乙酸水溶液中，室溫攪拌2小時后蒸干，上硅膠柱分離得化合物9(2.48克，88％)。(5)烯丙基2，3，5-三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→4)-2-氧-苯甲?；?α-L-鼠李吡喃糖苷10的合成將二醇9(1.0克，1.54毫摩爾)溶于10毫升二氯甲烷中，再先后加入3毫升的吡啶和0.19毫升的苯甲酰氯，室溫攪拌5小時，TLC檢測反應完成，濃縮后上硅膠柱分離得化合物10(890毫克，77％)。[α]D25-1°(c1，CHCl3)；1HNMR(CDCl3)δ1.37(d，3H，J6.4Hz，H-6r)，1.49，1.82，2.04(3s，9H，Ac)，3.84-3.90(m，2H，H-5r，H-5g)，4.00(t，3H，J9.4Hz，H-4r)，4.05(m，1H)，4.14-4.20(m，3H)，4.42(dd，1H，J3，4，J10.4Hz，H-3r)，4.65-4.70(m，2H，H-4a，H-1g)，4.80-5.02(m，5H，J7.8，J9.1，J1.5Hz，2H-5a，H-1r，H-2g，H-4g)，5.21(t，1H，J9.3Hz，H-3g)，5.25(m，1H)，5.31(dd，1H，H-2r)，5.34(m，1H)，5.53(d，1H，J.10Hz，H-1a)，5.65(bd，1H，J3.8Hz，H-3a)，5.77(s，1H，H-2a)，5.95(m，1H)，7.26-8.11(m，20H，Ph).(7)烯丙基2，3，5-三-氧-苯甲酰基-α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→4)-[2，3，4，6-四-氧-乙酰基-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2-氧-苯甲?；?α-L-鼠李吡喃糖苷12的合成1.05當量的葡萄糖供體11(制備見R.R.Schmidt，J Michel，J.Carbohydr.Chem1985，4，141-168)與雙糖受體10(0.7克，0.93毫摩爾)在0℃下、10毫升二氯甲烷中以TMSOTf(20微升，0.11毫摩爾)為催化劑進行糖基化反應3小時后，再加入0.1毫升的三乙胺中和，經(jīng)常規(guī)處理和柱層析分離后得三糖12(0.79克，78％)。[α]D25-1°(c1，CHCl3)；1HNMR(CDCl3)δ1.37(d，3H，J6.4Hz，H-6r)，1.49，1.82，2.04(3s，3x3H，CH3CO)，3.84-3.90(m，2H，H-5r，H-5g)，4.00(t，3H，J9.4Hz，H-4r)，4.05(m，1H)，4.14-4.20(m，3H，2H-6g)，4.42(dd，1H，J3，4，J10.4Hz，H-3r)，4.65-4.70(m，2H，H-4a，H-1g)，4.80-5.02(m，5H，J7.8，J9.1，J1.5Hz，2H-5a，H-1r，H-2g，H-4g)，5.21(t，1H，J9.3Hz，H-3g)，5.25(m，1H)，5.31(dd，1H，H-2r)，5.34(m，1H)，5.53(d，1H，J1.0Hz，H-1a)，5.65(bd，1H，J3.8Hz，H-3a)，5.77(s，1H，H-2a)，5.95(m，1H)，7.26-8.11(m，20H，Ph)(8)2，3，5-三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→4)-[2，3，4，6-四-氧-乙酰基-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2-氧-苯甲?；?α-L-鼠李吡喃糖14的合成將烯丙基苷12(3.0克，2.77毫摩爾)溶于30毫升80％醋酸水溶液中，再加入氯化鈀(1.07克)和醋酸鈉(1.07克)。室溫攪拌16小時，TLC檢測反應完成，碳酸氫鈉中和、二氯甲烷翠取、濃縮后上硅膠柱分離得半縮醛化合物14。粗產(chǎn)物可直接進行下一步反應。(9)2，3，5-三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→4)-[2，3，4，6-四-氧-乙酰基-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2-氧-苯甲?；?α-L-鼠李吡喃糖基三氯乙酰亞胺酯15的合成將上述半縮醛化合物14(約2.3克)溶于15毫升二氯甲烷中，再先后加入1.2毫升三氯乙腈和0.13毫升的DBU，室溫攪拌4小時，TLC檢測反應完成，濃縮后上硅膠柱分離得化合物15(1.81克，55％)。[α]D25-6°(c1，CHCl3)；1HNMR(CDCl3)δ1.41(d，3H，H-6r)，1.44，1.83，2.02，2.04(4s，12H，4Ac)，3.84(m，1H，H-5r)，4.00-4.21(m，4H，H-5g，H-4r，2H-6g)，4.49(dd，1H，J3.5，J8.9Hz，H-3r)，4.70-4.75(m，2H，H-1g，H-4a)，4.80，4.90(2dd，2H，J7.9，J9.7，J6.0Hz，2H-5a)，5.01-5.09(m，2H，J8.0，J9.3Hz，H-2g，H-4g)，5.25(t，1H，J9.3Hz，H-3g)，5.47(dd，1H，J3.4，J1.9Hz，H-2r)，5.58(s，H-1a)，5.66(d，1H，J3.2Hz，H-3a)，5.73(s，1H，H-2a)，6.36(d，1H，J1.6Hz，H-1r)，7.25-8.08(m，20H，Ph)，8.76(s，1H，C＝NH)。(10)2，3，5-三-氧-苯甲酰基-α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→4)-[2，3，4，6-四-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2-氧-苯甲酰基-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)-3，4，6-三-氧-苯甲?；?β-D-葡萄吡喃糖基膽固醇甙16的合成1.05當量的三糖供體15與膽固醇甙受體5(0.27克，0.31毫摩爾)在0℃下、8毫升二氯甲烷中以TMSOTf(8微升，0.04毫摩爾)為催化劑進行糖基化反應3小時后，再加入0.05毫升的三乙胺中和，經(jīng)常規(guī)處理和柱層析分離后得膽固醇甙16(0.5克，86％)。13CNMR(CDCl3)δ18.3(C-6 of rhamnose)，60.9，63.5，63.9，68.0，70.1，71.1，71.2，71.9，72.8，74.1，74.9，75.8，77.2，78.0，78.5，80.0，81.9，82.0(C2-C5)，97.7(C1A)，99.6(C1C)，100.3(C1B)，105.9(C1D)，165.2，165.4，165.5，165.6，165.7，166.0，166.1(7PhCO)，168.5，169.0，169.9，170.7(4CH3CO).(11)α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→4)-[β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖基膽固醇甙17的合成膽固醇甙16(0.58克，0.31毫摩爾)溶于30毫升二氯甲烷-甲醇(1∶2)混合液中，滴加0.5M的甲醇鈉-甲醇溶液至pH9。室溫攪拌10小時，TLC檢測反應完成，加醋酸中和，蒸干至固體，得目標化合物17(0.288克，95％)。13CNMR(CD3OD)δ141.1，120.1，110.3，105.7，104.3，100.8；ESIMS(+)，C50H84O19Na計算值1011.5(M＋Na).實測1011.6(M＋Na).
權利要求
1.一種合成合歡皂甙衍生物的方法。其特征在于用部分苯甲?；奶腔纫阴啺孵?為供體與膽固醇等配糖體偶聯(lián)，可得到高產(chǎn)率、立體專一的單糖皂甙衍生物4。該皂甙衍生物的糖基化位點用乙?；R時保護，用3％乙酰氯的二氯甲烷-甲醇(1∶1)混合液處理，可選則性地脫除乙?；?，得2-OH的皂甙衍生物5。
2.一種合成合歡皂甙衍生物的方法。其特征在于全苯甲?；陌⒗秽腔纫阴啺孵?與4位為游離羥基的α-L-鼠李吡喃糖苷7進行標準糖基化反應，高產(chǎn)率地得到雙糖8。
3.一種合成合歡皂甙衍生物的方法。其特征在于將雙糖糖苷8用90％三氟乙酸水溶液處理，可得二醇化合物9。將9在二氯甲烷-吡啶-苯甲酰氯中，區(qū)域選擇性地單苯甲?；?，得化合物10。10與全乙?；钠咸烟腔纫阴啺孵?1進行標準糖基化反應，得到三糖糖苷12。三糖糖苷12經(jīng)過脫除1位烯丙基、活化異頭碳羥基，可制得三糖供體15。
4.一種合成合歡皂甙衍生物的方法。其特征在于三糖供體15與單糖皂甙受體5進行糖基化反應，得到全?；暮蠚g皂甙衍生物16。
5.一種合成合歡皂甙衍生物的方法。其特征在于用甲醇鈉的甲醇溶液或氨氣的甲醇溶液脫除16所有的?；Ｗo基，得到合歡皂甙衍生物17。
6.一種合成合歡皂甙衍生物的方法。其特征在于權利1-4中所述的(標準)糖基化反應，是指以無水二氯甲烷、乙腈、甲苯或乙醚為溶劑，以三甲基硅三氟甲磺酸酯(TMSOTf)或三氟化硼乙醚溶液為催化劑，反應溫度為-42-零度。
7.一種合成合歡皂甙衍生物的方法。其特征在于權利1中所述的配糖體為膽固醇、麥冬皂甙元、地高辛甙元、薯蕷甙元等。
8.一種合成合歡皂甙衍生物的方法。其特征在于所合成的合歡皂甙衍生物17對P388(鼠白血癥)表現(xiàn)出較好的細胞毒活性(GI50＝22.5微克/毫升)。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有潛在藥用價值的合歡皂甙衍生物的化學合成。該衍生物保持了天然合歡皂苷的核心四糖單元《α－L－阿拉伯呋喃糖基－(1→4)－[β－D－葡萄吡喃糖基－(1→3)]－α－L－鼠李吡喃糖基－(1→2)－D－葡萄吡喃糖》及一個甾體或三萜類配糖體的結構,本發(fā)明采用先合成葡萄糖的甾體苷,然后再接上三糖的策略。
文檔編號C07J51/00GK1338462SQ0012159
公開日2002年3月6日 申請日期2000年8月15日 優(yōu)先權日2000年8月15日
發(fā)明者杜宇國, 張梅鹛, 孔繁祚 申請人:中國科學院生態(tài)環(huán)境研究中心