本發(fā)明屬于食用真菌栽培
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種人工栽培華美牛肝菌的方法。
背景技術(shù)：
：華美牛肝菌(boletusspeciosus)又名紅見手，是云南省資源較豐富的一種野生食用菌，味道鮮美，每年發(fā)生于秋季,是一項大宗林特產(chǎn)品，在海拔8oom以上的馬尾松林中都有分布。營養(yǎng)價值較高,含有豐富的礦質(zhì)元素及氨基酸組分。華美牛肝菌作為一種外生菌根菌，其菌根結(jié)構(gòu)是長期協(xié)同進(jìn)化的結(jié)果，生態(tài)條件、營養(yǎng)方式以及子實體分化發(fā)育的條件尚不明確，而且由于華美牛肝菌的菌絲體缺乏分解木質(zhì)素、纖維素、半纖維素的酶類，對營養(yǎng)成分需求苛刻，導(dǎo)致其菌種分離培養(yǎng)以及菇體人工培養(yǎng)非常困難，盡管世界各國已投入大量的人力、物力對其進(jìn)行引種馴化和人工栽培的研究，但目前所采集銷售的美味牛肝菌仍完全依賴于野生資源，尚未有人工成功培育出子實體的報道。技術(shù)實現(xiàn)要素：為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種可以促進(jìn)華美牛肝菌對營養(yǎng)成分吸收的人工栽培方法，滿足當(dāng)前對華美牛肝菌的需求，緩解對野生自然資源的壓力，保護(hù)生態(tài)，同時為華美牛肝菌的商業(yè)化栽培奠定基礎(chǔ)。為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：一種人工栽培華美牛肝菌的方法，包括以下步驟：(1)菌棒培養(yǎng)，其中菌棒原料包括以下重量百分比的組分：馬尾松木屑70-80份，米糠15-25份，玉米粉30-40份，纖維素酶0.6-1.0份，kh2po46-10份，mgso45-10份；(2)制備覆土材料，取20-60目的無菌土壤，加入6-9％的有機(jī)肥，拌勻后暴曬3-5d即得覆土材料，暴曬期間每2h翻堆1次，保持土壤含水量65-80％；(3)覆土培養(yǎng)出菇，于菌棒表面覆蓋上4-7cm厚的覆土材料，置于溫室大棚，保持溫室大棚溫度16-24℃、濕度75-85％、光照強(qiáng)度100-750lx直至覆土層表面冒出華美牛肝菌子實體幼蕾；(4)分蕾覆土培養(yǎng)出菇，將菌棒上華美牛肝菌子實體幼蕾插入鋪有覆土材料的溫室大棚的培養(yǎng)床中，幼蕾間間隔10-15cm，保持溫室大棚溫度23-25℃、濕度75-85％、光照強(qiáng)度100-750lx，每2d噴灑0.2-0.3％的纖維素酶液，直至華美牛肝菌子實體幼蕾發(fā)育成熟。在其中一個實施例，所述方法步驟(1)菌棒制備方法為按重量份比準(zhǔn)確稱取米糠、玉米粉，均勻拌入馬尾松木屑中，將kh2po4、mgso4用適量的水溶解后噴灑入馬尾松木屑堆，含水量為55-65％，ph為4.8-5.8，混勻后分裝于菌種袋中，于1-1.5kg/cm2下滅菌，冷卻后將相應(yīng)重量份比的纖維素酶溶于華美牛肝菌液體菌種中并接種于菌種袋培養(yǎng)，待菌絲體長滿菌袋即得菌棒。在其中一個實施例，所述滅菌方法為環(huán)氧乙烷氣體滅菌法、濕熱滅菌法或干熱滅菌法。在其中一個實施例，所述方法步驟(1)中菌棒原料包括以下重量百分比的組分：馬尾松木屑73-78份，米糠18-22份，玉米粉32-37份，纖維素酶0.7-0.9份，kh2po47-9份，mgso46-9份。在其中一個實施例，所述方法步驟(1)中菌棒原料包括以下重量百分比的組分：馬尾松木屑75份，米糠20份，玉米粉35份，纖維素酶0.8份，kh2po48份，mgso47.5份。在其中一個實施例，所述方法步驟(2)的土壤為菜園土、灰沙土或紫色土。在其中一個實施例，所述方法步驟(2)的有機(jī)肥為兔糞、木薯渣或菜籽餅。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明在菌棒原料中添加纖維素酶，可將菌棒原料中的纖維素轉(zhuǎn)化成簡單糖，克服華美牛肝菌菌絲體因缺乏分解纖維素、半纖維素的酶類而無法充分利用營養(yǎng)成分導(dǎo)致菇體難以成熟的缺陷，同時在培養(yǎng)過程中及時補(bǔ)充纖維素酶液，最終提高了華美牛肝菌對菌棒營養(yǎng)成分的利用率；增加了菌袋上華美牛肝菌子實體幼蕾的數(shù)量；滿足當(dāng)前對華美牛肝菌的需求，緩解對野生自然資源的壓力，保護(hù)生態(tài)，同時為華美牛肝菌的商業(yè)化栽培奠定基礎(chǔ)。具體實施方式為使本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員能更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)說明。下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。1.菌棒原料配方實施例1馬尾松木屑70份，米糠15份，玉米粉30份，纖維素酶0.6份，kh2po46份，mgso45份。實施例2馬尾松木屑73份，米糠18份，玉米粉32份，纖維素酶0.7份，kh2po47份，mgso46份。實施例3馬尾松木屑75份，米糠20份，玉米粉35份，纖維素酶0.8份，kh2po48份，mgso47.5份。實施例4馬尾松木屑78份，米糠22份，玉米粉37份，纖維素酶0.9份，kh2po49份，mgso49份。實施例5馬尾松木屑80份，米糠25份，玉米粉40份，纖維素酶1.0份，kh2po410份，mgso410份。對比例1馬尾松木屑75份，米糠20份，玉米粉35份，kh2po48份，mgso47.5份。按照實施例1-5、對比例1的配方，菌棒可通過以下方法制備：按重量份比準(zhǔn)確稱取米糠、玉米粉，均勻拌入馬尾松木屑中，將kh2po4、mgso4用適量的水溶解后噴灑入馬尾松木屑堆，含水量為55-65％，ph為4.8-5.8，混勻后分裝于菌種袋中，于1-1.5kg/cm2下環(huán)氧乙烷氣體滅菌法、濕熱滅菌法或干熱滅菌法，冷卻后將相應(yīng)重量份比的纖維素酶溶于華美牛肝菌液體菌種中并接種于菌種袋培養(yǎng)，待菌絲體長滿菌袋即得菌棒。2.華美牛肝菌的人工栽培實施例6(1)按實施例1配方所得菌棒培養(yǎng)至菌絲體長滿菌袋；(2)制備覆土材料，取20目的無菌菜園土，加入6％的兔糞，拌勻后暴曬3d即得覆土材料，暴曬期間每2h翻堆1次，保持土壤含水量65％；(3)覆土培養(yǎng)出菇，于菌棒表面覆蓋上4cm厚的覆土材料，置于溫室大棚，保持溫室大棚溫度16℃、濕度75％、光照強(qiáng)度100lx直至覆土層表面冒出華美牛肝菌子實體幼蕾；(4)分蕾覆土培養(yǎng)出菇，將菌棒上華美牛肝菌子實體幼蕾插入鋪有覆土材料的溫室大棚的培養(yǎng)床中，幼蕾間間隔10cm，保持溫室大棚溫度23℃、濕度75％、光照強(qiáng)度100lx，每2d噴灑0.2％的纖維素酶液，直至華美牛肝菌子實體幼蕾發(fā)育成熟。實施例7(1)按實施例3配方所得菌棒培養(yǎng)至菌絲體長滿菌袋；(2)制備覆土材料，取40目的無菌菜園土、灰沙土或紫色土，加入7.5％的木薯渣，拌勻后暴曬4d即得覆土材料，暴曬期間每2h翻堆1次，保持土壤含水量72.5％；(3)覆土培養(yǎng)出菇，于菌棒表面覆蓋上5.5cm厚的覆土材料，置于溫室大棚，保持溫室大棚溫度20℃、濕度80％、光照強(qiáng)度425lx直至覆土層表面冒出華美牛肝菌子實體幼蕾；(4)分蕾覆土培養(yǎng)出菇，將菌棒上華美牛肝菌子實體幼蕾插入鋪有覆土材料的溫室大棚的培養(yǎng)床中，幼蕾間間隔12.5cm，保持溫室大棚溫度24℃、濕度80％、光照強(qiáng)度425lx，每2d噴灑0.25％的纖維素酶液，直至華美牛肝菌子實體幼蕾發(fā)育成熟。實施例8(1)按實施例5配方所得菌棒培養(yǎng)至菌絲體長滿菌袋；(2)制備覆土材料，取60目的無菌菜園土、灰沙土或紫色土，加入9％的兔糞、木薯渣或菜籽餅，拌勻后暴曬5d即得覆土材料，暴曬期間每2h翻堆1次，保持土壤含水量80％；(3)覆土培養(yǎng)出菇，于菌棒表面覆蓋上7cm厚的覆土材料，置于溫室大棚，保持溫室大棚溫度24℃、濕度85％、光照強(qiáng)度750lx直至覆土層表面冒出華美牛肝菌子實體幼蕾；(4)分蕾覆土培養(yǎng)出菇，將菌棒上華美牛肝菌子實體幼蕾插入鋪有覆土材料的溫室大棚的培養(yǎng)床中，幼蕾間間隔15cm，保持溫室大棚溫度25℃、濕度85％、光照強(qiáng)度750lx，每2d噴灑0.3％的纖維素酶液，直至華美牛肝菌子實體幼蕾發(fā)育成熟。對比例2(1)按對比例1配方所得菌棒培養(yǎng)至菌絲體長滿菌袋；(2)制備覆土材料，取40目的無菌菜園土、灰沙土或紫色土，加入7.5％的木薯渣，拌勻后暴曬4d即得覆土材料，暴曬期間每2h翻堆1次，保持土壤含水量72.5％；(3)覆土培養(yǎng)出菇，于菌棒表面覆蓋上5.5cm厚的覆土材料，置于溫室大棚，保持溫室大棚溫度20℃、濕度80％、光照強(qiáng)度425lx直至覆土層表面冒出華美牛肝菌子實體幼蕾；(4)分蕾覆土培養(yǎng)出菇，將菌棒上華美牛肝菌子實體幼蕾插入鋪有覆土材料的溫室大棚的培養(yǎng)床中，幼蕾間間隔12.5cm，保持溫室大棚溫度24℃、濕度80％、光照強(qiáng)度425lx，每2d噴灑0.25％的纖維素酶液，直至華美牛肝菌子實體幼蕾發(fā)育成熟。因菌棒原料的營養(yǎng)成分中纖維素居多，以纖維素的利用率代表菌棒營養(yǎng)成分的利用率。采用比色法測定實施例1、3、5、對比例1菌棒中纖維素的初始含量及實施例6-8、對比例2中華美牛肝菌子實體幼蕾長出后菌棒中的纖維素含量，結(jié)果見表1。表1菌棒纖維素含量變化表菌棒來源初始含量/％幼蕾長出后含量/％纖維素利用率/％實施例140.316.758.56實施例347.612.673.53實施例552.320.960.03對比例147.526.843.58從表1結(jié)果可知添加有纖維素酶的實施例1、3、5的纖維素利用率顯著高于未添加纖維素酶的對比例1，可見纖維素酶的添加確實提高了華美牛肝菌對菌棒營養(yǎng)成分的利用率。統(tǒng)計實施例6-8、對比例2菌袋中華美牛肝菌子實體幼蕾的平均數(shù)量，結(jié)果見表2。表2實施例6-8、對比例2菌袋中華美牛肝菌子實體幼蕾的平均數(shù)量菌袋來源子實體幼蕾數(shù)(個)實施例626實施例728實施例826對比例218從表2可知添加有纖維素酶的實施例6-8的子實體幼蕾數(shù)顯著高于未添加纖維素酶的對比例2，可見纖維素酶的添加能增加菌袋上華美牛肝菌子實體幼蕾的數(shù)量。顯然，上述8個實施例僅是本發(fā)明的部分實施例，而不是全部實施例。基于本發(fā)明的啟示，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動的前提下所得到的所有其它實施方式，都屬于本方面所保護(hù)的范圍。當(dāng)前第1頁12