本發(fā)明涉及一種尺寸可控的介孔二氧化硅納米載體的制備方法，屬于藥物和藥劑學(xué)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

化療是現(xiàn)階段在癌癥治療方面應(yīng)用最有效的方法之一。但效果往往不夠理想，主要原因在于化療的靶向給藥性能差，同時對正常組織易造成毒副作用，在長期使用的過程中，容易產(chǎn)生耐藥性。應(yīng)用藥物載體可以實現(xiàn)對抗癌藥物的靶向輸送，進而達到癌癥治療的目的。近年來，許多載體材料如有機無機雜化納米粒子、納米脂質(zhì)體、聚合物膠束以及樹枝狀大分子等已經(jīng)被廣泛開發(fā)并進行了將其作為靶向輸送藥物載體，以達到癌癥治療目的的研究。

介孔二氧化硅納米載體是無機雜化納米粒子的一種，其內(nèi)部有大量孔道結(jié)構(gòu)，可將藥物裝載在其中，實現(xiàn)藥物的輸送。制備適宜尺寸的介孔二氧化硅納米載體，既能防止載體尺寸過大而被腎臟濾出或尺寸過小不能被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識別而被快速清除，又可使其通過增強滲透滯留(epr)效應(yīng)富集在癌癥部位(被動靶向作用)，減少抗癌藥物對正常組織的不良反應(yīng)。在任何關(guān)于介孔二氧化硅納米載體的制備與應(yīng)用研究中，選擇和制備合適尺寸的載體是必須要考慮的問題，否則會大大影響藥物輸送的效果。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的第一個目的是提供一種介孔二氧化硅納米載體的制備方法，所述方法包括如下步驟：

(1)以四乙氧基硅烷(teos)為硅源進行聚合；

(2)在(1)中通過改性劑控制介孔二氧化硅納米載體的尺寸；所用的改性劑可以為aptes、3-巰基丙基三甲氧基硅烷(mptms)；

(3)對(2)中所得載體進行清洗，洗去模板。

所述方法，在本發(fā)明的一種實施方式中，具體是：

(1)將2g的十六烷基三甲基氯化銨(ctac)和100mg的三乙醇胺(teoa)溶解于蒸餾水中,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃，加入1.5ml的teos；

(2)1～10min后，在(1)的反應(yīng)溶液中加入一定量的3-氨丙基三乙氧基硅烷(aptes)，在95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h，當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心、收集；

(3)將(2)中收集得到的納米顆粒，先用乙醇清洗3次，再將其懸浮在質(zhì)量分數(shù)37％hcl與乙醇組成的混合液之中(體積比，hcl：乙醇＝1：12)，超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了模板ctac的介孔二氧化硅納米載體，用乙醇沖洗幾次，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去介孔二氧化硅納米載體上的乙醇。

所述方法，可通過控制反應(yīng)條件來制備不同尺寸的介孔二氧化硅納米載體，包括改變teoa及aptes的加入量及加入時間，使得載體既可躲避網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的清除，又可增強滲透與滯留效應(yīng)。例如，步驟(1)先加入2gctac和100mgteoa，加熱至95℃后加入1.5ml的teos，在間隔10min后步驟(2)加入0.2ml的aptes，在95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h，經(jīng)過后處理后可以獲得46±4.2nm大小的介孔二氧化硅納米載體。

在本發(fā)明的一種實施方式中，teoa、aptes的加入量分別為100mg、0.2ml，加入teos后加入aptes的間隔時間為10min，制得粒徑為46nm的介孔二氧化硅納米載體。

本發(fā)明的第二個目的是提供一種應(yīng)用上述方法制備得到的介孔二氧化硅納米載體，該載體為球形，其內(nèi)部有大量直徑在2-50nm之間孔道結(jié)構(gòu)，可將進行藥物裝載，并通過化學(xué)修飾將封口堵住，實現(xiàn)藥物的輸送。

所述的化學(xué)修飾，由于改性劑的不同可進行不同的化學(xué)修飾，如mptms會使載體表面存在巰基(-sh)，進一步可通過形成二硫鍵(-s-s-)進行載體修飾。

本發(fā)明的有益效果：

(1)本發(fā)明制備得到的介孔二氧化硅納米載體為球形，均勻分布；

(2)根據(jù)載體進入癌癥部位或癌細胞的程度要求不同，可以選擇制備不同尺寸大小的載體，粒徑在25-50nm之間的介孔二氧化硅納米載體，表面鍵連透膜肽后能夠穿透核膜進入細胞核，而當粒徑大于67nm時則不能；

(3)通過使用不同的改性劑得到表面修飾有不同基團的載體，可進行不同的化學(xué)修飾，為進一步的研究提供方便。

附圖說明

圖1：粒徑尺寸大小為46nmmsnps46-nh2的tem成像圖

圖2：粒徑尺寸大小為46nmmsnps46-nh2的z-average水合粒徑圖，圖中3條曲線從上向下分別是record25、26、27。

圖3：粒徑尺寸大小為46nmmsnps46-nh2的zeta電位圖，圖中3條曲線按最高點從高到低分別是record32、31、33。

圖4：粒徑尺寸大小為46nmmsnps46-nh2的粒徑分布計算圖

圖5：粒徑尺寸大小為57nmmsnps57-nh2的tem成像圖

具體實施方式

縮寫：ctac，十六烷基三甲基氯化銨；teoa，三乙醇胺；teos，四乙氧基硅烷；aptes，3-氨丙基三乙氧基硅烷；mptms，3-巰基丙基三甲氧基硅烷

實施例1：msnps36-nh2的合成

將2gctac和140mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，10min后，將0.2ml的aptes加入其中，之后在95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒懸浮在1ml質(zhì)量分數(shù)37％hcl與12ml乙醇組成的混合液之中，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps36-nh2用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps36-nh2。

實施例2：msnps46-nh2的合成

將2gctac和100mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，10min后，將0.2ml的aptes加入其中，之后在95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒懸浮在1ml質(zhì)量分數(shù)37％hcl與12ml乙醇組成的混合液之中，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps46-nh2用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps46-nh2。

實施例3：msnps57-nh2的合成

將2gctac和80mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，5min后，將0.2ml的aptes加入其中，之后在95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒懸浮在1ml質(zhì)量分數(shù)37％hcl與12ml乙醇組成的混合液之中，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps57-nh2用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps57-nh2。

實施例4：msnps100-nh2的合成

將2gctac和80mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，10min后，將1ml的aptes加入其中，之后在95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒懸浮在1ml質(zhì)量分數(shù)37％hcl與12ml乙醇組成的混合液之中，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps100-nh2用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps100-nh2。

實施例5：msnps180-nh2的合成

將2gctac和80mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，1min后，將1ml的aptes加入其中，之后在95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒懸浮在1ml質(zhì)量分數(shù)37％hcl與12ml乙醇組成的混合液之中，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps180-nh2用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps180-nh2。

實施例6：msnps36-sh的合成

將2gctac和140mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，10min后，將0.2ml的mptms加入其中，之后在氮氣保護95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒使用甲苯洗滌，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps36-sh用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps36-sh。

實施例7：msnps46-sh的合成

將2gctac和100mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，10min后，將0.2ml的mptms加入其中，之后在氮氣保護95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒使用甲苯洗滌，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps46-sh用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps46-sh。

實施例8：msnps57-sh的合成

將2gctac和80mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，5min后，將0.2ml的mptms加入其中，之后在氮氣保護95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒使用甲苯洗滌，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps57-sh用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps57-sh。

實施例9：msnps100-sh的合成

將2gctac和80mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，10min后，將1ml的mptms加入其中，之后在氮氣保護95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒使用甲苯洗滌，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps100-sh用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps100-sh。

實施例10：msnps180-sh的合成

將2gctac和80mgteoa溶解于20ml蒸餾水,在劇烈攪拌的條件下加熱至95℃。然后加入1.5mlteos，1min后，將1ml的mptms加入其中，之后在氮氣保護95℃條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h。當反應(yīng)的混合物冷卻至室溫后進行離心，收集納米顆粒，再用乙醇清洗3次。將所收集的納米顆粒使用甲苯洗滌，再超聲處理30min，重復(fù)3次。最后制得的移除了表面活性劑ctac的msnps180-sh用乙醇沖洗3次，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來干燥乙醇懸浮液中的msnps180-sh。

雖然本發(fā)明已以較佳實施例公開如上，但其并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉此技術(shù)的人，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，都可做各種的改動與修飾，因此本發(fā)明的保護范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書所界定的為準。