專利名稱:作為抗菌劑的噁唑烷酮類化合物的制作方法
技術領域:
本發(fā)明屬于感染相關的醫(yī)藥技術領域,更具體地說,是涉及一類新的具有 抗菌活性的化合物及其制備方法、含有它們的藥物組合物和作為抗菌藥物的用 途。
背景技術:
近年來,各類抗生素與抗菌劑的耐藥菌發(fā)展迅速,例如耐甲氧西林金黃 色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)、耐青霉素肺炎鏈球菌 (PRSP)、多重耐藥性結核桿菌,尤其是耐萬古霉素腸球菌(VRE)的出現(xiàn),給 臨床治療造成了困難。噁唑烷酮類抗菌劑是一類新型化學全合成的抗菌劑,該類藥物的代表是 2000年美國FDA批準上市的利奈唑酮(linezolid),在治療多重耐藥革蘭氏陽性 菌和結核桿菌感染方面顯示出較好的效果。然而,經(jīng)過幾年的臨床使用,已 有耐藥菌產(chǎn)生的報道,因此,人們還會不斷面對細菌的耐藥問題,需要研制新 的抗菌藥物。噁唑烷酮類化合物已見于下列文獻EP311090公開了具有抗菌作用的N-芳基噁唑烷酮類化合物;EP6099 05 公開了 3-(氮取代的)苯基-5-p-酰氨基曱基噁唑烷-2-酮類化合物; CN1121919A公開了五元雜芳基噁唑烷酮;W093/23384公開了含有取代的 二溱(哌喚)部分的噁唑烷酮和它們作為抗孩支生物劑的用途。W093/09103 公開了用作抗微生物劑的取代芳基和雜芳基-苯基-噁唑烷酮。WO90/02744 公開了用作抗微生物劑的5' -二氫吲哚基-5 P -酰氨基曱基噁唑烷酮,3-(稠 環(huán)取代的)苯基-5 |3 -酰氨基曱基噁唑烷酮,和3-(氮取代的)-苯基-5 P -酰氨基曱基噁唑烷酮。EP352781公開了苯基和吡啶基取代的苯基噁唑烷 酮。EP316594公開了 3-取代的苯乙烯基噁唑烷酮。EP312000公開了苯基 曱基取代的苯基噁唑烷酮。其它參考文獻公開了各種各樣的噁唑烷酮類化合物,包括J. Med. Chem. , 32, 1673-81 (198); J. Med, Chem. , 33, 2569-78 (1 990); Tetrahedron, 45, 1 32 3-26 (1 989) ; J.Med.Chem., 35, 1 1 5 6 (1 992); US4,801,600; US4,128,654; US4,250,318; US5,164,510; US5, 523, 403; US5,736,545; US5,981,528; US6, 239, 152B" EP0657440; EP0694544; EP0738726 ; W094/01110 ; WO95/07271 ; WO97/14690 ; WO97/37980 ; 謂8/01447。本發(fā)明的一個目的是為了克服細菌的耐藥問題,研制新結構的抗菌藥物, 提供了具有通式I結構的新型噁唑烷酮類衍生物及其藥學上可接受的鹽。本發(fā)明的另一個目的是提供含有通式I結構的化合物或其藥學上可接受的 鹽作為有效成分,以及含有一種或多種藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑 的藥用組合物,及其在抗菌方面的應用。現(xiàn)結合本發(fā)明的目的對本發(fā)明內(nèi)容進行具體描述。本發(fā)明的通式I化合物具有下述結構式<formula>formula see original document page 4</formula>R為<formula>formula see original document page 4</formula>具體的通式I化合物及其代碼Ll: (S) -N-[[3-[3-氟-4- (1 -哌咬基)]苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]曱基 -N-氯乙酰胺。發(fā)明內(nèi)容C I )其中:L2: (S) +[[3-[3-氟-4- (l-吡咯基)]苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]曱基 -N-氯乙酰胺。L3: (S) -N-[[3-[3-氟-4- (1-哌咬基)]苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]曱基 -N-氯乙酰胺鹽酸鹽。本發(fā)明所述的通式I化合物通過以下步驟合成RHNO,Et,NNO;HCOONH4Pd/CPhCH2OCOCI^》NaHC03C02CH2PhO 9、OR-BuLi4ON OCH3S02CIOHEt,NO人,O>=>^ N O J| NaN3、》II O'3oPd/C . H2R.人 CICH2COCI N O _f_^>R-其中R的定義同上文所述。制備方法參考oA,.N OHN、 .CIO目標化合物 Journalof MedicinalChemistry. 1996. 39 (3): 673—378.提供的方法,制得氨基化合物7,再與氯乙酰氯反應得到目標化合物。本發(fā)明所述式I化合物的藥學上可接受的鹽系指本發(fā)明化合物與無機酸、 有機酸成鹽,特別優(yōu)選的鹽是鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、疏酸鹽、硫酸 氬鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、乳酸鹽、曱磺酸鹽、對曱苯磺酸鹽、 馬來酸鹽、苯曱酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、枸櫞酸鹽、富馬酸鹽、?;撬猁} 等等。具體是將式I化合物溶于無水乙醇,冰水浴冷,滴加鹽酸乙醇溶液制成 鹽酸鹽或?qū)⑹絀化合物溶于無水乙醇,加入等摩爾檸檬酸,得其檸檬酸鹽等等。本發(fā)明化合物的藥物組合物制備如下使用標準和常規(guī)的技術,使本發(fā)明 化合物與制劑學上可接受的固體或液體載體結合,以及使之任意地與制劑學上 可接受的輔助劑和賦形劑結合制備成微?;蛭⑶颉9腆w劑型包括片劑、分散顆 粒、膠嚢、緩釋片、緩釋微丸等等。固體載體可以是至少一種物質(zhì),其可以充 當稀釋劑、香味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、粘合劑、崩解劑以及包裹劑。 惰性固體載體包括磷酸鎂、硬脂酸鎂、滑粉糖、乳糖、果膠、丙二醇、聚山梨 酯80、糊精、淀粉、明膠、纖維素類物質(zhì)例如曱基纖維素、微晶纖維素、低熔 點石蠟、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液體劑型包括溶劑、懸浮液例如注射 劑、粉劑等等。藥物組合物以及單元劑型中含有的活性成份(本發(fā)明化合物)的量可以根 據(jù)患者的病情、醫(yī)生診斷的情況特定的加以應用,所用的化合物的量或濃度在 一個較寬的范圍內(nèi)調(diào)節(jié),通常,活性化合物的量范圍為組合物的0. 5 % ~ 90 % (重 量)。另 一優(yōu)選的范圍為0. 5%-70%。下面通過抑菌實驗進一步說明本發(fā)明化合物對細菌的抑制作用。 培養(yǎng)基微生物鑒定培養(yǎng)基PH 7. 9 ± 0.1北京三藥科技開發(fā)公司產(chǎn)品;菌 種標準金黃色葡萄球菌CMCC26003,標準藤黃八疊球菌CMCC28001,標準綠膿假 單胞菌CMCC10211,標準肺炎克雷伯桿菌CMCC46117,以上菌種均購于中國藥品 生物制品檢定所。(1)抑菌效果的測定(抑菌圈測定) 樣品配制分別稱取約2mg上述各樣品,于50ml容量瓶中,用少量的DMF溶解后,用蒸餾水加至刻度,濃度為10jjmol/L,過濾除菌,用2ml的離心管分 裝。培養(yǎng)平皿的制備 一定量滅菌后的微生物鑒定培養(yǎng)基I (使培養(yǎng)基厚度為 3mm),冷至48-5(TC,分別加入適量的菌液(菌濃度為0. 1 %),倒入調(diào)好水平的培 養(yǎng)平皿中,小心趕走氣泡,培養(yǎng)基凝固后,在需要放牛津杯的位置做好標記, 備用。樣品的測定在培養(yǎng)平皿上間隔2. 5-3cm方文置牛津杯,注意與標記位置對 應,用微量加樣器取各樣品50m1加樣,做2-3個復管,做好加樣記錄,放置 在37。CC02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16-18h后,用游標卡尺測量抑菌圈直徑。 (2)最小抑菌濃度(mic)的測定采用二倍稀釋法。先在已經(jīng)消毒的96孔板的1孔、12孔中分別加入菌液和 肉湯培養(yǎng)基對照,而后在2-ll孔中,用微量可調(diào)移液器從低濃度到高濃度依次 加入用培養(yǎng)基倍比稀釋的上述樣品溶液0. 25 ja g mL—128 jj g . m1/1,每孔100 m 1,然后在每孔中加入稀釋菌液100 )i 1,使得各孔中樣品濃度分別為0. 125 、 0.25、0.5、 1、 2、 4、 8、 16、 32、 64jug.mL—'。置于振蕩器上振蕩1 min, 使孔內(nèi)溶液充分混勻后,微孔板加蓋并用膠紙密封以減少孵育過程中的蒸發(fā), 于37 。C溫箱中孵育18 h,肉目艮觀測無細菌生長孔所含最低藥物濃度即為最小 抑菌濃度。實驗重復3次,求其平均值。 說明書附1為噁唑烷酮^"生物(I )結構式。
具體實施例方式下面結合實施例對本發(fā)明做進一步的說明,實施例僅為解釋性的,決 不意味著它以任何方式限制本發(fā)明的范圍,發(fā)明的化合物經(jīng)高效液相色譜 (HPLC),薄層色譜(TLC),熔點(m. p.)進行檢測,隨后還可以采用核磁 共振('H薩R/'3CNMR)確證其結構。實施例1(S) -N-[[3-[3-氟-4- (l-哌咬基)]苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]曱基-N-氯乙酰胺 (Ll)1. 在250ml的反應瓶中,加入10ml艱咬、16ml三乙胺、45ml乙酸乙酯, 緩緩滴加3,4-二氟硝基苯(llml, 15. 9g),升溫至回流反應4h,經(jīng)板層檢測反 應完畢。然后用適量蒸餾水洗,乙酸乙酯萃取,合并有機層,無水硫酸鈉干燥, 過濾,減壓蒸餾蒸除溶劑,得粗品,用丙酮-水精制,得黃色固體(中間體l) 19. 2g, HPLC99. 3%。2. 取5g中間體l,溶于50ml丙酮,再加入4.7g曱酸銨,45一50。C攪拌下 完全溶解后,加入適量鈀碳(10°/。),反應5h,板層檢測反應完畢。過濾, 取濾液(中間體2 ),攪拌下加入56ml碳酸氫鈉溶液(5% ),緩緩滴加4. 15g 氯曱酸千酯,有絮狀沉淀生成,板層控制反應進程結束。過濾,濾餅用石 油醚洗滌,適量丙酮-水精制,得米色固體(中間體3) 5. lg, HPLC99. 5%。3. 取2. lg中間體3,溶于55ml四氫呋喃,而后降溫至-40。C,緩慢滴加 6ml正丁基鋰/正己烷溶液,攪拌lh,滴加2ml 丁酸縮水甘油酯(用10ml 四氫呋喃稀釋),攪拌反應1.5h。停止冷卻,繼續(xù)攪拌2h,直至升至室溫, 板層檢測反應完畢。加入1. lml飽和氯化銨溶液、27ml蒸餾水,攪拌分相, 水相用乙酸乙酯(3xi5ml)萃取,合并有幾層,用適量飽和食鹽水洗滌, 無水硫酸鈉干燥。過濾,減壓蒸餾蒸除有機溶媒,得黃色固體,用乙酸乙 酯-正己烷精制,得白色固體(中間體4) 1.4g, HPLC99. 3%。4. 取1.2g中間體4,溶于15ml二氯曱烷,加入1.3ml三乙胺,冰鹽 浴降溫至-5。C,緩慢滴加0. 5ml曱磺酰氯,攪拌30min。然后升至室溫, 加入18ml蒸餾水,15ml乙酸乙酯,60ml 二氯曱烷,攪拌,不能完全溶解,過濾,濾餅經(jīng)洗滌、干燥的白色固體0. 92g。濾液水相用適量二氯曱烷萃 取,合并有機相,無水硫酸鈉干燥,過濾,蒸干,得白色固體(中間體5) 0. 4g。合并收率87%, HPLC97. 81%。5. 取lg中間體5,溶于10mlDMF,再加入O. 7g疊氮化鈉,加熱至85 。C,攪拌反應4h,然后降至室溫,將反應液傾倒入50ml水中,生成白色 絮狀沉淀,過濾,洗滌,干燥得白色固體(中間體6) 0. 7g, HPLC98.1%。6. 取1.5g中間體6,溶于60ml乙酸乙酯,加入0. 12g 4巴碳(10% ), 進行氫化反應,約5h后反應結束,過濾,洗滌濾餅,收集濾液,減壓蒸餾, 而后進行硅膠柱層析(洗脫劑石油醚/乙酸乙酯=1/1 ),得白色固體(中 間體7 ) 1. lg, HPLC99. 6%。7. 取lg中間體7,溶于15ml三氯曱烷,再加入0. 8ml三乙胺,冰浴 冷卻至-S。C,攪拌下分次緩緩滴加0.4g氯乙酰氯,滴加過程中保持溫度在 l(TC以下。滴加完畢后,升至室溫,反應約3h,經(jīng)TLC監(jiān)測反應結束。加 入20ml水洗,分出有機層,無水硫酸鈉干燥,減壓蒸餾,得白色固體(目 標產(chǎn)物LI) 1.03g, Rf=0. 65(展開劑無水乙醇),m. p. 166. 1-167. 9 。C , HPLC98.9%。(S) -N-[[3-[3-氟-4- (1-吡咯基)]苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-N-氯乙酰胺 (L2)參照實施例1的操作,區(qū)別在于選用了吡咯替代實施例1中的哌咬,經(jīng)七 步反應制得白色固體(目標產(chǎn)物L2),總收率17.3%, Rf-O. 69(展開劑無 水乙醇),m. p. 172. 1-174. (TC , HPLC99. 1%。實施例2實施例3化合物Ll成鹽酸鹽(L3 ):取上述Ll產(chǎn)物1. 0g,溶于20ml無水乙醇, 冰水浴冷卻至5。C左右,滴加23. 3°M 8. 3 mol 'ml/1 )鹽酸乙醇溶液,調(diào)至PH=2-3, 然后繼續(xù)攪拌30min。過濾,得白色固體,干燥,得其鹽酸鹽,m.p. >230°C。 實施例4注射液的制備L2 50mg石岸酸二氫鈉 10mg檸檬酸 20mg氯化鈉 90mg注射用水 50tnl工藝取注射用水50ml,稱取處方量的檸檬酸、磷酸二氫鈉、氯化鈉攪拌 使溶解,加入樣品攪拌溶解,用0. lmol/L的鹽酸或氫氧化鈉調(diào)pH值為4. 0-7. 0, 加入O. 1%的活性炭吸附20分鐘。先用045lum濾膜濾過,再用022 nm精濾。按 每安剖2毫升灌裝,105。C高溫滅菌30分鐘即得注射液。 實施例5通式I化合物對細菌的體外抗菌活性結果表明1. 化合物Ll和L2對標準金黃色葡萄球菌、標準藤黃八疊球菌等G+菌具有 非常強的抑菌作用,MIC《0. 5jug . mL—1,活性明顯強于該類化合物的代表藥物 利奈唑酮;2. 化合物Ll和L2對標準肺炎克雷伯桿菌有抑菌作用,MIC《32 n g . ml/1; 對標準綠膿假單胞菌有弱的抑菌作用,MIC < 64 n g . mL—、而利奈唑酮對G-菌無 效。提示本類結構的化合物具有非常強的抗G+菌作用,同時對部分G—菌有良好 的抑制作用。
權利要求
1.具有通式I結構的化合物及其藥學上可接受的鹽其中R為
2. 權利要求1所述的通式I化合物及其藥學上可接受的鹽,更優(yōu)選以下化 合物LI: (S) -N-[[3-[3-氟-4- (l-哌咬基)]苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]曱基 -N-氯乙酰胺。L2: ( S ) -N- [ [3- [3告4- (1 —吡咯基)]苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]曱基 -N-氯乙酰胺。L3: (S) -N-[[3-[3-氟-4- (1 -哌口絲)]苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]曱基 -N-氯乙酰胺鹽酸鹽。
3. 權利要求1-2所定義的通式I化合物,其藥學上可接受的鹽是指與無機 酸或有機酸成鹽。
4. 一種治療敏感細菌感染病人的藥物組合物。它含有權利要求1-2所定義的式I化合物或其藥學上可接受的鹽作為有效 成分,以及含有一種或多種藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
5. 權利要求1-2所定義的式I化合物在抗菌方面的用途。
全文摘要
本發(fā)明屬于感染相關的藥物領域,提供具有通式(I)結構的噁唑烷酮衍生物及其藥學上可接受的鹽見式(Ⅱ)。本發(fā)明還提供了此類化合物或其藥學上可接受的鹽作為藥物,特別是作為抗菌藥物的用途。
文檔編號C07D263/20GK101220002SQ20071006053
公開日2008年7月16日 申請日期2007年12月28日 優(yōu)先權日2007年12月28日
發(fā)明者穎 劉, 默 劉, 劉登科, 張士俊, 張存彥, 徐為人, 湯立達 申請人:天津藥物研究院