專利名稱：一種活性益生菌護膚霜及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于益生菌應用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種活性益生菌護膚霜及其制備方法。
背景技術(shù)：
當今化妝品的發(fā)展趨勢為趨向生物化、賦予功能化和應用高科技。益生菌(Probiotics)是指對人和動物機體有益的菌。經(jīng)過一個多世紀的實驗已證明益生菌具有重要的生理功能，目前多應用于保健食品中。我國允許用于保健食品的益生菌菌株有10種，嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、干釀乳桿菌干釀亞種(Lactobacillus caseisubsp casei)、嗜熱鏈球菌(Streptococcsus thermophilus)均包括在其中。實驗證明，將益生菌直接或調(diào)和成護膚品涂抹在面部皮膚上，可以起到護膚、潔膚的作用。益生菌能吸收利用無機鹽、尿酸和尿素等皮膚排泄物，平衡肌膚表面pH，抑制有害菌，抵御重金屬離子對細胞的侵害，保水保濕等。目前，活性益生菌在護膚品中的應用主要受兩個因素的限制，一方面市場上益生菌形態(tài)主要為粉劑或顆粒，且不能耐受高于45°C的工藝溫度，因此無法直接加入護膚品的乳化體系中，無法與其融合為體態(tài)均勻的產(chǎn)品；另一方面，益生菌在沒有任何保護劑保護并且暴露在大量游離水存在的體系中很容易衰退失活，活菌穩(wěn)定性低。因此，具有活性的益生菌尚未被應用于日常護膚品 中，也無相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點與不足，本發(fā)明首要目的在于提供一種可用于油包水乳化體系的活性益生菌菌液及其制備方法。本發(fā)明的另一個目的在于提供一種活性益生菌護膚霜及其制備方法。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn):一種活性益生菌護膚霜，該活性益生菌護膚霜中含有I X IO6 I X 108CFU/g的活性益生菌。優(yōu)選地，所述的活性益生菌為嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus casei subsp casei)和嗜熱鏈球菌(Streptococcsusthermophilus)中的一種或兩種以上的混合。上述活性益生菌護膚霜的制備方法，包括如下步驟:(I)將益生菌在液態(tài)培養(yǎng)基里進行37 40°C高密度培養(yǎng)，然后培養(yǎng)液經(jīng)過10000 15000rpm離心3 10分鐘后獲得菌泥；(2)將甘油和海藻糖按照質(zhì)量比(80 90): (10 20)混合，85 95°C水浴至海藻糖完全溶解，90 95°C滅菌10 20分鐘后，密封冷卻至O 4°C ;(3)將步驟⑴所得的菌泥與步驟(2)所得的混合液按質(zhì)量比1:1000 1:10進行混合，研磨攪拌均勻，成為菌漿；將菌漿用200 300目篩網(wǎng)過濾，得到活性益生菌菌液；
(4)制備油包水乳化體系，當乳化體系溫度達到40 45°C時，向其中加入乳化體系1% 10%w/w的活性益生菌菌液和0.l%w/w日用香精，攪拌均勻即得到活性益生菌護膚霜。本發(fā)明的油包水乳化體系可以采用護膚品領(lǐng)域常用的乳化體系。本發(fā)明優(yōu)選的乳化體系的制備方法為:按乳化體系總質(zhì)量的百分比計，分別稱取杏仁油8%、白油8%、蜂蠟5%、十八醇2%、羊毛脂2%、角鯊烷14%、尼泊爾金丙酯0.1%混合加熱至75°C，制得油相；分別稱取甘油5%、尼泊爾金甲酯0.1%、去離子水55.8%混合后加熱至95°C，滅菌20分鐘，制得水相；在攪拌條件下，將油相緩緩地加入水相中，在真空度0.06 0.08MPa，轉(zhuǎn)速IOOOOrpm下乳化15分鐘。優(yōu)選地，步驟(3)中制得的菌液中活性益生菌的含量為IXlO7 lX101(lCFU/g。本發(fā)明的原理:益生菌能利用皮膚汗腺排泄的無機鹽、尿酸和尿素等物質(zhì)作為生長因子和營養(yǎng)氮源，從而達到清潔皮膚的功效。同時，大量實驗證明，益生菌代謝產(chǎn)生乳酸等有機酸可使皮膚的PH呈弱酸性，即皮膚正常的pH范圍。且乳酸等有機酸具有一定的緩沖能力，可幫助提高皮膚的堿中和能力。益生菌產(chǎn)生的有機酸、雙乙酰和小分子抗菌物質(zhì)等能有效抑制皮膚表面有害菌的生長繁殖。大量實驗證明，一定數(shù)量的益生菌可有效抑制致病性大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、利斯特氏菌、志賀氏菌、沙門氏菌、白色念珠菌等有害菌。益生菌分泌的莢膜和粘液多糖對細胞具有防護作用。大量實驗證明，益生菌分泌的莢膜和粘液多糖可以通過形成親水表面覆蓋細胞進而保持細胞水分防止細胞干裂；可以螯合重金屬離子，以防止其毒害；可以使噬菌體不敏感從而防止其侵害；可以防止抗生素破壞細胞；可以提供供氧 張力等。益生菌具有上述護膚功效，須滿足兩個前提條件，一是益生菌具有活性，即以活菌的形式添加并存在于產(chǎn)品中；二是活性益生菌數(shù)量足夠，即一定的活菌含量才能保證活性益生菌的護膚效果，該含量以1父106 1\10*^^/^為宜。本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點及有益效果:(I)本發(fā)明所述的益生菌為國家食品藥品監(jiān)督管理局2005年5月20日發(fā)布的《益生菌類保健食品申報與評審規(guī)定》中允許用于保健食品的益生菌菌株，是人體正常菌群成員，安全無毒，已經(jīng)有大量實驗證明其對人體有益的生理功能。本發(fā)明不僅獲得一種可用于油包水乳化體系的活性益生菌菌液，而且為化妝品行業(yè)提供了一種含有活性益生菌的具有護膚、潔膚功能的新型護膚品，豐富化妝品品種。(2)本發(fā)明所述的益生菌活性成分不僅活性益生菌含量高，而且甘油和海藻糖溶液對活性益生菌具有很強的保護作用。甘油作為載體一方面可將益生菌分散于無水體系中從而減緩菌株新陳代謝，另一方面容易與油包水乳化體系的護膚品在較低的溫度下融合有利于益生菌均勻分散。海藻糖對益生菌菌株細胞具有高效的生物保護作用，可以幫助生物體抵抗外界惡劣環(huán)境。因此，本發(fā)明所述的護膚霜可以保證在生產(chǎn)過程和一定條件(如冷藏或陰涼處存放)的產(chǎn)品貯存過程中活性益生菌具有活性和數(shù)量穩(wěn)定性，最終達到利用益生菌清潔肌膚，平衡肌膚表面pH，抑制有害菌，防護重金屬離子對細胞的侵害，保水保濕的功效。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式包括但不限與此。實施例1第一步將嗜熱鏈球菌(Streptococcsus thermophilus)在微生物分批培養(yǎng)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基里40°C下進行高密度培養(yǎng)，培養(yǎng)液活菌數(shù)達6.5X 109CFU/mL，然后經(jīng)過15000rpm離心5分鐘獲得菌泥，菌泥活菌數(shù)為I X 10nCFU/g ；第二步將甘油和海藻糖按質(zhì)量比80:20配比混合，90°C水浴待海藻糖完全溶解后，加熱95°C，保持15分鐘滅菌后，密封冷卻至4°C ；第三步將第一步所得的菌泥與第二步所得的混合液按質(zhì)量比1:10進行混合，研磨攪拌均勻，成為菌漿；第四步將菌漿用200目篩網(wǎng)過濾，濾液為益生菌菌液，其活菌數(shù)含量為9 X IO9CFU/g ;第五步油包水乳化體系的制備:分別稱取杏仁油8kg、白油8kg、蜂蠟5kg、十八醇2kg、羊毛脂2kg、角鯊烷14kg、尼泊爾金丙酯0.1kg混合加熱至75°C;分別稱取甘油5kg、尼泊爾金甲酯0.1kg、去離子水55.8kg混合后加熱至95°C，滅菌20分鐘；在攪拌條件下，將所得的油相緩緩地加入水相中，在真空度0.06MPa，轉(zhuǎn)速IOOOOrpm下乳化15分鐘；第六步待溫度降至40°C，向第五步所得的乳化體系中加入第四步所得的益生菌嗜熱鏈球菌(Streptococcsus thermophilus)菌液Ikg和日用香精0.1kg,攪拌均勻即可出料，得到活性益生菌護膚霜，益生菌活菌數(shù)為8X 10 7CFU/g。實施例2第一步將干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus casei subsp casei)在微生物分批培養(yǎng)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基里37°C下進行高密度培養(yǎng)，培養(yǎng)液活菌數(shù)達1.2X 109CFU/g，然后通過IOOOOrpm離心10分鐘獲得菌泥，菌泥活菌數(shù)為3X 101(lCFU/g ；第二步將甘油和海藻糖按質(zhì)量比85:15配比混合，85°C水浴待海藻糖完全溶解后，加熱90°C，保持20分鐘滅菌后，密封冷卻，4°C冷藏；第三步將第一步所得的菌泥與第二步所得的混合液按質(zhì)量比1:100進行混合，研磨攪拌均勻，成為菌漿；第四步將菌漿用300目篩網(wǎng)過濾，濾液為益生菌菌液，其活菌數(shù)含量為2 X IO8CFU/g ;第五步油包水乳化體系的制備:分別稱取杏仁油800g、白油800g、蜂蠟500g、十八醇200g、羊毛脂200g、角鯊烷1400g、尼泊爾金丙酯IOg混合加熱至75 V ;分別稱取甘油500g、尼泊爾金甲酯10g、去離子水5580g混合后加熱至95°C,滅菌20分鐘；在攪拌條件下，將所得的油相緩緩地加入水相中，在真空度0.08MPa，轉(zhuǎn)速IOOOOrpm下乳化15分鐘；第六步待溫度降至45°C，向第五步所得的乳化體系中加入第四步所得的益生菌干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus casei subsp casei)菌液300g和日用香精10g,攬拌均勻即可出料，得到活性益生菌護膚霜，益生菌活菌數(shù)為5X 106CFU/g。實施例3
第一步將嗜熱鏈球菌(Streptococcsus thermophilus)在微生物分批培養(yǎng)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基里40°C下進行高密度培養(yǎng)，培養(yǎng)液活菌數(shù)達6.5X 109CFU/g，然后通過15000rpm離心5分鐘獲得菌泥，菌泥活菌數(shù)為I X 10nCFU/g ；第二步將干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus casei subsp casei)在微生物分批培養(yǎng)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基里37°C下進行高密度培養(yǎng)，培養(yǎng)液活菌數(shù)達1.5X101(lCFU/g，然后通過15000rpm離心10分鐘獲得菌泥，菌泥活菌數(shù)為6X 10nCFU/g ；第三步將甘油和海藻糖按照甘油和海藻糖按質(zhì)量比90:10配比混合，90°C水浴待海藻糖完全溶解后，加熱95°C，保持20分鐘滅菌后，密封冷卻，(TC冷藏；第四步將第一步中所得的菌泥按質(zhì)量比1:100加入第三步所得的混合物中，將第二步中所得的菌泥按質(zhì)量比1:1000加入第三步所得的混合物中，研磨攪拌均勻，使兩種菌泥完全分散，成為菌衆(zhòng);第五步將菌漿用250目篩網(wǎng)過濾，得到混合菌液，其活菌數(shù)含量為lX109CFU/g ；第六步油包水乳化體系的制備:分別稱取杏仁油8kg、白油8kg、蜂蠟5kg、十八醇2kg、羊毛脂2kg、角鯊烷14kg、尼泊爾金丙酯0.1kg混合加熱至75°C;分別稱取甘油5kg、尼泊爾金甲酯0.1kg、去離子水55.8kg混合后加熱至95°C，滅菌20分鐘；在攪拌條件下，將所得的油相緩緩地加入水相中，在真空度0.07MPa，轉(zhuǎn)速IOOOOrpm下乳化15分鐘；第七步待溫度降至40°C，向第六步所得的乳化體中加入第五步所得的益生菌嗜熱鏈球菌(Streptococcsus thermophilus)和干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus caseisubsp casei)混合菌液7kg和日用香精0.1kg,攪拌均勻即可出料,得到活性益生菌護膚霜，益生菌活菌數(shù)為6 X 107CFU/g。實施例4 第一步將嗜熱鏈球菌(Streptococcsus thermophilus)在微生物密封分批培養(yǎng)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基里40°C下進行高密度培養(yǎng)，培養(yǎng)液活菌數(shù)達6.5X109CFU/g，然后通過15000rpm離心5分鐘獲得菌泥，菌泥活菌數(shù)為I X 10nCFU/g ；第二步將干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus casei subsp casei)在微生物密封分批培養(yǎng)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基里37°C下進行高密度培養(yǎng)，培養(yǎng)液活菌數(shù)達1.5X IO10CFU/g，然后通過15000rpm離心10分鐘獲得菌泥，菌泥活菌數(shù)為6X 10nCFU/g ；第三步將嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)在微生物密封分批培養(yǎng)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基里37°C下進行高密度培養(yǎng)，培養(yǎng)液活菌數(shù)達1.4X109CFU/g，然后通過IOOOOrpm離心10分鐘獲得菌泥，菌泥活菌數(shù)為4X 101(lCFU/g ；第四步將甘油和海藻糖按照甘油和海藻糖按質(zhì)量比82:18配比混合，90°C水浴待海藻糖完全溶解后，加熱95°C，保持10分鐘滅菌后，密封冷卻，(TC冷藏；第五步將第一步所得的菌泥按質(zhì)量比1:100加入第四步所得的混合物中，將第二步所得的菌泥按質(zhì)量比1:1000加入第四步所得的混合物中，將第一步中所得的菌泥按質(zhì)量比5:1000加入第四步所得的混合物中研磨攪拌均勻，使三種菌泥完全分散，成為菌漿；第六步將菌漿用200目篩網(wǎng)過濾，得到混合菌液，其活菌數(shù)含量為1.5X IO9CFU/g ; 第七步油包水乳化體系的制備:分別稱取杏仁油8kg、白油8kg、蜂蠟5kg、十八醇2kg、羊毛脂2kg、角鯊烷14kg、尼泊爾金丙酯0.1kg混合加熱至75°C;分別稱取甘油5kg、尼泊爾金甲酯0.1kg、去離子水55.8kg混合后加熱至95°C，滅菌20分鐘；在攪拌條件下，將所得的油相緩緩地加入水相中，在真空度0.07MPa，轉(zhuǎn)速IOOOOrpm下乳化15分鐘；第六步待溫度降至40°C，向第七步所得的乳化體系中加入第六步所得的益生菌嗜熱鏈球菌(Streptococcsus thermophilus),干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus caseisubsp casei)和嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)混合菌液IOkg和日用香精
0.1kg，攪拌均勻即可出料，得到活性益生菌護膚霜，益生菌活菌數(shù)為lX108CFU/g。上述實施例制得的活性益生菌護膚霜的穩(wěn)定性試驗，將樣品在4°C冷藏條件下保藏60天，每隔10天取樣測定樣品中益生菌活菌，每個樣品取三個平行樣，最終結(jié)果為三個樣品活菌數(shù)的平均值。根據(jù)《GB7918.1 7918.5—1987化妝品微生物標準檢驗方法》處理樣品，根據(jù)《GBT4789.35-2010食品衛(wèi)生微生物學檢驗食品中乳酸菌檢驗》選擇檢測培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。試驗結(jié)果參見下表:表I不同樣品益生菌護膚霜在保藏過程中的穩(wěn)定性

權(quán)利要求
1.一種活性益生菌護膚霜，其特征在于，該活性益生菌護膚霜中含有IXio6 I X 108CFU/g的活性益生菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的活性益生菌護膚霜，其特征在于，所述的活性益生菌為嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、干酷乳桿菌干酷亞種(Lactobacillus caseisubsp casei)和嗜熱鏈球菌(Streptococcsus thermophilus)中的一種或兩種以上的混口 O
3.權(quán)利要求I或2所述活性益生菌護膚霜的制備方法，其特征在于，包括如下步驟 (1)將益生菌在液態(tài)培養(yǎng)基里進行37 40°C高密度培養(yǎng)，然后培養(yǎng)液經(jīng)過10000 15000rpm離心3 10分鐘后獲得菌泥； (2)將甘油和海藻糖按照質(zhì)量比(80 90): (10 20)混合，85 95°C水浴至海藻糖完全溶解，90 95°C滅菌10 20分鐘后，密封冷卻至O 4°C ; (3)將步驟(I)所得的菌泥與步驟(2)所得的混合液按質(zhì)量比1:1000 1:10進行混合，研磨攪拌均勻，成為菌漿；將菌漿用200 300目篩網(wǎng)過濾，得到活性益生菌菌液； (4)制備油包水乳化體系，當乳化體系溫度達到40 45°C時，向其中加入乳化體系1% 10%w/w的活性益生菌菌液和O. l%w/w日用香精，攪拌均勻即得到活性益生菌護膚霜。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)所述乳化體系的制備方法為按乳化體系總質(zhì)量的百分比計，分別稱取杏仁油8%、白油8%、蜂蠟5%、十八醇2%、羊毛脂2%、角鯊烷14%、尼泊爾金丙酯0. 1%混合加熱至75°C，制得油相；分別稱取甘油5%、尼泊爾金甲酯0. 1%、去離子水55. 8%混合后加熱至95°C，滅菌20分鐘，制得水相；在攪拌條件下，將油相緩緩地加入水相中，在真空度0. 06 0. 08MPa，轉(zhuǎn)速IOOOOrpm下乳化15分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中制得的菌液中活性益生菌的含量為I X IO7 I X 1010CFU/g。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種活性益生菌護膚霜及其制備方法，即將益生菌進行高密度培養(yǎng)，然后培養(yǎng)液經(jīng)離心獲得菌泥；將甘油和海藻糖混合，水浴加熱至海藻糖完全溶解，滅菌后，密封冷卻至0～4℃；將所得的菌泥與甘油和海藻糖的混合液混合，研磨攪拌均勻，成為菌漿，過濾，得到活性益生菌菌液；制備油包水乳化體系，并向其中加入活性益生菌菌液和日用香精，攪拌均勻即得到活性益生菌護膚霜。所得活性益生菌護膚霜含有1×106～1×108CFU/g的活性益生菌。本發(fā)明的護膚霜能保證在生產(chǎn)及產(chǎn)品貯存過程中益生菌具有活性和數(shù)量穩(wěn)定性，最終達到利用益生菌清潔肌膚，平衡肌膚表面pH，抑制有害菌，防護重金屬離子對細胞的侵害，保水保濕的功效。
文檔編號A61Q19/00GK103251547SQ201310158938
公開日2013年8月21日 申請日期2013年5月2日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月2日
發(fā)明者熊犍, 鮑志寧, 林偉鋒, 陳中 申請人:華南理工大學