專利名稱：：含有薔薇提取物和表沒食子兒茶素沒食子酸酯的皮膚外用組合物的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明是關于一種皮膚外用組合物，該組合物含有表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechingallate，EGCG)和薔薇提取物。更具體地，本發(fā)明是關于一種含有EGCG和薔薇提取物的皮膚外用組合物，該組合物促進膠原的生物合成，因此產(chǎn)生長效的優(yōu)良皮膚彈性和皮膚皺紋改善。
背景技術：
：人的皮膚作為初級保護屏障而保護人體重要器官免受外來刺激，例如溫度和濕度的改變、紫外線和污染物。然而，當皮膚老化時，調(diào)節(jié)新陳代謝的各種激素的分泌就會減少，免疫細胞的功能和細胞活力也會降低。另外，由于諸如臭氧層破壞的污染所導致的紫外光和氧自由基的增加，產(chǎn)生了物理和化學的刺激和應激，促使皮膚老化。為了防止皮膚老化并保持更健康美麗的皮膚，人們已經(jīng)開展了許多研究，通過利用從各種動物、植物和微生物中獲得的生理有效物質(zhì)來保持皮膚的內(nèi)在功能并激活皮膚細胞，因而有效抑制皮膚老化。已知EGCG能夠增強人體的免疫力，當口服時具有優(yōu)秀的抗氧化效果和抗腫瘤效果。另外，已知EGCG施用于皮膚時促進膠原(所述膠原為軟骨、毛細血管和肌肉的組分)的合成并破壞紫外光產(chǎn)生的化學物質(zhì)，因此保護皮膚免受損傷，同時防止皮膚老化，保持皮膚健康，而且具有優(yōu)秀的美白功效。因此，期望EGCG在應用于化妝品組合物以及藥物組合物和家庭用品時顯示出很好的效果。然而，因為EGCG具有多酚化學結(jié)構(gòu)，具有極強的抗氧化作用，所以在外界環(huán)境例如空氣中容易發(fā)生反應，特別是和氧氣、熱和光發(fā)生反應，從而極容易被氧化分解。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)一種含有EGCG和薔薇提取物的皮膚外用組合物可以促進皮膚真皮中膠原的合成，因而產(chǎn)生優(yōu)秀長效的皮膚皺紋改善，由此完成了本發(fā)明。因此，本發(fā)明的目的是提供一種產(chǎn)生優(yōu)秀長效的皮膚皺紋改善的皮膚外用組合物。本發(fā)明的含有EGCG和薔薇提取物的皮膚外用組合物產(chǎn)生優(yōu)秀長效的皮膚皺紋改善。因此，在本發(fā)明中，提供了一種產(chǎn)生優(yōu)秀長效的皮膚皺紋改善的皮膚外用組合物。具體實施例方式為了實現(xiàn)上述目標，本發(fā)明提供了一種含有EGCG和薔薇提取物的皮膚外用組合物。EGCG優(yōu)選具有水中穩(wěn)定的(water-stabilized)EGCG膠囊制劑(capsuleformulation),薔薇提取物優(yōu)選為薔薇芽提取物。根據(jù)本發(fā)明，水中穩(wěn)定的EGCG膠囊含有0.01-30重量Q/o的純EGCG，是通過將陽性聚合物(positivepolymer)、陰性聚合物(negativepolymer)、或者它們的混合物；水不溶性聚合物、兩親聚合物、或者它們的混合物；以及抗氧化劑進行混合而制備得到的。本發(fā)明所用的水中穩(wěn)定的EGCG膠囊組合物的制備方法包括如下步驟在室溫下混合親水性溶劑；EGCG;陽性聚合物、陰性聚合物、或者它們的混合物；抗氧化劑；以及水不溶性聚合物、兩親聚合物、或者它們的混合物；和將水、親水性溶劑、或者它們的混合物加入到上述混合物中以制備膠囊。本發(fā)明所用的水中穩(wěn)定的EGCG膠囊組合物的另外一種制備方法包括如下步驟室溫下混合親水性溶劑；EGCG;以及水不溶性聚合物、兩親聚合物、或者它們的混合物；將水、親水性溶劑、或者它們的混合物加入到上述混合物中以溶解該混合物；以及將陽性聚合物、陰性聚合物、或者它們的混合物混合到溶解的混合物中。在以上兩種方法中，基于所述膠囊的總重量，所述EGCG的含量為0.01-30重量％，所述陽性聚合物、陰性聚合物、或者它們的混合物的含量為0.1-5.0重量％，所述水不溶性聚合物、兩親聚合物、或者它們的混合物的含量為0.5-25.0重量％，所述抗氧化劑的含量為0.1-10重量％，所述膠囊含有平衡量的水和親水性溶劑。在本發(fā)明中，基于整個組合物，水中穩(wěn)定的EGCG膠囊的量優(yōu)選為0.01-50重量％。如果水中穩(wěn)定的EGCG膠囊的量低于整個組合物的0.01重量%，很難有效果；如果水中穩(wěn)定的EGCG膠囊的量超過50重量y。，則需要考慮由于過量使用而導致的副作用。如果基于整個組合物，薔薇芽提取物的量低于0.01重量％，很難有效果；如果薔薇芽提取物的量超過50重量％，則需要考慮由于過量使用而導致的副作用。薔薇用作治療已有千年，薔薇在它的芽、葉、莖和根以及果實中存在有效成分。尤其是，通過實驗已經(jīng)知道薔薇芽的提取物含有豐富的維生素B、維生素C等，因此有效地防止紫外光和抗氧化劑造成的皮膚損傷，并且有效地增強皮膚彈性。本發(fā)明中所用薔薇芽的提取物優(yōu)選通過用丁二醇提取生長于高山地區(qū)的野生薔薇芽而制得。這些薔薇芽的提取物含有大量生理活性物質(zhì)，例如維生素B、維生素C，因此具有抗氧化作用，有助于恢復受損肌膚，以增強皮膚彈性。根據(jù)本發(fā)明，對所述含有EGCG和薔薇提取物的皮膚外用組合物的劑型沒有特別限定?？梢灾瞥善つw柔化劑、營養(yǎng)化妝水、營養(yǎng)霜、按摩膏、美容涂敷劑(pack)、凝膠或皮膚粘附型化妝品。另外，還可以制成經(jīng)皮類型，例如洗劑、軟膏劑、凝膠劑、乳霜劑、貼劑(patches)或噴霧劑。通過以下實施例對本發(fā)明進行更加詳細得描述。然而，對本領域技術人員來說顯而易見的是，提供這些實施例只是為了詳細說明的目的，并不應理解為限制本發(fā)明的范圍。參考實施例l水中穩(wěn)定的EGCG膠囊的制備表l<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>水中穩(wěn)定的EGCG膠囊按照上面表1的組成制備，制備過程如下:1)、將作為親水性溶劑的丙三醇和丙酮置于燒瓶中，將EGCG加入其中并溶解；2)、室溫下，將作為極性聚合物的糖和殼聚糖以及作為抗氧化劑的酪氨酸加入到l)的溶液中并溶解；3)、將作為水不溶性聚合物的聚酯溶解在作為親水性溶劑的丙三醇和丙酮的混合物中。如果需要，可以通過升高溫度來完成這些水不溶性聚合物的溶解。溶解后，溫度降到室溫；4)、將2)的溶液和3)的水不溶性聚合物溶液混合；5)、將4)的溶液加入到水與作為親水性溶劑的丙三醇和丙酮的混合物中，慢慢攪拌以制備膠囊；6)、膠囊制備好后，在約100mmHg、6(TC條件下除去丙酮。實驗實施例1對于人皮膚細胞的膠原生物合成的作用在24孔微量培養(yǎng)板中培養(yǎng)人纖維原細胞，將它們的培養(yǎng)基變?yōu)楹斜?中物質(zhì)的培養(yǎng)基。培養(yǎng)3天時，每孔加入0.5ml含10。/。胎牛血清(FBS)的DMEM培養(yǎng)基，再向其中加入10pCi的L[2，3,4,5-3H]-脯氨酸。24小時后，使每孔中所含的培養(yǎng)基和細胞傾斜，加入5%三氯乙酸(Trichloroaceticacid，TCA)溶液。然后將每個樣品分裝在2個試管中，向每對試管的一個試管中加入l單位4il的I型膠原酶，在37'C下培養(yǎng)90分鐘；另一個試管在《C儲存。然后每個試管中都加入0.05ml的50。/。TCA，試管在4。C下放置20分鐘，然后每個試管均以12000轉(zhuǎn)/分(rpm)離心10分鐘。每組上清液和沉淀都用液態(tài)閃爍計數(shù)器(LiquidScintillationCounter,LSC)處理以獲得CPM(每分鐘計數(shù))值，然后基于下面的數(shù)學公式l求得每個對照組和實驗組的相對膠原生物合成值(RCB)。所得結(jié)果是相對值，設定不含任何表2物質(zhì)的對照的值為100。結(jié)果如表2所示。數(shù)學公式l11。8(%)=(膠原的0111)/{(總膠原的0111^5.4+膠原的cpmHX100表2<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>從以上表2可以看出，水中穩(wěn)定的EGCG膠囊和薔薇芽的提取物以濃度依賴形式促進纖維原細胞膠原的生物合成。實施例l-4和對比例l-5根據(jù)以下表3的組成，制備實施例l-4和對比例l-5的乳霜制劑。在表3中，薔薇提取物得自薔薇的葉、莖和根。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實驗實施例2對動物膠原生物合成的作用為了確定組合物對膠原生物合成的作用，制備了實施例l-4和對比例l-5的乳霜制劑，所述制劑制備后立即在無毛小鼠的背上施用l周，所述制劑制備10周后和20周后施用。小鼠接下來進行活組織檢查和膠原免疫組織化學染色檢查。所得結(jié)果是相對值，對照組的值設為IOO。結(jié)果如表4所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從表4中可以看出，與施用對比例l的乳霜的組相比，施用實施例l-4的乳霜的組的膠原生物合成分別提高了38%、22%、19%和15%。尤其是在同時使用水中穩(wěn)定的EGCG膠囊和薔薇芽提取物的實施例1中，膠原蛋白生物合成提高了38%，20周后仍然保持作用。從中可以看出，在本發(fā)明中，當使用水中穩(wěn)定的EGCG膠囊和薔薇芽提取物的混合物時，效果顯著增強而且持久。實驗實施例3對人體皮膚彈性的改善進行以下實驗以證明上述表3中的制劑對改善皮膚彈性的效果。90位30-39歲的女性被分成3組(每組30人)。對于每組，每天施用兩次制劑1或2或者對比制劑l，在24-26"C、相對濕度76%RH的條件下持續(xù)12周。皮膚的彈性用cutomer(CutometerSEM575，C+KElectronicGmbH，德國)檢測。得到R8[R8(左)-R8(右)]值，在表5中顯示，其中R8(左)是對照的皮膚彈性，而R8(右)是評價組的皮膚彈性，這樣R8值表示了粘彈性的程度。對照組是未用制劑處理的組。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>從表5中可以看出，用同時含有水中穩(wěn)定的EGCG膠囊和薔薇芽的提取物的實施例l制劑處理的組，表現(xiàn)出的皮膚彈性比用實施例2和對比例1制劑處理的組顯著提高。實驗結(jié)束后，受試者分別完成了問巻調(diào)査以確定對效果的主觀評價。結(jié)果見表6。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>從以上表6可以確定，當施用實施例1的含有水中穩(wěn)定的EGCG膠囊和薔薇提取物的制劑時，皮膚彈性得到了改善。實驗實施例4皮膚皺紋的改善進行以下實驗以確定上述實施例1和實施例2的制劑，以及對比例1和2的制劑對皮膚皺紋的改善作用。80位31-39歲女性被分成4組(每組20人)。對于每組，各施用制劑1或2、或者對比制劑1或2，一天2次，持續(xù)8周，8周后用硅制備復制品。皮膚鈹紋狀況用皮膚鈹紋量度測試儀(SV600,Courage+KhazakaElectronicGmbH,德國)進行圖像分析。通過將同一個人8周后對應的參數(shù)值減去使用前的每個參數(shù)值獲得平均值。見表7。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>Rl:皮膚皺紋輪廓的最大值和最小值之間的差值。R2:由隨機輪廓的值和該隨機輪廓的第五輪廓的值之間的差值獲得的Rl的平均值。R3:由隨機輪廓的值和該隨機輪廓的第五輪廓的值之間的差值獲得的Rl的最大值。R4:在皺紋輪廓的基線，每個峰至峰值之間的平均值。R5:每個皺紋輪廓值和基線之間的差值。從表7中可以看出，實施例1和2在改善皮膚皺紋方面優(yōu)于對比例1和2，尤其是實施例l更為突出。權(quán)利要求1、一種皮膚外用組合物，該組合物含有薔薇提取物和表沒食子兒茶素沒食子酸酯作為有效成分。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述表沒食子兒茶素沒食子酸酯位于水中穩(wěn)定的表沒食子兒茶素沒食子酸酯膠囊制劑中。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中，以組合物的總重量為基準，所述水中穩(wěn)定的表沒食子兒茶素沒食子酸酯膠囊的含量為0.01至50重量％。4、根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中，所述水中穩(wěn)定的表沒食子兒茶素沒食子酸酯膠囊是通過將表沒食子兒茶素沒食子酸酯；陽性聚合物、陰性聚合物、或者它們的混合物；水不溶性聚合物、兩親聚合物、或者它們的混合物；以及抗氧化劑進行混合以使表沒食子兒茶素沒食子酸酯在水中穩(wěn)定而制成的。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述薔薇提取物為薔薇芽的提取物。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其中，所述薔薇芽的提取物是通過用丁二醇提取生長于高山地區(qū)的野生薔薇芽而制成的。7、根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其中，以組合物的總重量為基準，所述薔薇芽的提取物的含量為0.01至50重量％。8、根據(jù)權(quán)利要求1-7中任意一項所述的組合物，其中，所述組合物用于改善皮膚皺紋。全文摘要本發(fā)明是關于一種皮膚外用組合物，該組合物含有薔薇提取物和表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)作為有效成分。更具體地，本發(fā)明是關于一種含有薔薇提取物和EGCG的皮膚外用組合物，因而促進膠原纖維合成，以長效地增進較好的皮膚彈性并改善皮膚皺紋。文檔編號A61Q19/00GK101111290SQ200580047678公開日2008年1月23日申請日期2005年11月1日優(yōu)先權(quán)日2005年2月3日發(fā)明者曹濬喆,李和俊,韓相勛申請人:株式會社太平洋