得到包覆海藻酸鈉的多孔殼聚糖微球；
[0035]四、將得到的微球放入20mL2wt%的氯化鈣溶液中交聯(lián)lh，得到海藻酸鈣殼層；
[0036]五、將步驟四所得微球進(jìn)行洗滌，分別用蒸餾水多次洗滌，真空干燥后得到海藻酸鈣凝膠層包覆多孔殼聚糖復(fù)合多孔微球。
[0037]本實(shí)施例中所使用的殼聚糖多孔微球不同放大倍數(shù)的掃描電鏡圖如圖1a和Ib所示。殼聚糖多孔微球的直徑約為150微米，表面具有大量I?2微米的孔洞。
[0038]本實(shí)施例制備得到的殼聚糖-海藻酸鈣核殼多孔微球不同放大倍數(shù)的掃描電鏡圖如圖2a和2b所示。包覆后，殼聚糖微球表面的多孔結(jié)構(gòu)不復(fù)存在，而是形成了比較光滑和致密的殼層。
[0039]本實(shí)施例制備的殼聚糖-海藻酸鈣核殼多孔微球切面的掃描電鏡圖如圖3a和3b所示。微球表面形成了厚度為7微米的致密殼層，內(nèi)部仍為具有豐富孔洞的多孔結(jié)構(gòu)。
[0040]實(shí)施例2
[0041 ] 一、50mL石油醚+3.2g Span80+8mL 1^1:%的聚乙稀醇溶液，乳化2h，得到油包水乳液；
[0042]二、在油包水乳液中加入20mg殼聚糖微球，攪拌lh，讓其與乳滴中的聚乙烯醇發(fā)生氫鍵相互作用，吸附在殼聚糖多孔微球表面；
[0043]三、將步驟二所得乳液超聲分散5min后，加入50mL乙醇，抽濾得到包覆聚乙烯醇的多孔殼聚糖微球；
[0044]四、將步驟四所得微球用乙醇進(jìn)行洗滌，真空干燥后得到聚乙烯醇?xì)影驳亩嗫讱ぞ厶菑?fù)合多孔微球。
[0045]實(shí)施例3
[0046]一、50mL石錯(cuò)油+2g Span80+10mL 1^1:%的纖維素溶液，乳化1.5h，得到油包水乳液；
[0047]二、在油包水乳液中加入20mg殼聚糖微球，攪拌Ih，讓其與乳滴中的纖維素發(fā)生相互作用，吸附在殼聚糖多孔微球表面；
[0048]三、將步驟二所得乳液超聲分散5min后，加入50mL的丙酮，抽濾得到包覆纖維素的多孔殼聚糖微球；
[0049]四、將步驟四所得微球進(jìn)行洗滌，用丙酮多次洗滌，真空干燥后得到纖維素殼層包覆的多孔殼聚糖復(fù)合多孔微球。
[0050]實(shí)施例4
[0051]—、將40mg殼聚糖-海藻酸I丐核殼多孔微球浸于1mL 3mg/mL BSA(牛血清白蛋白)溶液中，室溫下，慢速攪拌直至分散均勾，后放入真空干燥器中抽真空排氣0.5h。載藥24h結(jié)束后，靜置分離微球。用蒸餾水洗滌3次，干燥待用。
[°°52] 二、載藥微球釋放試驗(yàn)步驟如下:量取釋放介質(zhì)PBS(pH = 7.4)溶液50mL倒入錐形瓶，隨后將錐形瓶移入37°C的恒溫振蕩水浴(轉(zhuǎn)速為10rpm)。將40mg載藥微球放入錐形瓶并開(kāi)始計(jì)時(shí)。之后每間隔lh，使用移液管從錐形瓶中取出ImL溶液，保存，同時(shí)補(bǔ)充ImL新鮮母液。整個(gè)藥物釋放過(guò)程持續(xù)24h，待釋藥結(jié)束后用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定BSA濃度，依據(jù)BSA的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算不同時(shí)間BSA的釋放濃度。每個(gè)樣品測(cè)定三組平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算其平均值。
[0053]本實(shí)施例的殼聚糖-海藻酸鈣核殼多孔微球?qū)SA的緩釋情況示于圖4。參照殼聚糖多孔微球(CSMS)I小時(shí)能釋放60%的BSA，3小時(shí)釋放80%BSA。殼聚糖-海藻酸鈣核殼多孔微球(CSiAlgCa-MS) I小時(shí)和3小時(shí)的BSA的釋放量分別為20 %和50 %。由此說(shuō)明核殼多孔微球延長(zhǎng)了BSA的釋放時(shí)間，起到了明顯的緩釋效果。
[0054]實(shí)施例5
[0055]一、將40mg殼聚糖-海藻酸鈣核殼多孔微球浸于1mL lmg/mL DOX溶液中，室溫下，慢速攪拌直至分散均勻，后放入真空干燥器中抽真空排氣lh。載藥12h結(jié)束后，靜置分離微球。用蒸餾水洗滌3次，冷凍干燥待用。
[°°56] 二、載藥微球釋放試驗(yàn)步驟如下:量取釋放介質(zhì)PBS(pH = 7.4)溶液50mL倒入錐形瓶，隨后將錐形瓶移入37°C的恒溫振蕩水浴(轉(zhuǎn)速為10rpm)。將40mg載藥微球放入錐形瓶并開(kāi)始計(jì)時(shí)。之后每間隔lh，使用移液管從錐形瓶中取出4mL溶液，保存，同時(shí)補(bǔ)充4mL新鮮母液。整個(gè)藥物釋放過(guò)程持續(xù)24h，待釋藥結(jié)束后用紫外分光光度儀在481nm波長(zhǎng)測(cè)定取出液的吸光值，依據(jù)DOX的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算不同時(shí)間DOX的釋放濃度。每個(gè)樣品測(cè)定三組平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算其平均值。
[0057]本實(shí)施例的殼聚糖-海藻酸鈣核殼多孔微球?qū)OX的緩釋情況示于圖5。參照殼聚糖多孔微球(CSMS)突釋嚴(yán)重:I小時(shí)能釋放55 %的DOX，5小時(shí)釋放80 %BSA，在24h內(nèi)累積釋放率就已達(dá)到98%。殼聚糖-海藻酸鈣核殼多孔微球(CSMlgCa-MS)明顯緩解了微球所載藥物的突釋情況:I小時(shí)和3小時(shí)的BSA的釋放量分別為28%和60%，而24h的累積釋放率為85%。由此說(shuō)明核殼多孔微球延長(zhǎng)了BSA的釋放時(shí)間，起到了明顯的緩釋效果。
[0058]以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述特定實(shí)施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在權(quán)利要求的范圍內(nèi)做出各種變形或修改，這并不影響本發(fā)明的實(shí)質(zhì)內(nèi)容。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: 分別制備殼材的水溶液、多孔微球的油相分散液，以及含有乳化劑的油相溶液； 將所述殼材的水溶液加入含有乳化劑的油相溶液中，混合后得到油包水乳液； 將所述多孔微球的油相分散液加入油包水乳液中，攪拌后，收集殼材包覆的多孔微球，得到核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球。2.如權(quán)利要求1所述的核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其特征在于，所述殼材為海藻酸鈉、殼聚糖、纖維素、明膠、環(huán)糊精、聚乙烯醇、淀粉中的一種。3.如權(quán)利要求1所述的核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其特征在于，所述多孔微球?yàn)闅ぞ厶嵌嗫孜⑶?、纖維素多孔微球、聚乳酸多孔微球、明膠多孔微球、海藻酸鈣多孔微球、聚乙烯醇多孔微球、淀粉多孔微球中的一種。4.如權(quán)利要求2所述的核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其特征在于，所述殼材為海藻酸鈉時(shí)，殼材溶液的制備方法包括如下步驟:將0.05?0.5g的海藻酸鈉溶于1mL的蒸餾水中，攪拌溶解，靜置消泡。5.如權(quán)利要求3所述的核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其特征在于，所述多孔微球?yàn)闅ぞ厶嵌嗫孜⑶驎r(shí)，多孔微球的油相分散液的制備方法包括如下步驟:將5?20mg的多孔殼聚糖微球放入1mL的油相中，攪拌分散。6.如權(quán)利要求1所述的核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其特征在于，所述含有乳化劑的油相溶液的制備方法包括如下步驟:在50mL的油相中加入I?3g乳化劑，攪拌均勻。7.如權(quán)利要求6所述的核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其特征在于，所述乳化劑選自司班系列、吐溫系列、陽(yáng)離子和陰離子表面活性劑。8.如權(quán)利要求4所述的核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其特征在于，所述殼材為海藻酸鈉時(shí)，需在氯化鈣溶液內(nèi)交聯(lián)，氯化鈣溶液的濃度為0.5?5wt %。9.如權(quán)利要求4所述的核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其特征在于，所述油相溶液和油相分散液的溶劑均為石油醚、石蠟油、礦物油中的一種。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合多孔微球的制備方法，其包括如下步驟：分別制備殼材溶液、多孔微球的油相分散液，以及含有乳化劑的油相溶液；將所述殼材溶液加入含有乳化劑的油相溶液中，混合后得到油包水乳液；將所述多孔微球的油相分散液加入油包水乳液中，攪拌后，收集殼材包覆的多孔微球。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下的有益效果：1、復(fù)合微球分散性良好，無(wú)聚集結(jié)塊；2、制造工藝簡(jiǎn)單；3、微球具有致密殼層和多孔內(nèi)核的結(jié)構(gòu)特征，有利于載藥量的提高和藥物的緩慢釋放。
【IPC分類】A61K47/34, A61K47/38, A61K47/36, A61K47/42, A61K9/52, A61K9/50
【公開(kāi)號(hào)】CN105534952
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610011690
【發(fā)明人】劉海清, 吳曉威, 李濟(jì)祥
【申請(qǐng)人】福建師范大學(xué)
【公開(kāi)日】2016年5月4日
【申請(qǐng)日】2016年1月8日