甘草香豆素作為pbk/topk蛋白抑制劑的新用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及甘草香豆素作為P服/TOPK蛋白抑制劑的一種新用途。
【背景技術(shù)】
[0002] -直W來(lái)，癌癥被認(rèn)為是人類(lèi)的"頭號(hào)殺手"，被稱為不治之癥。國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu) 發(fā)表的《2014年世界癌癥報(bào)告》顯示，2012年，全球新增癌癥病例達(dá)到1400多萬(wàn)例，并預(yù)計(jì)在 未來(lái)20年達(dá)到每年2200萬(wàn)的水平，同期癌癥死亡人數(shù)也將從每年820萬(wàn)飄升至1300萬(wàn)。
[0003] 2000年，Gaudet等在Hela細(xì)胞cDNA文庫(kù)中克隆出了一種與hDlg化Uman homologue of theDrosophila Discs-Iarge)分子PDZ結(jié)構(gòu)域結(jié)合的分子PBK(PDZbinding-kinase , P服）。同年，Abe等在活化型淋己因子激活的殺傷性T細(xì)胞（lymphokine-activated killer T Ce 11S，T-LAK Ce 11S)的cDNA文庫(kù)中，克隆和表達(dá)出新型蛋白激酶T-LAK細(xì)胞源蛋白激酶 P服/TOPK(T-LAKcello;riginatedp;roteinkinase,P服/TOPK),通過(guò)序列分析發(fā)現(xiàn)兩者為 同一種分子，即命名為P服/P服/TOPK蛋白。
[0004] PBK/T0PK蛋白是一種有絲分裂激酶，在許多惡性腫瘤中高表達(dá)，比如血液腫瘤、結(jié) 腸癌、乳腺癌、肺癌和膽管癌。另外，由于PBK在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞有絲分裂，細(xì)胞周期、調(diào)亡W及 細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化中都起著非常重要的作用。PBK/T0PK有可能成為廣譜性的腫瘤潛在的藥物開(kāi) 發(fā)祀點(diǎn)。PBK/T0PK能夠調(diào)控細(xì)胞周期，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖并且能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞抵抗調(diào)亡。 目前，PBK/T0PK與腫瘤關(guān)系的研究日益受到關(guān)注，祀向PBK/T0PK的特異性阻斷劑已被應(yīng)用 于腫瘤治療研究中。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供甘草香豆素作為P服/TOPK蛋白抑制劑中的一種新用途。
[0006] 本發(fā)明首先保護(hù)甘草香豆素在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用;所述產(chǎn)品的用途為如下(a)和/ 或(b)和/或(；c)和/或(d)和/或(e)和/或(f)和/或(g)和/或化)和/或（i)和/或（j)和/或化） 和/或（1):
[0007] (a)抑制腫瘤細(xì)胞增殖；
[000引（b)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡；
[0009] (C)抑制P服/TOPK蛋白憐酸化；
[0010] (d)抑制histone冊(cè)憐酸化；
[0011] (e)與P服/TOPK蛋白結(jié)合；
[0012] (f)檢測(cè) PBK/T0PK 蛋白；
[001 ：3 ] (g)抑制PBK/T0PK蛋白的活性；
[0014] 化)抑制P服/TOPK蛋白表達(dá)；
[001引（i)降低細(xì)胞中的PBK/T0PK蛋白水平；
[0016] (j)降低細(xì)胞中的憐酸化PBK/T0PK蛋白水平；
[0017] 化)降低細(xì)胞中的憐酸化histone冊(cè)水平；
[001引（1)治療腫瘤。
[0019] 所述(a)和/或(b)中，所述腫瘤細(xì)胞為表達(dá)PBK/T0PK蛋白的腫瘤細(xì)胞。所述(a)和/ 或(b)中，所述腫瘤細(xì)胞為肝癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞株或前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述(a)和/或(b) 中，所述腫瘤細(xì)胞為人肝癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞株或人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述(a)和/或 (b)中，所述腫瘤細(xì)胞為化pG2細(xì)胞、肥T-116細(xì)胞、DU-145細(xì)胞或化h-7細(xì)胞。
[0020] 所述（i)和/或（j)和/或（k)中，所述細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞。所述腫瘤細(xì)胞為表達(dá)PBK/ TOPK蛋白的腫瘤細(xì)胞。所述腫瘤細(xì)胞為肝癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞株或前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述 腫瘤細(xì)胞為人肝癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞株或人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述腫瘤細(xì)胞為HepG2細(xì) 胞、HCT-116細(xì)胞、DU-145細(xì)胞或Huh-7細(xì)胞。
[0021] 所述(1)中，所述腫瘤為表達(dá)PBK/T0PK蛋白的腫瘤細(xì)胞引起的腫瘤。所述(1)中，所 述表達(dá)PBK/T0PK蛋白的腫瘤細(xì)胞為肝癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞株或前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述(1) 中，所述表達(dá)PBK/T0PK蛋白的腫瘤細(xì)胞為人肝癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞株或人前列腺癌細(xì)胞 細(xì)胞。所述（1)中，所述表達(dá)P服/TOPK蛋白的腫瘤細(xì)胞為化pG2細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、DU-145細(xì) 胞或化h-7細(xì)胞。
[0022] 本發(fā)明還保護(hù)一種產(chǎn)品，其活性成分為甘草香豆素;所述產(chǎn)品的用途為如下（（a) 和/或(b)和/或(C)和/或(d)和/或(e)和/或(f)和/或(g)和/或化)和/或（i)和/或（j)和/或 (k)和/或（1):
[0023] (a)抑制腫瘤細(xì)胞增殖；
[0024] (b)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡；
[0025] (C)抑制P服/TOPK蛋白憐酸化；
[00%] (d)抑制histone冊(cè)憐酸化；
[0027] (e)與P服/TOPK蛋白結(jié)合；
[002引 （f)檢測(cè)P服/TOPK蛋白；
[0029] (g)抑制P服/TOPK蛋白的活性；
[0030] 化)抑制P服/TOPK蛋白表達(dá)；
[0031] (i)降低細(xì)胞中的P服/TOPK蛋白水平；
[0032] (j)降低細(xì)胞中的憐酸化PBK/T0PK蛋白水平；
[0033] 化)降低細(xì)胞中的憐酸化histone冊(cè)水平；
[0034] (1)治療腫瘤。
[0035] 所述(a)和/或(b)中，所述腫瘤細(xì)胞為表達(dá)PBK/T0PK蛋白的腫瘤細(xì)胞。所述(a)和/ 或(b)中，所述腫瘤細(xì)胞為肝癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞株或前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述(a)和/或(b) 中，所述腫瘤細(xì)胞為人肝癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞株或人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述(a)和/或 (b)中，所述腫瘤細(xì)胞為化pG2細(xì)胞、肥T-116細(xì)胞、DU-145細(xì)胞或化h-7細(xì)胞。
[0036] 所述（i)和/或（j)和/或（k)中，所述細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞。所述腫瘤細(xì)胞為表達(dá)PBK/ TOPK蛋白的腫瘤細(xì)胞。所述腫瘤細(xì)胞為肝癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞株或前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述 腫瘤細(xì)胞為人肝癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞株或人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述腫瘤細(xì)胞為HepG2細(xì) 胞、HCT-116細(xì)胞、DU-145細(xì)胞或Huh-7細(xì)胞。
[0037] 所述(1)中，所述腫瘤為表達(dá)PBK/T0PK蛋白的腫瘤細(xì)胞引起的腫瘤。所述(1)中，所 述表達(dá)PBK/T0PK蛋白的腫瘤細(xì)胞為肝癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞株或前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞。所述(1) 中，所述表達(dá)PBK/TOPK蛋白的腫瘤細(xì)胞為人肝癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞株或人前列腺癌細(xì)胞 細(xì)胞。所述（1)中，所述表達(dá)P服/TOPK蛋白的腫瘤細(xì)胞為化pG2細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、DU-145細(xì) 胞或化h-7細(xì)胞。
[003引 W上任一所述P服/TOPK蛋白（TOPK蛋白）具體可如序列表的序列1所示。
[0039] 本發(fā)明的發(fā)明人用一系列生物實(shí)驗(yàn)證明了甘草香豆素可W通過(guò)與PBK/T0PK蛋白 的直接互作從而抑制P服/TOPK蛋白的活性，從而抑制P服/TOPK高表達(dá)的惡性腫瘤。
[0040] 由于PK(在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞有絲分裂，細(xì)胞周期、調(diào)亡W及細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化中都起著非 常重要的作用。PBK/T0PK有可能成為廣譜性的腫瘤潛在的藥物開(kāi)發(fā)祀點(diǎn)。本發(fā)明為研制 P服/TOPK抑制劑及應(yīng)用于腫瘤治療的祀向P服/TOPK的特異性阻斷劑提供充分的理論依據(jù)。
[0041] 本發(fā)明對(duì)于腫瘤治療具有巨大的應(yīng)用價(jià)值，在防癌抗癌，保護(hù)人體健康方面具有 廣泛前景，能獲得很好的社會(huì)效益。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)甘草香豆素可W抑制PBK/T0PK的表達(dá)， 為研制組分明確，療效確切的保健食品或藥品提供充分依據(jù)，市場(chǎng)前景廣闊。
【附圖說(shuō)明】
[0042] 圖1為實(shí)施例1的結(jié)果。
[0043] 圖2為實(shí)施例2的結(jié)果。
[0044] 圖3為實(shí)施例3的結(jié)果。
[0045] 圖4為實(shí)施例4的結(jié)果。
[0046] 圖5為實(shí)施例5的結(jié)果。
[0047] 圖6為實(shí)施例6的結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0048] W下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn) 方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為自 常規(guī)生化試劑商店購(gòu)買(mǎi)得到的。
[0049] 甘草香豆素如式(I)所示，制備方法和表征數(shù)據(jù)見(jiàn)參考文獻(xiàn)(甘草香豆素即文獻(xiàn)中 的化合物6a):朱大元，宋國(guó)強(qiáng)，蔣福祥;甘草化學(xué)成分的研究-異甘草黃酬醇及甘草香豆素 的結(jié)構(gòu)；化學(xué)學(xué)報(bào);ACTA CHIMICA SINICA，198