.25g乳鐵蛋白/天Ag體重，優(yōu)選至少0.5g乳鐵蛋白/天Ag體重，更 優(yōu)選至少Ig乳鐵蛋白/天Ag體重。
[(K)加]乳鐵蛋白可W至少O.Olg/lOOkcal，優(yōu)選至少O.lg/lOOkcal的濃度存在于組合物 中。例如，乳鐵蛋白可W約O.Olg/lOOkcal組合物至lOOg/lOOkcal組合物、優(yōu)選0.1 g/ IOOkcal組合物至50g/100kcal組合物、甚至更優(yōu)選2g/100kcal組合物至25g/100kcal組合 物的范圍存在于組合物中。
[0051] 乳鐵蛋白也可結(jié)合其他化合物一起使用，例如唾液酸和/或鐵。
[0052] 特別優(yōu)選的含有乳鐵蛋白的組合物可另外包含唾液酸，其量在IOOmg唾液酸/100g 組合物（重量比）至1000 mg唾液酸/100g組合物（重量比）的范圍內(nèi)，例如500mg唾液酸/100g 組合物(重量比）至650mg唾液酸/100g組合物(重量比）的范圍內(nèi)。
[0053] 例如本發(fā)明所用的組合物可包含至少約0.001%的唾液酸(按重量計(jì)）。在本發(fā)明 的其他實(shí)施例中，該組合物可包含至少約0.005%或至少約0.0 l %的唾液酸(按重量計(jì)）。
[0054] 作為另外一種選擇或除此之外，含有乳鐵蛋白的組合物可包含鐵，其量在約Img 鐵/100g組合物(重量比）至50mg鐵/100g組合物(重量比）的范圍內(nèi)，例如IOmg鐵/100g組合 物(重量比）至30mg鐵/1 OOg組合物(重量比）。
[0055] 例如一種含有乳鐵蛋白的組合物可包含約852mg/100g(重量比）的唾液酸和22mg/ 100g(重量比）的鐵。
[0化6] 本發(fā)明的含有乳鐵蛋白的組合物可具有30kcal/100g組合物至lOOOkcal/lOOg組 合物，優(yōu)選50kcal/100g組合物至450kcal/100g組合物范圍內(nèi)的熱量密度。例如組合物可具 有約400kcal/100g的熱量密度。
[0057] 該組合物的性質(zhì)沒有特別限制。它優(yōu)選為口服或經(jīng)腸施用的組合物。
[0058] 該組合物例如可選自食品、動(dòng)物食品、藥物組合物、營(yíng)養(yǎng)制劑、保健營(yíng)養(yǎng)品、飲料、 食品添加劑和嬰幼兒喂養(yǎng)配方。
[0059] 在一個(gè)典型的實(shí)施例中，該組合物將包含蛋白質(zhì)源、脂質(zhì)源和碳水化合物源。
[0060] 例如，此類組合物可包含在約2至6g/100kcal的范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)，在約1.5至3g/ IOOkcal范圍內(nèi)的脂質(zhì)和/或在約1.7至12g/100kcal范圍內(nèi)的碳水化合物。如果該組合物是 液體，其能量密度可在60至75kcal/100ml之間。
[0061 ] 如果該組合物是固體，其能量密度可在60至75kcal/100g之間。
[0062] 蛋白質(zhì)的類型被認(rèn)為對(duì)本發(fā)明無關(guān)緊要。因此，可使用例如基于乳清、酪蛋白及其 混合物的蛋白質(zhì)源。就乳清蛋白而言，可使用酸乳清或甜乳清或其混合物，W及W任何所需 比例混合的O-乳白蛋白和e-乳球蛋白。乳清蛋白可為經(jīng)改性的甜乳清。甜乳清是較易獲得 的奶酪制作過程的副產(chǎn)品，常用于制取基于牛乳的嬰幼兒配方。然而，甜乳清中包含一種名 為酪蛋白糖巨膚(CGMP)的組分，該組分不期望地富含蘇氨酸，而色氨酸含量很少。將CGMP從 甜乳清中去除可使得蛋白質(zhì)中蘇氨酸的含量更接近于人乳中蘇氨酸的含量。然后可在運(yùn)種 經(jīng)改性的甜乳清中補(bǔ)充那些有關(guān)的含量低的氨基酸(主要是組氨酸和色氨酸）dEP 880902 中描述了將CGMP從甜乳清中除去的方法，WO 01/11990中描述了基于此類經(jīng)改性的甜乳清 的嬰幼兒配方。所述蛋白質(zhì)可為完整的或水解的蛋白，或?yàn)橥暾鞍缀退獾鞍椎幕旌衔铩?例如，對(duì)于被認(rèn)為處于發(fā)生牛乳過敏風(fēng)險(xiǎn)的受試者而言，提供部分水解的蛋白質(zhì)(水解程度 在2%與20%之間）可能是可取的。如果需要水解的蛋白質(zhì)，則可根據(jù)需要并且如本領(lǐng)域已 知的那樣進(jìn)行水解過程。例如，可通過如在EP 322589中所述的兩個(gè)步驟對(duì)乳清級(jí)分進(jìn)行酶 法水解，W制備乳清蛋白水解物。對(duì)于深度水解蛋白，所述乳清蛋白可進(jìn)行先使用堿性蛋白 酶Alcalase 2.化化C 940459)，再使用中性蛋白酶化UtraseO.化(可得自諾和諾德股份公 司（Novo Nordisk Ferment AG))，最后使用膜酶在55°C下的S重水解。如果用作原料的乳 清級(jí)分基本上不含乳糖，則發(fā)現(xiàn)該蛋白質(zhì)在水解過程中經(jīng)受少得多的賴氨酸阻斷。運(yùn)使得 能夠?qū)①嚢彼嶙钄嗟某潭葟目傎嚢彼岬募s15重量％降低至不到賴氨酸的約10重量％，例如 賴氨酸的約7重量％，運(yùn)大大地提高了蛋白質(zhì)源的營(yíng)養(yǎng)質(zhì)量。
[0063] 本發(fā)明中所用的組合物可包含碳水化合物源。可使用任何碳水化合物源，例如乳 糖、薦糖、麥芽糖糊精、淀粉及它們的混合物。
[0064] 本發(fā)明中所用的組合物可包含脂質(zhì)源。脂質(zhì)源可W是任何脂質(zhì)。優(yōu)選的脂肪源包 括乳脂肪、棟桐油精、高油酸向日葵油和高油酸紅花油?？商砑颖匦柚舅醽営退岷蚎-亞麻 酸，也可添加含有豐富初加工的花生四締酸和二十二碳六締酸的少量油，例如魚油或微生 物油。在脂質(zhì)源中，n-6和n-3脂肪酸的比例優(yōu)選地約為5:1至15:1;例如約8:1至10:1。
[0065] 本發(fā)明的組合物也可包含據(jù)悉為日常飲食所必不可少并且在營(yíng)養(yǎng)上大量需求的 所有維生素和礦物質(zhì)。某些維生素和礦物質(zhì)的最小需要量已被確定。礦物質(zhì)、維生素和任選 地存在于嬰幼兒配方中的其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的例子包括維生素 A、維生素 B1、維生素 B2、維生素 B6、維生素 B12、維生素 E、維生素 K、維生素 C、維生素 D、葉酸、肌醇、煙酸、生物素、泛酸、膽堿、 巧、憐、艦、鐵、儀、銅、鋒、儘、氯化物、鐘、鋼、砸、銘、鋼、牛橫酸和左旋肉堿。礦物質(zhì)通常W鹽 的形式加入。特定礦物質(zhì)和其他維生素的存在及其量將根據(jù)許多因素而變化，例如，待施用 組合物的人或動(dòng)物的年齡、體重和狀況。
[0066] 組合物還可包含至少一種益生菌菌株。益生菌是指對(duì)宿主的健康或良好狀態(tài)具有 有益效果的微生物細(xì)胞制劑或微生物細(xì)胞成分。如果存在益生菌的話，它的量同樣優(yōu)選地 根據(jù)人或動(dòng)物的年齡而變化。一般來講，益生菌含量可隨嬰幼兒年齡增大而增加，例如從10 <3〉cfu/g配方(干重)增大到10<12〉cfu/g配方(干重），更優(yōu)選10<4〉cfu/g配方(干重)增大 到10<8〉cfu/g配方(干重）。
[0067] 該組合物還可包含至少一種益生元，其含量為0.3%至10%。益生元是不可消化的 食品成分，其通過選擇性地刺激結(jié)腸中一種或有限數(shù)量的細(xì)菌的生長(zhǎng)和/或活性對(duì)宿主產(chǎn) 生有益地影響，從而改善宿主健康狀況。運(yùn)些成分是不可消化的，在運(yùn)個(gè)意義上來講，它們 在胃或小腸中是不能被分解和吸收的，因而它們可W完整地通過胃和小腸到達(dá)結(jié)腸，在結(jié) 腸處通過有益細(xì)菌選擇性地發(fā)酵。益生元的例子包括某些寡糖，例如低聚果糖(FOS)和低聚 半乳糖(G0S)。可使用益生元的組合，例如90%的GOS與10%的短鏈低聚果糖的組合(例如W 商標(biāo)Raf t i Io Se (R)銷售的產(chǎn)品），或90 %的GOS與10 %的菊粉的組合(例如W商標(biāo)Raf t i 1 ine (R)銷售的產(chǎn)品）。
[0068] 該組合物可選擇性地包含可具有有益效果的其他物質(zhì)，如核巧酸、核巧等。
[0069] 本發(fā)明所用的組合物例如嬰幼兒配方，可W通過任何合適的方式制備得到。例如， 嬰幼兒配方可通過將蛋白質(zhì)源、碳水化合物源和脂肪源W合適的比例混合在一起制備得 到。如果使用乳化劑，則可將其包含在混合物中。此時(shí)可加入維生素和礦物質(zhì)，但為了避免 熱降解，通常在稍晚一點(diǎn)的時(shí)候加入。任何親脂性維生素、乳化劑等可在混合之前先溶解在 脂肪源內(nèi)。然后可加入水混合形成液體混合物，優(yōu)選地是經(jīng)過反滲透處理的水。隨后可對(duì)液 體混合物進(jìn)行熱處理W降低細(xì)菌量。例如，可將液體混合物迅速加熱到約80°C至110°C范圍 內(nèi)的溫度，保持約5秒至約5分鐘。運(yùn)可通過蒸汽噴射或熱交換器例如板式換熱器進(jìn)行。然后 可將液體混合物冷卻到約60°C至約85°C，例如通過急速冷卻的方法。接著可將液體混合物 進(jìn)行均質(zhì)處理;例如分兩個(gè)階段進(jìn)行，第一階段在約7M化至約40M化下進(jìn)行，第二階段在約 2M化至約14M化下進(jìn)行。然后可進(jìn)一步冷卻均質(zhì)的混合物W加入任何熱敏感組分，如維生素 和礦物質(zhì)。此刻順便將均質(zhì)的混合物的pH和固形物含量標(biāo)準(zhǔn)化。將均質(zhì)的混合物轉(zhuǎn)移至合 適的干燥裝置(例如噴霧干燥器或冷凍干燥器），并將其轉(zhuǎn)化成粉末。該粉末應(yīng)具有小于約5 重量％的含水量。如果需要增加一種或多種益生菌，可根據(jù)任何合適的方法培養(yǎng)所述益生 菌，然后例如通過冷凍干燥或噴霧干燥方式制成，W供添加到嬰幼兒配方中?；蛘撸蓮膶?業(yè)供應(yīng)商如科漢森公司（化ristian化nsen)和森永制果公司（Morinaga)購買已經(jīng)制成合 適形式的細(xì)菌制品W供添加到食品如嬰幼兒配方中。此類細(xì)菌制品可通過干混方式添加到 粉狀的嬰幼兒配方中。
[0070] 乳鐵蛋白可在該過程中的任何階段加入，但優(yōu)選地在加熱步驟之后添加。
[0071 ] 該組合物包含蛋白質(zhì)源，所述蛋白質(zhì)源可在1.4g/100kcal組合物至lOOg/lOOkcal 組合物，優(yōu)選在1.4g/100kcal組合物至6.0g/100kcal組合物之間的范圍內(nèi)存在。由于乳鐵 蛋白是蛋白質(zhì)，因此應(yīng)當(dāng)認(rèn)為它是蛋白質(zhì)源的一部分。
[0072] 已知乳清蛋白提供多個(gè)健康益處。例如它易于消化。乳清的蛋白級(jí)分（占乳清內(nèi)總 干物質(zhì)的大約10 %)包括幾種蛋白級(jí)分，如e-乳球蛋白、a-乳白蛋白、牛血清白蛋白和免疫 球蛋白。在一個(gè)實(shí)施例中，乳清蛋白占蛋白源的重量百分比至少50%，優(yōu)選地至少75%，甚 至更優(yōu)選地至少85 %。
[0073] 如果存在脂質(zhì)源的話，它可貢獻(xiàn)組合物總能量的30%至55%。碳水化合物源可貢 獻(xiàn)組合物總能量的35%至65%。
[0074] 也可在本發(fā)明的組合物中加入唾液酸。唾液酸是神經(jīng)氨酸的N端或0端被取代的衍 生物的通用名稱，它是具有九碳主鏈的單糖。
【具體實(shí)施方式】
[0075] 研究發(fā)現(xiàn)在生理?xiàng)l件下，乳鐵蛋白膳食補(bǔ)充劑改善了小豬的位置記憶和長(zhǎng)期記 憶，提高了小豬的學(xué)習(xí)速度，基于此提出了本發(fā)明。
[0076] 在第一組實(shí)驗(yàn)中，乳鐵蛋白經(jīng)證實(shí)改善了36至38日齡小豬的位置記憶。具體地講， 喂養(yǎng)高劑量乳鐵蛋白（約225至325mg/kg體重/天）的小豬比對(duì)照組小豬表現(xiàn)出明顯更好的 30分鐘長(zhǎng)期位置記憶。
[0077] 第二組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，乳鐵蛋白膳食補(bǔ)充劑大大改善了在八臂迷宮中測(cè)試的22至 32日齡小豬的記憶并提高了其學(xué)習(xí)速度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，喂養(yǎng)中等劑量（約100至175mg/kg 體重/天)和高劑量乳鐵蛋白的小豬的40分鐘長(zhǎng)期記憶和3小時(shí)長(zhǎng)期記憶都得到改善。有趣 的是，學(xué)習(xí)速度提高得最多的是喂養(yǎng)中等劑量乳鐵蛋白的小豬。
[0078] 另一組實(shí)驗(yàn)表明，乳鐵蛋白補(bǔ)充劑上調(diào)了海馬體中腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(抓NF)的 mRNA表達(dá)，并且激活了抓NF信號(hào)通路。
[0079] 可通過上調(diào)該通路中的關(guān)鍵基因（例如Trk3、IRSl、GRB2、CAMKl、MAPK、SPdP CREBl)觀察到抓NF信號(hào)通路的激活。
[0080] 實(shí)驗(yàn)還表明乳鐵蛋白補(bǔ)充劑增加了海馬體中憐酸化CREB(pCREB)的水平。
[0081 ]可W確定，BDNF信號(hào)通路的激活會(huì)加強(qiáng)CR邸的憐酸化和核轉(zhuǎn)位。還可W確定，CREB 在133位絲氨酸處的憐酸化(pCREB)可誘導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄，并在開始學(xué)習(xí)和記憶的過程中起關(guān)鍵 作用。
[0082] 另一組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，乳鐵蛋