一種葡萄枝條提取物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物組分提取領(lǐng)域，具體設(shè)及一種葡萄枝條提取物及其制備方法和應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 當(dāng)今社會，隨著生產(chǎn)和經(jīng)濟的快速發(fā)展，空氣污染也隨之日益嚴(yán)重，臭氧層破壞加 深。紫外線福射，電磁福射、汽車尾氣、工業(yè)廢氣W及空氣粉塵等都對人體健康造成了嚴(yán)重 的影響。PM 2.5成為熱議話題，其中多含氮化物、硫化物W及鉛等重金屬，運些有毒物質(zhì)可 W進入皮膚毛孔，造成毛孔堵塞和黑頭加劇，最終導(dǎo)致膚色暗沉。皮膚代謝不楊最終加速肌 膚衰老。紫外線可W導(dǎo)致皮膚細(xì)胞過早調(diào)零甚至病變，加速氧化進程，使得膠原等細(xì)胞分泌 物分解，皮膚結(jié)構(gòu)遭到破壞，保濕能力和彈性變差。大眾已經(jīng)意識到尋求安全有效的肌膚保 護措施W避免生活環(huán)境的侵蝕已是刻不容緩。
[0003] 長期暴露于陽光、大氣污染物中，機體會產(chǎn)生過多的活性氧與自由基，致使人體自 身的抗氧化物質(zhì)含量下降，導(dǎo)致細(xì)胞活力降低，人體代謝失調(diào)、內(nèi)分泌失調(diào)等連鎖反應(yīng)，最 終使得皮膚加速老化，膚色暗沉。
[0004] 葡萄是白襲蘆醇或其二聚體(viniferine)含量最豐富的植物之一，PCT專利申請 W001/03713公開了一種提取白襲蘆醇和/或其二聚體(viniferine)的方法，并指出其抗氧 化的性質(zhì)，但是，白襲蘆醇類黃酬物質(zhì)難溶于水，需要乙醇或甘油等作為溶劑來提取，運種 提取方法對于皮膚有一定的傷害。
[0005] 日本專利JP 2014198042 A公開了一種葡萄藤中液體的提取和保存方法，采用 50%乙醇蒸煮提取，打破了季節(jié)的局限性，但是，該方法采用高溫蒸煮進行提取，提取不徹 底，所獲得的提取物的成分及含量不詳，并且提取劑中使用的大量乙醇對皮膚會造成一定 傷害。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種葡萄枝條提取物及其制備方法和應(yīng)用，該葡萄枝條提 取物對于促進真皮中成纖維細(xì)胞的增殖并產(chǎn)生膠原蛋白有顯著作用，同時可W促進皮膚產(chǎn) 生神經(jīng)酷胺、透明質(zhì)酸等鎖水物質(zhì)的產(chǎn)生，與此同時還能減少色素沉積，具有美白功效，抑 制了色斑生成，該組合物具有安全性高，抗氧化性強的特點。
[0007] 為了達到上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下：
[000引一種葡萄枝條提取物，其包括:多酪類物質(zhì)0.5~Iwt. %，氨基酸0.5~Iwt. %，多 糖90~95wt. %，鐵離子0.02~0.03wt. % ;其中，所述多酪類物質(zhì)中至少含有原花青素，所 述原花青素占葡萄枝條提取物總量的0.2~0.5wt. %;其中，所述氨基酸中至少含有賴氨 酸、脯氨酸和甘氨酸，所述賴氨酸占葡萄枝條提取物總量的0.2~0.3wt. %，所述脯氨酸占 葡萄枝條提取物總量的0.02~0.03wt. %，所述甘氨酸占葡萄枝條提取物總量的0.03~ 0.05wt. % 0
[0009] 本發(fā)明的葡萄枝條提取物的制備方法，包括W下步驟：
[0010] 1)將葡萄枝條截段、清洗、用酒精消毒5~lOmin;
[0011] 2)將消毒后的葡萄枝段用液氮凍干、磨粉，加入水，葡萄枝段和水的質(zhì)量比為1:2 ~20，在無氧條件下加熱至40~60°C，超聲浸提1~化；
[0012] 3)浸提結(jié)束后離屯、，過濾，收集濾液，然后將濾液無氧滅菌6~12h，得到的濾液即 為葡萄枝條提取物的水溶液，其中，葡萄枝條提取物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5~10%，需密封避光保 存。
[0013] 進一步，所述制備方法步驟1)中在消毒后去掉表皮。
[0014] 優(yōu)選地，所述制備方法步驟3)中的濾膜的孔徑為0.22皿。
[001引優(yōu)選地，所述的步驟2)中葡萄枝段和水的質(zhì)量比為1:2~5。
[0016] 又優(yōu)選地，步驟2)中的加熱溫度為40~45°C，超聲浸提化。
[0017] 進一步，步驟3)中在離屯、后用濾膜過濾，得到的濾液即為所述的葡萄枝條提取物 的水溶液，其中，葡萄枝條提取物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5~10%。
[0018] 本發(fā)明的葡萄枝條提取物可應(yīng)用于制備化妝品或保健品中，所述的化妝品為抗衰 老、美白或\和保濕化妝品。
[0019] 本發(fā)明在對葡萄枝條進行提取時，剝?nèi)テ咸褬涞耐獗砥?，所剩下的初皮部與木質(zhì) 部中含有豐富的抗氧化物質(zhì)和營養(yǎng)成分，采用水提方式對葡萄枝條進行提取，本發(fā)明的提 取方法中，而是將提取體系加熱至40~60°C，使葡萄枝條中的易失活成分得W保留，避免了 高溫蒸煮而造成天然活性成分的活性降低，配合本發(fā)明的超聲浸提，充分提取葡萄枝條中 的活性成分。
[0020] 本發(fā)明的提取方法中進行超聲浸提1~化，超聲波可W打破細(xì)胞壁的保護，有助于 提取出細(xì)胞中的原花青素，本發(fā)明W水作提取劑，可W選擇性地提取出葡萄枝條中的水溶 性成分，水溶性成分對皮膚親和度高，并且水作為提取劑可W減少化妝品對皮膚造成的傷 害，所獲得的葡萄枝條提取物中含有多種天然的活性成分，運些活性成分來自葡萄樹木質(zhì) 部及初皮部的活性物質(zhì)，W每年Ξ四月份分泌最為旺盛。
[0021] 本發(fā)明的葡萄枝條提取物中的多種天然的活性成分，具有活性高、對皮膚親和性 強、安全性高的特點，并易于通過皮膚表層進入皮膚深層，對皮膚產(chǎn)生良好的作用。
[0022] 本發(fā)明的葡萄枝條提取物中的抗氧化物質(zhì)來自多酪類物質(zhì)，其中，含量最高的多 酪類物質(zhì)是葡萄樹源的原花青素，原花青素是高效的抗氧化物質(zhì)，并且可W減少紫外線的 福射;本發(fā)明的葡萄枝條提取物中含有植物多糖，運些植物多糖可W長效滋養(yǎng)皮膚，延緩衰 老，可W對細(xì)胞產(chǎn)生保護作用，從而能夠抗福射，與此同時，多糖與原花青素的抗氧化作用 抑制kDOPA氧化為棟褐色的多己色素的反應(yīng)，減少色素沉積，具有美白功效，抑制色斑生 成，安全性高，抗氧化性強。
[0023] 本發(fā)明葡萄枝條提取物還含有氨基酸和鐵離子，其中的氨基酸主要有賴氨酸、脯 氨酸和甘氨酸，運些氨基酸和鐵離子均是合成膠原蛋白合成的重要原料，對于促進真皮中 成纖維細(xì)胞的增殖并產(chǎn)生膠原蛋白有顯著作用，同時可W促進皮膚產(chǎn)生透明質(zhì)酸等鎖水物 質(zhì)的產(chǎn)生，起到保濕作用，使皮膚具有水活提亮的效果。
[0024] 本發(fā)明的葡萄枝條提取物用于抗衰老美白保濕的化妝品和保健品的開發(fā)，對于促 進真皮中成纖維細(xì)胞的增殖并產(chǎn)生膠原蛋白有顯著作用，促進神經(jīng)酷胺、透明質(zhì)酸等鎖水 物質(zhì)的產(chǎn)生，透明質(zhì)酸為皮膚中重要的彈性物質(zhì)，可w緊致肌膚，持久保持皮膚的活力，與 此同時還能減少色素沉積，具有美白功效，抑制了色斑生成并增強皮膚的美白保濕能力。
[0025] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
[0026] 1)本發(fā)明采用水提方式對葡萄枝條進行提取，提取出其中的水溶性成分，含有豐 富的葡萄樹源的植物多酪類物質(zhì)一原花青素，可W產(chǎn)生抗紫外福射的效果，保護皮膚，有助 于膠原蛋白的產(chǎn)生，同時有明顯的抗氧化作用，使該葡萄枝條提取物具有抗衰老功效。
[0027] 2)本發(fā)明的葡萄枝條提取物中含有多種天然的活性成分，對于皮膚有良好的保護 作用，運些天然的活性成分在葡萄樹藤條中的自然組合可W促進皮膚產(chǎn)生膠原蛋白W及透 明質(zhì)酸等，可W增強皮膚的美白保濕能力，有明顯的美白保濕和抗衰老的功效，其中的多酪 類物質(zhì)是美白保濕與抗衰老的關(guān)鍵成分。
【附圖說明】
[0028] 圖1為本發(fā)明實施例2中徑脯氨酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0029] 圖2為本發(fā)明實施例2、3中徑脯氨酸和透明質(zhì)酸的增長百分比，其中，1為徑脯氨酸 的增長百分比，2為透明質(zhì)酸的增長百分比。
[0030] 圖3為本發(fā)明實施例3中透明質(zhì)酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
【具體實施方式】
[0031] W下結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0032] 實施例1
[0033] 利用葡萄枝條制備葡萄枝條提取物，包括W下步驟：
[0034] 1)將10克葡萄枝條截段、去掉表皮清洗、用75%酒精消毒5~lOmin;
[0035] 2)將消毒后的葡萄枝段用液氮凍干、磨粉，加入40毫升水，加熱至40~60°C，超聲 浸提化；
[0036] 3)浸提結(jié)束后離屯、，過濾，收集濾液，再用孔徑為0.22WI1的濾膜過濾，得到25毫升 葡萄枝條提取物水溶液，W下簡稱提取原液，其中葡萄枝條提取物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5~10%。
[0037] 本實施例的1毫升提取原液中含有葡萄樹源的原花青素(約71.4mg/L)，賴氨酸(約 64.2mg/U，脯氨酸(約7.3mg/U，甘氨酸(約10.3mg/U，鐵離子(4.8mg/L)，將得到的原液稀 釋10倍制成原液稀釋液，待用。
[003引實施例2
[0039] 徑脯氨酸是膠原蛋白中一種重要且含量穩(wěn)定（占13.4%)的氨基酸，在彈力蛋白中 含量甚微，在其他蛋白中均不存在，因此測定其含量是檢測膠原蛋白合成能力的可靠方法， 徑脯氨酸的檢測包括如下步驟：
[0040] 1.準(zhǔn)備人的皮膚細(xì)胞
[0041] 取正常人的真皮成纖維細(xì)胞作為原代細(xì)胞，于75cm2培養(yǎng)瓶中（含有生長因子的培 養(yǎng)基2ml)，37°C、C02濃度為5%的條件下培養(yǎng)細(xì)胞至80%濃度。進行傳代，傳代細(xì)胞175cm 2方 瓶中繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至80%濃度。
[0042] 2.制備待測樣品
[0043] 用含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)上一步培養(yǎng)得到的人真皮成纖維細(xì)胞，37 °C，5%C〇2培養(yǎng)24小時，待細(xì)胞接近融合，用含ο. 25 %膜蛋白酶和ο. 02 %邸ΤΑ的消化液消化 后按1:2傳代，選取第四代細(xì)胞；
[0044] 用含有10 %胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液將細(xì)胞稀釋至密度為105個細(xì)胞/ml，再