一種從葡萄葉中提取白藜蘆醇的工藝的制作方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于生物技術領域，具體涉及的是一種從葡萄葉中提取白藜蘆醇工藝。
【背景技術】
[0002]白藜蘆醇是一種多酚類化合物，廣泛存在于多種植物中。由于其具有抗癌、抗氧化、雌激素調節(jié)、抗菌消炎和預防心血管疾病等多方面的藥理作用，含有白藜蘆醇的功能性食品深受歡迎，市場需求很大。目前，從植物資源中提取和分離純化白藜蘆醇的研究越來越受到人們的關注。在國外，主要從葡萄和葡萄籽中提取白藜蘆醇，國內主要以中藥虎杖為原料進行提取，但都面臨提取所用的植物原料匱乏、成本高等問題。
[0003]據(jù)報道，在葡萄的多個組織中都含有白藜蘆醇，如葡萄皮、葡萄籽和葡萄葉等。我國葡萄資源豐富，但對葡萄葉的利用不足，僅有極少部分用于飼料或食物輔料，其余則作為廢棄物自然分解或燃燒，這不但浪費了農業(yè)資源，而且造成了環(huán)境污染。因此，研究和開發(fā)葡萄葉中的白藜蘆醇對擴大白藜蘆醇的植物來源及提高葡萄相關產品的經濟價值具有重要意義。
[0004]由于葡萄葉片產量巨大且取材方便，價格低廉，因此對葡萄葉中白藜蘆醇提取意義深遠。遺憾的是以往葡萄種植過程中，葡萄葉作為農業(yè)廢棄物沒有較好的利用。本發(fā)明的現(xiàn)實意義在于可以為葡萄產業(yè)提供一種變廢為寶的方法，增加農民收入，降低農業(yè)生產成本，又可以緩解白藜蘆醇需求增加與生產原料虎杖資源日益緊張的矛盾。

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術存在的缺陷，提供一種提取率尚、廣品純度尚、耗能低且對環(huán)境危害小，從葡萄葉中提取白藜蘆醇的工藝。
[0006]本發(fā)明的技術方案是:一種從葡萄葉中提取白藜蘆醇的工藝，其工藝步驟為:
(1)原材料采集:選擇葡萄生產過程中自然脫落及種植期間人工打掉葉片；將收集到的葡萄葉洗凈，避光保存；
(2)原料預處理:葡萄葉片中加入2-10重量份液氮預冷凍2-20分鐘，隨后進行機械粉碎得到葉粉；
(3)超聲波提取白藜蘆醇粗粉:將粉碎后的葡萄葉放入乙醇溶劑中，采用超聲波提取，其中葡萄葉與乙醇溶劑的重量體積(g/ml)比為1:2 — 3 ;提取溫度55?65°C，提取時間40?80min，提取結束后，對提取液進行過濾得濾液和濾渣，將濾液濃縮并回收溶劑，利用回收的溶劑對濾渣再次提取，提取溫度和時間與第一次提取相同，提取結束后，對提取液進行過濾得濾液和濾渣，對濾液濃縮并回收溶劑；將兩次提取的濃縮液進行混合后，干燥后得白藜蘆醇粗粉；
(4)純化:將白藜蘆醇粗粉經HPD450A大孔樹脂進行靜態(tài)吸附及洗脫；柱層析條件為:上樣速率為1.0mL/min，充分吸附后，先以30%的乙醇3BV洗脫除去極性大的雜質，再以95%的乙醇5BV洗脫，洗脫流速為1.0mL/min ;白藜蘆醇得率為3mg/100g以上，含量為45%以上。
[0007]上述步驟(3)中所述超聲波提取是300 W的功率下超聲處理30 min。
[0008]本發(fā)明的技術方案采用乙醇與超聲提取集成，根據(jù)葡萄葉中白藜蘆醇在乙醇溶劑中的溶解性較高的特性，利用超聲波產生的強烈振動、很高的加速度、強烈的空化效應、攪拌等特殊作用，提高物質分子之間的碰撞速度，使本發(fā)明的技術方案具有以下特點:1、提取效率高、提取成本低。采用了超聲波提取技術，促進了白藜蘆醇向提取溶劑中的溶解速度，從而大大減少了溶劑的用量，降低提取成本，提高萃取效率，為工業(yè)化生產奠定了基礎。與現(xiàn)有技術相比，白藜蘆醇的提取率可提高2-4倍左右，白藜蘆醇產品的純度與現(xiàn)有技術相比提高了 15-25個百分點；2、本發(fā)明提取的工藝條件溫和，避免了在提取過程中白藜蘆醇的生物活性的破壞，適合具有生物活性物質的提取。3、本發(fā)明能耗低。由于提取時間短、提取溫度低、溶劑用量少等特點，降低了能耗，減少了廢物的排放。4、由于在提取過程中所用的溶劑可以循環(huán)利用、溶劑用量小，對環(huán)境的影響較低。
【具體實施方式】
實施例
[0009](1)原材料采集:選擇葡萄生產過程中自然脫落及種植期間人工打掉葉片；將收集到的葡萄葉洗凈，避光保存；
(2)原料預處理:葡萄葉片中加入2-10重量份液氮預冷凍2-20分鐘，隨后進行機械粉碎得到葉粉；
(3)超聲波提取白藜蘆醇粗粉:將粉碎后的葡萄葉放入乙醇溶劑中，采用超聲波提取，其中葡萄葉與乙醇溶劑的重量體積(g/ml)比為1:2 — 3 ;提取溫度55?65°C，提取時間40?80min，提取結束后，對提取液進行過濾得濾液和濾渣，將濾液濃縮并回收溶劑，利用回收的溶劑對濾渣再次提取，提取溫度和時間與第一次提取相同，提取結束后，對提取液進行過濾得濾液和濾渣，對濾液濃縮并回收溶劑；將兩次提取的濃縮液進行混合后，干燥后得白藜蘆醇粗粉；
(4)純化:將白藜蘆醇粗粉經HPD450A大孔樹脂進行靜態(tài)吸附及洗脫；柱層析條件為:上樣速率為1.0mL/min，充分吸附后，先以30%的乙醇3BV洗脫除去極性大的雜質，再以95%的乙醇5BV洗脫，洗脫流速為1.0mL/min ;白藜蘆醇得率為3mg/100g以上，含量為45%以上。
[0010]上述步驟(3)中所述超聲波提取是300 W的功率下超聲處理30 min。
【主權項】
1.一種從葡萄葉中提取白藜蘆醇的工藝，其特征在于，包括以下工藝步驟: (1)原材料采集:選擇葡萄生產過程中自然脫落及種植期間人工打掉葉片；將收集到的葡萄葉洗凈，避光保存； (2)原料預處理:葡萄葉片中加入2-10重量份液氮預冷凍2-20分鐘，隨后進行機械粉碎得到葉粉； (3)超聲波提取白藜蘆醇粗粉:將粉碎后的葡萄葉放入乙醇溶劑中，采用超聲波提取，其中葡萄葉與乙醇溶劑的重量體積(g/ml)比為1:2 — 3 ;提取溫度55?65°C，提取時間40?80min，提取結束后，對提取液進行過濾得濾液和濾渣，將濾液濃縮并回收溶劑，利用回收的溶劑對濾渣再次提取，提取溫度和時間與第一次提取相同，提取結束后，對提取液進行過濾得濾液和濾渣，對濾液濃縮并回收溶劑；將兩次提取的濃縮液進行混合后，干燥后得白藜蘆醇粗粉； (4)純化:將白藜蘆醇粗粉經HPD450A大孔樹脂進行靜態(tài)吸附及洗脫；柱層析條件為:上樣速率為1.0mL/min，充分吸附后，先以30%的乙醇3BV洗脫除去極性大的雜質，再以95%的乙醇5BV洗脫，洗脫流速為1.0mL/min ;白藜蘆醇得率為3mg/100g以上，含量為45%以上。2.根據(jù)權利要求1所述的從葡萄葉中提取白藜蘆醇的工藝，其特征在于，上述步驟(3)中所述超聲波提取是300 W的功率下超聲處理30 min。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從葡萄葉中提取白藜蘆醇的工藝，其工藝步驟為：葡萄葉粉碎、乙醇與超聲波集成提取白藜蘆醇，純化后得白藜蘆醇產品。本發(fā)明的技術方案采用乙醇與超聲提取集成，根據(jù)葡萄葉中白藜蘆醇在乙醇溶劑中的溶解性較高的特性，利用超聲波提取工藝，使本發(fā)明的技術方案具有提取效率高、產品純度高、提取成本和能耗低，在提取過程中所用的溶劑可以循環(huán)利用、溶劑用量小，對環(huán)境的影響較低，避免了在提取過程中白藜蘆醇生物活性的破壞。
【IPC分類】C07C37/68, C07C39/21, C07C37/72
【公開號】CN105384605
【申請?zhí)枴緾N201510903067
【發(fā)明人】不公告發(fā)明人
【申請人】重慶三零三科技有限公司
【公開日】2016年3月9日
【申請日】2015年12月9日