用于治療和預(yù)防癌癥的包含(+)-兒茶素和氨基酸的復(fù)合物的組合物的制作方法
【專利說(shuō)明】用于治療和預(yù)防癌癥的包含（+)-兒茶轟和氨基酸的復(fù)合 物的組合物
[0001] 本發(fā)明設(shè)及用于口服給予的胃腸道組合物，包含單體（+)-兒茶素的化合物和至 少一種堿性氨基酸，用于哺乳動(dòng)物，并且特別是用于人類。
[0002]多酪類構(gòu)成廣泛存在于植物界的有機(jī)分子大家族。如名稱所指示的，它們的特征 在于與通常為高分子量的結(jié)構(gòu)組合的若干個(gè)酪基團(tuán)的存在。運(yùn)些化合物是植物的次級(jí)代謝 產(chǎn)物。
[0003] 特別地，單體形式的（+)-兒茶素直接獲自兒茶鉤藤OJncariagambir)提取物。
[0004] 運(yùn)樣的組合物是已知的，例如，文件US4 285 964在治療退行性結(jié)締組織的慢性 疾病的內(nèi)容中。運(yùn)些退行性疾病中，包括人類中最熟知和最普遍的，是例如關(guān)節(jié)炎、軟骨軟 化和牙周炎。
[0005] 根據(jù)文件US4 285 964,包含單體（+)-兒茶素化合物和至少一種堿性氨基酸的 組合物是一種藥物，其中活性物質(zhì)為單體（+)-兒茶素。
[0006] 文件US4 285 964主要設(shè)及可注射組合物。然而，該文件附帶上面提到的可注射 組合物推斷W通過(guò)將可注射組合物干燥來(lái)獲得口服制劑。
[0007] 本發(fā)明設(shè)及開始時(shí)提到的一種新的口服組合物，用于治療性和/或預(yù)防性處置癌 癥，優(yōu)選肝細(xì)胞癌，所述單體（+)-兒茶素具有相對(duì)于所述至少一種堿性氨基酸或相對(duì)于至 少一種堿性氨基酸衍生物（或另外氨基酸前體）的在1:1和1:2. 5之間的摩爾當(dāng)量比。
[0008]由WeynantM.J.、CarothersA.M.、DannenbergA.J.、和Betra即olliM.M.在 2001年發(fā)表在癌癥研究（CancerResearch)，第61卷，第118頁(yè)上的文章已知使用單體 (+)-兒茶素作為哺乳動(dòng)物中的癌癥的治療。
[0009] 該文章描述了使用口服給予的純單體（+)-兒茶素在小鼠中治療腸道腫瘤，并因 此當(dāng)然與一種或多個(gè)氨基酸不相關(guān)。特別地，該文章規(guī)定，通過(guò)當(dāng)口服給予時(shí)其高生物利用 度的優(yōu)點(diǎn)，單體（+)-兒茶素是用于治療哺乳動(dòng)物、優(yōu)選人類中的多種上皮型腫瘤的有希望 的活性劑。
[0010] 不幸的是，雖然該文章給出了有希望的結(jié)論，但運(yùn)些結(jié)論目前仍停留在假設(shè)范圍 內(nèi)，因?yàn)槠洳荒茏C明結(jié)果從鼠到人的轉(zhuǎn)換。
[0011] 在本發(fā)明的內(nèi)容中，完全出乎意料地觀察到了基于單體（+)-兒茶素和至少一種 堿性氨基酸或至少一種堿性氨基酸衍生物的組合物，在口服給予時(shí)，允許治療和預(yù)防、優(yōu)選 提高的預(yù)防哺乳動(dòng)物并且尤其是人類中的癌癥。
[0012] 通過(guò)根據(jù)本發(fā)明的組合物的還未解釋的性質(zhì)解釋抗癌作用，其是W下：
[0013]-膜穩(wěn)定作用；
[0014]-圍繞哺乳動(dòng)物的器官的結(jié)締組織的保護(hù)性能；W及
[0015]-對(duì)被認(rèn)為經(jīng)受潰瘍和良性腫瘤的胃粘膜的直接保護(hù)作用。
[0016]此外，作為由申請(qǐng)者所證明的事實(shí)，W所要求的當(dāng)量比存在的所述至少一種氨基 酸（或者所述至少一種氨基酸衍生物或前體），使得可能W未意料的方式加重單體（+)-兒 茶素的抗癌作用。
[0017] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比是在1:1和1:2之間。
[001引有利地，所述摩爾當(dāng)量比為1:1或1:2的比率。
[001引優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1:1，特別是大于1:1。
[0020] 有利地，所述摩爾當(dāng)量比小于或等于1:2. 5。
[0021] 特別地，所述摩爾當(dāng)量比小于1:2. 5,更特別是小于或等于1:2。
[0022] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比小于2。
[0023] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1:1，特別是大于1:1。
[0024] 有利地，所述摩爾當(dāng)量比小于或等于1:2. 5。
[002引特別地，所述摩爾當(dāng)量比小于1:2. 5,更特別是小于或等于1:2。
[0026] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比小于1:2。
[0027] 替換地，摩爾當(dāng)量比是在1:1. 5和1:2. 5,優(yōu)選在1:1. 5和1:2之間。
[002引有利地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1.00:1.00并小于或等于1.00:2.50。
[0029] 非常有利地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1. 00:1. 00并小于或等于1. 00:1. 50。
[0030] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1.00:1.50并小于或等于1.00:2.00。
[0031] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1.00:1.50并小于或等于1.00:2. 50。
[0032] 優(yōu)選地，所述組合物W(+)-兒茶素和至少一種堿性氨基酸或至少一種堿性氨基 酸衍生物的復(fù)合物的形式來(lái)使用，所述復(fù)合物具有所述單體（+)-兒茶素相對(duì)于所述至少 一種堿性氨基酸或相對(duì)于所述至少一種堿性氨基酸衍生物的在1:1和1: 2. 5之間的摩爾當(dāng) 量比（W下稱為[C:AA/1:1-1:2.引復(fù)合物）。
[003引優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比是在1:1和1:2之間。
[0034] 有利地，所述摩爾當(dāng)量比為1:1或1:2的比率。
[0035] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1:1，特別是大于1:1。
[0036] 有利地，所述摩爾當(dāng)量比小于或等于1:2. 5。
[0037] 特別地，所述摩爾當(dāng)量比小于2. 5,更特別是小于或等于1:2。
[003引優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比小于2。
[0039] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1:1，特別是大于1:1。
[0040] 有利地，所述摩爾當(dāng)量比小于或等于1:2. 5。
[0041] 特別地，所述摩爾當(dāng)量比小于1:2. 5,更特別是小于或等于1:2。
[0042] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比小于1:2。
[0043] 可替換地，所述摩爾當(dāng)量比是在1:1. 5和1:2. 5之間，優(yōu)選在1:1. 5和1:2之間。
[0044] 有利地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1.00:1.00并小于或等于1.00:250。
[0045] 非常有利地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1.00:1.00并小于或等于1.00:1.50。
[0046] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1.00:1.50并小于或等于1.00:2.00。
[0047] 優(yōu)選地，所述摩爾當(dāng)量比大于或等于1.00:1.50并小于或等于1.00:2.50。
[0048] 優(yōu)選地，所述至少一種堿性氨基酸是賴氨酸。
[0049] 通過(guò)當(dāng)（+)-兒茶素與在至少一種堿性氨基酸或至少一種堿性氨基酸衍生物或前 體復(fù)合時(shí)，借助當(dāng)口服給予時(shí)（+)-兒茶素的高生物利用度，在口服治療和預(yù)防癌癥的情況 中使用[C:AA/1:1-1:2. 5]復(fù)合物是可能的，該性質(zhì)迄今為止尚未出現(xiàn)。
[0050] 實(shí)際上認(rèn)為連接至單體（+)-兒茶素的至少一種堿性氨基酸的存在允許復(fù)合物容 易地穿過(guò)腸壁；運(yùn)因此在血液中獲得更高比例的游離單體（+)-兒茶素。
[0051] 在他們的文章中，WeynantM.J.等沒(méi)有限定高生物利用度的含義，特別是當(dāng)口服 給予時(shí)。
[0052] 基于在本發(fā)明中呈現(xiàn)的結(jié)果，觀察到一克的W復(fù)合物形式的單體（+)-兒茶素當(dāng) 在口服給予時(shí)的高生物利用度在人類中達(dá)到至少90化gh/ml(5400化gmin/ml)的值。根 據(jù)本發(fā)明的結(jié)果，術(shù)語(yǔ)"人類中的高生物利用度"因此旨在意為對(duì)于口服給予一克至少等于 900ngh/ml(54000ngmin/ml)的生物利用度。
[0053] 由本專利申請(qǐng)的發(fā)明人獲得的結(jié)果顯示對(duì)于W摩爾當(dāng)量比在1:1和1:2. 5之間的 單體（+)-兒茶素和至少一種堿性氨基酸的復(fù)合物形式攝取的一克（+)-兒茶素在人類中測(cè) 定的生物利用度為至少900ngh/ml(54000ngmin/ml)。
[0054] 例如，觀察到，在本發(fā)明的內(nèi)容中，當(dāng)在人類中口服給予時(shí)，W單體（+)-兒茶素的 復(fù)合物形式攝取的（+)-兒茶素的生物利用度[對(duì)于W1. 5g復(fù)合物形式攝取的0. 920g的 單體（+)-兒茶素，為1263±88ngh/ml(75780ngmin/ml)]比單獨(dú)攝取單體（+)-兒茶素 的生物利用度[對(duì)于等量的0.920g的口服攝取的純單體（+)-兒茶素，為832 + 15化gh/ ml(4992化gmin/ml)]高得多，即，借助復(fù)合物生物利用度增加巧2%。
[0055] 此特性更是出乎意料的，因?yàn)槠湟驯蛔C明在本發(fā)明的內(nèi)容中，純單體（+)-兒茶素 在水中的溶解度比當(dāng)W與至少一種堿性氨基酸或至少一種堿性氨基酸衍生物一起形成的 復(fù)合物形式溶解時(shí)測(cè)得的低400倍。
[005引的確，（+)-兒茶素的賴氨酸鹽的溶解度在20°C達(dá)到每升水400克，而（+)-兒茶素 自身在相同的條件下顯示為0. 9g每升的溶解度。
[0057] 應(yīng)注意到另外兩種重要的優(yōu)點(diǎn)。
[005引首先，使用W[C:AA/1:1 - 1:2. 5]復(fù)合物形式的口服給予的（+)-兒茶素提供游離 單體（+)-兒茶素的最大血漿濃度，c(max)，其與在相同條件下攝取的用相同劑量的純單體 (+)-兒茶素所獲得的相比是兩倍多的：對(duì)于1克W復(fù)合物形式攝取的（+)-兒茶素C(max) 為571ng，與對(duì)于1克W自身攝取的單體（+)-兒茶素280ng相比，即增加+103%。
[0059] 其次，當(dāng)（+)-兒茶素是W[C:AA/1:1-1:2.5]復(fù)合物形式攝取時(shí)，達(dá)到運(yùn)些多一 倍的血漿峰濃度[T(max)]比W單體（+)-兒茶素單獨(dú)形式的快兩倍：30min對(duì)80min的 T(max),增加+166 %。
[0060] 所有運(yùn)些特點(diǎn)構(gòu)成了真正的優(yōu)勢(shì)，特別是在藥物用于預(yù)防和/或治療癌癥的情況 中。因?yàn)樵谶\(yùn)種情況下劑量是通常很高的并且會(huì)長(zhǎng)期服用，其優(yōu)勢(shì)不僅可W借助復(fù)合物 [C:AA]減少它們，更直接獲得在攝取該復(fù)合物后，血液水平比對(duì)于單用分子所獲得那些多 兩倍。
[0061] 因?yàn)椋?)-兒茶素一般耐受性良好，唯一的抱怨是在高劑量下的消化不良，其在長(zhǎng) 期治療的情況中可W通過(guò)使用復(fù)合物[C:AA/1:1-1:2.5]消除或至少減少。
[0062] 此外，本發(fā)明中已經(jīng)證明口服使用根據(jù)本發(fā)明的復(fù)合物用于治療和預(yù)防癌癥已被 證明是和通過(guò)注射使用所述組合物至少是一樣有效的。
[0063] 的確，對(duì)于復(fù)合物[C:AA/1:1-1:2. 5]的生物利用度，在大鼠中，當(dāng)口服給予時(shí)其 比當(dāng)通過(guò)注射給予時(shí)高1. 90的系數(shù)，運(yùn)是在本發(fā)明中證明的。
[0064] 其還證明一旦注射，（+)-兒茶素被快速代謝并從身體消除（在注射后的一小時(shí)的 時(shí)間里，近90%的游離單體（+)-兒茶素含量已從血液中消除）。在口服吸收的情況中，在 吸收后一小時(shí)的時(shí)間內(nèi)觀察到血液中游離單體（+)-兒茶素的峰濃度，并在兩小時(shí)后觀察 到該含量減少50%。
[0065] 運(yùn)意味著口服同化作用可能在血液中保持部分游離單體（+)-兒茶素，其隨時(shí)間 延遲，并因此增強(qiáng)抗癌作用。
[0066] 最后，因?yàn)樵诖笫笾兴@得的關(guān)于通過(guò)口服（perOS)攝取根據(jù)本發(fā)明的復(fù)合物治 療癌癥的結(jié)果與在人類中獲得那些很匹配，因此證明了在大鼠中的結(jié)果到人類情況中的轉(zhuǎn) 換。
[0067] 在已攝取150mg/kg的（+)-兒茶素鹽酸賴氨酸鹽化y化ochlorolysinate)的大鼠 中，游離（+)-兒茶素在血液中的生物利用度是132349ngmin/ml(2206ngh/ml)，而在人類 中，攝入1.5g相同的（+)-兒茶素鹽酸賴氨酸鹽給出75780ngmin/ml(1263ngh/ml)的生 物利用度。考慮到在大鼠中代謝是加快的事實(shí)，發(fā)現(xiàn)對(duì)于隨后提到的生物利用度研究，結(jié)果 是可轉(zhuǎn)換到人類的（見(jiàn)表4和2)。
[006引本申請(qǐng)參考了在治療癌癥、特別是肝細(xì)胞癌的情況中，單體（+)-兒茶素代表對(duì)于 由放射或化療所代表的更廣泛治療的替代治療的事實(shí)。
[0069] 優(yōu)選地，所述至少一種堿性氨基酸是賴氨酸。
[0070] 在本發(fā)明一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述復(fù)合物是包含一分子