一種銀杏內(nèi)酯k、n復(fù)方氯化鈉注射液及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種銀杏內(nèi)酯K、N復(fù)方氯化鈉注射液及其制備和應(yīng)用，所述一種銀杏 內(nèi)酯K、N復(fù)方氯化鈉注射液是以銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N為主藥，屬于藥物制劑領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 銀杏和銀杏葉是治療心腦血管疾病常用中藥，其主要活性成分銀杏內(nèi)酯類化 合物已證為強(qiáng)血小板活化因子（plateletacllvafactor，PAF)受體抑制劑。銀杏內(nèi)酯 B (ginkgo-ide B，GB)是目前發(fā)現(xiàn)的活性最強(qiáng)的天然PAF受體特異拮抗劑，但GB自然界含 量較低，價(jià)格昂貴、工業(yè)成本較高。銀杏內(nèi)酯N(GN)是從銀杏葉中分離得到的新化合物，可 通過合成反應(yīng)制得，其藥理活性與GB類似，明顯降低了原料成本。
[0003] 專利CN1919848公開了銀杏內(nèi)酯K(GK)及其復(fù)合物及其制備方法與用途，將銀杏 內(nèi)酯K與堿性物質(zhì)反應(yīng)生成復(fù)合物，以增加其溶解性；專利CN1513449公開了 GB溶于非水 溶劑制備銀杏內(nèi)酯針劑，專利CN101249085公開了一種銀杏內(nèi)酯A、B復(fù)方注射劑及其制備 方法和應(yīng)用，以銀杏內(nèi)酯A、B為主藥，使用PEG、、丙二醇、丙三醇、普洛沙姆、吐溫-80中的 一種或兩種以上為潛溶劑制備注射劑。上述注射液均由于主藥溶解度差，采用各種手段增 加其溶解度，并制備成針劑，在臨床稀釋后用于靜脈滴注。
[0004] 專利CN103169744公開了銀杏內(nèi)酯N、黃芩苷、防風(fēng)組成的組合物治療腦缺血、腦 梗塞，其中銀杏內(nèi)酯N的復(fù)方組合物能夠穿過血腦屏障，抑制P-糖蛋白促進(jìn)銀杏內(nèi)酯病灶 處的暴露濃度。
[0005] 本發(fā)明在上述基礎(chǔ)上，使用水溶性較好的銀杏內(nèi)酯N與銀杏內(nèi)酯K混合，制備大容 量氯化鈉注射液，降低輔料用量，降低安全隱患；同時(shí)發(fā)現(xiàn)，二者在藥理活性上有協(xié)同作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明提供一種銀杏內(nèi)酯K、N復(fù)方氯化鈉注射液，由主藥和藥學(xué)上可接受的注射 用輔料組成，其特征在于所述主藥為銀杏內(nèi)酯N和銀杏內(nèi)酯K.
[0007] 其中，銀杏內(nèi)酯N和銀杏內(nèi)酯K藥理活性有協(xié)同作用，二者比例沒有特別限制，由 于銀杏內(nèi)酯N水溶性較好，為銀杏內(nèi)酯K助溶劑，作為優(yōu)選，其中所述每單位制劑中含主藥 IOmg~50mg，銀杏內(nèi)酯N和銀杏內(nèi)酯K的重量比為1~9 : 9~1，進(jìn)一步優(yōu)選為5 : 1.
[0008] 銀杏內(nèi)酯N水溶性較好，可以減少輔料的應(yīng)用，降低溶血風(fēng)險(xiǎn)；并且，本發(fā)明為氯 化鈉注射液，臨床用于靜脈滴注。其中所述的注射用輔料，可以選用藥學(xué)上可接受的注射 制劑用輔料，考慮到氯化鈉注射液的安全性，選用常用的丙二醇和乙醇促進(jìn)溶解，其中丙二 醇：乙醇為I : 1~5,優(yōu)選為1 : 3。其中氯化鈉用于調(diào)節(jié)滲透壓。
[0009] 本發(fā)明上述所述的一種銀杏內(nèi)酯K、N復(fù)方氯化鈉注射液，其中所述的主藥銀杏內(nèi) 酯N和銀杏內(nèi)酯K，來源和獲得方式?jīng)]有特別限制，可以分別是純的銀杏內(nèi)酯N和銀杏內(nèi)酯 K混合而成，銀杏內(nèi)酯N和銀杏內(nèi)酯K可以分別由植物內(nèi)提取單體獲得，也可以是化學(xué)合成 制備獲得。
[0010] 作為本發(fā)明【具體實(shí)施方式】之一，上述所述的一種銀杏內(nèi)酯K、N復(fù)方氯化鈉注射 液，由主藥和藥學(xué)上可接受的輔料組成，其中每單位制劑中含主藥IOmg~50mg，其中銀杏 內(nèi)酯N和銀杏內(nèi)酯K的重量比為1~9 : 9~1，優(yōu)選為5 : 1，所述輔料丙二醇：乙醇為 I : 1~5,優(yōu)選為1 : 3。其氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓，注射用水稀釋至100mL/瓶。
[0011] 本發(fā)明還提供了一種制備上述一種銀杏內(nèi)酯K、N復(fù)方氯化鈉注射液的制備方法， 其特征在于包括以下步驟：
[0012] (1)主藥加入丙二醇、乙醇和適量注射用水在60°C下完全溶解
[0013] (2)向步驟⑴中加入氯化鈉，加入活性炭、注射用水，保溫（60°C )攪拌15分鐘
[0014] (3)將步驟（2)趁熱過濾，濾液放置至40°C，加入剩余量注射用水。濾過，灌裝， 115 °C滅菌30分鐘，燈檢，貼簽，包裝，即得。
[0015] 本發(fā)明通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，銀杏內(nèi)酯K和銀杏內(nèi)酯N混合作為制劑主藥，銀杏內(nèi)酯N為 銀杏內(nèi)酯K的助溶劑，增強(qiáng)了銀杏內(nèi)酯K的溶解度。本發(fā)明在少量使用有機(jī)溶劑的基礎(chǔ)上 制備獲得氯化鈉注射液，改變了目前銀杏內(nèi)酯類注射劑必須采用大量有機(jī)溶劑溶解，臨床 使用前稀釋制備的現(xiàn)狀。同時(shí)，本發(fā)明復(fù)方氯化鈉注射液穩(wěn)定性良好，在各種保存環(huán)境下均 保證了藥品有效期內(nèi)的安全性和有效性。同時(shí)，銀杏內(nèi)酯N為銀杏內(nèi)酯K在用于缺血性腦 血管疾病預(yù)防和治療上具有協(xié)同的藥理活性。
[0016] 以下試驗(yàn)用于證明本發(fā)明的技術(shù)效果，但不僅限于以下試驗(yàn)。
[0017] 試驗(yàn) 1
[0018]
[0019] 配制：取銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化鈉，攪拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0020] 試驗(yàn) 2
[0021]
[0023] 配制：取銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化鈉，攪拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0024] 試驗(yàn) 3
[0025]
[0026] 配制：取銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化鈉，攪拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0027] 試驗(yàn) 4
[0028]
[0029] 配制：取銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 攪拌，全部溶解后加入注射用水至l〇〇ml，加入氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓。
[0030] 試驗(yàn) 5
[0031]
[0032] 配制：取銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化鈉，攪拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0033] 試驗(yàn) 6
[0034]
[0035] 配制：取銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化鈉，攪拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0036] 試驗(yàn) 7
[0037]
[0038] 配制：取銀杏內(nèi)酯K加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解，加入氯化鈉， 攪拌，全部溶解后加入注射用水至l〇〇ml。
[0039] 試驗(yàn) 8
[0040]
[0041] 配制：取銀杏內(nèi)酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解，加入氯化鈉， 攪拌，全部溶解后加入注射用水至l〇〇ml。
[0042]試驗(yàn) 9
[0045] 配制：取銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化鈉，攪拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0046] 試驗(yàn) 10
[0047]
[0048] 配制：取銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N加入丙二醇、乙醇、少量注射用水在60°C下溶解， 加入氯化鈉，攪拌，全部溶解后加入注射用水至100mL。
[0049] 試驗(yàn) 11
[0050]
[0051] 配制：取銀杏內(nèi)酯K、銀杏內(nèi)酯N加入乙醇、少量注射用水在60°C下溶解，加入氯化 鈉，攪拌，全部溶解后加入注射用水至l〇〇ml。
[0052] 按上述試驗(yàn)1~試驗(yàn)9配置銀杏內(nèi)酯N、銀杏內(nèi)酯K復(fù)方氯化鈉注射液，考察二者 在-30°C、-20°C、-10°C、0°C、5°C、25°C溫度下，0天、10天、30天、90天的穩(wěn)定性，結(jié)果見下 表。
[0053] 不同溫度貯藏0天結(jié)果


[0063] 一種銀杏內(nèi)酯K、N復(fù)方氯化鈉注射液對(duì)局灶性缺血性腦損傷大鼠的保護(hù)作用
[0064] 1 ?試驗(yàn)材料
[0065] (1)受試藥品及與給藥
[0066] 一種銀杏內(nèi)酯K、N復(fù)方氯化鈉注射液，按上述試驗(yàn)1、試驗(yàn)6方法進(jìn)行自制；同時(shí) 按照試驗(yàn)方法自制銀杏內(nèi)酯N氯化鈉注射液（2mg/ml)和銀杏內(nèi)酯K氯化鈉注射液（0. 2mg/ ml);銀杏內(nèi)酯B氯化鈉注射液（自制，使用PEG助溶）；0. 9%氯化鈉注射液（山東華魯制 藥有限公司，批號(hào)：C1303130)。
[0067] (2)試劑與試驗(yàn)儀器
[0068] 超氧化歧化酶（SOD)試劑盒；丙二醛（MDA)試劑盒；一氧化氮（NO)試劑盒；一氧 化氮合酶（NOS)試劑盒（均由南京建成生物工程研究所提供）。
[0069] 儀器UV-2201紫外可見分光光度計(jì)（島津公司）；MPF_4熒光分光光度計(jì)（島津公 司）；31TDL-5型臺(tái)式低速大容量離心機(jī)（上海隆拓儀器）；DG5033A酶標(biāo)儀（華東電子科 技）。
[0070] (3)試驗(yàn)動(dòng)物
[0071] 健康SD大鼠180只，體質(zhì)量（220±30) g，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。 室溫19~26°C，濕度40%~70%，晝夜明暗交替時(shí)間12h/12h。飼料籠具兩周更換1次， 料盒和水瓶每周更換1次，更換的籠具、料盒、水瓶進(jìn)行消毒處理。所有對(duì)大鼠的實(shí)驗(yàn)程序 經(jīng)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。
[0072] 2?試驗(yàn)方法與結(jié)果
[0073] 按性別、體質(zhì)量將大鼠隨機(jī)分為11組，每組20只，分