hesive Technology)，Α·皮茲（A. Pizzi)和 K.L.米塔爾 (Κ. L. Mittal)編（CRC 出版社 2003)。
[0077] 不可滲透背襯執(zhí)行雙重功能：（1)防止藥劑損失和（2)提供藥劑味道掩蔽。
[0078] 一般來說，不可滲透的涂層由如乙酸纖維素、羥丙基甲基纖維素或尤特奇 (Eudragit)(聚丙烯酰胺）的聚合物形成。這些也可以是生物粘附性的。生物可降解的材 料是優(yōu)選的，因?yàn)樗霾牧峡赡鼙煌萄实目赡苄浴?br>[0079] E.待囊封藥劑
[0080] 任何治療劑、防治劑、診斷劑或營(yíng)養(yǎng)藥劑都可以被囊封。代表性藥劑包括化學(xué)治療 劑、抗感染劑、抗生素、抗真菌劑、抗病毒劑、抗炎劑、免疫調(diào)節(jié)劑、疫苗以及其組合。
[0081] 優(yōu)選藥劑是鉑基化學(xué)治療劑，如順鉑（CIS)。歷史上，CIS已處于鉑基化學(xué)治療劑 的前沿并且是包括OC的許多癌癥的治療中的護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)。盡管CIS是許多癌癥的主導(dǎo)療法， 但其常常由于傳統(tǒng)大丸劑全身IV劑量而受其顯著的全身性毒性阻礙。這一系統(tǒng)避免所述 毒性。
[0082] 診斷劑可以是不透射線的、放射性的或其它。舉例來說，診斷劑可以是成像劑，如 氧化鐵、釓絡(luò)合物、放射性同位素、金以及其組合。
[0083] F.額外添加劑
[0084] 可以包括的其它化合物是味道掩蔽劑，如調(diào)味劑（薄荷、橙子或柑桔調(diào)味劑等）； 以及抗氧化劑，其可用于預(yù)防細(xì)菌污染。代表性抗血管生成劑是姜黃素和其純化組分；抗生 素，如四環(huán)素和其衍生物；以及化學(xué)治療劑，如沙立度胺（thalidomide)。這些還可以幫助 治療癌癥或治療部位處的感染。
[0085] 這些藥劑可以涂布于基質(zhì)或納米粒子上、分散在基質(zhì)或納米粒子內(nèi)或囊封在基質(zhì) 或納米粒子內(nèi)。
[0086] II.制造方法
[0087] 至少存在四種可用方法以制得殼聚糖粒子：離子型膠凝、微乳液、乳化溶劑擴(kuò)散以 及聚電解質(zhì)絡(luò)合物。最廣泛研發(fā)的方法是離子型膠凝和自組裝聚電解質(zhì)。這些方法提供許 多優(yōu)勢(shì)，如簡(jiǎn)單并且溫和的制備方法，而不使用有機(jī)溶劑或較高剪切力。其適用于較寬類別 的藥劑，包括作為不穩(wěn)定藥劑眾人皆知的大分子。一般來說，發(fā)現(xiàn)影響納米粒子形成（包括 粒徑和表面電荷）的因素是殼聚糖的分子量和脫乙?；潭取０l(fā)現(xiàn)截留效率取決于PKa和 截留藥劑的溶解度。
[0088] 離子型膠凝方法常用于制備殼聚糖納米粒子。在酸性溶液中，殼聚糖分子的胺基 被質(zhì)子化并且通過離子相互作用與如三聚磷酸鹽（TPP)的陰離子相互作用形成粒子（李 (Lee)等人，聚合物（Polymer), 42:1879-1892(2001))。這種方法極其簡(jiǎn)單并且溫和。應(yīng) 用可逆的通過靜電相互作用的物理交聯(lián)替代化學(xué)交聯(lián)以防止試劑的可能的毒性和其它非 所需作用（舒（Shu)等人，國(guó)際藥學(xué)雜志（Internal J. Pharm. ),201:51-58 (2000))。
[0089] 還參見呂等人，分子藥物學(xué)，9:1736-1747(2012)，其描述通過接枝有環(huán)狀 Arg-Gly-Asp(RGD)肽的PEG化0-羧甲基-殼聚糖（CMC)納米粒子的不溶性藥劑（太平洋 紫杉醇，PTX)的腫瘤靶向遞送系統(tǒng)。為了提高負(fù)載效率（LE)，將0/W/0雙乳液方法與程序 升溫固化技術(shù)組合，并且控制呈原位納米微晶形式的基質(zhì)網(wǎng)絡(luò)內(nèi)的PTX。此外，這些CMC納 米粒子被PEG化，其可以減少網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（RES)識(shí)別并且延長(zhǎng)在血液中的循環(huán)時(shí)間。
[0090] 已知通過微乳液制得殼聚糖粒子的方法。舉例來說，使用殼聚糖（CS)作為親水性 主鏈和聚（乳酸-共-乙醇酸）（PLGA)作為疏水性側(cè)鏈的兩親性接枝共聚物經(jīng)由乳液自 組裝合成制備。CS水溶液用作水相，并且三氯甲烷中的PLGA用作油相。在表面活性劑斯 潘-80(叩&11-80)存在下制造油包水（1/0)乳液。031-?11^兩親物可以自組裝形成尺寸在 ~100-300nm范圍內(nèi)的膠束，使得其容易應(yīng)用到各種靶向藥物釋放和生物材料領(lǐng)域中。殼 聚糖可以與1-羥基苯并三唑一起溶解于去離子水中。制備油包水（W/0)殼聚糖和聚（乳 酸-共-乙醇酸）微乳液，并且接著制造殼聚糖-接枝-聚（乳酸-共-乙醇酸）刺激反 應(yīng)兩親物。所得兩親物可以在適合的溶劑中自組裝形成膠束。蔡（Cai)，國(guó)際納米醫(yī)學(xué)雜 志（Int J Nanomedicine), 6:3499-508(2011)描述了針對(duì)整合素過度表達(dá)腫瘤細(xì)胞靶向遞 送的RGD肽介導(dǎo)的殼聚糖基聚合膠束。
[0091] 殼聚糖微米粒子可以通過油包水乳液溶劑擴(kuò)散方法制備。在攪拌下將殼聚糖溶液 逐滴添加到乙酸乙酯中持續(xù)45分鐘。在乳化擴(kuò)散之后，通過離心回收殼聚糖微米粒子并且 在30°C下在真空烘箱中干燥24小時(shí)。
[0092] 殼聚糖的重復(fù)吡喃葡萄糖單元的C2位置上的陽離子氨基可以與其它聚離子的陰 離子基團(tuán)（通常羧酸基團(tuán)）以靜電方式相互作用以形成聚電解質(zhì)絡(luò)合物。已使用許多來 自天然來源（例如果膠、海藻酸鹽、角叉菜膠、黃原膠、羧甲基纖維素、硫酸軟骨素、硫酸葡 聚糖、玻尿酸）或合成來源（例如聚（丙烯酸））、聚磷酸、聚（L-交酯）的不同聚陰離子來 形成具有殼聚糖的聚電解質(zhì)絡(luò)合物以提供對(duì)于特定藥物遞送系統(tǒng)設(shè)計(jì)所需的物理化學(xué)特 性（伯杰（Berger)等人歐洲制藥學(xué)與生物制藥學(xué)雜志（Eur J Pharm Biopharm. )2004; 57:35-52)。
[0093] 如實(shí)例5所展示，殼聚糖海綿可以通過形成殼聚糖溶液、添加酸、接著冷凍并且凍 干殼聚糖來制備。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，使含有藥物的納米粒子懸浮于殼聚糖溶液中以產(chǎn) 生具有分散于其中的藥物納米粒子的殼聚糖海綿。
[0094] II.投與方法
[0095] 兩種通常報(bào)道的口腔癌給藥方案（假設(shè)平均生理資料檔案）產(chǎn)生15-40 μ g/ml范 圍內(nèi)的治療劑濃度。這些濃度范圍可以使用NP遞送系統(tǒng)獲得。然而，重要的是理解藥劑被 吸收通過口腔粘膜時(shí)的生物可用性。意圖是將藥劑遞送到局部組織，其在待遞送藥劑總濃 度方面具有直接影響。需要濃度小于全身治療劑給定的濃度。舉例來說，CIS傳統(tǒng)上以靜 脈內(nèi)大丸劑劑量形式遞送，并且受其全身性毒性限制。這一毒性尤其導(dǎo)致腎毒性（腎臟） 和耳毒性（聽覺）以及骨髓抑制、惡心和嘔吐。在累積劑量200mg/m2的情況下觀測(cè)到神經(jīng) 毒性。發(fā)現(xiàn)CIS的近期脂質(zhì)形式具有300mg/m2的最大耐受劑量。假設(shè)平均生理資料檔案， 血漿濃度應(yīng)小于76 μ g/ml。通過保持累積劑量在所報(bào)道的耐受范圍內(nèi)，這一途徑避免全身 性毒性和其相關(guān)作用。如果由于唾液清除藥劑到達(dá)胃腸（GI)道，那么這還將避免全身性毒 性。最終在GI道中的大多數(shù)藥劑將被排泄出，因?yàn)榇蠖鄶?shù)鉑基抗癌劑在GI道中的吸收較 低。
[0096] 將通過參考以下非限制性實(shí)例進(jìn)一步理解本發(fā)明。
[0097] 實(shí)例1 :制備無藥物殼聚糖基納米粒子
[0098] 使用如下文所描述的低分子量研究級(jí)殼聚糖制備納米粒子。
[0099] 材料和方法
[0100] 簡(jiǎn)單來說，在劇烈攪拌的同時(shí)將以各種w/v(0. 1%-1% )于純化水中的5mL 三聚磷酸鹽（TPP)溶液添加到含有各種濃度低分子量、中等重量并且脫乙?；瘹ぞ厶?(0. 1% -1% w/v)的IOmL乙酸溶液（0. 175% v/v)中。在室溫下連續(xù)攪拌混合物10分鐘， 產(chǎn)生具有各種尺寸的殼聚糖納米粒子（CHI-NP)的集合。
[0101] 表征納米粒子。通過澤塔塞澤納米儀（英國(guó)馬爾文儀器有限公司（Malvern Instruments, Ltd.，UK))測(cè)量納米粒子的尺寸、多分散指數(shù)（PDI)、每秒千計(jì)數(shù)（KCPS)以及 ζ電位（ZP)。
[0102] 結(jié)果
[0103] 表1概括了由低分子量殼聚糖制備的納米粒子的特性。到目前為止，顆粒樣品的 最重要的物理性質(zhì)是粒徑。在廣泛范圍的工業(yè)領(lǐng)域中常規(guī)地進(jìn)行粒徑分布的測(cè)量，并且其 常常是制造許多產(chǎn)品時(shí)的關(guān)鍵參數(shù)。NP必須小于200nm以滲透通過粘膜并且被癌細(xì)胞攝 取。
[0104] 如休托特（Heurtault)等人，生物材料（Biomaterials)，24:4283-4300 (2003)中 所描述，ζ電位是粒子表面電荷的重要并且有用的指標(biāo)，其可以用于預(yù)測(cè)并且控制膠體懸 浮液或乳液的穩(wěn)定性。幾乎所有與液體接觸的粒子在其表面上獲得電荷。剪切面處的電勢(shì) 稱為ζ電位。剪切面是分離在運(yùn)動(dòng)中結(jié)合到固體表面的液體薄層（由抗衡離子構(gòu)成的液 體層）的假想表面。ζ電位越大，懸浮液越有可能穩(wěn)定，因?yàn)閹щ娏Ｗ颖舜伺懦獠⑶乙虼丝?服聚集的自然傾向。ζ電位的測(cè)量允許對(duì)膠體分散液的儲(chǔ)存穩(wěn)定性進(jìn)行預(yù)測(cè)。
[0105] 納米粒子的電荷對(duì)其粘膜粘附特性來說是關(guān)鍵的（生物藥效學(xué)公報(bào)（Biol Pharm Bull. )2003年5月；26(5) :743-6. ζ電位與豬膀胱粘膜的粘膜粘著強(qiáng)度之間的相關(guān)性（The correlation between zeta potential and mucoadhesion strength on pig vesical mucosa).)。帶正電荷納米材料具有較佳粘膜粘著強(qiáng)度。因此，所需ζ電位是在10-50mV 范圍內(nèi)的正電荷，其被視為穩(wěn)定的。
[0106] 表1 :低分子量殼聚糖納米粒子。
[0109] KCPS =每秒千計(jì)數(shù)
[0110] PDI =多分散指數(shù)，也稱為分散度
[0111] ZP = ζ 電位
[0112] 中等分子量研究級(jí)殼聚糖還用于由低分子量研究級(jí)殼聚糖制備如上文所描述的 納米粒子。如表2中所示出表征納米粒子。
[0113] 表2 :中等分子量殼聚糖納米粒子。
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[0115] 在單獨(dú)的實(shí)驗(yàn)中，還使用醫(yī)藥級(jí)殼聚糖PROTASAN? UP CL 113(殼聚糖氯化物）如 上文所描述制備納米粒子。PROTASAN? UP CL 113 (殼聚糖氯化物）是基于殼聚糖，其中去 除75%與90%之間的乙?；?。陽離子聚合物是高度純化并且充分表征的水溶性氯化物鹽。 功能特性通過分子量和脫乙?；潭让枋觥Ｍǔ?，PROTASAN? UP CL 113 (殼聚糖氯化物） 的分子量在50, 000-150, OOOg/mol范圍內(nèi)（如乙酸殼聚糖所測(cè)量）。內(nèi)毒素和蛋白質(zhì)的超 低水平允許很多種活體外和活體內(nèi)應(yīng)用。
[0116] 表3 :PR0TASAN? UP CL 113(殼聚糖氯化物）納米粒子。
[0118] 通過使用高純度殼聚糖（陽離子聚合物是高度純化并且充分表征的水溶性氯化 物鹽。），獲得具有較佳品質(zhì)的殼聚糖納米粒子，如表3中所示。通過優(yōu)化TPP與殼聚糖溶 液之間的不同比率（0.6:1 ;0.5:1 ;0.4:1)獲得最佳調(diào)配物。如表3中所示，最佳形成是使 用大約0. 5:1的TPP與殼聚糖的比率，其具有理想的尺寸和ζ電位。
[0119] 實(shí)例2 :順鉑囊封納米粒子的制備和表征
[0120] 材料和方法
[0121] 使用低分子量研究殼聚糖，使用如下文所描述的不同濃度順鉑制備順鉑負(fù)載納米 粒子。
[0122] 簡(jiǎn)單來說，在劇烈攪拌的同時(shí)將以0. 1% w/v含有順鉑（0. l_2mg)的5mL三聚磷酸 鹽（TPP)溶液添加到含有0. 1% w/v殼聚糖的IOmL乙酸溶液（0. 175% v/v)中。在室溫下 連續(xù)攪拌混合物10分鐘，產(chǎn)生具有不同順鉑負(fù)載量的順鉑囊封CHI-NP的集合。
[0123] 空白納米粒子的最佳調(diào)配是在