一種應用于靶向給藥系統(tǒng)的新的支鏈連接體的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種靶向給藥系統(tǒng)的新的支鏈連接體的設計、合成及在靶向給藥系統(tǒng) 中的應用。其中所述肽鏈通過對氨基連接到支鏈連接體，所述藥物通過芐基醇的部分連接 到支鏈連接體，修飾片段及靶頭部分通過炔基連接到支鏈連接體；本發(fā)明進一步涉及制備 所述多肽藥物偶聯(lián)物的中間體以及通過各種中間體制備所述多肽藥物偶聯(lián)物的方法，涉及 這樣的多肽藥物偶聯(lián)物的體外釋藥實驗。
【背景技術】
[0002] 大部分化療藥物由于不具有選擇性，往往在其用于治療的過程中伴隨著嚴重的毒 副作用，這限制了它們的用途和療效。為了提高藥物對病變組織或細胞的特異性，越來越多 的研宄傾向于將藥物設計成靶向前藥。靶向前藥是指將藥物活性化合物通過連接體連接 至革G向劑（如單克隆抗體，iRGD，葉酸等）所形成的革El向藥物聯(lián)接體。其中，連接體的作用 是將靶向劑與藥物連接；靶向劑主要負責將靶向藥物聯(lián)接體特異性的運送至病變組織或細 胞；藥物提供治療作用。
[0003] 相較于腙和二硫化物的連接體在細胞外的生理條件下的不穩(wěn)定性，肽鍵連接體在 細胞外的生理條件下有一定的穩(wěn)定性，提高靶向藥物聯(lián)接體（如ADCs)的治療窗。肽鍵連 接體可以通過組織蛋白酶進行水解斷裂。
[0004] 組織蛋白酶（Cathepsins)是一大類主要存在于溶酶體的半胱氨酸蛋白水解酶， 包括組織蛋白酶B，C，F(xiàn)，H，K，L，0, S，V，W和X。組織蛋白酶多以無活性的酶原形式存在， 酶活性的調節(jié)是通過各種轉譯后的過程完成，其中，最重要的蛋白酶酶原的激活是通過核 內體/溶酶體的酸性環(huán)境和來自半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族的內源性抑制劑的高親和力 的表達。由于腫瘤細胞能夠酸化其周圍環(huán)境，其分泌的組織蛋白酶在此環(huán)境中被活化，因 此，腫瘤組織及細胞中組織蛋白酶的活性遠高于遠離腫瘤的其他正常組織和細胞的組織蛋 白酶活性。
【發(fā)明內容】
[0005] 本發(fā)明的目的是設計一個用于靶向給藥系統(tǒng)的支鏈連接體。
[0006]
【主權項】
1. 一種應用于祀向給藥系統(tǒng)的新的支鏈連接體，其特征在于該支鏈連接體具有下式結 構：
2. -種權利要求1所述支鏈連接體（VII)的制備方法，其特征在于該方法包括W下具 體步驟：
式中，由原料I經(jīng)過醋化、漠代、取代、水解、醋化及還原反應得到支鏈連接體（VII);其 中， i) 在堿性條件下，化合物III發(fā)生親核取代反應同時伴隨著部分水解反應得到混合 物，堿為氨氧化鋼或氨氧化鐘，溶劑為二氯甲燒，反應溫度為0-20°C，其中，化合物III與堿 的摩爾比為1 : 5;在酸性條件下，該混合物經(jīng)過水解反應得到化合物IV，酸為鹽酸，溶劑為 水； ii) 化合物IV在氯化亞諷的作用下生成酷氯中間體，與甲醇作用得到化合物V，溶劑為 甲醇，反應溫度為20-80°C，其中，化合物IV與氯化亞諷的摩爾比為1 : 6.6; iii) 化合物V經(jīng)還原得到化合物VI，還原劑為化粉和氯化錠或者化粉和氯化錠，溶 劑為己醇和水的混合溶劑，反應溫度為20-100°C，其中，化合物VJe粉或化粉W及氯化錠 的摩爾比為1 : 4 : 4,己醇與水的體積比為2 : 1; iv) 化合物VI經(jīng)過LAH還原得到化合物VII，溶劑為四氨快喃，反應溫度為0-20°C，其 中，化合物VI與LAH的摩爾比為1 : 2. 5。
3. -種權利要求1所述支鏈連接體用于連接配體LI、引發(fā)劑R-PI W及藥物DR的方法， R-PI中PI選自；組織蛋白酶底物；R是取代基團，為-H、PEG、糖、葉酸、多膚類、抗體或 保護基； DR是一種藥學上的活性藥物； LI選自；PEG、糖、葉酸、多膚類或抗體； 其特征在于；通過組織蛋白酶水解膚鍵，引發(fā)藥物釋放；
(+w)表示用于連接R-PI的連接部位； (+…）表示用于連接DR的連接部位； (++W+)表示用于連接LI的連接部位。
4. 根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于所述組織蛋白酶底物為單個氨基酸或二 膚；所述多膚類為RGD或iRGD ;所述保護基為叔了氧幾基、節(jié)氧幾基或贊甲氧幾基。
5. 根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于所述R-PI通過縮合反應與支鏈連接體 (VII)連接，得到式（a)化合物；
式（a)中，PI 選自單個氨基酸（-AA-)，為-Lys-，-Cit-，-Arg-，-Leu-，-His-，-Asp-，-Glu-, -Ala-，-Val-，-1le-，-Pro-，-Phe-，-Trp-, -Met-，-Ser-，-Cys-或-Asn-；PI 選自 ^月太 (-AAi-AA]-)，為-Phe-Lys-，-Val-Lys-，-Ala-Lys-，-Val-Cit-，-Phe-Cit-，-Leu-Cit-，-lie -Cit，-Trp-Cit-，-Trp-Cit-或-Phe_Arg-〇
6. 根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于所述DR與支鏈連接體W式（b)或式（c)化 合物的形式連接；
DR如權利要求3中所定義； X是雜原子，為-N-或; 式化）化合物是在步驟（MIb)中制備； 步驟（M扣）包括反應（M化），反應（MIb)是由化合物（VIII)與化合物（VIIII)參與的 反應；
式（VIII)化合物是在步驟中制備； 步驟（MIb_l)包括反應（MIb_l)，反應（MIb_l)是由化合物（a)與化合物狂）參與的反 應； 式狂）化合物選自4-硝基苯基氯甲酸醋、二（對硝基苯）碳酸醋、光氣、雙光氣、S光 氣及其混合物；
式（vnn)化合物是在步驟（Mib_。中制備； 步驟（MIb_。包括反應（MIb_2)，反應（MIb_。是用立氣醋酸除去化合物煙）的保護 基=苯甲基的反應；
式狂I)化合物是在步驟（MIb_3)中制備； 步驟（MIbJB)包括反應（MIb_3)，反應（MIbJB)是由化合物伽)、化合物佩與化合物 狂II)參與的反應；
式（C)化合物是在步驟（MIb_4)中制備； 步驟（M扣）包括反應（MIb_4)，反應（MIb_4)是由化合物（Vin)與化合物值時參與的 反應。
7.根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于所述LI與支鏈連接體W式（d)或式（e)化 合物的形式連接；
LI如權利要求3中所定義； X如權利要求6中所定義； LKi是連接修飾片段，為PEG、糖或燒基鏈。
8.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于所述式（a)化合物選自：
9.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于所述式（b)和式（c)化合物選自：
10.根據(jù)權利要求7所述的方法，其特征在于所述式（d)和式（e)化合物選自：
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種應用于靶向給藥系統(tǒng)的新的支鏈連接體、合成及在靶向給藥系統(tǒng)中的應用，其中肽鏈通過對氨基連接到支鏈連接體，藥物通過芐基醇的部分連接到支鏈連接體，修飾片段及靶頭部分通過炔基連接到支鏈連接體；本發(fā)明使給藥后在體內到達病變組織過程中有一定的穩(wěn)定性，并且靶向到特定組織或細胞后，在特定的條件下，釋放出藥物，達到治療效果并減少毒副作用。
【IPC分類】A61K47-48, C07C213-08, C07C217-76
【公開號】CN104587487
【申請?zhí)枴緾N201510005869
【發(fā)明人】呂偉, 劉雅倩, 張翾, 方艷芬, 羅宇, 鮑彬, 章雄文
【申請人】華東師范大學
【公開日】2015年5月6日
【申請日】2015年1月6日