一種治療高血壓的竹節(jié)參提取物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥提取物領(lǐng)域，具體涉及一種竹節(jié)參提取物及含有該提取物的藥物 制劑，該提取物可以應用于治療高血壓。
【背景技術(shù)】
[0002] 竹節(jié)參為五加科（Araliaceae)植物竹節(jié)參Panaxjaponicus C. A. Mey.的干燥根 莖，又名竹節(jié)人參、竹節(jié)七等，其根莖橫臥，呈竹鞭狀，肉質(zhì)肥厚，白色，結(jié)節(jié)間具凹陷莖痕， 有羽葉三七、狹葉竹節(jié)參及珠子參等變種，廣泛分布于日本及中國西南至中部地區(qū)。竹節(jié)參 性溫，味甘、微苦，歸肝、脾、肺經(jīng)，具有滋補強壯、散瘀止痛、止血、祛痰等功效。
[0003] 竹節(jié)參最主要的成分為皂苷，其量因產(chǎn)地不同而有所變化。日本報道其根莖含粗 皂苷約23. 6%，而我國文獻報道其根中含皂苷僅約為5%。除此之外，竹節(jié)參還含有豐富 的氨基酸、多糖，少量的揮發(fā)油及無機元素等成分。其皂苷類成分根據(jù)母核類型及取代基 的不同可分為齊墩果燒型（Oleanane type)、達瑪燒型、奧寇梯木醇型（Octillol type) 及甾醇型等。①齊墩果烷型：齊墩果烷型五環(huán)三萜皂苷為竹節(jié)參總皂苷的主要有效成分 之一，其種類較達瑪烷型少，但量較達瑪烷型要高。②達瑪烷型：達瑪烷型四環(huán)三萜皂苷 為竹節(jié)參的另一主要有效成分。根據(jù)母核羥基多少，達瑪烷型皂苷分為20 (S)-原人參二 醇型和20(S)_原人參三醇型，兩者間的區(qū)別取決于達瑪烷母核的C6位是否含有羥基或 由羥基衍生的0-糖苷取代基。③奧寇梯木醇型：此類皂苷均具有20 (S)，24 (S)-環(huán)氧達 瑪-3 β，6 α，12 β，25-四醇的母核結(jié)構(gòu)。偽人參皂苷F11是奧寇梯木醇型皂苷的代表組分， 同時還有偽人參皂苷RT4，葉三七皂苷A、B、C等。
[0004] 現(xiàn)代藥理學研究表明，竹節(jié)參具有多種生物活性，如對消化系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、 心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、炎癥、糖尿病、肥胖、慢性疲乏綜合癥、腫瘤均有不同程度的藥理作 用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種竹節(jié)參提取物，其制備方法和液相分析方法，含有該 提取物的藥物制劑及利用該提取物制備治療高血壓的藥物的用途。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0007] -種竹節(jié)參提取物，該提取物由以下方法制備：
[0008] (a)以重量計，每100份藥材包含竹節(jié)參80~90份和大黃10~20份，混合粉碎， 用60 %乙醇溶液熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液；(b)將步驟 (a)所得乙醇提取濃縮液用水稀釋，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，減壓 濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用水溶 解，過濾，用大孔樹脂富集活性成分，先用8%乙醇沖洗12個柱體積除去大極性成分，再用 70%乙醇洗脫10個柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮即得。
[0009] 進一步地，步驟（C)中所述大孔樹脂為AB-8型大孔樹脂。
[0010] 為了能夠通過建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同批次制備的提取物的批間差 異，所述提取物的液相分析方法為：
[0011] 色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0012] 流動相：A為乙腈，B為0. 4%磷酸溶液；
[0013] 梯度洗脫程序：0· 01 ~5min，A 10%- 15% ;5 ~15min，A 15%-48% ;15 ~ 25min，A48% - 78% ;25 ~40min，A 78%- 10% ;
[0014] 流動相流速：1. OmL · min S
[0015] 檢測波長：260nm ;柱溫：30°C ;進樣量：10 yL。
[0016] 藥物制劑，含有治療有效量的所述提取物和藥學上可接受的載體。
[0017] 所述的提取物在制備治療高血壓的藥物中的應用。
[0018] 所述的藥物制劑在制備治療高血壓的藥物中的應用。
[0019] 本發(fā)明提取物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0020] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明竹節(jié)參提取物，其余為藥物學上可接受 的、對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0021] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0022] 本發(fā)明的優(yōu)點：本發(fā)明通過對干燥的竹節(jié)參進行提取、除雜、富集處理，能得到具 有治療高血壓的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋圖譜， 用于控制不同批次制備的提取物的批間差異。
【附圖說明】
[0023] 圖1為竹節(jié)參提取物HPLC液相圖譜。
【具體實施方式】
[0024] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應當理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0025] 實施例1 :提取物制備（竹節(jié)參85份，大黃15份）
[0026] 藥材來源：竹節(jié)參和大黃干燥根莖購自安徽亳州中藥材市場。
[0027] 主要試劑：食品級乙醇購自上海凌峰化學試劑有限公司；醫(yī)藥級AB-8大孔樹脂購 自天津波鴻樹脂有限公司；乙腈為HPLC級，購于TEDIA ;85 %磷酸為HPLC級，購于TEDIA ; 色譜用純凈水為哇哈哈純凈水。
[0028] 制備方法：將8. 5kg干燥的竹節(jié)參和I. 5kg的大黃干燥根莖混合粉碎，用60 %乙 醇溶液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將 所得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水 飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁 醇萃取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg， 柱體積I. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗12個柱體積（18L)除去大極性成分，再用 70%乙醇洗脫10個柱體積（15L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得竹節(jié)參提取物約120g。
[0029] 實施例2 :提取物制備（竹節(jié)參80份，大黃20份）
[0030] 制備方法：將8kg干燥的竹節(jié)參和2kg的大黃干燥根莖混合粉碎，用60 %乙醇溶 液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所得 乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽和 的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱體 積I. 5L)富集活性成分，先用8%乙醇沖洗12個柱體積（18L)除去大極性成分，再用70% 乙醇洗脫10個柱體積（15L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得竹節(jié)參提取物約120g。
[0031] 實施例3 :提取物制備（竹節(jié)參90份，大黃10份）
[0032] 制備方法：將9kg干燥的竹節(jié)參和Ikg的大黃干燥根莖混合粉碎，用60 %乙醇溶 液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所得 乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽和 的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱體 積I. 5L)富集活性成分，先用8%乙醇沖洗12個柱體積（18L)除去大極性成分，再用70% 乙醇洗脫10個柱體積（15L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得竹節(jié)參提取物約120g。
[0033] 實施例4 :提取物制備（竹節(jié)參75份，大黃25份）
[0034] 制備方法：將7. 5kg干燥的竹節(jié)參和2. 5kg的大黃干燥根莖混合粉碎，用60 %乙 醇溶液熱回流提取（25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將 所得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水 飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁 醇萃取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg， 柱體積I. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇沖洗12個柱體積（18L)除去大極性成分，再用 70%乙醇洗脫10個柱體積（15L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得竹節(jié)參提取物約120g。
[0035] 實施例5 :提取物制備（竹節(jié)參95份，大黃5份）
[0036] 制備方法：將9. 5kg干燥的竹節(jié)參和0. 5kg的大黃干燥根莖混合粉碎，用60 %乙 醇溶液熱回流提取（25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將 所得乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水 飽和的正丁醇（