【具體實(shí)施方式】
[0037] 以下通過實(shí)施例對本申請做進(jìn)一步闡述。
[0038] 實(shí)施例1本發(fā)明藥物組合物的制備
[0039] 1、原輔料的制備
[0040] ①原料的制備：黃芪50kg、知母40kg檢驗合格后，除去雜質(zhì)，洗凈，切片，備用；蛹 蟲草子實(shí)體IOkg檢驗合格后，除去雜質(zhì)備用；薄荷素油40ml檢驗合格后，備用。
[0041] ②輔料的制備：10%甜菊糖甙溶液、10%山梨酸鉀溶液、純化水適量檢驗合格后， 移入清潔區(qū)，備用；
[0042] 2、本發(fā)明藥物組合物的制備
[0043] ①黃芪、知母，置多功能提取罐中，加水提取二次，第一次加水量為藥量的8倍，煎 煮2小時；第二次加水量為藥量的6倍，煎煮1. 5小時。提取液過濾（350目），合并2次濾 液，減壓濃縮至相對密度為1. 06~1. 08 (75-80 °C熱測），濃縮液放冷后，置醇沉罐內(nèi)，加入 85%~95%乙醇，使含醇量達(dá)60%，攪拌均勻，靜置24小時，取上清液過濾（350目），回收 乙醇，濾液減壓濃縮至相對密度為1. 04~1. 06 (65-70°C熱測），放涼，得浸膏A，備用。
[0044] ②蛹蟲草子實(shí)體，置提取罐中，第一次加水量為藥量的8倍，煎煮2小時，第二次加 水量為藥量的6倍，煎煮1小時，藥液過濾（350目），合并2次濾液，減壓濃縮至相對密度為 1. 04~1. 06 (65-70 °C熱測），放涼，得浸膏B，備用。
[0045] ③將浸膏A、浸膏B與適量水混合，置提取罐中煮沸，過濾（350目），濾液相對密度 為1.02~1.04( < 90°C熱測），放冷庫，備用。
[0046] ④配液，將上述濾液與薄荷素油40ml，適量甜菊糖甙溶液、山梨酸鉀溶液、純化水 混合均勻，共制備到20L，再分裝、滅菌，即得。
[0047] 實(shí)施例2、本發(fā)明藥物組合物的抗氧化功能實(shí)驗（老年鼠）
[0048] 實(shí)施例1制備得到的藥物組合物，富含多糖、多酚、皂苷類等物質(zhì)。衰老的自由基 學(xué)說認(rèn)為，自由基和脂質(zhì)過氧化物引起的細(xì)胞衰老是導(dǎo)致衰老的重要原因。而機(jī)體抗氧化 酶活性提高，清除自由基的能力增強(qiáng)，其抗衰老能力也得到增強(qiáng)。本實(shí)驗建立了衰老小鼠 模型，并用實(shí)施例1制備得到的藥物組合物干預(yù)，以觀察其對衰老小鼠抗氧化功能的影 響。
[0049] 1材料和方法
[0050] I. 1樣品：實(shí)施例1制備得到的藥物組合物，20ml/瓶，玻璃瓶裝，內(nèi)容物為棕褐色 液體，保存在陰涼干燥處。
[0051] 1. 2實(shí)驗動物和實(shí)驗室：SPF級昆明種雄性小白鼠，老年鼠8-10月齡，青年鼠3月 齡，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物中心提供，生產(chǎn)許可證號：SCXK(粵）2013-0002,質(zhì)量合格證編 號：44007200012308,顆粒飼料亦由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物中心提供；動物實(shí)驗室為屏障環(huán) 境，使用許可證號：SYXK (粵）2013-0011，室溫20~26°C，濕度40~70%。
[0052] 1. 3劑量選擇與受試物處理和給予方式
[0053] 1. 3. 1劑量選擇：本實(shí)驗設(shè)低、中、高三個劑量組，劑量為5、10、30ml/kg BW，相當(dāng) 于人體推薦量的5、10、30倍，另設(shè)老年對照組和青年對照組。
[0054] 1. 3. 2受試物處理和給予方式：實(shí)驗時稱取樣品I. 67、3. 33ml的3倍樣品濃縮液， 分別用純凈水配制成IOml的樣液，供低、中劑量組動物灌胃使用，高劑量組直接灌胃給予3 濃縮液。每天按〇. lml/lOg BW量灌胃動物給予受試物。
[0055] 1. 4主要儀器與試劑：酶標(biāo)儀、生化培養(yǎng)箱、微量振蕩器、微量加樣器、洗板機(jī)、分 光光度計、恒溫水浴鍋、低溫高速離心機(jī)、混旋器、2ml離心管、日立7600全自動生化儀等。 還原型谷胱甘肽（GSH)檢測測試盒，Biovision產(chǎn)品，購自深圳欣博盛公司；2,4_二硝基 苯肼（DNPH)、三氯乙酸（TCA)、鹽酸胍、無水乙醇、乙酸乙酯、乙酸、乙酸鈉、十二烷基硫酸鈉 SDS、硫代巴比妥酸TBA、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、四乙氧基丙烷購自廣州聯(lián)方實(shí)驗器材有 限公司；MDA、SOD、GSH-Px檢測試劑盒，購自碧云天生物技術(shù)有限公司；蛋白檢測試劑由日 立7600全自動生化儀生產(chǎn)商供應(yīng)。
[0056] 1. 5試驗方法：動物在實(shí)驗室條件下檢疫三天后，老年鼠內(nèi)眥靜脈采血進(jìn)行全血 MDA含量檢測，根據(jù)MDA水平隨機(jī)分為四組，每組12只，劑量組每日灌胃給予受試物。青年 對照組（12只）和老年對照組每日灌胃給予純凈水。給樣量根據(jù)每周體重增減調(diào)整，實(shí)驗 時間為30天。連續(xù)灌胃30天后，經(jīng)眼球取血，分離出血清進(jìn)行蛋白質(zhì)羰基和還原性谷胱甘 肽（GSH)檢測；取出肝組織進(jìn)行丙二醛（MDA)、超氧化物歧化酶（SOD)和谷胱甘肽過氧化物 酶（GSH-Px)的檢測。
[0057] I. 5. 1小鼠肝組織中MDA、SOD、GSH-Px的檢測：按試劑盒說明操作。
[0058] 1. 5. 2小鼠血清中GSH的檢測：
[0059] 1. 5. 2. 1樣品測定：按試劑盒說明操作，具體方法如下：
[0060] GSH 標(biāo)準(zhǔn)孔濃度分別為：50 μ g/ μ L、40 μ g/ μ L、30 μ g/ μ L、20 μ g/ μ L、0 μ g/ μ L0
[0061]
【主權(quán)項】
1. 一種藥物組合物，其特征在于，其活性成分包括如下重量份的原料： 黃芪45-55份、知母35-45份、蛹蟲草子實(shí)體5-15份、薄荷素油0. 03-0. 05份。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，其活性成分包括如下重量份的原 料：黃芪50份、知母40份、蛹蟲草子實(shí)體10份、薄荷素油0. 04份。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物的劑型為口服液、片 劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑或注射劑。
4. 權(quán)利要求1-3任一項所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟： (1) 按比例將黃芪、知母加水提取1-3次，合并濾液，減壓濃縮，再加入乙醇溶液至乙醇 的體積含量為55-60 %進(jìn)行醇沉，取上清液濾過，再減壓濃縮得浸膏A; (2) 按比例將蛹蟲草子實(shí)體加水提取1-3次，合并濾液，減壓濃縮得浸膏B; (3) 將浸膏A、浸膏B和適量水混合，煮沸，過濾備用； (4) 按比例將薄荷素油加入步驟（3)所得濾液，并加入適量水以及輔料混合，即得所述 藥物組合物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟（1)中，提取次數(shù)為2次，第一 次加水量為藥材量的6-10倍，煎煮I. 5-2. 5h，第二次加水量為藥材量的5-7倍，煎煮l-2h; 步驟（2)中，提取次數(shù)為2次，第一次加水量為藥材量的6-10倍，煎煮I. 5-2. 5h，第二次加 水量為藥材量的5-7倍，煎煮0. 5-1. 5h。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟（1)中，提取次數(shù)為2次，第一次 加水量為藥材量的8倍，煎煮2h，第二次加水量為藥材量的6倍，煎煮I. 5h;步驟（2)中，提 取次數(shù)為2次，第一次加水量為藥材量的8倍，煎煮2h，第二次加水量為藥材量的6倍，煎煮 Ih0
7. 權(quán)利要求1-3任一項所述的藥物組合物在制備抗氧化、延緩衰老的保健食品或藥物 中的應(yīng)用。
8. 權(quán)利要求1-3任一項所述的藥物組合物在制備防治糖尿病并發(fā)癥的藥物中的應(yīng)用。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述糖尿病并發(fā)癥包括糖尿病腎病、糖尿 病視網(wǎng)膜病變或糖尿病神經(jīng)病變。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用，該藥物組合物的活性成分包括如下重量份的原料：黃芪45-55份、知母35-45份、蛹蟲草子實(shí)體5-15份、薄荷素油0.03-0.05份。該藥物組合物可應(yīng)用于制備抗氧化、延緩衰老的保健品或藥品，其還可以應(yīng)用于制備防治糖尿病并發(fā)癥的藥物。
【IPC分類】A61K36-8964, A61P3-10, A61P39-06, A23L1-29
【公開號】CN104815139
【申請?zhí)枴緾N201510227617
【發(fā)明人】李吉來, 張春波, 鄒琦, 耿春賢, 周杰, 程艷陽, 梁海清, 王尉
【申請人】廣州白云山中一藥業(yè)有限公司
【公開日】2015年8月5日
【申請日】2015年5月6日