內(nèi)黃色熒光蛋白熒光強度的代表性實驗 結果。
[0038] 圖4為同一視野下TMEM16A離子通道抑制劑單寧酸作用下，白藜蘆醇對黃色熒光 蛋白的熒光強度影響的代表性實驗結果，其中：
[0039] 圖4a為實施例15中未加入白藜蘆醇時細胞內(nèi)黃色熒光蛋白熒光強度的代表性實 驗結果圖。
[0040] 圖4b為實施例15中加入白藜蘆醇后細胞內(nèi)黃色熒光蛋白熒光強度的代表性實驗 結果。
【具體實施方式】
[0041] 圖Ia所示實施例表明，不轉染TMEM16A離子通道的HEK293細胞的空白組激活電 流為本底電流，穩(wěn)態(tài)電流小于6pA。
[0042] 圖Ib所示實施例表明，實施例13中，浴液中含30 y M白藜蘆醇時的激活電流，其 為TMEM16A離子通道被激活時的典型電流，穩(wěn)態(tài)電流大小約為50pA，顯示比空白組明顯增 大。
[0043] 圖Ic所示實施例表明，實施例13中，浴液中含濃度100 y M白藜蘆醇條件下的激 活電流，穩(wěn)態(tài)電流大小約為l〇〇pA。
[0044] 圖Id所示實施例表明，IOOyM單寧酸對浴液中含濃度IOOyM白藜蘆醇條件下的 激活電流的抑制作用，由于單寧酸為鈣激活氯離子通道的抑制劑，所以圖Id顯示圖Ib和圖 Ic所示的實施例中的電流均為TMEM16A離子通道所介導的電流，TMEM16A離子通道可被白 藜蘆醇激活。
[0045] 圖Ie所示實施例表明，實施例13中，浴液中含濃度I yM鈣離子條件下的激活電 流，穩(wěn)態(tài)電流大小約為50pA，顯示比空白組明顯增大。
[0046] 圖2a所示實施例表明，實施例14中，在豚鼠回腸收縮反應測定實驗中，白藜蘆醇 可引起豚鼠回腸收縮反應增強，并且收縮反應可被TMEM16A離子通道抑制劑CaCCinh-AOl 迅速抑制到本底水平。
[0047] 圖2b所示實施例表明，實施例14中，在豚鼠回腸收縮反應測定實驗中，白藜蘆醇 可顯著增加促進胃腸道收縮力。本實施例的獨立實驗次數(shù)為6次。圖中，**表示與對照組 相比，白藜蘆醇處理組存在極顯著差異（P〈〇. 01)。
[0048] 圖3a所示實施例表明，實施例15中，未加入白藜蘆醇時細胞內(nèi)黃色熒光蛋白的熒 光強度，每個細胞內(nèi)部均為強烈的黃色熒光。
[0049] 圖3b所示實施例顯示，實施例15中，加入白藜蘆醇時細胞內(nèi)黃色熒光蛋白的熒光 強度，由于白藜蘆醇激活了 TMEM16A離子通道，從該離子通道進入的碘離子使得胞內(nèi)的黃 色熒光蛋白發(fā)生熒光淬滅。
[0050] 圖4a所示實施例顯示，實施例15中，在加入TMEM16A抑制劑單寧酸的條件下，未 白藜蘆醇加入時細胞內(nèi)黃色熒光蛋白的熒光強度，每個細胞內(nèi)部均為強烈的黃色熒光。
[0051] 圖4b所示實施例顯示，實施例15中，在加入TMEM16A抑制劑單寧酸的條件下，且 加入白藜蘆醇時細胞內(nèi)黃色熒光蛋白的熒光強度，由于單寧酸抑制了 TMEM16A離子通道， 并不引起碘離子進入胞內(nèi)，從而細胞的黃色熒光并未淬滅。
[0052] 實施例1
[0053] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以淀粉載體，白 藜蘆醇與淀粉載體的用量的重量比為1: 〇. 4,其配備方法使用藥學上可接受的形式，本實施 例的含白藜蘆醇的藥物組合物為口服型給藥的散劑。
[0054] 實施例2
[0055] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以糖粉載體，白 藜蘆醇與糖粉載體的用量的重量比為1: 〇. 4,其配備方法使用藥學上可接受的形式，本實施 例的含白藜蘆醇的藥物組合物為口服型給藥的顆粒。
[0056] 實施例3
[0057] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以糊精載體，白 藜蘆醇與糊精載體的用量的重量比為1: 1，其配備方法使用藥學上可接受的形式，本實施例 的含白藜蘆醇的藥物組合物為口服型給藥的膠囊。
[0058] 實施例4
[0059] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以乳糖載體，白 藜蘆醇與乳糖載體的用量的重量比為1:1. 6,其配備方法使用藥學上可接受的形式，本實施 例的含白藜蘆醇的藥物組合物為口服型給藥的片劑。
[0060] 實施例5
[0061] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以微晶纖維素 載體，白藜蘆醇與微晶纖維素載體的用量的重量比為1: 1，其配備方法使用藥學上可接受的 形式，本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物為口服型給藥的滴丸。
[0062] 實施例6
[0063] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以甘露醇載體， 白藜蘆醇與甘露醇載體的用量的重量比為1:0. 7,其配備方法使用藥學上可接受的形式，本 實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物為非口服型給藥的注射劑。
[0064] 實施例7
[0065] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以任意比例的 淀粉加糖粉載體，白藜蘆醇與任意比例的淀粉加糖粉的用量的重量比為1:1，其配備方法使 用藥學上可接受的形式，本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物為口服型給藥的散劑。
[0066] 實施例8
[0067] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以任意比例的 糊精加乳糖加微晶纖維素的載體，白藜蘆醇與任意比例的糊精加乳糖加微晶纖維素的用量 的重量比為1:1. 6,其配備方法使用藥學上可接受的形式，本實施例的含白藜蘆醇的藥物組 合物為口服型給藥的散劑。
[0068] 實施例9
[0069] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以任意比例的 糊精加乳糖加微晶纖維素加甘露醇的載體，白藜蘆醇與任意比例糊精加乳糖加微晶纖維素 加甘露醇的用量的重量比為1:1. 6,其配備方法使用藥學上可接受的形式，本實施例的含白 藜蘆醇的藥物組合物為口服型給藥的散劑。
[0070] 實施例10
[0071] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以任意比例的 糊精加乳糖加微晶纖維素加甘露醇加糖粉載體，白藜蘆醇與任意比例的糊精加乳糖加微晶 纖維素加甘露醇加糖粉的用量的重量比為1 : 1，其配備方法使用藥學上可接受的形式，本 實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物為口服型給藥的散劑。
[0072] 實施例11
[0073] 本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物，以白藜蘆醇為活性成分，輔以任意比例的 糊精加乳糖加微晶纖維素加甘露醇加糖粉加淀粉載體，白藜蘆醇與任意比例糊糊精加乳糖 加微晶纖維素加甘露醇加糖粉加淀粉的用量的重量比為1:0. 4,其配備方法使用藥學上可 接受的形式，本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物為口服型給藥的散劑。
[0074] 實施例12
[0075] 取蒸餾水500mL，加入聚山梨酯-80制成溶液，再加入白藜蘆醇100g，邊加熱邊攪 拌使之溶解成含白藜蘆醇的溶液，另外將蔗糖50g加入公知標準用量的防腐劑并溶于蒸餾 水IOOmL中，制得蔗糖溶液，再將該蔗糖溶液在攪拌下加入上述含白藜蘆醇的溶液中，加蒸 餾水至lOOOmL，混勻，過濾，分裝成200支，滅菌，制得本實施例的含白藜蘆醇的藥物組合物 的口服液。
[0076] 在以下本發(fā)明含白藜蘆醇的藥物組合物的應用的實施例中，所選用的含白藜蘆醇 的藥物組合物為上述實施例1至實施例12中的任意一種含白藜蘆醇的藥物組合物。
[0077] 實施例13
[0078] 上述實施例1至實施例12中的任意一種含白藜蘆醇的藥物組合物作為TMEM16A 離子通道的一種激活劑，用于使轉染有TMEM16A離子通道的HEK293細胞電流值增強：
[0079] 將表達質(zhì)粒pEGFP-Nl-TMEM16A轉入哺乳動物細胞HEK293中。在細胞轉染后 24-72h之內(nèi)，利用膜片鉗技術進行電生理檢測。具體方法如下：
[0080] HEK293細胞用含有10%胎牛血清的DMEM(高糖）培養(yǎng)液傳代培養(yǎng)，即加入100UI/ mL的青霉素和IOOy g/mL鏈霉素。轉染過程用Invitrogen公司產(chǎn)品Lipofectamine 2000 脂質(zhì)體進行。細胞于37°C，5%的CO2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至對數(shù)生長期用于實驗。電 生理檢測在室溫下進行，采用內(nèi)面向外（Inside-Out)記錄模式（EPC-lOAmplif ier，HEKA公 司，德國），內(nèi)液和基礎外液的成分為（單位：mM) :CsCl 140, MgCl2 ? 6H20, HEPES 10, EGTA 5,用CsOH調(diào)至pH7. 3。加入藥物的外液中白藜蘆醇的濃度分別設為30 y M和100 yM，用 IOOnM游離鈣離子測試TMEM16A通道表達與否，用IOmM EGTA無鈣溶液