一種虎杖苷在制備抗心律失常產(chǎn)品中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥材的活性成份在臨床中的應(yīng)用，主要涉及一種中藥提取物即虎杖 苷（piceid，polydatin)在制備抗心肌肥大和/或心室肥厚所致心律失常產(chǎn)品的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 1、心律失常
[0003] 心臟病已經(jīng)成為近年來發(fā)病率增長最快的疾病之一。心律失常是由于竇房結(jié)激動 異?；蚣赢a(chǎn)生于竇房結(jié)以外，激動的傳導(dǎo)緩慢、阻滯或經(jīng)異常通道傳導(dǎo)，即心臟活動的起 源和（或）傳導(dǎo)障礙導(dǎo)致心臟搏動的頻率和（或）節(jié)律異常。心律失常是心血管疾病中重 要的一組疾病。它可單獨發(fā)病亦可與心血管病伴發(fā)?？赏蝗话l(fā)作而致猝死，亦可持續(xù)累及 心臟而衰竭。
[0004] 心肌肥大則是引發(fā)心衰的最重要的原因。心室肥厚常常繼發(fā)于高血壓和心肌梗 死。心室肥厚通常涉及心室結(jié)構(gòu)改變，即心室重構(gòu)。心肌重構(gòu)是許多心血管疾病的并發(fā)癥， 是心衰發(fā)展過程中的重要的決定因素。心肌重構(gòu)后心律失常發(fā)生率提高28 %，最終引起 心臟猝死增高5倍以上。慢性心臟病理性超負荷（如，由高血壓、瓣膜病、慢性缺血）的患 者致命性心律失常風(fēng)險增加并且有發(fā)生嚴重心力衰竭的傾向。隨著心力衰竭的進展，室性 異位搏動出現(xiàn)的頻率和復(fù)雜性增加。長期以來，人們已經(jīng)認識到病理性心室肥厚是心臟性 猝死的獨立危險因素。然而，在慢性血流動力學(xué)超負荷情況下導(dǎo)致心律失常的機制很復(fù)雜。 即使在具有同樣病理改變的患者中也存在著不同心動過速的機制。
[0005] 研究發(fā)現(xiàn)在超負荷的心肌（心肌肥厚和心力衰竭）中存在心肌細胞的結(jié)構(gòu)和電生 理的重建。不論什么原因?qū)е碌男募》屎窈托牧λソ撸潆娭貥?gòu)的特點是心室動作電位延 長（CurrOpinCardiol. 2010Jan ;25(1) :29-36.)。對于人類心臟而言，動作電位延長既可出 現(xiàn)于代償性心肌肥厚又可出現(xiàn)于終末期心力衰竭中。在缺血性或非缺血性擴張型心肌病和 其它心肌肥厚或心力衰竭患者中QT間期常常發(fā)生改變。而這些改變，常常是以K+通道下 調(diào)和Ca 2+內(nèi)環(huán)境恒定性改變?yōu)榛A(chǔ)的。
[0006] 目前觀點一致認為，關(guān)于K+通道下調(diào)的重要信息來自于最近對心室肌復(fù)極化離 子通道Ito的α亞基（Kv4. 2、Kv4. 3)表達下調(diào)，使Ito電流密度降低，通過延長心肌細胞 動作電位，引起長QT間期綜合癥，從而導(dǎo)致室性心律失常的發(fā)生。
[0007] 以往臨床對肌肥大和/或心室肥厚的治療重點是使用強心甙類正性肌力作用藥 物和利尿藥，往往忽略心肌肥厚所帶來的心律失常。目前臨床上使用和開發(fā)的抗心律失常 藥物根據(jù)對心肌電生理的影響和作用機制分類，可分為四大類：I類是鈉通道阻滯劑，然而 可產(chǎn)生嚴重的竇性心動過緩、房室傳導(dǎo)阻滯、QRS波增寬誘發(fā)新的尖端扭轉(zhuǎn)性室性心律失常 等副作用。II類是β受體阻滯劑，其副作用為嚴重低血壓，并且也有延長Q-T間期的作用。 III類是選擇性延長心肌細胞動作電位時程（APD)和有效不應(yīng)期（ERP)的藥物，選擇性阻滯 心肌鉀離子通道的藥物，具有和I類藥物相似的副作用。IV類是鈣通道阻滯劑。I IIIV類 藥物均有降低傳到速度甚至引起傳到阻滯的作用，這些作用可增加折返激動的可能性，而 誘發(fā)心律失常。III類藥物對自律性無明顯影響。
[0008] 2、虎杖
[0009] 虎杖，產(chǎn)于東亞地區(qū)，分布在日本北海道西部以南的地區(qū)、朝鮮半島、中國臺灣及 中國的江蘇、江西、山東、四川等地。味微苦，性微寒，含虎杖苷，黃酮等。本發(fā)明中所使用之 虎杖苷可以以常規(guī)方法提取，例如公開號為CN1546503A(公開日2004年11月17日）的專 利中所披露的提取方法。本發(fā)明中所使用的虎杖苷水溶液以常規(guī)方法配制，例如公開號為 CN1709269A(公開日2005年12月21日）的專利中披露的方法。配制的濃度為6-150mg/ ml,優(yōu)選濃度為20-100mg/ml，最優(yōu)選濃度為40mg/ml。
[0010] 近年來人們發(fā)現(xiàn)虎杖具有良好的臨床應(yīng)用前景，已逐漸成為新的研究熱點。在祖 國的傳統(tǒng)醫(yī)藥治療中，中藥由于取自于天然植物，毒副作用少，往往具有多個作用靶點，而 且在機體自穩(wěn)調(diào)控中具有"高者抑之，下者舉之；有馀者損之，不足者補之"之奧妙。
[0011] 虎杖苷是虎杖中提取的一種單體，它是白藜蘆醇與葡萄糖結(jié)合的產(chǎn)物，它們均屬 于虎杖成分中的芪類化合物，即羥基二苯乙烯類化合物?；⒄溶赵谛难芊矫娴乃幚硌芯?進展包括：
[0012] 1)虎杖苷心肌細胞保護作用?；⒄溶毡话l(fā)現(xiàn)可明顯減輕小鼠心肌組織病毒感染損 害（宋軍華，濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報2008, 31:95-98)。國內(nèi)學(xué)者報道虎杖苷具有抗氧化、抗炎等 類似白藜蘆醇的功能，以及改善失血性休克引起的心功能和微循環(huán)障礙的作用（河北醫(yī)藥 2010, 32:1492-1493 ;ClinHemorheolMicrocirc. 2003, 29:211-217)。目前，虎杖苷注射液在 國內(nèi)目前處于IIb期臨床人體研究階段，IIb期臨床人體研究進展順利。國內(nèi)現(xiàn)在通行的 常用劑量為50-40mg/kg。
[0013] 2)虎杖苷抗動脈粥樣硬化。實驗表明，虎杖苷可以顯著降低家兔動脈粥樣 硬化模型的血脂，并且可以緩解主動脈和冠狀動脈粥樣硬化病程。（中國中醫(yī)急癥， 2005, 14:564-567)虎杖苷亦能降低頸動脈不穩(wěn)定板塊的軟斑數(shù)量，可能有抗動脈硬化的作 用（北京中醫(yī)藥，2009, 28172-175)。
[0014] 3)虎杖苷抗血栓形成?；⒄溶赵隗w內(nèi)外都有抑制花生四烯酸、二磷酸腺苷和腎上 腺素誘導(dǎo)的兔血小板聚集作用，且抑制強度隨著虎杖苷濃度的降低而減弱（單春文，中國 藥理學(xué)報，1990, 11(6) : 527)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0015] 目前來說，所有抗心律失常藥物均有致心律失常作用，其發(fā)生率為6%~36%，其 機制與心電沖動形成或傳導(dǎo)障礙有關(guān)。除心肌梗死損傷后易出現(xiàn)長Q-T間期綜合癥，在各 種致長Q-T間期綜合癥的藥物中，抗心律失常藥物卻最常出現(xiàn)該副作用。本發(fā)明的目的，是 應(yīng)用虎杖苷治療心肌梗死性心律失常，可顯著降低延長的Q-T間期，減少心律失常的發(fā)生。 [0016] 本發(fā)明包括：
[0017] 虎杖苷在制備抗心律失常產(chǎn)品中的用途。所述心律失常是心肌肥大和/或心室肥 厚所致，所述心肌肥大和/或心室肥厚所致心律失常由高血壓或心肌梗死引起。
[0018] 虎杖苷在制備抑制長Q-T間期綜合癥產(chǎn)品中的用途。所述長Q-T間期由心肌梗死 引起。
[0019] 虎杖苷在制備用于增加 Ito通道蛋白表達產(chǎn)品中的用途。所述Ito通道蛋白為 Κν4· 2、Κν4· 3和Kchip中的一種或多種。
[0020] 虎杖苷在低劑量（20mg/kg)條件下具有抑制心肌梗死引起心律失常作用。
[0021] 上述產(chǎn)品包括藥物、試劑或食品中的一種，其使用方式包括單獨使用或與其它化 學(xué)物質(zhì)聯(lián)合使用。
[0022] 發(fā)明的技術(shù)效果如下：
[0023] 1、在眾多治療心律失常，特別是心肌肥大和/或心室肥厚所致心律失常，藥物中 選取一種高效、價格低廉、并且安全的中藥，該中藥（虎杖苷）可以上調(diào)瞬時外向鉀電流，通 過縮短動作電位時程（APD)，來發(fā)揮抗心律失常的作用。
[0024] 2、提供一種抑制長Q-T間期綜合癥的高效、價格低廉、并且安全的中藥，該中藥 (虎杖苷）通過對心肌細胞膜鉀離子通道的調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)心肌細胞AP的復(fù)極過程，縮短APD， 抑制長QT間期綜合癥的發(fā)生。
[0025] 3、提供一種顯著增加 Ito通道的蛋白表達的高效、價格低廉、并且安全的中藥，該 中藥（虎杖苷）對心肌細胞膜瞬間外向鉀電流（Ito)電流有抑制作用，顯著增加 Ito通道 的蛋白表達。
[0026] 4、提供了一種使用的低劑量濃度，20mg/kg，在該濃度下具有抗心律失常作用。
【附圖說明】
[0027] 圖1為表示Ito亞基Kv4. 2和Kchip的蛋白表達的電泳圖。
【具體實施方式】
[0028] 1.材料和方法
[0029] I. 1 材料
[0030] 1)試劑本發(fā)明中所使用之虎杖苷由深圳市海王藥業(yè)公司提供，具體方法如下：
[0031] 虎杖根莖100g，適當(dāng)粉碎，以800ml乙醇滲濾提取，過濾，減壓濃縮 (50°C，0. 07-0.1 Mpa)至終體積50ml，加入100mL水，并以200ml乙酸乙醇萃取3次，萃取 液減壓濃縮（50°C，0. 07-0.1 Mpa)至150ml，聚酰胺粉攪拌，減壓揮干溶劑，作為上樣樣品備 用。
[0032] 上樣樣品采用干法上樣于備用聚酰胺柱上（柱體約600ml)，依次以1000 ml水、 3000ml30%乙醇水為流動相進行層析洗脫，流速600ml/hr，收集30%乙醇水洗脫流出液， 并將其中含虎杖苷流份合并，減壓濃縮至100ml (60°C，0. 07-0.1 Mpa)，抽濾，得出產(chǎn)物2g， 其中虎杖苷含量為84%。
[0033] 初產(chǎn)物以95-100 %乙醇溶解，過濾，濾液加水至含醇終濃度30%，加入1% (ml/ ml)藥用活性碳粉煮沸3分鐘，趁熱過濾，濾液減壓濃縮至50ml，4°C下靜置0. 5小時析晶， 過濾，所得晶體真