用于治療cmt及相關(guān)病癥的新組合物的制作方法
【專利說明】用于治療GMT及相關(guān)病癥的新組合物
[0001] 本申請(qǐng)為國(guó)際申請(qǐng)日2010年5月28日、國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/EP2010/057438于2011 年12月2日進(jìn)入中國(guó)國(guó)家階段、申請(qǐng)?zhí)?01080024444. 9、發(fā)明名稱"用于治療CMT及相關(guān) 病癥的新組合物"的分案申請(qǐng)。
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明涉及用于治療沙-馬-圖病（Charcot-Marie-Tooth disease)和相關(guān)病癥 的組合物和方法。
【背景技術(shù)】
[0003] 沙-馬-圖?。?CMT"）是一種遺傳性外周多發(fā)性孤兒神經(jīng)病。約2500個(gè)體中 有1人患有這種疾病，它是外周神經(jīng)系統(tǒng)最常見的遺傳性病癥。它的發(fā)作典型地出現(xiàn)在生 命的第一或第二個(gè)十年中，盡管在嬰兒期也可以檢測(cè)到它。疾病過程是慢性的，具有逐漸的 神經(jīng)肌肉變性。在伴隨有神經(jīng)痛和極度肌無力的病例中，疾病可造成殘廢。CMT是研宄得最 深入的遺傳病之一，在法國(guó)使用了大約30, 000個(gè)病例。盡管大多數(shù)CMT患者帶有含有髓磷 脂基因 PMP22的17號(hào)染色體片段的重復(fù)（CMT1A形式），但有兩打以上的基因與不同形式的 CMT相關(guān)。因此，盡管起源是單基因的，但由于可能的調(diào)芐基因，該疾病表現(xiàn)出臨床異質(zhì)性。 CMT患者中突變的基因，簇集在緊密關(guān)聯(lián)的影響施旺細(xì)胞或神經(jīng)元的分化、或在外周神經(jīng)中 改變這些細(xì)胞的相互作用的分子途徑周圍。
[0004] 挖掘公用數(shù)據(jù)，描述CMTlA疾病的分子機(jī)制和病理表現(xiàn)，允許我們對(duì)幾個(gè)功能性 細(xì)胞組件--PMP22基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控、PMP22蛋白的折疊/降解、施旺細(xì)胞的增殖和凋亡、神 經(jīng)元死亡、細(xì)胞外基質(zhì)的沉積和重塑，免疫應(yīng)答一一作為CMT相關(guān)治療性干預(yù)的潛在合理的 靶，按優(yōu)先順序進(jìn)行排列。這些失調(diào)控的功能性組件對(duì)沙-馬-圖病的病理表現(xiàn)的發(fā)生和 發(fā)展的組合影響，為組合CMT療法的潛在效能提供了證明。
[0005] 國(guó)際專利申請(qǐng)n° PCT/EP2008/066457描述了通過建立病理的動(dòng)態(tài)模型并靶向與 CMT疾病的調(diào)控相關(guān)的功能性細(xì)胞途徑，來鑒定用于沙-馬-圖病治療的藥物候選物的方 法。
[0006] 國(guó)際專利申請(qǐng)n° PCT/EP2008/066468描述了用于治療沙-馬-圖病的組合物，其 包含選自多種藥物候選物的至少兩種化合物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是提供用于治療CMT和相關(guān)病癥的新的治療藥劑組合。因此，本發(fā) 明涉及使用特定藥物組合治療CMT和相關(guān)病癥、特別是中毒性神經(jīng)病和肌萎縮性側(cè)索硬化 癥的組合物和方法。
[0008] 更具體來說，本發(fā)明的一個(gè)目的涉及包含巴氯芬、山梨糖醇以及選自毛果蕓香堿、 甲巰咪唑、米非司酮、納曲酮、雷帕霉素、氟比洛芬和酮洛芬的化合物、他們的鹽或前體藥 物，用于同時(shí)、分別或相繼給藥于哺乳動(dòng)物對(duì)象。
[0009] 本發(fā)明的具體目的涉及包含巴氯芬、山梨糖醇和納曲酮的組合物，其用于同時(shí)、分 別或相繼給藥于哺乳動(dòng)物對(duì)象。
[0010] 本發(fā)明的另一個(gè)目的涉及包含（a)雷帕霉素、（b)米非司酮或納曲酮以及（C) PMP22調(diào)節(jié)劑的組合物，其用于同時(shí)、分別或相繼給藥于哺乳動(dòng)物對(duì)象。
[0011] 在具體實(shí)施方案中，PMP22調(diào)節(jié)劑選自乙酰唑胺、沙丁胺醇、阿米洛利、氨魯米特、 胺碘酮、氨曲南、巴氯芬、巴柳氮、甜菜堿、氨基甲酰甲基膽堿、比卡魯胺、溴隱亭、布美他尼、 丁螺環(huán)酮、卡巴膽堿、卡馬西平、卡比馬唑、西維美林、環(huán)丙沙星、可樂定、姜黃素、環(huán)孢菌素 A、地西泮、雙氯芬酸、地諾前列酮、雙硫侖、D-山梨糖醇、度他雄胺、雌二醇、依西美坦、非爾 氨酯、非諾貝特、非那雄胺、氟馬西尼、氟硝西泮、氟比洛芬、呋塞米、加巴噴丁、加蘭他敏、氟 哌啶醇、布洛芬、異丙腎上腺素、酮康唑、酮洛芬、L-肉毒堿、碘塞羅寧（T3)、鋰、氯沙坦、洛 沙平、美洛昔康、異丙喘寧、間羥胺、二甲雙胍、醋甲膽堿、甲巰咪挫、甲基麥角新堿、美托洛 爾、美替拉酮、咪康唑、米非司酮、納多洛爾、納洛酮、納曲酮；諾氟沙星、噴他佐辛、苯氧芐 胺、丁酸苯酯、毛果蕓香堿、匹格列酮、哌唑嗪、丙基硫尿嘧啶、雷洛昔芬、雷帕霉素、利福平、 辛伐他汀、螺內(nèi)酯、他克莫司、他莫昔芬、海藻糖、曲洛司坦、丙戊酸及其鹽或前體藥物。
[0012] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是包含雷帕霉素和米非司酮的組合物，其用于同時(shí)、分別或 相繼給藥于哺乳動(dòng)物對(duì)象。
[0013] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是如上所公開的組合物，其還包含一種或幾種可藥用賦形劑 或載體（即藥物組合物）。
[0014] 本發(fā)明的另一個(gè)目的涉及如上所公開的組合物，其用于治療CMT或相關(guān)病癥。
[0015] 本發(fā)明的另一個(gè)目的涉及使用如上公開的化合物的組合，用于制造治療CMT或相 關(guān)病癥的藥物。
[0016] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是用于治療CMT或相關(guān)病癥的方法，所述方法包含向需要的 對(duì)象給藥有效量的如上定義的組合物。
[0017] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是制備藥物組合物的方法，所述方法包含將上述化合物混合 在適合的賦形劑或載體中。
[0018] 本發(fā)明的另一個(gè)具體目的是在對(duì)象中治療CMTla的方法，所述方法包含向需要的 對(duì)象給藥有效量的如上公開的化合物或化合物組合。
[0019] 本發(fā)明的另一個(gè)具體目的是在對(duì)象中治療中毒性神經(jīng)病的方法，所述方法包含向 需要的對(duì)象給藥有效量的如上公開的化合物或化合物組合。
[0020] 本發(fā)明的另一個(gè)具體目的是在對(duì)象中治療中ALS的方法，所述方法包含向需要的 對(duì)象給藥有效量的如上公開的化合物或化合物組合。
[0021] 本文中公開的各種應(yīng)用或治療方法中的任一項(xiàng)，還可以包括將患者診斷為患有 CMT或相關(guān)病癥特別是CMT1A，或?qū)€(gè)體鑒定為具有發(fā)生CMT或相關(guān)病癥特別是CMTlA的風(fēng) 險(xiǎn)的任選步驟。
[0022] 就此而言，本發(fā)明的另一個(gè)目的是治療CMT、特別是CMTla的方法，所述方法包含 (1)評(píng)估對(duì)象是否患有CMT、特別是CMTla，以及（2)用有效量的上述化合物的組合治療患有 CMT、特別是CMTla的對(duì)象。確定對(duì)象是否患有CMT、特別是CMTla，可以通過本技術(shù)領(lǐng)域中 本身已知的各種測(cè)試?yán)鏒NA測(cè)定法來進(jìn)行。
[0023] 本發(fā)明可用于在任何哺乳動(dòng)物對(duì)象、特別是人類對(duì)象中治療CMT或相關(guān)病癥，更 優(yōu)選為CMTla。
【附圖說明】
[0024] 圖1.藥物組合的協(xié)同效應(yīng)，劑量I :A)混合物7(劑量1，第10日），B)d_山梨糖醇 (SRB，500 μ M，第 10 日），C) (R/S)-巴氯芬（BCL，5 μ M，第 10 日）和 D)納曲酮（NTX，5 μ M， 第10日）對(duì)MBP表達(dá)的影響。* :ρ〈0· 05 :與對(duì)照（=抗環(huán)血酸）顯著差異（單向ANOVA然 后進(jìn)行Fisher事后檢驗(yàn)）；ns :無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異
[0025] 圖2.藥物組合的協(xié)同效應(yīng)，劑量6 :A)混合物7 (劑量6,第10日），B) SRB (160 μ M， 第 10 日），C)BCL(1.6nM，第 10 日）和 D)NTX(1.6nM，第 10 日）對(duì)MBP 表達(dá)的影響。* : ρ〈0· 05 :與對(duì)照（=抗環(huán)血酸）顯著差異（單向ANOVA然后進(jìn)行Fisher事后檢驗(yàn)）；ns :無 統(tǒng)計(jì)學(xué)差異
[0026] 圖3.在PMP22TG共培養(yǎng)物中與抗環(huán)血酸共溫育的A)第10日和B)第11日，混合 物7 (7種劑量）對(duì)MBP表達(dá)的正效應(yīng)，以對(duì)照（=抗環(huán)血酸）的百分率表示。單向Anova 然后進(jìn)行Fisher事后檢驗(yàn)。
[0027] 圖4.使用桿試驗(yàn)測(cè)量的用混合物1處理3和6周對(duì)雄性大鼠的影響。等待時(shí)間 用試驗(yàn)的前兩次測(cè)定的平均值度量（白色條表示用安慰劑處理的對(duì)照大鼠；黑色條表示用 安慰劑處理的轉(zhuǎn)基因大鼠；灰色條表示用混合物1處理的轉(zhuǎn)基因大鼠。**P〈〇. 01。統(tǒng)計(jì)使 用Student雙向檢驗(yàn)來實(shí)現(xiàn)）。
[0028] 圖5.用混合物1組合物處理3和6周（分別為左圖和右圖）對(duì)雄性大鼠步態(tài)的 正效應(yīng)（白色條表示流暢步態(tài)；灰色條表示不流暢步態(tài)；黑色條表示大鼠具有嚴(yán)重的行走 失能。統(tǒng)計(jì)使用Student雙向檢驗(yàn)來實(shí)現(xiàn)）。
[0029] 圖6.使用斜面試驗(yàn)（25° )，大鼠中混合物1組合物對(duì)雄性大鼠的正效應(yīng)。在處 理3、6、9和12周后對(duì)大鼠進(jìn)行檢查（白色條表示用安慰劑處理的對(duì)照大鼠；黑色條表示用 安慰劑處理的轉(zhuǎn)基因大鼠；灰色條表示用混合物1處理的轉(zhuǎn)基因大鼠。*P〈〇. 05。統(tǒng)計(jì)使用 Student雙向檢驗(yàn)來實(shí)現(xiàn)）。
[0030] 圖7.使用斜面試驗(yàn)（25° )，在大鼠中用混合物2組合物處理3周后對(duì)雌性大鼠 的正效應(yīng)（白色條表示用安慰劑處理的對(duì)照大鼠；黑色條表示用安慰劑處理的轉(zhuǎn)基因大 鼠；灰色條表示用混合物2處理的轉(zhuǎn)基因大鼠。**p〈0. 01。統(tǒng)計(jì)使用Student雙向檢驗(yàn)來 實(shí)現(xiàn)）。
[0031] 圖8.在奧沙利鉑誘導(dǎo)的神經(jīng)病后，混合物1對(duì)雄性大鼠的保護(hù)效應(yīng)（白色條表示 用安慰劑處理的野生型大鼠；黑色條表示用參比產(chǎn)品加巴噴丁處理的野生型大鼠；灰色條 表示用混合物1處理的野生型大鼠。*P〈〇. 05 ;#p〈0. 01。統(tǒng)計(jì)使用Student雙向檢驗(yàn)來實(shí) 現(xiàn)）。
[0032] 圖9.在用混合物7-劑量3處理9周后觀察到的在處理的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中與PMP22 轉(zhuǎn)基因大鼠相比pmp22RNA表達(dá)的顯著降低（MPZ作為參比基因，Sereda等，1996) (p = 0. 0015)。轉(zhuǎn)基因的整合和pmp22基因的過表達(dá)也已被證實(shí)；轉(zhuǎn)基因 PMP