專利名稱：治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的含雙氫青蒿素的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的藥物，特別是用于治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的含有雙氫青蒿素的藥物組合物。
紅斑狼瘡和多形性日光疹等均為光敏性疾病，而紅斑狼瘡又屬免疫性疾病，嚴(yán)重危害人體健康，特別是系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)址附Y(jié)締組織、血管、內(nèi)皮膚等多種器官并伴有免疫學(xué)異常的全身性疾病?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為自身免疫性疾病是由機體免疫功能紊亂，導(dǎo)致B細(xì)胞功能亢進(jìn)而產(chǎn)生大量自體抗體，引起免疫復(fù)合物在組織，特別是腎小球內(nèi)基底膜內(nèi)沉著(狼瘡性腎常是致死的原因)導(dǎo)致III型變態(tài)反應(yīng)。
近年來紅斑狼瘡發(fā)病率有不斷上升的趨勢，據(jù)美國Siegel和Fessel對紐約和舊金山人群調(diào)查，患病率分別為13.4/10和50.8/10萬。國內(nèi)上海紡織系統(tǒng)人群調(diào)查患病率為70.4/10萬(女性則為113.3/10萬)故有關(guān)本病的流行病學(xué)及治療學(xué)研究已日益受到國內(nèi)外重視。對于該病的治療，西醫(yī)多用大劑量皮質(zhì)類固醇激素以及免疫抑制劑治療，對部分患者可控制病情，但長期用藥則引起嚴(yán)重的毒副作用和并發(fā)癥，甚至成為本病致死的主要原因。中醫(yī)采用辨證施治的方針，近年來開發(fā)了一些治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的藥物。例如中國專利申請91103109公開了一種治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的藥物組合物，其中含有34種中藥；中國專利申請94103378公開了一種治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的藥物組合物，其中含有十多種中藥。上述這些中藥組合物一般都是處方藥，使用時一般都需醫(yī)生根據(jù)患者的實際情況對藥物組合物的成分進(jìn)行取舍。盡管也有中成藥，但因為其成分多，制備復(fù)雜，因此在實際使用過程中還不是非常方便。雙氫青蒿素是青蒿素的還原化合物，其結(jié)構(gòu)式如下
我國自七十年代開始，對青蒿素進(jìn)行了廣泛深入的研究，開發(fā)出了青蒿素及其衍生物是一類有效的抗瘧藥物組合物。近年來，隨著對青蒿素及其衍生物研究的深入，不斷發(fā)現(xiàn)了其在新領(lǐng)域中的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的是提供一種高效、安全且無毒副作用的治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的藥物組合物。
本發(fā)明是基于這樣的事實而完成的本發(fā)明人以其發(fā)明的雙氫青蒿素致力于抗瘧研究，結(jié)果證明雙氫青蒿素在高效、低毒、制備方便等方面均優(yōu)于其它青蒿素類衍生物，同時又在免疫研究領(lǐng)域取得新發(fā)現(xiàn)，即在發(fā)現(xiàn)雙氫青蒿素具有顯著免疫抑制并對細(xì)胞免疫及體液免疫具有雙向調(diào)節(jié)作用的基礎(chǔ)上，經(jīng)藥效學(xué)和臨床研究證明雙氫青蒿素對紅斑狼瘡和光敏性疾病具有肯定的療效，且無明顯的毒副作用。
本發(fā)明提供了一種用于治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的含有雙氫青蒿素的藥物組合物，該組合物含有治療有效劑量的雙氫青蒿素。
本發(fā)明的目的是提供一種用于治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的含有雙氫青蒿素的藥物組合物，該組合物含有雙氫青蒿素1-10重量％。
本發(fā)明的藥物組合物適用于所有紅斑狼瘡(系統(tǒng)性紅斑狼瘡和盤狀紅斑狼瘡)和光敏性疾病(多形性日光疹等)。
本發(fā)明的藥物組合物可以是任何常用的藥劑形式，可以為固體制劑，例如片劑、膠囊、栓劑、粉劑、顆粒劑、透皮軟膏、霜劑等，也可以為液體制劑，例如口服液、噴霧劑、注射液等。本發(fā)明的藥物組合物的制備方式是本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所公知的。
按照本發(fā)明的藥物組合物，優(yōu)選是將其制成片劑或膠囊，每一片片劑或每一粒膠囊含有20-80mg的雙氫青蒿素。
本發(fā)明的藥物組合物一般為口服給藥，也可以經(jīng)其他途徑給藥，例如治療光敏性皮膚病可以使用外用制劑。用量一般為1-5mg/kg體重/天，成年患者的用量優(yōu)選為每人每天60-80mg。
本發(fā)明的藥物組合物可以單獨使用。在治療癥狀較重的系統(tǒng)性紅斑狼瘡時，也可以與現(xiàn)有的治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的其他藥物，例如常用的激素類藥物組合使用。
本發(fā)明使用的雙氫青蒿素的制備方法是已知的。有關(guān)其制備方法已經(jīng)見諸于文獻(xiàn)報道。
以下通過實驗例對本發(fā)明進(jìn)行更進(jìn)一步的說明。但應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的實驗例只是用于說明而不是限制本發(fā)明。藥效學(xué)實驗本發(fā)明的藥物組合物對紅斑狼瘡小鼠(BXSB)免疫功能的影響材料與方法(一)動物引自美國Jackson實驗室的BXSB紅斑狼瘡小鼠。(二)藥品1、本發(fā)明的含有雙氫青蒿素的藥物組合物。
2、商購強的松。(三)主要試劑和設(shè)備1、十二烷基硫酸鈉2、CBBG2503、標(biāo)準(zhǔn)蛋白試劑4、OKT4OKT8單克隆體αL3T4αLYT2
5、FITC-抗鼠Ig抗體6、小鼠淋巴細(xì)胞液7、紫外分光光度儀8、熒光顯微鏡9、離心機(四)用藥方法1、給藥途徑灌胃，每天一次2、藥量(1)本發(fā)明的藥物組合物25mg/kg/d(2)強的松6.3mg/kg/d連續(xù)給藥15天，30天，45天。(五)實驗方法選擇30只體重為22-25g的10-11周齡BXSB雄性小鼠，共分三組對照組(10只)，本發(fā)明的藥物組合物組(10只)，強的松組(10只)。
1、尿蛋白的測定壓迫膀胱法取鼠尿，在用藥前取尿，然后分別在用藥后15天，30天，45天取尿。
Marcart法測定將尿液100ml加4ml含十二烷基硫酸鈉的CBBG250混均室溫20分鐘，以標(biāo)準(zhǔn)蛋白液為對照，在紫外光分光光度儀600nm光吸收值檢測。
2、脾重量改變在BXSB小鼠用藥后45天，斷頸殺死小鼠，取脾稱重。
3、脾T淋巴細(xì)胞亞群分類(1)取小鼠脾研磨、過濾；(2)淋巴細(xì)胞分層液，去除紅細(xì)胞，保留單一核細(xì)胞；(3)用大量的Hank’s液洗滌單一核細(xì)胞；
(4)細(xì)胞計數(shù)；(5)同含小牛血清的培養(yǎng)液將細(xì)胞配成1×107懸液；(6)將細(xì)胞懸液置于小離心管中；(7)5000rpm離心，去上清；(8)分別加單克隆抗體(αL3T4αLYT2)4℃，30’(9)離心，加熒光洗液洗離2次；(10)加熒光抗體，4℃，30’；(11)熒光洗液洗離兩次；(12)加熒光保存液保存在4℃；(13)熒光顯微鏡下觀察計數(shù)。
4、B細(xì)胞檢測(1)取脾研磨，過濾；(2)淋巴細(xì)胞分層液，分離單一核細(xì)胞；(3)用0.01MPB(PH7.4)洗離細(xì)胞2次；(4)用含有50％小牛血清的0.01MPAS配成2-3×106細(xì)胞懸液；(5)標(biāo)記細(xì)胞用FITC一抗小鼠抗體與細(xì)胞懸液中，4℃，靜置30分鐘；(6)細(xì)胞液0.01MPBS(PH7.4)含5％小牛血清，37℃(預(yù)溫)，洗離兩次；(7)熒光顯微鏡下觀察計數(shù)；結(jié)果1、BXBB小鼠用藥前后與未用藥組尿蛋白檢測結(jié)果見下表1
表1本發(fā)明的藥物組合物對小鼠尿蛋白(OD)的影響
結(jié)果表明，在使用本發(fā)明的藥物組合物后，受試小鼠的尿蛋白下降，使用強的松后，小鼠的尿蛋白下降更多，但毒副作用大。
2、脾重量表2本發(fā)明的藥物組合物對小鼠脾重量的影響
3、T細(xì)胞亞群和B細(xì)胞表3本發(fā)明的藥物組合物對T細(xì)胞亞群和B細(xì)胞的影響
試驗結(jié)果表明，本發(fā)明的含有雙氫青蒿素的藥物組合物和強的松有降低BXSB小鼠尿蛋白的作用，并能減輕BXSB小鼠的脾臟重量，前者作用略低于后者。與對照組的BXSB小鼠中T細(xì)胞亞群分類和B細(xì)胞數(shù)量顯示青蒿素具有提高細(xì)胞各亞群的數(shù)量，同時降低B細(xì)胞數(shù)量。而強的松不僅降低B細(xì)胞數(shù)量而且也阻低T細(xì)胞各亞群的數(shù)量。提示青蒿素在降低B細(xì)胞分泌Sig的情況下，減少免疫復(fù)合物沉積引起的自身免疫病，還可能具有提高T細(xì)胞的免疫病功能，即有免疫雙向調(diào)節(jié)作用。強的松雖然降低了B細(xì)胞數(shù)量，但也抑制了T細(xì)胞各亞群數(shù)量，這說明強的松治療BXSB小鼠是一種完全一致免疫系統(tǒng)，因此長期服用可降低機體的免疫功能，兩者相比，在治療BXSB小鼠時選用本發(fā)明的含有雙氫青蒿素的藥物組合物更為適宜。毒性實驗急性毒性實驗(小鼠)LD50834.5mg/kg亞急性毒性實驗(狗)按11、33、99mg/kg/天三個劑量組給藥一個月，經(jīng)臨床行為觀察，多項血液生化指標(biāo)檢查及主要臟器病理學(xué)檢查，結(jié)果表明除大中劑量組體重比給藥前略有下降外，其他各項均未見明顯異常。長期毒性實驗(大鼠)按280、93、31mg/kg/天三個劑量組給藥24周，經(jīng)臨床行為觀察，血液學(xué)檢查，血清生化學(xué)檢查，主要臟器檢查，病理學(xué)檢查，結(jié)果表明除大劑量(相當(dāng)人用量175倍)組腎功能(肌酐)有明顯的改變外，其他各項均未見明顯異常。臨床實驗用本發(fā)明的含有雙氫青蒿素的藥物組合物治療紅斑狼瘡患者100例，顯效率44％，總有效率94％。臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)及臨床療效評定標(biāo)準(zhǔn)按1994年衛(wèi)生部頒標(biāo)準(zhǔn)。
1、顯效皮損完全消退(可遺留色素沉著)，局部病理檢查真皮炎癥消退，無基底細(xì)胞液化。
2、有效皮損消退50％以上，局部病理檢查改善。
3、無效治療三個療程，組織病理檢查無改善或加重。
臨床試驗結(jié)果表明，本發(fā)明的藥物組合物對于治療各種紅斑狼瘡和光敏性疾病均有非常明顯的療效。本發(fā)明的藥物組合物尤其對各種光敏性紅斑皮損消退效果明顯，對關(guān)節(jié)痛等全身癥狀以及其他生化學(xué)和病理學(xué)檢查項目也有程度不等的改善。且此藥安全范圍大，臨床未見明顯毒副作用。
以上對本發(fā)明進(jìn)行了說明。但應(yīng)該理解的是，對于本發(fā)明的普通技術(shù)人員來說，可以在不偏離本發(fā)明的精神實質(zhì)的前提下，對本發(fā)明進(jìn)行修正和改進(jìn)，這些修正和改進(jìn)都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.用于治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物含有治療有效劑量的雙氫青蒿素。
2.如權(quán)利1要求的藥物組合物，其特征在于該組合物含有1-10重量％的雙氫青蒿素。
3.如權(quán)利1要求的藥物組合物，其特征在于該組合物為固體制劑。
4.如權(quán)利1要求的藥物組合物，其特征在于該組合物為液體制劑。
5.如權(quán)利1要求的藥物組合物，其特征在于該組合物為外用制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及含有雙氫青蒿素的藥物組合物,經(jīng)藥效學(xué)、毒理學(xué)及臨床研究,表明本發(fā)明的藥物組合物是治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的有效藥物,該藥物組合物可以制成各種常用的劑型用于臨床,具有高效、安全、無毒副作用的特點。
文檔編號A61K31/357GK1266683SQ9910334
公開日2000年9月20日 申請日期1999年3月16日 優(yōu)先權(quán)日1999年3月16日
發(fā)明者屠呦呦, 楊嵐 申請人:屠呦呦, 楊嵐