專利名稱：用作基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的3－巰基乙酰氨基－1.5－二取代的－2－氧代－氮雜環(huán)庚 ...的制作方法
背景技術(shù)：
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是一類可裂解生物分子例如膠原蛋白、粘蛋白和明膠的含鋅肽鏈內(nèi)切酶，其表達受促炎細胞因子和/或生長因子的正向調(diào)節(jié)。MMP以無活性酶原形式分泌，當(dāng)活化后，受內(nèi)原性抑制劑例如金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)和α2-巨球蛋白控制。K.T.等人，藥物化學(xué)雜志(J.Med.Chem.)36,4293-4301(1993)；Beckett,R.P.等人，DDT1,16-26(1996)。與所述酶有關(guān)的疾病的特點表現(xiàn)為在活性酶和內(nèi)原性抑制劑之間的化學(xué)計量的不平衡，導(dǎo)致組織破裂過度，并通常導(dǎo)致退化。McCachren,S.S.，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Arthritis Rheum.)34,1085-1093(1991)。
在幾份報告中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了不同類基質(zhì)金屬蛋白酶，它們的關(guān)系并對它們各自的特性進行了分類。Emonard,H.等人，細胞分子生物學(xué)(Cell Molec.Biol.)36,131-153(1990)；Birkedal-Hansen,H.，口腔病理學(xué)(J.Oral Pathol.)17,445-451(1988)；Matrisian,L.M.,Trends Genet.6,121-125(1990)；Murphy,G.J.P.等人，F(xiàn)EBS Lett.289,4-7(1991)；Matrisian,L.M.，生物分析(Bioessays)14,455-463(1992)?，F(xiàn)在已公開了三組分泌的MMP作為底物的具有三鏈螺旋間隙膠原蛋白的膠原酶，作為變性的膠原蛋白和Ⅳ型膠原蛋白蛋白酶的明膠酶和原本被認為是粘蛋白酶而現(xiàn)如今被認為是具有較寬蛋白分解譜的溶基質(zhì)素。具體的膠原酶的實例包括成纖維細胞膠原酶(MMP-1)、嗜中性細胞膠原酶(MMP-8)和膠原酶3(MMP-13)。明膠酶的實例包括72kDa明膠酶(明膠酶A；MMP-2)和92kDa明膠酶(明膠酶B；MMP-9)。溶基質(zhì)素的實例包括溶基質(zhì)素1(MMP-3)、溶基質(zhì)素2(MMP-10)和matrilysin(MMP-7)。與上述各組不完全相符的其他MMP包括金屬彈性蛋白酶(MMP-12)、膜類MMP(MT-MMP或MMP-14)和溶基質(zhì)素3(MMP-11)。Beckett,R.P.等人的上述文獻。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，MMP的表達和活性過度與許多疾病有關(guān)，例如癌癥；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；骨關(guān)節(jié)炎；慢性炎癥疾病例如肺氣腫；心血管疾病例如動脈粥樣硬化；角膜潰瘍；牙病例如牙齦炎和牙周疾病；以及神經(jīng)疾病例如多發(fā)性硬化。例如，在腺癌中，受侵害的近基胃細胞會表達72kDa Ⅳ型膠原酶，而未受侵害的細胞則不會。Schwartz,G.K.等人，癌癥(Cancer)73,22-27(1994)。用Ha-ras和v-myc腫瘤基因或單獨用Ha-ras轉(zhuǎn)化的大白鼠胚胎細胞在裸鼠中可被轉(zhuǎn)移并釋放92kDa明膠酶/膠原酶(MMP-9)。Bernhard,E.J.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.91,4293-4597(1994)。在122名患胃腸道癌和乳腺癌的患者中，其MMP-9血漿濃度明顯升高(p＜0.01)。Zucker,S.等人，癌癥研究(Cancer Res.)53,140-146(1993)。另外，腹膜內(nèi)施用batimastat，一種合成的MMP抑制劑，對于C57BL/6N小鼠通過靜脈注射B16-BL6鼠黑色瘤產(chǎn)生的肺集落的生長和轉(zhuǎn)移擴散及數(shù)量可產(chǎn)生顯著的抑制作用。Chirivi,R.G.S.等人，國際癌癥雜志(Int.J.Cancer)58,460-464(1994)。TIMP-2,MMP-2內(nèi)原性組織抑制劑的過度表達可明顯減緩免疫缺陷鼠皮膚中黑色瘤的生長。Montgomery,A.M.P.等人，癌癥研究(Cancer Res.)54,5467-5473(1994)。
在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎病理學(xué)中，關(guān)節(jié)軟骨細胞外基質(zhì)加速性分解是關(guān)鍵因素?，F(xiàn)有證據(jù)表明，MMP的不適宜合成是關(guān)鍵所在。Beeley,N.R.A.等人，Curr.Opin.Ther.Patents,4(1),7-16(1994)?？煽康脑\斷方法的產(chǎn)生使得大量研究小組認識到，在關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)損傷中，溶基質(zhì)素是關(guān)鍵酶。Beeley,N.R.A.等人，Id.；Hasty,K.A.等人，Arthr.Rheum.33,388-397(1990)。還有研究表明，溶基質(zhì)素對于膠原酶原轉(zhuǎn)變成活性膠原酶是十分重要的。Murphy,G.等人，生物化學(xué)雜志(Biochem.J.)248,265-268(1987)。
另外，大量MMP可以水解膜結(jié)合的促炎細胞因子腫瘤壞死因子α(TNF-α)的前體。Gearing,A.J.H.等人，自然(Nature)370,555-557(1994)。這種裂解可產(chǎn)生成熟的可溶性TNF-α，而MMP抑制劑可阻斷體外和體內(nèi)TNF-α的產(chǎn)生。Gearing,A.J.H.等人，Id.；Mohler,K.M.等人，Nature 370,218-220(1994)；McGeehan,G.M.等人，Nature 370,558-561(1994)。這種藥理學(xué)作用可能是在動物模型中觀察到的此類化合物抗關(guān)節(jié)炎作用的貢獻所在。Beckett,R.P.等人的上述文獻。
觀察結(jié)果表明，溶基質(zhì)素可使調(diào)節(jié)例如彈性蛋白酶的酶活性的α1-蛋白酶抑制劑降解，而已知例如彈性蛋白酶的酶過量與慢性炎癥疾病有關(guān)，例如肺氣腫和慢性氣管炎。因此，對適當(dāng)MMP的抑制可對此類內(nèi)原性抑制劑產(chǎn)生潛在的抑制作用。Beeley,N.R.A.等人的上述文獻；Wahl,R.C.等人，藥物化學(xué)年報(Annual Reports inMedicinal Chemistry)25,177-184(1990)。
在心臟移植患者動脈粥樣硬化斑塊中，現(xiàn)已觀測到與溶基質(zhì)素相應(yīng)的較高濃度水平的mRNA。Henney,A.M.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.88,8154-8158(1991)。這表明在此類斑塊中，溶基質(zhì)素的作用在于促使包裹斑塊的結(jié)締組織基質(zhì)破裂，結(jié)果此破裂被認為是在冠狀動脈血栓形成中所看到的導(dǎo)致此種類型的血凝塊形成的一連串反應(yīng)的關(guān)鍵所在。因此，MMP抑制作用對于此類血栓形成是一種預(yù)防性手段。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，膠原酶、溶基質(zhì)素和明膠酶與角膜細胞外基質(zhì)的破壞有關(guān)。這被認為是大量潰瘍性角膜疾病，特別是發(fā)炎和化學(xué)損傷后的潰瘍性角膜疾病的發(fā)病率和視覺喪失的主要機理。Burns,F.R.等人，眼科學(xué)研究(Invest.Opthalmol.and Visual Sci.)32,1569-1575(1989)。潰瘍過程中，眼中存在的MMP既可由滲入的白細胞或成纖維細胞內(nèi)原性衍生，也可由微生物外原性衍生。
在由發(fā)炎牙齦分離出的成纖維細胞中對膠原酶和溶基質(zhì)素的活性已經(jīng)進行了鑒定，并且已觀察到所述酶的水平與牙齦炎的嚴(yán)重成度相關(guān)。Beeley,N.R.A.等人的上述文獻；Overall,C.M.等人，牙周研究雜志(J.Periodontal Res),22,81-88(1987)。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，腦脊髓液中明膠酶-B濃度過高與多發(fā)性硬化及其他神經(jīng)疾病的發(fā)病率有關(guān)。Beeley,N.R.A.等人的上述文獻；Miyazaki,K.等人的Nature 362,839-841(1993)。此酶可在此類疾病中神經(jīng)原脫髓鞘作用和血腦屏障損壞中起到關(guān)鍵性作用。
已經(jīng)開發(fā)出的現(xiàn)有的MMP抑制劑包括以底物為基礎(chǔ)設(shè)計開發(fā)的假-肽衍生物以及由化合物庫和天然產(chǎn)物中隨機篩選鑒定出的其他化合物。在以底物為基礎(chǔ)進行設(shè)計時，獲得有效酶抑制作用的關(guān)鍵是將與活性部位鋅(Ⅱ)離子形成螯合物的鋅結(jié)合基(ZBG)結(jié)合到裂解部位的左手側(cè)(LHS)或右手側(cè)(RHS)或者兩側(cè)序列的肽類似物中?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)了幾種不同的ZBG，即異羥肟酸酯、羧酸酯、氨基羧酸酯、巰基化合物(suphydryl)和磷酸衍生物。異羥肟酸類化合物，例如Batimastat，正在進行臨床試驗并且被證實是一些體外最具活性的化合物，但它們存在生物利用度的問題并且還可被降解成致癌物類似物，例如羥胺。
因此，需要提供其它基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，并需要控制基質(zhì)金屬蛋白酶的不平衡而不產(chǎn)生致癌副產(chǎn)物。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了新的下式化合物或其藥物上可接受的鹽、立體異構(gòu)體或水合物
其中R1是C1-C6烷基、W-(CH2)m-基團或Q-Z-(CH2)m-基團，其中W是苯二甲酰亞氨基；Z是化學(xué)鍵或是氧、NR6、C(O)NR6、NR6C(O)、NHC(O)NR6、OC(O)NR6、HNC(O)O或SO2NR6；Q是氫或Y-(CH2)n-基團，其中Y是氫、C6-C10芳基、C3-C9雜芳基、-C(O)OR6、-N(R6)2、嗎啉代、哌啶子基、吡咯烷子基或異氮雜茚基；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，或者-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar1是被選自鹵素、C1-C4烷基、-OR7、-N(R6)2、SO2N(R6)2或-NO2的取代基任意取代的苯基或萘基；R3是氫、C1-C6烷基、-CH2SCH2NHCOCH3、-(CH2)p-A基團、-(CH2)m-B基團或-CH2-D-R7基團，其中A是C6-C10芳基、C3-C9雜芳基或環(huán)己基；B是-N(R7)2、胍基、硝基胍基、-C(O)OR6或-C(O)NR6；和D是氧或硫；R4是氫或-(CH2)m-S(O)pX’(R6)2基團；R5是氫、C1-C6烷基或者R4和R5與它們所連接的氮原子一起形成哌啶子基、吡咯烷子基或異氮雜茚基；R6是氫或C1-C6烷基；R7是氫、C1-C4烷基或-(CH2)p-Ar2基團，其中Ar2是被選自鹵素、C1-C4烷基、-OR7、-N(R6)2、SO2N(R6)2或-NO2的取代基任意取代的苯基或萘基；R8是氫、-C(O)R7、-C(O)-(CH2)q-K基團或-S-G基團，其中K選自下列基團
和
G選自下列基團
和
R9和R10分別獨立地是C1-C4烷基或-(CH2)p-Ar2基團；R11是-CF3、C1-C10烷基或-(CH2)p-Ar2基團；R12是氫、C1-C6烷基、-CH2CH2S(O)pCH3或芳基烷基；R13是氫、羥基、氨基、C1-C6烷基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基、-CO2R17或-OC(O)R18，其中R17是氫、-CH2O-C(O)C(CH3)3、C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar2基團或二苯甲基而R18是氫、C1-C6烷基或苯基；R14是獨立地選自氫、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或鹵素的1或2個取代基；R15是氫、C1-C6烷基或-(CH2)p-Ar2基團；R16是氫或C1-C4烷基；V1是O、S或NH；V2是N或CH；V3是化學(xué)鍵或-C(O)-；V4是-(CH2)w’-、O、S、NR7或NC(O)R11；
氧基苯甲酸和磺酸例如甲磺酸和2-羥基乙磺酸。此類鹽可以以水合物或基本上無水形式中任何一種形式存在。
本文所用術(shù)語“C1-C4烷基”是指含1-4個碳原子的飽和直鏈或支鏈烴基并且包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基等。術(shù)語“C1-C6烷基”是指含1-6個碳原子的飽和直鏈或支鏈烴基并且包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基、異戊基、正己基等。術(shù)語“C1-C10烷基”指含1-10個碳原子的飽和直鏈或支鏈烴基并且包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基、異戊基、正己基、2,3-二甲基-2-丁基、庚基、2,2-二甲基-3-戊基、2-甲基-2-己基、辛基、4-甲基-3-庚基、壬基、癸基等。
術(shù)語“C1-C4烷氧基”是指含1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基等。
符號“-C(O)-”是指下式羰基
術(shù)語“C6-C10芳基”是指被選自F、Cl、C1-C4烷基、-OR7、-N(R6)2或-NO2的1-3個取代基任意取代的環(huán)狀芳族共軛碳原子集團，包括苯基、1-萘基、2-萘基、2-羥基苯基、3-羥基苯基、4-羥基苯基、2,3-二羥基苯基、2,4-二羥基苯基、3,4-二羥基苯基、2,3,4-三羥基苯基、4-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、3,4-二氯苯基、2,3,4-三氯苯基、4-溴苯基、3,4-二溴苯基、4-氟苯基、3,4-二氟苯基、3-甲苯基、4-甲苯基、4-乙基苯基、4-異丙基苯基、3-氨基苯基、4-氨基苯基、3,4-二氨基苯基、N-甲基-4-氨基苯基、2-硝基苯基、4-硝基苯基、3-溴-4-甲苯基等。
術(shù)語“C3-C9雜芳基”是指環(huán)狀或雙環(huán)的碳原子和1-3個氮、氧和硫原子共軛的芳族基團集合，例如吡啶基、2-喹喔啉基、喹啉基、噠嗪基、嘧啶基、吡唑基、pyrazyl、噻吩基、呋喃基、咪唑基、唑基、噻唑基等。
術(shù)語“PhtN”或“苯二甲酰亞氨基”是指下式苯二甲酰亞氨基功能基
術(shù)語“Boc”、“叔丁氧羰基”或“叔丁氧基羰基”是指下式叔丁氧羰基功能基
術(shù)語“CBz”或“芐酯基”是指下式芐酯基功能基
符號“C(O)NR6”、“NR6C(O)”、“NHC(O)NR6”、“OC(O)NR6”、“R6NC(O)O”或“SO2NR6”是指酰胺或修飾的酰胺鍵并且分別由下列分子式表示
術(shù)語“Ar1”、“Ar2”或“芳基”是指未被取代的或被選自F、C1、C1-C4烷基、-OR7、-N(R6)2、SO2N(R6)2或-NO2的1-3個取代基取代的苯基或萘基；特別是包括在所述術(shù)語“芳烷基”范圍內(nèi)的苯基、萘基、萘甲基、苯甲基或芐基、苯乙基、對甲氧基芐基、3,4-亞甲二氧基芐基、對氟芐基和對氯芐基。
如下所示，對于本發(fā)明，當(dāng)“Ar1”是苯基時，所述一個或多個取代基可以僅與所述苯環(huán)的3、4或5位相連。當(dāng)“Ar1”是萘基時，所述基團可以在2-位相連，并且所述一個或多個取代基可以僅與5、6、7或8位相連，如下式所示
對于本發(fā)明，當(dāng)“Ar2”是苯基時，所述一個或多個取代基可以僅與所述苯環(huán)的2、3、4、5或6位相連。當(dāng)“Ar2”是萘基時，可以理解的是，所述基團可以在1-位或2-位任何一個位置上相連，進一步可以理解的是，當(dāng)所述基團在1-位相連時，所述一個或多個取代基可以與2、3、4、5、6、7或8位任何一個位置相連，而當(dāng)所述基團在2-位相連時，所述一個或多個取代基可以與1、3、4、5、6、7或8位任何一個位置相連。
術(shù)語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。
術(shù)語“立體異構(gòu)體”是原子僅在空間定向上不同的單個分子的所有異構(gòu)體的總稱。它包括鏡像異構(gòu)體(對映體)、幾何(順式/反式)異構(gòu)體以及帶有多于一個手性中心的彼此不成鏡像的化合物異構(gòu)體(非對映體)。本申請中式(1)化合物之一的任何參考例均包括每一種特定的立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體混合物。所述特定的立體異構(gòu)體可通過立體特異性合成方法或者本領(lǐng)域公知的分離和回收方法制備，例如如Enantiomers,Racemates，和Resolutions,J.Jacques,A.Collet，和S.H.Wilen,Wiley(1981).所述的色譜法、在手性固定相上的色譜法、通過試劑形成加成鹽而進行的分級重結(jié)晶法。
所述新化合物的一個實施方案是其中X是CH和R8是氫的式(1)化合物。
在此實施方案的一類化合物中，R1是C1-C6烷基，優(yōu)選甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar是被F、Cl、C1-C4烷基或-OR7任意取代的苯基，或者是-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，其中(C3-C9)雜芳基是噻吩基、2-吡啶基或噻唑基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
在此實施方案的另一類化合物中，R1是W-(CH2)m-基團；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar1是被F、Cl、C1-C4烷基或-OR7任意取代的苯基，或者是-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，其中(C3-C9)雜芳基是噻吩基、2-吡啶基或噻唑基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
在此實施方案的另一類化合物中，R1是Q-Z-(CH2)m-基團；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar1是被F、Cl、C1-C4烷基或-OR7任意取代的苯基，或者是-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，其中(C3-C9)雜芳基是噻吩基、2-吡啶基或噻唑基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
此實施方案中的實例為下列表1和2中所示式Ⅱ和Ⅲ化合物
表1
表1(續(xù))
表1(續(xù))
表1(續(xù))
表1(續(xù))
表1(續(xù))
表2
表2(續(xù))
表2(續(xù))
表2(續(xù))
表2(續(xù))
表2(續(xù))
所述新化合物的另一個實施方案是其中X是N而R8是氫的式(1)化合物。
在此實施方案的一類化合物中，R1是C1-C6烷基，優(yōu)選甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar1是被F、Cl、C1-C4烷基或-OR7任意取代的苯基，或者是-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，其中(C3-C9)雜芳基是噻吩基、2-吡啶基或噻唑基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
在此實施方案的另一類化合物中，R1是W-(CH2)-基團；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar1是被F、Cl、C1-C4烷基或-OR7任意取代的苯基，或者是-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，其中(C3-C9)雜芳基是噻吩基、2-吡啶基或噻唑基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
在此實施方案的另一類化合物中，R1是Q-Z-(CH2)m-基團；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar是被F、Cl、C1-C4烷基或-OR7任意取代的苯基，或者是-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，其中(C3-C9)雜芳基是噻吩基、2-吡啶基或噻唑基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
此實施方案中的實例為下列表3中所示式Ⅳ化合物
表3
表3(續(xù))
表3(續(xù))
表3(續(xù))
所述新化合物的另一個實施方案是其中R8是R8’并且是-C(O)R7、-C(O)-(CH2)q-K基團或-S-G基團的式(1)化合物。
在此實施方案的一類化合物中，R1是C1-C6烷基，優(yōu)選甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar1是被F、Cl、C1-C4烷基或-OR7任意取代的苯基，或者是-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，其中(C3-C9)雜芳基是噻吩基、2-吡啶基或噻唑基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
在此實施方案的另一類化合物中，R1是W-(CH2)-基團；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar1是被F、Cl、C1-C4烷基或-OR7任意取代的苯基，或者是-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，其中(C3-C9)雜芳基是噻吩基、2-吡啶基或噻唑基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
在此實施方案的另一類化合物中，R1是Q-Z-(CH2)m-基團；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar是被F、Cl、C1-C4烷基或-OR7任意取代的苯基，或者是-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，其中(C3-C9)雜芳基是噻吩基、2-吡啶基或噻唑基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
在此實施方案的另一類化合物中，K是
在此實施方案的另一類化合物中，G是
此實施方案中的實例為下列所述化合物
其中X是CH的式(1)化合物可通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員利用公知的和適宜的方法制備。這些化合物的一般合成路線如反應(yīng)路線A所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線A
反應(yīng)路線A(續(xù))
反應(yīng)路線A(續(xù))
反應(yīng)路線A(續(xù))
反應(yīng)路線A提供了一種制備其中X是CH的式(1)化合物，即式(17)、(17a)、(18)和(18a)的一般合成方法。所述取代基R1、R2、R3、R4和R5如上定義，而R8’為-C(O)R7。術(shù)語“Me”表示甲基，“PhtN”表示苯二甲酰亞氨基，“TMS”表示三甲基甲硅烷基和術(shù)語“TFA”表示三氟乙酸鹽。
在反應(yīng)路線A步驟a中，將適宜的式(2)R2-取代的環(huán)己酮用非親核性堿烯醇化并用適宜的親電子試劑例如氯化三甲基甲硅烷驟冷，形成相應(yīng)的R2-取代的烯醇醚，隨后用臭氧、甲硫醚、原甲酸三甲酯和適宜的堿處理，得到適宜的式(3)R2-取代的酸。
例如，在適宜的有機溶劑例如四氫呋喃(THF)存在下，將丁基鋰加入到二異丙基胺中，生成二異丙基氨化鋰(LDA)。然后在-78℃下加入式(2)R2-取代的環(huán)己酮的適宜有機溶劑例如THF溶液，在約1-3小時后，反應(yīng)用氯化三甲基甲硅烷驟冷，將混合物攪拌，隨后萃取并濃縮有機層，得到甲硅烷基烯醇醚中間體。
然后將所述甲硅烷基烯醇醚中間體溶于適宜有機溶劑或溶劑混合物中，例如二氯甲烷/甲醇混合物中，冷卻至-78℃并用臭氧處理。加入甲硫醚并在10-20小時范圍內(nèi)令反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。然后，將溶液濃縮并用原甲酸酯試劑例如原甲酸三甲酯和酸源例如乙酰氯處理，并加熱回流。4-6小時后，將混合物冷卻至環(huán)境溫度并用適宜的堿例如氫氧化鉀處理。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出適宜的式(3)R2-取代的酸。
在反應(yīng)路線A步驟b中，將適宜的式(3)R2-取代的酸與鋰鹽化的(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮反應(yīng)，得到適宜的式(4)酰氧基噁唑烷酮。
例如，在適宜的有機溶劑例如四氫呋喃中，將適宜的式(3)R2-取代的酸用適宜的有機叔胺例如三乙胺或N-甲基嗎啉處理并冷卻至-78℃。加入適宜的酰氯例如三甲基乙酰氯并將反應(yīng)物轉(zhuǎn)移至冰浴中0.5-1.0小時，然后冷卻至-78℃。所得漿狀物用鋰鹽化的(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮(通過將正丁基鋰加入到四氫呋喃中的(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮中制備)處理，并在約10-20小時范圍內(nèi)逐漸溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出適宜的式(4)酰氧基噁唑烷酮。所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線A步驟c中，將適宜的式(4)酰氧基噁唑烷酮用適宜的疊氮化物轉(zhuǎn)移試劑進行疊氮化物烷基化反應(yīng)，得到適宜的式(5)α-疊氮基酰氧基噁唑烷酮。
例如，將適宜的氨化物例如二(三甲基甲硅烷基)氨化鋰的適宜有機溶劑例如四氫呋喃溶液冷卻至-78℃，并用預(yù)先冷卻至-78℃的適宜的式(4)酰氧基噁唑烷酮的四氫呋喃溶液處理。然后加入預(yù)先冷卻至-78℃的適宜的疊氮化物轉(zhuǎn)移試劑例如三異丙基苯磺酰基疊氮化物的適宜有機溶劑例如THF溶液，將溶液攪拌，用乙酸驟冷并轉(zhuǎn)移至溫度范圍在約25-40℃的油浴中。約1-2小時后，將懸浮液冷卻至環(huán)境溫度并向所得溶液中加入水。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出適宜的式(5)α-疊氮基酰氧基噁唑烷酮。所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的方法例如快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線A步驟d中，將適宜的式(5)α-疊氮基酰氧基噁唑烷酮轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的α-疊氮基酸，然后與2-三甲基甲硅烷基乙醇反應(yīng)，得到相應(yīng)的式(6)α-疊氮基酯。
例如，將適宜的式(5)α-疊氮基酰氧基噁唑烷酮在適宜的溶劑例如四氫呋喃或四氫呋喃/水混合物中冷卻，并用過氧化氫和適宜的堿例如氫氧化鋰處理。將混合物攪拌約1-2小時并令其溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度，用Na2SO3處理。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出相應(yīng)的α-疊氮基酸。
然后，在環(huán)境溫度下，將所述相應(yīng)的α-疊氮基酸在適宜的有機溶劑例如四氫呋喃中依次用2-三甲基甲硅烷基乙醇、有機胺例如吡啶和縮合劑例如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)處理。將混合物攪拌約1-3天，然后濃縮。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出相應(yīng)的式(6)α-疊氮基酯。所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線A步驟e中，將所述式(6)α-疊氮基酯與適宜的有機酸反應(yīng)，得到相應(yīng)的式(7)醛-酯例如，在適宜有機酸例如乙酸和適宜有機溶劑例如四氫呋喃/水混合物存在下，將式(6)α-疊氮基酯溶液在約55℃至約70℃溫度下加熱約3-5小時。然后將溶液冷卻并用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)分離出相應(yīng)的式(7)醛-酯。所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線A步驟f中，將所述式(7)醛-酯與式(7a)R3-取代的胺鹽偶合，得到相應(yīng)的式(8)氨基-酯。
例如，將所述式(7)醛-酯與式(7a)R3-取代的胺鹽的羥基溶劑例如甲醇或乙醇溶液用粉末狀活化的3A分子篩處理。約30分鐘至1小時后，將溶液與適宜的還原劑例如氰基硼氫化鈉、氰基硼氫化鋰等反應(yīng)。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)分離出式(8)氨基-酯。所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線A步驟g中，將所述式(8)氨基-酯環(huán)合，得到式(9)順α-疊氮基內(nèi)酰胺和式(10)反α-疊氮基內(nèi)酰胺的混合物。
例如，于環(huán)境溫度下，將所述式(8)氨基-酯的適宜有機溶劑例如四氫呋喃溶液用氟離子源例如四正丁基氟化銨處理并攪拌。約2-4小時后，將溶液濃縮。然后將殘余物溶于適宜的有機溶劑例如乙酸乙酯中，用適宜的酸例如10％鹽酸水溶液和鹽水洗滌，將有機層干燥并濃縮，得到相應(yīng)的氨基酸粗產(chǎn)物。
然后，將所述氨基酸粗產(chǎn)物溶于適宜的有機溶劑例如四氫呋喃中，在冰浴中冷卻并依次用適宜的叔胺例如N-甲基嗎啉和氯甲酸異丁基酯處理。將懸浮液攪拌約2-3小時并過濾，所述鹽用無水四氫呋喃洗滌，將濾液濃縮。殘余物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如徑向色譜法純化，分別得到式(9)順α-疊氮基內(nèi)酰胺和式(10)反α-疊氮基內(nèi)酰胺。
在反應(yīng)路線A步驟h1和h2中，將式(9)順α-疊氮基內(nèi)酰胺和式(10)反α-疊氮基內(nèi)酰胺分別轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的式(11)順α-氨基內(nèi)酰胺和式(12)反α-氨基內(nèi)酰胺。
例如，將式(9)順α-疊氮基內(nèi)酰胺或式(10)反α-疊氮基內(nèi)酰胺的質(zhì)子傳遞溶劑例如甲醇或乙醇溶液脫氣并用烷基二硫醇例如1,3-丙二硫醇和叔胺例如三乙胺處理。將溶液攪拌60-72小時并濃縮。殘余物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如快速色譜法純化，分別得到式(11)順α-氨基內(nèi)酰胺或式(12)反α-氨基內(nèi)酰胺。
在反應(yīng)路線A步驟i1和i2中，分別將式(11)順α-氨基內(nèi)酰胺和式(12)反α-氨基內(nèi)酰胺與式(12a)溴代酸偶合，分別得到式(13)和(14)溴代酰胺。
例如，將式(11)順α-氨基內(nèi)酰胺或式(12)反α-氨基內(nèi)酰胺、式(12a)溴代酸、碳化二亞胺例如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)和1-羥基苯并三唑(HOBt)在適宜有機溶劑例如二氯甲烷中的混合物于環(huán)境溫度下攪拌15-25小時。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分別分離出式(13)順式溴代酰胺或式(14)反式溴代酰胺。所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線A步驟j1和j2中，將式(13)順式溴代酰胺或式(14)反溴代酰胺分別轉(zhuǎn)變成式(15)順式α-硫代酰胺和式(16)反式α-硫代酰胺。
例如，將對甲氧基芐硫醇的適宜有機溶劑例如二甲基甲酰胺溶液脫氣并用適宜堿例如氫化鈉處理。約1-2小時后，向剛剛形成的上述硫醇鹽中加入式(13)順式溴代酰胺或式(14)反式溴代酰胺的適宜有機溶劑例如二甲基甲酰胺溶液以及適宜的相轉(zhuǎn)移催化劑例如四正丁基碘化銨，將反應(yīng)混合物攪拌15-25小時并加入飽和氯化銨水溶液和水。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分別分離出式(15)順式α-硫代酰胺或式(16)反式α-硫代酰胺。所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線A步驟k1和k2中，將式(15)順式α-硫代酰胺和式(16)反式α-硫代酰胺分別裂解得到式(17)和(18)化合物，即其中X是CH的式(1)化合物。
例如，將式(15)順式α-硫代酰胺或式(16)反式α-硫代酰胺、乙酸汞和苯甲醚在適宜有機溶劑例如二氯甲烷中的混合物在冰浴中冷卻，脫氣，并用適宜的酸例如三氟乙酸處理。約3-6小時后，向反應(yīng)混合物中通入硫化氫氣約10-20分鐘。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出式(17)和式(18)化合物，即其中X是CH的式(1)化合物。所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線A可供選擇的步驟11和12中，將化合物(17)和(18)中硫醇功能基用R8’-?；瘎?其中R8’如上定義)?；玫交衔?17a)和(18a)。
例如，將適宜的式(17)或(18)化合物與摩爾等量適宜的R8’-?；瘎├缫宜狒痛呋康乃崂缌蛩岱磻?yīng)，典型地是將反應(yīng)物一起攪拌10分鐘至10小時。用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出式(17a)和式(18a)化合物。所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如快速色譜法純化。
式(2)R2-取代的環(huán)己酮可通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員利用公知的和適宜的技術(shù)和方法制備。這些化合物的一般合成路線如反應(yīng)路線A1所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線A1
反應(yīng)路線A1提供了一種制備式(2)化合物(除非另有說明，其中所述取代基如上定義)的一般合成方法。
在反應(yīng)路線A1步驟a中，按照本領(lǐng)域公知方法，將式(2d)酮與式R2Li有機鋰化合物或式R2Mg-Hal(其中“Hal”是鹵素)格氏試劑反應(yīng)，得到式(2c)叔醇。
例如，將適宜的式R2MgBr格氏試劑的適宜有機溶劑例如乙醚溶液加入到式(2d)適宜有機溶劑例如無水乙醚溶液中，將反應(yīng)混合物攪拌，然后冷卻至約0℃，加入飽和氯化銨溶液。分出乙醚層，用水洗滌并干燥(MgSO4)。真空蒸除溶劑并經(jīng)硅膠色譜法純化，得到式(2c)叔醇。
適宜的式R2Mg-Hal格氏試劑可按本領(lǐng)域公知方法制備。例如，在惰性氣氛下，將鎂屑和無水乙醚混合，然后向所述鎂混合物中加入式R2-Hal(其中Hal是鹵素)化合物的乙醚溶液，將化合物攪拌，直至鎂金屬溶解，得到式R2Mg-Hal格氏試劑。
在反應(yīng)路線A1步驟b中，按照本領(lǐng)域公知方法，將式(2c)叔醇脫水，得到式(2b)中間體。
例如，按照Yadav,J.S.和Mysorekar,S.V.，合成通訊(Synth.Comm.)19,1057-1060(1989)所述方法，可將式(2c)叔醇脫水。例如，向攪拌下的式(2c)叔醇的二氯甲烷溶液中加入三乙胺和DMAP，然后將混合物冷卻至約0℃并向所述混合物中滴加甲磺酰氯，于室溫下將所得反應(yīng)混合物攪拌約1小時，加入碎冰并將混合物攪拌約1小時。此后，反應(yīng)混合物用二氯甲烷萃取，將有機萃取液合并，用水洗滌并干燥(Na2SO4)。然后蒸發(fā)溶劑，所述產(chǎn)物可用本領(lǐng)域公知的和適宜的方法例如硅膠色譜法純化，得到式(2b)中間體。
反應(yīng)路線A1步驟C中，將式(2b)中間體還原，得到式(2a)酮縮醇。
例如，將式(2b)中間體的適宜有機溶劑例如甲醇溶液可用10％鈀/碳催化劑(Pd-C)處理并在氫氣氛下攪拌10-20小時。然后可再加入催化劑，將混合物再攪拌5-10小時，脫氣并過濾。然后將濾液濃縮，得到式(2a)酮縮醇。
在反應(yīng)路線A1步驟d中，按照本領(lǐng)域公知方法，將式(2a)酮縮醇水解，得到式(2)R2-取代的環(huán)己酮。例如，按照Honan,M.C.,Tetrahedron Lett,26,6393-6396(1985)或Greico,P.A.等人，J.Amer.Chem.Soc.99,5773-5780(1977)所述方法，可將式(2a)化合物被保護的酮功能基水解。例如，將式(2a)酮縮醇溶于四氫呋喃/5％鹽酸混合物(2∶1)溶液中并令其在室溫下反應(yīng)約15-25小時，然后于減壓下除去溶劑，得到式(2)R2-取代的環(huán)己酮。
其中X是N的式(1)化合物可通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員利用公知的和適宜的技術(shù)和方法制備。這些化合物的一般合成路線如反應(yīng)路線B所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線B
反應(yīng)路線B(續(xù))
反應(yīng)路線B(續(xù))
反應(yīng)路線B提供了一種制備其中X是N的式(1)化合物即式(32)和(32a)化合物的一般合成方法。所述取代基R1、R2、R3、R4、R5、R8’、Me、Phth、Boc和TFA如上定義。術(shù)語“TMS”表示三甲基甲硅烷基。
在反應(yīng)路線B步驟a中，將N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸(19)轉(zhuǎn)變成N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸β-內(nèi)酯(20)。
例如，用本領(lǐng)域公知的技術(shù)和方法將N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸(19)轉(zhuǎn)變成N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸β-內(nèi)酯(20)。例如，如Pansare,S.V.等人，有機合成(Org.Synth.)70,10(1991)所述或者在Mitsunobu反應(yīng)條件下，可將N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸(19)與偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)和三苯膦(Ph3P)反應(yīng)，得到N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸β-內(nèi)酯(20)。所述產(chǎn)物可用公知方法例如萃取和蒸發(fā)分離并用公知方法例如色譜法純化。
在反應(yīng)路線B步驟b中，將N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸β-內(nèi)酯(20)與烯丙基胺反應(yīng)，得到式(21)所述氨基酸。
例如，將N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸β-內(nèi)酯(20)的適宜的有機溶劑例如乙腈(CH3CN)溶液加入到烯丙基胺的適宜有機溶劑例如乙腈溶液中，用公知方法例如蒸發(fā)可分離出式(21)所述氨基酸。將濾液濃縮可回收羥基酰胺副產(chǎn)物。
在反應(yīng)路線B步驟c中，將式(21)所述氨基酸在仲胺上進行Z-保護并且將伯胺上的Boc-保護基用苯二甲酰亞氨基基團替代，得到所需式(22)苯二甲酰亞氨基酸。
例如，將式(21)氨基酸的飽和NaHCO3水溶液和水的溶液與氯甲酸芐基酯的適宜有機溶劑例如丙酮溶液反應(yīng)。典型地是將反應(yīng)物在環(huán)境溫度下攪拌約2-10小時。用本領(lǐng)域公知的萃取方法，由反應(yīng)物中可回收得到CBz-氨基酸中間體，可無需進一步純化而使用。
然后，將CBz-氨基酸中間體的適宜有機溶劑例如二氯甲烷溶液用三氟乙酸處理，典型地是將反應(yīng)物于環(huán)境溫度下攪拌1-4小時并濃縮。用萃取法由反應(yīng)物中回收得到三氟乙酸鹽中間體并可無需進一步純化而使用。
將所述三氟乙酸鹽中間體的水∶醚溶劑混合物例如水∶二噁烷溶液和固體Na2CO3用N-乙酯基鄰苯二甲酰亞胺(NCEP)處理。典型地是將反應(yīng)物于約30℃至約50℃溫度范圍內(nèi)進行攪拌3-10小時，攪拌后，再加入Na2CO3，將反應(yīng)反應(yīng)混合物的pH調(diào)至pH8-10。再加入N-乙酯基鄰苯二甲酰亞胺(NCEP)并將反應(yīng)再攪拌12-24小時。用本領(lǐng)域公知的萃取法由反應(yīng)物中回收得到式(22)苯二甲酰亞氨基酸，用公知的純化方法例如快速色譜法可將其純化。
在反應(yīng)路線B步驟d中，將式(22)苯二甲酰亞氨基酸的酸功能基轉(zhuǎn)變成三甲基甲硅烷基酯功能基，得到式(23)酯。
例如，將式(22)苯二甲酰亞氨基酸的適宜有機溶劑或溶劑混合物例如四氫呋喃和二氯甲烷溶液用2-三甲基甲硅烷基乙醇；適宜的有機胺例如吡啶、三乙胺、N-甲基嗎啉等和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽處理。典型地是將反應(yīng)物于環(huán)境溫度下攪拌12-24小時。經(jīng)萃取和蒸發(fā)可由反應(yīng)物中分離出所需式(23)酯并可經(jīng)快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線B步驟e中，將式(23)酯氧化，得到式(24)醛。
例如，在惰性氣氛下，例如氬氣氛下，將式(23)所述酯的適宜有機溶劑或溶劑混合物例如二氯甲烷和甲醇溶液冷卻至約-78℃，然后向所述溶液中通入臭氧達到足夠時間，典型地是直至變成持續(xù)的藍色。通過向溶液中通入氬氣10-20分鐘，可由溶液中除掉過量的臭氧。然后加入適宜的還原劑例如甲硫醚并在6-20小時時間范圍內(nèi)令溶液逐漸溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。經(jīng)萃取和蒸發(fā)可由反應(yīng)物中分離出式(24)所述醛并可經(jīng)快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線B步驟f中，將式(24)所述醛與式(7a)R3-取代的胺鹽偶合，得到相應(yīng)的式(25)氨基-酯。
例如，典型地是將式(24)所述醛和式(7a)R3-取代的胺鹽的非質(zhì)子傳遞溶劑例如甲醇或乙醇溶液攪拌10-20分鐘，用氰基硼氫化鈉處理，然后攪拌約3-6小時。經(jīng)萃取和蒸發(fā)由反應(yīng)物中分離出式(25)所述氨基-酯并經(jīng)快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線B步驟g中，按反應(yīng)路線A步驟g所述相似方法，將式(25)所述氨基-酯環(huán)合，得到式(26)所述Cbz-內(nèi)酰胺。
在反應(yīng)路線B步驟h中，將式(26)所述Z-內(nèi)酰胺的CBz-保護的胺功能基脫保護，得到式(27)所述內(nèi)酰胺。
例如，將所述Z-內(nèi)酰胺的適宜有機溶劑例如甲醇溶液可用10％鈀/碳催化劑(Pd-C)處理并在氫氣氛下攪拌10-20小時。然后可再加入催化劑，將混合物再攪拌5-10小時，脫氣并過濾。然后將濾液濃縮，得到式(27)內(nèi)酰胺。
在反應(yīng)路線B步驟i中，將式(27)所述內(nèi)酰胺與式R2-Hal(“Hal”是Cl、Br或I)R2-取代的鹵化物反應(yīng)，得到式(28)所述R2-取代的內(nèi)酰胺。
例如，將式(27)所述內(nèi)酰胺的適宜有機溶劑或溶劑混合物例如乙腈和二甲基甲酰胺溶液用適宜的R2-取代的鹵化物和固體K2CO3處理。在約12-24小時后，經(jīng)萃取和蒸發(fā)由反應(yīng)物中分離出所需式(28)內(nèi)酰胺并經(jīng)快速色譜法純化。
在反應(yīng)路線B步驟j中，將式(28)所述內(nèi)酰胺的苯二甲酰亞氨基-保護的胺功能基脫保護，得到式(29)所述胺。
例如，將式(28)所述內(nèi)酰胺的適宜有機溶劑例如甲醇溶液與2摩爾當(dāng)量水合肼的適宜有機溶劑例如甲醇溶液反應(yīng)，典型地是所述反應(yīng)在環(huán)境溫度下進行。然后將反應(yīng)混合物攪拌約60-90小時，然后過濾。將濾液濃縮，得到式(29)所述胺。
在反應(yīng)路線B步驟k中，按照反應(yīng)路線A步驟i1和i2所述相似方法，將式(29)所述胺與式(12a)所述溴代酸偶合，得到式(30)所述溴代酰胺。
在反應(yīng)路線B步驟1中，將式(30)所述溴代酰胺轉(zhuǎn)變成式(31)所述α-硫代酰胺。
例如，將式(30)溴代酰胺和對甲氧基芐硫醇的適宜有機溶劑例如二甲基甲酰胺溶液脫氣并于環(huán)境溫度下用碳酸銫處理。12-24小時后，經(jīng)萃取和蒸發(fā)由反應(yīng)物中分離出式(31)所述α-硫代酰胺并經(jīng)快速色譜法純化。
另外，按照反應(yīng)路線A步驟j1和j2所述相似方法，可將式(30)所述溴代酰胺轉(zhuǎn)變成式(31)所述α-硫代酰胺。
在反應(yīng)路線B步驟m中，按照反應(yīng)路線A步驟k1和k2所述相似方法，可將式(31)所述α-硫代酰胺裂解，得到式(32)化合物，即其中X是N而R8是H的式(Ⅰ)化合物。
在反應(yīng)路線B步驟n中，按照反應(yīng)路線A步驟11和12所述相似方法，將式(32)所述化合物的硫醇功能基?；?，得到式(32)化合物。
反應(yīng)路線A和B所用原料可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員很容易地獲得。例如，某些式(2)R2-取代的環(huán)己酮可由市售獲得，如4-苯基環(huán)己酮、4-甲基環(huán)己酮、4-乙基環(huán)己酮、4-叔丁基環(huán)己酮可由AldrichChemical Co.,Inc.,Milwaukee,Wisconsin 53233獲得。
式(7a)所述R3-取代的胺鹽可通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的和適宜的技術(shù)和方法制備。反應(yīng)路線C給出了一般合成路線，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線C
在步驟a中，將式(7c)所述被保護的氨基酸酰胺化，得到式(7b)所述氨基酰胺。
例如，將式(7c)所述被保護的氨基酸的適宜有機溶劑例如四氫呋喃溶液冷卻至約-25℃至約-40℃并依次用摩爾量略微過量的叔胺例如N-甲基嗎啉和摩爾量略微過量的氯甲酸異丁基酯處理。約10-20分鐘后，反應(yīng)混合物用摩爾過量的式H2NR4R5胺(其中R4和R5如上定義)處理，攪拌約1-4小時并濃縮。將殘余物溶于適宜有機溶劑例如二氯甲烷，用適宜酸例如鹽酸和碳酸鈉(NaHCO3)洗滌，有機層用適宜的干燥劑例如硫酸鈉干燥并濃縮，得到式(7b)所述氨基酰胺粗產(chǎn)物。
在反應(yīng)路線C步驟b中，將式(7b)所述氨基酰胺脫保護，得到式(7a)所述R3-取代的胺鹽。
例如，將式(7b)氨基酰胺粗產(chǎn)物的適宜的有機溶劑例如二氯甲烷和三氟乙酸溶液于環(huán)境溫度下攪拌約2-4小時并濃縮。用適宜溶劑混合物例如四氯化碳和甲苯經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀共蒸發(fā)除去殘余的三氟乙酸。然后，用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的和適宜的方法分離并純化式(7a)所述R3-取代的胺鹽。
反應(yīng)路線C所用原料可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員很容易地獲得。例如，式(7c)N-保護的氨基酸可由市售獲得或者由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易地制得。另外，式H2NR4R5胺(其中R4和R5如上定義)可由市售獲得或者由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易地制得。可由AldrichChemical Co.,Inc.市售獲得的式H2NR4R5胺的實例包括甲胺、乙胺、丙胺、異丙胺、丁胺、R-(-)-仲-丁胺、(±)-仲-丁胺、S-(+)-仲-丁胺、叔丁胺、己胺、嗎啉、哌啶和吡咯烷。
式(12a)所述溴代酸可由市售獲得或者由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員利用公知的和適宜的原料、技術(shù)和方法制得?？捎墒惺郢@得的式(12a)溴代酸的實例包括2-溴代丙酸、2-溴代丁酸、2-溴代戊酸、2-溴代己酸、6-(苯甲酰氨基)-2-溴代己酸、α-溴代庚酸、2-溴代辛酸、2-溴代-3-甲基丁酸、α-溴代異己酸、α-溴代-β-(5-咪唑基)丙酸、(R)-(+)-2-溴代丙酸、(S)-(-)-2-溴代丙酸。
其中R1是W-(CH2)m-基團的式(12a)溴代酸可按照反應(yīng)路線D合成。式(35)溴代酸即是其中R1是W-(CH2)m-基團的式(12a)溴代酸。
反應(yīng)路線D
在反應(yīng)路線D步驟a中，將在適宜極性溶劑例如水或水∶醚溶劑混合物中的式(33)所述氨基羧酸用Na2CO3和N-乙酯基鄰苯二甲酰亞胺(NCEP)處理。典型地是將反應(yīng)混合物于環(huán)境溫度下攪拌1-5小時并用本領(lǐng)域公知的萃取法萃取，然后將水層冷卻并用酸例如濃鹽酸酸化至約pH1，過濾收集沉淀，用水洗滌，然后干燥，得到式(34)所述苯二甲酰亞氨基羧酸。
在反應(yīng)路線D步驟b中，將式(34)所述苯二甲酰亞氨基羧酸溴化，得到式(35)所述2-溴-苯二甲酰亞氨基羧酸。例如，在約-20℃至約10℃溫度范圍內(nèi)，將式(34)所述苯二甲酰亞氨基羧酸和無水紅磷的混合物通過滴加溴處理，然后將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，再加熱至約80℃約2-5小時。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，傾入含NaHSO3的水中并用固體NaHCO3中和。水層用醚溶劑例如乙醚洗滌，并用適宜的酸例如濃鹽酸酸化。過濾收集沉淀并干燥，得到式(35)所述溴代酸。
另外，式(35)所述溴代酸也可用下列所述反應(yīng)路線D步驟a1、a2和b1所述方法以及Baldwin,J.E.等人在Tetrahedron44,2633-2636(1988)和Bezas,B.和Zervas,L.,J.Am.Chem.Soc.83,719-722(1961)所述相似方法制備。
例如，在反應(yīng)路線D步驟a1中，通過形成亞芐基亞胺保護ε-氨基對適宜的α-氨基酸例如L-賴氨酸進行選擇性N-α-保護。通過將L-賴氨酸一鹽酸鹽溶于氫氧化鋰并將溶液冷卻至約0℃-10℃形成亞芐基亞胺。然后加入新蒸餾的苯甲醛并將溶液振搖。過濾并蒸發(fā)回收N-ε-亞芐基-L-賴氨酸。
將所述N-ε-亞芐基-L-賴氨酸的α-氨基進行尿烷保護，隨后就地水解裂解所述亞胺，得到N-α-芐氧羰基-L-賴氨酸。例如，將N-ε-亞芐基-L-賴氨酸加入到氫氧化鈉和乙醇混合物中，冷卻至約-5℃至約-25℃。然后向反應(yīng)混合物中加入預(yù)先冷卻的芐氧基甲酰氯的堿性溶劑例如氫氧化鈉和乙醇溶液，在加料過程中，將溫度保持在約-10℃至約-25℃溫度范圍內(nèi)，然后在攪拌下溫度略微升高(約-5℃)。反應(yīng)混合物用適宜的酸例如預(yù)先冷卻的鹽酸酸化，過濾并重結(jié)晶回收得到N-α-芐氧羰基-L-賴氨酸，即其中m是4的式(34a)化合物。
在反應(yīng)路線D步驟a2中，在碳酸鈉水溶液中，將N-α-芐氧羰基-L-賴氨酸或其他式(34a)化合物與N-乙酯基鄰苯二甲酰亞胺反應(yīng)，得到式(34a)化合物的光學(xué)純鄰苯二甲酰基衍生物。
同時用芐酯基氫解將式(34a)化合物的鄰苯二甲?；苌镞€原，得到式(34b)N-ε-鄰苯二甲?；被帷＠?，將單一一種式(34a)鄰苯二甲?；苌锱c催化量的氫化催化劑例如10％鈀/碳反應(yīng)，典型地是將反應(yīng)物與適宜的溶劑混合物例如四氫呋喃/水接觸，反應(yīng)混合物典型地是在室溫氫氣壓35-45psi下振搖5-24小時。通過蒸發(fā)溶劑由反應(yīng)物中回收得到每一種式(34b)N-ε-鄰苯二甲?；被帷?br> 在反應(yīng)路線D步驟b1中，將每一種式(34b)N-ε-鄰苯二甲酰基氨基酸脫氨基溴化，得到式(35)所述溴代酸。所述反應(yīng)可用Compagnone,R.S.和Rapoport,H.,J.Org.Chem.,51,1713-1719(1986)；U.S.Pat.No.5,322,942,issued June 21,1994；Overberger,C.G.和Cho,I.,J.Org.Chem.,33,3321-3322(1968)；or Pfister,K.等人，J.Am.Chem.Soc.,71,1096-1100(1949).所述典型反應(yīng)進行。
例如，將式(34b)N-ε-鄰苯二甲酰基氨基酸和適宜的溴化物例如溴化氫或溴化鉀的混合物在酸溶液例如硫酸中用亞硝酸鈉處理，如果需要避免過量溴離子引起的外消旋作用，則在加料和攪拌過程中反應(yīng)溫度可控制在-5℃至0℃之間。將反應(yīng)混合物攪拌1.5-5小時后，經(jīng)萃取和蒸發(fā)回收得到式(35)所述溴代酸。
按照反應(yīng)路線E合成得到式(12a)所述溴代酸，其中R1是C1-C6烷基或Q’-Z’-(CH2)m-基團，其中m如上定義并且Q’是氫或Y’-(CH2)n-基團，其中Y’是-C(O)OR6；Z’是化學(xué)鍵、氧或氨基。所述式(37)溴代酸即是其中R1是C1-C6烷基或Q’-Z’-(CH2)m-基團的式(12a)所述溴代酸。反應(yīng)路線E
反應(yīng)路線E提供了一種制備式(12a)(當(dāng)R1是C1-C6烷基或Q’-Z’-(CH2)m-基團時，即是式(37)化合物)的一般合成方法。所述取代基R1’定義為C1-C6烷基或Q’-Z’-(CH2)m-基團。
在反應(yīng)路線E中，如上述反應(yīng)路線D步驟b1所述，將適宜的式(36)氨基酸進行脫氨基溴化，得到式(37)R1’-取代的溴代酸。
式(36)氨基酸及其N-被保護形式可由市售獲得或者經(jīng)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的和適宜的技術(shù)和方法容易地制備。例如L-丙氨酸、D-丙氨酸、L-纈氨酸、D-纈氨酸、D-正纈氨酸、L-亮氨酸、D-亮氨酸、D-異亮氨酸、D-叔亮氨酸、甘氨酸、L-谷氨酸、D-谷氨酸、L-谷氨酰胺、D-谷氨酰胺、L-賴氨酸、D-賴氨酸、L-鳥氨酸、D-鳥氨酸、(D)-(-)-2-氨基丁酸、D-蘇氨酸、D-高絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-絲氨酸、D-2-氨基己二酸、D-天冬氨酸、D-谷氨酸、D-賴氨酸水合物、2,3-二氨基丙酸一氫溴酸鹽、D-鳥氨酸鹽酸鹽、D,L-2,4-二氨基丁酸二鹽酸鹽、L-偏酪氨酸、D-4-羥苯基甘氨酸、D-酪氨酸、D-苯丙氨酸、D,L-2-氟苯丙氨酸、β-甲基-D,L-苯丙氨酸鹽酸鹽、D,L-3-氟苯丙氨酸、4-溴-D,L-苯丙氨酸、D-2-苯基甘氨酸、D,L-4-氟苯丙氨酸、4-碘-D-苯丙氨酸、D-高苯丙氨酸、D,L-2-氟苯丙氨酸、D,L-4-氯苯丙氨酸等均可由Sigma Chemical Co.St.Louis,Mo.或Aldrich Chemical Co.,Inc.市售獲得。
式(15)順式α-硫代酰胺、式(16)反式α-硫代酰胺和式(31)α-硫代酰胺(其中R1是Q’2-Z’2-(CH2)m-基團，其中Q’2是-Y’2-(CH2)n-基團，其中Y’2是-N(R6)2)可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知技術(shù)和方法合成。制備這些化合物的一般合成方法如反應(yīng)路線F所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。式(38)α-硫代酰胺統(tǒng)一表示式(15)順式α-硫代酰胺、式(16)反式α-硫代酰胺和式(31)α-硫代酰胺(其中R1是Q’2-Z’2-(CH2)m-基團，其中Q’2是-Y’2-(CH2)n-基團，其中Y’2是-N(R6)2)。反應(yīng)路線F
反應(yīng)路線F(續(xù))
反應(yīng)路線F提供了一種制備式(15)、(16)和(31)化合物(其中R1是Q’2-Z’2-(CH2)m-基團，其中Q’2是-Y’2-(CH2)n-基團，其中Y’2是-N(R6)2)的一般合成方法。除了R6’定義為C1-C6烷基以外，所有取代基均如上定義。
在反應(yīng)路線F步驟a中，將適宜的單一一種式(38)α-硫代酰胺化合物的苯二甲酰亞氨基基團與摩爾量略微過量的一水合肼反應(yīng)，典型地是將反應(yīng)物在質(zhì)子傳遞有機溶劑例如甲醇中進行。典型地是將反應(yīng)物在室溫下攪拌5-24小時，經(jīng)蒸發(fā)溶劑，再溶于CHCl3、過濾除去鄰苯二甲酰肼并真空除去CHCl3，由反應(yīng)物中回收得到式(39)相應(yīng)的游離胺化合物。
在反應(yīng)路線F任選步驟b中，經(jīng)還原烷基化將每一種游離胺(39)轉(zhuǎn)變成式(40)R6’-取代的胺。
例如，將式(39)游離胺在質(zhì)子傳遞有機溶劑例如甲醇中的混合物與R6’CHO、氰基硼氫化鈉和1滴1％溴甲酚綠甲醇溶液反應(yīng)，用1N鹽酸的甲醇溶液維持反應(yīng)的pH值不變。經(jīng)萃取并蒸發(fā)溶劑由反應(yīng)物中回收得到式(40)所述R6’-取代的胺。
在反應(yīng)路線F任選步驟C中，如反應(yīng)路線E任選步驟b所述，將式(40)所述R6’-取代的胺轉(zhuǎn)變成式(41)所述二-R6’-取代的胺。
式(15)順式α-硫代酰胺、式(16)反式α-硫代酰胺和式(31)α-硫代酰胺(其中R1是Q’3-Z’3-(CH2)m-基團，其中Q’3是-Y’3-(CH2)n-基團，Z’3是CONR6和Y’3是H、C6-C10芳基、C3-C9雜芳基、嗎啉代、哌啶子基、吡咯烷子基或異氮雜茚基)可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的方法合成。制備這些化合物，即所述式(43)化合物的一般合成方法如反應(yīng)路線G所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線G
反應(yīng)路線G提供了一種制備式(15)、(16)和(31)化合物(其中R1是Q’3-Z3-(CH2)m-基團，其中Q’3是-Y’3-(CH2)n-基團，Z’3是CONR6和Y’3是H、C6-C10芳基、C3-C9雜芳基、嗎啉代、哌啶子基、吡咯烷子基或異氮雜茚基)的一般合成方法，所有其他取代基均如上定義。
在反應(yīng)路線G中，式(43)化合物可通過將式(39)所述游離胺或式(40)R6’-取代的胺與式(42)所述酸偶合制得。具體講，在適宜溶劑例如四氫呋喃中，將式(42)酸與1.2-1.7當(dāng)量適宜堿例如N-甲基嗎啉反應(yīng)，在加入1.2-1.7當(dāng)量氯甲酸異丁基酯之前，將反應(yīng)混合物冷卻至-50℃-0℃溫度范圍內(nèi)，優(yōu)選-25℃--20℃。令反應(yīng)攪拌30分鐘至3小時，使其形成混合酸酐，活化的中間體。在保持溫度介于-50℃-0℃之間的情況下，加入適宜的式(39)游離堿或適宜的式(40)R6’-取代的胺。在加完式(39)和(40)胺后，反應(yīng)可以溫?zé)嶂潦覝?，反?yīng)需要進行2-48小時。經(jīng)本領(lǐng)域公知方法例如萃取、蒸發(fā)、色譜法和重結(jié)晶法可分離并純化所述產(chǎn)物(43)。
另外，例如，將式(42)酸與亞硫酰氯或草酰氯反應(yīng)，得到酰氯中間體。所述反應(yīng)可以用亞硫酰氯或草酰氯作溶劑或者所述反應(yīng)可以在適宜的溶劑例如甲苯、苯、二氯甲烷、四氯化碳或氯仿中進行。所述反應(yīng)可以在適宜催化劑例如二甲基甲酰胺或吡啶存在下進行。所述反應(yīng)可在-40℃至溶劑的回流溫度下進行，反應(yīng)通常需要30分鐘至24小時。經(jīng)本領(lǐng)域公知方法例如蒸發(fā)、萃取、色譜法和重結(jié)晶法可分離并純化所述酰氯中間體。
然后將所述酰氯中間體與適宜的式(39)或(40)胺反應(yīng)。所述反應(yīng)可在適宜溶劑例如甲苯、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、二氯甲烷、吡啶或氯仿中進行。所述反應(yīng)可在摩爾量略微過量的堿例如三乙胺、碳酸鈉、碳酸氫鉀、吡啶或二異丙基乙基胺存在下進行。所述反應(yīng)可在-70℃至溶劑的回流溫度下進行。所述反應(yīng)通常需要30分鐘至24小時。經(jīng)本領(lǐng)域公知方法例如萃取、蒸發(fā)、色譜法和重結(jié)晶法可分離并純化所述產(chǎn)物(43)。
另外，例如，在摩爾量略微過量的偶合劑例如二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(EDC)存在下，將式(42)酸與摩爾量略微過量的適宜的式(39)或(40)胺和1-羥基苯并三唑水合物反應(yīng)。所述反應(yīng)可在適宜的堿例如二異丙基乙基胺存在下進行。所述反應(yīng)可在適宜溶劑例如二氯甲烷或氯仿中進行。經(jīng)本領(lǐng)域公知方法例如萃取、蒸發(fā)、色譜法和重結(jié)晶法可分離并純化所述產(chǎn)物。
所述式(42)化合物及其被活化的中間體可由市售獲得或者可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的技術(shù)和方法容易地制備。例如，苯甲酸、1-萘甲酸、2-萘甲酸、2-喹啉羧酸、4-噠嗪羧酸、4-吡唑羧酸、2-呋喃甲酸、3-呋喃甲酸、2-吡嗪羧酸、2-噻吩羧酸、4-嗎啉甲酰氯、Boc-3-哌啶甲酸、異煙酸和吡啶甲酸均可由Aldrich Chemical Co.,Inc和Baychem,Inc.市售獲得式(15)順式α-硫代酰胺、式(16)反式α-硫代酰胺和式(31)α-硫代酰胺(其中R1是Q’3-Z’4-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’4是NHC(O)NR6)可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的方法合成。制備這些化合物，即所述式(45)化合物的一般合成方法如反應(yīng)路線H所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線H
反應(yīng)路線H提供了一種制備式(15)、(16)和(31)化合物(其中R1是Q’3-Z’4-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’4是NHC(O)NR6)的一般合成方法，所有其他取代基均如上定義。
在反應(yīng)路線H中，式(45)化合物可通過將式(39)游離胺或式(40)R6’-取代的胺與式(44)異氰酸酯反應(yīng)制備。例如，將等當(dāng)量或者摩爾量略微過量的適宜的式(44)異氰酸酯加入到適宜的式(39)胺或適宜的式(40)R6’-取代的胺的適宜無水芳族溶劑例如無水苯或無水甲苯溶液中。然后將混合物回流2-24小時。經(jīng)本領(lǐng)域公知方法例如萃取、蒸發(fā)、色譜法和重結(jié)晶法可分離并純化所述適宜的式(45)化合物。
所述式(44)化合物及其被活化的中間體可由市售獲得或者可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的技術(shù)和方法容易地制備。例如，異氰酸苯酯和異氰酸1-萘酯可由Aldrich Chemical Co.,Inc.獲得。本領(lǐng)域公知的其他式(44)化合物包括異氰酸4-甲基苯基酯、異氰酸4-甲氧基苯基酯、異氰酸2-萘酯、異氰酸4-氨基苯基酯、異氰酸4-氟苯基酯、異氰酸3-氯苯基酯、異氰酸4-氯苯基酯、異氰酸3,4-二氯苯基酯、異氰酸2,6-二甲基苯基酯、異氰酸2-甲氧基-1-萘基酯、異氰酸2,4,6-三甲基苯基酯和異氰酸4-硝基苯基酯。
式(15)順式α-硫代酰胺、式(16)反式α-硫代酰胺和式(31)α-硫代酰胺(其中R1是Q’3-Z’5-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’5是OC(O)NR6)，可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的方法合成。制備這些化合物，即所述式(48)化合物的一般合成方法如反應(yīng)路線I所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線I
反應(yīng)路線I提供了一種制備式(15)、(16)和(31)化合物(其中R1是Q’3-Z’5-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’5是OC(O)NR6)的一般合成方法，所有其他取代基均如上定義。
在反應(yīng)路線I步驟a中，在適宜溶劑例如甲苯、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、二氯甲烷、吡啶或氯仿存在下，將適宜的式(39)游離胺或適宜的式(40)R6’-取代的胺與式(46)氯甲酸酯偶合。所述反應(yīng)可在摩爾量略微過量的適宜的堿例如三乙胺、碳酸鈉、碳酸氫鉀、吡啶或二異丙基乙基胺存在下進行。所述反應(yīng)可在-70℃至溶劑的回流溫度下進行。所述反應(yīng)通常需要30分鐘至24小時。經(jīng)本領(lǐng)域公知方法例如萃取、蒸發(fā)、色譜法和重結(jié)晶法可分離并純化所述式(48)產(chǎn)物。
所述式(46)氯甲酸酯可由市售獲得或者可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的技術(shù)和方法容易地制備。例如，氯甲酸苯基酯、氯甲酸芐基酯、氯甲酸4-氯苯基酯、氯甲酸4-硝基苯基酯、氯甲酸4-甲基苯基酯、氯甲酸4-溴苯基酯、氯甲酸4-氟苯基酯、氯甲酸4-甲氧基苯基酯和氯甲酸2-萘基酯可由A1drich ChemicalCo.Inc.獲得或者是本領(lǐng)域公知的。
另外，在反應(yīng)路線I步驟a1中，按照上述反應(yīng)路線G所述酸酐的偶合方法，可將適宜的式(39)游離胺或適宜的式(40)R6’-取代的胺與式(47)酸酐反應(yīng)。
所述式(47)酸酐可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的技術(shù)和方法容易地制備，例如參見。Pope,B.M.等人，Org.Synth.,Ⅵ,418(1988)；Dean,C.S.等人，Chem.Comm.,728(1969)；Tarbell,D.S.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)69,730(1972)或Dean,C.S.等人，J.Org.Chem.35,3393(1970).
式(15)順式α-硫代酰胺、式(16)反式α-硫代酰胺和式(31)α-硫代酰胺(其中R1是Q’3-Z’5-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’6是SO2NR6)可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的方法合成。制備這些化合物，即所述式(51)化合物的一般合成方法如反應(yīng)路線J所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線J
反應(yīng)路線J提供了一種制備式(15)、(16)和(31)化合物(其中R1是Q’3-Z’6-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’r是SO2NR6)的一般合成方法，所有其他取代基均如上定義。
在反應(yīng)路線J中，按照上述反應(yīng)路線G所述酸酐的偶合方法，將適宜的式(39)游離胺或適宜的式(40)R6’-取代的胺與式(49)氯化物或式(50)酸酐反應(yīng)。
所述式(49)氯化物可由市售獲得或者可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的技術(shù)和方法容易地制備。例如，苯磺酰氯、1-萘磺酰氯、2-萘磺酰氯、丹磺酰氯、8-喹啉磺酰氯、2-氧芴磺酰氯、1,2-萘醌-2-二疊氮化物-4-磺酰氯、N-嗎啉基磺酰氯、N-哌啶基磺酰氯、2,4,5-三氯代苯磺酰氯、2,5-二氯代苯磺酰氯、2-硝基苯磺酰氯、2,4-二硝基苯磺酰氯、3,5-二氯-2-羥基苯磺酰氯、2,4,6-三異丙基苯磺酰氯、2-均三甲基苯磺酰氯、3-硝基苯磺酰氯、4-溴苯磺酰氯、4-氟苯磺酰氯、4-氯苯磺酰氯、4-氯-3-硝基苯磺酰氯、4-硝基苯磺酰氯、4-甲氧基苯磺酰氯、4-叔丁基苯磺酰氯、對甲苯磺酰氯、2,3,4-三氯苯磺酰氯、2,5-二甲氧基苯磺酰氯、4-乙基苯磺酰氯、3,4-二甲氧基苯磺酰氯、2,6-二氯苯磺酰氯、3-溴苯磺酰氯、4-甲氧基-2-硝基苯磺酰氯和4-正丁基苯磺酰氯均可由Aldrich Chemical Co.Inc.，其他化學(xué)品供應(yīng)商例如Lancaster,Salor或Maybridge獲得或者是本領(lǐng)域公知的。
所述式(50)酸酐可由市售獲得或者可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的技術(shù)和方法容易地制備。例如，苯磺酸酐、4-甲苯磺酸酐、2-均三甲基苯磺酸酐和4-硝基苯磺酸酐均可由Aldrich Chemical Co.,Inc.獲得或者是公知的。
式(15)順式α-硫代酰胺、式(16)反式α-硫代酰胺和式(31)α-硫代酰胺(其中R1是Q’3-Z’7-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’7是NR6C(O))可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的方法合成。制備這些化合物，即所述式(54)化合物的一般合成方法如反應(yīng)路線K所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線K
反應(yīng)路線K提供了一種制備式(15)、(16)和(31)化合物(其中R1是Q’3-Z’7-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’7是NR6C(O))的一般合成方法，所有其他取代基均如上定義。
在反應(yīng)路線K步驟a中，在本領(lǐng)域公知的條件下，將適宜的式(52)酯脫保護，得到式(53)所述酸。例如，當(dāng)R6’是甲基或乙基時，將式(52)酯溶于適宜的有機溶劑例如乙醇中并用約等體積的水處理。在攪拌下向此溶液中加入1-2當(dāng)量氫氧化鋰并將反應(yīng)攪拌1-6小時，然后用本領(lǐng)域公知的方法分離并純化所得酸。例如真空下除去有機溶劑，殘余的水溶液用稀鹽酸酸化，然后水相用適宜的有機溶劑例如乙酸乙酯萃取，將合并的有機萃取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物可用適宜洗脫劑例如甲醇/氯仿在硅膠上進行快速色譜純化，得到式(53)所述酸。
在反應(yīng)路線K步驟b中，在本領(lǐng)域公知的反應(yīng)條件下，將式(53)所述酸與式(53a)所述胺偶合，得到式(54)逆酰胺。例如，在惰性氣氛下，例如氮氣氛下，將式(53)所述酸溶于適宜的有機溶劑例如二氯甲烷中，然后溶液用1-4當(dāng)量適宜胺例如N-甲基嗎啉處理，冷卻至約-20℃并加入1當(dāng)量氯甲酸異丁基酯。將反應(yīng)攪拌約10-30分鐘并向反應(yīng)中加入1-4當(dāng)量式(53a)所述胺，反應(yīng)在約-20℃下攪拌30分鐘至2小時，然后令其溫?zé)嶂潦覝夭嚢?-3小時。經(jīng)本領(lǐng)域公知的方法例如萃取法和快速色譜法分離并純化式(54)逆酰胺。例如，將所述反應(yīng)用適宜有機溶劑例如二氯甲烷稀釋，用水沖洗，用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物可用適宜的洗脫劑例如乙酸乙酯/己烷在硅膠上進行快速色譜純化，得到式(54)所述逆酰胺。
另外，在惰性氣氛下，例如氮氣氛下，將式(53a)所述胺溶于適宜的無水有機溶劑例如二氯甲烷中，向此溶液中加入溶于適宜有機溶劑例如二氯甲烷中的1當(dāng)量N-羥基苯并三唑水合物、1當(dāng)量1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽和1當(dāng)量式(53)所述酸，然后，將反應(yīng)攪拌約1-15小時。經(jīng)本領(lǐng)域公知的方法例如萃取法和快速色譜法分離并純化式(54)逆酰胺(retroamide)。例如，將所述反應(yīng)用適宜有機溶劑例如乙酸乙酯稀釋，用水沖洗，用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物可用適宜的洗脫劑例如乙酸乙酯/己烷在硅膠上進行快速色譜純化，得到式(54)所述逆酰胺。
式(15)順式α-硫代酰胺、式(16)反式α-硫代酰胺和式(31)α-硫代酰胺(其中R1是Q’3-Z’8-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’8是HNC(O)O)可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的方法合成。制備這些化合物，即所述式(56)化合物的一般合成方法如反應(yīng)路線L所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線L
反應(yīng)路線L提供了一種制備式(15)、(16)和(31)化合物(其中R1是Q’3-Z’8-(CH2)m-基團，其中Q’3如反應(yīng)路線G中定義，m如上定義和Z’8是HNC(O)O)的一般合成方法，所有其他取代基均如上定義。
在反應(yīng)路線L步驟a中，在本領(lǐng)域公知的反應(yīng)條件下，將適宜的式(52)酯還原，得到式(55)醇。例如，將式(52)酯溶于適宜溶劑例如己烷、二氯甲烷、四氫呋喃或甲苯，優(yōu)選四氫呋喃中，并與適宜的還原劑例硼氫化鋰、硼氫化鈉、氫化鋰鋁、二異丁基氫化鋁、9-硼雙環(huán)并[3.3.1]壬烷，優(yōu)選硼氫化鋰反應(yīng)。所述反應(yīng)既可以通過將適宜的酯(52)加入到適宜還原劑溶液中，也可以通過將適宜還原劑溶液加入到適宜式(52)酯溶液中進行，加料過程在約-30℃至約10℃下進行。所述反應(yīng)可在約0℃至約30℃溫度范圍內(nèi)進行，反應(yīng)通常需要2-5小時。所述產(chǎn)物可通過驟冷和萃取分離得到。所述驟冷反應(yīng)在約-15℃至約0℃下進行。用本領(lǐng)域公知和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出式(55)所述醇。式(55)所述醇可經(jīng)本領(lǐng)域公知的色譜法和蒸餾法純化。
在反應(yīng)路線L步驟b中，按照上述反應(yīng)路線H所述方法，將式(55)所述醇與式(44)所述異氰酸酯反應(yīng)，得到適宜的式(56)化合物。
另外，式(15)順式α-硫代酰胺、式(16)反式α-硫代酰胺和式(31)α-硫代酰胺也可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的方法合成。制備這些化合物的一般合成方法如反應(yīng)路線M所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線M
反應(yīng)路線M提供了一種制備式(15)、(16)和(31)化合物的一般合成方法，所有其他取代基均如上定義。
在反應(yīng)路線M步驟a中，將式(57a)硫醇在適宜的有機溶劑例如二甲基甲酰胺中脫氣并用溴代乙酸乙酯(57b)和適宜的叔胺例如二異丙基乙基胺處理。將反應(yīng)混合物置于冷卻浴中并攪拌約20分鐘至約1小時，其間可觀測到有沉淀生成。除去冷卻浴，將反應(yīng)混合物再攪拌48-72小時。用本領(lǐng)域公知和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出式(57)所述硫醚酯。式(57)所述硫醚酯可經(jīng)本領(lǐng)域公知的色譜法和蒸餾法純化。
在反應(yīng)路線M步驟b中，將式(57)硫醚酯在適宜的有機溶劑例如四氫呋喃中用氨化物堿例如二(三甲基甲硅烷基)氨化鋰處理。然后將所得中間體與R1-取代的烷基鹵化物(R1CH2-Hal)反應(yīng)，得到式(58)R1-取代的硫醚酯。用本領(lǐng)域公知和適宜的方法例如萃取和蒸發(fā)可分離出式(58)所述R1-取代的硫醚酯。式(58)所述R1-取代的硫醚酯可經(jīng)本領(lǐng)域公知的色譜法和蒸餾法純化。
在反應(yīng)路線M步驟c中，按照反應(yīng)路線K步驟a所述方法，將式(58)所述R1-取代的硫醚酯脫保護，得到式(59)R1-取代的硫醚酸。
在反應(yīng)路線M步驟d中，按照反應(yīng)路線G所述方法，將式(59)R1-取代的硫醚酸與適宜的式(11)、(12)或(29)化合物偶合，得到適宜的式(15)、(16)或(31)化合物。
如1995年6月13日公開的美國專利5,424,425所述，式(1)化合物(其中R8是-C(O)-(CH2)q-K基團)可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照公知的和適宜的方法合成。制備這些化合物，即所述式(61)化合物的一般合成方法如反應(yīng)路線N所示，除非另有說明，其中所有取代基如上定義。
反應(yīng)路線N
反應(yīng)路線N提供了一種制備式(61)化合物的一般合成方法，其中K’是
和
R7”表示Boc、C1-C4烷基或-(CH2)p-Ar2基團。所有其他取代基如上定義。
在反應(yīng)路線N中，適宜的式(61)硫代乙?；衔锟赏ㄟ^下述方法制備，即在適宜非質(zhì)子傳遞溶劑例如二甲基甲酰胺中，于堿性條件下例如氫化鈉、硫化氫，將適宜的式(13)、(14)或(30)溴代酰胺與適宜的式(60或60a)氨基硫代乙酸三苯甲基酯反應(yīng)。
對于式(61)硫代乙?；衔?，其中K’是
或
其中R3”是Boc，所述Boc保護基可用三氟乙酸脫除，得到其中R7是氫的相應(yīng)化合物。
另外，其中K是下式的式(61)硫代乙?；衔锏牧蚧锕δ芑?
可用本領(lǐng)域公知的技術(shù)和方法氧化，例如單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物，得到其中K是下式的式(61)硫代乙酰基化合物
其中p’是1或2。
反應(yīng)路線O提供了一種制備式(60)和(60a)氨基硫代乙酸三苯甲基酯的一般合成方法。
反應(yīng)路線O
反應(yīng)路線O提供了一種制備式(64)和(64a)化合物的一般合成方法，其中K”是
和
而K是
R7”表示Boc、C1-C4烷基或-(CH2)p-Ar2基團。所有其他取代基如上定義。
反應(yīng)路線O步驟a中，在非質(zhì)子傳遞溶劑例如二氯甲烷中，于堿性條件下，例如吡啶，將三苯基甲硫醇(62)與溴代乙酰溴(63)反應(yīng)，得到式(64)溴代硫代乙酸三苯甲基酯。
反應(yīng)路線O步驟b中，在非質(zhì)子傳遞溶劑例如二氯甲烷中，于堿性條件下，例如吡啶，將式(64)溴代硫代乙酸三苯甲基酯與適宜的式(65)氨基化合物反應(yīng)，得到適宜的式(66)氨基硫代乙酸三苯甲基酯。
反應(yīng)路線O可供選擇的步驟c中，其中K是下式的式(66)硫代乙?；衔锏牧蚧锕δ芑?
可用本領(lǐng)域公知的技術(shù)和方法氧化，例如單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物，得到其中K是下式的式(66a)硫代乙?；衔?
其中P’是1或2。
另外，其中R8是-C(O)-(CH2)q-K基團的式(1)化合物可如反應(yīng)路線P所述制備。反應(yīng)路線P中，除非另有說明，所有取代基均如上定義。 反應(yīng)路線P
反應(yīng)路線P提供了一種制備式(61)化合物的一般合成方法，其中所有取代基均如上定義。
反應(yīng)路線P中，在適宜偶合劑存在下，式(17)、(18)或(32)硫醇化合物的硫醇功能基可與適宜的式(68)酸偶合，生成適宜的式(61)硫代乙?；衔?。例如，在非質(zhì)子傳遞溶劑例如二氯甲烷中，在偶合劑例如2-氟-1-甲基吡啶鎓對甲苯磺酸鹽、EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽)、羰基二咪唑、EEDQ(1-乙氧羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉)、DCC或氰基磷酸二乙酯存在下，可將適宜的式(17)、(18)或(32)硫醇化合物與適宜的式(68)酸反應(yīng)，生成適宜的式(61)硫代乙?；衔?。
如1995年8月17日公開的PCT國際公開WO95/21839所述，其中R8是-S-G基團的式(1)化合物可用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員適宜和公知的方法合成。以式(71)化合物代表的這些化合物的一般合成方法如上述反應(yīng)路線Q所示，除非另有說明，其中所有取代基均如上定義。
反應(yīng)路線Q
式(69)二硫化物可用本領(lǐng)域公知方法或者本領(lǐng)域公知的相似方法制備(Roque,B.P.等人，J.Med.Chem.33,2473-2481(1992))。
反應(yīng)路線Q中，適宜的式(69)二硫化物可與適宜的式(17)、(18)或(32)硫醇反應(yīng)，生成式(70)二硫化物或其被保護形式。適宜的式(70)二硫化物是其中G是式(1)最終產(chǎn)物所需的或者脫保護后所得G是式(1)最終產(chǎn)物所需的那類二硫化物。
例如，適宜的式(69)二硫化物與適宜的式(17)、(18)或(32)硫醇反應(yīng)。所述反應(yīng)在適宜溶劑例如乙醇、甲醇、二氯甲烷或者乙醇或甲醇和二氯甲烷的混合物中進行。在進行反應(yīng)之前，所述溶劑通過通入氮氣流脫氣15分鐘。所述反應(yīng)用1.0-4.0摩爾當(dāng)量的適宜式(69)化合物進行。所述反應(yīng)在0℃至所述溶劑的回流溫度下進行，優(yōu)選的是10℃-30℃。所述反應(yīng)通常需要1-48小時。所述產(chǎn)物可通過本領(lǐng)域公知方法分離，例如萃取法、蒸發(fā)法和沉淀法。適宜的式(70)二硫化物或被保護的二硫化物可經(jīng)色譜法和重結(jié)晶法純化。
式(70)被保護的二硫化物可以用本領(lǐng)域公知方法脫保護。如T.Greene在Protecting Groups in Organic Synthesis中所述，在連續(xù)反應(yīng)中使用保護基時，選擇使用和脫除保護基以及脫除保護基是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的和可以理解的。
下列實施例闡明了反應(yīng)路線A-Q所述典型合成方法?？梢岳斫獾氖牵@些實施例只用于說明目的，而對本發(fā)明范圍不起任何限定作用。本文所用下列術(shù)語具有下列含義“g”指克；“mol”指摩爾；“mmol”指毫摩爾；“L”指升；“ml”指毫升；“bp”指沸點；“℃”指攝氏度；“mmHg”指毫米汞柱；“mp”指熔點；“mg”指毫克；“μM”指微摩爾；“μg”指微克；“h”或“hrs”指小時；“min”指分鐘；“HOBt”指羥基苯并三唑；“EDC”指1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺；“NCEP”指N-乙酯基苯鄰二甲酰亞胺和“MTBE”指甲基叔丁基醚。
實施例12H-異氮雜茚-2-己酰胺，N-[六氫-1-[2-(甲氨基)-2-氧代-1-(苯甲基)乙基]-2-氧代-5-苯基-1H-吖庚因-3-基]-1,3-二氫-α-巰基-1,3-二氧代-，[3S-[1(R*),3α,5α]]-的制備；化合物Ⅱ-1(MDL108,180)
步驟1.1
反應(yīng)路線C步驟a；將Boc-Phe-OH(8.00g,30.2mmol)的四氫呋喃溶液冷卻至-30℃并依次用N-甲基嗎啉(3.5ml,32mmol)和氯甲酸異丁基酯(4.5ml,35mmol)處理。10分鐘后，反應(yīng)混合物用40％甲胺水溶液(13ml,380mmol)處理，攪拌2小時并濃縮。殘余物溶于二氯甲烷(125ml)并用1N鹽酸和飽和NaHCO3(每次75ml)洗滌。將有機層干燥并濃縮，得到所述標(biāo)題化合物粗產(chǎn)物，無需進一步純化使用。
步驟1.1.1
反應(yīng)路線C步驟b；室溫下，將實施例1.1所述粗產(chǎn)物的二氯甲烷(100ml)和三氟乙酸(20ml)溶液攪拌3小時并濃縮。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀通過與四氯化碳和甲苯共蒸發(fā)除去殘留的三氟乙酸。用乙醚研制粘著殘余物，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物(9.12g,100％)。
步驟1.2
反應(yīng)路線D步驟a；于H2O(100ml)中，用Na2CO3(6.84g,64mmol)和NCEP(14.0g,64mmol)處理6-氨基己酸。將反應(yīng)混合物于環(huán)境溫度下攪拌90分鐘并用乙酸乙酯(100ml)萃取。將水層在冰浴中冷卻并用濃鹽酸酸化至pH～1，過濾收集白色沉淀物，用水洗滌并于真空烘箱中干燥過夜，得到6-苯二甲酰亞氨基己酸(12.7g，產(chǎn)率為80％)。
步驟1.2.1
反應(yīng)路線D步驟b；于0℃下，將6-苯二甲酰亞氨基己酸(12.7g,48mmol)和無水紅磷(1.95g,63mmol)滴加溴(12.7ml,246mmol)處理，將所得塊狀混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒓訜嶂?0℃3小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，傾入含有NaHSO3的水(300ml)中，并用固體NaHCO3中和。水層用乙醚(150ml)洗滌并用濃鹽酸酸化。過濾收集暗黃色沉淀物并干燥，得到2-溴-6-苯二甲酰亞氨基己酸(15g，產(chǎn)率為91.5％)。
步驟1.3
反應(yīng)路線A步驟a；于0℃下，將二異丙基胺(16.2ml,116mmol)的四氫呋喃(100ml)溶液滴加正丁基鋰(44ml,110mmol,2.5M-己烷)處理。攪拌30分鐘，將溶液冷卻至-78℃并用套管加入4-苯基環(huán)己酮(17.42g,100mmol)的四氫呋喃(40ml)溶液。1小時后，用三甲基氯硅烷(14ml,110mmol)使反應(yīng)驟冷。將混合物攪拌45分鐘并除去冷卻浴。2小時后，將反應(yīng)混合物傾入冰水(100ml)和飽和NaHCO3水溶液(100ml)中，混合物用戊烷(300ml)萃取。有機層用鹽水(150ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮，得到暗黃色油狀甲硅烷基烯醇醚(25.6g,104％)。
將上述所得甲硅烷基烯醇醚粗產(chǎn)物溶于二氯甲烷(200ml)/甲醇(300ml)溶劑混合物中，冷卻至-78℃并用臭氧處理，直至變成恒定的藍色(55分鐘)。向溶液中通入20分鐘氬氣由所述反應(yīng)系統(tǒng)中清洗掉過量臭氧，加入甲硫醚(40ml,540mmol)并令反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度過夜。16小時后，將溶液濃縮至約150ml并加入原甲酸三甲酯(50ml,460mmol)和乙酰氯(10ml,140mmol)。將混合物回流加熱4小時并冷卻至環(huán)境溫度。加入氫氧化鉀(22g,600mmol)水(100ml)溶液，將反應(yīng)混合物于60℃下加熱2小時，冷卻至環(huán)境溫度，濃縮并于MTBE(2×125ml)和水(75ml)之間配分。將水層于冰浴中冷卻并用濃鹽酸水溶液酸化至pH=1～2，用二氯甲烷(250ml)萃取。有機層用鹽水(75ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮，得到暗桔黃色油狀所述標(biāo)題化合物(20.3g，產(chǎn)率為80％)。
步驟1.3.1
反應(yīng)路線A步驟b將實施例1.3所述產(chǎn)物(16.0g,63.4mmol)于四氫呋喃(200ml)中用三乙胺(10.6ml,76.1mmol)處理并冷卻至-78℃。滴加三甲基乙酰氯(8.6ml,70mmol)，15分鐘后，將混合物轉(zhuǎn)移至冰浴中45分鐘，然后冷卻至-78℃。所得漿狀物經(jīng)套管用含鋰鹽助劑(通過向(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮(12.94ml,73.0mmol)的四氫呋喃(200ml)溶液中加入正丁基鋰(28.4ml,71.0mmol,2.5M-己烷)制備)溶液處理，冷卻至-78℃并攪拌1小時。令反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度過夜，18小時后，加入水(5ml)并將溶液濃縮。殘余物于飽和氯化銨水溶液(75ml)和二氯甲烷(200+125ml)之間分配，將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮。粗產(chǎn)物用己烷∶乙酸乙酯(3∶1-3∶2)經(jīng)快速色譜法純化，得到淺褐色油狀所需?；鶉f唑烷酮(22.13g,85％)。
步驟1.3.2
反應(yīng)路線A步驟c；將雙(三甲基甲硅烷基)氨化鉀(58ml,29mmol,0.5M-甲苯)的四氫呋喃(50ml)溶液冷卻至-78℃并經(jīng)套管滴加預(yù)先冷卻至-78℃的?；鶉f唑烷酮(10.58g,25.71mmol)的四氫呋喃(100ml)溶液處理。30分鐘后，于10分鐘內(nèi)經(jīng)套管加入預(yù)先冷卻至-78℃的三異丙基苯磺?；B氮化物(9.90g,32mmol)的四氫呋喃(50ml)溶液，將溶液攪拌3分鐘，用乙酸(6.9ml,120mmol)驟冷，攪拌5分鐘并轉(zhuǎn)移至油浴(35℃)中。1.5小時后，將懸浮液冷卻至環(huán)境溫度并向所得溶液中加入水。將溶液濃縮，殘余物于飽和氯化銨水溶液(75ml)和乙酸乙酯(350ml)之間分配。有機層用飽和NaHCO3水溶液∶鹽水(1∶1=75ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮。殘余物用氯仿/二氯甲烷研制并過濾，將濾液濃縮，粗產(chǎn)物用己烷∶乙酸乙酯(3∶1-3∶2)經(jīng)快速色譜法純化，得到淺黃色油狀所需α-疊氮基?；鶉f唑烷酮(9.96g,86％)。
步驟1.3.3
反應(yīng)路線A步驟d；將α-疊氮基酰基噁唑烷酮(9.86g,21.8mmol)的四氫呋喃(300ml)/水(90ml)溶液于冰浴中冷卻并依次用30％H2O2水溶液(8.8ml,77mmol)，然后用氫氧化鋰(1.05g,43.8mmol)處理。將混合物于環(huán)境溫度下攪拌1.5小時并加入Na2SO3(12g,95mmol)水(68ml)溶液。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去四氫呋喃，水層用乙醚(2×125ml)萃取，于冰浴中冷卻，用6N HCl酸化至pH1-2并用二氯甲烷(2×200ml)萃取。將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮，得到淺黃色油狀所需酸(7.19g,112％)。
環(huán)境溫度下，將所生成的α-疊氮基酸(21.8mmol)在四氫呋喃(120ml)中依次用2-三甲基甲硅烷基乙醇(9.4ml,66mmol)、吡啶(5.3ml,66mmol)和EDC(8.40g,44mmol)處理。將混合物攪拌2.5天并濃縮。將混合物溶于MTBE(150ml)，溶液依次用5％硫酸水溶液、飽和NaHCO3和鹽水(各50ml)洗滌。將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮，殘余物用己烷∶乙酸乙酯(7∶1-6∶1)經(jīng)快速色譜法純化，得到無色油狀所述標(biāo)題化合物(7.09g,83％)。
步驟1.3.4
反應(yīng)路線A步驟e；將實施例1.3.3所述產(chǎn)物(3.00g,7.62mmol)的乙酸(30ml)、水(10ml)和四氫呋喃(10ml)溶液于60℃油浴中加熱4小時。將溶液冷卻至環(huán)境溫度并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(水浴溫度=40℃)濃縮，殘余物于MTBE(125ml)和鹽水(50ml)之間分配，有機層用飽和NaHCO3水溶液∶鹽水(1∶1=50ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮。殘余物用己烷∶乙酸乙酯(6∶1)經(jīng)快速色譜法純化，得到無色油狀所述標(biāo)題化合物(2.52g,95％)。
反應(yīng)路線A步驟f；將實施例1.3.4所述產(chǎn)物(717mg,2.06mmol)和步驟1.1.1所述胺鹽產(chǎn)物(1.81g,6.19mmol)的甲醇(20ml)溶液用粉狀活化3A分子篩處理。30分鐘后，加入氰基硼氫化鈉(0.73ml,0.73mmol,1.0M-THF)，將反應(yīng)混合物攪拌2.5小時，經(jīng)硅藻土(CeliteR)層過濾并濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(100ml)并用飽和NaHCO3水溶液∶鹽水(1∶1=30ml)洗滌，將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮。產(chǎn)物混合物用己烷∶乙酸乙酯(1∶1-1∶2)經(jīng)快速色譜法純化，得到粘性無色油狀所述標(biāo)題化合物(737mg,70％)。
步驟1.3.6
反應(yīng)路線A步驟g；于環(huán)境溫度下，將實施例1.3.5所述產(chǎn)物(737mg,1.45mmol)的四氫呋喃(15ml)溶液用四正丁基氟化銨(2.2ml,2.2mmol,1.0M-THF)處理并攪拌。3小時后，將溶液濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯(125ml)并用10％HCl水溶液(30ml)和鹽水(25ml)洗滌，將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮，得到氨基酸粗產(chǎn)物(0.72g,122％)。將此產(chǎn)物溶于四氫呋喃(27ml)，于冰浴中冷卻，并依次用N-甲基嗎啉(0.35ml,3.2mmol)和氯甲酸異丁基酯(0.24ml,1.85mmol)處理。將懸浮液攪拌2.5小時并過濾。所述鹽用無水四氫呋喃洗滌并將濾液濃縮。殘余物用己烷∶乙酸乙酯(1∶1-2∶3)經(jīng)徑向色譜法純化，分別得到所述標(biāo)題化合物的順式-(230mg,41％)和反式-(290mg,51％)異構(gòu)體。
步驟1.3.7
反應(yīng)路線A步驟h1；將實施例1.3.6所述產(chǎn)物的順式-異構(gòu)體(145mg,0.370mmol)的甲醇(6ml)溶液脫氣(真空-N2)并用1,3-丙二硫醇(0.20ml,1.99mmol)和三乙胺(0.27ml,1.94mmol)處理。將溶液攪拌66小時并濃縮，殘余物用二氯甲烷∶甲醇(100∶0，然后95∶5-90∶10)經(jīng)快速色譜法純化，得到無色油狀所述標(biāo)題化合物(140mg,104％)。
步驟1.3.8
反應(yīng)路線A步驟i1；于環(huán)境溫度下，將實施例1.3.7所述產(chǎn)物(135mg,0.370mmol)、2-溴-6-苯二甲酰亞氨基己酸(189mg,0.56mmol，實施例1.2.1)、EDC(106mg,0.55mmol)和HOBt(75mg,0.56mmol)在二氯甲烷(8ml)中的混合物攪拌18小時。將反應(yīng)混合物濃縮并于乙酸乙酯(60ml)和5％硫酸水溶液(15ml)之間分配，有機層用飽和NaHCO3，然后用鹽水(各為15ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮。粗產(chǎn)物用己烷∶乙酸乙酯(2∶3-1∶3)經(jīng)快速色譜法純化，得到白色泡沫狀所述標(biāo)題化合物(220mg,87％)。
步驟1.3.9
反應(yīng)路線A步驟j1；將對甲氧基芐硫醇(0.09ml,0.65mmol)的二甲基甲酰胺(3ml)溶液脫氣(真空-N2)并用氫化鈉(20mg,0.50mmol,60％油分散液)處理。1小時后，用套管向所述硫醇鹽中加入實施例1.3.8所述產(chǎn)物(220mg,0.320mmol)的二甲基甲酰胺(2ml+3ml洗液)溶液，加入一刮勺尖的四正丁基碘化銨作催化劑。將反應(yīng)混合物攪拌20小時并加入飽和氯化銨水溶液(25ml)和水(5ml)，該溶液用乙酸乙酯(75ml)萃取，有機層用鹽水(25ml)洗滌。合并的水層用乙酸乙酯(50ml)反萃取，將合并的有機層干燥(Na2SO4)并濃縮，于高真空下放置。將粗產(chǎn)物用二氯甲烷∶乙酸乙酯(2∶1-1∶2)經(jīng)快速色譜法純化，得到白色泡沫狀所述標(biāo)題化合物(194mg,80％)。
反應(yīng)路線A步驟k1；將實施例1.3.9所述產(chǎn)物(194mg,0.255mmol)、乙酸汞(102mg,0.32mmol)和苯甲醚(0.28ml,2.55mmol)在二氯甲烷(8ml)中的混合物于冰浴中冷卻，脫氣(真空-N2)并用三氟乙酸(2.5ml)處理。4小時后，向反應(yīng)混合物中通入H2S氣15分鐘。將黑色沉淀物過濾并用二氯甲烷洗滌，將濾液濃縮，通過與四氯化碳共蒸發(fā)除去殘余的三氟乙酸。殘余物用己烷研制，得到淺褐色固體狀所述標(biāo)題化合物(MDL108,180)(150mg,92％)。IR(KBr)702,721,752,962,1045,1173,1209,1366,1398,1437,1494,1643,1711,1773,2862,2940,3028,3380cm-1；1H NMR(CDCl3)δ1,34-1.81(m,6),1.87-2.11(m,4),2.82(d,3,J=4.9),2.90-3.06(m,2),3.13-3.34(m,3),3.48(dd,I,J=11,16),3.67(t,2,J=7.3),3.69-3.76(m,1),4.59-4.66(m,1),5.03(t,1,J=8.1),6.32-6.39(m,1),7.00-7.03(m,2),7.15-7.35(m,8),7.60-7.65(m,1),7.68-7.73(m,2),7.78-7.84(m,2).MW計算值C36H40N4O5S=640.8.實測值(M+H+)=641.
實施例22H-異氮雜茚-2-己酰胺，N-[六氫-1-[2-(甲氨基)-2-氧代-1-(苯甲基)乙基]-2-氧代-5-苯基-1H-吖庚因-3-基]-1,3-二氫-α-巰基-1,3-二氧代-，[3S-[1(R*),3α,5β]]-的制備；化合物Ⅲ-
步驟2.1
反應(yīng)路線A步驟h2；用實施例1.3.6所述反式-異構(gòu)體(290mg,0.740mmol)按照實施例1.3.7所述方法制備。用二氯甲烷∶甲醇(100∶0，然后95∶5-90∶10)經(jīng)快速色譜法純化，得到所述標(biāo)題化合物(249mg,92％)。
反應(yīng)路線A步驟i2；于環(huán)境溫度下，將實施例2.1所述產(chǎn)物(125mg,0.342mmol)、2-溴-6-苯二甲酰亞氨基己酸(189mg,0.56mmol)、EDC(106mg,0.55mmol)和HOBt(75mg,0.56mmol)在二氯甲烷(8ml)中的混合物攪拌17小時。將反應(yīng)混合物濃縮并于乙酸乙酯(60ml)和5％硫酸水溶液(20ml)之間配分，有機層用飽和NaHCO3∶鹽水(1∶1=20ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮。粗產(chǎn)物用己烷∶乙酸乙酯(2∶3-1∶2)經(jīng)快速色譜法純化，得到白色泡沫狀所述標(biāo)題化合物(187mg,80％)。
步驟2.3
反應(yīng)路線A步驟j2；將實施例2.2所述產(chǎn)物(150mg,0.22mmol)、對甲氧基芐硫醇(0.08ml,0.57mmol)和四正丁基碘化銨(一刮勺尖，催化劑)的二甲基甲酰胺(3ml)溶液脫氣并于環(huán)境溫度下用碳酸銫(94mg,0.29mmol)處理。24小時后，加入飽和氯化銨水溶液(20ml)和水(5ml)，該溶液用乙酸乙酯(75ml)萃取，有機層用鹽水(2×20ml)洗滌。將合并的有機層干燥(Na2SO4)，濃縮，并于高真空下放置。將粗產(chǎn)物用己烷∶乙酸乙酯(2∶3-1∶2)經(jīng)快速色譜法純化，得到白色泡沫狀所述標(biāo)題化合物(160mg,77％)。
步驟2.4
反應(yīng)路線A步驟k2；將實施例2.3所述產(chǎn)物(160mg,0.210mmol)、乙酸汞(84mg,0.26mmol)和苯甲醚(0.23ml,2.10mmol)在二氯甲烷(6.6ml)中的混合物于冰浴中冷卻，脫氣并用三氟乙酸(3ml)處理。4小時后，向反應(yīng)混合物中通入H2S氣15分鐘。將黑色沉淀物過濾并用二氯甲烷洗滌，將濾液濃縮，通過與四氯化碳共蒸發(fā)除去殘余的三氟乙酸。殘余物用己烷∶乙酸乙酯(1∶1-1∶2)經(jīng)快速色譜法純化，得到淺褐色固體狀所述標(biāo)題化合物(MDL106,540)(96mg,71％)。
IR(KBr)702,721,1337,1366,1398,1437,1454,1468,1497,1530,1645,1678,1710,1770,2938,3380cm-1；1H NMR(CDCl3)δ1.35-1.80(m,7),1.94-2.10(m,2),1.96(d,0.5,J=8.7),1.97(d,0.5,J=8.8),2.50-2.70(m,2),2.81(d,1.5,J=4.8),2.82(d,1.5,J=4.8),2.91-3.00(m,1),3.22-3.29(m,1),3.31-3.39(m,1),3.47-3.58(m,1),3.67(t,2,J=7.2),3.72-3.80(m,1),4.82-4.90(m,1),5.25(t,l,J=7.8),6.07-6.10(m,1),7.15-7.30(m,10),7.48-7.55(m,1),7.66-7.72(m,2),7.78-7.84(m,2).MW計算值C36H40N4O5S=640.8.實測值(M+H)+=641.
實施例32H-異氮雜茚-2-己酰胺，N-[六氫-4-[2-(甲氨基)-2-氧代-1-(苯甲基)乙基]-5-氧代-1-(苯甲基)-1H-1,4-二氮雜-6-基]-1,3-二氫-α-巰基-1,3-二氧代-，[6S-[4(R*),6R*(R*)]]-的制備；化合物Ⅳ-1
反應(yīng)路線B步驟b；于1.5小時內(nèi)，將N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸β-內(nèi)酯(1.00g,5.82mmol；Pansare,S.V.等人，Org.Synth.70,10(1991))的CH3CN(100ml)溶液滴加到烯丙基胺(10ml,133mmol)的CH3CN(200ml)溶液中。1小時后，將溶液濃縮，固體殘余物用CH3CN研制，得到白色固體狀所需氨基酸(648mg,46％)。將濾液濃縮，得到白色固體狀羥基酰胺副產(chǎn)物(632mg,44％)。
步驟3.2
反應(yīng)路線B步驟c；于環(huán)境溫度下，將步驟3.1所述氨基酸產(chǎn)物(640mg,2.62mmol)的飽和NaHCO3水溶液(7.5ml)和水(1ml)溶液用氯甲酸芐基酯(0.42ml,2.94mmol)的丙酮(1ml)溶液處理5分鐘。將渾濁反應(yīng)混合物攪拌2小時，所得溶液于MTBE(40ml)和水(25ml)之間配分。將水層于冰浴中冷卻，用5％HCl水溶液調(diào)至約pH2，用NaCl飽和并用二氯甲烷(2×45ml)萃取。將合并的有機層干燥(Na2SO4)并濃縮，得到無色油狀CBz-保護的氨基酸(1.14g)。將CBz-保護的氨基酸(1.14g)的二氯甲烷(100ml)和三氟乙酸(20ml)溶液于環(huán)境溫度下攪拌1小時并濃縮，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀與四氯化碳共蒸發(fā)除去殘余的三氟乙酸，得到氨基酸t(yī)fa鹽(1.27g)。
將所述氨基酸t(yī)fa鹽(1.27g)的水(25ml)溶液、二噁烷(10ml)和固體Na2CO3(306mg,2.88mmol)用NCEP(945mg,4.32mmol)處理并于40℃下攪拌。4小時后，再加入Na2CO3(306mg)，將混合物由約pH4調(diào)至約pH8-10。加入NCEP(630mg,2.87mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌16小時并濃縮。加入水(40ml)，混合物用MTBE(40ml)萃取，將水層于冰浴中冷卻，用6N HCl酸化至約pH1，并用二氯甲烷(60ml)，然后用乙酸乙酯(60ml)萃取。將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮，產(chǎn)物混合物用己烷∶乙酸乙酯∶乙酸(1∶1∶0.1)經(jīng)快速色譜法純化，得到所需苯二甲酰亞氨基酸(1.2g)。
步驟3.3
反應(yīng)路線B步驟d；于環(huán)境溫度下，將步驟3.2所述苯二甲酰亞氨基酸產(chǎn)物(1.2g)于四氫呋喃(25ml)和二氯甲烷(10ml)中依次用2-三甲基甲硅烷基乙醇(1.2ml,8.4mmol)、吡啶(0.68ml,8.4mmol)和EDC(1.26g,6.55mmol)處理。將混合物攪拌18小時并濃縮，將殘余物溶于MTBE(75ml)，溶液依次用5％硫酸水溶液和飽和NaHCO3∶鹽水=1∶1(各40ml)洗滌，將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮。殘余物用二氯甲烷∶乙酸乙酯(100∶0-95∶5)經(jīng)快速色譜法純化，得到無色油狀所需酯(1.12g，總產(chǎn)率為84％)。
步驟3.4
反應(yīng)路線B步驟e；于氬氣氛下，將步驟3.3所述酯產(chǎn)物(1.12g,2.20mmol)的二氯甲烷(30ml)和甲醇(3ml)溶液冷卻至-78℃。向所述溶液中通入臭氧，直至變成恒定的藍色。向溶液中通入15分鐘氬氣將過量臭氧清洗掉。加入甲硫醚(3ml)并令溶液逐漸溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度過夜。15小時后，反應(yīng)混合物用二氯甲烷(100ml)稀釋并用鹽水(40ml)洗滌，將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮。產(chǎn)物混合物用己烷；乙酸乙酯(3∶2-1∶1)經(jīng)快速色譜法純化，得到所需醛(1.11g,99％)。
反應(yīng)路線B步驟f；將醛(1.11g,2.17mmol)和步驟1.1.1胺鹽產(chǎn)物(1.84g,6.29mmol)的甲醇(23ml)溶液攪拌10分鐘并用氰基硼氫化鈉(2.2ml,2.2mmol,1.0M-THF)處理。將反應(yīng)混合物攪拌3小時并濃縮，將殘余物溶于二氯甲烷(1250ml)并用飽和NaHCO3∶鹽水(1∶1=40ml)洗滌。將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮。產(chǎn)物混合物用己烷∶乙酸乙酯(3∶2-1∶2)經(jīng)快速色譜法純化，得到白色泡沫狀所需氨基-酯(1.32g,90％)。
步驟3.6
反應(yīng)路線B步驟g；于環(huán)境溫度下，將步驟3.5所述甲硅烷基酯產(chǎn)物(1.30g,1.93mmol)的四氫呋喃(20ml)溶液用四正丁基氟化銨(3.0ml,3.0mmol,1.0M-THF)處理并攪拌。1.5小時后，將溶液濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯(125ml)并用10％鹽酸水溶液(30ml)和鹽水(25ml)洗滌，將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮，得到氨基酸粗產(chǎn)物(1.54g)。將此產(chǎn)物溶于四氫呋喃(36ml)，于冰浴中冷卻，并依次用N-甲基嗎啉(0.47ml,4.27mmol)和氯甲酸異丁基酯(0.32ml,2.47mmol)處理。將懸浮液攪拌4小時并經(jīng)硅藻土層過濾。所述鹽用無水四氫呋喃洗滌并將濾液濃縮。殘余物用己烷∶乙酸乙酯(3∶2-1∶1)經(jīng)快速色譜法純化，得到所述內(nèi)酰胺(954mg,89％)。
步驟3.7
反應(yīng)路線B步驟h；將步驟3.6所述Z-內(nèi)酰胺產(chǎn)物(954mg,1.72mmol)的甲醇(17ml)溶液脫氣(真空-N2)，用10％Pd-C(500mg)處理并在H2氣氛下(氣球)攪拌15小時。再加入催化劑(250mg)，將混合物攪拌7小時，脫氣并過濾。將濾液濃縮，得到所需產(chǎn)物(720mg,100％)。
步驟3.8
反應(yīng)路線B步驟i；將步驟3.7所述胺產(chǎn)物(720mg,1.71mmol)的CH3CN(10ml)和二甲基甲酰胺(3ml)溶液用芐基溴(0.30ml,2.5mmol)和固體K2CO3(130mg,0.94mmol)處理。18小時后，將混合物濃縮并將殘余物于乙酸乙酯(75ml)和水(15ml)之間配分，將有機層干燥(Na2SO4)并濃縮。產(chǎn)物混合物用己烷∶乙酸乙酯(1∶2)經(jīng)快速色譜法純化，得到所需產(chǎn)物(500mg,57％)。
反應(yīng)路線B步驟j；于環(huán)境溫度下，將步驟3.8所述苯二甲酰亞氨基內(nèi)酰胺(500mg,0.979mmol)的甲醇(10ml)溶液用水合肼(2.0ml,2.0mmol,1.0M-甲醇)處理。將反應(yīng)混合物攪拌72小時并經(jīng)硅藻土過濾。將濾液濃縮，得到一白色固體(400mg,107％)。
步驟3.10
反應(yīng)路線B步驟k；將步驟3.9所述胺(400mg,1.05mmol)和2R-溴-6-苯二甲酰亞氨基己酸(500mg,1.47mmol的二甲基甲酰胺(5ml)溶液依次用N-甲基嗎啉(0.33ml,3.0mmol)、EDC(288mg,1.50mmol)和HOBt(203mg,1.50mmol)處理。將反應(yīng)混合物于環(huán)境溫度下攪拌18小時并濃縮。殘余物于乙酸乙酯(75ml)和鹽水(15ml)之間配分，干燥(Na2SO4)并濃縮。粗產(chǎn)物用乙酸乙酯經(jīng)快速色譜法純化，得到泡沫狀所需的溴代酰胺(500mg,71％)。
步驟3.11
反應(yīng)路線B，步驟l；將步驟3.10溴代酰胺(500mmg,0.714mmol)和對甲氧基芐基硫醇(0.35ml,2.5mmol)的二甲基甲酰胺(5ml)溶液脫氣(真空-N2)，并在室溫下用碳酸銫(400mg,1.22mmol)處理。18小時后，將有機懸液濃縮，使殘余物在乙酸乙酯(7.5ml)和水(15ml)中分配。有機層干燥(Na2SO4)濃縮。將粗產(chǎn)物用快速色譜法純化，以乙酸乙酯洗脫，得到α-硫代酰胺(326mg,59％)。
步驟3.12
反應(yīng)路線B步驟m；將步驟3.11α-硫代酰胺(326mmg,0.420mmol)、乙酸汞(234mg,0.734mmol)和苯甲醚(0.45ml,4.2mmol)在二氯甲烷(12ml)中的混合物于冰浴中冷卻，脫氣(真空-N2)并用三氟乙酸(5ml)處理。3小時后，向反應(yīng)混合物中通入H2S氣15分鐘。將黑色沉淀物過濾并用二氯甲烷洗滌，將濾液濃縮，通過與四氯化碳共蒸發(fā)除去殘余的三氟乙酸。殘余物用己烷研制，得到褐色固體狀產(chǎn)物混合物(350mg)。此混合物經(jīng)反相制備HPLC純化，用30％CH3CN/水(0.1％tfa)作洗脫劑，得到所需產(chǎn)物(130mg,47％)。
實施例4化合物Ⅱ-2的制備
步驟4.1
反應(yīng)路線C步驟a；用乙胺經(jīng)實施例1步驟1.1所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟4.1.1
反應(yīng)路線C步驟b；用實施例4步驟4.1所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.1.1所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟4.2
反應(yīng)路線A步驟f；用實施例4步驟4.1.1所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.5所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟4.3
反應(yīng)路線A步驟g；用實施例4步驟4.2所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.6所述方法制備，得到所述標(biāo)題順式和反式化合物。
步驟4.4
反應(yīng)路線A步驟h1；用實施例4步驟4.3所述順式-異構(gòu)體產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.7所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟4.5
反應(yīng)路線A步驟i1；用實施例4步驟4.4所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.8所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟4.6
反應(yīng)路線A步驟j1；用實施例4步驟4.5所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.9所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟4.7
反應(yīng)路線A步驟k1；用實施例4步驟4.6所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.10所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
實施例5化合物Ⅲ-9的制備
步驟5.1
反應(yīng)路線C步驟a；用Boc-Val-OH經(jīng)實施例1步驟1.1所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟5.1.1
反應(yīng)路線C步驟b；用實施例5步驟5.1所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.1.1所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟5.2
反應(yīng)路線A步驟f；用實施例5步驟5.1.1所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.5所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟5.3
反應(yīng)路線A步驟g；用實施例5步驟5.2所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.6所述方法制備，得到所述順式和反式標(biāo)題化合物。
步驟5.4
反應(yīng)路線A步驟h1；用實施例5步驟5.3所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.7所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟5.5
反應(yīng)路線A步驟i1；用實施例5步驟5.4所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.8所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟5.6
反應(yīng)路線A步驟j1；用實施例4步驟4.5所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.9所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟5.7
反應(yīng)路線A步驟k1；用實施例5步驟5.6所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.10所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
實施例6化合物Ⅳ-28的制備
步驟6.1
反應(yīng)路線B步驟k；將實施例3步驟3.9所述胺產(chǎn)物與2-溴戊酸反應(yīng)，經(jīng)實施例3步驟3.10所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟6.2
反應(yīng)路線B步驟1；用實施例6步驟6.1所述產(chǎn)物經(jīng)實施例3步驟3.11所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟6.3
反應(yīng)路線B步驟m；用實施例6步驟6.2所述產(chǎn)物經(jīng)實施例3步驟3.12所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
實施例7化合物Ⅱ-37的制備
步驟7.1
反應(yīng)路線A步驟a；用4-甲基環(huán)己酮經(jīng)實施例1步驟1.3所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟7.2
反應(yīng)路線A步驟b；用實施例7步驟7.1所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.1所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟7.3
反應(yīng)路線A步驟c；用實施例7步驟7.2所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.2所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟7.4
反應(yīng)路線A步驟d；用實施例7步驟7.3所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.3所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟7.5
反應(yīng)路線A步驟e；用實施例7步驟7.4所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.4所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟7.6
反應(yīng)路線A步驟f；用實施例7步驟7.5所述產(chǎn)物和實施例1.1.1所述胺鹽產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.5所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟7.7
反應(yīng)路線A步驟g；用實施例7步驟7.6所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.6所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物的順式-和反式-異構(gòu)體。
步驟7.8
反應(yīng)路線A步驟h1；用實施例7步驟7.7所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.7所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟7.9
反應(yīng)路線A步驟i1；用實施例7步驟7.8所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.8所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟7.10
反應(yīng)路線A步驟j1；用實施例7步驟7.9所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.9所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
步驟7.11
反應(yīng)路線A步驟k1；用實施例7步驟7.10所述產(chǎn)物經(jīng)實施例1步驟1.3.10所述方法制備，得到所述標(biāo)題化合物。
在進一步實施方案中，本發(fā)明提供了一種抑制所需患者基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的式(1)化合物。
本文所用術(shù)語“患者”是指溫血動物或哺乳動物，包括豚鼠、狗、貓、鼠、小鼠、大鼠、兔和靈長類動物，包括人。當(dāng)降低活性MMP的生理作用對患者較有利時，則所述患者需要進行抑制MMP的治療。例如，當(dāng)所述患者患有以組織破裂或組織退化過度為特征的疾病時，則所述患者需要進行抑制MMP的治療，所述疾病例如有，但不僅限于，腫瘤疾病或癌癥；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；骨關(guān)節(jié)炎；慢性炎癥疾病，例如肺氣腫或慢性氣管炎；心血管疾病，例如動脈粥樣硬化；角膜潰瘍；牙病，例如牙齦炎或牙周疾病；以及神經(jīng)疾病，例如多發(fā)性硬化。
如何鑒別需要進行抑制MMP治療的患者是本領(lǐng)域技術(shù)人員力所能及的。本領(lǐng)域臨床醫(yī)師利用臨床試驗、身體檢查以及病史和家史可以很容易地識別出患有以組織破裂或組織退化過度為特征的疾病的患者。
式(1)化合物“有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量”是指給患者施用單或多劑量后能夠有效地緩解與MMP有關(guān)的癥狀并因此可有效地抑制MMP-誘導(dǎo)的組織破裂和/或MMP-誘導(dǎo)的組織退化的量。本文所用對MMP-介導(dǎo)的病癥“緩解癥狀”是指降低在沒有治療的情況下所預(yù)計的嚴(yán)重程度，而并不必指完全消除或治愈所述疾病。癥狀的緩解也包括預(yù)防在內(nèi)。
利用常規(guī)技術(shù)以及在類似條件下所獲得的觀測結(jié)果，可以較容易地確定有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量。在測定有效劑量時，要考慮的許多因素包括，但不僅限于，受治療者的種屬；體重、年齡以及一般的健康狀況；所涉及的特定疾??；所述疾病的復(fù)雜成都或嚴(yán)重程度；每一患者的反應(yīng)；所施用的特定化合物；用藥方式；所施用制劑的生物利用度特性；所選用的劑量形式以及所伴隨使用的藥療法。
有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的式(1)化合物通常在約0.1毫克每天每公斤體重(mg/kg/day)至約300毫克每天每公斤體重(mg/kg/day)范圍內(nèi)變化。優(yōu)選的日劑量約為1mg/kg至約100mg/kg。
本文所用術(shù)語“腫瘤疾病”是指以迅速增生的細胞生長或腫瘤為特征的異常狀態(tài)或病癥。特別是可用式(1)化合物治療的腫瘤疾病包括白血病例如，但不僅限于，急性成淋巴細胞瘤、慢性成淋巴細胞瘤、急性淋巴細胞瘤和慢性淋巴細胞瘤；癌和腺癌例如，但不僅限于，子宮癌、食道癌、胃癌、小腸癌、結(jié)腸癌、肺(小細胞和大細胞)癌、乳腺癌和前列腺癌；肉瘤例如，但不僅限于，骨瘤(oesteroma)、骨肉瘤、脂肪瘤、脂肉瘤、血管瘤和血管肉瘤；黑色瘤包括不含黑色素和黑色素黑色瘤；以及混合型腫瘤例如，但不僅限于，癌肉瘤、淋巴樣組織瘤、肉狀毛囊炎、細胞肉瘤和霍奇森病。特別優(yōu)選適于用式(Ⅰ)化合物治療的疾病包括癌和腺癌，特別是乳腺癌、前列腺癌和肺癌。
動脈粥樣硬化是以動脈粥樣硬化損害或斑塊發(fā)展和生長為特征的疾病。如何鑒別需要進行動脈粥樣硬化治療的患者，是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員力所能及的。例如，患有臨床上顯著的動脈粥樣硬化或者有發(fā)展成臨床上顯著的動脈粥樣硬化危險的每一個體都是需要對動脈粥樣硬化進行治療的患者。利用臨床試驗、身體檢查和病史/家史作為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員的臨床醫(yī)生可以容易地確定每個個體是否是需要進行動脈粥樣硬化治療的患者。
所用術(shù)語“慢性炎癥疾病”是指以在無可辨別的刺激物或微生物病原體存在下持續(xù)發(fā)炎為特征的疾病或病癥。特別適于用式(1)化合物治療的炎癥疾病包括肺氣腫、慢性氣管炎、哮喘、慢性梗阻性肺病和慢性炎癥。
在給患者進行治療時，式(1)化合物可以使所述化合物達到生物利用有效量的任何形式或方式施用，例如口服和非腸道施用。例如所述化合物可以經(jīng)口服、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、經(jīng)皮膚、局部、鼻內(nèi)、直腸等施用。通常優(yōu)選口服用藥。在制備制劑時，本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)所治療的疾病、發(fā)病階段以及其他相關(guān)條件很容易地選擇適宜的用藥形式和方式。Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Co.(1990)。
式(1)化合物可以以藥物組合物或藥劑的形式施用，所述藥物組合物或藥劑可通過將式(1)化合物與藥物上可接受的載體或賦形劑混合制備，它們的之間的比例和種類可根據(jù)所選擇的用藥方式以及常規(guī)的藥物慣例決定。
所述藥物組合物或藥劑可按照藥物領(lǐng)域公知的方法制備。所述載體或賦形劑可以是可用作所述活性成份載體或基質(zhì)的固體、半固體或液體材料。適宜的載體或賦形劑是本領(lǐng)域公知的。所述藥物組合物可以與口服或非腸道施用相適應(yīng)并可以以片劑、膠囊劑、栓劑、溶液、懸浮液、凝膠劑、軟膏、氣霧劑等形式給患者施用。
所述藥物組合物可以例如與惰性稀釋劑或者與可食用載體一起施用。它們可以被包覆成明膠膠囊或者壓制成片劑。當(dāng)口服用藥治療時，式(1)化合物可以與賦形劑混合并以片劑、糖錠劑、膠囊劑、酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙囊劑、口香糖等形式施用。這些制劑應(yīng)當(dāng)含有至少4％所述活性成份式(1)化合物，但可以根據(jù)具體的劑型而改變并且通?？山橛趩挝恢亓康?％至約70％之間。組合物中存在的所述活性成份的量應(yīng)能得到適于施用的單位劑型。
所述片劑、顆粒劑、膠囊劑、糖錠劑等還可含有一種或多種下列輔劑粘合劑，例如微晶纖維素、西黃蓍膠或明膠；賦形劑，例如淀粉或乳糖，也可以添加崩解劑例如藻酸、Primogel、玉米淀粉等；潤滑劑例如硬脂酸鎂或Sterotex；助流劑例如膠體二氧化硅；以及甜味劑例如蔗糖或糖精或者調(diào)味劑例如薄荷、水楊酸甲酯或橙味劑。當(dāng)單位劑型是膠囊劑時，除了上述各種類型的材料外，其還可含有液體載體例如聚乙二醇或脂肪油。其他單位劑型可含有調(diào)節(jié)所述單位劑型物理形態(tài)例如作為包衣的各種材料。因此，片劑或顆粒劑可以用糖、蟲膠或其他腸溶性包衣劑包衣。除了所述活性成份外，糖漿可含有作為甜味劑的蔗糖以及某種防腐劑、染料和著色劑及調(diào)味劑。用于制備這些各種組合物的材料應(yīng)當(dāng)具有用藥純度并且在所用量的情況下是無毒的。
當(dāng)非腸道施用治療時，式(1)化合物可以配制成溶液或懸浮液。這些制劑應(yīng)當(dāng)含有至少0.1％本發(fā)明化合物，但也可以在0.1-約50％重量比范圍內(nèi)變化。此類組合物中存在的所述活性成份的量應(yīng)能得到適宜的劑型。
根據(jù)式(1)化合物的溶解性以及其他特性，所述溶液或懸浮液還可含有一種或多種下列輔劑無菌稀釋劑例如注射用水、生理鹽水溶液、不揮發(fā)油、聚乙二醇、甘油、聚丙二醇或其他合成溶劑；抗茵劑例如苯甲醇或?qū)αu基苯甲酸甲酯；抗氧化物例如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑例如乙二胺四乙酸；緩沖劑例如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽以及毒性調(diào)節(jié)劑例如氯化鈉或葡萄糖。所述非腸道制劑可封裝于由玻璃或塑料制成的安瓿、一次性注射器或多劑量藥瓶中。
實施例8表征MMP抑制劑的方法A．MMP-3原的制備和活化按照Okada,Y.等人在J.Biol.Chem.26l,14245-14255(1986)中所述，由用巨噬細胞條件化培養(yǎng)基刺激的人類風(fēng)濕病滑液成纖維細胞培養(yǎng)基中純化出MMP-3原(EC3.4.24.17；溶基質(zhì)素-1)。于37℃下用胰蛋白酶(5μg/ml)處理MMP-3原30分鐘，隨后加入大豆胰蛋白酶抑制劑(50μg/ml)，得到活性MMP-3。將活化的MMP-3等分試樣于-20℃下貯存。B．MMP-3抑制常數(shù)(Ki)的測定在含有50mM Tris,pH7.6、0.2M NaCl、50mM CaCl2和0.02％Brij-35的檢測緩沖液中，于37℃下用產(chǎn)熒光底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2(Knight,C.G.等人，F(xiàn)EBS Lett,296,263-266(1992))對活化的MMP-3進行試驗。因MMP-3使Gly-Leu肽鍵裂解而引起的熒光增強可用Perkin-Elmer LS50B熒光計檢測(λex328,λem393，激發(fā)縫隙2.5，發(fā)射縫隙10)。分別于DMF和0.1％HCl-DMF中制備底物和抑制劑的備用溶液。當(dāng)測定MMP-3抑制劑的Ki值時，在0.1％HCl-DMF中制備一系列中間狀態(tài)抑制劑溶液并在含有2ml檢測緩沖液的石英比色杯中將1或2μl稀釋的抑制劑溶液與1μl2mM底物的DMF溶液混合。最后加入所述酶(10μl0.2μM MMP-3的檢測緩沖液稀釋液)以開始反應(yīng)。對可逆的、競爭性抑制劑進行Ki值常規(guī)測定時，在存在至少4種抑制劑濃度(兩種濃度在Ki以上，兩種濃度在Ki以下)情況下，用[S]=1μM(＜＜Km)和[MMP-3]=1nM測定起始速率。在這種條件下，所測定的Ki,app接近實際的Ki。C．MMP-2原的制備和活化由載帶了在其染色體中整合了MMP-2基因的酵母茵巴斯德畢赤氏酵母發(fā)酵肉湯中純化出重組的MMP-2。簡言之，用序列特異性寡核苷酸經(jīng)反向轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)，由人黑色瘤A375M細胞系通過RNA的反向轉(zhuǎn)錄，得到MMP-2的全長cDNA。所述核苷酸序列用Taq循環(huán)定序法測序。將所述eDNA連接到巴斯德畢赤氏酵母表達載體pHIL-D2中，由此在甲醇誘導(dǎo)的醇氧合酶啟動子控制下使MMP2原表達。表達構(gòu)建體用SalI或NsiI消化并用于轉(zhuǎn)化巴斯德畢赤氏酵母菌株KM71和SMD1168。在高細胞濃度發(fā)酵器中進行大規(guī)模培養(yǎng)稱為24S的選擇的克隆并用明膠-瓊脂糖凝膠4B(Pharmacia)由培養(yǎng)基上清液中純化出重組MMP-2。對于常規(guī)抑制作用的測定，在此步驟所述酶的純度已足夠了。但如果需要，所述酶也可經(jīng)AcA44硅膠過濾(Spectra)做進一步純化。D．MMP-2抑制常數(shù)(Ki)的測定在37℃下，通過用4-氨基苯基乙酸汞活化MMP-2原1小時，然后用Sephadex G-50自旋柱將4-氨基苯基乙酸汞除去，得到活化的MMP-2。在37℃下，于含有50mM Tris,pH7.6、0.2M NaCl、50mMCaCl2、0.02％Brij-35和50μM β-巰基乙醇的2.0ml檢測緩沖液中，用熒光底物，Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2對所述酶進行試驗，測定熒光的增強情況(λex328nm,λem393nm)。底物和抑制劑貯存溶液用DMF制成。最后加入所述酶以開始反應(yīng)。對可逆的、競爭性抑制劑進行Ki值常規(guī)測定時，在存在至少4種抑制劑濃度(兩種濃度在Ki以上，兩種濃度在Ki以下)情況下，用[S]=1μM(＜＜Km)和[MMP-2]=0.4nM測定起始速率。在這種條件下，所測定的Ki,app接近實際的Ki。E．MMP-12(巨噬細胞金屬彈性蛋白酶)的制備按照Shapiro,S.D.等人J.Biol.Chem.268,23824-23829(1993)所述，將MMP-12(EC3.4.24.65)克隆、表達并純化。自體活化產(chǎn)生完全加工過的酶活性形式。將MMP-12等分試樣于-70℃下貯存。F．MMP-12抑制常數(shù)(Ki)的測定用石英比色杯或用微滴定板測定MMP-12抑制劑的效力。于25℃下，在含有50mM Tris,pH7.6、0.2M NaCl、50mM CaCl2和0.02％Brij-35的檢測緩沖液中，用熒光底物，Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2(Knight,C.G.等人，F(xiàn)EBS Lett.296,263-266(1992))測定MMP-12的活性。用Perkin-Elmer LS50B熒光計(λex328nm,λem393nm，激發(fā)縫隙2.5，發(fā)射縫隙10)對比色杯試驗并且用Molecular Devices Fmax熒光板讀數(shù)器(λex320nm,λem405nm)對所述微滴定板試驗測定因MMP-12裂解Gly-Leu肽鍵引起的熒光增強情況。底物和抑制劑貯存溶液分別用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)和0.1％HCl-DMF制備。
通過制備一系列中間狀態(tài)抑制劑的0.1％HCl-DMF溶液并將所述抑制劑在含有2ml檢測緩沖液的石英比色杯中與底物混合(最終濃度為2μM)，利用比色杯法可測定Ki值。以2nM加入MMP-12以開始反應(yīng)并記錄進展曲線。對可逆的競爭性抑制劑進行Ki值常規(guī)測定時，在存在至少4種抑制劑濃度(兩種濃度在Ki以上，兩種濃度在Ki以下)情況下，用[S]=2μM(＜＜Km)和[MMP-12]=2nM測定起始速率。在這種條件下，所測定的Ki,app接近實際的Ki。
通過某些修飾按照比色杯法所述方法用微滴定板法也可測定Ki值。將每種化合物4種不同濃度的抑制劑(50μl檢測緩沖液)加到微滴定板的每一個井中并加入底物(100μl)，最終濃度達到4μM。加入MMP-12達到終濃度2nM(50μl)以開始反應(yīng)。每30秒鐘記錄一次底物的裂解情況記錄30分鐘并得到進展曲線。G．Ki值的計算用v0/vi=(1+[I]/Ki,app)和Ki=Ki,app/(1+[S]/Km)計算競爭抑制劑Ki值，其中v0是無抑制劑存在下的起始速率，vi是在濃度為[I]的抑制劑存在下的起始速率，[S]是底物濃度和Km是Michaelis常數(shù)。若觀測的結(jié)合作用很緩慢(即緩慢得接近結(jié)合平衡)，則寧可使用最終穩(wěn)定態(tài)速率而不是起始速率作為vi。表4
N.T.=未試驗用任何適宜的體內(nèi)藥物吸收模型可對式(1)化合物進行試驗。如Blanchard,J.等人在Journal of Pharmaceutical Sciences,79,411-414(1990)所述使用原位大鼠腸技術(shù)，可驗證式(1)化合物的體內(nèi)吸收情況。在該方法中，用原位大鼠腸灌注技術(shù)對式(1)化合物的吸收情況進行評價，其中對腸腔中消失情況、與灌注的空腸部分結(jié)合情況以及腸系膜(空腸)靜脈中的出現(xiàn)情況進行測定。
同樣，通過任何適宜的體內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶抑制模型可對式(1)化合物對基質(zhì)金屬蛋白酶的抑制作用進行試驗。用Davies,B.等人在Cancer Research 53,2087-2091(1993)中所述方法，可驗證式(1)化合物對基質(zhì)金屬蛋白酶的體內(nèi)抑制作用以及抗腫瘤作用，其中令人卵巢異種移植物在裸鼠中生長。所述酶的抑制作用通過腹水轉(zhuǎn)變成實體瘤時伴發(fā)的腫瘤生長緩慢以及使腫瘤基質(zhì)發(fā)展得以闡明。
同樣，通過將活化的基質(zhì)金屬蛋白酶與粘蛋白單體(Lark,M.W.等人，Biochem.Pharmacol.39,2041-2049(1990))或3H羧甲基轉(zhuǎn)鐵球蛋白(Chapman,K.T.等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.6,803-806(1996))注射到小鼠或大鼠的胸膜腔中并測定胸膜液中底物的降解情況，可測定式(1)化合物對基質(zhì)金屬蛋白酶的體內(nèi)抑制作用。對軟骨降解的體內(nèi)抑制作用可用佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型(Conway,J.G.等人，J.Exp.Med.182,449-457)或任何大量的動物關(guān)節(jié)炎模型闡明。
權(quán)利要求
1．下式化合物或其藥物上可接受的鹽、立體異構(gòu)體或水合物
其中R1是C1-C6烷基、W-(CH2)m-基團或Q-Z-(CH2)m-基團，其中W是苯二甲酰亞氨基；Z是化學(xué)鍵或是氧、NR6、C(O)NR6、NR6C(O)、NHC(O)NR6、OC(O)NR6、HNC(O)O或SO2NR6；Q是氫或Y-(CH2)n-基團，其中Y是氫、C6-C10芳基、C3-C9雜芳基、-C(O)OR6、-N(R6)2、嗎啉代、哌啶子基、吡咯烷子基或異氮雜茚基；R2是C1-C4烷基、-(CH2)p-(C3-C9)雜芳基基團，或者-(CH2)p-Ar1基團，其中Ar1是被選自鹵素、C1-C4烷基、-OR7、-N(R6)2、SO2N(R6)2或-NO2的取代基任意取代的苯基或萘基；R3是氫、C1-C6烷基、-CH2SCH2NHCOCH3、-(CH2)p-A基團、-(CH2)m-B基團或-CH2-D-R7基團，其中A是C6-C10芳基、C3-C9雜芳基或環(huán)己基；B是-N(R7)2、胍基、硝基胍基、-C(O)OR6或-C(O)NR6；和D是氧或硫；R4是氫或-(CH2)m-S(O)pX’(R6)2基團；R5是氫、C1-C6烷基或者R4和R5與它們所連接的氮原子一起哌啶子基、吡咯烷子基或異氮雜茚基；R6是氫或C1-C6烷基；R7是氫、C1-C4烷基或-(CH2)p-Ar2基團，其中Ar2是被選自鹵素、C1-C4烷基、-OR7、-N(R6)2、SO2N(R6)2或-NO2的取代基任意取代的苯基或萘基；R8是氫、-C(O)R7、-C(O)-(CH2)q-K基團或-S-G基團，其中K選自下列基團
G選自下列基團
和
R9和R10分別獨立地是C1-C4烷基或-(CH2)p-Ar2基團；R11是-CF3、C1-C10烷基或-(CH2)p-Ar2基團；R12是氫、C1-C6烷基、-CH2CH2S(O)pCH3或芳基烷基；R13是氫、羥基、氨基、C1-C6烷基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基、-CO2R17或-OC(O)R18，其中R17是氫、-CH2O-C(O)C(CH3)3、C1-C4烷基、-(CH2)p-Ar2基團或二苯甲基而R18是氫、C1-C6烷基或苯基；R14是獨立地選自氫、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或鹵素的1或2個取代基；R15是氫、C1-C6烷基或-(CH2)p-Ar2基團；R16是氫或C1-C4烷基；V1是O、S或NH；V2是N或CH；V3是化學(xué)鍵或-C(O)-；V4是-(CH2)w’-、O、S、NR7或NC(O)R11；X和X’分別獨立地是CH或N；m是2-4的整數(shù)；n是0或1-4的整數(shù)；p是0或1-2的整數(shù)；q是0或1-5的整數(shù)；t是1-2的整數(shù)；w是1-3的整數(shù)；而w’是0或整數(shù)1。
2．權(quán)利要求1化合物，其中X是CH。
3．權(quán)利要求2化合物，其中R2是C1-C4烷基或-(CH2)p-Ar基團，其中Ar是被F、Cl、C1-C4烷基、-NO2、-NH2或-OR7任意取代的苯基；和R4是氫。
4．權(quán)利要求3化合物，其中R3是氫、C1-C6烷基、苯基、芐基、1-萘基、2-萘基、環(huán)己基甲基、2-羥基苯基、3-羥基苯基、4-羥基苯基、2,3-二羥基苯基、2,4-二羥基苯基、3,4-二羥基苯基、4-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、3,4-二氯苯基、4-溴苯基、3,4-二溴苯基、4-氟苯基、3,4-二氟苯基、3-甲苯基、4-甲苯基、4-乙基苯基、4-異丙基苯基、3-氨基苯基、4-氨基苯基、3,4-二氨基苯基、N-甲基-4-氨基苯基、2-硝基苯基、4-硝基苯基、4-氨基芐基、4-羥基芐基、4-甲氧基芐基、3-氯芐基、4-氟芐基、3,4-二氯芐基、4-溴芐基、4-甲基芐基、-CH2SCH2NHCOCH3或下式化合物
或
5．權(quán)利要求4化合物，其中R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基而R8是氫。
6．權(quán)利要求2化合物，其中R1是W-(CH2)m-基團。
7．權(quán)利要求3化合物，其中R1是W-(CH2)m-基團。
8．權(quán)利要求5化合物，其中R1是W-(CH2)m-基團。
9．權(quán)利要求2化合物，其中R1是C1-C6烷基。
10．權(quán)利要求3化合物，其中R1是C1-C6烷基。
11．權(quán)利要求5化合物，其中R1是C1-C6烷基。
12．權(quán)利要求2化合物，其中R1是Q-Z-(CH2)m-基團。
13．權(quán)利要求3化合物，其中R1是Q-Z-(CH2)m-基團。
14．權(quán)利要求5化合物，其中R1是Q-Z-(CH2)m-基團。
15．權(quán)利要求1化合物，其中X是N。
16．權(quán)利要求15化合物，其中R2是C1-C4烷基或-(CH2)p-Ar基團，其中Ar是被F、Cl、C1-C4烷基、-NO2、-NH2或-OR8任意取代的苯基；而R4是氫。
17．權(quán)利要求16化合物，其中R3是氫、C1-C6烷基、苯基、芐基、1-萘基、2-萘基、環(huán)己基甲基、2-羥基苯基、3-羥基苯基、4-羥基苯基、2,3-二羥基苯基、2,4-二羥基苯基、3,4-二羥基苯基、4-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、3,4-二氯苯基、4-溴苯基、3,4-二溴苯基、4-氟苯基、3,4-二氟苯基、3-甲苯基、4-甲苯基、4-乙基苯基、4-異丙基苯基、3-氨基苯基、4-氨基苯基、3,4-二氨基苯基、N-甲基-4-氨基苯基、2-硝基苯基、4-硝基苯基、4-氨基芐基、4-羥基芐基、4-甲氧基芐基、3-氯芐基、4-氟芐基、3,4-二氯芐基、4-溴芐基、4-甲基芐基、-CH2SCH2NHCOCH3或下式化合物
或
18．權(quán)利要求17化合物，其中R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基而R8是氫。
19．權(quán)利要求16化合物，其中R1是W-(CH2)m-基團。
20．權(quán)利要求17化合物，其中R1是W-(CH2)m-基團。
21．權(quán)利要求19化合物，其中R1是W-(CH2)m-基團。
22．權(quán)利要求16化合物，其中R1是C1-C6烷基。
23．權(quán)利要求17化合物，其中R1是C1-C6烷基。
24．權(quán)利要求19化合物，其中R1是C1-C6烷基。
25．權(quán)利要求16化合物，其中R1是Q-Z-(CH2)m-基團。
26．權(quán)利要求17化合物，其中R1是Q-Z-(CH2)m-基團。
27．權(quán)利要求19化合物，其中R1是Q-Z-(CH2)m-基團。
28．權(quán)利要求1化合物，其中X是CH；R2是苯基、甲基或乙基；R3是苯基、芐基、環(huán)己基甲基、異丙基、異丁基、3-吡啶基甲基、4-氟芐基或4-氨基芐基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基而R8是氫。
29．權(quán)利要求28化合物，其中R1是W-(CH2)m-基團。
30．權(quán)利要求1化合物，其中X是N；R2是苯基、甲基或乙基；R3是苯基、芐基、環(huán)己基甲基、異丙基、異丁基、3-吡啶基甲基、4-氟芐基或4-氨基芐基；R4是氫；R5是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基而R8是氫。
31．權(quán)利要求30化合物，其中R1是W-(CH2)m-基團。
32．權(quán)利要求1化合物，其中所述化合物是2H-異氮雜茚-2-己酰胺，N-[六氫-1-[2-(甲氨基)-2-氧代-1-(苯甲基)乙基]-2-氧代-5-苯基-1H-吖庚因-3-基]-1,3-二氫-α-巰基-1,3-二氧代-，[3S-[1(R*),3α,5α]]-。
33．權(quán)利要求1化合物，其中所述化合物是2H-異氮雜茚-2-己酰胺，N-[六氫-1-[2-(甲氨基)-2-氧代-1-(苯甲基)乙基]-2-氧代-5-苯基-1H-吖庚因-3-基]-1,3-二氫-α-巰基-1,3-二氧代-，[3S-[1(R*),3α,5β]]-。
34．權(quán)利要求1化合物，其中所述化合物是2H-異氮雜茚-2-己酰胺，N-[六氫-4-[2-(甲氨基)-2-氧代-1-(苯甲基)乙基]-5-氧代-1-(苯甲基)-1H-1,4-二氮雜-6-基]-1,3-二氫-α-巰基-1,3-二氧代-，[6S-[4(R*),6R*(R*)]]-。
35．一種藥物組合物，該組合物含有權(quán)利要求1化合物和藥物上可接受的載體。
36．一種抑制所需患者基質(zhì)金屬蛋白酶的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
37．一種抑制所需患者MMP-誘導(dǎo)的組織破裂和/或MMP-誘導(dǎo)的組織退化的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
38．一種治療所需患者類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
39．一種治療所需患者骨關(guān)節(jié)炎的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
40．一種治療所需患者慢性炎癥疾病的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
41．一種治療所需患者腫瘤形成疾病的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
42．一種治療所需患者心血管疾病的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
43．權(quán)利要求42的方法，其中所述心血管疾病是動脈粥樣硬化。
44．一種治療所需患者角膜潰瘍的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
45．一種治療所需患者牙齦炎或牙周疾病的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
46．一種治療所需患者多發(fā)性硬化的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
47．一種治療所需患者慢性梗阻性肺病的方法，該方法包括給所述患者施用有效的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制量的權(quán)利要求1化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及用作基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的新的3－巰基乙酰氨基－1.5－二取代的－2－氧代—氮雜環(huán)庚烷(azepan)衍生物。本發(fā)明還要求保護含有所述化合物的藥物組合物以及治療與基質(zhì)金屬蛋白酶抑制作用相關(guān)的各種疾病的方法。
文檔編號A61P25/28GK1234039SQ97199024
公開日1999年11月3日 申請日期1997年8月4日 優(yōu)先權(quán)日1996年9月19日
發(fā)明者A·M·瓦沙弗斯基, G·A·福萊恩, M·V·帕泰爾, D·W·貝特, J·P·伯克哈特, J－T·特塞, M·J·簡紐茲, J·沈, R·M·達拉尼帕噶達 申請人:赫徹斯特馬里恩魯斯公司